Cuestionario

UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA
Unidad Xochimilco
Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud

Tronco Comn Divisional
Mdulo: Procesos Celulares Fundamentales
EXAMEN DE LABORATORIO.
Por: Alberto Aroz Vsquez

Matricula: 2152028961
Lic. En Medicina Veterinaria y Zootecnia
Docente:
Dr. Jorge Antonio Amzquita Landeros
Grupo: BB12A
CUESTIONARIO.
1. Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

esterilizacin.
R= medios fsicos:
-Vapor saturado a presin: autoclave: es el medio ms especfico y efectivo de
menor costo para esterilizar la mayora de los objetos de uso hospitalario
-Calor seco: pupinel: este sistema elimina microorganismos por coagulacin de las
protenas de estos. Su efectividad depende de la cantidad de calor, la cantidad de
calor disponible y los niveles de perdida de calor, requiere largos periodos de
exposicin.
Medios qumicos:
-xido de etileno: este es un producto qumico con un alto poder desinfectante, su
presencia est en forma lquida y se volatiza formando un compuesto gaseoso que
elimina microorganismos por cualquier alquilacin de la pared celular del
microorganismo.
-Perxido de hidrogeno: es un agente qumico que se ha utilizado como
desinfectante de alto nivel y esterilizante por inmersin, esteriliza a baja
temperatura por medio de plasma de perxido de hidrogeno
-cido paracetico: esterilizante de alto nivel, es esporicida, por lo tanto esteriliza
en tiempos menores al glutaraldehido, hay dos formas por este agente: lquido y
plasma.
2. Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior e
indica cuando es recomendable utilizar cada uno de estos.
R= Fsicos: ventajas: ms efectivo y de bajo costo, eleva la temperatura tiempo
corto y no deja residuos txicos.
Desventajas: su efectividad depende de la cantidad de calor disponible, largos
periodos.
Qumicos: ventajas: alto poder desinfectante.
Desventajas: alto costo, largos periodos de esterilizacin y alto nivel de
infraestructura.
3. Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

desinfeccin.
R=Antispticos: alcoholes, tintura de yodo, povidona yodada, clorhexidina,
triclosan.
Desinfectantes: glutaraldehido, hipoclorito de sodio1%
4. Qu tipo de sustancias suele utilizarse continuamente para desinfectar
superficies?
R= para las superficies muy comnmente es usado el cloro y productos a base de
cloro, incluidas los compuestos de hipocloruro, yodoforos, amonio, cidos y lcalis
fuerte, fenol, agentes gaseosos.
5. Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estril
para el trabajo microbiolgico y seala que factores influyen en la creacin de la
zona estril.
R=el mechero te ayuda a crear corrientes de aire caliente que arrastran partculas
de polvo y microorganismos dispersos en el rea que rodea tu rea de trabajo, es
decir el aire caliente que genera la flama arrastra hacia afuera toda partcula y
microorganismo.
6. Menciona otros mtodos usados en la industria y en los laboratorios de
investigacin para crear zonas de trabajo estril.
R= se pueden realizar limpiezas con agua jabonosa, se limpian con una compresa
impregnada de alcohol al 70%
Limpieza de la cabina, desinfeccin de todo el material que se vaya a introducir a
la cabina sumergindola en un bao de alcohol.
7. Explica los riesgos que puede correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas despus de concluir cada sesin.
R= los riesgos que se corren son primero que el material pueda caerse y por lo
tanto romperse, tambin puede quedar sucio y contaminarse al hacerse una nueva
tcnica.
8. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de
trabajo despus de concluir cada sesin.
R= al no lavar los materiales de laboratorio corremos el riesgo que queden sucios
y por lo tanto despus se contaminen o se infecten o algn virus se quede ah.
9. Realiza el diagrama del microscopio describe cada una de sus partes e indica
su intencin.
10. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.

R= se han encontrado bacterias como por ejemplo Vibrio, e-coli, pseudomonas.
11. Explica cul es el objetivo de sembrar diluciones del agua.
R=su principal propsito es disminuir la concentracin bacteriana de una muestra
especifica.
12. Explica el fundamento del aislamiento por estra cruzada.
R= es la tcnica ms utilizada, para aislar los microorganismos en un placa de
agar, se colocan muestras y se realiza un barrido con una asa inoculada hasta
lograr separar colonias individuales de la cepa de inters.
13. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
R= este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos gram negativos de fcil
desarrollo aerobios y anaerobios facultativos.
14. Explica que se le llama medio de cultivo bacteriolgico.
R= son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y
condiciones fsicas optimas, permite el crecimiento de microorganismos.
15. Explica que es un medio de cultivo enriquecido.

R= son aquellos que adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan
una serie de factores, indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por medio de adicin de sangre u otros
tipos biolgicos.
16. Explica que es un medio de cultivo selectivo.
R= son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias
contenidas en una poblacin poli microbiana. El fundamento de estos medios
consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una poblacin microbiana
especfica.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias grampositivas
y gram negativas, resaltando las diferencias.
R= bacterias gram positivas: pared celular interna y una pared de peptiduglucano
que es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial para replicacin y
supervivencia de la batera, no tiene membrana externa, no tiene espacio peri
plasmtico.
Bacterias gram negativas: pose una pared celular ms compleja , pared celular
interna, pared de peptiduglucano, bicapa lpida externa, membrana externa,
espacio peri plasmtico.
18. Cmo se diferencia las bacterias coliformes?
R= las bacterias del grupo coliformes totales que son capaces de fermentar
lactosa a 44-45 se conocen como coliformes termo tolerantes.
19. Qu indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
R= lo que indica es que el agua est contaminada y por lo tanto no puede ser
consumida por el ser humano.
20. Cul es la importancia clnica de las bacterias coliformes?
R=su importancia se debe que al ser analizadas se pueden crear procesos y
tratamientos para el agua y as lograr que el agua est libre de e-coli.
21. Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
R= todas estn y se considera que el Escheria coli es el ndice de contaminacin
fecal ms adecuado.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias en

la muestra de agua que colectaste?
R= puede contener parsitos en el agua y as desencadenar unan posible
contaminacin y un riesgo de una suma importancia de la salud humana.
23. Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
contaminada con materia fecal?
R= Shigellae dysenteriae, Salmonella, Fiebre tifoidea, Salmonella ssp, Vibrio,
Escheria Colli.
24. Qu significan las siglas IMViC?
I: Indol, M: rojo de metilo, V: V-P (Voges- Proskauer), iC: citrato de Simons
25. Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMViC?
R= se utiliza en la biologa para identificar bacterias. El resultado de test expresa
mediante smbolos de positivo o negativo (+,-) segn el resultado de cada prueba
siguiendo siempre el orden establecido por las iniciales del mtodo.
26. Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para realizar
la prueba de la oxidasa?
R= para las pruebas de oxidasa, se utiliza un reactivo llamado Kovacs, el cual est
compuesto de alcohol osaomlico, p-dimetilaminobenzaldehdo, y cido
clorhdrico. El cido puede reaccionar con el metal y darles falsos positivos.
27. Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de 24
horas de incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se origina a
partir de una sola bacteria (UFC) y estas de dividen en un promedio de 30
minutos.
R= el nmero de bacterias resultante depende mucho del tipo de muestra pero lo
aproximado es que se generen alrededor de unas 4 a 6 bacterias.

