Suplemento al1 N

Nectopsyche
Neotropical Trichoptera Newsletter
Recolección y Conservación de Trichoptera, con Énfasis en el Material
Montado
Roger J. Blahnik y Ralph W. Holzenthal
Traducido en Español por Lourdes Chamorro-Lacayo y Rufino Vieira-Lanero
University of Minnesota Insect Collection

Introducción Ventajas de Montar Material en Alfileres

Probablemente la mayoría de sistemáticos Una de las ventajas de trabajar con Tricópteros
especializados en Tricópteros en todo el mundo capturan montados en alfileres es que sus alas se conservan
y conservan los imagos de este orden en alcohol. Esto se perfectamente; éstas están cubiertas con pelos y los colores y
debe -en parte- a la tradición de capturar insectos adultos los diseños de estos pelos pueden ser útiles como caracteres
de cuerpo blando, particularmente los acuáticos como taxonómicos, tanto como lo son los diseños de escamas en
Ephemeroptera, Plecoptera y Trichoptera, en alcohol o las alas de las mariposas. Estos pelos se pierden fácilmente
aguardiente, y las tradiciones son difíciles de cambiar. Los en los ejemplares que han estado en alcohol durante mucho
estudiantes a menudo adoptan las prácticas de sus mentores tiempo. Además, los pelos o sedas de varias partes del cuerpo
o instructores y así se perpetúan estas tradiciones. Los pueden variar considerablemente en tamaño, longitud
trabajadores que se especializan en Ephemeroptera y y textura; a veces poseen funciones especiales, como las
Plecoptera continúan recolectando ejemplares en alcohol, “sedas en forma de brocha” de Lepidóptera, que sirven para
pero los imagos de Trichoptera se preservan mucho mejor dispersar feromonas. Sedas modificadas de este tipo se hallan
en alfileres que los miembros de estos otros órdenes y uno frecuentemente asociadas con glándulas abdominales, pero
de los objetivos de este artículo es animar a más sistemáticos también pueden
de Tricópteros, especialmente a los nuevos Tricopterólogos, estar situadas
a montar en alfileres por lo menos parte de sus colecciones. en la cabeza,
La mayor parte de los métodos discutidos aquí siguen la tórax o en las
tradición derivada de los métodos de conservación del alas. La pérdida
Dr. Oliver S. Flint, Jr., actualmente Conservador Emérito de estas sedas en
del Smithsonian Institution, y todavía una autoridad alcohol equivale
mundial en los Tricópteros neotropicales. Estos métodos a la pérdida de
fueron adoptados por Ralph Holzenthal y sus estudiantes i n f o r m a c i ó n
de la Universidad de Minnesota y han sido modificados t a x o n ó m i c a
gradualmente y mejorados con el transcurso de los años. y filogenética.
Probablemente los métodos continuarán evolucionando e, También, los
indudablemente, habrá mejores maneras de hacer las cosas. e s p e c í m e n e s
Tenemos la esperanza de que este boletín de noticias sirva que han estado Una caja de Tricópteros montados
también como foro para intercambiar ideas y técnicas. en alcohol por bien conservada y oraganizada.

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mucho tiempo pierden, gradualmente, en la solución de inventariar el conjunto de la fauna de Tricópteros de una
almacenaje sus grasas corporales y proteínas (y el ADN). región concreta, deberán ser utilizados todos lo métodos
Además se pierde la pigmentación. Finalmente, lo que queda apropiados, incluyendo, pero no limitando, el uso de sábana
es un “fantasma” del exoesqueleto cuticular del insecto y se y luces, trampas de luz, trampas de alcohol, trampas Malaise,
vuelve frágil, de forma que a menudo el espécimen pierde aspirador, redes de mano, trampas de emergencia, cría, etc.
sus antenas y diversas partes de sus apéndices. Aunque los Sin embargo, para insectos que serán montados en alfileres
insectos en alfileres son muy frágiles y hay determinadas técnicas que realzan
tienen que ser manipulados con cautela, el valor de los especímenes y que
estos se preservan mejor a largo plazo. facilitarán su manipulación después de
Podemos discutir sobre la diferencia que sean montados.
en el precio monetario de mantener
especímenes en viales o en los alfileres
(el precio de los viales, los tapones y Captura en el Campo de
el alcohol vs. el precio de los alfileres,
las cajas para las colecciones y los Ejemplares que serán Montados
armarios para almacenaje, por ejemplo) Un método estándar de captura
o los potenciales peligros asociados con de Tricópteros que serán montadas
cada método (evaporación del alcohol Recolectando a las orillas del Río es el uso de “luz negra” (ultravioleta
y almacenaje de líquidos inflamables Grande de Orosí, Parque Nacional o UV) y una sábana colgada cerca de
Tapantí, Cartago, Costa Rica. Observe
vs. el daño causado por Derméstidos, el toldo y el uso de la luz de vapor de un río. La mayoría de las Tricópteros
el problema de la humedad y la mercurio (que requiere un generador emergen y empiezan a volar durante
exposición a la luz, por ejemplo). Sin portátil) además de luces negras y el crepúsculo o un poco antes de que
embargo, casi 20 años de experiencia blancas estándar. oscurezca, y continúan volando a la
nos convencen de que la calidad del sábana 2 a 3 horas después de la puesta
material montado es superior a la del material preservado del sol. Después la actividad es esporádica, pero los imagos
en alcohol. Especímenes que han estado montados durante mantendrán un nivel bajo de actividad toda la noche, con un
100 años o más a menudo retienen sus características segundo pico un poco antes de la aurora. Como regla general,
maravillosamente. Este tipo de preservación extendida es hemos observado que la gran mayoría de la diversidad se
especialmente útil para especímenes que eventualmente captura durante las primeras horas después del ocaso, con
serán holotipos o paratipos. Cuando hay diferentes opciones poca distribución temporal en diversidad, por lo menos en
disponibles, el material montado debería ser el preferido el Neotrópico. ¡Sin embargo, el investigador debe observar
cuando se va a designar un holotipo. Una advertencia, sin esto personalmente, ya que los Tricópteros no saben leer las
embargo, es que si un Tricóptero es colectado en alcohol no reglas! Por otro lado, es crucial que la sábana esté colgada
deberá ser montado en alfiler posteriormente. Almacenar los y las luces encendidas por lo menos unas horas antes de
Tricópteros en pliegos de papel o sobres, una técnica usada que oscurezca ya que algunas especies, particularmente
generalmente en el campo con los Lepidóptera, resulta en los hidroptílidos, llegan casi en el momento en que uno
este caso inefectiva. enciende las luces, y desaparecen mientras otros Tricópteros
Admitimos que existen ciertas ventajas al trabajar continúan llegando.
con especímenes en alcohol (especialmente con aquellos que El método para suspender la sábana es intuitivo.
no son muy antiguos), por ejemplo la facilidad al manipular Se extiende una cuerda entre dos soportes (normalmente
ciertas partes mientras se hacen observaciones, y la habilidad dos árboles) de
de observar las verrugas de sedas de la cabeza y el tórax, donde se puede
que suelen dañarse cuando los especímenes se montan. suspender la
También, cuando se hacen grandes proyectos de inventario, sábana. Nosotros
el uso de trampas de alcohol tienen más probabilidades de también usamos
capturar más diversidad total que los métodos que dependen pinzas para la
de recolecciones hechas individualmente con frascos de ropa o clips
cianuro. No animamos a los tricopterólogos a que abandonen grandes para
totalmente el uso de recolectar especímenes en alcohol. colgar la sábana,
Nosotros hemos continuado recogiendo especímenes en y para mantenerla
alcohol y colocamos rutinariamente trampas de alcohol o tirante usamos
de tipo Malaise como métodos complementarios de captura, gomas elásticas Roger Blahnik armando una sábana
incluso en situaciones en las que también recogemos fijadas al suelo y sobre el Río Campo Belo, Parque Na-
especímenes que serán montados. De hecho, para amarradas a las cional Itatiaia, Río de Janeiro, Brasil.

