Recogida, preparación y conservación de muestras

del aparato digestivo

1. Saliva:
Las glándulas salivares producen diariamente entre 1- 1,5l., la función
es lubricar para facilitar la masticación y la deglución, tiene una
función digestiva gracias a la
amilasa salivar o ptialina que
desdobla los polisacáridos en
disacáridos, la saliva se mantiene
con distinta intensidad y también la
hay de noche aunque disminuye. Es
una secreción rica en potasio,
ligeramente ácida con un pH sobre
6,6 muy rica en electrolitos K+, Na+,
Cl-, un aumento se secreción de
saliva se llama sialorrea o ptialismo
y puede ser debida a una irritación
mecánica, por intoxicación (por
ejemplo por yodo), puede haber a
veces una sialorrea fisiológica (por ejemplo embarazo o en situaciones
de rabia). En casos extremos se pueden producir entre 2-4 litros de
saliva y eso podría llegar a una oliguria.
Aptialismo, es más frecuente y puede ser debido a lo siguiente, en
procesos emocionales (nerviosismo, pánico…) en casos de
deshidratación, en diabetes.
Debido a su alto contenido en electrolitos es fácil que se puedan
producir cálculos en las parótidas.
Para la obtención de la muestra se debe favorecer la secreción de
saliva y recogerla en un tubo de boca ancha y estéril.
2. Jugo gástrico:
En condiciones normales la cantidad es de menos de 50cm3, es
incoloro, si hay patologías puede aparecer un color verdoso, si hay
bilis, y está compuesto por agua, ácido clorhídrico, sales minerales,
pepsina y factor intrínseco (si este factor se encuentra en deficiencia
no se absorbe la vitamina B12, y da lugar a una anemia perniciosa, que
es frecuente en personas con gastritis
atrófica).
El estudio de las secreciones gástricas
tiene interés para diagnosticar algunas
enfermedades, por ejemplo para
diagnosticar el síndrome de Zoringer o

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cuando se quiere controlar las úlceras, sobre todo las que hayan sido
intervenidas quirúrgicamente.
El quimismo gástrico es una exploración que mide la secreción ácida
del estómago, lo hace en dos condiciones, una en condiciones basales
y después de provocar un estímulo.
El paciente debe evitar en las 48 horas antes fármacos que puedan
activar la secreción gástrica, además el paciente tiene que soportar un
ayuno de 12 horas.
Se introduce una sonda por la nariz
en sentido del estómago y se aspira
el contenido gástrico, se valora la
cantidad, se mide el pH, luego cada
15 min. Se le realizan aspirados
durante 1h., y se vuelve a valorar el
volumen total y el pH. Luego se
añade una sustancia alcalina al
aspirado (por ejemplo sosa) hasta
que se consigue un pH neutro,
entonces se puede valorar la acidez.
Durante esa hora el estómago ha
segregado jugo gástrico sin
producirle ningún estímulo, a eso se le llama BAO (condiciones
basales). Una vez determinado se administra (pentagastrina) y durante
la hora siguiente cada 15 min. Se vuelve a realizar una aspiración y se
valoran como antes (MAO secreción ácida máxima).
En esta técnica puede haber errores, el más frecuente pueden existir
fugas de la secreción por el píloro hacia el duodeno.
El valor fundamental de esta prueba es para diagnosticar el síndrome
de Zoringer y para valorar el estado de las úlceras que se han operado.
El valor del BAO en pacientes sanos es de 10 miliequivalentes/hora,
los valores del MAO en pacientes sanos difieren según el sexo pero
más o menos están entre 15-40 miliequivalentes/hora.
3. Heces:
El estudio de las heces es útil para el diagnóstico de algunas
enfermedades, parasitosis, infecciones del tracto intestinal,
malabsorción, diagnóstico de
distintos tipos de diarreas…
Normalmente se excretan entre
100-200 g. heces/día, esta
cantidad está condicionada por