Unidad Xochimilco

Por: Alicia Maribel Curiel Rojo

Lic. en Estomatologia
Docente:
Grupo: BB12A
1.- Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

esterilizacin.
Garantizan la destruccin total de los microorganismos presentes en sustancias o
materiales. De esta forma se asegura que los microorganismos detectados en
alguna experimentacin provengan de las muestras estudiadas y no de alguna
contaminacin del ambiente o de la persona.
Dentro de los mtodos fsicos se pueden encontrar:
Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la accin
del calor, el cual provoca una desnaturalizacin de protenas, fusin
desorganizacin de las membranas en los microorganismos.
Radiaciones: se atribuye a la absorcin por DNA, existen uniones covalentes entre
residuos de primigenia pertenecientes a la misma cadena, se distorsiona el DNA y
se inhibe la sntesis del DNA, por tanto tambin el crecimiento y respiracin de los
microorganismos. Su uso principal es para esterilizar el aire y superficies.
Dentro de los mtodos qumicos: Pueden ser Gaseosos (xido de etileno) o no
Gaseosos (Aldehdos, cido peractico y perxido de hidrgeno)
Los antispticos son considerados venenos que al actuar sobre grmenes, estos
son destruidos. Algunos de ellos ejercen su accin nociva sobre todas las clulas y
otros actan sobre algunas especies bacterianas en especfico. Es ptimo para la
antisepsia de las manos del experimentador, mesas de trabajo, material, etc.
2.- Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior

e indica cundo es recomendable utilizar cada uno de stos.
Mtodos fsicos:
Ventajas: Rpido calentamiento y penetracin, destruccin de bacterias en un
periodo corto, no hay residuos txicos, adems de que no es corrosivo.
Entre sus desventajas se encuentra que: En algunas ocasiones el material a

esterilizar no soporta altas temperaturas y pueden sufrir algn dao o simplemente
el material a esterilizar puede ser inflamable. En cuanto a las radiaciones, no
penetran en slidos y pobremente en lquidos.
Mtodos qumicos:
Ventajas: el ciclo de esterilizacin dura de 54-75 minutos, el material sometido a
estos procesos no precisa de aireacin.
Desventajas: se necesita un mayor tiempo, las sustancias son inflamables, txicas
y de muy alto costo.
3.- Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en

la desinfeccin.
Los desinfectantes son productos qumicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados. Como: Glutaraldehdo, hipoclorito de sodio
Los antispticos son sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de
los microorganismos y no son lo suficientemente txicos para ser aplicados a los
tejidos vivos. Como: Alcoholes, tintura de Yodo,
4.- Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desinfectar

superficies?
*Hipoclorito de sodio al 10%
*Solucin de benzal diluido 1:10
5.- Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

estril para el trabajo microbiolgico y seala qu factores influyen en la
creacin de la zona estril.
Ayudan a mantener un ambiente de esterilidad, a travs del calor, cuando se
trabaja con siembra de microorganismos.
Factores que influyen en la zona estril: Una manipulacin correcta de las

muestras y del material, evitar contaminar a travs de microorganismos propios
del experimentador, aire externo, al igual que material no esterilizado previamente
a su uso.
6.- Menciona otros mtodos usados en la industria y en los laboratorios de
investigacin para crear zonas de trabajo estriles.
Desinfectantes: son productos qumicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados
Antispticos: sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de los
microorganismos y no son lo suficientemente txicos para ser aplicados a los
tejidos vivos
El calor es el mtodo ms utilizado para la esterilizacin y puede emplearse calor
seco con hornos con una temperatura de 170C por una hora o como calor
hmedo con autoclaves con una temperatura de 121C a 15 libras de presin por
pulgada durante 20minutos.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
las pipetas despus de concluir la sesin.
Primero que nada se corre el riesgo de la ruptura de alguno de los materiales lo
que puede causar algn accidente adems de que es importante recoger el
material y desinfectarlo para evitar la contaminacin bacteriolgica en especial si
los materiales sern usados despus.
8.- Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa
de trabajo despus de concluir cada sesin.
De no limpiar la mesa se propaga la contaminacin, hay que tratar de mantener el
campo estril. Adems que hay que tener el mayor cuidado en la limpieza para el
manejo de las muestras y evitar alteraciones en los resultados.
10.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.
Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina pestis y algunas

pertenecientes a la flora oportunista como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae
y Proteus mirabilis.
11.- Explica cul es el objetico de sembrar diluciones de agua.

Las diluciones son recomendadas debido al alto contenido de bacterias ya que
permiten trabajar con un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas
viables as como el aislamiento adecuado de las colonias. Es importante no
trabajar con una dilucin tan grande ya que el nmero de bacterias sera tan bajo
que podra impedir el detectar las colonias.

El objetivo es obtener, a partir de elevado nmero de bacterias, un nmero
reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubar esta, cada una de las bacterias originara una colonia.
13. Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en agar macconkey.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Microorganismos
Colonias
Escherichia coli ATCC 25922
Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Incoloras, transparentes
Shigella flexneri ATCC 12022
Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Diminutas, incoloras, opacas
14. Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico.

Un cultivo es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para
favorecer el proceso deseado. Un cultivo es empleado como un mtodo
fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan
enfermedades en medicina humana y veterinaria.

