Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
RESUMEN
METABOLITO _
PRIMARIO / BRIX / VELOCIDAD _ ESPECFICA_ DE_CRECIMIENTO/ TIEMPO _
DE _ DUPLICACIN
PRACTICA N 2
FERMENTACIN ALCOHLICA (DESARROLLO DE LA CERVEZA Y CURVA DE
CRECIMIENTO MICROBIANO)
1. INTRODUCCIN
El crecimiento es el incremento ordenado de todos los constituyentes celulares a lo largo de
un determinado tiempo que conducen a un aumento de biomasa y de metabolito. Para que el
crecimiento microbiano tenga lugar es necesario un aporte adecuado de nutrientes; Todos
los microorganismos tienen requerimientos nutricionales para su correcto desarrollo, tales
como carbono, nitrgeno, hidrgeno, Oxgeno, Azufre, Fsforo y diversos minerales para
crecer, adems de nutrientes especiales, y condiciones adecuadas o ptimas de pH,
temperatura, un sistema homogneo en donde los nutrientes lleguen a cada uno de ellos, y
la necesidad o no de oxgeno. Gracias a todos estos requerimientos hacen que el
microorganismo se reproduzca y permita identificarlo debido a ese crecimiento nico, a
partir de eso podemos crear curvas de identificacin que las denominamos curva de
crecimiento microbiano. Las cuales permiten determinar el tipo de reaccin de
microorganismo que se necesita para una ptima fermentacin.
2. OBJETIVOS
2.1. Elaborar de la curva de crecimiento microbiano para la levadura Saccharomyces
Cerevisiae.
2.2. Identificar de las variables en una fermentacin alcohlica para un proceso discontinuo.
2.3. Visualizar del proceso de gemacin de la levadura Saccharomyces Cerevisiae.
2.4. Obtener metabolito primario de una fermentacin alcohlica.
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiales y Equipos
3.1.1.
3.1.2.
Microscopio
Portaobjetos
3.1.3.
3.1.4.
3.1.5.
3.1.6.
3.1.7.
3.1.8.
3.1.9.
3.1.10.
3.1.11.
3.1.12.
3.1.13.
3.1.14.
3.1.15.
3.1.16.
Cubreobjetos
Tubos de ensayo
Estufa Memmert
Balanza Analtica
R= (0-200) g
Fermentador
R=(0-6) L
Brixmetro
R= (0-30) Brix
Cajas Petri
Vasos de precipitacin
R=(0-200) ml
Pipetas
R= (0-10) ml
Reverberos
Olla
Globos (pequeos y 1 grande)
Papel Filtro
. Embudo
A=0.001g
A=0.1 Brix
A= 50 ml
A= 0.1 ml
Agua estril
H2O
Dextrosa
C6H12O6
Sal
NaCl
Saccharomyces cerevisiae
Lpulo
3.3. Procedimiento
3.3.1.
3.3.1.1. Preparar una mezcla con una pizca de levaduras, una cucharada de agua
tibia y una pizca de azcar.
3.3.1.2. Dejar reposar 5-10 minutos.
3.3.1.3. Colocar sobre el portaobjetos y cubrir con el cubreobjetos.
3.3.1.4. Observar bajo el microscopio con un objetivo de fuerte aumento.
3.3.1.5. Dibujar lo que se observa. Nota: en caso de no poder observar claramente
se debe probar alternativas para mejorar el preparado, por ejemplo,
variando la cantidad de levadura que se coloca en la muestra.
3.3.2.
3.3.2.1.2.
3.3.2.1.3.
3.3.2.1.4.
3.3.2.1.5.
3.3.3.
