INFORME DE LABORATORIO 3

CROMATOGRAFIA
PRESENTADO POR:
JOSE DAVID SERNA MORALES
JESUS ALEJANDRO GAMBOA MESA
PROFESORA:
LUZ AMPARO VLEZ
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
ESCUELA DE MICROBIOLOGIA
ASIGNATURA:
QUIMICA Y LABORATORIO
MEDELLIN

2016

Objetivo general:
-

Separar una mezcla de compuestos orgnicos en solucin, mediante

cromatografa de capa fina.

Objetivos especficos:
-

Identificar cada uno de los compuestos separados comparndolos con

muestras patrones

Calcular el factor de retardo para cada una de las especies separadas

incluyendo la muestra desconocida.

Identificar el compuesto en la muestra problema.

Separar acetaminofn y cafena de un frmaco por cromatografa de

columna.

MARCO TERICO

La cromatografa en capa fina es una tcnica usada para separar molculas

relativamente pequeas, al igual que otras cromatografas utiliza una fase mvil y
una fase estacionaria y su principio es el mismo; la sustancia de inters se adhiere
a la fase estacionaria o se mueve con la fase mvil, la fase estacionaria puede ser
variada; puede ser de papel, celulosa o de un gel de silicato unido a una superficie
slida, una placa de aluminio, vidrio, plstico o papel, el tipo de fase estacionaria
depende del tipo de molculas que se quiere separar. La fase estacionaria
consiste en agua un solvente orgnico o una mezcla de ambos. La cromatografa
en capa fina permite, determinar el grado de pureza de unas sustancias, comparar
muestras y realizar el seguimiento de una reaccin.
Cromatografa de columna, En este tipo de cromatografa, la fase estacionaria
utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio,
la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la
columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase mvil.
Seguidamente la mezcla orgnica que nos interesa separar la depositamos por la
parte superior de la fase estacionaria, y as la fase mvil podr ir atravesando el
sistema.

DATOS
Fase 8.2

Fase 6.4

Acido Glico
Acido Glico

Resorcinol
Resorcinol

B-naftol

B-naftol

P
M

RESULTADOOS
Luego de realizar la prueba se puede observar que la elucin situ a los
compuestos de la siguiente manera, B-naftol, Resorcinol y cido glico, ordenadas
por su polaridad, en ambas placas se puede observar que aparentemente la
muestra carece de resorcinol, teniendo porciones de cido glico y B-naftol . A
partir de la placa 6.4 por su mayor resolucin realizaremos los clculos del factor
de retardo.

5,52 cm

4,67 cm
2,28 cm

La distancia recorrida por

de este dato se calculara
compuestos.

0.03 cm

el solvente fue de 5,52 cm a partir

el factor de retardo para los

En muestra desconocida #48: en la muestra aparentemente no se encuentra el

resorcinol.

B-naftol: Rf=

0.03 cm = 0
5,52

cido glico: Rf= 4,67 cm = 0,84

5,52 cm

En muestra patrn:

B-naftol: Rf=

0.03 cm = 0
5,52 cm

Resorcinol: Rf=

2,28 cm = 0,41
5,52 cm

cido glico: Rf= 4,67cm = 0,84

5,52 cm

CROMATOGRAFIA DE COLUMNA

ANALISIS DE RESULTADO

Cromatografa en capa fina:

El acetato de etilo es un compuesto que polariza muy fcil, al encontrarse con el
B-naftol, un compuesto no polar, hace que este se quede en la fase estacionaria,
aunque por la presencia de hexano este se mueve un poco. Entre ms polar sea
el compuesto su Rf es mayor. Por lo cual se sita el cido glico como el
compuesto con mayor Rf.
La muestra #48 contiene B-naftol y cido glico.
Cromatografa de columna:
Luego de realizar la observacin de este tipo de cromatografa podemos decir que
la velocidad de arrastre de cada componente (azul de metileno y naranja de
metilo), depende de su grado de absorcin en la fase estacionaria y de su afinidad
por la fase mvil.
Para la fase mvil se utiliz silica gel, para llevar acabo la separacin de etanol. Al
realizar el experimento el compuesto que sali primero de la columna fue el
naranja de metileno por ser la sustancia menos polar, el azul de metileno por ser
ms polar se liga con la fase mvil, por esta razn sale de ultimo.

CONCLUSIONES

Se determin que la muestra desconocida #48 contiene B-naftol y cido

glico.

La cromatografa de columna y la de capa fina son tcnicas de separacin

de mtodo fcil de aplicacin.

