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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA DEPARTAMENTO DE SISTEMTICA E ECOLOGIA ECOLOGIA DO PLNCTON MARINHO Prof. Roberto Sassi AULA 02 - TCNICAS DE AMOSTRAGENS DO PLNCTON 1. Coletas 1.1- Redes de plncton As redes de plncton so essencialmente uma espcie de "grande filtro de caf", confeccionada em tecido de malhas muito pequenas que possibilitam a reteno da maior parte dos organismos planctnicos que nos interessam, deixando sair a gua com certa facilidade. O primeiro pesquisador que utilizou uma rede de plncton foi J. Vaughan Thompson, em 1882. Durante muito tempo as redes eram confeccionadas com tecido de seda, do tipo usado nos moinhos de trigo para tamizar a farinha. Nos anos recentes, a seda foi substituda por fios sintticos (especialmente o nailon), mais resistentes aos agentes mecnicos e qumicos, de secagem mais rpida e imune ao bacteriana. Existem diferentes tamanhos de malhas utilizveis na confeco das redes, dependendo da frao de organismos que se quer coletar. As aberturas das malhas so da ordem de micrmetros, conforme tabela anexa. Para o fitoplncton usam-se, em geral, redes de 20 a 64 m de abertura de malhas. As malhas muito pequenas so mais usadas para filtraes em laboratrio (malhas de 10, 8 e 5 m), por serem pouco adequadas a trabalhos de rotina no mar devido a sua ocluso total muito rpida. Redes com malhas grandes (acima de 100 e at 200 m) so mais adequadas s coletas do zooplncton e malhas maiores so propcias coletas de larvas de peixes, por exemplo (macrozooplncton). Os organismos do microzooplncton tambm so eficientemente retidos em redes com malhas mais finas (as mesmas usadas em coletas de fitoplncton). No h redes convenientes para todos os organismos planctnicos. Em geral, uma rede boa para coleta de algumas microalgas (p. ex. diatomceas e dinoflagelados) tem malhas demasiadamente grandes para coleta de outras (p. ex. cocolitofordeos), no caso do fitoplncton, e pequenas para coleta de algumas formas de zooplncton (p. ex. coppodos). A filtrao mais lenta quanto menor forem as malhas. Com a diminuio do tamanho da malha h um excesso de presso no tecido.

As malhas muito pequenas so, portanto, inconvenientes para redes de boca ampla e arrastos um pouco mais rpidos. Formam-se, durante o arrasto, turbilhonamentos na entrada da rede o que provoca um escape de organismos com natao mais vigorosa (no caso de formas zooplanctnicas). Todas as redes apresentam filtrao seletiva sobre determinadas classes de tamanho, seja do fito ou do zooplncton. Por esse motivo no se prestam para estudos populacionais quantitativos. Podemos precisar dados quantitativos, desde que conhecido o volume de gua filtrada pela rede, entretanto, mesmo assim as informaes so semiquantitativas (relativas) e no absolutas, devido filtrao seletiva. Amostras de rede so preferencialmente utilizadas em estudos taxonmicos, por concentrarem sempre um grande nmero de organismos, possibilitando coletar-se inclusive, espcies mais raras. Existem vrias maneiras de se precisar o volume de gua filtrada pela rede: a)- pelo uso de um medidor de fluxo (flowmeter), acoplado a boca da rede e que registra o volume de gua que passa por ela medida que a mesma vai sendo arrastada. Medidor de fluxo (Fig. a,b,c) , na verdade, um aparelho metlico que possui um contador de giros como nos hidrmetros que registram o consumo de gua em residncias. medida que a gua passa pelo aparelho uma aleta vai girando e a quantidade de revolues registrada. O volume de gua previamente aferido levando-se em conta que certa quantidade de giros corresponde a certa quantidade de gua filtrada. Desse modo, perfeitamente possvel calcular com preciso qual foi o volume total de gua filtrada durante um procedimento de coleta.

Figura 1 (a,b)- Medidor de fluxo usado em redes de coleta de plncton.

Fig. 1(c) - Medidor de fluxo usado em redes de plncton.

b)- por meio de procedimentos matemticos que levam em conta o dimetro da boca da rede e a distncia em que a mesma foi arrastada. O volume filtrado estimado multiplicando-se a rea da boca pela distncia. c)- pelo uso de bombas de suco, em que se posiciona a vlvula da bomba na profundidade desejada e o volume de gua coletada pode ser medido diretamente com baldes na superfcie. Esse mtodo em particular apresenta um grande inconveniente, particularmente para o zooplncton, uma vez que pode haver escape de nadadores mais ativos, de formas muito grandes, assim como pode haver destruio parcial ou total de organismos devido a choques mecnicos com a parede interna da mangueira ou com os pistes da bomba. Existem vrios tipos de redes de plncton em uso atualmente, como se pode verificar nas figuras abaixo.

1.1- Rede cnica: Possui um aro de metal, 3 tirantes que se unem um anel no qual prende-se um cabo que serve para puxar a rede durante o procedimento de coleta. Na extremidade oposta prende-se um copo de PVC para reteno dos organismos coletados (Fig. 2a,b,c).

Fig. 2: a- Rede de plncton cnica; b, c- rede bong.

1.2- Redes de fechamento: Permite a coleta de plncton em profundidades. Podem ser fechadas em profundidades desejadas utilizando-se, para tal, um mensageiro de metal enviado pelo cabo que aciona um dispositivo que fecha a boca da rede (tipo Apstein) ou que estrangula a rede (tipo Nansen) (Fig. 3).