Parte C: Fermentacin
Parte D: Embotellado
DATOS
4.1. Datos Experimentales
Tabla 4.1.-1
Datos de los pesos de las muestras
TIEMPO
[h]
mL aadidos
PESO CAJA
PETRI [g]
PESO SECO, 24
horas
[g/mL]
BRIX
0
1
2
5
5
5
18.4339
18.6755
20.1248
23.836
21.529
21.5157
0.18846
0.2349
0.26954
16.2
16
15.9
3
4
5
5
5
5
18.8578
13.4853
83.72
21.147
18,914
88,6722
0.30542
0.30532
0.4353
MALTA
Cebada que ha germinado y ha sido
tostada en un proceso que suele
denominarse malteado, concentracin
para la prctica 29.41% (p/v)
ADITIVOS/CANTIDAD
Dextrosa/ 6g
3
DENSIDAD (Kg/m )
284.15
BRIX
16,2
Fuente: Datos analizados antes de inoculacin en el Laboratorio de Biotecnologa
Tabla 4.2.-2
Condiciones ptimas de la Saccharomyces Cerevisiae
TEMPERATURA C
25-30
CONCENTRACIN AZCAR (%M/V)
10-12
PH
3-6
Fuente: repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/11059/1689/1/66182G245.pdf
5.
CLCULOS
5.1. Clculo de la velocidad especfica de crecimiento.
Ln(X)=mt+b; b=ln(X)o
lnX=lnXo+ut
Donde:Ecu 5.1-.1
m=0.1456
b=-1.6359
*Por lo que u=m=0.1456/h
15.9
15.8
15.8
Y=ln(x)
-1.669
-1.4485
-1.31
-1.186
-1.1864
-0.83171
X=t
0
1
2
3
4
5
X=t
0
1
2
3
4
5
Ln(X)=mt+b; b=ln(x)o ;
m=u=ln(2)/td
Donde:
m=0.1456
b=-1.6359
*Por lo que u=m=0.1456/h
Td=ln(2)/(0.1456/h)
Td=4.56h
6. RESULTADOS
Tabla 6.1.-1
Datos registrados para la curva
Tiempo,h
0
1
2
Paul Vallejo Posso
Ayudante de Ctedra
lnX
-1.669
-1.4485
-1.31
3
4
5
0.30542
0.30532
0.4353
-1.186
-1.1864
-0.83171
Tabla 6.1.-2
Resultados finales
Fermentacin
Microorganismo
Anaerobia
Saccharomyces
Cerevisiae
Velocidad especfica de
crecimiento (1/s)
4.044*10-5
Tiempo de
duplicacin (h)
4.56
Tabla 6.1.-3
Identificacin de fases
Fase
Latencia
Crecimiento exponencial
Tiempo de fermentacin
<1h
>1h
7. DISCUSIN
El mtodo cuantitativo-cualitativo utilizado para la experimentacin es vlido, ya que se
pudo determinar cuantitativamente las variables de fermentacin para un proceso
discontinuo, adems que cualitativamente se pudo apreciar el proceso de gemacin de la
Saccharomyces Cerevisiae, y mediante los grados BRIX se observ que el contenido
porcentual de azcar disminua conforme el proceso de fermentacin se produca, para la
obtencin del metabolito primario de esta levadura, el cual es el alcohol. Se produjeron
errores sistemticos en la prctica, ms no aleatorios, ya que en el proceso de calentamiento
del mosto, las resistencias de los reverberos dejaron de funcionar, por lo cual la temperatura
ptima en el proceso no se pudo mantener durante un lapso de tiempo lo cual si no se
controlaba rpidamente, los resultados iban a ser errneos, ya que el lpulo a temperaturas
de proceso establecidas y relativamente altas, tienen la capacidad de desdoblar cidos y se
polimerizan, perdiendo as su poder de amargor, brindando de esta manera un aroma y
sabor nico a la cerveza, y si no se controlaba la temperatura, la funcin del lpulo sera
mnima o escaza . Las medidas de acondicionamiento se manejaron con normalidad y todo
Paul Vallejo Posso
Ayudante de Ctedra
9. ANEXOS
9.1. Grfica X=f(t) con fases identificadas.
ANEXO 1
y[g/mL]
0.4
Comcentracin(g/mL)
Latencia
0.2
0
0
Tiempo(h)
Figura 9.1.1
Grfica X=f(t) con fases identificadas.