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la dieta, algunas características organolépticas van a estar
condicionadas por la alimentación.
La recogida de heces se hace en un recipiente grande y luego con una
espátula se recoge una cantidad del tamaño de una almendra y se
coloca en un frasco estéril, hay que tener precaución de que las heces
no se contaminen con la orina porque la orina podría afectar a
parásitos que podría haber en las heces. En el caso de los niños la
recogida de heces se hace en bolsas de plástico estériles.
Las heces están constituidas por agua,
estercobilinógeno, bacterias propias de la flora
intestinal y restos no asimilables de los
alimentos.
La existencia de heces normales significa que la
función digestiva funciona de forma correcta.
Cuando hay alguna alteración a nivel del
intestino se refleja en la formación de las heces
y va a indicar que hay trastornos de absorción
de uno o varios de los principios inmediatos,
habría un síndrome de malabsorción.
Cuando aparecen de forma anormal grasas en heces se dice que hay
una esteatorrea, cuando se detecta almidón se llama amilorrea, cuando
se pueden detectar proteínas se llama creatorrea. Normalmente los
síndromes de malabsorción van acompañados de heces diarreicas.
3.1 Características
organolépticas:
• Consistencia, en
condiciones normales en
cuanto a la consistencia las
heces son blandas, sólidas y
están bien formadas porque
el tubo digestivo hace como
un molde. En caso de
estreñimiento las heces son
duras, resecas, y pequeñas.
En una diarrea son fluidas,
pastosas o a veces
totalmente líquidas, depende
del grado de diarrea, en
algunas enfermedades como
por ejemplo el cólera se dice
que las heces son como sopa

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 de arroz, en el caso del tifus o fiebres tifoideas las heces
aparecen como crema de guisante.
• Olor, el olor normal es característico, pero en algunos casos
como por ejemplo diarrea el olor puede ser más rancio por
existir fermentación, en cambio en un caso de diarrea aguda son
inodoras o también en diarreas provocadas por antibióticos, en
algunos canceres en los que hay putrefacción, cáncer rectal, hay
un olor fétido penetrante, en los casos de melenas (sangrados)
hay un color característico y muy nauseabundo.
• Cantidad, puede haber una
disminución de entre 100-200 ml.
debido a comidas muy astringentes,
comidas como por ejemplo la
manzana, el chocolate, una
disminución patológica es indicativo
de un tumor a nivel intestinal
localizado en el recto. El aumento de
volumen indica una mala absorción
intestinal, un tránsito intestinal muy
acelerado o un megacolon. Cuando
el tránsito es muy rápido las heces
aparecen blandas y pueden aparecer
restos de alimentos. Cuando hay una estenosis aparecen con
forma de cinta.
• Color, en condiciones normales tiene un color pardo oscuro
debido a la estercobilina, en los lactantes son amarillas, con
dietas excesivamente en proteínas las heces se vuelven de un
marrón oscuro, en cambio en dietas vegetarianas las heces se
vuelven verdosas porque hay mucha biliverdina, pero también
existen casos de acolia (sin color) y esto se da cuando no hay
estercobilinógeno, esto puede ser porque no se excreta casi bilis.
También pueden aparecer rojas cuando hay una rectorragia
porque van acompañadas de sangre y dentro de eso habría que
observar si la sangre aparece por encima de las heces, que
indica que hay un sangrado en las partes bajas del intestino
provocadas por ejemplo por hemorroides, si la sangre aparece
mezclada con las heces aparece de un color negruzco, aparece
en casos de melena, indica que hay una hemorragia en las partes
altas del intestino. Puede tener a veces un aspecto negro, esto
puede ser en ingestas de preparaciones con hierro o con
medicamentos con carbón.
• Aspectos patológicos, que aparezca moco en las heces siempre
es patológico, excepto en los recién nacidos, se ve porque por
 encima de las heces hay
una película gelatinosa,
eso hace que las heces
tengan un aspecto más o
menos blanquecino, esto
indicaría que hay una
inflamación en la mucosa
intestinal, normalmente a
nivel del colon, también
aparece cuando hay
neoplasias intestinales. Si
aparece pus indica también que siempre es patológico.
Observamos una masa blanquecina y frecuentemente ese pus va
asociado al moco y a la sangre. Sangre, en condiciones
normales la sangre no aparece, así que puede indicar que hay
tumores, que hay una inflamación o una hemorragia. Puede ser
visible a simple vista, pero también puede ser solo visible
microscópicamente, a eso se le llama sangre oculta en heces.
3.2 pH:
El pH oscila entre 6,8- 7,2 y esa variación es debida a la alimentación,
en dietas ricas en productos alcalinos las heces debido a una
descomposición de aminoácidos en amoniaco
tiene un pH más alcalino; en cambio en una
dieta rica en hidratos de carbono las heces
aparecen con un pH más ácido debido a que
la degradación de hidratos de carbono tiende
a formar ácidos. Es importante determinar el
pH de las heces porque orienta sobre la
digestión, si el pH es alcalino puede indicar
una putrefacción, si el pH es ácido puede
indicar un aumento de la fermentación de los
alimentos.
La determinación se hace así, se recoge una
pequeña cantidad de heces, se introduce en un tubo y se le añade agua
destilada, se obtiene entonces una especie de papilla, se introduce una
tira indicadora de pH y se valora.
3.3 Sangre oculta en heces:
A veces la cantidad de sangre que se pierde es tan pequeña que no se
produce patología pero si la pérdida es continua puede llegar a
producir la patología, lo más frecuente es que venga de úlceras lo que
da lugar a una pequeña hemorragia, puede ser insignificante pero si es
continuada puede provocar una anemia ferropénica. La sangre oculta
en heces puede ser debida también a un tumor intestinal. La prueba de

