Sei sulla pagina 1di 48

Divisione di Farmacologia

Facoltà di Medicina e Chirurgia


Università di Napoli
“Federico II”

FARAMACOGENETICA DEI FARMACI


ANTIASMATICI

Gianfranco Di Renzo
FATTORI COINVOLTI NELLA DIVERSA
SENSIBILITA’ AI FARMACI

• Età
• Dieta
• Sesso
• Concomitante Somministrazione
• di Altri Farmaci (Interazioni)
Gravità e Tipo di Malattia
Genetica
VARIAZIONI DELLA RISPOSTA AI
FARMACI SU BASE GENETICA

• Variazione dell’Efficacia del Trattamento


Farmacologico

2. Variazione della Frequenza di Comparsa


e dell’Intensità delle Reazioni Avverse
EVENTI SU BASE FARMACOGENETICA CHE
INTERFERISCONO CON IL TRATTAMENTO
DELL’ASMA
Aspetti Farmacodinamici
• Modifica del Bersaglio del Farmaco o
di una Componente dei Meccanismi Transduzionali
e Trascrizionali Attivati dall’Interazione
Farmaco-Recettore

Aspetti Farmacocinetici
• Polimorfismi degli Enzimi Metabolizzanti e/o dei
Trasportatori dei farmaci
FARMACI UTILIZZATI NEL
TRATTAMENTO DELL’ASMA
• β 2 Agonisti

• Inibitori della Sintesi ed Antagonisti


dei Leucotrieni
• Glucocorticoidi
• Teofillina e Derivati
• Antagonisti Muscarinici
BETA2 Agonisti
• Albuterolo, terbutalina

• A lunga durata di azione :Salmeterolo


formoterolo
VARIAZIONI NELLA RISPOSTA LEGATE
A MECCANISMI FARMACODINAMICI (I)

Polimorfismi del Recettore


β 2 Adrenergico
STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
~4 kb
Inizio trascrizione

ORF con ORF ORF codificante


genoma 3’-UTR
funzione non nota LC Per ADRβ 2

● Il gene ADRβ 2 è composto da un solo esone (senza introni)


● Le proteine codificate sono 3 (3 cistroni)
● ORF codificante per una proteina a funzione non nota
● ORF codificante per un Leader Cistron di 19 aminoacidi
con funzione regolatoria per la trascrizione del cistrone
3
● ORF codificante per il recettore adrenergico β 2 di 413
aminoacidi
POLIMORISMI DEL RECETTORE ADR β 2
27 16 CHO CHO
Gln Arg NH2
Glu CAA→GAA Gly AGA→GGA

Met 34
GTG→ATG Val 175
Arg
84
Leu Arg

1 2 Leu 3 4 164
CGG→AGG
5 6 7
CTG→CTA
Thr GGG→GGC
Ile Gly
351
ACC→ATC
Gly

413 355
Leu Tyr
CTG→CTA Tyr
TAT→TAC
HOOC Leu
FREQUENZE ALLELICHE DEI MAGGIORI
POLIMORFISMI DEL RECETTORE ADRβ 2

POLIMORFISMO FREQUENZA
• Gly16 66-70

• Glu27 50

• Met34 0-1

• Ile164 1-2
CONSEGUENZE FARMACOLOGICHE
DEI POLIMORFISMI DEL RECETTORE ADRβ 2

Arg16/Gly : Aumento della “Down Regulation”


del Recettore Indotta dal Legame
con l’Agonista

Gln27/Glu : Riduzione della“Down Regulation”


del Recettore Indotta dal
Legame dell’Agonista

Thr164/Ile : Riduzione dell’Affinità del


Legame dell’Agonista e dello
Accoppiamento alla Gs
RISPOSTA ALL’ALBUTEROLO DEL FLUSSO
ESPIRATORIO IN PAZIENTI ASMATICI A
SECONDO DEL GENOTIPO
Arg/Arg-PRN Gly/Gly-Regular
10
∆ AM PEF (L/min) 5
0
-5
-10
Arg/Arg-Regular
-15
-20
-25
Run out
0 5 10 15 20
Weeks after Randomization

Arg/Arg patients who received regularly scheduled beta-agonist treatment (Arg/Arg-Regular) experienced
a 30.5 ± 12.1 L/min decline in AM peak expiratory flow relative to those who received as-needed treatment
(Arg/Arg-PRN; P = 0.012). Gly/Gly patients were not affected by regular treatment (Gly/Gly-Regular).

