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INTERNO EN
PARASITOLOGA CLNICA
Ana Mara Bacca Meneses
David Julian Zambrano
Bacteriologa y Laboratorio Clnico
Escuela Bacteriologa y Laboratorio Clnico
Universidad del Valle
QU IMPLICA UN DIAGNSTICO
PARASITOLGICO?
Utilizar muestras satisfactorias.
Preparar y conservar adecuadamente los reactivos.
Realizar cuidadosamente los procedimientos tcnicos
seleccionados.
Examinar
realizadas.
meticulosamente
las
preparaciones
Tomado de:
http://1080.plus/FROTIS_DE_HECES_by_PARASITOLOGIA_UCE/1GsccAeEZPA.vi
deo
y las
El
control
de
calidad
interno
debe
ser
parte
integral
de
un
laboratorio
clnico
Cuenta con una serie de recomendaciones relacionadas con las tcnicas de diagnstico de parasitosis
humanas
CICLO EXAMEN DE
LABORATORIO
Mdico o paciente
Solicitud de exmenes
Validacin de
resultados
Anlisis de la
muestra
Toma de muestras en o
envo al laboratorio
Asegura:
1.
2.
3.
4.
5.
Solicitud de anlisis.
Preparacin del paciente.
Recoleccin de la muestra.
Conservacin.
Transporte.
Tomado de:
http://www.laboratorioconsultores.com/carboni/index.php?
option=com_content&view=article&id=45&catid=10&Itemid=117
SOLICITUD DE ANLISIS
RECOLECCIN DE LA MUESTRA
Material tomado del lugar en el cual se desarrolla una infeccin y que se emplea para la
determinacin del agente etiolgico.
Heces, sangre, orina, esputo, pus, LCR, humor vtreo o acuoso, lquido sinovial, flujos
(vaginal/prosttico),lavado bronco-alveolar, biopsias de tejidos, aspirados de piel, bazo, hgado y
medula sea.
*Un fragmento de un parsito o el organismo entero pueden constituir una muestra clnica.
Calidad de la muestra.
Cantidad de muestra.
Nmero de muestras que se estudian.
Control del tiempo transcurrido entre la
toma de la muestra y su entrega en el
laboratorio
Tomado de: http://bioquimicasaludyvida.blogspot.com.co/2015_09_01_archive.html
Ejemplos:
Heces: Examen til para demostrar parsitos
localizados en:
Intestinos
Hgado
Sangre
Pulmones
lcera cutnea
Ascaris, Trichuris
Fasciola heptica
Trypanosoma cruzi, malaria
Paragonimus sp
Leishmania
Tomado de: http://keckmedicine.adam.com/content.aspx?productId=118&pid=5&gid=003729
Cryptosporidium sp.
Isospora belli
Giardia lamblia
Strongyloides stercoralis
Ooquiste
Ooquiste
Trofozoto, quiste
Larva
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Examen microscpico
Mtodos directos
Tinciones permanentes
Concentraciones de heces
Examen serolgico
Respuesta a anticuerpos
Tomado de: http://www.onmeda.es/videos/rayos-x.html
Deteccin de antgenos
Hibridacin de A. nucleicos
Sondas y tcnicas de amplificacin
Cultivo
Inoculacin de animales
Xenodiagnstico
Examen macroscpico
Resonancia magntica
Rayos X
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La
REFRIGERACIN: Permite conservar las formas parasitarias durante mximo un da, excepto los
trofozoitos. Se deben guardar a 4C.
FIJACIN: Consiste en agregar a la materia fecal alguna sustancia qumica que evite descomposicin de
las muestras. Se recomienda varios mtodos:
FASE ANALTICA
Verificar la correcta toma de la muestra por parte
del paciente.
Procesamiento correcto por personal entrenado
que siga los protocolos especficos para el tipo
de muestra y parsito en cuestin.
La conservacin, manejo y envo de muestras
cuando no se procesan inmediatamente o
requieren ms pruebas.
Llenado correcto de formatos.
Qu se debe hacer?
Qu no se debe hacer?
Intercambiar
diferentes
las
lentes
entre
microscopios
Protocolo de calibracin
Retirar un ocular del microscopio y quitarle la lente superior del mismo.
Colocar la lenta ocular micromtrica en el limitador del campo visual.
Insertar el ocular en el microscopio.
Colocar el portaobjetos micromtrico sobre la platina del microscopio.
Enfocar la escala graduada del portaobjetos micromtrico con el
objetivo 10X, y ajustar las escalas del ocular y del portaobjetos hasta
que queden paralelas.
Anotar el nmero de divisiones del ocular y la medida correspondiente
del portaobjetos micromtrico, por ejemplo: 33 divisiones del ocular =
22 mm.
Calcular el valor de una divisin del ocular, por ejemplo: 22/33
=0.0066= 6.6 mm entonces 1 unidad ocular es igual a 6.6 mm para este
objetivo
Realizar esta operacin para cada objetivo, y anotar los resultados
El personal del laboratorio debe comprobar la fecha de caducidad de los reactivos antes de su utilizacin,
y proceder en su caso a su sustitucin. Lo ideal sera que el sistema informtico del laboratorio contase
con un sistema de control de caducidad.
