Tema

Curva de crecimiento bacteriano

Clasificación bacteriana
Metabolismo y Fisiología

Biología Celular
 Nutrientes
1- Fuente de energía luz
química
2- Macronutrientes
H K
O Mg
C Na
N 95% Ca
S Fe
P
3- Micronutrientes (elementos traza)
Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se, W
4- Factores de crecimiento
•Vitaminas
•Purinas y pirimidinas
•Aminoácidos
 Macronutrientes
Fuente de - CO2
carbono - Compuestos Carbohidratos, azúcares,
orgánicos proteínas, aminoácidos,
lípidos, ácidos grasos,
glicerol
Fuente de - Inorgánica NH4, NO3-, N2
nitrógeno - Orgánica Proteínas, peptonas, aa,
bases púricas y
pirimídicas, urea
Fuente de - Inorgánica Fosfatos
fósforo - Orgánica Esteres del ácido
fosfórico
Fuente de - Inorgánica Sulfuros y sulfatos
azufre - Orgánica Aminoácidos sulfurados,
vitaminas
Tipos nutricionales Fuente de Fuente de Ejemplos
energía C
Cianobacterias,
Fotoautótrofos Luz CO2 bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Fotoheterótrofos Luz orgánicos bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Quimioautótrofos o inorgánicos CO2 Eubacterias y
litótrofos ej.: H2, NH3, muchas Archaea
NO2-, H2S
La mayoría
Quimioheterótrofos Compuestos Compuestos Eubacterias,
o heterótrofos orgánicos orgánicos algunas Archaea
 Condiciones para el crecimiento microbiano
agua
Medios de cultivo fuente de energía
fuentes de C, N, otros
Nutrientes elementos

Crecimiento micronutrientes, factores de

crecimiento

temperatura
pH
Condicione luz

s ventilacion
actividad de agua
de cultivo
potencial redox
 Factores de crecimiento

Microorganismos auto o heterotrófos pueden

requerir pequeñas cantidades de ciertos
compuestos orgánicos que no pueden sintetizar y
deben incorporarse en los medios

* bases púricas y pirimídicas ADN, ARN

* aminoácidos esenciales síntesis
proteica
* vitaminas coenzimas
 Aislamiento

Aislar: Es separar un tipo de microorganismo a partir de una

población mixta. En habitats naturales, raramente encontramos
a los microorganismos en cultivo puro

Aislamiento directo:se logra directamente a partir de una

muestra cuando el o los microorganismos están en una
proporción adecuada., se realiza por estrías (agotamiento) con o
sin dilución previa de la muestra (suelo, alimentos), en medio
sólido

Aislamiento por enriquecimiento:Cuando el microorganismo

que se desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción
en la muestra, se incluye una primera etapa que consiste en
sembrar la muestra en medio líquido. Luego de varios pasajes
se aisla por el método de estrías.
 Clasificación de los medios de
cultivo

Según su naturaleza física

* líquidos
* sólidos - solidificante: agar-agar, silico-gel
* semi-sólidos

Según su composición
* definidos o sintéticos: composición química conocida
* no definidos o complejos: composición química no
definida, enriquecidos con peptonas, extracto de carne, de
levadura, de suelo, sangre
Según su uso en el laboratorio

* selectivos o inhibitorios: medios que contienen, además de los

nutrientes, ciertas sustancias que inhiben el desarrollo de algunos
microorganismos permitiendo el crecimiento de otros o cuya composición permite
el desarrollo de un grupo determinado
Ej.agar-antibióticos; agua, sales, luz, para algas, medios con NaCl
superior a la concentración fisiológica

* diferenciales: medios que contienen indicadores para diferenciar los

distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él.
Ej. azúcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo neutro
 Según su uso en el laboratorio

* selectivos o inhibitorios: medios que contienen, además de los

nutrientes, ciertas sustancias que inhiben el desarrollo de algunos microorganismos
permitiendo el crecimiento de otros o cuya composición permite el desarrollo de un
grupo determinado
Ej.agar-antibióticos; agua, sales, luz, para algas, medios con NaCl
superior a la concentración fisiológica

* diferenciales: medios que contienen indicadores para diferenciar los

distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él.
Ej. azúcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo neutro
Cultivo en medio líquido
• Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se
puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o película, o
por sedimento.

