UNIMINUTO LABORATORIO DE BIOLOGA GENERAL PROGRAMA DE LICENCIATURA EN EDUCACIN BSICA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL PLAN INTEGRAL DE CURSO

ESTRUCTURA DE LA VIDA TUTOR: Juan Carlos Beltrn Bustos Antes de iniciar el laboratorio y a modo de nota: Deben traer bata y guantes de ciruga, y los materiales que aparezcan resaltados con amarillo. Tome en cuenta que son tres partes del laboratorio y que en las tres hay materiales que deben traes por grupos de 4 personas. Lea todo el laboratorio antes de realizar la prctica y por ltimo conserve el orden en el laboratorio. LA CLULA ESTRUCTURA Y FUNCIN OBJETIVOS GENERALES: Al finalizar la prctica de laboratorio el estudiante estar en capacidad de:

Las clulas tanto las vegetales como las animales poseen tamaos y formas variables. El tamao y la forma estn relacionados con la funcin que cumplen. Saber distinguir morfolgicamente entre una clula vegetal y una animal.

En la primera parte del laboratorio trabajaremos exclusivamente con clulas vegetales y Usted deber cumplir con los siguientes objetivos especficos para esta parte, que conducirn a los objetivos generales: 1. Comprobar que las clulas vegetales son las nicas que poseen unos organelos llamados plastidios, que cuando contienen clorofila (en todos los vegetales) reciben el nombre de cloroplastos, muy importantes por la funcin que llevan acabo: la fotosntesis. 2. Comprobar que las clulas vegetales poseen no solo membranas citoplasmticas, sino tambin una pared celular fuerte de celulosa que les permite soportar presiones muy fuertes. MATERIALES: 1. BIOLGICOS: a. Cebolla cabezona. b. Hojas de Elodea. c. Hojas de Zebrina d. Papas. 2. REACTIVOS: a. Lugol. b. Azul de metileno. c. Acetocarmn. d. Colorante de Wright. e. Solucin salina. f. Alcohol 70%. 3. EQUIPO: a. Microscopio. b. Estuche de diseccin. c. Laminas y cubre objetos. d. Bistur.

4. FUNGIBLE: a. Algodn y gasa. b. Palillos. c. Lancetas. PLAN DE TRABAJO (I PARTE) 1. Tome una hoja de cebolla y con mucho cuidado levante la capa ms externa, esta es el tejido epitelial, tome una pequea porcin, extiendala muy bien y realice un montaje hmedo, consulte los esquemas, recuerde que no debe dejar secar la preparacin) 2. Examine su preparacin con un pequeo aumento de 10X Son difciles de ver los organelos como el ncleo o los nucleolos? Tenga en cuenta que las propiedades pticas de tales organelos son similares, por lo tanto se hace difcil distinguirlos unos de otros, pero tenga en cuenta tambin, que afortunadamente las propiedades qumicas de estos organelos son diferentes, por lo tanto la afinidad de estos organelos por determinados colorantes vara: as, si Usted utiliza ahora lugol (solucin de yodo) y colora su preparacin para distinguir mejor los organelos celulares: por ejemplo, las vacuolas hora seran fciles de distinguir y tambin el citoplasma que las rodea. Los colorantes adems de colorear tambin controlan la materia viva. 3. Haga un esquema de tres o cuatro clulas de las que forman el tejido epitelial de la cebolla y reconozca, dibuje en mayor aumento 40X (seale con flechas y rotule una de ellas): a. Ncleo. b. Nucleolos. c. Vacuolas. d. Citoplasma celular. e. Pared celular. f. Membrana citoplasmtica. g. Membrana celular. Cules son las ventajas de usar colorantes? Cules son las desventajas de utilizar colorantes? Qu organelos celulares se colorean con el lugol? 4. Haga un montaje hmedo de Elodea. Con pequeo aumento de 10X, localice el pice (punta) de la hojita donde encontrar clulas que estn conformando unas capas de tejido muy delgadas. Ahora pase a mayor aumento 40X. Cmo se llaman los organelos de color verde que se observan? Enfoque la parte media de la clula y note que los organelos de color verde estn en la perisferia de la clula. Localice con flechas y rotule: pared celular, ncleo y cloroplastos. 5. Observe que se nota un movimiento dentro de la clula (movimiento intracelular o ciclocis). Qu organelos parece que se mueven? En qu direccin se mueven? Cree Usted, que verdaderamente estos organelos se mueven o que son arrastrados por corrientes citoplasmticas?