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esquinas inferiores de la sábana. La Otros Métodos de Captura
energía para las luces proviene de una Aspirador
batería de 12 voltios de un automóvil o Un método útil para recolectar
de una motocicleta o de un generador de la sábana un gran número de
de gasolina portátil. Habrá que buscar hidroptílidos u otro tipo de Tricópteros
algún sistema para recargar la batería. pequeños es con el delicado uso
Necesitaremos algún tipo de apoyo para de un aspirador. Este método es
suspender la luz y evitar el contacto especialmente útil para recolectar
con la sábana, ya que proveerá una individuos que están descansando en la
mejor iluminación y facilitará la vegetación y son encontrados mientras
captura; nosotros usamos un palito se colecta durante el día. Un problema
bifurcado ajustado a la sábana y al cable que se debe evitar es el de dejar
de la luz con un clip. Además de la luz
Henrique Paprocki usando un aspira- muchos ejemplares en el contenedor
ultravioleta, también usamos un tubo
dor para recolectar Byrsopteryx (Hy- del aspirador mientras uno continua
fluorescente estándar que provee luz droptilidae) de una roca en el Río So- recogiendo más ejemplares. Cada vez
visible, iluminando los alrededores, lo berbo, Parque Serra dos Órgãos, Río que se aspira por el tubo, se produce
que ayuda a ver el área donde uno esta de Janeiro, Brasil. un vórtice en el contenedor y en poco
colectando y a localizar los insectos tiempo las alas pierden todos sus pelos.
que llegan a la sábana. El tubo de luz fluorescente también Este método también presenta un problema para aquellos
p r o p o r c i o n a que tienen alergia a los pelos de los Tricópteros, ya que éstos
una porción del entran en las vías respiratorias al aspirar. Es importante
espectro electro- transferir frecuentemente los especímenes del contenedor
magnético que del aspirador a un frasco de cianuro. Si el contenedor del
puede atraer varias aspirador es suficientemente pequeño como para caber
especies. Un toldo dentro del frasco de cianuro, podemos matar a la vez todas
suspendido sobre las capturas del aspirador introduciéndolas, dentro del
la sábana protege contenedor, en el frasco de cianuro, mientras utilizamos un
de la lluvia y segundo contenedor para recoger más ejemplares.
ayuda a mantener Pan Traps
la sábana seca, En el caso de los hidroptílidos (también conocidos
ya que los como “micros”, por su pequeño tamaño) se recomienda de
T r i c ó p t e r o s forma especial ampliar las capturas hechas sobre la sábana
c o n t i n u a r á n con otros métodos, como el uso de pan traps con alcohol,
llegando durante especialmente en sitios donde éstos son muy abundantes. Esto
garúas y lluvias es porque los “micros” usualmente aparecen en la sábana solo
leves. No obstante, durante un corto periodo de tiempo después de la puesta del
es importante que sol y el uso de estas trampas con alcohol garantiza que especies
la sábana no se que pueden ser pasadas por alto en la sábana serán colectadas.
moje porque los Además, si estas trampas se dejan funcionando durante toda
Aysha Prather recolectando
Tricópteros de una sábana con la Tricópteros y el la noche recolectarán especies que tienen periodos de vuelo
ayuda de luces negra (ulta-violeta). interior de los inusuales. Aunque
frascos de cianuro es necesario
se humedecerán, mojando y arruinando el espécimen (al r e c o l e c t a r
menos si lo piensa montar). La manera mejor y más efectiva h i d r o p t í l i d o s
de capturar Tricópteros es directamente de la sábana, en alcohol para
usando frascos de cianuro (KCN). Cuando un Tricóptero capturar la
llega a la sábana, un simple toquecito en las puntas de sus diversidad total,
alas provocará que se de la vuelta dejándose caer dentro del se deberá hacer
frasco. Como discutiremos a continuación, es importante todo lo posible
colocar un poco de papel higiénico, o algo similar, en el para recolectar
fondo del frasco para evitar que el espécimen se frote o se y montar en
dañe mientras se mueven antes de morir. alfileres los más Un pan trap utilizando una linterna
que se pueda. portátil.

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Es frecuente capturar especies en la plan de escape!
sábana que no fueron capturadas en Trampas de tipo Malaise
una pan trap cercana o viceversa. Esto El uso de una trampa Malaise
puede ser debido simplemente a la y recolectar con una red de mano o
fuerte iluminación generada por las cazamariposas durante el día son otros
luces de la sábana comparada con la luz métodos complementarios de captura,
de la trampa, y/o por la habilidad del especialmente para capturar el elevado
ojo humano para discriminar especies. número de especies del Neotrópico que
Una pan trap simple consiste están activas durante el día y las que no
en un contenedor cuadrado o son atraídas por las luces. Las trampas
rectangular, poco profundo y de plástico Malaise funcionan particularmente
(preferiblemente blanco), llenado con Aysha Prather recolectando imagos bien si se dejan funcionando durante
etanol. Sobre el contenedor se pone un activos durante el día en el Río Claro, varios días y son inspeccionadas
tubo de luz negra (UV) o una linterna Estacão Biológica de Boracéia, São periódicamente. Hemos tenido mucho
fluorescente portátil equipada con una Paulo, Brasil. éxito colocando estas trampas sobre
bombilla ultravioleta y se enciende en pequeños riachuelos (de primer orden),
el crepúsculo. Las unidades portátiles suelen funcionar con donde actúan doblemente como trampas de intercepción y
pilas de linterna, y la luz puede quedar encendida solo durante como trampas emergentes. Los imagos son capturados en
unas horas o toda la noche. Los factores limitantes serán la un depósito de la trampa lleno de líquido (alcohol etílico
seguridad de la localidad (¿destrozarán la trampa?) y cuantas o una solución de etilenglicol, aunque hemos obtenido
pilas estamos dispuestos a comprar. Nosotros generalmente resultados dispares con esta última y preferimos la anterior)
cubrimos la trampa con un trozo de malla de alambre (malla y después son sacados y transferidos a 80% EtOH para su
de 1 cm² aprox.) para evitar que las mariposas y escarabajos almacenaje permanente. Si va a ser inspeccionada a menudo,
grandes caigan en el alcohol. Después el contenido se vierte especialmente en áreas de mucha humedad, podemos evitar
en un bote de plástico (un embudo facilita la transferencia), usar los líquidos, sustituyéndolos en el depósito por una tira
rellenándolo hasta el tope con alcohol nuevo y rotulándolo de Vapona® y papel higiénico. Los especímenes también
apropiadamente. Escriba la información de la localidad y la pueden ser colectados de la pared de tela de la trampa con
fecha en un trozo de papel e introdúzcalo dentro del bote, un aspirador antes de que entren en el depósito, y después se
no adhiera la etiqueta por fuera del bote. Después de varios transfieren a un frasco con cianuro para luego ser montados.
días, el alcohol deberá ser cambiado por etanol fresco de Red de Mano o Manga entomológica
70-80% para asegurar la conservación apropiada. Nosotros En el Neotrópico (como en otras partes) podemos
colocamos este tipo de trampas a cierta distancia del sitio observar durante el día varias especies volando o posadas en
donde colgamos la sábana (50-100 m) y usualmente a la orilla la vegetación ribereña, o sobre rocas. Muchos hidroptílidos
del agua. Generalmente la lluvia ligera no es un problema, se exhiben y caminan sobre las rocas situadas a lo largo del
pero si se espera lluvia recia sería bueno colocar la trampa borde o dentro de la corriente. La actividad de los imagos
bajo alguna estructura (un puente, una roca o un tronco de es especialmente común durante la mañana, cuando el sol
árbol) y a una distancia razonable del río en caso de que el tropical empieza
nivel del agua se a calentar el
eleve. ¡Lo mismo ambiente, y antes
deberá aplicarse al del comienzo
colocar la sábana: de las lluvias de
esté siempre la tarde. Este es
alerta frente a la el tiempo ideal
posible subida del para recorrer a
nivel del agua o a pie una sección
las inundaciones! del riachuelo con
Nunca muestree una red en mano
al otro lado del para capturar
río o de su salida i n d i v i d u o s
y nunca coloque activos durante
Una trampa de tipo Malaise puesta la sábana en un el día. También
sobre un pequeño tributario del Río sitio peligroso o podemos aspirar Dos tamanos de frascos con cianuro.
Caparaó, Parque Nacional Caparaó, incómodo. ¡Tenga los ejemplares de Observe la etiqueta, el papel higié-
Minas Gerais, Brasil. de antemano un la vegetación o de nico y la envoltura protectiva.

