AMINOACIDOS Y PROTEINAS.

Carolina Aguileraa, Cristian Castaedab

carolina.aguilera@correounivalle.edu.coa,leandro.potosi@gmail.comb

Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Qumica,

Cali-Colombia
Fecha de realizacin: 05 de Diciembre de 2015
Fecha de entrega: 15 de Enero de 2016
RESUMEN
En la prctica se realizaron algunas reacciones de los aminocidos y protenas, adems se
comprob cualitativamente qu efectos pueden tener factores como la temperatura y sustancias
como cidos o sales en estos.
Palabras claves: aminocidos, protenas, cidos , sales.

OBJETIVOS

Realizar algunas reacciones de los

aminocidos y protenas.
Comprobar de una forma visual, que
efectos parciales o definitivos pueden
causar la temperatura y sustancias
como cidos o sales en aminocidos y
protenas.

1 g de oxido de cobre pulverizado

METODOLOGIA EXPERIMENTAL
1. Acidez de aminocidos.
2. Formacin de una sal compleja de
cido amino actico.
0,2-0,3 g acido
Aminoacetico

Hervir
durante
varios minutos.
Que se observa?

5 mL agua

10 gotas de NaOH

Que se

Colocar el filtrado en una

capsula de porcelana y se
evapora en un bao mara
hasta la aparicin de
cristales.

6.
7. Reaccin coloreada del formaldehido
para protenas.
0,2 mL sln clara de
huevo

Filtrar los cristales

formados y calcular
el porcentaje de
rendimiento.

3.
4.
5. Reaccin Xantoproteica.

1 gota sln
formaldehido

3 gotas deH2SO4

1.0 mL sln clara de0,4-0,6 mL

huevo

HNO3conc.

Que se

Qu
sucede?

DATOS Y RESULTADOS
1. Acidez de aminocidos.

2. Formacin de una sal compleja de

cido amino actico.

3.Coagulacion de la albumina.

Tabla 2. Datos obtenidos

Parmetro
Cantidad g (0.0001)
Capsula vaca
36,5891
capsula con muestra 36,8050
Muestra experimental 0,2209

4. Reaccionxantoproteica.
Solucin
de
Clara de huevo
Mas HNO3 conc.

1. Clculo del reactivo lmite.

Oxido de cobre II
1,01 g CuO x

1 mol CuO
79,545 g CuO

Mas 10 gotas de
NaOH

0, 0127 mol CuO

Observaciones
Inicialmente
la
mezcla fue blanca,
viscosa y en el fondo
de color amarillo, al
calentarlo
la
coloracin se torn
amarilla.
Al adicionarle NaOH
la mezcla se torn de
color naranja.

Acido Aminoacetico:
0,23 g C 2 H 5 N O2 x

5. Reaccin de Biuret.

1 mol C 2 H 5 N O2
75,07 g C2 H 5 N O2

6.Reaccin coloreada del formaldehido

para protenas.

3,0638 x 10 mol C2 H 5 N O2
El reactivo limitante es el cido amino actico.
2. Clculo
peso terico de la sal
compleja de cido amino actico:
3,0638 x 103 mol C2 H 5 N O2

1 mol producto
1 mol C 2 H 5 N O2

138,54 g producto
=0 , 4245 g
1 mol producto

Observaciones

Con 3 gotas de
H2SO4Conc.

se
form
un
precipitado blanco y
se veian dos fases

No se observ un
cambio notable en la
solucion precipitado
blanco.

DISCUSIN

3. Porcentaje de rendimiento (%R)

R=

Solucin
de
Clara de huevo
Con 1 gota de
formaldehido

Acidez de los aminocidos:

Peso Teorico
100 Ec. 1
Pesoexperimental

En el tubo de ensayo al adicionar 0.1 mL de

glicina al 2% y gotas de fenolftalena al 1% se
observo una coloracin blanca lechosa, como
se observa en la figura 1 en la solucin que al

Aplicando la Ec 1 obtenemos un % de
rendimiento del 52,04%.
3

pasar el tiempo, esta se torno incolora, como

se muestra en la figura 2. Esto se debe a que
la glicina es un aminocido no esencial, es
decir que el cuerpo humano lo puede sintetizar,
aun cuando no se ha introducido en el cuerpo
a travs de los alimentos que se ingiere.
Este como todos los aminocidos se les
considera anftero, ya que al reaccionar con
cidos o, bases para dar un catin o anin
respectivamente:

