Se procede a poner en la cámara cromatográfica, con las
pipetas correspondientes los disolventes a utilizar, en este Es una técnica utilizada para análisis inorgánico caso serán 3 ml de Cloroformo (CHCl3 ), 3ml de cualitativo, permite llevar acabo la separación e Acetona, estos en relación 1:1 se la adiciona tres gotas identificación de iones, trabajando con cantidades de Isopropanol. Se mezclan estos disolventes dentro de mínimas de sustancias. la camará cromatográfica, luego tomamos el papel Pertenece al tipo “Cromatografía de partición” se cromátografico tratado previamente con las distintas fundamenta en que las sustancia problema, puedan tener tintas, el cual se sumerje en la cámara. diferentes coeficientes de reparto en dos disolventes de inmisibilidad limitada, uno permanece fijo en la Realizar las mediciones de las distancias recorridas por superficie del papel “fase estacionaria” generalmente en las sustancias, para la posterior identificación de ellas. agua, la fase móvil constituida generalmente por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella. Desde el momento en que ponemos el papel en la camara Hay varios tipos de Cromatografía la ascendente (papel cromatográfica se debe llevar un minucioso control del hacia arriba), descendente (papel invertido), radial y de tiempo, el cual será en 25, 30, 35, 40 minutos, luego de separación de zonas y sectores. cumplidos los distintos tiempos con los distintos papeles, Las cámaras cromatográficas son de varios tipos, de se procede al secado para el análisis final y sus forma cilíndrica, de unos 30-40 cm de altura deben cerrar respectivas mediciones, este caso no necesitaremos de un perfectamente, para evitar la evaporación del disolvente revelado que es lo común, en este tipo de trabajos que satura la atmósfera, se trabaja con papel cromatográficos, ya que al ser tintas se percibe su cromatográfico (Schleider, Schull, Whatman, etc.) contraste con fácilidad, lo cual no ocurre con otras Al las sustancias a analizar estas al entrar en contacto con sustancias, las que necesitan procesos especiales como los disolventes empiezan su fase de movilidad, luz ultravioleta, asi se percibe aquellas marcas que no se produciendo unas manchas caracteristicas unicas para perciben a simple vista. cada sustancia, las cuales dependeran de la cantidad de compuestos que las compongan. Generalmente, estas manchas no son coloreadas de por sí A B y se ponen de manifiesto por su posible fluorescencia a la luz ultravioleta—frecuente en sustancias orgánicas—o mediante reactivos químicos que pueden dar una reacción coloreada y que se reparten en gran estado de división.
Los contornos de las manchas así «reveladas» se señalan
con lápiz y constituyen la referencia para la identificación de las sustancias aisladas. Como medida en cromatografía sobre papel se emplea el Rf (del inglés: Retention factor).
Se define como el cociente de dividir el recorrido de la
sustancia por el del disolvente, o sea la distancia que media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por la distancia que media desde el origen hasta el frente del disolvente (S). Rf = X/S.
A.- Cromatografía ascendente.
Laboratorio de cromatografía sobre papel B.- Cromatografía descendente.
Se prepara un papel para cromatografía el cual esta
cortado en forma rectangular. En el papel procedemos a realizar la colocación de pequeñas cantidad de sustancia cerca del extremo del papel, en forma paralela una de otra, asi podremos observar con claridad la cromatografía. Las muestras serán distintas tintas, las cuales tienen distintos colores rojo, azul y negro, veremos que cada una tiene una distinta composición y características cromatográficas, hacen que sean diferentes sus desplazamientos, como las sustancias que los componen.