Tcnicas de Aislamiento

Es la separacin de un determinado microorganismo del resto de

microorganismos que le acompaan. El mtodo ms usual es la siembra por
estra sobre un medio de cultivo slido adecuado dispuesto en una placa de
petri.
Para ello se toma una pequea cantidad de muestra con un asa de platino y se
reparte sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio quedan
separadas e inmovilizadas las clulas bacterianas. Tras la incubacin en
condiciones adecuadas, cada clula viable origina una colonia visible resultado
de sucesivas divisiones celulares. Cada colonia bacteriana tiene unas
caractersticas determinadas en cuanto a su forma, borde, elevacin, tamao,
consistencia, etc.. Los tipos de bacterias presentes en la muestra original es
visible como tipos diferentes de colonias. A partir de colonias separadas
suficientemente es posible obtener un cultivo puro de cada uno de los tipos de
bacterias presentes en la muestra original.
El xito del aislamiento, de la separacin sobre el medio de cultivo, depende de
la superficie sobre la que se ha distribuido la muestra. Es muy importante
realizar el mayor nmero de estras posible. En las primeras estras aparecern
colonias confluentes o una masa continua de microorganismos. En las estras
finales debern aparecer colonias separadas unas de otras. El aislamiento
requiere un reducido inculo de partida. La sucesiva disminucin del tamao de
la poblacin sobre el asa (por descarga sobre el medio de cultivo) al recorrer el
medio de cultivo, debe asegurar que finalmente algunas clulas queden
suficientemente separadas (aisladas unas de otras) sobre la superficie.
Criterios para la diferenciacin de colonias El aspecto de las colonias, su
coloracin, tamao, etc. permiten diferenciar diferentes bacterias, aunque son
propiedades generales muy influenciadas por las condiciones de cultivo, por lo
que a continuacin se realiza una descripcin muy general. Las colonias
pueden ser opacas, translucidas o transparentes. Algunas producen pigmentos
fluorescentes cuando se iluminan con luz ultravioleta. Otras aparecen con
superficie pulverulenta, otras son lisas, o rugosas, o poseen anillos
concntricos. En ocasiones el olor es tambin caracterstico.

Aislamiento
Consiste en obtener un cultivo puro de un microorganismo a partir de un
cultivo mixto.
Metodos:

Directo
Estras
Inclusin o baado
Indirecto enriquecimiento previo

Aislamiento por agotamiento

Siembra por estra
Se inocula la muestra sobre un extremo de la placa con un asa y se extiende
formando estras sobre la superficie en varios sentidos, cada clula aislada se
multiplicar formando una colonia independiente, cada colonia representa un
cultivo puro.

Aislamiento por dilucin

Siembra por extensin o baado
Se extiende el inculo uniformemente con una varilla acodada estril por la
superficie del medio de cultivo. Las clulas diseminadas sobre la superficie
formarn colonias aisladas.