MEIOS DE CULTURA - MEIOS SÓLIDOS

Gelose Simples (Columbia)

Isolamento de bactérias comuns
Contém uma mistura de peptonas particularmente adaptada à cultura dos microrganismos mais
frequentes em amostras humanas.
Pode tornar-se enriquecida pela adição de sangue (de carneiro ou de cavalo) permitindo o crescimento
de bactérias mais exigentes.
Pode tornar-se selectiva pela adição de misturas antibióticas.

Gelose Sangue
Isolamento de bactérias mais exigentes
É uma gelose simples adicionada com sangue de carneiro ou cavalo.
Permite o crescimento de bactérias mais exigentes e permite a leitura da hemólise.

Gelose Chocolate
Isolamento de Haemophilus e Neisseria
É uma gelose-sangue aquecida para provocar a hemólise dos glóbulos vermelhos que assim libertam
factores intracelulares fundamentais para o crescimento das bactérias do género Haemophilus - como por
exemplo o factor V (NAD). Chama-se chocolate porque a placa fica com uma cor acastanhada igual à do
chocolate.

Gelose Chocolate-Haemophilus
Isolamento selectivo de Haemophilus
É um meio selectivo para isolamento de bactérias do género Haemophilus.
O isolamento de Haemophilus a partir de produtos patológicos provenientes das vias respiratórias ou das
genitais, é frequentemente difícil devido à presença de uma flora associada importante.
A gelose Chocolate-Haemophilus é composta de uma base nutritiva enriquecida de factores X (hemina) e
V (NAD) produzidos pela hemoglobina e pelo PolyViteX.
A selectividade é obtida pela associação de antibióticos (Bacitracina e Vancomicina inibem a maioria das
bactérias Gram+) e antifúngicos (Anfotericina B inibe leveduras).

Gelose Chocolate PolyviteX VCAT

Isolamento selectivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis
A gelose Chocolate PolyViteX VCAT descrita por Thayer e Martin é um meio selectivo para o isolamento
de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis a partir de amostras polimicrobianas.
É composta por uma base nutritiva enriquecida em factores X (hemina) e V (NAD) produzidos pela
hemoglobina e pelo PolyViteX.
A selectividade é obtida pela associação de antibióticos e de antifúngicos (VCAT= Vancomicina, Colistina,
Anfotericina B, Trimetoprim-sulfametoxazole) que permitem inibir a maior parte das bactérias e das
leveduras existentes nas amostras.

Gelose Tripcase Soja

Isolamento de microrganismos não exigentes
Meio de isolamento que se destina aos microrganismos que não apresentam exigências específicas para
o seu desenvolvimento.
Pode ser utilizada sozinha ou adicionada com sangue (neste caso permitindo o crescimento de bactérias
mais exigentes e a leitura da hemólise)

Gelose Mac Conkey

Isolamento selectivo e diferenciação de Enterobactereaceae
A gelose de Mac Conkey contém lactose e permite evidenciar a fermentação da lactose pela viragem do
vermelho neutro (indicador de pH).
Os microrganismos que fermentam a lactose originam colónias rosas ou vermelhas. Os microrganismos
que não fermentam a lactose originam colónias incolores ou ligeiramente bege.
A selectividade é proporcionada pelos sais biliares e cristal de violeta que impedem o crescimento das
bactérias Gram+ (excepto Enterococcus).

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Gelose SS
Isolamento selectivo e diferenciação de Salmonella e Shigella
É um meio de isolamento selectivo e de diferenciação destinado à pesquisa de Salmonella e Shigella a
partir de amostras de fezes. Permite evidenciar colónias que fermentam a lactose e que reduzem o
tiosulfato por produção de H2S.
Os microrganismos que fermentam a lactose originam colónias rosas, os que não fermentam originam
colónias incolores.
Os microrganismos que produzem H2S reduzem o tiosulfato e originam colónias com centro negro.
A presença de colónias incolores ou fracamente coloridas com ou sem centro negro representa uma forte
prsunção de Salmonella ou Shigella.
A inibição dos microrganismos Gram+ é obtida pelos sais biliares e corantes.

Gelose CLED
Isolamento de microrganismos presentes na urina
O CLED (Cistina, Lactose, Electrólito-deficiente) é recomendado para o isolamento de microrganismos
causadores de infecção urinária. Também permite diferenciar os lacto-fermentadores dos que o não são.
Os microrganismos lactose-fermentadores originam colónias amarelas ou amarelo-esverdeadas por
acidificação do meio.
Os que não fermentam originam colónias verdes, azuis ou incolores.
A baixa concentração de electrólitos impede o swarming do Proteus.

