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GUA DE PRCTICAS
FARMACOGNOSIA II
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INTRODUCCIN La Farmacognosia es la ciencia que estudia las drogas naturales de origen vegetal y animal y sus constituyentes qumicos . Los alcaloides son compuestos nitrogenados dotados de propiedades bsicas. Se distribuyen casi en su totalidad en el reino vegetal a quienes comunican sus propiedades farmacolgicas o toxicas y se estudian de acuerdo a los ncleos qumicos de donde se originan. Entre los principales alcaloides tenemos: Las bases purinicas cuyo ncleo qumico es la purina , tienen carcter anftero y son solubles en agua caliente y en disolventes clorados. Tambin tenemos los alcaloides derivados de aminocidos como los derivados del ncleo tropnico, piridnico, quinolico responsables de actividades farmacolgicas como antiespasmodicos, antimalaricos , etc. Los alcaloides del grupo qumico del indol como los de vinca y ua de gato tienen aplicaciones en ciertas formas de neoplasias. Los alcaloides del grupo aminado e imidazol tienen aplicaciones en neurologa y oftalmologa . Los alcaloides que derivan de los ncleos del fenantreno e isoquinoleina tienen importante actividad narcotica y antiespasmdica. Los alcaloides derivados del metabolismo esteroidal como los diterpenicos del Acnito y los esteroidales del eleboro tienen aplicacin como antihipertensivos . La farmacognosia tambin estudia los lpidos y vitaminas: Los aceites qumicamente son esteres de glicerina con los acidos grasos , estan distribuidos en los vegetales , se localizan en las semillas como el man, almendras , linaza , etc. En el reino animal las grasas estn en el tejido celuloadiposo entre el tejido conjuntivo, subcutneo y el tejido muscular. Tambin se encuentran en la leche , en el hgado de los peces, etc. Las materias lipidicas presentan diversas estructuras qumicas , para poder identificarlas es necesario realizar reacciones qumicas generales y particulares las que resaltan caractersticas peculiares de cada estructura. Para calificar las materias lipidicas hay que identificarlas y descubrir sus falsificaciones; se realizan las determinaciones qumicas llamadas ndices como: I.Acidez, I.Saponificacin, I.Yodo, I.Hehner. El aceite de higado de bacalao se extrae de varias especies de peces de la fam. Gdidos que se encuentran en la fraccin insaponificable del aceite. Las vitaminas hidrosolubles: Vitamina C y el complejo B son muy importantes y necesarios para la conservacin de nuestra salud , se encuentran presentes en alimentos que es necesario evaluarlos.
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I. PRCTICA No. 1 DROGAS CON ALCALOIDES: MTODOS DE EXTRACCIN CIDA Y ALCALINA 1.1 Marco terico Los alcaloides son compuestos nitrogenados de diversos tipos de estructuras, casi todos se encuentran en el reino vegetal, son importantes porque constituyen los P.A. de muchos medicamentos. 1.2 Competencias Aplica los diversos mtodos de extraccin de alcaloides a partir de drogas naturales y los identifica con: R. Mayer, R. Dragendorff, R. Popoff, R. Bertrand , R. Sonneschein. 1.3 Materiales y equipos Material: MP: Polvo de droga Beaker, matraz x 150ml, pera de separacin, embudo, placa petri, HCl, H2SO4, amoniaco, cloroformo, xido de calcio. Reactivos generales y particulares. Mtodos: Extraccin cida, Extraccin alcalina. 1.4 Procedimiento Para la extraccin cida: 2g de polvo de una droga, se trata con un cido mineral, luego filtrar. El filtrado alcalinizarlo hasta reaccin bsica. Extraer los alcaloides con un solvente orgnico, evaporar a sequedad. El residuo disolverlo con agua acidulada y efectuar las reacciones generales. Para la extraccin alcalina: a 2g de droga en polvo, adicionar igual cantidad de CaO y gotas de amoniaco, formar una papilla, desecar. Adicionar cloroformo y agitar. Decantar la capa clorofrmica y evaporar a sequedad. Con el residuo efectuar las reacciones generales. 1.5 Resultados Se extrajo alcaloides de drogas vegetales mediante dos mtodos de extraccin segn su solubilidad. 1.6 Cuestionario 1. De los mtodos de extraccin de alcaloides en medio cido y medio alcalino Cul le parece mejor? Por qu? 1.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Panamericana, 8va. Edicin. 1991. Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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II. PRCTICA No. 2 DROGAS CON ALCALOIDES DE NCLEO PURNICO 2.1 Marco terico El ncleo qumico de los alcaloides xnticos es la purina, estructura heterocclica de importante aplicacin por sus acciones estimulantes y diurticas. 2.2 Competencias Analiza cuali-cuantitativamente los alcaloides purnicos en hojas de t. efecta reacciones de diferenciacin de cafena, teobromina y teofilina. 2.3 Materiales y equipos Material: Hojas de t, caf tubos de ensayo, beaker, matraz x 150ml, pera de separacin, cpsula, embudo. HNO3, HCl o H2SO4, cloroformo, amoniaco, NaOH 10% CaO, Citrato Na, Reactivos generales y particulares de alcaloides. Mtodo: Extraccin acuosa en medio cido. Cromatografa de capa fina. Valoracin de cafena. 2.4 Procedimiento Se realiza la extraccin acuosa cida en caliente de 2g de t o caf para extraer sus alcaloides, adicionndole 0.5g de citrato de sodio, filtrar. El filtrado se alcaniliza con Na (OH) y se extrae con 5 ml cloroformo x 3 veces; concentrar y verificar con los Reactivos generales y particulares y luego los ensayos cromatogrficos. Efectuar la valoracin de cafena por Iodometra. 2.5 Resultados Se extrae alcaloides de ncleo purnico a partir de las drogas vegetales que los contienen, se las separa y se los identifica mediante reacciones generales, particulares y cromatografa, lo que se cuantifica. 2.6 Cuestionario
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t?