Israel E & the ACRN, AJRCCM; 2000


RISPOSTA AI β 2 AGONISTI
IN PAZIENTI ASMATICI IN FUNZIONE
DEL GENOTIPO

Il Genotipo Arg/Arg è Associato


ad una Riduzione del Controllo
dell’Asma da β 2 Agonisti

Taylor et al. Thorax : 55, 762, 2000


RISPOSTE BRONCODILATATRICI
E APLOTIPI DEL β 2 AR
TIPOLOGIA DEGLI STUDI MENZIONATI

STUDI DI ASSOCIAZIONE
RETROSPETTIVI:
L’ASSOCIAZIONE TRA RISPOSTA AL
FARMACO E GENOTIPO
EFFETTUATA AL TERMINE DELLO
STUDIO
CLINICAL TRIAL : “BETA ADRENERGIC
RESPONSE BY GENOTYPE (BARGE)”

Use of Regularly Scheduled Albuterol


Treatment in Asthma: Genotype-Stratified,
Randomised, Placebo Controlled Cross-
Over Trial.

Israel et al. Lancet 364, 23, 2004


PROTOCOLLO DEL CLINICAL TRIAL :
“BETA ADRENERGIC RESPONSE
BY GENOTYPE (BARGE)”

• Pazienti Suddivisi in due Gruppi a Seconda


Genotipo (Arginina o Glicina)

• Albuterolo Somministrato per Inalazione


4 volte al giorno per 16 settimane

• Placebo Somministrato con le stesse


Modalità
RISULTATI PUBBLICATI SUL NUMERO DI
GENNAIO 2005 DELL’FDA CONSUMER MAGAZINE

• Globalmente i Partecipanti con il Genotipo


Arginina Avevano un Migliore Controllo
dell’Asma Quando non Usavano l’Albuterolo
su Base Regolare e Secondo il Protocollo.

• Invece i Partecipanti con il Genotipo Glicina


Avevano un Miglior Controllo dell’Asma con
il Trattamento Regolare a Base di Albuterolo.
POLIMORFISMI DEL ADRβ 2: RISPOSTA
TERAPEUTICA AL SALMETEROLO

Wechsler et al.

I Soggetti con Genotipo Arg/Arg Possono


Avere una Riduzione della Risposta
Terapeutica al Salmeterolo

Am.J.Respir. Crit.Care Dec. 2005


ORGANIZZAZIONE DEL GENE ADRβ 2
POLIMORFISMI DELLA REGIONE
DEL PROMOTORE DEL GENE ADR β 2

• 8 Polimorfismi con Frequenza


Variabile tra 33 e 67% Potrebbero
Influenzare l’Espressione del
Recettore β 2
VARIAZIONI NELLA RISPOSTA LEGATE
A MECCANISMI FARMACODINAMICI (II)

Inibitori della Sintesi ed


Antagonisti dei Leucotrieni
SINTESI DEI LEUCOTRIENI E
FARMACI INTERFERENTI
PATHWAY DRUG
Arachidonic
acid

5-LOX/FLAP ZILEUTON

LTA4

LTC4S

LTC4/D4/E4

interact with:
MONTELUKAST
PRANLUKAST
CysLT1Receptor
ZAFIRLUKAST

LT, leukotriene; LOX, lipoxygenase; FLAP, 5-lipoxygenase activating protein;


LTC4S, leukotriene C4 synthase; Cys, cysteinyl (cysteinyl leukotriens are: LTC4, LTD4, LTE4).
POLIMORFISMI DELLA REGIONE DEL
PROMOTORE DEL GENE 5-LOX

• Il Promotore Possiede una Regione


Regolatoria con un Motivo di Binding
(GGGCGG) per un Fattore di Regolazione.

