REPBLICA DE COLOMBIA UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESTUDIOS DE PREGRADO PROGRAMA: ENFERMERIA SUPERIOR ASIGNATURA:

BIOQUIMICA DOCENTE: NOHORA BERNAL ARMESTO

REACCIONES DE CARBOHIDRATOS EXPERIMENTO N 03

PRESENTADO POR: Daniela Luquez Montero Karen Vanegas Meja Yesmireth Martnez Amaya Kelly Paola Taborda Acua

VALLEDUPAR 13 SEPTIEMBRE 2011

INTRODUCCION

En este trabajo manejaremos todo lo concerniente a los carbohidratos y sus respectivas reacciones; teniendo en cuenta que Qumicamente, son biomolculas formadas por tomos de carbono (C), hidrgeno (H) y oxgeno (O) en una relacin general de 1:2:1. Los tomos de carbono estn unidos a grupos alcohlicos o hidroxilos (-OH) y a radicales hidrgenos (-H). En todos los glcidos siempre hay un grupo carbonilo, es decir, un carbono unido a un oxgeno mediante un doble enlace (C=O), que puede ser un grupo aldehdo (CHO) o un grupo cetnico (-CO-). Los azcares o carbohidratos pueden ser monosacridos, disacridos, trisacridos, oligosacridos y polisacridos. Los monosacridos reaccionan de acuerdo a los grupos hidroxilo y carbonilo que poseen. Los disacridos y los polisacridos se pueden hidrolizar para producir monosacridos. Los azcares que dan resultados positivos con las soluciones de Tollens, Benedict Fehling se conocen como azcares reductores, y todos los carbohidratos que contienen un grupo hemiacetal o hemicetal dan pruebas positivas. Los carbohidratos que solo contienen grupos acetal o cetal no dan pruebas positivas con estas soluciones y se llaman azcares no reductores.

OBJETIVOS

Analizar las propiedades caractersticas de los carbohidratos, derivadas en su estructura, realizando algunas reacciones generales de identificacin. Realizar diferentes pruebas de oxidacin para la determinacin de azucares reductores. Reconocimiento de muestra problema, mediante el uso de los reactivos.

MARCO TEORICO Los carbohidratos o hidratos de carbono estn formados por carbono (C), hidrgeno (H) y oxgeno (O) con la formula general (CH2O)n. Los carbohidratos incluyen azcares, almidones, celulosa, y muchos otros compuestos que se encuentran en los organismos vivientes. Los carbohidratos bsicos o azcares simples se denominan monosacridos. Azcares simples pueden combinarse para formar carbohidratos ms complejos. Los carbohidratos con dos azcares simples se llaman disacridos. Carbohidratos que consisten de dos a diez azcares simples se llaman oligosacridos, y los que tienen un nmero mayor se llaman polisacridos La principal funcin de los carbohidratos es suministrarle energa al cuerpo, especialmente al cerebro y al sistema nervioso. Una enzima llamada amilasa ayuda a descomponer los carbohidratos en glucosa (azcar en la sangre), la cual se usa como fuente de energa por parte del cuerpo.

ACCION DE LOS ACIDOS Y REACCIONES DE CARACTERIZACION DE CARBOHIDRATOS. Los cidos fuertes inorgnicos calientes deshidratan a las hexosas formando derivados furnicos como el hidroximetil furfural, que puede posteriormente descomponerse y formar otros compuestos como el cido levulnico y el cido frmico. Por otra parte, a las pentosas las deshidratan produciendo furfural. Las siguientes reacciones caracterizan los carbohidratos, ya que el producto deshidratado del carbohidrato se condensa con el reactivo correspondiente produciendo compuestos coloridos caractersticos. Reaccion de Molish-Udransky. La prueba de Molish est basada en la formacin de furfural o derivados de ste a partir de los carbohidratos, que se condensan con el alfa-naftol, dando un producto violeta. Es una reaccin muy sensible puesto que soluciones de glucosa al 0.001% y sacarosa al 0.0001% dan positiva la prueba. Esta prueba tambin es positiva para aldehdos, cetonas y algunos cidos como frmico, oxlico, lctico y ctrico. Tambin sirve para el reconocimiento general de carbohidratos donde polisacridos y disacridos se hidrolizan formando monosacridos formando un color purpura violeta. Reaccion de Bial. La prueba de Bial es una reaccin caracterstica de pentosas y est basada en la formacin de furfural a partir de pentosas y posterior condensacin con el floroglucinol dando un color rojo verdoso (Cereza).