Con qu finalidad se usa el citrato de Na en la extraccin de los alcaloides a partir del 2.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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III. PRCTICA No. 3 DROGAS CON ALCALOIDES DE NCLEO TROPNICO 3.1 Marco terico Los alcaloides tropnicos, son compuestos nitrogenados derivados del ncleo de la tropina y ecgonina, su estudio es importante por sus acciones sedantes y antiespasmdicas. 3.2 Competencias Obtiene e identifica alcaloides tropnicos en Datura estramonio y coca. 3.3 Materiales y equipos Material: Hoja de Datura estramonio y hojas de coca. Tubos de ensayo, beaker, matraz x 150ml, pera de separacin, cpsula, placa petri, embudo. HNO3, HCl, H2SO4, cloroformo, amoniaco, NaOH 10% Oxido de Ca, Citrato de Na, Reactivos generales y particulares de alcaloides. Mtodo: Extraccin acuosa en medio cido. Reacciones Generales y particulares. Cromatografa de capa fina. 3.4 Procedimiento Para la extraccin de los alcaloides de las hojas de coca y Datura, se pesa 3g de muestra pulverizada se agrega 25ml de agua acidulada y se lleva a BM x30. Enfriar y filtrar. El filtrado alcalinizar con NaOH 10% y extraer con 5ml cloroformo x 3 veces. Estos extractos concentrarlos y realizar las reacciones generales y particulares. Efectuar los ensayos cromatogrficos. 3.5 Resultados Se extrae alcaloides de ncleo tropnico a partir de drogas vegetales, se separa y se los identifica con reacciones generales, particulares y cromatografa. 3.6 Cuestionario
1. Para la extraccin de los alcaloides de las hojas de coca y Datura por qu se utiliz el mtodo cido?
3.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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1. Con qu finalidad se usa la papilla de CaO y amoniaco en la extraccin de alcaloides de Uncaria tomentosa?
5.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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Porqu se usa la placa de toque cuando se trata de muestras puras y no los mtodos convencionales? 7.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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VIII. PRCTICA No. 8 DROGAS CON ALCALOIDES DERIVADOS DEL METABOLISMO TERPENICO
8.1 Marco terico Los alcaloides del metabolismo terpenico mas utilizados en farmacia son los alcaloides de ncleos diterpenicos y esferoidales, con variadas acciones terapeuticas. 8.2 Competencias Obtiene e identifica alcaloides diterpenicos en Aconito; y esferoidales en Veratrum. 8.3 Materiales y equipos Material: Raiz de aconito, rizomas de veratrum eleboro Tubos de ensayo, Beacker, frascos de boca ancha. Amoniaco, CaO, Alcohol 95, H2So4 conc, Hcl conc, HNo3 conc. Mtodo: Extraccin en medio acido. Reacciones generales y particulares. Identificacion cromatografica TLC. 8.4 Procedimiento Extraer los alcaloides de Aconito por el mtodo alcalino. Efectuar las reacciones generales y particulares de alcaloides. Identificacin cromatogrfica TLC. 8.5 Resultados Se extrae alcaloides de nucelo diterpenico y esferoidal apartir de drogas vegetales, se les identifica con reacciones generales, particulares y cromatograficas. 8.6 Cuestionario Por qu se usa el metodo alcalino para la extraccin de alcaloides de la raiz de acnito. 8.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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IX. PRCTICA No. 9 REACCIONES GENERALES Y PARTICULARES DE ACEITES 111 Marco terico Para calificar, identificar y descubrir las falsificaciones de los lpidos se realizan reacciones caractersticas y se comprueban con controles qumicos denominados ndices. 11.2 Competencias Efecta las reacciones qumicas generales y particulares de los aceites ms usados en farmacia. 11.3 Materiales y equipos Material: Aceite de maz, man, ssamo, algodn, ricino, linaza, hgado de bacalao. Tubos de ensayo, beaker, R. Hauchercorne, R. Heidenreich, R. Bellier, R. Serger. R. Halphen. R. Halphen Gastaldi, R. Brulle, R. Beherns. R. Baudovin, R. Villavechia-Fabris, R. Blarez. Mtodo: Identificacin por reacciones de coloracin y precipitacin, Observar el comportamiento de aceites frente a R. Generales y Particulares. 