1.

-Concepto Las tcnicas cromatogrficas son tcnicas de separacin de mezclas de solutos, que disueltas en un solvente, son fraccionadas en sus distintos componentes. La separacin cromatogrfica se produce entre dos fases: -Fase mvil: un flujo lquido o gaseoso en el cual estn los solutos que se van a separar -Fase estacionaria: el lecho a travs del cual fluye la fase mvil. 2.-Separacin La separacin se va a producir en funcin de la diferente afinidad de los componentes de la fase mvil por la fase estacionaria. Aquel compuesto que sea ms afn que otro por la fase estacionaria retrasar su avance en esta y el menos afn la atravesar antes. Una vez que todos los componentes han atravesado la fase estacionaria salen separados unos de otros lo cual puede ser empleado para diversos fines. 3.- Clasificacin Se pueden seguir varios criterios de clasificacin: -Segn las caractersticas fsicas de las fases: Fase mvil: *Lquida *Gaseosa Fase estacionaria: *Slida *Lquida -Segn el mecanismo fsico de la separacin: Adsorcin Particin Intercambio inico Exclusin molecular Afinidad -Segn la forma fsica de los sistemas: En soportes planos: cromatografa lquida En columna: cromatografa lquida o gaseosa 4.-Cromatografa en papel El soporte es plano y consiste en una hoja de papel de celulosa de elevada pureza. La fase estacionaria es una la hoja de papel recubierta de una capa de agua asociada a la celulosa, por tanto la fase estacionaria es lquida. La fase mvil es lquida tambin, y en ella va disuelta la muestra. Es una cromatografa lquido/lquido 4.1.- Cromatografa bidimensional en papel Para mejor separacin se puede hacer una cromatografa bidimensional girando el papel 90.

5.-Cromatografa en capa fina El t l l i i i l i i t t l t l i cromatografa l ui o/sli o

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6.- Cromatografa en columna Los mtodos de columna se emplean pa cromatografas l uidas y slidas y los ra mecanismos de separacin son: -Adsorcin cuando la fase estacionaria es slida -Particin cuando la fase estacionaria es l uida 6.1.-Fase estacionaria de cromatografa en columna La fase estacionaria es la columna, que consiste en un tubo de longitud y ancho variables que lleva en su interior un soporte slido que puede ir slo o asociado a un lquido, en cuyo caso ser este la fase estacionaria. 6.2.-Fase mvil de la cromatografa en columna La fase mvil es un solvente que se hace pasar a travs de la columna. En la cromatografa lquida es lquido y gas en la gaseosa. 6.3.-Tcnica de la cromatografa en columna La muestra se introduce en la columna junto con la fase mvil. Las fases se encuentran en equilibrio para que la separacin de los componentes de la muestra se lleve a cabo por su distribucin entre ambas. Finalmente se efect an las lecturas del eluido y se obtiene un registro o cromatograma en el cual hay una serie de picos que corresponden a los componentes de la muestra.

MTODOS DE COLUMNA

CROMATOGRAFA LQUIDA (fase mvil lquida)

CROMATOGRAFA GASEOSA (fase mvil gas)

C.LQUID/LQUIDO F. Estacionaria lquida Particin L/L

C.LQUIDO/SLIDO F. Estacionaria slida Adsorcin L/S

C.GAS/LQUIDO F. Estacionaria lquida Particin G/L

C.GAS/SLIDO F. Estacionaria slida Adsorcin G/S

6.4.-T cnicas especiales de cromatografa en col mna -Cromatografa lquida de alta resolucin o precisin (HPLC -Cromatografa de gases 6.4.1.-Cromatografa lq ida de alta resol cin o precisin (HPLC) Emplea instrumentos relativamente complicados. Mediante la impulsin controlada del solvente a travs de la muestra se consigue la separacin en tiempos muy cortos. 6.4.2.-Cromatografa de gases En esta tcnica la fase mvil es un gas portador a presin. En el gas se inyecta la muestra y la mezcla pasa por la columna, que se encuentra incluida en u sistema n calefactor que tiene como misin volatilizar la muestra. Cualquier compuesto que pueda ser volatilizado es susceptible de ser analizado en cromatografa gaseosa. 7.-T cnica general de na cromatografa -Aplicacin de la muestra -Introduccin del soporte en la cmara de cromatografa -Separacin -Deteccin