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las rocas si es que podemos acercarnos sin espantarlos. Los frasco se rompiese y rotuladas con la fecha de su creación y
ejemplares de dentro de la red deberán ser engañados para una advertencia de que el contenido es venenoso. Algunas
que entren en el frasco con cianuro y, en general, están en personas estarán poco dispuestas a usar cianuro, pero nada
excelente estado para ser montados. Algunas especies que que hayamos usado anteriormente ha funcionado tan bien
son particularmente activas durante el día raramente, o solo y de forma tan efectiva. Una vez hechos, los frascos nos
accidentalmente (ó nunca) serán capturadas con luces. durarán por lo menos una temporada, y a veces hasta 2-3
años, dependiendo de la frecuencia de uso y de la cantidad
de cianuro usado al hacer el frasco. Deberemos extremar
Uso y Construcción de un Frasco con Cianuro las precauciones al caminar por el campo con un frasco
Ni siquiera el montaje más cuidadoso de un con cianuro, especialmente al atravesar rocas resbaladizas
espécimen ayudará si el espécimen sale dañado de un en el lecho del río. En esta situación, nunca lleve un frasco
frasco. Los Tricópteros son más delicados que la mayoría con cianuro en los bolsillos de su pantalón; un desliz puede
de los insectos y necesitan ser manipulados con cuidado provocar la rotura del frasco y un corte en la pierna, con
en el campo para mantenerlos en buenas condiciones. Esto el potencial, aunque improbable, peligro de que el cianuro
no es tan difícil como suena si se toman en cuenta ciertas entre en la herida. Lleve los frascos aparte, en una bolsa
precauciones. La mejor manera de recolectarlos es usando de tela o en una mochila. Además, cuente el número de
un frasco con cianuro que ha sido reservado exclusivamente frascos que lleva al campo y asegúrese de que todos han
para los Tricópteros. También es buena idea tener disponibles sido recogidos antes de irse del sitio de captura. Olvidar un
varios frascos extra (2-3 por colector) para evitar que se llenen frasco con cianuro en el campo representa un peligro para
mucho de ejemplares, y para poder rotar los frascos durante personas confiadas o para los niños, especialmente si no han
la captura y permitir que el ejemplar recién capturado sido rotulados.
muera antes de añadir más ejemplares. Los especímenes
pertenecientes a otros órdenes, especialmente mariposas y
escarabajos, no deben ser incluidos en el mismo frasco con Montaje de Especímenes en el Campo
los Tricópteros. Los escarabajos son mucho más grandes y Es importante montar los especímenes lo más
más robustos que los Tricópteros y tardan más en morir en pronto posible después de que han sido capturados. Nosotros
el cianuro; un escarabajo grande se moverá mientras muere, solemos realizar las capturas al atardecer y montamos los
destruyendo cualquier Tricóptero que esté en el frasco. Los Tricópteros muy de mañana, al día siguiente, ya que tienen
Lepidópteros, por otro lado, especialmente los grandes, se una cutícula relativamente fina y suelen secarse rápidamente.
despojan de sus escamas ensuciando a los Tricópteros. El Al secarse, cualquier atento de montarlo dañará el ejemplar
frasco con cianuro deberá tener en el fondo algún tipo de inutilizándolo como espécimen montado. La velocidad con
papel suave (Kleenex, papel higiénico) para permitir que el la que se secan depende en la temperatura y en la humedad
espécimen se mueva o caiga entre los pliegues al morirse relativa. Otra ventaja de montarlos pronto es que los líquidos
y así los pelos de las alas se protegerán. Este papel deberá corporales de un
ser inspeccionado la mañana siguiente, cuando se están ejemplar fresco
montando, por si acaso han quedado ejemplares escondidos actúan como
entre los pliegues, y deberá ser cambiado después de cada pegamento y lo
noche de colecta. También es una buena idea tener frascos adhieren al alfiler.
pequeños de reserva para recolectar miembros de la familia Si lo montamos
Hydroptilidae. cuando el es-
Otras soluciones usadas a veces, como el acetato pécimen se em-
de etilo, no son del todo buenas para recolectar Tricópteros. pieza a secar,
El acetato de etilo en particular humedece los pelos de las después giraran
alas y deja el espécimen muy blando y difícil de montar. y rotaran en su
El procedimiento para hacer frascos con cianuro ha sido alfiler. Esto no
descrito en varios lugares. Nosotros usamos un método solo causará que
corriente que incluye el uso de cianuro de potasio (KCN) el espécimen
en el fondo de un frasco, luego se cubre con una capa fina sea dañado en
de aserrín absorbente (que facilita el lento desplazamiento una futura ma-
del cianuro), seguidamente se empolva con una capa fina nipulación, sino
de yeso de París y todo ello se cubre con una capa de yeso que también Un montaje doble. Observe la distan-
de París mojado que se deja secar antes de usar el frasco. Las d i f i c u l t a r á cia entre la tira de silicona, la eitqueta,
bases de estos frascos se envuelven cuidadosamente con su posterior y el vial de genitalia a lo largo del al-
cinta adhesiva para contener el material en caso de que un c o n s e r v a c i ó n . filer.