Figura 2. Acidez de aminocidos, despus de

cierto tiempo

La siguiente tabla muestra los valores de PK a

para algunos aminocidos, de entre los cuales
est la glicina que tiene un PKa1 de 2.34, que
indica que el grupo COOH es un acido
relativamente fuerte, para la otra constante,
PKa2 el valor es de 9.78 lo que indica que el
grupo amino protonado.-NH3+ es un acido tanto
dbil, indicando asi que el aminocido glicina
es de carcter acido que bsico.1
Reaccin 1. Anforerismo de aminocidos

Figura 1.Acidez de aminocidos

Tabla con valores de PKa para aminocidos
Formacin de una
acidoaminoactico:

sal

compleja

de

En esta parte de la prctica se quiso ver la

formacin de una sal compleja a partir de
glicina y oxido de cobre (II); la glicina ejerce un
efecto protector de compuestos con una
eficiente capacidad de reduccin en este caso
por iones cpricos y, como consecuencia de
ello, disminuye la generacin de radicales
hidroxilo; es probable que esta accin haya
ocurrido como consecuencia de la formacin
del complejo constituido por glicina y cobre, de
tal manera que no se dispondra de Cu-II para
oxidar cierto tipo de compuestos reductores
como por ejemplo el cido ascrbico y formar
radicales hidroxilo.
CH2COOH
NH2

+ CuO

a la mala manipulacin de los reactivos o

impurezas de estos o a que no hubo un
reaccin completa pues siempre hay
un
3
reactivo limitante.
Coagulacin de la albumina
Se tomaron 5 tubos de ensayo, a cada uno se
le adiciono 1 mL de clara de huevo, y se
realizaron las siguientes pruebas:
Tubo #1: calentamiento: la solucin se someti
a calentamiento, pero no se obtuvo ninguna
observacin de la coagulacin, ya que al
preparar la solucin de clara de huevo, esta
quedo aguada , dificultando el proceso.
Tubo #2: Adicin 4 mL de etanol: al adicionar
este alcohol a la solucin clara de huevo se
observo la solucin de color blanca con un
pequeo aro blanco en su superficie. Como se
puede ver en la Figura No3.

H2O

Tubo #3 Adicin gotas de acido clorhdrico al

37%: se observo que la solucin tomo un color
blanco lechoso con pequeos cogulos
blancos en la superficie de la solucin. Como
se ve en la figura No 3.

Se ha mostrado que la glicina ligada al Cu-II

puede formar un complejo [Gly-Cu]+ cuyo pico
de mxima absorcin es a 732 nm, mientras
que el complejo [Cu-Gly ] 2 tiene un pico
mximo a 624 nm16. Asimismo, se ha sugerido
que se formara un complejo de bis-glicinatoCu-II,
que
tendra
una
estructura
tetracoordinadaplanar, en la cual las molculas
de agua estaran excluidas de las posiciones
axiales del cobre 16.

Tubo # 4 Adicin de Acido ntrico al 60-70%: se

observo que la solucin toma un color amarillo
claro con cogulos en la superficie de color
amarillo. Como se visualiza en la figura No 3.
Tubo #5 : Adicin de hidrxido de sodio al
50%: se observo una solucin aceitosa de
color amarillo muy claro con burbujas en la
superficie, como se puede ver en la figura No
3.

Experimentalmente se
adicion el agente
oxidante CuO a la glicina esta solucin se
calent y se vio la formacin de un precipitado
de color negro en la superficie y en el fondo,
en la mitad la coloracin fue azul. Por ltimo se
filtr y se sec en el horno el filtrado,
formndose as unos cristales que segn lo
mencionado anteriormente sera el complejo
[Gly-Cu]+; estos cristales fueron pesados y se
compararon con los datos tericos dando un
porcentaje de error del 39% que es un valor
significativamente alto y cuyas causas de ese
valor se puede haber debido a un mal filtrado,

Reacciones:
Coagulacin de la albumina4

Con etanol
5

Al someter la solucin a calentamiento se

observa que esta cambia de color de violeta a
vinotinto, como se visualiza en la figura No 6