Gelose Yersinia (CIN)

Isolamento selectivo de Yersinia
Meio contendo manitol e Vermelho neutro(indicador de pH) permitindo a diferenciação das bactérias do
género Yersinia pela coloração das colónias (rosa escuro a vermelho).
A presença de colato, desoxicolato, cristal violeta, Irgasan e antibióticos inibe o crescimento das bactérias
Gram+ e da maioria das Gram -.
CIN=Cefsulodina, Irgasan, Novobiocina

Meio de Kligler
Diferenciação de Enterobacteriáceas
Permite detectar a fermentação da glucose e da lactose, a produção de sulfato de hidrogéhio (H2S) e de
gás.
Este meio é utilizado em tubos com a gelose inclinada. A leitura é efectuada da seguinte forma:
Ao nível da parte inferior:
-A fermentação da glucose, presente em fraca concentração, traduz-se por uma acidificação que provoca
viragem do indicador vermelho de fenol para amarelo, ficando o mio amarelo (inicialmente é vermelho);
-A produção de gás traduz-se na presença de bolhas de ar que podem provocar a fragmentação da
gelose;
-A produção de H2S na presença de citrato de ferro provoca a formação de um precipitado negro na
gelose.
Ao nível da parte superior inclinada:
-A fermentação da lactose, presente em forte concentração, provoca uma acidificação e viragem do
indicador para amarelo.

Gelose Campylosel
Isolamento selectivo para Campylobacter
É um meio selectivo utilizado para o isolamento de Campylobacter a partir de amostras de fezes.
É um meio básico contendo sangue.
A selectividade é conferida por uma mistura de antibióticos: Cefoperazone, Vancomicina e Anfotericina B
que inibem a maioria das bactérias Gram+ , Gram- e leveduras.

Gelose Columbia ANC + Sangue Carneiro

Isolamento selectivo de bactérias Gram+
Meio rico que permite o crescimento de bactérias Gram+.
As bactérias Gram- e o género Bacillus são inibibas por uma mistura de antibióticos: ácido nalidíxico e

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colimicina.
Permite detecção do padrão hemolítico das colónias.

Gelose Chapman (MAS)

Isolamento selectivo e diferenciação de estafilococos
O meio contém elevado teor em cloreto de sódio que limita o crescimento de outros microrganismos.
O meio contém manitol. Os estafilococos que fermentam o manitol (como o Staphylococcus aureus)
originam colónias amarelas por viragem do indicador de pH (vermelho neutro). Os que não fermentam o
manitol originam colónias rosa.

Gelose DNASE
Identificação de Staphylococcus aureus
Meio que tem DNA incorporado.
Permite identificar estirpes (Staphylococcus aureus) produtoras da enzima DNAse a qual degrada o DNA
do meio (reacção revelada por ácido clorídrico).

Gelose Wilkins-Chalgren
Isolamento de anaeróbios
Meio contendo vários suplementos nutritivos (sem sangue) que permite o crescimento dos anaeróbios
importantes em patologia humana.

Gelose BCYE-L
Isolamento de Legionella
BCYE-L=Buffered (tamponado), Charcoal (carvão), Yeast Extract, L-cisteína
O meio de BCYE com L-cisteina é utilizado para sementeira de amostras suspeitas de conterem
Legionella. A L-cisteína é um amino-ácido indispensável para o crescimento da bactéria.
O carvão activado permite adsorver os elementos tóxicos presentes no extracto de levedura.
O tampão permite estabilizar o pH do meio fundamental para o crescimento da bactéria.
Este meio pode ser adicionado com antibióticos e utiliza-se na sementeira de amostras com flora
saprófita. A mistura antibiótica inibirá o crescimento das bactérias da flora saprófita.

Gelose Sabouraud
Isolamento de fungos
Permite o isolamento de todo o tipo de fungos (leveduras e bolores).

Gelose Sabouraud Cloranfenicol-Gentamicina

Isolamento selectivo de fungos
Permite o isolamento de todo o tipo de fungos (leveduras e bolores).
Utiliza-se para semear amostras contaminadas com flora bacteriana. A mistura antibiótica permite inibir a
maioria dos bactérias gram+ e Gram-.

Meio de Lowenstein-Jensen (LJ)

Isolamento de micobactérias
Meio enriquecido com a presença de ovo, asparagina e fécula para favorecer o crescimento das
micobactérias. Não contém agar. O estado sólido do meio é conseguido por coagulação das proteínas do
ovo.
Tem um indicador de pH: Verde de Malaquite

Meio de Loeffler
Isolamento de Corynebacterium
Meio contendo soro coagulado que estimula o rápido crescimento das bactérias do género
Corynebacterium, particularmente o Corynebacterium diphtheriae desenvolvendo este as granulações
metacromáticas características. As outras bactérias têm geralmente um crescimento mais lento.

Meio de Triptose
Isolamento de Brucella
Meio não selectivo composto por mistura contendo elevada quantidade de proteínas digeridas pela

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tripsina.

Meio Teste Haemophilus (HTM)

Estudo da sensibilidade aos antimicrobianos para estirpes de Haemophilus
Meio contendo suplementos de crescimento mas com baixa concentração de antagonistas dos
amtimicrobianos (normalmente presentes nos meios). Permite uma leitura dos halos de inibição sem
grandes interferências mesmo para o Trimetoprim-sulfametoxazole.