El enriquecimiento es una tcnica que utiliza un medio selectivo lquido para
permitir el desarrollo de un microorganismo a partir de una muestra que contiene
una gran variedad de microorganismos. As, aquellos microorganismos para los
que el ambiente sea ms favorable crecern ms que los otros y finalmente sern
predominantes
Son aquellos que, adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por adicin de sangre u otros productos
biolgicos
que aportan dichos factores. En ocasiones es posible aadir
suplementos artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del mismo.
El gonococo, por ejemplo, necesita cistina y cistena para su crecimiento. Estas
sustancias son aportadas por la sangre calentada adicionada al medio de cultivo
(agar chocolate).
Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias
contenidas en una poblacin polimicrobiana. El fundamento de estos medios
especfica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para
favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de enterobacterias.
17.- Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias

grampositivas y gramnegativas, resaltando sus diferencias.
Bacteria Gram Positiva:
a) Su envoltura celular comprende:
1. La membrana citoplasmtica
2. La pared celular.
b) La pared celular est compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano o
murena (polmero de N-acetil-2-D-glucosamina, unido en orientacin -1,4
con N-acetil murmico), su grosor le confiere una gran resistencia, las
protege de una ruptura osmtica en ambientes acuticos, les confiere forma
y es la responsable de retener el tinte azul oscuro o violeta durante la
tincin de Gram.
c) Presentan slo una membrana lipdica (membrana citoplasmtica) y la capa
gruesa de peptidoglicano.
Posee dos clases de cidos teicoicos: cido lipoteicoico (cido teicoico
unido a un lpido) y cido teicoico. Son polisacridos que se unen al cido
N-acetil murmico del peptidoglicano.
La pared celular se une a la membrana citoplasmtica mediante molculas
de cido lipoteicoico.
Ciertas bacterias Gram-positivas, cuando se someten a un rgimen de
limitacin de fosfato son incapaces de sintetizar cidos teicoicos, pero en su
lugar producen cidos teicurnicos. Los teicurnicos consisten en polmeros
aninicos formados por la alternancia de cidos urnicos (que tienen
grupos -COOH libres) y aminozcares como la N-acetil-galactosamina.
d) Pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S o
capa superficial (es la parte ms externa de la envoltura celular bacteriana)
unida a la capa de peptidoglicano.
e) No existe presencia de endotoxinas.
Bacteria Gram Negativa:
a) Conformada por 4 zonas:
1. La membrana citoplasmtica.
2. El espacio periplasmtico, ubicado entre la membrana citoplasmtica y el
peptidoglicano.
3. Una fina capa de peptidoglicano.
4. Membrana externa que contiene fosfolpidos, el lipopolisacrido (LPS) y
protenas (protenas de membrana 6 externa). Esta capa est
estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de
la pared celular.
b) Su estructura didrmica, es decir, de doble membrana celular (una externa

y la otra citoplasmtica) est ntimamente ligada al color rosado tenue que
presentan ante la tincin de Gram.
c) Presentan dos membranas lipdicas (membrana citoplasmtica y membrana
externa) entre la fina pared celular de peptidoglicano
Entre la membrana citoplasmtica interna y la membrana externa que
recubre la pared celular se localiza el espacio periplsmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes
para la nutricin en estas bacterias. Retienen la safranina.
La membrana externa contiene diversas protenas; entre ellas, las porinas o
canales proteicos que permiten el paso de ciertas sustancias, adems de
los lipopolisacridos (LPS), formados por tres regiones: el polisacrido O
(antgeno O), una estructura polisacrida central (KDO) y el lpido A
(endotoxina).
d) Pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la
membrana externa.
e) Presencia de endotoxinas: el lipopolisacrido (LPS)
18.- Cmo se definen a las bacterias coliformes?

Se definen como coliformes totales a aquellas bacterias entricas en forma de
bacilos cortos que se caracterizan por tener las siguientes propiedades
bioqumicas:
Ser aerobias o anaerobias facultativas

Ser bacilos Gram negativos;
No ser esporgenas; (Si es Gram negativo NO esporula)
Fermentan la lactosa a 35C en menos 48 horas
Con produccin de cido y gas
Incluye los gneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. Durante

mucho tiempo se consideraron evidencia de contaminacin fecal, pero se ha
demostrado que muchos de ellos pueden vivir e incluso crecer en el suelo, el agua
y otros ambientes. Actualmente se consideran un excelente indicador de la
eficiencia de los procesos de sanitizacin y desinfeccin, as como de calidad
sanitaria en agua, vegetales y diversos productos procesados. Su determinacin
se basa generalmente en la capacidad de fermentar lactosa. Se pueden utilizar los
mtodos del nmero ms probable (NMP MPN por sus siglas en ingls) que es
un mtodo estadstico en tres etapas y permite el hallazgo de cantidades muy
bajas de coliformes. Tambin se pueden detectar por cuenta en placa utilizando
agar bilis-rojo violeta (ABRV RVBA por sus siglas en ingls) en el cual las
colonias fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse

por filtracin en membrana (Millipore) e incubacin en medios adecuados, por
mtodos rpidos como Petrifilm y reacciones cromognicas o fluorognicas.
Coliformes fecales: dentro del grupo coliforme, los de origen fecal son capaces
de fermentar la lactosa tambin a 44.5 C; se consideran el indicador ms
adecuado de contaminacin con heces de animales y humanos, por ejemplo en
pescados y mariscos, carnes, leche, alimentos RTE, entre otros. La determinacin
se hace a partir de la segunda etapa (confirmativa) del mtodo de NMP, cultivando
en caldo lactosado con incubacin a 44.5 C. Generalmente se combinan las
determinaciones, segn se requiere.
Escherichia coli: se considera indicador de contaminacin fecal reciente, humana
o animal en productos como agua embotellada, leche y jugos, alimentos infantiles,
y alimentos procesados, en general. Se caracteriza por ser coliforme
termotolerante (fermenta lactosa a 44.5C) que produce indol a partir de triptofano
y produce -glucuronidasa, caractersticas que se usan para su identificacin en
laboratorio, generalmente en la etapa final del NMP o de alguno de los otros
mtodos, incluyendo Petrifilm.
19.- Qu indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
La presencia de coliformes en el suministro de agua es un indicio de que el
suministro de agua puede estar contaminado, ya sea con aguas negras u otro tipo
de desechos en descomposicin. Generalmente, las bacterias coliformes se
encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los
sedimentos del fondo.
20.- Cul es la importancia clnica de las bacterias coliformes?
La determinacin de la calidad bacteriolgica reviste gran importancia en el mbito
de la salud pblica ya que permite garantizar la inocuidad (incapacidad para hacer
dao) del agua destinada al consumo, evitando as epidemias gastrointestinales, y
adems de descubrir enfermedades que son comunes al hombre y animales.
21.- Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No todas las bacterias coliformes son de origen fecal, por lo que se hizo necesario
desarrollar pruebas para diferenciarlos a efectos de emplearlos como indicadores
de contaminacin. Dentro del grupo de los coliformes totales (que comprende la
totalidad del grupo) existe un subgrupo que es el de los coliformes fecales (los de
origen fecal).
Vase pregunta nmero 18.
22.- Qu implicaciones epidemiolgicas tienen

enterobacterias en la muestra de agua que colectaste?
la
presencia
de
Las complicaciones pueden ser que venga una epidemia de E.coli as como
tambin de Salmonella y muy graves que no se puedan controlar.
23.- Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua

* Enf. trasmitidas por el agua: Clera, Fiebre Tifoidea y Paratifoidea, Disenteras,
Poliomelitis, Hepatitis, Salmonelosis, Cryptosporidiosis, Gastroenteritis.
* Enf. con base en el agua: Ascariasis, Clonorquiasis, Dracunculosis,
Paraginimiasis, Esquistosomiasis.
* Enf. vectoriales relacionadas con el agua: Dengue, Filariasis, Paludismo,
Oncocercosis, Fiebre del Valle del Rift (FVR).
24.- Qu significan las siglas IMViC?