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Para impedir que los ejemplares se sequen antes de ser espacio para trabajar con dedos “gordos”. Nosotros usamos
montados, una buena idea es asegurarse de que las tapas un calibrador para montarlos en el campo y así obtener una
de los frascos estén bien cerradas después de una noche de misma altura en todos los ejemplares. El calibrador es una
captura y sacar del frasco pocos especímenes a la vez cuando varita plástica con forma de lápiz que tiene perforado un
estos están siendo montados. El frasco en sí actúa como agujero en la punta del “lápiz” de 12 mm de profundidad y
un humidificador. Asegúrese también de que el frasco esté lo suficientemente ancho para aceptar la cabeza de un alfiler.
situado en un lugar fresco, oscuro, lejos de los rayos del sol. La Encontramos que esta es una buena altura para la mayoría de
necesidad de montar los ejemplares mientras uno esta en el los especímenes, dejando suficiente distancia por encima del
campo dificulta la recolección de los Tricópteros más que con ejemplar como para manejarlo con seguridad y rapidez en
otros grupos de el laboratorio. La excepción son las especies relativamente
insectos, pero el grandes y las que
esfuerzo no es tienen patas
excesivo y muy largas, como los
pronto se vuelve hidropsíquidos
parte de una rutina de los géneros
del trabajo en el Leptonema o
campo. La calidad Macronema, o
de los ejemplares especies de
tratados de este Phylloicus (Ca-
modo compensará lamoceratidae),
el trabajo extra etc. que podrían
realizado. sufrir daños en las
Si en la patas al colocar las Unas tablas hechas en casa para ex-
mente del lector etiquetas debajo tender las alas de pequeños Lepidop-
Un calibrador plástico casero para de-
hay todavía del ejemplar si se teros y Tricópteros (cuarta fila de la
terminar la altura inicial del ejemplar derecha).
en el alfiler.
dudas sobre la deja tanto espacio
c o n s e r v a c i ó n por encima del mismo. Para esas especies, es mejor empujar
de especímenes en alfileres, probablemente sea por el el espécimen un poco más arriba, para prevenir dañar las
prejuicio resultante de experiencias anteriores al trabajar patas en un futuro. Nuestros calibradores son caseros y,
con ejemplares antiguos montados en alfileres que ni fueron probablemente uno puede hacer un calibrador similar
colectados con cuidado ni manipulados apropiadamente, modificando, con un poco de ingenio, un bolígrafo retráctil.
por lo tanto se encuentran dañados (con las alas sin pelos), (Si alguien divisa un modelo más simple podrá informarnos
o rotos. Todos los insectos en alfileres son frágiles y se en un futuro artículo). Lo importante es que el espécimen sea
quiebran fácilmente y esto es particularmente cierto en manipulado cautelosamente para evitar eliminar los pelos
los Tricópteros. No estamos seguros de quién tuvo la idea de las alas. El insecto se coge por el mesotórax y se empuja
original de que al poner un insecto en un alfiler el espécimen cuidadosamente hacia arriba en el alfiler hasta un punto un
podría ser manipulado sin que los dedos de uno lo dañen. poco mas arriba de su posición final; después es empujado
Por lo que nosotros sabemos, las hacia abajo hasta la altura apropiada
colecciones originales de Linnaeus y usando el calibrador. Lo ideal sería
otros entomólogos de antaño fueron que los ejemplares fuesen manipulados
conservadas en alfileres. Los alfileres con pinzas de puntas fina. Use las
modernos han sido estandardizados en pinzas para colocar cuidadosamente
longitud y suelen venir con una cabeza el espécimen que se va a fijar sobre la
de nylon que facilita su manipulación. “V” que se forma al juntar el pulgar y
Lo importante es dejar suficiente el dedo índice. El espécimen puede ser
espacio entre la cabeza del alfiler y empujado hacia arriba cuidadosamente
el ejemplar para así poder manejarlo con los dedos o con las pinzas. Asegúrese
sin dañarlo, y también debajo de la de que el alfiler esté perpendicular al eje
etiqueta del ejemplar. La distancia longitudinal del cuerpo del espécimen.
ideal depende del grosor de los propios Otra alternativa consiste en colocar el
dedos, y hasta cierto grado del tamaño ejemplar cuidadosamente sobre una
del espécimen. Como estos serán Fijando un Phylloicus mientras se co- superficie de montaje, como un trozo
manipulados por individuos diferentes loca el ejemplar entre el dedo índice y de espumilla plástica, y pincharlo
en este aspecto, se debe dejar suficiente el pulgar. directamente sin tener que usar los

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dedos. Un buen ejemplar se consigue capturadas series extremadamente
mediante una cuidadosa manipulación. largas, es poco práctico intentar montar
En cuanto al tamaño del todos los ejemplares y en ese caso es
alfiler, probablemente la mayoría mejor colocarlos en alcohol antes de
de los especímenes puedan ser que se sequen. No obstante, es deseable
colocados en alfileres de tamaño 0 que por lo menos unos cuantos
hasta 3, preferiblemente de acero ejemplares (una docena o más) de cada
inoxidable. En general, podemos morfoespecie se monte en alfileres, por
usar solo los tamaños 0 y 2, excepto las razones anteriormente comentadas
para los ejemplares muy pequeños para preferir ejemplares montados
(casi siempre un gran porcentaje del en vez de los preservados en alcohol.
total). En general, no es necesario Fijando Tricópteros la manaña despu- Nosotros hemos instalado “estaciones
extender las alas de los Tricópteros, es de una recolecta. de montaje” en todo tipo de situaciones,
aunque algunos especímenes con sus incluyendo al aire libre, en tiendas de
alas extendidas quedan muy bonitos y también facilita la campaña, en la cabina trasera de una camioneta, en chozas,
observación de la venación. No nos oponemos a la práctica en habitaciones de hoteles, en restaurantes y hasta a la orilla
de extender las alas de los Tricópteros si se hace con cuidado de una piscina:
Un cuaderno
y, especialmente, si solamente se trata así un pequeño en todos los de campo de
porcentaje de los ejemplares. La misma técnica usada para casos es deseable Ingienería.
extender las alas de los Lepidópteros puede ser usada para disponer de una Su tamaño
los Tricópteros, usando un extensor de alas del tamaño i l u m i n a c i ó n (12 x 19 cm)
adecuado; sin embargo, la ventaja de tener ejemplares con adecuada (natural y su papel
sus alas extendidas probablemente no es tan grande como en o artifi cial) y es impermeable
el caso de los Lepidópteros, ya que pocos Tricópteros tienen esencial algún lo hacen una
diseños característicos en las alas posteriores y el montaje de tipo de protección buena selec-
ción para
las alas en preparaciones es más útil para observar caracteres contra el viento y
trabajos bio-
de la venación. la lluvia.
lógicos en el
Los ejemplares demasiado pequeños para ser campo.
dispuestos en alfileres estándar necesitan ser montados en
minucias. Cualquiera que haya trabajado con Tricópteros,
pegándolos en cartulinas de montaje se habrá percatado de Etiquetado y Almacenaje en el Campo
que no es un buen método de conservación. Según nuestra En el campo, los ejemplares son almacenados en
experiencia, terminan siendo pegados por el costado de un cajas Schmidt con fondos de polietileno expandido. En
ala en vez de por el cuerpo del espécimen, o el ejemplar la caja, los ejemplares son dispuestos en elegantes filas
termina sumergido completamente en la gota de pegamento. horizontales precedidas por una etiqueta temporal con el
Nosotros usamos minucias de acero inoxidable de tamaño “código-de-campo”. Este código de campo se anota junto con
0.15 mm para hidroptílidos, glososomátidos, y especies información más detallada de la localidad en un cuaderno de
pequeñas de otras familias (Philopotamidae, Hydropsychidae, campo. Dentro de los viales que preservan adultos y larvas
Helicopsychidae, leptocéridos pequeños y delgados, etc.). también se introduce unas etiquetas parecidas, escritas en
Casi todas las especies que son demasiado pequeñas para tinta indeleble (pluma Pigma Micrón, tamaño 0.05) sobre un
ser montadas en alfileres estándar son suficientemente papel duradero.
grandes para ser montadas en minucias, con excepción de Fijamos los
los hidroptílidos más pequeños, como ciertas especies de especímenes en
Neotrichia o Hydroptila, que tienen menos probabilidad de minucias sobre
ser dañadas si son conservados directamente en alcohol. En tiras de espumilla
el campo es indispensable algún tipo de lupa o microscopio m i c r o p o r o s a
si queremos montar los especímenes debidamente y (como Plastazote,
eficientemente en minucias (¡o muy buena vista, que disponibles de
ninguno de nosotros tiene!). Una pequeña lupa de 10 BioQuip® http://
aumentos (10X), de mano o con soporte, funciona bien, pero w w w . b i o q u i p .
preferimos una lupa binocular (microscopio estereoscópico com/) y luego
o estereomicroscopio) cuando es posible. Tenemos la fortuna clavamos con un Una caja Schmidt con Tricópteros en
de tener una antigua y obsoleta de laboratorio que funciona alfiler las tiras alfileres. Observe las etiquetas tem-
maravillosamente para trabajar en el campo. Cuando son dentro de las porarias con codigos-de-campo.