Con cido ntrico

En soluciones alcalinas Cu +2 se complejan con

las uniones de pptidos de protenas
resultando en la formacin del color morado
mencionado anteriormente. Este mtodo es
generalmente aplicable porque el nmero de
enlaces peptdicos por unidad de peso para
todas las protenas es casi el mismo. Sin
embargo, el mtodo es un poco insensible
siendo el lmite menor de 0.25mg de
protenas.2

Con HCl

Con NaOH

Figura No 4.Formacion del complejo

Figura No 3.observaciones de Coagulacin

de la albumina
Reaccin de Biuret :
Figura No 5.Reaccin de Biuret

La reaccin de biuret se basa en la formacin

de un compuesto de color violeta (ver figura No
5) que resulta cuando los iones cpricos en
medio alcalino se complejan con los electrones
no saturados de los tomos de nitrgeno y
oxgeno de los enlaces de todas las protenas.
La cantidad de color producido es proporcional
a la concentracin de protenas y se puede
medir espectrofotomtricamente a 550 nm.

Reaccin coloreada del formaldehido para

protenas:
En esta ltima prueba al adicionar las gotas de
formaldehido no se observ un cambio notable
en la mezcla, al adicionarle las 3 gotas de
HSO se form un precipitado blanco. La
reaccin se puede ver en la siguiente
ecuacin:

Esta reaccin se da por la adicin del ataque

del grupo amino, este posee electrones libres y
a su vez el carbonilo del formaldehido posee
una carga positiva, esto provoca que se rompa
el doble enlace del carbono con el oxgeno,
quedando este con una carga negativa por lo
tanto al protonarlo con el cido sale en forma
de agua, mientras que el grupo amino se
desprende de su protn para formar un doble
enlace con el carbono7.

Figura No 6 Reaccin de Biuret despus de

calentamiento

Reaccin Xantoproteica
Esta reaccin se debe a la formacin de nitro
derivadosaromticos por reaccin del cido
ntrico sobre losgrupos bencnicos que poseen
algunos aminocidoscomo la fenilalanina, la
tirosina, y el triptfano. Por lotanto, la dan
positiva todas aquellas protenas quetengan
aminocidos aromticos en su molcula

PREGUNTAS

1. En que consiste la prueba de Millon?

Cuales protenas dan positiva dan esta
prueba? Cual es la reaccion qumica
fundamental?

Para este experimento se quiso apreciar si la

ovoalbmina de la clara de huevo contiene
aminocidos aromticos y que segn los
resultados mostrados anteriormente en la
seccin correspondiente dieron positiva a esta
prueba ya que se vio la formacin de un
compuesto aromtico nitrado de color amarillo,
cuando la protena fue tratada con cido ntrico
concentrado.

La prueba de Milln consiste en adicionar el

reactivo de Milln (mezcla de nitrato mercuroso
y mercurio en cido ntrico) a las protenas, en
el cual se obtiene un precipitado blanco y que
al hervir se vuelve rojo
Las protenas que dan positiva la prueba de
Milln son las que tienen tirosina, pues
la reaccin de la protena con el reactivo de
Milln se debe a la presencia de grupos
hidroxifenilos (C6H5OH) en la molcula
proteica. Cualquier compuesto fenlico que no
est sustituido en la posicin 3, 5, como la
tirosina, fenol y timol, dan lugar a la reaccin.

La prueba da resultado positivo en aquellas

protenas con aminocidos portadores de
grupos
bencnicos,
especialmente
en
presencia de tirosina. Si una vez realizada la
prueba se neutraliza con un alcalino vira a un
color anaranjado oscuro. 6
7

La reaccin qumica fundamental con albmina

es:

Protenas Globulares: Estn constituidas por

cadenas
polipeptdicas
plegadas
estrechamente, de modo que adoptan formas
esfricas o globulares compactas. Son
solubles en sistemas acuosos, su funcin
dentro de la clula es mvil y dinmica. Ej:
(enzimas, anticuerpos, hormonas).Existen
protenas que se encuentra entre las fibrosas
por sus largas estructuras y las globulares por
su solubilidad en las soluciones salinas. Ej.
(Miosina, fibringeno).

