CINTICA DE MUERTE

La fase de MUERTE sigue una Cintica Exponencial y puede ser sometida a un tratamiento matemtico similar al usado para el tratamiento matemtico del crecimiento.

Por lo tanto una grafica del logaritmo del nmero de clulas supervivientes a un tratamiento trmico realizado a una temperatura dada en funcin del tiempo de tratamiento, producir una lnea recta.

Entonces por ser una curva exponencial de primer orden, se puede aplicar la clsica ecuacin de ARRHENIUS.


dN !  kN dt dN N !  k dt N0 !  kt ln N E lnk ! lnA RT N ! N 0 e  kt

Arrhenius

k ! Ae

E RT

DONDE: No = nmero inicial de microorganismos viables. N = nmero de microorganismos viables al tiempo t. K = coeficiente que depende de la exposicin y de la sensibilidad del microorganismo.

Por lo tanto; cuando el descenso logartmico es constante desde tiempo cero, la curva es una forma de cintica de: CHOQUE NICO:

N/No = e -kt
DONDE: No = poblacin inicial, N = nmero de supervivientes despus de la dosis o tiempo de tratamiento, t = dosis o tiempo de tratamiento y, k = constante de velocidad de muerte especfica.

PARA VARIOS CHOQUES:

N/No = 1-(1-e 1-(1-

-kd n

n= es un nmero de extrapolacin igual a la interseccin sobre el eje N/No que da el nmero de choques requeridos para la letalidad.

Esta lnea recta nos indica que se destruye una proporcin constante de microorganismos viables por unidad de tiempo.

Tiempo de reduccin decimal o valor D: Tiempo en minutos para reducir 10 veces (o el 90%) el nmero de microorganismos de una poblacin a una temperatura dada.

DONDE: N0= Nmero de clulas al inicio del tratamiento, NX= Nmero de clulas supervivientes despus de un tratamiento, x= minutos a una determinada temperatura t.

EJEMPLO: EJEMPLO: Determinar el valor del tiempo de reduccin decimal a 116 C (D116) de un microorganismo a partir de los siguientes datos de supervivencia al tratamiento
Duracin del Nmero de tratamiento viables 5 10 15 20 25 340.0 65.0 19.0 4.5 1.3

D116 ! D116 ! D116

x log( N 0 / N X )

20 min log(340 / 1.3) ! 8,27 min

El valor-Z es el cambio de temperatura que se requiere para modificar el valor D por un factor de 10.

DONDE:

((t 2  t1 ) !

Incremento de la temperatura Valores de respectivos de D

Dt1 , Dt 2 !

EJEMPLO: EJEMPLO: Para un microorganismo determinado el valor D104.4 es 113.0 min. y D121.1 es 2.3 min. Calcular el valor z.

(temp z! log( Dt1 / Dt 2 ) (121.1  104.4) z! log(113.0 / 2.3) z ! 9.9 C

Los valores D y z varan para cada microorganismo y para cada condicin. Las esporas, por ejemplo, tienen valores D mucho ms altos que las clulas vegetativas de los mismos microorganismos. Para poder determinar las condiciones en las que hacer un tratamiento trmico para destruir microorganismos es necesario dominar los conceptos de los valores D y z

UNIDAD DE LETALIDAD
LETALIDAD RELATIVA : VALOR F  Es el tiempo que se requiere para causar una reduccin especfica de una poblacin de microorganismos a una temperatura dada (min) o como mltiplo del valor D.  Este tiempo se puede expresar en minutos o como un mltiplo del valor D. Por ejemplo

Para una reduccin en la poblacin microbiana de 90 % 99 % 99.9 % 99.99 %

El valor F ser igual a D 2D 3D 4D

Valor F es el efecto letal de un minuto de calentamiento a la temperatura de 121 C. La letalidad relativa puede ser expresada en trminos de valores F basados en la relacin:
121)/z F = t x 10(T -121)/z

DONDE: DONDE: t = tiempo de aplicacin del tratamiento letal, T = temperatura en C y z = aumento de temperatura requerido para reducir el perodo de calentamiento en un 90 %(es decir el valor z )

Valor F corresponde al tiempo equivalente (medido en minutos de tratamiento a 250F, o 121C) a todo el calor recibido considerando su capacidad de destruir microorganismos. Al valor de la integral del calor recibido se la denomina Fs. Cuando consideramos que el calentamiento es un proceso instantneo, se puede calcular usando la siguiente frmula:

FS ! D (log N 0  log N )

Para medios de fermentacin: Probabilidad aceptable de fallo en la esterilizacin puede ser de 0,001 (1 fallo de cada 1.000 preparaciones). Ejemplo: va a realizarse la esterilizacin de 100 litros de lquido de maceracin de maz, el nivel de contaminacin es de 103 esporas viables/ ml, la contaminacin biolgica total ser de 1017 esporas. Si la temperatura de procesamiento es de 121 C y el valor D de las esporas del Bacillus contaminante a esta temperatura es de 3 min entonces

No= 1017 esporas viables/ ml Nf= 103 esporas viables/ ml T= 121C D= 3 min

FS ! D (log N 0  log N )
Fs=3min(log1017 -log103 ) Fs=3 X14 Fs=42 minutos
El tiempo de procesamiento requerido para tener una probabilidad de fallo de 0,001 es de un total de 14 x D = 42 minutos.

Si por alguna razn, por ejemplo, presencia de sustancias termolbiles, no es posible utilizar esta combinacin de tiempo/temperatura, ser posible encontrar un nuevo tiempo de procesamiento a partir de la ecuacin anterior: t = 42 x 10
(121-T )/z

Si la nueva temperatura es 131C, ENTONCES F = 1,0 z = 10 t = 42 x10-1 =4,2 min nuevo tiempo de procesamiento En otras palabras si se eleva la temperatura de esterilizacin en 10C, el tiempo de calentamiento 10 debera disminuirse en 10 veces. veces.
EJEMPLO: EJEMPLO Si el organismo contaminante ms resistente es mucho menos resistente que el organismo resistente modelo, con un valor D de 1,2 min a 121 C, entonces para llevar a cabo la letalidad equivalente a 121 C.

Fs = 1,2 (log 1017 - log 103) = 16,8 minutos

Bibliografa
Hugo and Russell Pharmaceutical Microbiology; EDITED BY Stephen P Denyer et al. 7th edition 2004; captulo 20 Ashutosh Kar; Pharmaceutical Microbiology; Copyright 2008 New Age International (P) Ltd., Publishers; captulo 7;ISBN (13) : 97881-224-2867-4