1) Se quiere investigar sobre una enfermedad autoinmune que cursa con

autoanticuerpos y con deficiencia de hGH. Se cuenta con cortes

congelados de hipofisis humanas, y conts con todos los reactivos que
quieras. Tambien contas con sueros de pacientes con esta enfermedad y
de pacientes normales.
a) Plantear un IFI para diagnosticar en pacientes. (esquema y algo minimo)
b) Se quiere hacer una Inmunoprecipitacion contando con 35S-Met y 35SHomocistina. Plantear la IP. Cual de las dos elegis?
c) Comparar ambas tecnicas en la busqueda de estos autoAc, y plantear
ventajas y desventajas.
2) Sobre la misma enfermedad, se quiere buscar autoac anti hGH en
pacientes sin tratamiento (hGHAA) y en pacientes que ya estan en
tratamiento con hGH recombinante (hGHA).
a) Platear un RBA que sirva para buscar ambos tipos de Ac. Se quiere en el
trazador utilizado tenga una alta AE sin que afecte a la molecula. Como
la obtendria? (decia que elijas y justifiques el tipo de oxidante, la
subvariante elegida y purificacion) Porque en el RBA se desea una alta
AE?
b) Te dicen que compraron un trazador que segun el fabricante tiene una
AE de 100uCi/ug y fue purificado por Sephadex. Sabiendo que la hGH
tiene un PM de X Da, y que el 125I decae con un T1/2 de aprox 60 dias,
calcular el numero de at radiactivos por molecula. Comparando con el
punto anterior, que ventajas/desv tendrias con este reactivo.
c) Se desea plantear ahora una IP marcando las Met de la hormona. Se
desea que no haya NINGUN cambio en la molecula, como la harias?
Expresion en sistema proca o euca? Justificar.
d) Comparando las Inmunoprecipitaciones del punto anterior con el 1.b),
porque se requiere que la molec sea lo menos modificada posible?
e) En que unidades se mide en RBA, como se debe informar? Deficir el
valor de cutoff y requerimientos del RBA (preequilibrio) y evaluar entre
ambos tipos de Ac.
3) Definir IRC tipo 1 y 2. A que tipo de Ac se aplica? (Mab o PAb)