 Reaccion de Seliwanoff. La prueba de Seliwanoff es una reaccin para diferenciar cetosas de aldosas; aunque ambas dan la reaccin, las cetosas la dan rpidamente y las aldosas lentamente. Est basada en la formacin de durfural o en un derivado de ste y su posterior condensacin con el resorcinol dando un color rojo fuego para cetosas y rosa para aldosas. ACCION DE ALCALISIS Y PODER REDUCTOR DE LOS CARBOHIDRATOS Los lcalis pueden inducir varias reacciones qumicas en los monosacridos que dependen de la intensidad del tratamiento y de la concentracin del lcali utilizado. A bajas concentraciones (0.5 N) se favorece la isomerizacin y el equilibrio ceto-enlico (aldosas cetosas). En condiciones ms severas (0.5 N), la isomerizacin se produce fuertemente y los enoles intermediarios se rompen produciendo compuestos como: formaldehdo, aldehdo gliclico, gliceraldehdo, acetona, lctico, propinico, purvico etc. En condiciones fuertemente alcalinas se generan cidos sacridos. Una reaccin caracterstica de los carbohidratos est basada en el poder reductor que le confiere su grupo aldehdo o cetona. Reaccin de Fehling. La reaccin de Fehling est basada en la accin reductora que tienen los azcares sobre los iones cpricos en medio alcalino, como se representa a continuacin: Carbohidrato + Cu2 + lcali_ Carbohidrato oxidado + Cu+ El reactivo de Fehling est constituido por dos soluciones que se mezclan al momento de usarse (Solucin A de sulfato de cobre y solucin B de tartrato de sodio-potasio en medio alcalino). El poder reductor de los oligo y polisacridos depende, del nmero de carbonilos potencialmente libres que no estn involucrados en enlaces glicosdicos. Reaccin de Tollens. La prueba de Tollens es una reaccin caracterstica para pentosas y est basada en la formacin de furfural a partir de pentosas y su posterior condensacin con el floroglucinol dando un color rojo cereza.

Reaccin de Benedict. Algunos azcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes oxidantes suaves como el ion Fe3+ o Cu2+. Esta caracterstica radica en la presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lo tanto, aquellos azcares con un grupo carbonilo libre son

llamados azcares reductores y aquellos en los que el grupo carbonilo se encuentra combinado en unin glicosdica se conocen como azcares no reductores. PRUEBAS PARA DIFERENCIAR CARBOHIDRATOS Reaccin de Barfoed. Esta prueba permite diferenciar entre monosacridos y disacridos reductores, tambin contiene ion cprico que se reduce hasta oxido cuproso ms rpidamente con los monosacridos que con los disacridos. SOLUBILIDAD Y SABOR DE LOS CARBOHIDRATOS Reaccin del Yodo. El yodo es atrapado por los polisacridos y dependiendo de la estructura de stos da una coloracin caracterstica; si el polisacrido es lineal se obtendr una coloracin azul pero si es ramificada la coloracin obtenida va del prpura al rojo.

MATERIALES Tubos de ensayo Pipetas Gradilla Bao mara a ebullicin Vaso de precipitados de 100 ml Cerillos Marcador Masking tape Glucosa Slida y al 2% Arabinosa al 2% Maltosa al 2% Sacarosa slida y al 2% Fructosa al 2% Glucgeno slido y al 0.2% Almidn slido y al 2% Dextrina slida y al 2% Amilosa al 0.2% a-naftol REACTIVOS Etanol al 96% Acido sulfrico concentrado Fluorogucinol HCI concentrado y diluido 1:3 Resorcinol Sulfato de cobre Hidrxido de potasio Tartrato de sodio Yodo metlico Yoduro de potasio

PROCEDIMIENTO PRUEBA ORGANOLECTICAS

CARACTERISTICAS/ AZUCARES SABOR COLOR OLOR SOLUBILIDAD (H2O) ESTADO

Dextrina Glucosa Anhidra Lactosa Almidn Dextrosa Xilusa Sacarosa Manosa Galactosa Arabinosa

Grasa Azcar Sinsabor Sinsabor Dulce Dulce Dulce Dulce Dulce Dulce Dulce

Amarillo Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco Blanco

Dulce

Soluble

Slido Slido Slido Slido Slido Slido Slido Slido Slido Slido slido

Incoloro Soluble Incoloro Soluble Incoloro Soluble Dulce Dulce Dulce Soluble Soluble Soluble