I: Indol M: Rojo de metilo V: V-P (Voges-Proskauer) i C: Citrato de Simmons
25.- Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMViC?

Las bacterias pertenecientes a la familia enterobacteriaceae, pueden identificarse
a travs de una serie de pruebas bioqumicas, que permiten determinar la
presencia o ausencia de ciertas enzimas y a veces incluso permiten determinar la
existencia de una secuencia metablica. Con este fin se han desarrollado diversos
esquemas de clasificacin, uno de los ms conocidos y utilizados corresponde al
IMVIC que se desarroll para clasificar especies de la familia antes mencionada y
correspondientes al grupo de bacterias coliformes (bacterias aerbicas o
anaerbicas facultativas, Gram (-), bacilares, no esporgenas que producen cido
y gas durante la fermentacin de la lactosa).
26.- Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para

realizar la prueba de la oxidasa?
Ya que la prueba tiene como fundamento demostrara la presencia de un sistema

citocromooxidasa que activa la oxidacin del citocromo, que es reducido por el
oxgeno molecular que produce agua o perxido de hidrgeno segn la especie
bacteriana.
Los metales pueden interferir de manera oxidativa ya que las enzimas estn
ntimamente relacionadas a la cadena de transporte de electrones.
horas de incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se
origina a partir de una sola bacteria (UFC) y estas se dividen en un tiempo
promedio de 30 minutos.
El nmero de bacterias totales segn su fusin binaria

Unidad Xochimilco
Cuestionario de Laboratorio
Por: Aura Ramirez Vega

Lic. en Biologia
Docente:
Grupo: BB12A

esterilizacin.
METODOS QUMICOS: Provocan la prdida de viabilidad de los
microorganismos
-xido de etileno: Utilizado en estrerilizacin gaseosa. Destruye todos los
microorganismos, incluso los virus. Sirve para esterilizar material
termosensible.
-Aldehido: Agentes alquilantes que actan sobre las protenas provocando
modificacin irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimtica,
destruyen esporas.
-Gluteraldehidos: Solucion salina al 2% y sumergir el material de 20 a 30 mins
y enjuagar 10mins.
-Folmaraldehidos: Pastillas para formaraldehido, se disponen en el fondo de

una caja envueltas en gas o algodn y despus expuesta al calor para una
rpida esterilizacin. A una temperatura ambiente esterilizan en 36hrs.
MTODOS FSICOS: Dependen del tiempo y la temperatura. Desnaturalizan
protenas y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidantes
irreversibles en los microorganismos.
-Calor hmedo: Produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas por 2
razones; el agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras
violgicas son producidas por reacciones que eliminan agua y que el vapor de
agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho mas elevado que el
aire.
-Autoclave: Esterilizacion por el vapor de agua a presin. El mas utilizado es el
Chamberland. Esterilizacion a una temperatura de 120 grados a 1atm durante
20 o 30mins.
-Tyndalizacion: Esterilizacion por accin discontinua del vapor de agua, se
basa en el principio de Tyndal. Las bacterias que resisten 1 sesin pueden ser
destruidas cuando la misma operacin se repite con intervalos separados en
varias sesiones.
-Filtracion: Se utilizan membranas filtrantes con poros de un tamao
determinado. Los filtros no retienen virus ni micoplasmas, estos estn en el
lmite de separacin segn el dimetro del poro. Se usa para esterilizar,
algunas pomadas, soluciones oftlmicas, intravenosas, etc.
2. Explica las ventajas y desventajas de los mtodos esterilizantes e indica

cuando es recomendable utilizarlos.
La eleccin de mtodo va a depender de las caracter
VENTAJAS
CALOR HMEDO: Rpido, no deja
residuos txicos, bajo deterioro material,
econmico.
CALOR SECO: No es corrosivo para
metales e instrumentos, esteriliza
substancias en polvo.
IONIZANTES RUV: Esterilizan superficies.
FILTRACION: Esteriliza aceites, pomadas
y soluciones oftlmicas.
XIDO DE ETILENO: Esteriliza material
DESVENTAJAS
No se permite para emulciones con agua,
es corrosivo sobre algunos metales.
Muy tardado al esterilizar, baja penetracin
del calor, radiacin de acuerdo a su tiempo.
Escasamente penetrante.
No retienen virus ni microplasma.
Peligrosos por ser altamente flamables,
explosivos y cancergenos.
termosensible, equipos electrnicos, etc.

ALDEHIDOS: Rpido y nico esterilizante
fro.
GAS PLASMA DE PERXIDO DE
HIDRGENO: No deja residuos txicos, se
convierte en agua y oxgeno al final del
proceso, material sin aireacin, dura entre
1hr, y 1hr 30mins.
No se pueden esterilizar objetos con

celulosa, algodn, lquidos, humedad,
madera, etc.
Muy costoso.
3. Principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

desinfeccin.
DESINFECTANTES ESTERILIZANTES: Alcohol (60%-85% etanol o
isopropanol en agua). Detergentes catinicos (amonio cuaternario). Gas cloro,
compuestos clorados (cloraminas, hipoclorito sdico, dixido de cloro). Sulfato
de cobre. xido de etileno(gas). Formaldehido. Glutaraldehido. Perxido de
hidrgeno. Compuestos yodforos (yodo). Dicloruro de mercurio. Ozono. cido
peractico. Compuesto fenlico.
ANTISPTICOS:Alcohol(60%-85% etanol o isopropanol en agua). Compuestos
que contienen fenol. Detergentes catinicos, especialmente compuestos de
amonio cuaternario. Perxido de hidrgeno, compuestos yodorosos que
contienen yodo en solucin, nitrato de plata.
4. Qu tipo de substancias suelen utilizarse comnmente para desinferctar

superficies?
HIPOCLORITO DE SODIO AL 10%: Mezclarlo con 900ml de agua y envasarlo
en frasco de plstico.
SOLUCION BENZAL DILUIDA 1:10: Diluir con agua y envasarla en frasco
ambar y bien tapado. Desinfectantes como bacterisidas, fungisidas y virusidas.
5. Explica cual es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