11.4 Procedimiento Para efectuar las reacciones generales y particulares de aceites: en un tubo de ensayo poner 1ml de MP con 1ml de S.R. observar y anotar los resultados. 11.5 Resultados Se identifica los lpidos provenientes de las drogas vegetales mediante reacciones generales y particulares. 11.6 Cuestionario 1. Cmo podra diferenciar un aceite de origen vegetal de uno animal? 11.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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X. PRCTICA No.10 NDICE DE ACIDEZ, INDICE DE SAPONIFICACIN 9.1 Marco terico Los aceites son principios naturales, qumicamente proceden de estructuras triglicridas donde predominan los Ac. grasos insaturados. Tienen aplicacin en la farmacia y alimentacin. 9.2 Competencias Realiza los anlisis cuali-cuantitativos de aceites aplicando los ndices saponificacin. 9.3 Materiales y equipos Materiales : Muestras de aceite. Matraz x 250ml, bureta, pipeta, vaso x 100ml. Cloroformo, Alcohol, R. Fenolftalena 1%, Sol. KOH 0.1N, Sol. KOH alcohlica N/2, Sol. HCl N/2 Mtodos : ndice de Acidez: valorar los cidos grasos libres contenidos en 1gr de grasa. ndice de Saponificacin: Capacidad de Sol. potasa alcohlica para saponificar 1 gr. de grasa, valorar el exceso de potasa. 9.4 Procedimiento Para I. Acidez: neutralizar, 20ml de alcohol y 10ml de cloroformo y III gts de S.R. Fenolftalena, con sol. KOH 0.1N hasta un tinte rosado persistente x ms de 10, en otro beaker pesar 2g. MP y adicionarle los solventes neutralizados agitar y valorar con KOH 0.1N hasta color rosado final. Efectuar clculos. Para I. Saponificacin: pesar 2g. de MP, adicionar 25ml KOH alcohlica N/2, adaptarle tapn con refrigerante, colocar a BM hirviente x 30, enfriar y agregar V gts de Fenolftalena y valorar el exceso de KOH no combinado, con la Sol. HCl N/2 hasta rosado plido. Efectuar una prueba en blanco. Realizar los clculos. 9.5 Resultados Se determina su estado de conservacin y capacidad de saponificacin de los lpidos. 9.6 Cuestionario de acidez y
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XI. PRCTICA No. 11 NDICE DE IODO, NDICE DE HEHNER 10.1 Marco terico Para identificar las estructuras qumicas de los aceites se realizan variadas reacciones para resaltar sus caractersticas peculiares. 10.2 Competencias Realiza los anlisis diferenciales aplicando los ndices de Iodo y Hehner. 10.3 Materiales y equipos Material: Muestras de aceites o grasas. Bureta, pipeta,matraz x 250ml, vaso x 100ml, Ioduro de Potasio 30%, cloroformo S.R Iodo-Bromuro, Engrudo de almidn, Tiosulfato de sodio O.IN. Sol. alcohlica KOH 10%, Sol H2SO4 20% Mtodo: ndice de Iodo .- Valorar la cantidad de Iodo que puede ser fijada por 100gr. de aceite. ndice de Hehner.- Valorar la cantidad de cidos grasos fijos insolubles contenidos en 100gr de lpido. 1.4 Procedimiento Para ndice de Iodo: Pesar en matraz con tapa esmerilada 0.3 g de MP, ms 10ml de cloroformo, agitar, agregar 20ml de S.R. Iodo bromuro, guardar en lugar oscuro por 30 adicionar 10ml de KI y 100ml de agua. Titular con Tiosulfato de sodio 0.1 N, usando indicador almidn, anotar el gasto. Efectuar una prueba en blanco, anotar el gasto. La diferencia de gastos da los ml de Iodo fijados por la MP. Efectuar los clculos. Para el I. de Hehner.- En matraz pesar 3g MP agregar 15ml Sol alcohlica de KOH adaptarle refrigerante, poner a BM x 30. Enfriar, evaporar el alcohol a pequeo vol. y disolver el jabn con 25ml de agua caliente, enfriar y agregar 10ml de Ac. sulfrico 20%. Decantar la parte insoluble, lavar con varias porciones de agua hasta reaccin neutra. Desecar en estufa a 70 a peso constante. El valor encontrado corresponde a los cidos grasas fijos insolubles contenidos en la MP que se expresa en 100%. Efectuar clculos. 10.5 Resultados Se determina mediante estos controles qumicos qu clases de lpidos contienen las drogas vegetales y la cantidad de cidos grasos fijos insolubles. 10.6 Cuestionario
1.
