Anlisis HPLC de nica inyeccin

de cidos, azcares y alcoholes

Nathalia Jaimes Veg
en fermentaciones de pepino Geraldine Bustos
Carolina Aponte

Introduccin

Introduccin

Cromatograma

Cromforo

Refraccin

Materiales y
Mtodos
Sistema

Cromatogrfico

Cuenta con: una bomba de gradiente

Dionex gmp-2,
inyector Rheodyne
modelo 9125, columna de intercambio
catinico Bio-rad, columna de cido
orgnica Phenomenex ROA, supresor de
micromembrana
Dionex
AMMS-II,
mdulo de suministro de reactivos
Dionex RDM, detector de conductividad
Dionex CDM-II, bobina de reaccin
Dionex 122 cm, cmara de depsito
presurizable Dionex, Dionex PAD con
electrodo de oro y un mdulo
desgasificador Dionex EDM-2

Materiales y
Mtodos
Condiciones
de
Operacin

65
C

1,7 mL/min

cido
heptafluorobutrico1.6
mM/Agua

Materiales y
Mtodos
Condiciones
de
Operacin

65
C

Se reduce la conductividad del eluyente con

2 mL/min de hidrxido de terabutilamonio 5
mM como solucin supresora.
El eluyente se mezcl con NaOH 0,3 N a
una velocidad de flujo de 0,7 mL / min.

Materiales y
Mtodos
Preparacin
de
muestras
1-propanol
50 mM
Ac. succnico
1 mM

Glicerol
1 mM

Etanol
50 mM
Glucosa
1,2 mM

Ac. lctico
6 mM
Ac. actico
Fructosa
5 mM
1,2 mM
Ac. mlico
Ac. propinico 1 mM
Ac. butrico
5 mM
5 mM
Agua

MUESTRA

Materiales y
Mtodos
Diseo Experimental
Se integran los 66 cromatogramas generados por cuatro
mtodos:
1.
2.
3.
4.

rea del pico/ Estndar interno

rea del pico/ standar externo
Altura del pico/ Estndar interno
Altura del pico/ Estndar externo

Se calcula por regresin lineal en SAS STAT.

Materiales y
Mtodos
Diseo Experimental
Cuadrados Latinos
Mutuamente Ortogonales

Resultados y
Discusin

Inyeccin nica

Resultados y
Discusin

Pepin
o

Salmuer
a

Resultados y
Discusin
Centrifugaci
n

Resultados y
Discusin

Resultados y
Discusin

Resultados y
Discusin

Conclusiones
El sistema dual de deteccin fue bastante
estable cromatogrficamente, mecnicamente y
electrnicamente, tal que funciono durante
periodos prolongados con poco tiempo de
inactividad.
Las interferencias que se observan con detector
de ndice de refraccin RI, no se presentan con
sta tcnica.
La sensibilidad de la deteccin de azucares y
cidos orgnicos fue considerablemente mayor
que con el detector RI o el detector UV.
A pesar de la baja sensibilidad de deteccin, la
presencia de etanol y 1-propanol a bajos niveles
se pudo observar debido a la alta estabilidad de
la lnea base.

Referencias
Corts Prez, C. (2011). Propiedades y
Aplicaciones de los Cuadrados Latinos
(Maestra). Universidad Autnoma
Metropolitana.
Refraccin de la luz y ley de Snell - Fsica
de nivel bsico, nada complejo... Fisic.ch.
Recuperado de:
http://www.fisic.ch/cursos/primeromedio/refracci%C3%B3n-de-la-luz-y-ley-desnell/