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Un ejemplo de notas hechas en el campo. Observe el estilo
de anotar la información de la localidad.
cajas Schmidt. Vale la pena tomarse la molestia de colocar
todos los especímenes en minucias mirando en la misma
dirección sobre la tira. Esto ayudará cuando se vaya a
realizar el montaje doble de los ejemplares sobre las tiras de
silicona (también de BioQuip) al regresar al museo. Después
de la experiencia de haber encontrado una caja de nuestros
especímenes destruidos por las hormigas en el campo, ahora
-para proteger la caja- la guardamos dentro de una bolsa de
malla fina con cremallera hecha en casa. Si no disponemos de
una bolsa como esta, deberemos estar constantemente alerta
contra las hormigas y tomar las precauciones apropiadas.
Es importante mantener un cuaderno de campo.
Un cuaderno estándar de ingeniero o de topógrafo funciona
particularmente bien, ya que son pequeños y el papel está
compuesto en un 50% por algodón, por lo que es impermeable.
Se debe usar algún tipo de marcador permanente, una pluma
con tinta indeleble o un lápiz. Por lo menos la localidad
deberá incluir la latitud, longitud y elevación (ahora
obtenidas fácil y económicamente con tecnología GPS
(Sistema de Posicionamiento Global)), fecha, nombre de la
masa de agua, alguna indicación de su distancia y dirección
a una ciudad o pueblo, y la unidad política o administrativa
(estado, provincia, distrito, unidad protegida, etc.). Además,
el cuaderno debe incluir toda observación pertinente sobre
el hábitat, condiciones, direcciones, observaciones sobre
la biología o comportamiento, nombres de personas del
área, etc., etc. El hecho de mantener el cuaderno al día
deberá realizarse con constancia, y uno nunca debe fiarse
de su memoria para recordar la información referente a un
sitio. Finalmente, siempre hay que asegurarse de que todo
el material de un sitio está rotulado. Cualquier material
descubierto posteriormente sin etiqueta será mejor tirarlo.
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Montaje Doble de Ejemplares en Minucias
El hongo Polyporus, que se usaba en el pasado para
el montaje doble, no está disponible hoy en día, pero las tiras
de silicona funcionan muy bien. Al realizar el montaje doble
de las minucias es importante usar tiras lo suficientemente
largas (como 1 cm.) para que la minucia pueda ser montada
a cierta distancia del alfiler y no directamente al lado de éste,
donde podría ser tocada accidentalmente con el dedo durante
su manipulación. Si tocamos la minucia accidentalmente,
seguramente el ejemplar se desintegrará en una pequeña
nube de polvo de insecto. Por la misma razón, la tira en
la que está fijada la minucia debe estar lo suficientemente
lejos de la cabeza del alfiler (por lo menos 12 mm) para que
la minucia permanezca después lo mas lejos posible de los
dedos del investigador (recordando que el extremo superior
de la minucia siempre quedará más alto que la tira de
silicona). Este consejo puede parecer demasiado obvio como
para mencionarlo, pero es sorprendente la cantidad de veces
que no se sigue en práctica.
Manipulación y Separación de Especímenes
Montados
La separación y conservación de especímenes en
alfileres varía un poco respecto a la separación de ejemplares
en alcohol. Sin embargo, con la experiencia, la separación
de especímenes en alfileres le parecerá más directa y mucho
menos aburrida que la separación de material en alcohol.
Los colores y diseños se convierten en caracteres muy útiles,
no solo para separar familias y géneros, sino a menudo
también para separar especies dentro de los géneros. Como
los ejemplares están secos y las alas pueden tapar los órganos
genitales, se necesita mucha habilidad para manipularlos
durante la separación por sexos, pero la ventaja de poder
manipular y separar eficientemente los ejemplares en
alfileres compensa cualquier desventaja. En los siguientes
párrafos ofrecemos una corta explicación sobre los métodos
de conservación. Cualquiera que trabaje con Tricópteros
desarrollará su propia metodología y atajos.
Separación de Especies y Sexos
Normalmente nosotros empezamos a separar
especímenes en el campo mientras se colocan en las cajas
de campo. Esto empieza con la obsesión del taxónomo de
colocar objetos similares en grupos, uno cerca del otro.
Esto es claramente diferente del “ojo artístico”. Todos
hemos visto exhibiciones de insectos en museos que fueron
colocados obviamente por artistas, porque los insectos que
son similares se disponen por los alrededores y se colocan
con otros insectos para crear una yuxtaposición estética
de forma y figura. Un taxónomo ve eso e inmediatamente
Suplemento al1 N
empieza a juntar los objetos similares que comparten una ser cuidadosamente empujadas hacia un lado con una sonda
relación genealógica. Una meta de la taxonomía es organizar fina para dejar al descubierto el abdomen. Las hembras son
la diversidad de la naturaleza en forma que la diversidad sea rotuladas con un pequeño símbolo de hembra (♀) colocado
fácil de entender. El proceso inicial de organizar especies debajo de la etiqueta de la localidad. Nosotros situamos
en el campo continua cuando uno regresa al laboratorio y primero –y de izquierda a derecha- la serie de machos
los insectos son etiquetados, todo esto antes de observarlos de una especie, seguida de un símbolo de hembra en un
bajo el microscopio. ¡Sin embargo, los ejemplares deben ser alfiler y la serie de hembras. Esto también facilita luego la
etiquetados antes de ser separados! introducción de los ejemplares en la base de datos. En una de
Los Tricópteros son mucho mas difíciles de separar estas series, se seleccionan unos cuantos machos para aclarar
que otros insectos porque hay una gran uniformidad en la la genitalia. Seleccione uno o dos individuos típicos, pero
forma habitual del cuerpo y las diferencias en color son también trate de buscar individuos que se diferencian en
usualmente muy sutiles; de todos modos, una separación alguna característica, por ejemplo aquellos que son un poco
aproximada teniendo en cuenta la forma, tamaño y color o más oscuros o más claros, más grandes o más pequeños, y
los patrones de coloración iniciará el proceso de organización. marque éstos para después aclararlos (a veces solo con dejar
Generalmente unas cuantas especies serán relativamente el espécimen un poco de lado en la fila en vez de situado
más abundantes, y organizar el material para que éstas sean perpendicularmente). Si después de que los ejemplares
fácilmente distribuidas ayudará al proceso de separación. representativos de una serie son aclarados la serie resulta
Hemos encontrado que la mejor forma de separar el material estar compuesta por dos o más especies, la serie tendrá que
es por fecha y localidad de captura. Todos los ejemplares ser separada otra vez. A veces no es necesario, y de hecho
de determinada localidad son separados bajo una lupa no es deseable, aclarar todos los ejemplares en una serie. Las
binocular (estéreomicroscopio) u otro sistema de aumento diferencias en los caracteres de la genitalia de unas especies
hasta el nivel de “morfoespecies” independientemente de que están siendo separadas pueden ser observadas en los
las de otras localidades. En general, el especímenes que no han sido aclarados
color o patrón de coloración, tamaño y y pueden ser emparentados con las
la forma de las alas son suficientes para genitalias de aquellos ya aclarados. El
separar hasta el nivel de morfoespecies, mismo proceso puede ser utilizado para
pero la presencia o ausencia de ocelos, aclarar las hembras de la serie.
la estructura de los palpos maxilares, Normalmente, los machos
el numero de espolones, tamaño y y las hembras de una serie serán casi
forma de las antenas, etc., son otras idénticos en coloración, y uno puede
características que contribuyen a asumir sin problema, por lo menos
la separación. La separación es un durante la primera separación, que
proceso interactivo que se refinará con aquellos de ambos sexos con la misma
el tiempo. coloración y diseño y de la misma
Después de que los especímenes localidad y fecha, son de la misma
son separados en una primera ronda, se Una serie separada, los machos especie. Si después de haber separado
seguidos por las hembras, separados
separan por sexo viendo el extremo del
por un símbolo de hembra en un al- más refinadamente una serie parece
abdomen bajo la lupa. Normalmente haber más de dos especies, se deberán
filer (♀).
es fácil reconocer a los machos y a observar más cuidadosamente las
las hembras, ya que los órganos genitales (la genitalia) de diferencias leves en los diseños y colores de las alas, lo
los machos son más complejos y se pueden ver los diversos cual ayudara cuando se vayan a asociar las hembras con los
apéndices y prolongaciones. Las hembras de algunas especies machos. Si no se observan diferencias, probablemente es
pueden ser un poco más oscuras que los machos (como en mejor colocar a las hembras con la serie más larga de machos
algunos Smicridea) o un poco más claras. En la mayoría de (Ej., la serie con más individuos). Nuestra experiencia nos
las familias, las hembras son más grandes que los machos, dice que las series organizadas de esta manera facilitan la
pero en Leptoceridae, los machos son más grandes. Los dos eventual asociación de las hembras con los machos, una vez
sexos presentan, sin embargo, otros muchos dimorfismos que son encontrados los caracteres diagnósticos para segregar
sexuales (además de los órganos genitales) que varían a las hembras, ya que usualmente algunas de las hembras en
dependiendo en la especie. Estos incluyen diferencias en la la serie serán co-específicas con los machos.
morfología y número de segmentos de los palpos maxilares,
modificaciones de los escapos de las antenas, glándulas de
feromonas, estructuras androconiales, venación de las alas, Extracción de la genitalia
morfología de las patas, etc. Ocasionalmente, el ápice del La identificación final, por supuesto, requiere que los
abdomen puede estar tapado por las alas, que tendrán que órganos genitales de los machos sean extraidos y aclarados.