Cada vez que se proceda a la sustitucin de un reactivo, o se introduzca uno nuevo, debe realizarse el
correspondiente control de eficacia.
EXAMEN DIRECTO
EN SOLUCIN SALINA:
Su propsito es reconocer trofozoitos de protozoos y otros estadios de diagnostico
de helmintos y protozoos y elementos que aparecen en situaciones anormales. Es
el mejor mtodo para detectar trofozoitos en una amebiasis por Entamoeba
histolytica; para ejecutar cuenta de huevos de algunos helmintos para stimar
intensidad de la infeccin.
EN SOLUCIN DE LUGOL:
Su propsito es colorear en forma temporal trofozoitos y quistes de protozoos,
como tambin es til para inmovilizar larvas.
8.5 g
1000 mL
Iodo en cristales
Ioduro de potasio
Agua destilada
2.5 g
5.0 g
50mL
MATERIALES:
Flotacin y la sedimentacin
TCNICAS DE SEDIMENTACIN
CONCENTRACIN POR FORMALINA-ACETATO DE ETILO:
Su propsito es concentrar huevos y larvas de helmintos y ooquistes y quistes de protozoos de las heces. Se
recurre a este mtodo cuando el examen directo es negativo, cuando la excrecin de quistes/ooquistes es
baja e intermitente o para descartar infecciones leves en general, sobre todo si otros mtodos (sulfato de zinc,
Sheather) no han ofrecido resultados esperados. El mtodo original utilizaba ter, pero esta sustancia se ha
sustituido por acetato de etilo por ser menos inflamable y explosiva que el ter. Algunos sugieren centrifugar
por 10 minutos en vez de dos minutos cuando se desea recobrar ooquistes de apicomplexa, pero
encontramos que esta duracin en el centrifugado forma demasiado sedimento de heces que impide realizar
el examen parasitolgico.
PREPARACIN DE REACTIVOS
Formalina al: 10%
Formaldehdo 10 mL
Agua destilada 90 mL o solucin salina al 0.85%
MATERIALES:
VENTAJAS :
Puede utilizarse con heces frescas o heces fijadas
previamente en formalina o en Mertiolate-Iodo-Formalina
(MIF); los quistes de protozoos no se deforman; puede
demorarse en examinar el sedimento ms que en
mtodos por flotacin; es adecuado tanto para huevos de
nemtodos como de cstodos y tremtodos; produce
menos errores tcnicos que otras concentraciones.
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DESVENTAJAS:
TCNICAS DE FLOTACIN
MTODO DE FLOTACIN POR SULFATO DE ZINC:
Su propsito es concentrar huevos de ciertos helmintos y quistes de protozoos cuando las infecciones
son muy leves y no se detectan en preparaciones directas.
MATERIALES:
Hidrmetro (Curtis Matheson Scientific Inc) para medir gravedad especifica, rango 1,000- 2,000)
Solucin de sulfato de zinc, densidad 1.18 (para heces frescas) Cuadrados de gasa de 16 X 16 cm, en 2 dobleces
Embudos de 5 cm de dimetro
Aplicadores
Tubos de ensayo, vasos de papel o vasos plsticos pequeos para hacer una suspensin de heces
Porta objetos, 7.5 x 2.5 cm (3 X 1 pulgada) 7.5 x 5 cm (3 X 2 pulgadas)
Cubre-objetos 22 X 22 mm, No. 1 No. 2
Solucin de Lugol Asa bacteriolgica de 5-7 mm de dimetro Gradilla para tubos
Solucin salina fisiolgica
METODO DE FAUST
Mtodo de Ritchie
INTENSIDAD DE LA INFECCIN
PARSITO
LEVE
MODERADA
SEVERA
A. Lumbricoides
1-49
49-200
Mayor 200
T. trichiura
1-10
11-50
50 O mas
Uncinarias
1-10
11-50
50 O mas
coproparasitoscpico por
concentracin
Muestras positivas
RESULTADO
En algunos casos el resultado que emite
el laboratorio NO es definitivo.
Siempre se debe contrastar o
correlacionar este con la historia clnica y
la epidemiologa del caso para llegar a
una conclusin final
BIBLIOGRAFA
Grupo colaborador GEGMIC, Hospital Clnico Universitario de Valencia y Facultad de Medicina.
Recomendaciones para el control de calidad interno. Espaa; 2004. 5 pg. Disponible en:
https://
www.seimc.org/contenidos/gruposdeestudio/gegmic/dcientificos/documentos/gegmic_dyc1_2004.p
df
B. L. CLINE, M. HABIB, F. GAMIL, F. ABDEL-AZIZ, D. LITTLE. Quality control for parasitologic
data. The American Society of Tropical By Medicine and Hygiene. Am. J. Trop. Med. Hyg., 62(2)S,
2000, 14-16pg
M M Kettelhut, P L Chiodini, H Edwards, A Moody. External quality assessment schemes raise
standards:
evidence from the UKNEQAS parasitology subschemes; (56):927932, noviembre 2015.
ZAPATA VALENCIA, Jorge Ivn. Feb 2015. Muestras, tecnicas y control de calidad.
Parasitologiajizv.blogspot.com.co
(mensaje
de
un
blog).
Disponible
en:
http://parasitologiajizv.blogspot.com.co/p/micro-medica.html
GRACIAS!