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la sangre oculta en heces es determinante y se basa en buscar unas
peroxidasas, si resulta que existen es que hay Hb y por tanto sangre,
para hacer esa determinación previamente hay que hacer una dieta a
base de leche, pasta, huevos… pero no puede aparecer ni carne ni
pescado porque entonces aparecería Hb. Si después de esa dieta
aparece Hb es que viene del individuo.
Para hacer la determinación se utiliza un reactivo cromógeno, el cual
es incoloro y cambia de color en presencia de peroxidasas y agua
oxigenada.
En el comercio existen unos kits de forma que esta prueba la puede
hacer el propio paciente, consiste en lo
siguiente, un papel de filtro, una
varilla y una pastilla que tiene el
cromógeno. Con la varilla se traza en
diagonal una capa fina sobre el papel
de filtro, se coloca la pastilla en el
medio de esa diagonal, sobre la pastilla
se echa una gota de agua destilada, se
espera unos 10 segundos y se echa una
gota de agua oxigenada entre los 30
segundos- 2 min. Que viene a
continuación se debe producir la
reacción, si en las heces hay sangre alrededor aparece un alo azulado,
si se lee mas tarde de los 2 min. El alo va perdiendo color, si no hay
Hb va perdiendo ese alo azulado, pero puede aparecer algún alo
azulado aislado aún siendo negativa.
3.4 Estudio macroscópico:
Consiste en examinar una muestra buscando en ella restos de
alimentos que puedan acompañarse de moco, de pus, para eso tenemos
que procesar la muestra.
1. Se tritura en un mortero una porción de heces con agua, se
obtiene entonces una masa uniforme.
2. Se pasa a una placa Petri.
3. Con luz directa sobre la muestra y con una lupa obervamos la
preparación, primero sobre un fondo claro y luego sobre fondo
oscuro.

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 Podemos observar lo siguiente, si la digestión es normal aparece

