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3-Princípio
A análise do líquor e líquidos biológicos consistem na identificação de suas
características físicas, citológicas, bioquímicas, imunológicas, bacteriológicas e
micológicas.
4-Amostra
4.1 Preparo do Paciente
NA
4.2 Tipos de amostra
Líquor, Líquido pleural, líquido ascítico, líquido sinovial.
5-Produto utilizado
6-Outros insumos
. Câmara de Fuchs-Rosenthal ou Neubauer
Lamínulas para câmara de contagem
Pipetas automáticas
Tubos de ensaio
Microscópio
7-Equipamentos
Microscópio
7.1Manutenção
NA
7.2Calibração
NA
8-Controle de qualidade
Duplo cego
8.1Materiais
NA
8.4Critérios de aceitação
NA
3
9-Procedimentos
9.1Manual
▪ Observar a aparência (aspecto e cor) do líquido antes e após a centrifugação. Se o
aspecto e a cor forem diferentes após centrifugação, referir os dois resultados.
▪ Quanto à aparência a amostra pode ser cristalino, opaco, turvo, leitoso,
sanguinolento, xantocrômico (termo usado para descrever o sobrenadante do LCR cuja
coloração é rosada, laranja ou amarela).
▪Homogeneizar bem a amostra antes de colocar na câmera de contagem ou fazer
diluições. Usar pipetas calibradas para fazer diluições. Usar câmera de contagem e
lamínulas limpas, desengorduradas e secas.
▪ A amostra deve ser centrifugada durante 5 a 10 minutos em baixa rotação; separar
o sobrenadante para as análises bioquímicas e imunológicas. Preparar duas lâminas
com o sedimento suspenso. Quando a amostra tiver muitas células prepararem duas
lâminas do sedimento e duas da amostra pura.
Câmera de Fuchs-Rosenthal
A câmera de Fuchs-Rosenthal apresenta uma área de contagem quadriculada que
consiste de um quadrado de 4mm x 4mm. Esta área de 16mm² está dividida em 16
quadrados de 1mm². Cada quadrado de 1mm² está subidividido em 16 pequenos
quadrados de 1/16mm². A lamínula é posicionada para que cubra ambas as áreas
quadriculadas da câmera de contagem. A lamínula confina o líquido na câmera e regula
a profundidade do líquido. A profundidade é 0,2mm. O volume é 3,2 (16mm² x 0,2mm).
Câmera Neubauer
A câmera de Neubauer consiste de uma lâmina retangular de vidro espessa que tem
duas plataformas centrais elevadas, rodeadas por depressões em 3 lados. Cada
plataforma elevada contém uma área de contagem quadriculada, que consiste de um
quadrado grande de três mm x.
3 mm. Esta área de 9mm² está dividida em nove quadrados de 1mm². Quatro dos
quadrados laterais se 1mm² estarão divididos cada um em 16 quadrados de 1/16mm². O
quadrado central de 1mm² está dividido em 25 quadrados de 1/25mm², sendo cada um
destes subdivididos em 16 quadradinhos de 1/400mm². A lamínula é posicionada para
que cubra ambas as áreas
Quadriculadas da câmera de contagem. A lamínula comprime o líquido na câmera e
regula a profundidade do líquido. A profundidade do líquido na câmera é 0,1mm.
9.2Automatizado
Não é possível utilizar contadores eletrônicos no LCR devido às variações nas
contagens de fundo e à possibilidade de elevar falsamente contagens normais ou
moderadamente altas.
10-Cálculos
Câmara de Fuchs-Rosenthal
Se toda a área quadriculada for contada sem diluição da amostra, dividir o número
final de células contadas por 3,2.
11-Resultados
11.1Unidade de medida
mm³ (µL)
11.2Valores de referência
Líquor
Celularidade:
Adultos: 0 a 5 leucócitos /µL.
RN: 0 a 30 leucócitos /µL
Líquido peritoneal(ascítico)
Celularidade:
Eritrócitos: < 100.000 /µL. Contagens mais altas podem indicar trauma hemorrágico.