Incolora Soluble Incolora Soluble Incolora Soluble Dulce Soluble

REACCIONES ACCION DE LOS ACIDOS Y REACCIONES DE CARACTERIZACION DE CARBOHIDRATOS. REACCION DE MOLISH-UDRANSKY

Colocamos en un tubo de ensayo 1 ml de Dextrina, y en otro tubo agregamos 1ml de Glucosa y a cada uno le agregamos 1 ml del reactivo de Molish y procedemos a mezclar. Luego a cada uno dejamos resbalar por la pared del tubo 1 ml de H2SO4 concentrado. Formando un anillo color violeta en la de lo que se deduce es una prueba positiva. REACCION DE BIAL.

Colocamos en un tubo de ensayo 0.5 ml de Dextrosa, y en otro tubo agregamos 0,5ml de Glucosa y agregamos 1ml del reactivo Bial respectivamente, mezclamos. Llevamos a calentar en bao mara a ebullicin 3-4 minutos. Dando como resultado un verde, lo cual indica que la prueba es negativo para ambos. El color cereza es caracterstico para una prueba positiva.

 REACCION DE SELIWANOFF Colocamos en un tubo de ensayo 1 ml de Dextrina, y en otro tubo 1ml de Glucosa y procedemos a adicionarle 0.5 ml del reactivo Seliwanoff respectivamente, mezclamos. Luego calentamos en bao maria a ebullicin en intervalos de 1 minuto durante 5 minutos. En la dextrina la prueba resulto siendo positiva, al mostrar un color rosa caracterstico de aldosas. Al igual la glucosa es positiva ACCION DE ALCALISIS Y PODER REDUCTOR DE LOS CARBOHIDRATOS REACCION DE FEHLING. Colocamos en un tubo de ensayo 2 ml de Dextrina, y en otro tubo 2 ml de Glucosa, procedemos a agregar 0.5 ml del reactivo de Fehling A y 0.5 ml del reactivo de Fehling B respectivamente y mezclamos. Llevamos a calentar en bao mara durante 5 minutos. Dio positiva para ambas pruebas. REACCIN DE TOLLENS.

Colocamos en un tubo de ensayo 0.5 ml de Dextrina, y en otro tubo 0,5 ml de Glucosa, agregamos 1 ml del reactivo de Tollens y procedemos a mezclar respectivamente. Llevamos a calentar en bao Mara a ebullicin por 3-4 minutos. REACCIN DE BENEDICT.

Colocamos en un tubo de ensayo 1ml de Dextrosa, y en otro tubo 1ml de Glucosa, en otro tubo agregamos 0,5 ml del reactivo de benedict y mezclamos respectivamente. Llevamos a calentar en bao de mara a ebullicin. Procedemos a tomar lectura de las coloraciones que toma a los intervalos de 1 minuto durante 5 minutos. REACCIN DE BARFOED.

Colocamos en un tubo de ensayo 1m de Dextrosa, y en otro tubo 1ml de Glucosa. En otro tubo 1ml de Glucosa y le adicionamos 0.5 ml del reactivo Barfoed procedemos a mezclar respectivamente y llevar al calentar en bao mara. Tomamos la lectura de la coloracin que se obtiene en intervalos de 1 a 5 minutos. SOLUBILIDAD Y SABOR DE LOS CARBOHIDRATOS. REACCION DEL YODO.

Colocamos en un tubo de ensayo 1 ml de Dextrosa y en otro tubo 1ml de Glucosa. Procedemos a agregar una gota de lugol y mezclamos respectivamente. Anotamos el color producido. Luego pasamos a calentar en bao mara y anotamos las observaciones.

