chimie ~ Lueriri practice medicin’, vo 9.73.2 Determinares fierului prin metoda fler ferrozin Principiul metodei Fierul trivalent dezlocuit la pH = 4.8 de pe transferind este redus la fier bivalent de cdtre ferozind, formand un complex colors T95 Taensitatea culorii obfinute este dizect proportional cu conceniratia 1n fier a probe. Materiale necesare eprubete stativ pentru eprubete pipete de sticks pipete semiautomate conuri spectrofotometnt cuvete 1 em vase cu solutie dezinfectant& apa distilata tifon reactivi Reactivi Reactiv RL ‘cctat tampon, pH =4,8 tiouree guanidin’ Reactiv R2: acid ascorbic Reactiv R3: ferrozin Standard fier Proba Ser nehemolizat Plasma heparinizat ‘Tehnica de lucru 100 mmol/l 52,2 mmol/l 6 mmol/l 150 mg/fiold 40 mmol/L 100 mg/l (17,9 mmol!) Se pregitesc trej eprubete: martor, standard, probBiochimie - Lucréri practice medicind, volll Le Se pipeteaza in eprubete conform tabelutut urmator: ‘Tabelul XVI “Amestec reactivi Ri + R2 ‘Api bidistilat’ Standard. Probii Dupé agitare se masoari extineile probei (Ep) si standardula} Ea) {ati de martor la langimea de unda de 560 nm, fa cuve de | cm Se adauga cate 40 pl de reactiv R3 in fiecare cuveta de masurare, agit, iar dupt 10 minute se msoari din nou extintile probei (Ey) $i standardului (Ea). Calcul Fy Epi! En - Ex) x €s unde: p= concentratia probei E, = extinctia probei K, = extincyia standardulut C.= concentrajia standardului (100 yrg/dl) Mai Observatii tl Mreroda este LiniarS pnd la valoarea de 179 yl, Poste aceastl valoare a concentrate misurate, proba se dilueaz de doul or, far rezaltatnl se ‘umulfeste cu 2. Valori normale €1luna: 60-200 pgidl Tuna 1 an: 15-160 we/dl = 1- Ian 50~ 120 pgidl aduli femei: 49 — 151 pg/dl (8,8-27 pmol/l) airbati: 50,2 - 165 ng/dl (9,0— 30 pmol!) 86Riochimie ~Lucritri practice medicind, vol. It Variatii fiziologice « sideremia la femei este mai redusé decat la bairbatis » Sideremia la nou-nascufi este mai mare deet la aduli FSideremia la now-nascufi este de aproximativ 200 1g %e, scade treptat la 2 fund la 160 —180 pg %, ajunge Ja 3 — 7 ani in jurul valorii de 125 ug % sila varsta de 7-14 ani la 119 we %: « nivelul vesperal al sideremiei este mai sclzut cu o (relme decit cel matinal: ‘in primele doua trimestre de sarcind sideremia 3° valori normale, care sead in trimestrul al treilea la valori medii de aproxirnan' 50m %s alimentatia gi efortul fizic nu influenfeazA valorile sidere ici Variatii patologice Valori crescute ale fierului (hipersideremie): ingestie excesiva de fier; nomii hemolitice (distrugere excesiva a hematiilor): Gliberarea masiva a fierului din depozite fn: necroze hepatice acute; hepatite acute, toxice, virale; ictere hemolitice eritropoezi deficitar’ in: anemia pernicioas4; anemia aplastic&, lafectarea maduvei osoase hematopoetices intoxicatii cu plumb; avitaminoza B. Valori scAaute ale fienului (hiposideremie): ‘port insuficient de fier; pierderi prin sangerari acute sau eronice: pierderi in ultimul trimestru de sarcina prin. transfer la fats avilaminoze; neoplasm; infectii acute gi cronice; poliartritS reumatoida: Polimmia csingura anemic hemoliticl ec previnti hiposideremie)