• La Maggior Parte degli Individui Possiede 5


Ripetizioni di Tale Motivo, Altri ne Possono
Avere 6 o 7 o 3 o 4. Circa Il 5% dei
Pazienti sono Omozigoti Portatori di una
Alterazione del Numero delle Ripetizioni.
EFFETTO DEL GENOTIPO SUL CAMBIAMENTO DEL VOLUME
ESPIRATORIO FORZATO ALLA FINE DI UN TRATTAMENTO CON
UN INIBITORE DELLA 5-LOX
% change in FEV1 from baseline 25

20
P=0.013
15 Questi dati indicano
Che
10 P=0.010
La Mutazione è
recessiva
5

0
Mutant Hetero- Wild type
-5 zigote

-10 n=15 n=81 n=140

Percent change in FEV1 from baseline for patients with mutations at the ALOX5 core promoter locus treated
with the 5-lipoxygenase inhibitor
Drazen et al. Nature Genetics; 1999
POLIMORFISMI DELLA REGIONE DEL
PROMOTORE DEL GENE LTC4S

• In uno Studio su 68 Pazienti Affetti da


Asma di Media Gravità i Portatori
Omozigoti o Eterozigoti dell’Allele A
Rispondevano allo Zafirlukast mentre
gli Omozigoti C/C non Rispondevano

Anderson et al.Eur.Respir.J. 2000,abs.1369


POLIMORFISMI DELLA REGIONE DEL
PROMOTORE DEL GENE LTC4 S

• Risultati Differenti da quelli Descritti


da Anderson et al. per quanto
Riguarda la Risposta allo Zafirlukast.

Sampson et al. :Thorax 55,S28, 2000


EFFETTO DELL’ANTAGONISTA DEL RECETTORE DEI
LEUCOTRIENI ZAFIRLUKAST SULLA FUNZIONE POLMONARE

Samson et al., Thorax,2000


VARIAZIONI NELLA RISPOSTA LEGATE
A MECCANISMI FARMACODINAMICI (III)

Glucocorticoidi
MECCANISMO DI AZIONE DEI GLUCOCORTICOIDI
POLIMORFISMI DEI RECETTORI DEI
GLUCOCORTICOIDI

641 Val/Asp • Riduzione dell’Affinità per il


Desametasone In Vitro

• 729 Val/Ile • Riduzione Attività del


Desametasone

• Gli Studi Clinici Non Hanno Confermato


L’associazione Tra Polimorfismi e Resistenza ai
Glucocorticoidi
POSSIBILI CAUSE DELLA RESISTENZA
AI GLUCOCORTICOIDI

• Aumentata Espressione in vivo della


Isoforma beta del Recettore
Sousa et al. J. Allergy Clin. Immunol. 105, 943, 2000

• Modifica dell’Attività di alcuni Fattori


di Trascrizione (AP1, NFkB)
VARIANTI GENETICHE ASSOCIATE AD UN MIGLIORAMENTO
DELL’EFFICACIA ANTIASMATICA DEI GLUCOCORTICOIDI
PER VIA INALATORIA

• TBX21 Gene che Codifica per il Fattore di


Trascrizione T-bet che Influenza lo Sviluppo
dei Linfociti
Tantisira et al. PNAS 101, 18099, 2004

