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Francisco I. Madero
Modulo: Analiza Sangre con Base en Tcnicas de Qumica Clnica
Submodulo: Analiza sangre con base en Tcnicas de Qumica Clnica
Practica:
Determinacin de cido rico
Profesor:
Benjamn Hernndez Meja
FUNDAMENTO
La determinacin de cido rico en suero se practica muy comnmente para el
diagnostico de gota. Tambin se encuentran niveles altos de cido rico en
leucemia, policitemia, hiperuricemia idioptica familiar y condiciones asociados
con el decremento de la funcin renal.
El cido rico es el mayor producto del catabolismo de los nuclesidos
purnicos (adenosina y guanosina) originarios de la via metablica de las
purinas. Estas pueden sintetizarse endgenamente por descomposicin de los
cidos nucleicos o incorporarse externamente a travs de dietas en que los
cidos nucleicos estn presentes.
El aumento anormal de cido rico circulante por encima de 7,0 mg/dL (0,42
mmol/L) se conoce como hiperuricemia siendo la gota la expresin mayor de la
dolencia que cursa con una saturacin de cido rico en los fluidos corporales y
la consiguiente deposicin de uratos en los tejidos blandos, especialmente en
las articulaciones. Aumentos elevados se hallan tambien asociados a
leucemias, toxemia del embarazo y fallo renal severo. Menos comunes son los
casos de hipouricemia, con concentraciones de cido rico inferiores a 2,0
mg/dL (0,12 mmol/L), por lo general secundarios a casos de enfermedad
hepatocelular, defectos de reabsorcin renal o a sobredosis de drogas
uricosricas empleadas en el tratamiento de la hiperuricemia.
El cido rico es oxidado por la accin de la uricasa, en alantoina y perxido de
hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) la mezcla de diclorofenol
sulfonato (DCFS) y 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan por accin del
perxido de hidrgeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la
concentracin de cido rico en la muestra.
Uricasa
c. rico + 2H20 + 02 --------------------------Alantona + CO2 + 2H202
POD
2H202 + 4AF + DCPS------------------ Quinona + 4H20
4-AF = 4 aminofenazona
MATERIAL
Gradilla
Espectrofotmetro
1Micropipeta de 1 mL
1Micropipeta de 50 L.
2Celdas de plstico de 3 ml
4 Tubos de vidrio de 13X100
Puntas para micropipeta
MUESTRA:
Suero, plasma u orina.
PROCEDIMIENTO.
1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente.
2. Pipetear en tubos rotulados:
Blanco
Estndar
25 L
Muestra
Estndar
Muestra
25 L
Reactivo
1.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
Mezclar e incubar durante 5 min a 37C 10 min a temperatura ambiente.
3. Mezclar y reposar los tubos 10 minutos a temperatura ambiente 5 minutos
a 37C.
4. Leer la absorbancia (A) de la muestra y el patrn a 520 nm frente al blanco
de reactivo.
El color es estable como mnimo 30 minutos protegido de la luz
CALCULOS.
CALCULOS A Muestra
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C Patrn
A Patrn
RESULTADOS.
CONCLUCION
BIBLIOGRAFIAS
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_1081
7.pdf
http://www.linear.es/ficheros/archivos/80_1161005C.pdf
http://es.scribd.com/doc/3596181/DETERMINACION-DE-ACIDO-URICO-ENSUERO#scribd
http://es.scribd.com/doc/57121241/Determinacion-de-Acido-Urico-5#scrib
Competencias Genricas.