esteril para el trabajo microbiolgico y seala que factores influyen en la
creacin de zona esteril.
Crea corrientes de aire caliente que arrastran partculas de polvo y
microorganismos dispersos en el aire (conveccin de masas de aire). Al mismo
tiempo la temperatura que alcanza distruye cualquier organismo y adems
esteriliza el asa bacteriolgica.
6. Menciona otros mtodos usados en la industria en los laboratorios para

crear zonas estriles.
DISCONTINUA: A 121oC durante 30 y 60mins y dejarla enfriar. Se inyecta
vapor de agua.
CONTINUA: A mayor temperatura menos tiempo 14oC durante 30-120s. Se
pueden 2 sistemas: Inyeccin a vapor e intercambiadores de calor.
ESTERILIZACION DEL MEDIO DE CULTIVO: Medio nutritivo que se prepara
inicialmente, contiene clulas vegetativas y esporas que proceden de los
constituyentes del medio, agua y recipientes.
ESTERILIZACION DEL AIRE DE FERMENTACION
AGITACION Y MEZCLADO: La agitacin es la operacin que crea o acelera el
contacto entre 2 o varias fases.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, tubos y

pipetas al concluir.
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacin y de
que se rompan y posiblemente nos cortemos.

trabajo al concluir.
Se puede provocar un foco de infeccin exponiendo las bacterias en el exterior.
9. Diagrama de un microscopio y describir cada una de sus partes e indica su

funcin.
BRAZO: Sirve para trsladar el microscopio y es donde se sujetan las pinzas, el

carro y el tubo.
BASE O PIE: Proporciona soporte al microscopio.
PLATINA: Aqu se coloca el portaobjetos con la muestra.
PINZAS: Sujeta la preparacin
TORNILLO MACROMTRICO: Movimiento rpido hacia arriba y debajo del
tubo o de la platina.
TORNILLO MICROMTRICO: Parte mecnica del movimiento giratorio que
coloca en posicin cualquiera de los objetos.
TUBO: Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y a los objetivos.
CREMALLERA: Permite el movimiento de los tornillos macro y micromtrico,
sea de mayor o de menor amplitud.
OCULAR: Lentes que captan y amplian la imagen de los objetivos.
OBJETIVOS: Incrustados en el revolver, son pequeos cilindros que
proporcionan el poder de resolucin y cantidad total del aumento.
DIAFRAGMA: Se encuentra en el condensador, elimina el exceso de

luminosidad para tener una buena iluminacin del objeto a observar.
FUENTE DE LUZ: Algn tipo de luz, es un foco que da energa elctrica hacia
el sistema condensador.
10. Explica tipos de bacterias que se pueden aislar en el agua.

Enterobacteriaceae como shigella, salmonella, yersina pestis y algunas
pertenecientes a la flora oportunista como escherichia collo, klebsiella
pneumonae y proteus mirabilis.
11. Explica cual es el objetivo de sembrar diluciones de agua.

Son recomendadas debido al alto contenido de bacterias ya que permiten
trabajar con un nmero apropiado de clulas asi como el aislamiento adecuado
de las colonias. Es importante no trabajar con una dilucin tan grande ya que
el nmero apropiado de bacterias sera tan bajo que podra impedir el detectar
las colonias.

El objetivo es obtener, a partir de un elevado nmero de bacterias, un nmero
reducido de ellas distribuidas endividualmente sobre la superficie de la placa.
Al incubar esta, cada una de las bacterias iriginaria una colonia.
13. Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en agar de MacConkey.

Se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram - de fcil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa
en muestras clnicas de agua y alimentos. Todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
MICROORGANISMOS
Escherichia colli
ATCC 25922
Klebsiella pneumonae
ARCC 700603
Salmonella typhimunum ATCC 12022
Proteus microbilis
ATCC 43071
Enterococcus faecalis
ATCC 29212
COLONIAS
Rojas con halo turbio.
Rosadas mucosas.
Incoloras, transparentes.
Incoloras, transparentes.
Diminutas, incoloras, opacas.
14. Explica a que se le llama medio de cultivo bacteriolgico.
Substancias que pueden ser liquidas o slidas que contienen los nutrientes
nescesarios para que una bacteria pueda crecer y desarrollarse.
15. Explica que es un medio enriquecido.

Estan compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le
puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos
(sangre, suero, etc) Se utiliza para microorganismos de grandes exigencias
nutricionales. Se utilizan comnmente para la cosecha de diferentes tipos de
microbios presentes en la muestra.
16. Explica que es un medio de cultivo selectivo

Son aquellos que favorecen el crecimiento de un microorganismo en
especfico. Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir
de una poblacin microbiana mixta.
17. Caractersticas de la pared celular de bacterias Gram + y Gram- y sus

diferencias.
GRAMMPOSITIVAS
GRAMMNEGATIVAS
DIFERENCIAS
Capa gruesa y rgida

compuesta por varias
capas de
peptidoglicano.
Contiene cidos
teicoicos. cido
lipoteicoico que est en
la superficie en la capa
de peptidoglucano
unido a la membrana
citoplsmica.
cido teicoico se
encuentra en la
superficie de la pared y
se une a solo una capa
del peptidoglicano
La carga negativa de los
cidos con la unin de
cationes regulan el
movimiento hacia el
interior y exterior de la
Capa delgada de
peptidoglicano
Contiene una membrana
externa.
El peptidoglicano est unido
a lipoprotenas de la
membrana externa.
Contiene periplasma, una
sustancia gelatinosa
localizada entre la
membrana externa y la
membrana plasmtica.
Periplasma con enzimas
degradadoras de protenas
de transporte.
No contiene cidos
teicoicos.
Alta posibilidad de ruptura
mecnica.
Membrana externa
Presencia de
periplasma en las
grammnegativas.
Presencia de
cidos teicoicos
en las
grammpositivas.
Presencia de
membrana
externa en las
grammnegativas.
Presencia de
lipopolisacaridos,
lipoprotenas y
fosfolpidos en la
membrana de las
grammnegativas.
En cuanto a la
tincin de
gramm. Las
bacterias
clula.
Baja posibilidad de
ruptura de la pared
gracias a los cidos
teicoicos.
compuesta por
lipopolisacaridos,
lipoprotenas y fosfolpidos.
Membrana externa con
permeabilidad media.
grammpositivas
gracias a su
espesa capa de
petidoglicano son
capaces de
retener el
compuesto cristal
violeta dentro de
la pared celular.
Por el contrario
las
grammpositiva
s son
incapaces de
retener el
compuesto
debido a su
delgada capa
de
peptidoglicano.
18. Cmo se definen las bacterias coliformes?

Grupo de bacterias que comparten caractersticas bioqumicas en comn y son
tiles como microorganismo indicadores de sanidad de alimentos y agua. Entre
los coliformes se encuentran las enterobacterias. Morfologia dacilar, pueden
ser aerobias o anaerobias facultativas. No forman endosporas, son Gram fermentan lactosa produciento cido y gas en 24 a 38hrs a 36 0C.

La presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgnicos sin
tratar que pueden tener un alto impacto en el medio ambiente. Indican la
sanidad de alimentos y agua. Es un indicador de calidad.
20. Cul es la importancia clnica de las B.Coliformes?

Permite garantizar la inocuidad del agua destinada al consumo evitando
epidemias gastrointestinales. Nos ayuda a encontrar bacterias patgenas y
virus.

No, tambin existen coliformes de vida libre.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias

en la muestra de agua recolectada?
Pueden contener una amplia gama de parsitos, bacterias y virus causantes de
enfermedad las cuales pueden variar desde condiciones leves como las
infecciones agudas de odo y otras mas graves.

conteminada con material fecal?
ENFERMEDAD
AGENTE
SINTOMAS
Shigelosis (disentera
shigella
Dolor abdominal, fiebre
bacilar)
aguda, sangre, moco o
pus en las heces, dolor
rectal, diarrea acuosa,
vomito, nauseas.
Amebiasis
Quistes de Entamoeba
Clicos abdominales,
histolytica
prdida de peso,
tenesmo, flatulencia
excesiva.
Hepatitis A
Orina oscura, ftiga,
picazn, inapetencia,
fiebre baja, heces color
arcilla o plidas, ictericia.
Balantidiasis
Balantidium coli
(Mayormente
asintomtico) cuadros
diarreicos, fiebre,
nausea, vomito
Criptosporidiosis
Cryptosporidium
Deshidratacin, prdida
de peso, clicos
Esquistosomiasis Schistosoma mansoni y
Dolor abdominal y
Schistosoma
diarrea (que puede ser
intercalatum
sanguinolenta).
Giardiasis
Giardia intestinalis
(Mayormente
asintomtica) diarrea
repentina pastosa o
lquida, amarilla,
Clera
Vibrio cholerae
maloliente, con moco y

acompaada por clicos,
dolor abdominal,
nuseas, anorexia,
flatulencia, meteorismo,
aerogastria y prdida de
peso.
Vmito, diarrea,
calambres,
deshidratacin, shock

Son siglas en ingls que representan las pruebas bioqumicas cualitativas a las
que
son sometidas las muestras para saber su origen bacteriolgico, es decir,
saber de qu bacteria se trata.
I: Indol
M: Rojo de Metilo
V: V-P(Voges-Proskauer)
IC: Citrato de Simmons.
25. Cual es el objetivo de realizar pruebas de identificacion IMViC?

Son cuatro pruebas bioqumicas cualitativas (indol, rojo de metilo, vogesprosikaver y citrato) que se emplean fundamentalmente para la identificacin
de las Enterobacterias (bacilos gran negativos, anaerobios facultativos con
metabolismo fermentador), su nivel de patogeniesidad, su poder de
reproduccin, su virulencia, origen y medios en los que crece
proliferantemente.
26. Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para

realizar la prueba de oxidasa?
Porque es de metal. Para las pruebas de oxidasa se utiliza un reactivo llamado
Kovacs, el cual est compuesto de alcohol isoamlico, pdimetilaminobenzaldehdo y cido clorhdrico. El cido puede reaccionar con el
metal y dar falsos positivos.
27. Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de

24hrs de incubacin, recuerda que la colonia se origina a partir de una sola
bacteria (UFC) y estas se dividen en un tiempo promedio de 30mins.
(UFC) Unidades Formadoras de Colonias
Despus de 24 h de incubacin= 28,147,497,670 bacterias
30min= 2
60 min= 4
90 min= 8
120min= 16
14
1440 min = 2.814749767X 10

Unidad Xochimilco

Por: Claudia Libertad Larios Ayala

Lic. En Nutricin Humana
Docente:
Grupo: BB12A
CUESTIONARIO PRCTICA
MTODOS BSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE
ENTEROBACTERIAS DEL AGUA.
esterilizacin.
Mtodos fsicos
Depende de factores como tiempo, exposicin y temperatura. El calor se puede
aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor hmedo el cual destruye
a los microorganismos por desnaturalizacin de las protenas y el calor seco que
destruye a los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. El
calor es considerado como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y
cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de
dao.
Mtodos qumicos
Algunas sustancias qumicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes
porque tienen la capacidad de promover una o ms reacciones qumicas capaces
de daar los componentes celulares de los microorganismos (protenas,
membranas, etc.)
2. Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior

La eleccin del mtodo, va a depender de las caractersticas del elementos que se
va a esterilizar, tiempo, costo, que tan peligrosos son, consecuencias secundaria,
entre otros factores.
Mtodo Mtodos Fsicos
Calor hmedo Ventajas Desventajas
Rpido, no deja residuos txicos, bajo deterioro del material expuesto, econmico
No se permite para emulsiones con agua, es corrosivo sobre algunos metales
Calor seco No es corrosivo para metales e instrumentos, permite esterilizacin de
sustancias en polvo Mayor tiempo de esterilizacin. Baja penetracin del calor.
Radiaciones de acuerdo al tiempo de radiacin.
Ionizantes RUV Esterilizan superficies Escasamente penetrantes
Filtracin Esteriliza aceites, pomadas, soluciones oftlmicas No retienen virus ni
micro plasma.
3. Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en
la desinfeccin.
Desinfectantes y esterilizantes: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua).
Detergentes catinicos (compuestos de amonio cuaternario) Gas cloro.
Compuestos clorados (cloraminas, hipoclorito sdico, dixido de cloro) Sulfato de
cobre. xido de etileno (gas). Formaldehdo. Glutaraldehdo. Perxido de
hidrgeno. Compuestos yodforos que contienen yodo en solucin. Dicloruro de
mercurio. Ozono. cido peractico. Compuestos fenlicos.
Antispticos: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua). Compuestos que
contienen fenol (hexaclorofeno, triclosan, cloroxilenol, clorhexidina). Detergentes
catinicos, especialmente compuestos de amonio cuaternario (cloruro de
benzalconio). Perxido de hidrgeno (solucin al 3%). compuestos yodorosos que
contienen yodo en solucin. Nitrato de Plata.
4. Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desinfectar
superficies?
Compuesto fenlico clorado, cloroxilenol:, es eficaz sobre un amplio espectro de

bacterias grampositivas, es menos eficaz sobre estafilococos y bacterias
gramnegativos.
El glutaral: es un desinfectante bactericida muy activo sobre las bacterias
grampositivas y gramnegativos, es activo sobre el bacilo de la tuberculosis,
hongos y virus como el VIH y de la hepatitis B.
Cloroxilenol: es un desinfectante y antisptico.}
Etanol: desinfectante representativo.
Glutarol: desinfeccin de instrumentos.
Polvidona yodada: antisptico, desinfeccin de la piel.
5. Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

