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MANABI
FALCULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE LABORATORIO CLINICO
BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR II
TRABAJO DE EXPOSICION
TEMAS:
HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS
SONDAS DE ANTICUERPOS PARA PROTEINAS
INTEGRANTES:
FLECHER PALMA JERSON
SALTOS GARCIA KARLA
SANTANA CANDELA JOSSENKA
PESANTES LUCAS NEXAR
PUCHA BAIRD PAMELA
ZAMBRANO MENDOZA KAROL
DOCENTE: MAYRA PARRAGA
PALABRAS CLAVES
Clones
Cebador
Hibridacin
Northern blotting
Electroforesis
Clula neoplsica
SDS-poliacrilamida
Inmunoprecipitacion
Quimioluminiscencia
Desnaturalizada
Endonucleasa
Nitrocelulosa
Microarrays
ADNc
Hibridacin in situ
GLOSARIO
Cebador: Un iniciador o cebador es una secuencia corta de ADN de cadena simple que
se utiliza en una reaccin en cadena de la polimerasa
SDS-poliacrilamida: Es una tcnica ampliamente utilizada en bioqumica, gentica,
biologa molecular y ciencia forense para separar las protenas
Inmuno-precipitacin: Regula procesos que se dan sobre la estructura nucleosomal
como la transcripcin, la replicacin y la recombinacin.
Quimioluminiscencia: Produccin de luz que acompaa a algunas reacciones qumicas
y bioqumicas.
Desnaturalizadas: Hacer que una protena pierda total o parcialmente su estructura.
Endonucleasa: Son enzimas que catalizan la ruptura de enlaces fosfodister en
diferentes regiones ubicadas en el interior de una cadena polinucleotdica
Nitrocelulosa: Producto resultante de la nitracin de la celulosa.
Oligonucletidos: es una secuencia corta de ADN o ARN, con cincuenta pares de bases
o menos.
Microarrays: (Microarray) Un Chip de ADN es una superficie slida a la cual se une
una coleccin de fragmentos de ADN. Las superficies empleadas para fijar el ADN son
muy variables y pueden ser de vidrio, plstico e incluso de silicona.
ADNc: El ADN complementario o ADN copia (ADNc) es una hebra de ADN de doble
cadena una de las cuales constituye una secuencia totalmente complementaria del ARN
mensajero a partir del cual se ha sintetizado.
Hibridacin in situ: La hibridacin in situ es una tcnica de laboratorio que consiste en
marcar una hebra sencilla de ARN o ADN denominada sonda y permitir que se empareje
con su secuencia complementaria en el ARN o el ADN presente en una muestra de tejido
o de cromosomas.
La transferencia Northern o
Northern blotting es una variante
de la tcnica de transferencia de
Southern, utilizada para la
deteccin de ARN en vez de ADN.
En
Una
Cada
En
Es
En
Los
La
hibridacin de cidos
nucleicos se emplea
para detectar
secuencias de ADN o
ARN homlogas no slo
en extractos celulares,
sino tambin en
cromosomas o clulas
intactas, proceso
llamado hibridacin in
situ.
Pueden
utilizarse
otros
materiales
para
producir
inmunizacin
yy
Pueden
utilizarse
otros
materiales
para
producir
inmunizacin
sintetizar
anticuerpos
sintetizar
anticuerpos
Las
Lasprotenas
protenasseseseparan
separan
(una
clula
por
una
tcnica
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clula
por
una
tcnica
neoplsica)
denominada
neoplsica)
denominada electroforesis
electroforesis
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gel
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poliacrilamina
Dadoque
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contra
contra estos
estos pptidos
pptidos
Tras
Tras la la electroforesis
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protena
completa.
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anticuerpos
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reaccionan
con
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dede
interes
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protena
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LaLa
inmunotransferencia
inmunotransferencia
transferencia
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Westerno o
Quimioluminisce
Quimioluminisce
Western
Blotting
y
la
Western
Blotting
y
la
ncia
ncia
nmunoprecipitacin
inmunoprecipitacin
En la inmunoprecipitacin los
anticuerpos son utilizados para aislar
las protenas contra las que
reaccionan. Pro ejemplo las clulas son
incubadas con aminocidos
radioactivos para marcar sus
protenas. Al extracto celular marcado
se le aade un anticuerpo, que se une
a su antgeno protenico diana. Los
complejos Antgeno-anticuerpo
resultantes se aislan y se someten a
electroforesis, permitiendo la
deteccin del antgeno radioactivo por
autorradiografia.
La inmunoprecipitacin tambin
puede emplearse para detectar
interacciones protena-protena
en el interior celular, mediante la
co-inmunoprecipitacin de dos
protenas que se encuentran
interaccionando.
Como
se
describi en el Captulo 2, una
tcnica para la identificacin de
complejos
de
protenas
es
inmunoprecipitar una protena a
partir de clulas bajo condiciones
suaves de modo que permanece
asociada con las protenas conComo fue expuesto en el capitulo 1
las que normalmente interacta los anticuerpos pueden ser
utilizados para visualizar protenas
en el interior de las clulas, as
como en la clulas lisadas. Las
clulas se tien con anticuerpos
marcados con pigmentos
fluorescentes, tras lo cual al ser
examinados con el microscopio de
fluorescencia se la localizacin