Cultivo en medio sólido

• Puede ser en tubos o placas
a) Tubos con agar inclinado. Para sembrarlos, se mueve el ansa o la
punta suavemente sobre la superficie del agar con un movimiento en
zigzag desde el fondo hasta la parte superior, cuidando de no dañar el
agar.
b) Tubos sin inclinar. Se siembran introduciendo una punta en el centro
del agar. También se llama siembra por picadura.
c) Siembra en placas. Puede ser en superficie (por estrías o bañado) o
incorporada (mezclando el inóculo con el agar semifundido)
 Aislamiento

Aislar: Es separar un tipo de microorganismo a partir de una

población mixta. En habitats naturales, raramente encontramos
a los microorganismos en cultivo puro

Aislamiento directo:se logra directamente a partir de una

muestra cuando el o los microorganismos están en una
proporción adecuada., se realiza por estrías (agotamiento) con o
sin dilución previa de la muestra (suelo, alimentos), en medio
sólido

Aislamiento por enriquecimiento:Cuando el microorganismo

que se desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción
en la muestra, se incluye una primera etapa que consiste en
sembrar la muestra en medio líquido. Luego de varios pasajes
se aisla por el método de estrías.
 Cultivo puro
• Las colonias se describen por examen macroscópico en función del
tamaño, la forma, el borde, la elevación, la transparencia y el color. Esto
resulta a veces muy útil en la identificación

• A partir de colonias aisladas en medio de cultivo se realiza un examen

microscópico que debe mostrar células razonablemente semejantes
respecto al Gram y a la morfología.

• Las colonias aisladas deben aislarse nuevamente en medio no selectivo

por el método de estrías. Esto se conoce como reaislamiento.
 Factores del ambiente

• físicos: temperatura, gases, pH, presión

osmótica
•químicos: nutrientes, sustancias antimicrobianas
•biológicos: otros microorganismos, micro y
mesofauna, vegetación, afectan las
actividades microbianas

Los distintos factores actúan simultáneamente

y resulta difícil el análisis integrado de los
efectos.
• Sicrófilos - rango: < 0-20°C, óptimo < 15oC
– organismos marinos, algas: Chlamydomonas nivalis (nieve rosada),
bacterias: Pseudomonas, Flavobacterium
– membrana contiene alto % de ácidos grasos insaturados
• Sicrótrofos o Sicrófilos facultativos
- rango: 0-35°C, óptimo 20-30oC
– Pseudomonas - crecen en el refrigerador
• Mesófilos - rango: 15-45° C, óptimo: 30-40°C
– la mayoría de los microorganismos (del suelo, aguas, patógenos)
• Termófilos - rango: 40-70°C, óptimo de 55-65oC
– membrana contiene alto % de ácidos grasos saturados
– enzimas estables al calor
– Bacillus stearothermophilus, organismos de compostaje
• Hipertermófilos - rango: 80-113°C, óptimo > 90oC
– Pyrococcus, Pyrodictium (aguas termales)
 Oxígeno