2. Por que el acido ntrico colorea la piel

de amarillo? Que sucede en
esta
reaccion?
El acido ntrico concentrado colorea la
piel de amarillo debido a que en la piel
hay presentes protenas que poseen
anillos aromticos, en esta reaccin los
ncleos
aromticos
se
nitran formando acido pcrico, el cual le
da el color amarillo caracterstico.
3. Describa el ensayo de la reaccin
coloreada
del
formaldehido
para
protenas.
El ensayo de la reaccin coloreada del
formaldehdo para protenas es el
siguiente:

5. Que es el punto isoelctrico de una

protena?
El punto isoelctrico es el pH al que una
sustancia anftera tiene carga neta cero. El
concepto es particularmente interesante en los
aminocidos y tambin en las protenas. A este
valor de pH la solubilidad de la sustancia es
casi nula. Para calcularlo se deben utilizar los
pKa

Los pKa a considerar para esta ecuacin, en

una tabla de pH, son los que contienen a la
especie qumica con carga igual a cero,
cuando tienen ms de un pKa).Las molculas
complejas, tales como las protenas, se
combinan con los iones hidrgeno y con otros
iones presentes en la disolucin, dando lugar a
la carga neta de la molcula. A la
concentracin de iones hidrgeno, o al pH,
para el cual la concentracin del ion hbrido de
una protena es mxima y el movimiento neto
de las molculas de soluto en un campo
elctrico es prcticamente nulo, se le
denomina punto isoelctrico. Los aminocidos
pueden existir como sal interna, llamada
zwitterion.Esto ocurre porque el protn del
grupo carboxilo es abstrado por el grupo
amino NH2que est en posicin alfa y que
dando este como grupo amonio NH4

Al adicionar una solucin diluida de

formaldehdo, la amina primaria ataca el
carbonilo del aldehdo formando una imina con
salida de agua, donde al quedar bloqueado el
grupo amino, desaparece el carcter anfotrico
de amino, por lo que al adicionar el acido
sulfrico concentrado, se forma una capa
separada en el fondo del tubo. Este mtodo de
valoracin se llama N-formol y se utiliza para
determinar amino cido libres totales
en alimentos hidrolizados de protenas y
lquidos biolgicos.

4. Que es una protena globular?

8

6. Escriba las formulas de los siguientes

aminocidos:
alanina,
leucina,
valina,
prolina,fenilalanina,
triptfano,
cistena,
arginina, histadina, tirosina.

proporcional a la concentracin de
protenas presentes en dicha solucin.

las

Las reacciones de reconocimiento de las

protenas son, reacciones de precipitacin y
reacciones coloreadas.

BIBLIOGRAFIA
1.http://www.quimitube.com/elcomportamiento-acido-base-de-losaminoacidos(http://www.quimitube.com/elcomportamiento-acido-base-de-losaminoacidos (Visitado el martes 12 de enero
de 2016)
2.
http://www.doschivos.com/trabajos/biologia/88.
htm (Visitado el martes 12 de enero de 2016)
3.
http://myslide.es/documents/aminoacidosyprot
einas-559397cca042a.html. (Visitado el martes
12 de enero de 2016)
4.
http://www.edu.xunta.es/centros/iesquiroga/sys
tem/files/inicio/depart/bioloxia/materialbio/labbi
o2bac/prot.pdf. (Visitado el martes 12 de enero
de 2016)
7. Como se determina la presencia de
azufre en las protenas?

5.
https://es.scribd.com/doc/50762402/REACCIO
N-XANTOPROTEICA-1 (Visitado el martes 12
de enero de 2016)

La presencia de azufre en las protenas se

pone de manifiesto por la formacin de un
precipitado negro desulfuro de plomo. sta
reaccin se basa en la separacin mediante un
lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al
reaccionar con una solucin de acetato de
plomo, forma el sulfuro de plomo.

6
https://es.scribd.com/doc/50762402/REACCIO
N-XANTOPROTEICA-1 (Visitado el martes 12
de enero de 2016)

CONCLUSIONES

7.
http://www.buenastareas.com/ensayos/Amino
%C3%A1cidos-Prote

La intensidad del color producido en una

solucin de reacciones coloreadas es
9

%C3%ADnas/3387845.html .
martes 12 de enero de 2016.

(Visitado

el

10

11