FOTOS:

GLUCOSA ANHIDRA

DEXTROSA

Soluciones de Dextrina y Solucin de Glucosa

Dextrina

Dextrina

Glucosa

Glucosa

MOLISH

BIAL SELIWANOFF

FEHLING

TOLLENS

BARFOED SOLUBILIDAD YODO

Glucosa Arabinosa Manosa Sacarosa Almidn Dextrina Dextrosa Lactosa Xilosa Galactosa

+ +

+ +

+ -

FOTOS DE AZUCARES

CUESTIONARIO 1. Explique porque la reaccin de Fehling es positiva con la glucosa y negativa con la sacarosa. Rta: La reaccin de Fehling es positiva con la glucosa, ya que esta se oxida y reduce los iones cpricos que pasan a cuprosos combinndose a la vez con iones hidroxilo, formando hidrxido cuproso (amarillo), que por el calor se convierte en oxido cuproso (transformando su color a ojo). Pero al utilizar el reactivo Fehling con la sacarosa esta al ser un disacrido que no tiene poder reductor los iones cpricos no son reducidos a cuprosos, por eso la reaccin no pierde su color azul (no transforma su color en rojo). 2. Cul es la diferencia estructural del glicgeno y la glucosa. Rta: La "glucosa" es un carbohidrato simple y el "glucgeno" es un Carbohidrato complejo formado por unidades de "glucosa". 3. A que se le llama inversin de la sacarosa. Rta: Se conoce con este nombre a la mezcla de azucares producida cuando la sacarosa se hidroliza, qumica o enzimticamente. El nombre de inversin se refiere al cambio del poder rotatorio que se observa durante dicha hidrlisis: la sacarosa es dextrorrotatoria (+66), pero al transformarse en glucosa (+52) y en fructosa (-92), la mezcla resultante desarrolla un poder levorrotatorio (-200) por la fuerte influencia de la fructosa. Es precisamente a este giro de +66 a -20 a 10 que se le Ilama inversin. El azcar invertido se produce en la miel de abeja en forma natural, razn por la cual es tan dulce; igualmente en los jugos de frutas con pH cido y que sufren algn tratamiento trmico se percibe un ligero aumento de la dulzura debido a la hidrlisis de la sacarosa. 4. Con base en el anlisis caracterizar la sustancia problema; si es un polisacridos, disacrido, monosacridos. En caso de ser disacrido o monosacridos si es o no reductor. Si se trata de un monosacridos indicar si es una aldopentosa, cetopentosa, aldohexosa, o cetohexosa. Rta: Con la sustancia problema, procedemos a llevarla a reaccionar con el reactivo de Molish dando como resultado un anillo color violeta, lo que deducimos que esta sustancia si es un carbohidrato. Luego continuamos a reaccionar la sustancia problema con el reactivo de Benedict, dando

como resultado un color amarillo naranja, de lo que se deduce es un azcar reductor libre; al reaccionar con el Lugol la reaccin es negativa, deduciendo que son monosacridos o disacridos no reductores; al proceder a reaccionar con el reactivo de Barfoed, la sustancia problema no precipito de lo cual deducimos que esta es un azcar o reductor sacarosa. En conclusin se caracteriza que la sustancia problema es disacrido, no es reductora y la sustancia fue la sacarosa. 5. Describa el anlisis y las reacciones que sigui para idntica la muestra problema, si ya conoce el nombre de la sustancia problema, discuta los resultados reportados. Rta: Resultados de la ruta de reconocimiento de carbohidratos. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

REACCION DE MOLISH

Anillo Rojo y Violeta. Si es carbohidrato

Rx BENEDICT

Color amarillo-naranja: Reductor libre Rx. DE BARFOED

Rx CON LUGOL

No precipito: No reductor o sacarosa X X

Reaccin Negativa: Monosacridos o Disacrido no reductor

ABSORBANCIA Tomamos un matraz aforado de 100ml en el depositamos 100ml de agua en el cual diluimos 1gr de lactosa, de aqu preparamos la solucin. Luego tomamos en tubo de ensayo cierta cantidad de agua potable con el objetivo de medir su absorbancia en el espectrmetro arrojando como resultado = 0.059. Despus tomamos cierta cantidad de la solucin, medimos su absorbancia inicial y esta dio como resultado = 0.066, dejamos pasar 30 minutos y volvimos a medir la absorvancia de la solucin de lactosa obteniendo como resultado = 0.071. Deduciendo con esto que:

0.77 0 0.66

Al producirse el movimiento hacia la derecha decimos que es Dextrgiro.