Qu fenmeno pudo observar en Elodea que no pudo observar en cebolla? Qu organelos estn envueltos en este fenmeno? 6. Tome una hoja de Zebrina que tenga el envs de color prpura, levante cuidadosamente la capa mas externa del envs de la hoja (tejido epitelial), elabore un montaje hmedo. Haga el esquema de una clula de este tejido epitelial en mayor aumento 40X, seale con flechas y rotule: pared celular, lumen celular (espacio dentro de una estructura tubular), ncleo, clulas estomticas, abertura estomtica (estoma), cloroplatos, vacuolas, antocianina (pigmento prpura). 7. Tome su bistur y realice un corte transversal (atravesado) de la papa, este corte debe ser tan fino que la apariencia de la porcin que obtenga sea transparente. En una caja de petri con agua, enjuague el corte (lvelo) para sacar el exceso de almidn contenido en las clulas de estos tejidos de la papa. Haga un montaje hmedo. Observe el espacio de las clulas en pequeo aumento 10X. Pase a mayor aumento 40X. Observe la pared celular. Qu otra cosa alcanza a ver? Aada al borde de la laminilla una gota de lugol (solucion de yodo) Qu nota que ha sucedido? Observe y dibuje en mayor aumento 40X: pared celular y grnulos de almidn (amiloplastidios). Puede Usted, citar ahora diferencias bsicas en taqmao, forma y contenido de cuatro tipos de clulas vegetales. DIFERENCIAS: Tamao Forma Contenido Elodea Cebolla Zebrina Papa

SIMILITUDES: Tamao Forma Contenido

Elodea

Cebolla

Zebrina

Papa

PLAN DE TRABAJO (II PARTE) En esta parte de la prctica Usted trabajar con clulas animales. El objetivo especfico es que el estudiante aprenda a reconocer las formas estructurales de tres tipos de clulas animales.

I. Clula escamosa epitelial. Esta clula se encuentra en el epitelio o revestimiento interno de la mejilla. La funcin de la clula epitelial escamosa, puede ser denominada protectora, en el sentido de que ayuda a mantener una pelcula hmeda en la cavidad oral, debido a la naturaleza de su funcin no requiere un alto grado de especializacin y adems son fcilmente removibles. 1. Elabore un montaje hmedo de sus propias clulas escamosas epiteliales, as: a. Colque una pequea gota de solucin salina en el centro del porta objeto. b. Con un palillo (extremo delgado) raspe suavemente el interior de su mejilla, de abajo hacia arriba. c. Coloque el producto de este raspado en la gota de solucin salina y proceda a esparcir suavemente. d. Coloree con una gota de acetocarmno azul de metileno. Coloque el cubre objetos o laminilla. e. Observe al microscopio con pequeo aumento 10X, luego con mayor aumento 40X. f. Elabore un esquema de la observacin y denote las siguientes partes de la clula: Membrana celular. Membrana nuclear. Ncleo. Nucleolo. Citoplasma II. Clulas de la sangre. Estas clulas a diferencia de las analizadas en el ejercicio anterior, son clulas diferenciadas, no solo en los varios niveles de organizacin en la escala zoolgica, sino tambin dentro de un mismo organismo. Esta diferenciacin se debe especialmente a sus funciones: transporte de oxgeno y dioxido de carbono, proteccin contra microorganismos invasores. Los eritrocitos (glbulos rojos) son los encargados de desarrollar la primera funcin y los leucocitos (glbulos blancos) trabajan en la segunda funcin. Para familiarizarnos con los tipos de clulas que tenemos en nuestra sangre, prepararemos a continuacin dos frotis de sangre uno teido y otro natural (sin teir) as: 1. Esterilice con alcohol el dedo donde va a hacer una puncin. 2. Haga la puncin con la lanceta. 3. Con gasa estril retire la primera gota de sangre. 4. Colque la segunda gota en el extremo en solucin salina sobre un portaobjetos. 5. Con ayuda de un segundo portaobjetos y de acuerdo a las indicaciones del tutor, extienda uniformemente la sangre sobre en primer portaobjetos, como indica la grfica. 6. Deje secaqr al aire. 7. Coloree con 10 gotas de wrigth (si no hay teir con azul demetileno) durante 1 minuto. 8. Lave el exceso de colorante con un chorro delgado de agua. 9. Deje secar y observe con pequeo aumento. 10. Compare al microscopio los dos montajes (coloreado y natural). Encuentre diferencias en tamao, forma y color en las dos preparaciones. Recorra cuidadosamente el campo focal y cuente las formas diferentes de clulas. Cuntas aparecen? Esquematice dichas formas. En cules de estas formas celulares no encuentra ncleo? Cules aparecen con ms frecuencia?