Fuente: Pintado, Alejandro (2016), Universidad Central del Ecuador
ESCALA
Y 1.3 cm=0.1(mg/ml)
X 0.8cm=1 h
Nombres
Fecha
x [h]
y[g/mL]
Universidad Central del Ecuador
Pintado A
Dibuja:
Facultad de Ingeniera Qumica
2016-06-12
0.18846
0
Escuela de Ingeniera Qumica
Revisa: 1 Posso P 0.2349
2016-06-12
FERMENTACIN
0.26954 ALCOHLICA (DESARROLLO DE LA
Escala: 2
Lmina
CERVEZA Y CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO)
0.30542
3
1
0.30532
4
0.4353
5
9.2. Grfica lnX=lnXo+ut
ANEXO 2
lnX=lnXo+ut
0
-0.20
-0.4
-0.6
-0.8
lnX
-1
-1.2
-1.4
-1.6
-1.8
Tiempo(h)
Figura 9.2.1
Grfica lnX=lnXo+ut.
Fuente: Pintado, Alejandro (2016), Universidad Central del Ecuador
ESCALA
Y 1.3 cm
X 0.8cm=1 h
Nombres
Dibuja:
Pintado A
Revisa:
Posso P
Escala:
y
x [h]
-1.669
0
-1.4485
1
-1.31
2
3
-1.186
Fecha
4
-1.1864
Universidad Central del Ecuador
Facultad de Ingeniera Qumica
5 2016-06-12
-0.83171
Escuela de Ingeniera Qumica
2016-06-12
Lmina
Figura 9.3.1
Diagrama del equipo
Fuente: Laboratorios de Ingeniera Qumica
Nombres
Fecha
Dibuja:
Pintado A
2016-06-12
Revisa:
Posso P
2016-06-12
Escala:
Lmina
Sol(NaCl)
Agua
Solucin
Mezclado
Mezcla
Sol (C6H12O6)
Mezclado
T=68 C
Solucin
Mezclado
T=73 C
Desintegracin
mecnica de slidos
Malta
Filtracin
Calentamiento
Mosto
Lpulo
Malta
Malta
Agua
T=25 C
Mosto
Mosto
Decantacin
t=1 semana
Levaduras
Mosto
Filtracin
Mosto
Mosto
T=0 C
Evaporacin
Enfriamiento
Mosto
Mosto
CO2
Mosto
T=68 C
Mezclado
Fermentacin
Filtracin
Agua
Agua (g)
Gasificacin
Cerveza
Dextrosa
Figura 9.5.1
Diagrama de flujo del proceso
Pintado A
2016-06-12
Revisa:
Posso P
2016-06-12
Escala:
Lmina
4
Paul Vallejo Posso
Ayudante de Ctedra
Figura 9.5.1
Reporte fotogrfico, gemacin
Fuente: Laboratorios de Ingeniera Qumica
Nombres
Fecha
Dibuja:
Pintado A
2016-06-12
Revisa:
Posso P
2016-06-12
Escala:
Paul Vallejo
Posso
Ayudante de Ctedra
Lmina
10. CUESTIONARIO
10.1.
corona con el jugo de uva o con agua y se deja por otros diez das, volvindole a vertir
el jugo cada vez que disminuya. Durante ese tiempo, las burbujas deben desaparecer.
El lquido es vuelto a colarse y vertido en botellas de vino. Una vez que se han llenado
las botellas con el vino (dejando una pulgada- 2.5 cm- de espacio de la parte de arriba),
coloca los corchos en las tapas y almacnalo en un lugar oscuro y fresco por seis meses
antes de consumirlo.
