REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE MEDICINA
ASIGNATURA: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA

TEMA 4
COCOS GRAM POSITIVO AEROBIOS

Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.)

MARACAIBO, ABRIL DE 2011.

COCOS GRAM POSITIVO AEROBIOS

OBJETIVO
ESPECÍFICO
Describir la taxonomía,
estructura antigénica,
enzimas, toxinas,
patogénesis, hallazgos
clínicos, diagnóstico de
laboratorio, epidemiología,
prevención y control de los
principales cocos Gram
positivo aerobios de
importancia clínica
STAPHYLOCOCCUS
MACROCOCCUS
PLANOCOCCUS
MICROCOCCUS: M. luteus, M. lylae, M. antarcticus
KOCURIA: M. roseus, M. varians, M. kristinae
KYTOCOCCUS: M. sedentarius
NESTERENKONIA: M. halobius
DERMACOCCUS: M. nishinomiyaensis
ARTHROBACTER: M. agilis (miembro del grupo A. globiformis-A.citreus)
STOMATOCOCCUS: Rothia mucilaginosa
ALLOIOCOCCUS: A. otitis
AEROCOCCUS
STREPTOCOCCUS
ENTEROCOCCUS
ABIOTROPHIA
 Bavariicoccus
Familia Catellicoccus
Enterococcaceae Enterococcus
Melissococcus
Pilibacter
Tetragenococcus
Género
Enterococcus • E. faecalis Vagococcus
• E. faecium
• 40 especies • E. gallinarum
• E. casseliflavus
Especies de
importancia clínica
 Cocos Gram positivo catalasa negativa, aislados, en pares o
cadenas cortas.
Las células son algunas veces cocobacilares cuando el frotis
coloreado con Gram se prepara a partir de crecimiento en medios
sólidos pero tienden a ser ovoides y en cadenas cuando el
crecimiento proviene de caldo tioglicolato.
Son exigentes desde el punto de vista nutricional, ya que
requieren vitaminas B, bases de ácidos nucleícos y una fuente de
carbono como la glucosa.
 El agar enriquecido con sangre de carnero
es adecuado para el desarrollo de estas
bacterias, y se pueden observar colonias
blanquecinas de gran tamaño (entre 1 y 2
mm de diámetro) tras un período de
incubación de 24 horas.
Las mayoría de las colonias pueden ser
no hemolíticas o α-hemolíticas, rara vez ß-
hemolíticas en agar sangre de carnero.
 Debido a su habilidad de fermentar carbohidratos a ácido
láctico, los enterococos son referidos como típicas bacterias
ácido lácticas.
No producen gas.
Son usualmente capaces de crecer en temperaturas entre
10°C y 45°C, crecimiento óptimo a 35°C.
La mayoría de las especies crecen en caldo con 6,5% de
NaCl e hidrolizan la esculina en presencia de sales biliares
(ensayo Bilis esculina).
Pocas especies son mótiles (E. casseliflavus y E. gallinarum).
Algunas especies son pigmentadas.
 No está disponible un criterio fenotípico que permita
inequivoca y claramente distinguir el género Enterococcus de
otros géneros, ya que no existen características particulares
comunes para todos los enterococos.
Identificación presuntiva  cocos Gram positivo catalasa
negativa, BE, PYR y LAP positivos y crecimiento en presencia
de 6,5% de NaCl y a 45°C (Lactococcus, Leuconostoc,
Pediococcus y Vagococcus).
Puede ser útil en la identificación la detección del antígeno
del Grupo D mediante reacción serológica, aunque este es
detectado solo en el 80% de las especies de Enterococcus.
Los enterococos son microorganismos comensales que no fabrican ninguna
toxina potente ni otro factor de virulencia definido. En consecuencia, por lo
general se considera que estas bacterias poseen una limitada capacidad
patógena, aunque las enfermedades potencialmente mortales, en especial en
sujetos hospitalizados, se han convertido en un grave problema.