PREGUNTAS DE CONSULTA: 1. Considera Usted, posible que un plastidio sea sucesivamente: leucoplasto, cloroplasto y cromoplasto? Explique su respuesta. 2. Qu demuestra el fenmeno de ciclocis en relacin a que la clula es una unidad de vida? 3. Hay evidencias al respecto a que los microorganismos, plantas y animales estn constituidos a base de la misma unidad estructural? 4. De dnde provenen las clulas primitivas? PLAN DE TRABAJO (III PARTE) FENMENOS BIOFSICOS: HEMLISIS Y PLASMLISIS La membrana que rodea a la clula es una estructura notable, pues no solo es semipermeable permitiendo que algunas sustancias pasen a travs de ella con exclusin de otras, sino que su permeabilidad puede ser variada; generalmente se refiere como la membrana plasmtica, el ncleo tambin est rodeado de una membrana y los organelos estn rodeados a circunscritos por membranas. Aunque la estructura qumica de las membranas y sus propiedades varan considerablemente tienen cerca de 75 Angstrom de espesor, constan primordialmente de fosfolpidos (proteinas y lpidos). La forma de la molcula de un fosfolpido consta del extremo ceflico que tiene la porcin del fosfato, que est cargado positivamente y es bastante soluble en agua, las colas son bastante insolubles; en la membrana de los extremos hidrfilos estn expuestos al medio acuoso que baa el exterior de las clulas y al citoplasma acuoso; los extremos hidrfobos se encuentran en el interior de la membrana escaso de agua. Hay muchas proteinas diferentes incluidos en la membrana: ellas existen como unidades globulares separadas que tachonan el interior y el exterior de la membrana, algunas estn localizadas en la superficie interna de la membrana otras en la superficie externa y otras se extienden a travs de ella. Muchas proteinas son enzimas encargadas de varias reacciones bioqumicas, algunas contienen lpidos y otras carbohidratos. Las membranas son dinmicas y sus constituyentes estn siendo renovados constantemente a velocidades diferentes, adems, la composicin de algunas membranas cambia durante el desarrollo; la imagen de la estructura de la membrana no es estticasino al contrario es un mosaico fluido, dinmico en el cual los componentes cambian y aun se mueven. La smosis es el movimiento de las molculas de solvente a travs de la membrana hacia un rea en el cual existe mayor concentracin de soluto para el cual es impermeable una membrana; la smosis es un factor extremadamente importante en los fenmenos fisiolgicos. La presin necesaria para impedir la emigracin del solvente es la presin osmtica efectiva de la solucin. La presin osmtica, as como el punto crioscpico y la elevacin del punto de ebullicin dependen del nmero ms que del tipo de partculas de una solucin. La actividad de cada sustancia es su concentracin efectiva estimulada por su comportamiento en la solucin. Cuando un soluto se disuelve en un solvente la actividad de las molculas decrece. La velocidad a la que se hinche y estalle una clula colocada en una solucin pura de una sustancia penetrante depender de la velocidad a la que puedan penetrar a la clula la sustancia penetrante y el agua. Overton fue uno de los primeros en realizar un estudio en realizar un estudio sistemtico de la permeabilidad de clulas vegetales a diferentes tipos de sustancias y demostr que las clulas ejercen un alto grado de discriminacin y selectividad, hall tambin que el factor ms importante para determinar la velocidad de penetracin de una membrana celular era la solubilidad lipoide de la molcula.