Clasificación de los microorganismos según

el efecto del oxígeno:
Aerobios
obligados: requieren oxígeno (21% o más)
Ej. Bacillus, hongos, etc.
microaerofílicos: lo requieren pero a niveles menores que el
atmosférico (5-10%)
Ej. Azospirillum
Anaerobios
facultativos: no requieren oxígeno, pero el desarrollo es mejor
con oxígeno.
Ej. Levaduras, E. coli
aerotolerantes: no son sensibles al oxígeno (crecen en
ausencia o presencia de oxígeno).
Ej. Enterococcus faecalis, Sreptococcus spp.
.
obligados: no toleran el oxígeno, muere en su presencia
Ej. Methanobacterium, Clostridium
 Cultivos en anaerobiosis
•tubos con medio de cultivo llenos por completo.
•medios con sustancias que reaccionan con el oxígeno y lo excluyen.
•dispositivo especial (cámara anaeróbica)
•cajas o tubos incubados en recipientes con granos germinados (cebada, centeno)
 Otros gases
N2 componente principal de de la atmósfera (78%). Gas inerte: no es
usado por la mayoría de los organismos, los que pueden reducir el
triple enlace del N2 con la enzima nitrogenasa se denominan
diazotrofos o fijadores de N2 y pueden desarrollarse en ambientes sin
N-combinado
CO tóxico para la mayoría de los organismos (cadena respiratoria)
puede ser oxidado a CO2 por algunos microorganismos
CH4 liberado a la atmósfera por microorganismos metanogénicos, gas
con efecto invernadero, puede ser oxidado a CO2 por bacterias
metanotróficas
CO2 importante gas, fuente de carbono para los autotrofos, aerobios y
anaerobios, fotosintéticos o quimiosintéticos. Muchos hongos lo
requieren a niveles superiores a los atmósfericos, para ciertas síntesis
H2 poco usado, tóxico para la mayoría de los microorganismos, brinda
energía a bacterias Hydrogenomonas: H2+O2 = H20 + ATP
 pH
El pH es la acidez o alcalinidad de una solución,
medida por el log 1/(H+)

Clasificación de los microorganismos según su pH

óptimo
Neutrófilo: pH óptimo 7 - Ej.: bacterias
patógenas humanas.
Acidófilo: pH óptimo  7 - Ej.: muchas de las
archeobacterias y hongos.
Basófilo: pH óptimo  7 - Suelos y aguas
ricas en carbonatos
 Crecimiento Microbiano
• Concepto: es el aumento poblacional de una
especie microbiana en un medio de cultivo
provisto de todas las necesidades del
microorganismo (cantidad de Nutrientes,
Temperatura, Grado de Humedad, gases y pH)
• Par la cuantificación del crecimiento se utilizara el
método de espectrofotometría en donde se observa el
aumento de la población de microorganismos por el
aumento en la longitud de honda del espectro de
absorción.
División celular: fisión binaria

Gemación
, ej.
levaduras
Fisión Binaria
Crecimiento de un microorganismo en
medio de cultivo líquido

1- Fase de latencia
2- Fase
exponencial
3- Fase
estacionaria
 Fase de latencia
•La fase de latencia representa un periodo de transición para los
microorganismos cuando son transferidos a una nueva condición.

•En esta fase se producen las enzimas necesarias para que ellos puedan crecer
en un nuevo medio ambiente.

•En esta fase no hay incremento en el número de células, pero hay gran
actividad metabólica, aumento en el tamaño individual de las células, en el
contenido proteico, ADN y peso seco de las células.
 Fase crecimiento exponencial
• Es el período de la curva de crecimiento en el
cual el microorganismo crece exponencialmente,
es decir que cada vez que pasa un tiempo de
generación la población se duplica.

• Bajo condiciones apropiadas la velocidad de

crecimiento es máxima. Las condiciones
ambientales (temperatura, composición del
medio de cultivo, etc.) afectan a la velocidad de
crecimiento exponencial.
 Fase estacionaria
• En cultivos en recipientes cerrados una población
no puede crecer indefinidamente en forma
exponencial.

• Las limitaciones del crecimiento ocurren ya sea

por agotamiento de algún nutriente esencial, por
acumulación de productos tóxicos, porque se
alcance un número de células elevado para el
espacio disponible o por una combinación de las
causas anteriores.
 Fase de muerte
• Si la incubación continúa después de que una
población microbiana alcanza la fase
estacionaria, las células pueden seguir vivas y
continuar metabolizando, pero va a comenzar
una disminución progresiva en el número de
células viables y cuando esto ocurre se dice
que la población ha entrado en fase de
muerte.
Curva de crecimiento bacteriano
 CLASIFICACION BACTERIANA
La comprensión de la relevancia y de la compleja
nomenclatura de los centenares de bacterias
importante puede constituir un considerable
desafío.