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Suplemento al1 N
Puesto que los ejemplares secos son Como los Tricópteros tienen una
delicados y frágiles, el proceso es cutícula fina, tienden a absorber
diferente al que se usa para ejemplares la humedad y a volverse flexibles
conservados en alcohol, pero el rápidamente en un humidificador.
proceso de identificación que le sigue Una vez hidratados es posible cortar
es esencialmente el mismo. Para el abdomen con unas microtijeras,
algunos Tricópteros, particularmente de las usadas en oftalmología. Estas
los Hidroptílidos pequeños y varios son un poco caras, pero son una
géneros en otras familias, es posible buena inversión si se cuidan bien. Es
romper el abdomen sin dañar el importante cortar lo más que se pueda
ejemplar, si uno tiene cuidado. para poder observar, describir e ilustrar
Mantenga el espécimen con una mano glándulas abdominales (estas se hallan
Removiendo el abdomen de un Lepto-
bajo el estereomicroscopio con la parte frecuentemente en el 5º segmento, pero
nema con unas microtijeras antes de
ventral hacia arriba y con las pinzas también en los segmentos más basales
aclarar la genitalia. Este procedimien-
o un sonda en la otra mano empuje to es hecho bajo un microscopio en en algunas especies.
delicadamente contra la base del un ejemplar que ha sido rehidratado.
abdomen (normalmente contra el 7º u
8º segmento) hasta que se quiebre en la base. Sin embargo, Preparación de las Genitalias
se debe extremar el cuidado, porque en ciertos grupos el Un método estándar para aclarar la genitalia es el
abdomen está firmemente adherido al metatórax, y la rotura uso de solución de 10-12% de hidróxido de potasio (KOH o
se producirá entre el meso- y el metatórax, dejando a este potasa). Un sistema muy útil que hemos ideado es el uso de
último, con sus patas y alas, adherido al abdomen. ¡Esto deberá una bandeja con fondo de espuma con una serie de hoyos
evitarse! Si después de un empujoncito delicado parece que el cortados en ella para acomodar viales pequeños (9 x 30 mm)
abdomen no se quebrara limpiamente, deténgase y coloque donde se colocaran
el ejemplar aparte para luego colocarlo en un humidificador. las genitalias
Para extraer el abdomen de esta manera son necesarias unas con el hidróxido
manos firmes y destreza manual. Una vez que el abdomen de potasio. Esto
es extraido deberá ser situado en un vial para aclarar. permite colocar
Un método más seguro es colocar el ejemplar en un los ejemplares en
humidificador por unas cuantas horas, antes de cortar alfileres al lado del
el abdomen. Las patas y los apéndices de los ejemplares vial que contiene
hidratados tienen menos probabilidades de quebrarse. Un su genitalia
humidificador es en proceso de
esencialmente un aclarado, y así Una bandeja con fondo de espumilla
tarro cerrado con se evitará la para aclarar la genitalia, mientras se
agua o con una separación del asegura una asociación correcta de el
esponja húmeda en el espécimen ejemplar y su genitalia.
y
fondo que aumentará su genitalia. Algunos investigadores prefieren calentar el
la humedad relativa. hidróxido de potasio para reducir el tiempo de aclarado,
Si se mantienen pero hemos visto que la solución de KOH a temperatura
los ejemplares en ambiente y dándole más tiempo para aclarar da resultados
el humidificador más predecibles, y evita el problema de distorsión de las
durante mucho genitalias que se produce al calentar la solución. El KOH
tiempo, las alas se caliente o hirviendo es muy peligroso, además tiende a
mojaran y el ejemplar desbordarse mientras hierve con riesgo de perder el abdomen
puede enmohecerse en el proceso. El aclarado a temperatura ambiente también
si el tarro no ofrece un tiempo más relajado durante el proceso de aclarado.
contiene algún Normalmente existe cierta flexibilidad en cuanto al tiempo
tipo de fungicida. de aclarado que dará buenos resultados, desde unas horas
Los ejemplares no para genitalias pequeñas, como las de los Hidroptílidos, hasta
Rehidratando y reblandeciendo
ejemplares en alfileres en un hu- deberán quedarse en seis horas más o menos, o toda la noche, para ejemplares
midificador. Los ejemplares en el humidificador más grandes o aquellos que tienen una cutícula gruesa. Después
alfileres son colocados en un tiempo del necesario del tiempo adecuado, saque el abdomen del vial y colóquelo
trozo de espumilla. para reblandecerlos. en un vidrio de reloj lleno de agua destilada (a veces los