Gelose Mueller Hinton (MH)

Estudo da sensibilidade aos antibióticos
Destina-se à realização do antibiograma por técnica de difusão.
Permite o crescimento das bactérias não exigentes garantindo um mínimo de interferência dos
componentes do meio no resultado do antibiograma.
A sua concentração em iões bivalentes é ajustada para assegurar uma precisão mais correcta na
determinação da sensibilidade das Pseudomonas aos aminoglicosídeos e às tetraciclinas.
O seu baixo teor em timina-timidina (elementos inibidores da actividade das sulfamidas) diminui os
fenómenos de crescimento à volta dos discos e permite uma determinação precisa dos diâmetros de
inibição.

Portagerm
Meio de transporte – mantém viabilidade de aeróbios e anaeróbios
Meio sólido para transporte de amostras.
O agar do meio inibe a difusão de oxigénio presente quando se insere a amostra. Agentes redutores
presentes no meio combinam-se com o oxigénio livre mantendo assim a atmosfera de anaerobiose.
Tem um indicador (resazurina) que indica a presença ou ausência de oxigénio:
Meio de cor azul = presença de oxigénio (bactérias anaeróbias já inviáveis)
Meio incolor = ausência de oxigénio.

Meio de Amies com carvão

Meio de transporte
Meio tamponado e com carvão que permite a sobrevivência de bactérias fastidiosas como a Neisseria
gonorrhoeae .
Utilizado no transporte de amostras para pesquisa de Neisseria gonorrhoeae (exsudados vaginais,
orofaríngeos, rectais).

Meio de Cary-Blair
Meio de transporte
Meio destinado a aumentar a sobrevivência das bactérias entéricas utilizado no transporte de amostras
fecais (fezes, zaragatoas rectais) para pesquisa de bactérias patogénicas entéricas (particularmente
importante na sobrevivência de Campylobacter).
Contém um baixo conteúdo nutritivo que permite a sobrevivência das bactérias sem multiplicação;
tioglicolato que mantém um baixo potencial de oxidação-redução; e um elevado pH que minimiza a
destruição das bactérias quando se produz ácido pelo metabolismo normal das bactérias.

MEIOS DE CULTURA - MEIOS LÍQUIDOS

Meio de Todd-Hewitt
Enriquecimento de Streptococcus
Caldo glicosado e tamponado que permite o crescimento abundante de bactérias do género
Streptococcus.
Pode ser enriquecido com sangue.

Meio de Tioglicolato
Enriquecimento de aeróbios, anaeróbios e microaerófilos
É um caldo de enriquecimento onde se desenvolvem as bactérias aeróbias, anaeróbias e microaerófilas.

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É utilizado para semear amostras biológicas cujos microrganismos possam estar presentes em baixas
concentraões.
É supérfluo incubar os tubos em anaerobiose.
Também se utiliza para controlo de esterilidade.

Meio de Carne
Enriquecimento de aeróbios e anaeróbios
Caldo peptonado contendo carne de coração cozida.
Permite o crescimento de aeróbios e anaeróbios.

Meio de Selenito (meio de Leifson)

Caldo de enriquecimento de Salmonella
Caldo contendo selenito de sódio destinando-se ao enriquecimento de Salmonella a partir das fezes.
A sua composição favorece o crescimento da Salmonella no meio de uma flora polimicrobiana.

Meio de Tetrationato (meio de Muller-Kauffmann)

Caldo de enriquecimento de Salmonella
Caldo contendo tetrationato, bílis e verde brilhante que inibem o crescimento da maioria das bactérias
entéricas. Destina-se ao enriquecimento de Salmonella a partir das fezes.
A sua composição favorece o crescimento da Salmonella no meio de uma flora polimicrobiana.

Água de Peptona Alcalina

Enriquecimento de Vibrio cholerae
Utiliza-se na sementeira de fezes quando se suspeita de cólera.
É um caldo composto por água peptonada contendo 10% cloreto de sódio e com pH hiperalcalino (8.8).
Permite o crescimento de vibrios (e também plesiomonas e aeromonas) inibindo o seu pH a maioria das
outras bactérias entéricas.

Meio de Ureia-Indol
Detecção dos caracteres Urease, Indol e TDA
Este meio permite detectar nas enterobactérias a presença de urease, de triptofano-desaminase (TODA)
e a produção de indol.
- As bactérias que produzem urease degradam a ureia do meio, alcalinizando-o o que provoca a viragem
do indicador de pH (vermelho de fenol) a vermelho violeta.
- O meio contém L-triptofano:
a sua degradação pelas bactérias que possuem uma triptofanase é seguida de uma produção de indol,
revelada pelo reagente de Kovacs: em caso de reacção indol positiva, um anel vermelho aparece à
superfície do meio;
a sua degradação pelas bactérias que possuem uma triptofano-desaminase é seguida da produção de
ácido indol-pirúvico revelada por uma solução de percloreto de ferro que dá cor castanha ao meio.

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Bibliografia
• Manual de meios de cultura e suplementos, BioMérieux, 2003
• N. Marchal. Les milieux de culture pour lísolement et lídentification biochimique des bactéries, Doin
Editeurs, 1982, Paris
• R. Cruickshank. Microbiologia Médica, I volume, 4ª edição, ed Fundação Calouste Gulbenkian,
• Murray, P.R. 1999, Manual of Clinical Microbiology, 7th ed. American society for Microbiology, Washington,
D.C.