Sin embargo, la clave de esta tarea depende de

la organización sistemática del desconcertante
conjunto de diferentes microorganismos en
unas relaciones lógicas (es decir, de una
clasificación taxonómica de los
microorganismos).
Clasificación fenotípica de las bacterias

• Morfología microscópica
• Serotipo
• Morfología macroscópica
• Patrones de antibiograma
• Biotipo
• Fagotipo
 Clasificación analítica de las bacterias

• Análisis de los ácidos grasos de la pared

celular
• Análisis de los lípidos celulares totales
• Análisis de las proteínas celulares totales
• Electroforesis enzimática tipo multifocus locus
 Clasificación genotípica de las
bacterias
• Relación guanina cítosina
• Análisis de la secuencia del ácido nucleíco
• Análisis de plásmidos
• Ribotipifícación
• Fragmento de ADN cromosómico
 Cocos Gram positivos aerobios

Cocos catalasa-positivos Cocos catalasa-negativos

• Micrococcus • Aerococcus
• Staphylococcus • Alloiococcus
• Enterococcus
• Lactococcus
• Leuconostoc
• Pediococcus
• Streptococcus
 Cocos y cocobacilos Helicobacteriaceae
• Branhamella • Helicobacter
• Moraxella • Pseudomonadaceae
• Neisseria • Pseudomonas
• Pasteurellaceae
• Actinobacillus
• Haemophilus
• Pasteurella
 Bacilos Vibrionaceae
• Enterobacteriaceae
• Citrobacter
• Vibrio
• Enterobacter • Aeromonadaceae
• Escheríchia • Aeromonas
• Ktebsiella
• Morganella • Campylobacteriaceae
• Plesiomonas • Arcobacter
• Proteus
• Salmonella • Campylobacter
• Serratia
• Shigella
• Yersinia
 Otros géneros
• Acinetobacter
• Bartonella
• Bordetella
• Brucella
• Burkholdería
• Capnocytophaga
• Cardiobacteríum
• Eikenella
• Francisella
• Kingella
• Legionella
• Stenotrophomonas
• Streptobacillus
 Bacilos grampositivos aerobios
Actinomicetos con ácidos Actinomicetos sin ácidos
micólicos en la pared celular micólicos en la pared celular
• Corynebacterium • Actinomadura
• Dermatophüus
• Gordonia • Nocardiopsis
• Nocardia • Oerskovia
• Rhodococcus • Rothia
• Streptomyces
• Tsukamurella • Actinomicetos termofílicos
• Mycobacteríum • Saccharomonospora
• Saccharopolyspora
• Thermoactinomyces
• Tropheryma
 Otros bacilos grampositivos

• Arcanobacteríum
• Bacillus
• Brevibacterium
• Erysipetothrix
• Gardnerella
• Listeria
• Turícelía
 Bacterias grampositivas y
gramnegativas anaerobias
Cocos grampositivos Cocos gramnegativos
• Anaerococcus • Veillonella
• Finegoldia
• Micromonas
• Peptostreptococcus
• Schleiferella
Bacilos grampositivos Bacilos gramnegativos
• Actinomyces • Bacte mides
• Bifidobacteríum • Fusobacterium
• Clostrídium • Porphyromonas
• Eubacterium • Prevotella
• Lactobacillus
• Mobiluncus
• Propionibacterium
 Bacterias diversas con importancia
médica

• Mycoplasmataceae • Chlamydiaceae
• Mycoplasma • Chlamydia
• Urea plasma • Chlamydophila
• Spirochaetaceae • Otras bacterias
• Borrelia • Coxiella
• Treponema • Ehrlichia
• Leptospiraceae • Oríentia
• Leptospira • Rickettsia
Es todo por hoy