Secretan enzimas
Presentan adhesinas de Normalmente no son capaces
extracelulares con actividad
superficie que facilitan su de evitar la fagocitosis y
hemolítica (citolisinas) y
unión a las células intestinales destrucción por parte de las
proteolítica (gelatinasa, serina
y vaginales. células fagocíticas.
proteasa)
Resistencia a muchos antibióticos. Los enterococos que forman
Pueden producir
parte de la flora normal de sujetos tratados con antibióticos de
bactericionas.
amplio espectro son capaces de proliferar y originar enf.
 FACTORES DE
EFECTO BIOLÓGICO
VIRULENCIA
Adhesinas de superficie
Proteína de aspecto velloso de la membrana
Sustancia de agregación citoplásmica que facilita el intercambio de
plásmidos y la unión a las células epiteliales
Proteína enterocócica de Adhesina de unión a colágeno presente en
superficie E.faecalis.
Presentes en bacterias individuales con muchos
Adhesinas hidrocarbonadas tipos de estas adhesinas; median en la unión con
las células del huésped
 FACTORES DE
EFECTO BIOLÓGICO
VIRULENCIA
Factores secretados
Bacteriocina proteica que inhibe el crecimiento de
Citolisina las bacterias grampositivas (favorece la
colonización); produce daño tisular local.
Quimioatrayente para los neutrófilos que puede
Feromona
regular la reacción inflamatoria
Hidroliza gelatina, colágeno, hemoglobina y otros
Gelatinasa
péptidos pequeños
Resistencia a los antibióticos
Numerosos plásmidos y Resistente a aminoglucósidos, ß-lactámicos y
genes cromosómicos vancomicina.
 Ampliamente distribuidos en la naturaleza y pueden ser
encontrados en suelo, plantas, agua, alimentos y en animales
(mamíferos, aves, insectos y reptiles).
 En humanos y otros animales son predominantemente habitantes
de tracto gastrointestinal (107 microorganismos/g de heces). Menos
comúnmente encontrados en otros sitios como tracto genitourinario
y cavidad oral.
 La prevalencia parece variar de acuerdo al hospedador. Está
influenciado por la edad, dieta y otros factores relacionados con
cambios de las condiciones fisiológicas (enfermedad y terapia
antimicrobiana anterior).
 Los enterococos son considerados los cocos Gram positivo más
abundantes colonizando el intestino, siendo E. faecalis una de las
más frecuentemente aisladas de este sitio.
 Tracto gastrointestinal humano  reservorio importante
asociado con enfermedad.
 La presencia de un alto número de enterococos en heces, así
como su habilidad de resistir diferentes condiciones físicas y
químicas y a sobrevivir en el ambiente implica que los enterococos
pueden ser utilizados como indicadores de contaminación fecal y de
calidad higiénica de alimentos, leche y agua de consumo.
 Microorganismos comensales que actúan como agentes
oportunistas de infecciones, particularmente en personas de
edad con enfermedad de base y pacientes inmunosuprimidos con
antecedente de hospitalización por períodos largos y/o han
recibido terapia antimicrobiana de amplio espectro.
 El microorganismo evade la respuesta inmunitaria y produce
cambios patológicos en el hospedador (directo o indirecto).
 Se han identificado varios factores de virulencia potenciales,
pero ninguno ha sido establecido como contribuidor principal a
la virulencia en humanos.
 Constituyen entre la segunda o tercera causa de infecciones
nosocomiales del tracto urinario (ITU), infecciones de heridas y
bacteremia en EEUU.
 Los enterococos han sido implicados en el 10% de todas las ITU y
aproximadamente en el 16% de las ITU nosocomiales.
 La bacteriuria enterococcica ocurre usualmente en pacientes con
anormalidades estructurales de base.
 Otras infecciones comunes son las intraabdominales y pélvicas, sin
embargo el rol en estos sitios permanece controversial.
 Son una importante causa de endocarditis y bacteremia.
 También han sido asociados menos frecuentemente con infecciones del
tracto respiratorio o SNC, otitis, sinusitis, artritis séptica, endoftalmitis e
infecciones dentales.
E. faecalis es la especie aislada de muestras clínicas humanas más
frecuentemente, representando el 80-90% de los aislamientos, seguido por
E. faecium (5-10%).
 ENFERMEDADES ENTEROCÓCICAS
INFECCIÓN DEL APARATO URINARIO: la disuria y la piuria son más
frecuentes en pacientes hospitalizados con una sonda urinaria
permanente y sometidos a tratamiento antibiótico con cefalosporinas de
amplio espectro.
PERITONITIS: inflamación y dolor con la palpación del intestino tras un
traumatismo o intervención quirúrgica abdominal; los pacientes debutan
de forma aguda, en estado febril y con hemocultivos positivos.
ENDOCARDITIS: infección del endotelio o las válvulas cardíacas;
asociada a bacteriemia persistente; puede manifestarse de forma aguda
o crónica.
 ENSAYOS
MUESTRAS CULTIVO
GENOTÍPICOS
 CULTIVO
INCUBACIÓN EN
SIEMBRA DE EN MEDIOS DE
AEROBIOSIS A
MUESTRAS CULTIVO
35-37°C durante
CLÍNICAS ENRIQUECIDOS
24 horas

IDENTIFICACIÓN:
Morfología colonial
Morfología celular
Pruebas bioquímicas.
Susceptibilidad a los antimicrobianos
Debido a la ocurrencia de enterococcus
vancomicina resistente como un importante
problema a nivel mundial, los hospitales deben
considerar la instalación de programas de
detección.
 Resistencia Intrínseca
antimicrobiana Extrínseca

Características codificadas
cromosómicamente de
manera natural o inherente, Intrínseca
presente en todos o la
mayoría de los enterococos.
 Es más variable y resulta tanto de
mutaciones o adquisición de
Adquirida nuevos determinantes genéticos
encontrados en plásmidos o
transposones.