estril para el trabajo microbiolgico y seala que factores influyen en la
Trabajar cerca del mechero (radio de 20 centmetros aproximadamente) crea
corriente de aire clido que impide la entrada a esta zona de bacterias
contaminantes esto creando un inoculo ms puro del microorganismo a trabajar.
6. Menciona otros mtodos usados en la industria y en la industria y en los
laboratorios de investigacin para crear zonas de trabajo estriles.
Mtodo Mtodos Qumicos
Ventajas Desventajas
xido de Etileno Esteriliza material que es termo sensible, como equipos
electrnicos, et. Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, adems de ser
cancergeno
Aldehdos Mtodo rpido y nico esterilizante fro. No se puede esterilizar objetos

con celulosa, algodn, lquidos, humedad, madera, etc.
Gas-Plasma de
Perxido de
Hidrgeno No deja ningn residuo txico, se convierte en agua y oxgeno al final
del proceso, material sin aireacin, dura aproximadamente entre una hora y hora y
media. Muy costoso.
Uso de bata, guantes y cubre bocas con la finalidad de evitar contaminacin.
Lavado del rea de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido 1:10.
El uso del mechero.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacin.
Se puede provocar un foco de infeccin.
9. Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e

indica su funcin.
PARTE FUNCION
BRAZO Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del
microscopio y el revlver. Adems sirve para trasladar el microscopio de un lugar a
otro
BASE O PIE Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas
las partes del microscopio
PLATINA Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene en su centro una abertura
circular por la que pasar la luz del sistema de iluminacin. Aqu se coloca el
portaobjetos con la muestra a observar
PINZAS DE SUJECION Parte mecnica que sirve para sujetar la preparacin. La

mayora de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con
dos tornillos, que permiten un avance longitudinal y transversal de la preparacin.
TORNILLO MACROMETRICO Permite hacer un movimiento rpido hacia arriba o
hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.
TORNILLO MICROMETRICO Parte mecnica de movimiento giratorio que nos
permite colocar en posicin cualquiera de los objetivos que se encuentran en l
TUBO Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos.
CREMALLERA Permite que el movimiento de los tornillos macro y micromtrico
sea de mayor o de menor amplitud.
OCULAR Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que
Capta y amplia la imagen formada en los objetivos. Los primeros microscopios
eran monoculares, es decir, posean una sola lente. Los microscopios actuales
poseen dos oculares, uno para cada ojo y se les llama binoculares.
OBJETIVOS Se encuentran incrustados en el revlver Son unos pequeos
cilindros colocados en el revlver que proporciona el poder de resolucin del
microscopio y determinan la cantidad total de aumento.
DIAFRAGMA Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de
luminosidad para tener una buena iluminacin del objeto a observar
FUENTE DE LUZ Para observar la muestra microscpica es necesario que sta
se ilumine con algn tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que
da energa elctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador
10. Explica qu tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

Las enterobacteriaceae, escherichia, shigella, edwarsiella, salmonella, citrobarter,
klebsiella,
11. Explica cul es el objetivo de sembrar diluciones de agua.
Trabajar con un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas viables, as
como un aislamiento adecuado de colonias. Disminuir la concentracin bacteriana
de una muestra.
La tcnica de estra cruzada es un procedimiento semicuantitativo.
Es una tcnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado nmero de
bacterias, un nmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la
superficie de la placa. Al incubar sta, cada una de las bacterias originar una
colonia.
13. Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
El agar MacConkey es un medio diferencial para la seleccin y recuperacin de
Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entricos relacionados. Contiene
sales biliares y cristal violeta que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas
y de algunas gramnegativos exigentes. Contiene lactosa como nica fuente de
carbono. Identificando con un color rojo las bacterias fermentadoras de lactosa.
14. Explica a que se llama medio de cultivo bacteriolgico.
Cualquier sustancia que puede ser usada para el cultivo de microorganismos
pueden ser solidos o lquidos que contienen los nutrientes necesarios para que
una bacteria pueda crecer y desarrollarse, un medio de cultivo debe ser
esterilizado antes de cultivar.
15. Explica qu es un medio enriquecido.
Aquellos medios que han sido complementados con lquidos corporales, vitaminas
especficas, aminocidos, protenas y otros nutrientes claramente definidos como
tales. Se utilizan para favorecer el crecimiento de ciertas especies bacterianas al
mismo tiempo que inhibe el desarrollo de microorganismos no deseados.
16. Explica qu es un medio de cultivo selectivo.
Son aquellos que favorecen el crecimiento especfico de un microorganismo
particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de
microorganismos a partir de una poblacin microbiana mixta.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias
grampositivas y gramnegativos, resaltando sus diferencias.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial para
replicacin y supervivencia de la bacteria. Poseen una pared celular ms
compleja: -pared celular interna -pared de peptidoglucano - bicapa lipdica externa
No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco rgido alrededor de

la bacteria, mantiene estructura y es barrera impermeable a macromolculas,
ofrece proteccin en condiciones adversas
No tiene espacio peri plasmtico Espacio peri plasmtico: espacio entre la
superficie externa de la membrana citoplasmtica y la interna de la membrana
externa.
La red de murena est muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas La red de
murena presenta una sola capa.
La penicilina mata a las grampositivas, ya que bloquea la formacin de enlaces
peptdicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano La penicilina no mata a
las Gram negativas, a causa de la capa de lipopolisacridos situada en la parte
externa de la pared celular.
No contiene LPS Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa
clulas B, liberacin de IL, FNT, IL 6 por macrfagos.
En la tincin de Gram, retienen la tincin azul Quedan decoloradas.
Conservan el complejo yodo colorante, Pierden el complejo yodo colorante
Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
Pueden ser anaerobios o aerobios.
18. Cmo se definen a las bacterias coliformes?
Los coliformes son un grupo de bacterias que comparten caractersticas
bioqumicas en comn y son tiles como microorganismos indicadores de sanidad
de alimentos y agua. Entre los coliformes se encuentran las enterobacterias.
Poseen morfologa bacilar, pueden ser aerobias o anaerobias facultativas. No
forman endosporas, son gramnegativos, fermentan la lactosa produciendo cido y
gas en 24 a 38 horas a 36 C.
Indican la presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgnicos
sin tratar, que pueden tener un alto impacto en el ambiente. Indican la sanidad de
alimentos y agua. Es un indicador de calidad de los alimentos.

de la salud pblica ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al
consumo evitando as epidemias gastrointestinales.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen
la
presencia
de
Las bacterias coliformes fecales pueden tener efectos graves en la salud pblica.
Los volmenes de agua con altos niveles de esta bacteria pueden contener una
amplia gama de parsitos, bacterias y virus causantes de enfermedades, las
cuales pueden variar desde condiciones leves como las infecciones agudas del
odo, hasta otras ms graves que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y
la hepatitis. Los gusanos parsitos y los patgenos bacterianos tales como
Salmonella, tambin se encuentran comnmente en el agua que da positivo en la
prueba que busca altos niveles de bacterias coliformes fecales.
Salmonelosis, Fiebre paratifoidea, shiguelosis, Clera
IMVIC es una prueba utilizada en biologa para la identificacin bacterias. Se
compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
Indol (I): consiste en cultivar el microorganismo en el estudio del caldo rico en
triptfano.
Rojo de Metilo (M): es un indicador de PH
Vogues-Proskavet (VI): producto final de la glucolisis.
Citrato (C): sirve para determinar si un organismo puede crecer utilizando citrato.

