kote|ro de An||se de uant|f|cao de c|dos Graxos

roced|mentos
Mtodo 1
Lm um Lubo de vldro com Lampa rosquevel e adlclonado 1mL de uma soluo com concenLrao de 1mg/mL de
LrlcosanoaLo de meLlla (adro lnLerno) em hexano em segulda o solvenLe e compleLamenLe removldo com fluxo
de n
2
gasoso
osLerlormenLe aproxlmadamenLe 23mg de llpldeos LoLals so pesados no Lubo conLendo o padro lnLerno e a
esLe se adlclonam 13mL de soluo meLanllca de naCP 03mol/L
Lm segulda a soluo e aqueclda em banhomarla a 100C por aproxlmadamenLe 3 mlnuLos e resfrlada a
LemperaLura amblenLe
ols mL de uma soluo de 8l
3
(1rlfluoreLo de boro) a 12 em meLanol so adlclonados ao Lubo que fol
novamenLe aquecldo em banhomarla a 100C duranLe 30 mlnuLos e resfrlado em gua correnLe aLe a
LemperaLura amblenLe
lmedlaLamenLe aps e adlclonado 1mL de hexano ao Lubo aglLado vlgorosamenLe por 30 segundos e flnalmenLe
adlclonamse 3mL de soluo aquosa saLurada de naCl
amosLra esLerlflcada e delxada em repouso na geladelra para permlLlr uma melhor separao das duas fases C
sobrenadanLe e reLlrado e Lransferldo para um frasco mbar de 3mL e mals 1mL de hexano e adlclonado ao Lubo
ps aglLao o sobrenadanLe e reLlrado e adlclonado a frao anLerlor que e enLo concenLrada para um volume
flnal de aproxlmadamenLe 1mL sob aLmosfera de n
2
gasoso
Mtodo 2
Lm um Lubo de vldro com Lampa rosquevel e adlclonado 1mL de uma soluo com concenLrao de 1mg/mL de
LrlcosanoaLo de meLlla (adro lnLerno) em hexano em segulda o solvenLe e compleLamenLe removldo com fluxo
de n
2
gasoso
esar aproxlmadamenLe 23mg de amosLra denLro do Lubo de ensalo (lsenLa de solvenLe)
dlclonar 4mL da soluo 03n de hldrxldo de sdlo em meLanol (Soluo l)
lechar bem o Lubo de ensalo (evlLar vazamenLo) e aquecer em banho de gua em ebullo aLe dlssolver os
glbulos de gordura e a soluo flcar LransparenLe (33 mlnuLos) Se necessrlo aglLar ocaslonalmenLe o Lubo
Lsfrlar o Lubo sob gua correnLe o mals rpldo posslvel
dlclonar 3mL do agenLe esLerlflcanLe (Soluo ll) fechar e aglLar o Lubo de ensalo
quecer em banho de gua fervenLe por 3 mlnuLos
Lsfrlar o Lubo sob gua correnLe o mals rpldo posslvel
dlclonar 4mL de soluo saLurada de cloreLo de sdlo glLar com fora por 30 segundos
dlclonar 3mL do solvenLe (Pexano) e aglLar com fora por 30 segundos
elxar em repouso C sobrenadanLe (eLeres meLlllcos) ser usado para ln[eLar no cromaLgrafo Se no for ln[eLar
lmedlaLamenLe e aconselhvel colocar o sobrenadanLe denLro de frasco escuro bem fechado e guardar em
freezer" aLe uso