10.7 Fuentes de informacin
Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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XII. PRCTICA No. 12 IDENTIFICACIN DE VIT A Y D EN EL INSAPONIFICABLE 121 Marco terico Los aceites de origen animal son triglicridos, cuyos Ac. Grasos insaturados tienen importancia teraputica del mismo modo que las sustancias insaponificables vitaminas A y D. 12.2 Competencias Obtiene la fraccin insaponificable de aceites y en ella identifica vitaminas liposolubles A y D. 12.3 Materiales y equipos Material: MP. Aceite de hgado de bacalao. Matraz refrigerante, probeta, pera de separacin, vaso x100ml ter etlico, alcohol, sol alcohlica KOH 5%, cloroformo Anhidrido actico, H2SO4, sol. NaOH 4%. Mtodo: Saponificacin y extraccin de vitaminas A y D del insaponificable. 12.4 Procedimiento Efectuar la saponificacin del aceite, disolver el jabn con agua hirviente. Extraer las sustancias insaponificables con ter etlico a partir de la solucin jabonosa. El extracto etreo lavar hasta que no d reaccin alcalina. Evaporar a residuo. Secar a 100 y pesar. Relacionarlo a 100g de muestra. Identificar las vitaminas A y D con reactivos especficos. 12.5 Resultados Se extrae vitaminas liposolubles A y D a partir del insaponificable del aceite de hgado de bacalao, se separa y se identifica con reacciones de caracterizacin. 12.6 Cuestionario 1. Con qu finalidad se usa ter etlico? 12.7 Fuentes de informacin Bruneton J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas medicinales. 3ra Ed. Acribia, Zaragoza, 2001 Bruneton J. Elementos de Farmacognosia y de Fitoqumica. Ed. Acribia, Zaragoza, 1991 Kuklinski C. Farmacognosia. Ediciones Omega, Barcelona, 2000 Trease G, Evans W. Pharmacognosy, Ed. Bailliere Tindall, Londres 1994 Villar A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, S A. Madrid, 1999. Farmacopea USA (USP 30), 2008.
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XIII. PRCTICA No. 13 VITAMINAS HIDROSOLUBLES VALORACIN DE VITAMINA C 13.1 Marco terico La Vitamina C y complejo B son principios muy importantes para la conservacin de la salud presentes en alimentos y medicamentos. 13.2 Competencias Obtiene y analiza cuali-cuantitativamente vitaminas hidrosolubles: Vit.C y complejo B. 13.3 Materiales y equipos Material: zumo de frutas ctricas, Muestras puras de: tiamina, riboflavina, piridoxina Matraz x 250, fiola x 200, bureta x 25, pipetas, tubos de ensayo. Ac. oxlico, H2SO4 dil, R. Fehling, R. Nitroprusiato, R. Fehling, R. Almidn, R. Yodo 0.01N, R. NaOH 1N. Mtodo: Extraccin de vitamina C y su valoracin por Iodometra. Reacciones de caracterizacin de tiamina, riboflavina. piridoxina 13.4 Procedimiento A un peso determinado de zumo de frutas agregarle cido oxlico, crist, y llevar a volumen con agua destilada en una fiola de 200. De esta solucin se realizan las reacciones de identificacin de vitamina C previa concentracin a la mitad de su volumen. Para la valoracin: medir 50ml del filtrado agregar 100ml de agua destilada y 25ml de H2SO4 diludo. Titular con solucin Yodo 0.01N usando como indicador Engrudo de Almidn. Efectuar los clculos. 13.5 Resultados Se extrae vitamina C de drogas vegetales, se identifica con reacciones especficas y cuantifica; adems se identifica vitaminas del complejo B mediante reacciones particulares. 13.6 Cuestionario
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NATURALES.
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