La resistencia intrínseca entre los

enterococos involucra dos grupos
principales de agentes antimicrobianos:
aminoglicósidos y β-lactámicos
Además de la resistencia intrínsica, los enterococos han
adquirido diferentes determinantes genéticos que le
confieren resistencia a varios antibióticos: cloranfenicol,
tetraciclina, macrólidos, lincosamidas y quinolonas.

La aparición de resistencia a vancomicina como un

problema terapéutico fue documentado por primera vez
en Europa y EEUU. A partir de allí, el aislamiento de
VRE ha sido continuamente reportado en diversas
localizaciones geográficas.
 Seis tipos de resistencia a glicopéptidos han
sido descritas entre los enterococos,
incluyendo tres fenotipos comunes.

Fenotipo Alto nivel de resistencia inducible

a vancomicina y teicoplanina,
VanA
codificado por el gen vanA
 Niveles moderados a altos de
Fenotipo resistencia inducible a vancomicina
VanB solamente, codificado por los genes
vanB (vanB1 y vanB2)

Fenotipo Confiere bajo nivel de resistencia

VanC no inducible a vancomicina (vanC)

E. gallinarum y E. casseliflavus
Fenotipo HLR a vancomicina y variable
VanD y resistencia a teicoplanina. Ha sido
solamente encontrado en E. faecium.
VanG

Fenotipo Resistencia intermedia a

vacomicina y susceptible a
VanE
teicoplanina (E. faecalis)
 PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD PARA
ENTEROCOCCUS. CLSI 2011

GRUPO A GRUPO B GRUPO U GRUPO I

Ensayo primario y Ensayo primario Suplementario solamente GRUPO O En
reporte Reporte selectivo para orina investigación
Ampicilina (1) Vancomicina (3) Tetraciclina (5) Eritromicina (4) Teicoplanina
Penicilina (2) Quinupristin- Ciprofloxacina Doxiciclina
dalfopristin (9)
Linezolid Levofloxacina Minocicliina
Norfloxacina Gatifloxacina (6)
Nitrofurantoína Rifampicina (7)
Fosfomicina (8)
Cloranfenicol (4)

1. Ampicilina es la clase representativa para ampicilina y amoxicilina. El resultado de ampicilina puede ser utilizado para predecir susceptibilidad a amoxicilina-ácido
clavulánico, ampicilina-sulbactam, piperacilina y piperacilina-tazobactam entre enterococos no productores de ß-lactamasa. La susceptibilidad a ampicilina puede ser
utilizada para predecir suceptibilidad a imipenem en el caso de E. faecalis.
2. Los Enterococcus susceptibles a penicilina son susceptibles a ampicilina, amoxicilina, ampicilina-sulbactam, amoxicilina-clavulanato, piperacilina y piperacilina-tazobactam
para enterococos no productores de ß-lactamasa. Sin embargo, los enterococs susceptibles a ampicilina no pueden asumirse susceptibles a penicilina. Si se requiere el
resultado de penicilina, se requiere su ensayo.
3. Las placas debe incubarse 24 horas para asegurar la detección de resistencia.
4. No reportar rutinariamente en aislamientos del tracto urinario.
5. Organismos sensibles a tetraciclina son también sensibles a Doxiciclina y Minociclina. Sin embargo, algunos organismos que son “I” o “R” a Te pueden ser “S” a
Doxycyclina, minocyclina o ambos.
6. Este criterio interpretativo aplica solo para aislamientos del tracto urinario.
7. No debe ser utilizado sólo para terapia antimicrobiana.
8. Indicado solamente frente a aislamientos de E. faecalis del tracto urinario.
9. Para reportar en E. faecium vancomicina resistente.
Infecciones enterococcicas sistémicas son tratadas
comúnmente con β-lactámicos o un glucopéptido
(vancomicina) y un aminoglicósido (gentamicina o
streptomicina).

Estos agentes actúan sinergísticamente para

incrementar el efecto bactericida.
Cuando una cepa de Enterococcus es resistente a un
agente activo frente a la pared celular o tiene
resistencia de alto nivel (HLR) a aminoglicósidos no
hay sinergismo y la combinación terapéutica no
provee un efecto bactericida.

Es importante determinar la susceptibilidad

tanto a los aminoglicósidos como a los
agentes activos frente a la pared celular.
 ENSAYOS PARA DETECCIÓN DE ALTA RESISTENCIA A AMINOGLICÓSIDOS Y
RESISTENCIA A VANCOMICINA EN ENTEROCOCCUS. CLSI 2011.

Resistencia a
Ensayo HLAR Gentamicina HLAR Streptomicina
Vancomicina
Método Difusión Microdilución Dilución en Difusión Microdilu Dilución en Dilución en agar
en disco en caldo agar en disco ción en agar
caldo
Medio MH Caldo BHI Agar BHI MH Caldo Agar BHI Agar BHI
BHI
Concentración 120µg Gentamicina Gentamicina Strepto Strepto Strepto Vancomicina 6
antimicrobiana 500 µg/mL 500 µg/mL 300µg 1000 2000 µg/mL
µg/mL µg/mL