• CRHR1 Gene del Recettore del


Corticotropin
Releasing Factor
Tantisira et al.: Human Mol. Gen. 13, 1353, 2004
POLIMORFISMI CHE INFLUENZANO LA RISPOSTA
ALL’ASSOCIAZIONE GLUCOCORTICOIDI-β 2 AGONISTI
MECCANISMI TRASDUZIONALI
INTRACELLULARI ATTIVATI DAI β 2 AGONISTI
VARIAZIONI NELLA RISPOSTA
ALL’ASSOCIAZIONE
BUDESONIDE-ALBUTEROLO
• Portatori del Polimorfismo Met/Ile a Livello
dell’Aminoacido 722 dello Adenilato Ciclasi
9 Rispondono meglio all’Albuterolo se questo
è associato alla budesonide rispetto ai wild
type mentre non c’è differenza alla risposta
all’albuterolo da solo tra portatori del
polimorfismo e wild type

Tantisira et al. Human Mol. Gen. 14, 1671, 2005


VARIAZIONI NELLA RISPOSTA LEGATE
A MECCANISMI FARMACODINAMICI (IV)

Teofillinici
MECCANISMO DI AZIONE DELLA TEOFILLINA
VARIAZIONI LEGATE AGLI
ASPETTI FARMACOCINETICI

FAMIGLIA FARMACO

CYP 1A2 Teofillina


CYP 2C9 Montelukast
CYP 3A4 Montelukast
CYP 3A Salmeterolo
Budesonide
VARIAZIONI LEGATE
AGLI ASPETTI FARMACOCINETICI

• Un Polimorfismo del Gene del


CYP1A2 Riduce la Clearance di
Teofillina in Pazienti Asmatici

Yasuhi et al. Clin. Pharmacol. Ther. 73, 468,


2003
VARIAZIONI CHE POSSONO CONDURRE
ALLO SVILUPPO DI REAZIONI AVVERSE

• In Donne in Menopausa Esiste una


Variazione nella Riduzione della
Densità Ossea in Seguito al
Trattamento con Glucocorticoidi
per Via Inalatoria

Israel et al. New Engl. J.Med. 345,941, 2001


EFFETTO DEL TRIAMCINOLONE SULLA DENSITÀ OSSEA

Israel et al. N Engl.J. Med. 2001


STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
~4 kb
Inizio trascrizione
Cistrone Leader

ORF con ORF ORF codificante


genoma 3’-UTR
funzione non nota LC Per ADRβ 2

-987 bp -232 bp -40 0 bp


Cistrone 1 2 Cistrone 3
252 aa 19 aa 451 aa

?
Regione Promotrice
della trascrizione
STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
0 1 2 3 4 KB
STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
~4 kb
Inizio trascrizione
Cistrone Leader

ORF con ORF ORF codificante


genoma 3’-UTR
funzione non nota LC Per ADRβ 2

● Il primo cistrone ha una Open Reading Frame di


252 aminoacidi
● La funzione di questa proteina non è nota
STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
~4 kb
Inizio trascrizione
Cistrone Leader

ORF con ORF ORF codificante


genoma 3’-UTR
funzione non nota LC Per ADRβ 2

● La regione Leader Cistron ha una ORF codificante


per una proteina di 19 aminoacidi con una funzione
regolatoria per la trascrizione del recettore ADRβ 2
● Si trova a 40 basi prima dell’ATG del ADRβ 2
STRUTTURA DEL GENE ADRβ 2
~4 kb

Inizio trascrizione

ORF con ORF ORF codificante


genoma 3’-UTR
funzione non nota LC Per ADRβ 2

● ADRβ 2 è un recettore accoppiato alle proteina


trimeriche G
● È composto da 413 aminoacidi
● La codifica di questa regione è regolata dal Leader
Cistron
RECETTORE ADRβ 2

Arg 16→Gly
(AGA→GGA)
Gln 27→Glu
(CAA→GAA)
175 (CGG→AGG)

Val 34→Met
(GTG→ATG)

84 (CTG→CTA)

Thr 164→Ile
(ACC→ATC) 355 (TAT→TAC)

351 (GGG→GGC)

413 (CTG→CTA)