Se encontr el factor de retardo para cada una de las especies separadas

PREGUNTAS

1. Qu tipos de cromatografa se utilizan segn la fase estacionaria?

Cromatografa de reparto: la fase estacionaria suele mantenerse fija
mediante un soporte poroso, papel o celulosa, esta suele ser una mezcla de
disolventes medianamente miscibles en el agua, cuanto ms soluble en
agua sea la sustancia a cromatografar mas retenida y retrasada quedara
en el desarrollo cromatografico.
Cromatografa de adsorcin: la fase estacionaria retiene con ms o menos
poder a la sustancia a cromatografiar por un fenmeno de adsorcin en
superficie. Para ello se utiliza almina, gel de slice, la cromatografa de
afinidad es un tipo de cromatografa de desorcin, en la que la fase
estacionaria tiene afinidad biolgica por la sustancia que se quiere separar;
se utilizan as, parejas antgeno-anticuerpo, enzima-inhibidor, en la
cromatografa de intercambio inico, la fase estacionaria retiene a la
sustancia por su carga inica, las sustancias que tengan carga opuesta a la
resina quedara en la fase estacionaria y las cargas iguales a la resina sern
arrastradas por la fase mvil, las sustancias que quedan unidas a la resina
pueden eluir si se les cambian las condiciones, variacin de pH fuerzas
inicas; este tipo de cromatografa se hace en columna y los soportes
utilizados son polmeros como la celulosa, poliestireno carboxilado o
poliaminados.
De acuerdo al soporte fsico donde se har la separacin, habla de dos
tipos de cromatografas.
Cromatografa en capa fina: la fase estacionaria se extiende sobre una
placa.
Cromatografa en columna: la fase estacionaria se empaqueta en una
columna y se hace pasar solventes a travs de ella para separar o
identificar sustancias.
2. Para qu se utiliza la cromatografa y en qu se diferencia de la
electroforesis?
Es una tcnica de separacin de compuestos, se utiliza para la
identificacin y verificacin de rendimiento de reacciones qumicas; y la
diferencia entre cromatografa y electroforesis es que la cromatografa
separa sustancias sin ningn uso de energa como lo hace la electroforesis,
ya que esta separa molculas segn la movilidad de estas en un campo
elctrico a travs de una matriz porosa, la cual los separa por tamao y por
carga elctrica.

3. En qu campos es ms utilizada la cromatografa sobre papel?

La cromatografa sobre papel es muy parecida a la cromatografa en capa
fina, excepto que se usa papel de filtro de alta calidad como adsorbente o
fase estacionaria, el fundamento de la cromatografa sobre papel no es
exactamente la adsorcin, sino ms bien una combinacin de adsorcin y
reparto, el reparto ocurre entre el agua que hidrata la celulosa y la fase
mvil orgnica, el papel se emplea cuando se desea separar compuestos
polifuncionales o muy polares, por ejemplo azucares, aminocidos; estos
compuestos no pueden ser cromatografiados en adsorbentes ms activos;
este mtodo se realiza parecidamente a la TLC.
4. Mencione cinco solventes que se utilicen en TLC
Hexano (no polar)
Diclorometano (bastante polar)
ter di etlico (medianamente polar)
Metanol (muy polar)
Cloroformo (polar)
5. Se podr utilizar agua como solvente en TLC?
No se puede utilizar agua como solvente, ya que esta no es muy voltil,
tambin porque se tardara mucho en subir por la fase estacionaria de
slice, y lo ms importante es que al ser el agua tan polar no interacta con
las sustancias que en su mayora son compuestos orgnicos y por esto es
una fase mvil de poca afinidad con la cromatografa en capa fina.
6. Si se tiene como eluente hexano-ter 1:1 y se necesita aumentar la
polaridad de este Cul de los dos componentes se necesita aumentar?
Se debera aumentar el ter que es medianamente polar, y el hexano por
ser un hidrocarburo es un compuesto no polar, por consiguiente para
aumentar la polaridad se debe aumentar de ter.
7. A un eluente benceno-cloroformo 1:1 se requiere disminuir la polaridad
cul de los dos componentes aumentara?
Para disminuir la polaridad se debera aumentar el componente benceno y
disminuir el cloroformo, ya que el benceno es un aromtico no polar, entre
ms proporcin haya de este menos polar ser la eluente.
8. En qu se diferencian los trminos adsorcin y absorcin?
La adsorcin es un proceso fsico o qumico por el cual tomos, iones o
molculas son atrapados o retenidos en la superficie de unas materias y
absorcin es un fenmeno fsico o qumico donde tomos, molculas o
iones pasan de una primera fase a otra incorporndose al volumen de la
segunda fase

BIBLIOGRAFIAS
Wilson Cardona Galeano; Roberto amaris; Manual de prcticas de
fundamentos de qumica orgnica; universidad de Antioquia.

CIBERGRAFIAS
http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/fina.htm
http://estudiarfarmacia.blogspot.com.co/2011/04/tipos-de-cromatografia.html
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Exposicion_electroforesis_5087.
pdf
https://books.google.com.co/books?
id=uHNdHS8JXFIC&pg=PA37&lpg=PA37&dq=cromatografia+sobre+papel+
usos&source=bl&ots=D3nOqvNbI9&sig=ZvB6Y0sXXxlCPxxXLaJ9u_6g8&hl
=es&sa=X&ved=0CFQQ6AEwC2oVChMItczNxoaGyAIVhRUeCh3XKgGC#v
=onepage&q=cromatografia%20sobre%20papel%20usos&f=false
http://blog.mariogonzalez.es/2007/03/diferencia-entre-adsorcion-yabsorcion.html
http://quimica.laguia2000.com/general/cromatografia-en-columna
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html