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Suplemento al1 N
especímenes con muchas sedas no rompen la tensión de la de localidad. El medio de almacenaje es una pequeña
superfecie, por lo que deberemos añadir unas cuantas gotitas cantidad de glicerina al fondo del vial. Estos viales están
de etanol o de detergente al agua destilada). Normalmente disponibles en varios proveedores, pero generalmente son
será necesario extraer el tejido macerado que queda de la caros, especialmente si están hechos de vidrio. Un sustituto,
cavidad abdominal después de ser aclarado (y también para adoptado por el Dr. Oliver Flint, y que hemos encontrado
enjuagar el restante KOH). Use una pequeña jeringa llena de que funciona bastante bien es el uso de pequeños cierres
agua para lavar el tejido macerado de dentro de la cavidad protectivos utilizados en la industria electrónica (caplugs)
del abdomen. Adicionalmente, el tejido puede ser retirado http://www.caplugs.com. El tope es cortado un poco debajo
con unas pinzas con punta fina o con una aguja enmangada del primer borde interno para reducirlos en tamaño, y son
con el extremo doblado en forma de un pequeño gancho. cerrados con un tapón de corcho pequeño (tamaño 0000,
Después de que los órganos genitales hayan sido enjuagados calidad XXXX). Los Caplugs están disponibles en varios
y limpiados en el agua destilada, deberán pasar por una serie tamaños. Nosotros usamos el tamaño 2.29 x 14.99 mm
de enjuagues para detener el proceso de aclarado, ya que (número de catálogo, SC – 3/32) para la mayoría de las
el KOH residual especies, pero para las especies más grandes, especialmente
puede continuar Leptonema, es necesario el tamaño más grande 4.06 x 14.22
aclarando la mm (número de catálogo SC – 5/32). En el fondo del vial se
genitalia. Después inserta una pequeña cantidad de glicerina con una jeringa
de que el ejemplar después de haber doblado la punta de la jeringa contra un
ha sido limpiado piedra (esto asegurará que la glicerina vaya al fondo del
en agua destilada, vial). El interior de los Caplugs tiene un pequeño borde
transfiéralo a una cerca del fondo que puede dañar ejemplares muy pequeños
placa con 10% o delicados, pero generalmente estos Caplugs funcionan
alcohol ácido bastante bien, especialmente si uno es cauteloso al sacar
(una parte ácido las genitalias del vial. La desventaja es que los tubitos son
acético glacial opacos y puede ser difícil observar las genitalias que están
Enjuagando tejidos con una jeringa. diluido en 9 partes dentro del vial (esto también ocurre en los viales de plástico,
de etanol –EtOH) que son muy similares, sino los mismos que los Caplugs).
para neutralizar el KOH, transfiéralo de ahí a otra con 95% Nosotros usamos estos viales de plástico como material
EtOH, de ahí a una placa con glicerina y, finalmente, a un “rutinario”, pero usamos los viales para genitalias de vidrio,
vial para genitalias. que son más caros, para ejemplares pequeños o delicados,
Hemos observado un problema con ejemplares como las genitalias de los Hidroptílidos o Protoptilinos, y
aclarados en KOH conservados en glicerina que todavía no para holotipos y otros ejemplares “importantes”. Los viales
hemos podido resolver, y es que a veces tienen la tendencia de de vidrio están equipados con un tapón de silicona, pero
continuar aclarándose mientras están almacenados. Parece también pueden ser cerrados con un tapón de corcho. Se
haber mucha variabilidad en este aspecto, desde algunos usa un tapón de corcho para los viales de plástico o un tapón
ejemplares que no se aclaran del todo o solamente un poco de silicona de los que vienen con los viales para genitales de
a otros que continúan aclarándose hasta que la cutícula se vidrio o de plástico, es importante evitar que el tapón haga
vuelve transparente y sin pigmento. Hemos tratado de evitar contacto con la glicerina y fijar los viales en ángulo, para que
este problema mediante los pasos descritos anteriormente. la glicerina se quede al fondo del tubo. Nosotros cortamos
La variabilidad que es observada entre los ejemplares con una esquina del extremo posterior del corcho para que así se
respecto al aclarado mientras están almacenados se puede pueda colocar paralelo a la etiqueta de la localidad, mientas
deber a que no se ha seguido estrictamente el protocolo que el vial con la genitalia se mantiene en ángulo. La glicerina
de lavados, o a los diferentes tiempos que los ejemplares tiende a moverse hacia arriba por las paredes de los viales
se dejan en cada placa, o a impurezas de las soluciones o de plástico y vidrio. Un corcho en contacto con la glicerina
a los viales de plástico usados para las genitalias, etc. Sin probablemente alejara la glicerina del ejemplar y provocará
embargo, no estamos completamente seguros de que que éste se seque. Además, un tapón de corcho o silicona,
hayamos identificado todos los factores que contribuyen a que llegase a hacer contacto con la glicerina alrededor de
la continuación del aclarado mientras están almacenadas. la pared interna del vial, se adherirá a las paredes del tubo
Animamos a los lectores a escribirnos con sugerencias y habrá que romper el tapón para abrirlo y remplazado la
o información sobre los procedimientos que dan como próxima vez que el ejemplar sea examinado. Finalmente,
resultado buenas preparaciones. cuando el corcho hace contacto con la glicerina los taninos
Para los ejemplares montados en alfileres es del corcho suelen disolverse en la glicerina y pueden afectar
necesario almacenar las genitalias con el ejemplar en el el ejemplar. Vale la pena limpiar la abertura del vial con una
vial correspondiente, que es fijado debajo de la etiqueta trozo pequeño de papel, pero se debe tener cuidado mientras