Figuras 3 Redes de fechamento para coletas em profundidade. 1.3- Coletores de alta velocidade de W. D. Clarke: So redes contidas em armaes metlicas, com entrada de gua muito reduzida e que podem operar a velocidades de 10 a 15 ns ou mais (Fig. 4a-d). Prestam para estudos de distribuio do plncton em larga escala e normalmente podem ser acopladas a navios mercantes que cortam os oceanos de um pas para o outro. Esses coletores possuem um compartimento com formol e uma bobina de uma fina rede que vai se desenrolando a medida que o equipamento vai sendo puxado. A gua passa pela rede, os organismos do plncton ficam retidos nela e ela vai sendo novamente enrolada em torno de um eixo no interior do compartimento com formol. Ao chegar ao destino, o compartimento retirado e a rede com os organismos coletados e preservados analisada.

Fig. 4 (A-D) Coletor de plncton de alta velocidade

1.4- Garrafas: Garrafas coletoras dos tipos Nansen, Van Dorn ou Niskin, podem ser usadas para coletar amostras de plncton, particularmente fitoplncton e representantes do microplncton. Neste caso, as garrafas so presas a um cabo e abaixadas a uma profundidade desejada na coluna dgua. Em seguida, envia-se atravs do cabo um mensageiro de metal que desarma a garrafa aprisionando em seu interior gua contendo os organismos planctnicos daquela profundidade. Particularmente no caso das populaes fitoplanctnicas essas garrafas so usadas para estudos verdadeiramente quantitativos uma vez que coletam a prpria gua e os organismos que ela contm. Prestam-se tambm para a coleta de gua para anlises qumicas, medidas de produtividade primria e anlises de pigmentos fotossintetizantes. Normalmente podem ser acoplados termmetros a essas garrafas o que torna possvel tambm, determinar-se a temperatura da gua na profundidade de coleta. Nos estudos

planctnicos, as amostras coletadas pelas garrafas so comumente fixadas com soluo de Lugol ou formol neutralizado e concentradas por centrifugao, por decantao ou por filtrao em filtros com poros muito pequenos. (Figuras 5 a-d)

Figuras 5-Garrafas coletoras de gua para estudos do plncton. a- van dorn, b- nansen, c- niskin, d- para coleta de bacterioplncton 2- Identificao das amostras Cada amostra coletada deve ser identificada por um nmero. Usam-se, para tal, etiquetas de papel vegetal que so colocadas dentro dos frascos contendo o material coletado, ou etiquetas adesivas aderidas parede do frasco. Dados complementares so agregados s etiquetas mas sempre conveniente dispor-se de uma ficha de bordo para anotaes que incluem: (a)- nmero da amostra, (b)- srie ou campanha oceanogrfica, (c)- nome da embarcao, (d)- localizao da estao de coleta (latitude e longitude), (e)- data e hora da coleta, (f)profundidade amostrada, (g)- tipo de rede utilizada, velocidade e tempo de arrasto (para coletas com redes), (h)- temperatura, salinidade e transparncia da gua, (i)- outros dados fsicos e qumicos de interesse, como intensidade luminosa, oxignio dissolvido, condies meteorolgicas, etc. 3- Conservao das amostras As amostras de plncton coletadas com a rede so conservadas comumente em formol neutralizado a 4%, em frascos de vidro devidamente fechados. A neutralizao pode ser feita com bicarbonato de sdio, brax ou hexametileno tetramina. No existe, em verdade, um

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conservante ideal. Para microalgas com placas calcreas (p. ex. cocolitofordeos) ou para animais com esqueleto de carbonato de clcio (ex. larvas de moluscos, etc.) a neutralizao sempre necessria mas para diatomceas e dinoflagelados no. Para diatomceas, por exemplo, at melhor preserv-las em formol no neutralizado uma vez que o excesso de neutralizante adicionado ao formol o torna alcalino e, nesse caso, a corrosso das frustulas acelerada. Amostras de fitoplncton coletadas com garrafas hidrogrficas comumente so fixadas com Lugol e, neste caso, devem ser mantidas na obscuridade. Em alguns casos utilizam-se tambm cido smico ou Glutaraldedo, entre outros fixadores. Algumas receitas mais usadas para a fixao de microalgas planctnicas incluem: a)- cido smico: Muito cuidado. Esta substncia altamente txica e letal. Prepar-la em capela ou local muito ventilado. Usar 200 mg de OsO4 + 10 ml de H20. Quebrar o frasco contendo o cido smico SEMPRE diretamente no interior da gua, num bequer, usando um basto de vidro. NUNCA QUEBRE OS FRASCO DESSE PRODUTO FORA DA GUA POIS OS GASES LIBERADOS PODEM MATAR. Para fixao usar 3 a 6 gotas por 100 ml de amostra. b)- Glutaraldedo: (pH entre 7,6-7,8). Usar 8 g de glutaraldedo e 100 ml de H2O. Misturar com a amostra na proporo de 1:1. c)- Soluo de Lugol cido (Lovegrove, 1960). Pesar 20 g de KI, 10 g de I2 e dissolver em 200 ml de H2O + 20 ml de cido actico glacial. d)- Soluo de Lugol alcalino (Utermhl, 1948). Pesar 20 g de KI, 10 g de I2 10 g de CH3COONa e dissolver em 140 ml de H2O + 20 ml de cido actico glacial. e)- Formol neutralizado: Usar 1 litro de formol a 40% (formol comercial) e 50 g de brax. 5.- Referncia bsica Newell, G.E. & Newell, R.C. 1963. Marine Plankton. A practical Guide. Hutchinson Educational., Essex, 244p.