un líquido turbio homogéneo podemos ver algunas fibras, serán fibras

vegetales de los alimentos. Puede haber restos de membranas
vegetales, puede aparece alguna semilla vegetal.
En caso de patologías podemos ver restos de alimentos, tejido
conjuntivo en forma de membrana, filamentos o grumos, color blanco-
amarillento (que se puede confundir con moco, in embargo es tejido
conjuntivo).
Para no confundirlo en tejido conjuntivo o moco añadimos 1 gota de
ácido acético al 30%, si los filamentos que estábamos viendo
desaparece entonces será tejido conjuntivo, si en cambio se ve mejor
entonces es moco.
También puede aparecer presencia de grasas, restos de carne y
aparecen como de color marrón- grisáceo (se corresponde con restos
de fibras musculares).
3.5 Estudio microscópico:
Nos proporciona datos sobre trastornos de la digestión.
Procesamiento:
Cogemos una porción de heces, la mezclamos en un mortero con agua.
Obtenemos así una suspensión homogénea, realizamos 3
preparaciones: una para observación en fresco, otra a la que le
añadimos Sudan III y otra a la que le añadimos Lugol. Depositamos
una pequeña cantidad en un porta y observamos al microscopio.
• Observamos al microscopio el porta sin teñir y esto nos va a
servir para observar cualquier alteración del resto de la
 digestión, sobre todo sirve para identificar proteínas, células
sanguíneas y parásitos.
• Cogemos ahora el porta que tiene
Sudán III, con esta tinción se
hacen visibles los restos de grasas
(que tiene un color rojo o
anaranjado) y de los ácidos grasos.
• En la preparación con Lugol doble
es usada para destacar hidratos de
carbono. Sobre la muestra
añadimos el Lugol,
homogeneizamos con el asa de
siembra y si aparece una
coloración azulada existen hidratos
de carbono.
En ocasiones se hacen otras tinciones
para complementar:
1. Un montaje en fresco con solución alcohólica de eosina.
En esta tinción diferenciamos la presencia de fibras
musculares que se tiñen de color rojo- anaranjado.
2. Un montaje en fresco con solución de ácido acético al
40%, se usa para diferenciar tejido conjuntivo y moco. Si
es tejido desaparece, si es moco se resalta más.
La observación microscópica se hace con objetivo de 40X.
También podemos observar la flora intestinal, si se tiñe con Lugol
cogen color los gérmenes que captan Yodo, podríamos observar
también celulosa y cristales (oxalato cálcico, fosfato amónico y
magnésico).
El significado de todo esto junto:
• fibras musculares, las cuales pueden aparecer bien digeridas
indican una digestión normal, si están medianamente digeridas
pueden suponer una alteración gástrica o pancreática, si no están
digeridas hay una alteración gástrica o pancreática severa.
• Tejido conjuntivo, indica siempre una insuficiencia gástrica.
• Grasas, en pequeña cantidad es normal pero cuando aparecen
grandes cantidades hay una insuficiencia de lipasa pancreática o
una obstrucción en el conducto biliar, o insuficiencia biliar, o
incluso por el tránsito intestinal muy acelerado o en la
enfermedad celíaca.
• Almidón, pequeñas cantidades son normales en una persona san,
si esta se encuentra dentro de células enteras indica que hay un
tránsito intestinal acelerado. Si es mucha cantidad sin digerir
indica una gran cantidad de ingesta de féculas. La aparición de

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 moco, leucocitos, hematíes, restos de epitelio, todo esto indica
una alteración en la mucosa intestinal.
4. Líquido peritoneal:
El líquido peritoneal se produce en la capa parietal del peritoneo y
va a ser reabsorbido por los capilares en la hoja visceral.
Este líquido puede ser en algunos
momentos un exudado, un
trasudado o quiloso.
El estudio de este líquido tiene
importancia clínica sobre todo en
patologías con aumento de líquido
peritoneal y entonces hay un
aumento del abdomen que recibe
el nombre de ascitis.
Se hace estudios bioquímicos,
bacteriológicos y citológicos. La
toma de muestras se hace de la
siguiente manera:
Hacemos una punción abdominal que recibe el nombre de
laparocentesis, la punción se realiza en la línea media entre las
sífinis del pubis y el ombligo. Estos líquidos coagulan rápidamente.
Entonces se usan tubos heparinizados.
Examen físico:
En condiciones normales este líquido es amarillo pálido y
transparente. Se recoge más o menos 50 ml. si es turbio indica que
hay una infección bacteriana (peritonitis) o puede indicar también
un traumatismo peritoneal.
Puede ser verdoso e indica presencia de bilis, si se ha perforado la
vesícula o las vías biliares por una perforación del duodeno.
Si es lechoso hay un derrame quiloso, por ejemplo puede haber una
obstrucción linfática, puede ser hemorrágico, puede no ser
patológico debido a la técnica de punción, si es así iría clareando.
Pero si hay una patología indicaría una neoplasia o una úlcera.
Puede ser purulento, indica una infección bacteriana.
Examen citológico:
Interesa hacer un recuento
de leucocitos y glóbulos
rojos, no es aconsejable
hacerlo de forma
automatizada, se suele
hacer manualmente.
Es aconsejable centrifugar
la muestra y entre las
 tinciones que se utilizan en este líquido puede MGG, pero la más
utilizada es la de Papanicolau sobre todo para reconocer células
tumorales, tiñe los núcleos de color azul, los nucleolos de rojo y el
citoplasma de color rosa.
Examen químico:
Interesa en los casos de ascitis, aumento de volumen, aquí interesa
mirar si es un exudado o el trasudado. Interesa determinar la
concentración de proteínas, que debe ser semejante a la
concentración de proteínas en sangre en estado normal, interesa
también la determinación de
enzimas, sobre todo las
fosfatasas alcalinas que
tienden a estar aumentadas
en perforación intestinal,
amoníaco que también
aumenta cuando hay
perforación intestinal.

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