OBJETIVO Estudiar el efecto de la solucin de NaCl a diferentes concentraciones sobre la permeabilidad de la membrana celular. MATERIALES 1. 2. 3. BIOLGICOS: Sangre oxalatada. Spyrogyra. Cebolla. INSTRUMENTAL: Tubos de ensayo. Lminas. Laminillas Pinzas de punta fina. Bistur. REACTIVOS: Soluciones de NaCl

EXPERIMENTACIN Tome cuatro tubos de ensayo y agregueles solucin salina as: TUBOS 2 cm NaCl 0.50% 1 0.85% 2 1.50% 3 4 Agua destilada

A todos los tubos agregueles 2 cm de sangre oxalatada. 1. Observe el estado de transparencia en cada tubo. Examine la forma de los eritrocitos suspendidos en las soluciones colocando una gota entre lmina y laminilla bajo el microscopio y compare la forma de cada uno de ellos. 2. Con ayuda de una cuchilla y pinzas finas saque ms o menos un cm 2 de la epidermis interna de un bulbo de cebolla, monte entre lmina y laminilla y agregue con el gotero 2 gotas de solucin de NaCl 1M, esta solucin se reparte por el tejido por capilaridad, observe inmediatamente hecho el montaje y 5 minutos despus; se considera que la plasmlisis se inicia cuando principia un desprendimiento de la membrana citoplasmtica. Cuente 20 clulas expresando cuntas estn plasmolisadas. Construya grficos empleando porcentajes de clulas plasmolisadas por concentracin molar. Haga el mismo procedimiento con soluciones de NaCl de concentraciones 0.75M, 0.5M y 0.25M. 3. Tome un filamento de spyrogyra, colquelo entre lmina y laminilla, agrguele solucion 1M de NaCl y observe al microscopio, proceda a realizar la experiencia como en el caso anterior; con cada una de las soluciones 0.75M, 0.5M y 0.25M. La frmula para calcular la presin osmtica es la siguiente: PO = 22.4 X M X T 273

PO: M: T:

presin osmtica. concentracin molar de la solucin. Temperatura absoluta (C + 273) del laboratorio.

CUESTIONARIO: 1. Describa la forma como se observ los glbulos rojos en cada una de las soluciones. 2. De acuerdo a la observacin anterior, cmo podra Usted clasificas estas soluciones. 3. Construya una grfica tomando en cuenta el porcentaje de clulas plasmolisadas y la concentracin de la solucin, con clulas de cebolla. 4. Construya la misma grfica con los datos obtenidos para Spyrogyra. 5. Obtenga los datos de la presin osmtica con cada una de las soluciones. 6. Cundo puede dicir Usted que una clula est turgente? 7. En una clula plasmolisada puede obtener el fenmeno contrario? Cmo lo hara? 8. Qu le sucede a los glbulos rojos frente a una solucin hipotnica? 9. Sucede lo mismo en una clula vegetal que a una animal frente a una solucin hipertnica? Por qu? 10. Cmo se denomina el fenmeno que le sucede a los glbulos rojos frente a una solucin hipertnica?

PREGUNTAS PARA CONSULTAR: 1. describa la ltima teora sobre la membrana celular e ilustre con esquemas. 2. Establezca la diferencia entre la membrana celular de una clula animal y membrana y pared celular de una vegetal en cuanto a su constitucin qumica y en cuanto a su funcin. BIBLIOGRAFA KIMBAL, W. JHON. Biologa. Fondo Educativo Interamericano S.A. VILLE, Claude A. Biologa. Editorial Universitaria de Buenos Aires. MURRAY, D. L., H. E. Buhse. A An Experience With Cells. Addison-Wesley Publeseting Company, Massachussetts. SMITH, Payne Alma, R. W. Chambers. De La Clula al Tubo de Ensayo. Editorial Limusa-Wiley, S.A. Mxico. BONNER y GALSTON. Fisiologa Vegetal. Editorial Aguilar. NULTSCH W. Botnica General. Editorial Norma. ROBINSON y BOOLATIAN. Conceptos Fundamentales De Biologa. Editorial Limusa. Mxico. EHRLICH, HOLM y SOULE. Introduccin A La Biologa. Editorial Mc Graw Hill.