Primero, debe prepararse el jugo vegetal. Para ello, se prensa la materia prima: trigo,
centeno, papa u otro producto con agua. Se calienta para convertir su fcula en azcar
y dar lugar a un lquido espeso llamado mosto. Se agrega levadura para que se
produzca la fermentacin y para que mediante la destilacin se obtenga el aguardiente
base, despus de que se han separado sus componentes bsicos agua, alcohol, metanol
y fusenol. Se utiliza un alambique continuo que cuenta con dos columnas: el analizador
y el rectificador. Se introduce vapor caliente en la parte inferior del analizador, que
asciende por los compartimientos, calentndolos a su paso. Tambin, se introduce, por
va del rectificador, una pequea cantidad de lquido fermentado en la parte superior,
que cae por las planchas que el vapor ha calentado a su vez.
De esta manera, se calienta el lquido, el alcohol empieza a evaporarse y cuando el
lquido cae a la parte inferior de la columna, se extrae la mayor parte de su alcohol
mediante un sifn. Los vapores del aguardiente y el vapor restante salen por la parte
superior de la columna a travs de un conducto que los lleva al rectificador.
Tras la destilacin y la rectificacin, el vodka se reduce a la graduacin requerida,
aadindole agua para luego filtrar y purificar, momento en que se eliminan los
elementos aromticos, para lograr esa bebida sin sabor. Para ello, se emplea carbn
vegetal; en Rusia siempre se ha utilizado madera de abedul para producirlo. Cuando se
calienta el carbn, da el aspecto de una esponja. Se introduce en los filtros y luego se
bombea el vodka. La filtracin mediante carbn vegetal debe controlarse, porque
cuando el material se satura con las impurezas, pierde sus cualidades absorbentes.
*PROCESO DE OBTENCIN DE RN
El
proceso
de destilacin consiste
en
mezclar
agua
con cebada y
dejar fermentar y aejar por lo menos dos aos. El primer paso es el malteado de la
cebada. Para ello, sta se remoja y se escurre varias veces a una temperatura
aproximada de 13 durante unos tres das. Luego es trasladada a tambores o recipientes
industriales de gran capacidad donde se deja germinar, gracias a la humedad obtenida,
durante seis das. Al germinar el cereal, el almidn de la cebada se convierte
en azcar (de donde luego se sacar parte del alcohol en la destilacin).
Una vez germinada, la cebada se seca en hornos mediante el humo de turba (carbn
vegetal que adems le da aroma a la malta). El proceso de secado/ahumado dura tres
das y suele ser a una temperatura de 70. La cebada germinada toma color oscuro,
tpico del caramelizamiento por accin del calor, y es cuando podemos hablar de la
malta como tal.
A continuacin la malta seca y tostada, es molida y se mezcla con agua caliente en un
tanque. El mosto, o mezcla, obtenido es similar al de una cerveza turbia y ste se llama
wort. Es el momento de aadir las levaduras, que harn posible la fermentacin. Este
mosto se pasa a cubas donde se dejar fermentar tres das a 33.
Llegamos a la destilacin. El wash (wort fermentado) se destila dos veces, en
alambiques pot still y spirit still. De la primera destilacin en pot still obtendremos un
llamado low wine de 25-30, y al destilar stos en la segunda destilacin, obtendremos
un whisky de 60-70.
Por ltimo llegamos al envejecimiento. Cada tipo de whisky utiliza un tipo de madera
en el barril, tambin es la destilera quien decide si utilizar barriles nuevos, o no,
quemados, o no, etc. En el caso de los whiskies de malta, los barriles han de ser de
roble y que anteriormente hayan contenido vinos de Jerez o Bourbon. La edad vara
dependiendo de la denominacin, destilera y propsito. La madera del barril aporta
aroma, taninos y sabor, como en el caso de los vinos, y en la mayora de casos, se
regula el color del producto mediante adicin de caramelo.
Una vez listo el producto, podremos comercializarlo como tal, realizar mezclas para
obtener blended