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Suplemento al1 N
de no extraer accidentalmente la genitalia con el papel. Use
siempre una lupa binocular mientras coloca o extrae las
genitalias del vial (nosotros usamos una minucia enmangada
con el extremo doblado en forma de gancho) y asegúrese
de que cuando devuelva la genitalia al vial, ésta queda en el
fondo del mismo.
Un método alternativo para aclarar las genitalias que
hemos adoptado recientemente, fue desarrollado por Aysha
Prather a partir de una técnica usada por los dipterólogos.
Implica el aclarado de ejemplares en ácido láctico. Este
método requiere el uso de 85% ácido láctico (tal como viene
en la botella) en un tubo estrecho marca Pirex (10 x 75
mm). Numere los tubos e idee un sistema para asegurar la
reasociación de las genitalias con el resto del ejemplar. Un
tercio del tubo que contiene el abdomen se rellena con ácido
láctico y se coloca en un vaso de precipitados que contiene
glicerina. Este vaso se calienta a un nivel bajo en un hornillo
a 110-125˚C, hasta que los tejidos internos se disuelven.
El baño de glicerina en el vaso de precipitados no se va a
evaporar durante el uso y se puede usar una y otra vez. El
único inconveniente es que hay que dejar que los tubos se
enfríen y hay que limpiarlos por fuera al sacarlos del baño
de glicerina, pero por lo demás este sistema funciona muy
bien y es muy cómodo. La mayoría de los ejemplares se
aclaran tras 30 minutos en el hornillo, si el baño ha sido
precalentado; como cualquier método de aclarado que
requiere el uso de calor, el tiempo utilizado influirá en el
resultado final y variará con cada ejemplar. El ácido láctico
no deberá ser reutilizado, ya que al ser recalentado tiende
a concentrarse y espesar, por lo que los futuros resultados
serán impredecibles. No obstante, solo es necesaria para
cada ejemplar una pequeña cantidad de ácido láctico (más o
menos un 1/3 del volumen del tubo).
La técnica de ácido láctico tiene sus ventajas y
desventajas comparada con el uso de KOH. Algunas de las
ventajas son que las genitalias requieren poca limpieza de
tejidos internos después de ser aclaradas, que es evidente
en insectos pequeños como los hidroptílidos (que a veces se
aclaran perfectamente con este método), y que el uso de este
método provoca en la eversion de la membrana endotecal
del falo, y así permite
observar estas
estructuras, aunque
puede que no ocurra
en especies con una
membrana endotecal
especialmente
larga. El aclarado
de la cutícula es
usualmente me-
nor que usando
Un vaso de precipitación sobre KOH, lo que es
un hornillo que contiene tubos definitivamente
estrechos con ácido láctico. una ventaja para
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ejemplares poco esclerotizados, pero tal vez no para
los fuertemente esclerotizados. Una desventaja de este
sistema es que el ejemplar se reblandece más que en KOH,
particularmente las membranas intersegmentales, dejando
los ejemplares relativamente más frágiles que los aclarados
en KOH, con lo que la cápsula genital tiene tendencia a
desarticularse del resto del abdomen. Los ejemplares aclarados
con ácido láctico deberán ser lavados para detener el proceso
de aclaración (hemos observado que con ácido láctico,
algunos ejemplares continúan aclarándose). Transfiera el
ejemplar del ácido láctico a una solución de agua o agua con
unas cuantas gotitas de alcohol, después transfiéralo a alcohol
(80-95%), seguidamente, a una pequeña placa con glicerina
(donde puede ser observado y dibujado), hasta finalmente
transferir el ejemplar al vial de genitalias lleno de glicerina
para su almacenaje permanente.
Tinción de las Genitalias
Ocasionalmente es necesario teñir las genitalias
que se han vuelto demasiado transparentes debido a que
se aclararon demasiado, o para examinar estructuras
membranosas. El proceso de teñir es especialmente útil para
examinar estructuras internas de la genitalia de las hembras.
En una placa pequeña con glicerina introduzca y
disuelva unos cuantos granos de negro de clorazol (Chlorazole
Black E; Sigma Chemical Co.). La intensidad de la tinción
está relacionada con la cantidad de granos introducidos,
pero con solo unos cuantos granos es suficiente para lograr
un tinte oscuro. Una vez preparado, esta tinción puede ser
usada una y otra vez. Después del enjuague final con alcohol
comentado anteriormente para aclarar la genitalia, colóquela
en la glicerina teñida durante unos cuantos minutos,
dependiendo del grado de tinción deseado. Experimente
para determinar el nivel apropiado. Si el ejemplar se vuelve
demasiado oscuro, transfiéralo a una placa con 80% EtOH
durante unos cuantos minutos para eliminar el exceso de
tinte y glicerina. Si el tinte original resulta ser insuficiente,
devuelva la genitalia a la tinción. Puede ocurrir que los
ejemplares muy transparentes se “pierdan” en la solución de
tinción, así que tenga cuidado de recuperar la genitalia de la
solución. Para ello, la luz transmitida por debajo de la placa
es esencial para localizar la genitalia teñida. Una vez teñida,
examínela en un vidrio de reloj con glicerina.
Para teñir membranas y estructuras esclerotizadas
podemos utilizar la fucsina ácida. Sumerja el ejemplar en
la tinción durante varios minutos, después lávelo en agua
destilada para eliminar el exceso de tinte. Examine el
ejemplar en glicerina o en 80% EtOH. Para teñir las alas
que son muy pálidas usamos el “teñido doble” (Double Stain;
BioQuip Products). Introduzca las alas en una placa con la
solución Double Stain durante unas cuantas horas/días antes
de eliminar los pelos. A continuación comentamos el método
de preparación de las alas.
Suplemento al1 N
Preparación de las Alas que esté completamente extendida (no doblada sobre si
No es necesario extender o preparar las alas de misma) y con el ápice del ala apuntando hacia la izquierda.
los Tricópteros para su identificación rutinaria. Aunque Haga lo mismo con el ala posterior y colóquela paralela al
la venación se utiliza frecuentemente en las claves de ala anterior. La región anal del ala trasera querrá mantener
familias o géneros, en la práctica normalmente es mas fácil su posición doblada natural, pero deberá ser extendida
identificar un ejemplar hasta el nivel de género después de cuidadosamente con los pinceles o con las pinzas; podemos
aclarar su genitalia. Sin embargo, para estudios taxonómicos eliminar un poco de agua con la esquina de un papel suave,
o sistemáticos es valioso montar las alas, para observar la lo que ayudara a que éstas se queden en posición. Añada o
venación o para hacer ilustraciones, aunque solo se hace elimine agua para hacer que las alas se coloquen bien sobre el
con algunos ejemplares. Para montar las alas de ejemplares cubreobjetos. Mientras están mojadas, deje caer un segundo
montados en alfileres, desprenda cuidadosamente las alas cubreobjetos sobre el primero. Luego se colocan entre un
de un lado (generalmente del lado derecho) empujándolas papel suave con un pequeño peso sobre ellas (unas cuantas
de la base hacia fuera con unas pinzas, hasta que se suelten. monedas) hasta que las alas se sequen completamente
Mientras que el ala delantera es delgada y más robusta, el (varias horas). Se pueden levantar los dos cubreobjetos
ala trasera es más ancha y especialmente delicada. Tenga a la vez con pinzas y sellar sus bordes con unas gotas de
cuidado de no dañar la frágil región pegamento, pero tenga cuidado de no
anal del ala trasera, que esta doblada. deslizar un cubreobjetos contra el otro
Coloque las alas en agua (como ya que provocará la ruptura de las alas.
anteriormente, añada unas cuantas Nosotros usamos el adhesivo Gelva
gotitas de detergente si las alas no como pegamento, que tiene la ventaja
se hunden) o agua con unas cuantas de ser soluble en alcohol y permite
gotitas de alcohol, hasta que éstas separar los cubreobjetos si es necesario.
se rehidraten (usualmente solo dura Es importante que la preparación
unos cuantos minutos). Luego, con este completamente seca, o el Gelva
un par de pinceles suaves de artista, penetrará entre los cubreobjetos hasta
sujete un ala con un pincel mientras las alas si se aplica demasiado. Si esto
usa el otro para –delicadamente- sucede, es posible empezar de nuevo
quitar los pelos. Cepille ambos lados Una preparación de las alas guarda- con solo disolver el Gelva en alcohol.
de ambas alas hasta que la venación, das con el resto del ejemplar en un Después de que las alas se sequen, la
incluyendo las venas cruzadas que son alfiler. preparación puede ser fijada en el alfiler,
pequeñas y poco visibles, se observen con el ejemplar; para ello, pegamos el
claramente. Cepille con cuidado para evitar rasgar las alas. borde de los cubreobjetos con Gelva entre los extremos de
A continuación, transfiera las alas sin pelos a una placa de un trozo de papel rígido doblado por la mitad (como si fuese
agua limpia. Nosotros luego montamos las alas entre dos una pinza): primero el alfiler se fija al papel cerca del pliegue,
cubreobjetos de vidrio y guardamos la preparación con el luego se coloca Gelva en la superficie interna del papel y
ejemplar. Usamos cubreobjetos de diferentes diámetros, con unas pinzas sujetamos los dos lados del papel sobre el
dependiendo del tamaño de las alas. Para montar las alas, borde del los cubreobjetos que contienen las alas hasta que el
tome un cubreobjetos redondo y coloque suficientes gotas Gelva se seque (5 minutos). Las preparaciones de alas hechas
de agua como para romper la tensión superficial con el de esta manera son compactas y pueden ser almacenadas
peso de las gotas adicionales. Luego -con cuidado- tome directamente con el ejemplar, son relativamente fáciles de
el ala delantera de la placa con unas pinzas o una minucia preparar, se ven ordenadas y la venación es fácil de observar,
enmangada y colóquela sobre el cubreobjetos mojado hasta ilustrar o fotografiar bajo el microscopio.

Si tiene preguntas o comentarios por favor contacte

a M. Lourdes Chamorro-Lacayo
cham0138@umn.edu

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