6. Escriba las reacciones qumicas que trabajo en el laboratorio.

MOLISCH

BIAL

SELIWANOFF

FEHLING

TOLLENS

BENEDICT

7. Escriba las estructuras de Fisher y Haworth para los Azucares.

FISHER

D-XILOSA -D-ARABINOSA

GLUCOSA

HAWORTH

DEXTRINA

ALMIDON

GLUCOSA

ARABINOSA

L -arabinopiranosa

L- arabinofuranosa

D - XILOSA D - xilopiranosa D - xilofuranosa

MANOSA - manopiranosa D

GALACTOSA - D(+) galactopiranosa

LACTOSA 8. Porque es importante el estudio de los carbohidratos para los ingenieros agroindustriales. Rta: Los almidones, los azcares, la fibra diettica son carbohidratos, y pues son de gran importancia en la industria alimentaria. Hay carbohidratos polisacridos de gran importancia econmica: El agar y el Carragun. Ambas sustancias estn qumicamente relacionadas y tienen propiedades suspensivas, emulsionantes, Estabilizantes y gelidificantes. El agar es conocido por su uso en la preparacin de los medios de cultivo para los microorganismos; el carragun por su empleo en la fabricacin de productos lcteos, aunque tambin se usa en la industria

textil, en cosmtica, en farmacia y en tipografa. Estos dos carbohidratos son obtenidos de las paredes celulares de ciertas algas rojas, son la nica fuente de donde se extraen. 9. Elabore un diagrama de flujo
Reaccin Molish Anillo Purpura

Accin De cidos y Caracterizacin

Reaccin Bial

Rojo-Cereza

Reaccin Seliwanoff

Aldehdo

Rojo

Cetona

Rosa

5-7minuto rojo: Monosacridos reductor

7-12minuto rojo: Disacrido reductor No precipitado. No reductor o sacarosa

CARBOHIDRATOS

Diferenciacin De Carbohidratos

Reaccin Barfoed

Reaccin de Yodo

Azul: Polisacrid os

Reaccin Negativa: No reductores.

Rojo: Glicgeno o Dextrina.

Reaccin Felhing

No precipitado rojo-Ladrillo

Accin De Los Alcalisis Y Poder Reductor

Reaccin Tollens

Reductor: Negro

Reaccin Benedict

Incoloro: No carbohidrato

Anillo rojo-violeta: si Carbohidrato

10. Diga los componentes de cada reactivo. REACCIN DE FELHING.

El reactivo est formado por dos soluciones llamadas A y B. La primera es una solucin de sulfato cprico; la segunda, de hidrxido de sodio y una sal orgnica llamada tartrato de sodio y potasio (sal de Seignette). Cuando se mezclan cantidades iguales de ambas soluciones, aparece un color azul intenso por la formacin de un complejo formado entre el ion cprico y el tartrato. Agregando un aldehdo y calentando suavemente, el color azul desaparece y aparece un precipitado rojo de xido cuproso (Cu2O).

REACTIVO DE TOLLENS:

El reactivo se prepara por adicin de hidrxido de amonio a una solucin de nitrato de plata, hasta que el precipitado formado se redisuelva. La plata y el hidrxido de amonio forman un complejo (Ag(NH3)2OH, plata diamino), que reacciona con el aldehdo. REACTIVO DE BIAL: El reactivo de Bial contiene orcinol en cido clorhdrico, el cual forma complejos de coloracin slo con las pentosas. REACTIVO SELIWANOF: es especfico para cetosas y se basa en la conversin de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensacin con resorcinol formando as complejos coloreados.

REACTIVO BARFOED: Permite diferenciar entre monosacridos y disacridos reductores, tambin contiene ion cprico que se reduce hasta xido cuproso ms rpidamente con los monosacridos que con los disacridos.

REACTIVO LUGOL: contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacridos, particularmente el almidn por la formacin de una coloracin azl violeta intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja.

REACTIVO DE MOLISCH: permite reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico concentrado hasta monosacridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con naftol formando un color prpura violeta.

CONCLUSIONES Despus de analizado el trabajo podemos concluir que utilizando las pruebas que realizamos en esta prctica, se usan para poder detectar carbohidratos, pentosas, aldosas, cetosas, su accin reductora de azucares y carbohidratos lineales y ramificados. Esto es muy importante en nuestra carrera para poder diferenciar que sustancias pueden ingerir cierto organismo cual las pueden rechazar y como pueden reaccionar algunas con un cierto organismo metabolizndolas.

BIBLIOGRAFIA

Laguna, J. Pia E. 1979. Bioquimica. 3 Ed. La presa Medica Mexicana. http://es.scribd.com/doc/23351531/Reacciones-de-Identificacion-ParaLos-Carbohidratos. http://www.zonadiet.com/nutricion/hidratos.htm http://www.perafan.com/azucar/ea02azuc.html