Leucócitos: < 300/ µL
Líquido pericárdico
Celularidade:
Eritrócitos: úteis nas efusões hemorrágicas
Leucócitos: < 1000 / µL
5
Líquido Sinovial
Celularidade:
Eritrócitos: 0 a 2000/ µL
Leucócitos: < 200/ µL
Líquido pleural
Celularidade:
Transudato: < 500/ µL
Exsudato: > 500/ µL
11.3Valores críticos
Contagem de células elevadas, analisarem a clínica e exames correlacionados:
cultura, bacterioscopia, pesquisa de fungos, reações imunológicas.
13-Limitações do procedimento
13.1Linearidade
NA
13.2Sensibilidade
NA
13.2Especificidade
NA
13.4Interferências
Presença de coágulos
14-Significado clínico
Meningites
Meningites bacterianas
▪ Leucócitos até mais de 15000/ µL
▪ Presença maciça de neutrófilos (Neisseria meningitidis-diplococos intracelulares)
▪ Proteínas de 100 – 500 mg/ dL
▪ Glicose inferior a 40mg/ dL
▪ Gram: identifica agente em 70 a 80% dos casos
▪ Cultura: identifica em 80%
Meningites virais
▪ Leucócitos geralmente < 1000/ / µL
▪ Presença de linfócitos ou monócitos
▪ Início neutro filia, após 6 a 12 horas: linfócitos.
▪ Proteínas normais ou levemente aumentadas (80-200 mg/dL)
▪ Glicose normal
Meningite tuberculosa
▪ Leucócitos 50-500/ / µL
▪ Linfo-monócitos, às vezes, linfócitos reacionais.
▪ Início neutrófilos
▪ Proteínas 100- 500 mg /dL
▪ Glicose baixa até < 20 mg/dL
▪ ADA aumentada
▪ Diagnóstico definitivo: cultura
▪ Presença de coágulo
7
Meningite sifilítica
▪ Leucócitos 100- 1000/ µL
▪ Predomínio de linfócitos
▪ Proteínas moderadamente elevadas < 200mg/dL
▪ Glicose diminuída
▪ VDRL e FTA_ABS usualmente positivos
Meningite fúngica
▪ Pleocitose linfocítica de até mais das 1000/µL
▪ Também pode ocorrer contagem normal
▪ Início pode ter polimorfo nucleares
▪ Aspergillus produz reação neutrofilíca
▪ Na câmera de Fuchs obeserva-se presença de fungos
▪ Na lâmina corada grupamentos escuros
▪ Proteínas inicialmente normais, depois até 200 mg/dL
▪ Glicose normal ou diminuída, raramente < 10mg/dL
▪ Coloração pela tinta da china revela cápsula do criptococo
Líquido Pleural
A contagem global de células tem valor limitado no auxílio do diagnóstico
Diferencial dos derrames pleurais. Valores acima de 1.000 células são encontrados nos
exudatos. A citologia específica apresenta como valores de referência: polimorfo
nucleares 25% e mononucleares 75%.
O predomínio de neutrófilos acontece em 90% dos casos de pneumonia, infarto do
miocárdio e pancreatite. Apenas 10% dos transuda tos apresentam predomínio de
polimorfo nuclear. O predomínio de linfócitos ocorre nas inflamações crônicas,
tuberculose, lúpus eritema toso sistêmico, linfoma, uremia e artrite reumatóide. A
eosinofilia acontece em processos inespecíficos como: pneumotórax, traumas, derrames
pós-operatórios, infarto pulmonar e insuficiência cardíaca congestiva. Aparecem também,
em doenças parasitárias, infecções por fungos e síndromes de hipersensibilidade.
Líquido Ascítico
É um filtrado do plasma que se forma por um aumento da pressão hidrostática
capilar ou diminuição da pressão oncótica do plasma (Transuda tos) e por aumento da
permeabilidade capilar ou diminuição da reabsorção (Exudatos). A presença de transuda
tos e exsuda tos ocorrem:
Líquido Sinovial
O líquido sinovial normal não apresenta hemácias e encontra-se no máximo 200
leucócitos por mm³. O diferencial de leucócitos apresenta 20% de polimorfo nucleares e
os outros 80% de mononucleares: monócitos,
15-Referência Bibliográfica