Se emplean fundamentalmente para la identificacin de las Enterobacterias
(bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos con metabolismo fermentador).
horas de incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se orgina
a partir de una sola bacteria (UFC) y stas se dividen en un tiempo promedio
de 30

Unidad Xochimilco
Tema: CUESTIONARIO
Por: Thania Sarahi lvarez Romn.
Lic. En Estomatologa.
Docente:
Grupo: BB12A
CUESTIONARIO

esterilizacin.
Mtodos fsicos
Depende de factores como tiempo, exposicin y temperatura. El calor se puede aplicar
como agente esterilizante de dos formas: el calor hmedo el cual destruye a los
microorganismos por desnaturalizacin de las protenas y el calor seco que destruye a
los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. El calor es considerado
como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar
soporte altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de dao.
Mtodos qumicos
Algunas sustancias qumicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque
tienen la capacidad de promover una o ms reacciones qumicas capaces de daar los
componentes celulares de los microorganismos (protenas, membranas, etc.)
2. Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior e indica

cundo es recomendable utilizar cada uno de stos.
La eleccin del mtodo, va a depender de las caractersticas del elementos que se va a

esterilizar, tiempo, costo, que tan peligrosos son, consecuencias secundaria, entre otros
factores.
Mtodo
Calor hmedo
Mtodos Fsicos
Ventajas
Rpido, no deja
txicos,
Calor seco
Ionizantes RUV
Filtracin
bajo
residuos
deterioro
Desventajas
No se permite para emulsiones
del
con agua, es corrosivo sobre
material expuesto, econmico

No es corrosivo para metales
algunos metales
Mayor tiempo de esterilizacin.
Baja
instrumentos,
permite
penetracin
de
del
esterilizacin de sustancias en
Radiaciones
polvo
Esterilizan superficies
Esteriliza aceites, pomadas,
tiempo de radiacin.
Escasamente penetrantes
No
retienen
virus
soluciones oftlmicas
microplasma.
calor.
acuerdo
al
ni
Mtodo
xido de Etileno
Mtodos Qumicos
Ventajas
Esteriliza material
Desventajas
que es Peligroso por
ser
altmente
termosensible, como equipos inflamable y explosivo, adem+s

electrnicos, et.
Mtodo
rpido
Aldehidos
de ser cancergeno
nico No se puede estrilizar objetos
esterilizante fro.
con celulosa, algodn, lquidos,
Gas-Plasma
humedad, madera, etc.

de No deja ningn residuo txico, Muy costoso.
Perxido
de se
Hidrgeno
convierte
en
agua
oxgeno al final del proceso,

material sin aireacin, dura
aproximadamente entre una
hora y hora y media.

desinfeccin.

Detergentes catinicos (compuestos de amonio cuaternario) Gas cloro. Compuestos
clorados (cloraminas, hipoclorito sdico, dixido de cloro) Sulfato de cobre. xido de
etileno (gas). Formaldehdo. Glutaraldehdo. Perxido de hidrgeno. Compuestos
yodforos que contienen yodo en solucin. Dicloruro de mercurio. Ozono. cido
peractico. Compuestos fenlicos.
Antispticos: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua). Compuestos que contienen

fenol (hexaclorofeno, triclosan, cloroxilenol, clorhexidina). Detergentes catinicos,
especiamente compuestos de amonio cuaternario (cloruro de benzalconio). Perxido de
hidrgeno (solucin al 3%). compuestos yodorosos que contienen yodo en solucin.
Nitrato de Plata.
4. Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desifenctar
superficies?
Los desinfectantes como lo son bacterisidas, fungisidas y virusidas
5. Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estril para
el trabajo microbiolgico y seala que factores influyen en la creacin de la zona
estril.
Trabajar cerca del mechero (radio de 20 centmetros aproximadamente) crea corriente de

aire clido que impide la entrada a esta zona de bacterias contaminantes esto creando un
inoculo ms puro del microorganismo a trabajar.

Uso de bata, guantes y cubrebocas con la finalidad de evitar contaminacin. Lavado del
area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido 1:10. El uso del mechero.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas despus de concluir la sesin.
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.
8. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de trabajo
despus de concluir cada sesin.
9. Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e indica

su funcin.
PARTE
BRAZO
FUNCION
Es la parte de donde se debe sujetar, las
pinzas el carro el tubo del microscopio y

el revlver. Adems sirve para trasladar el
BASE O PIE
microscopio de un lugar a otro

Es una pieza que proporciona estabilidad
y sirve de soporte a todas las partes del
PLATINA
microscopio
Es una pieza metlica, cuadrada, que
tiene en su centro una abertura circular
por la que pasar la luz del sistema de
iluminacin.
PINZAS DE SUJECION
Aqu
se
coloca
el

Parte mecnica que sirve para sujetar la
preparacin.
La
mayora
de
los
microscopios modernos tienen las pinzas

adosadas a un carro con dos tornillos,
que permiten un avance longitudinal y
TORNILLO MACROMETRICO
transversal de la preparacin.
Permite hacer un movimiento rpido
hacia arriba o hacia abajo del tubo o la
platina, y se utiliza para localizar la
TORNILLO MICROMETRICO
imagen a observar.
Parte mecnica de movimiento giratorio
que nos permite colocar en posicin
cualquiera de los objetivos que se
TUBO
encuentran en l
Parte mecnica que proporciona sostn a
CREMALLERA
los oculares y objetivos.

Permite que el movimiento de los
tornillos macro y micromtrico sea de
OCULAR
mayor o de menor amplitud.

Se localiza en la parte superior del tubo
ocular y son las lentes que Capta y
amplia
la
objetivos.
imagen
Los
formada
primeros
en
los
microscopios
eran monoculares, es decir, posean una

sola lente. Los microscopios actuales
poseen dos oculares, uno para cada ojo y
OBJETIVOS
se les llama binoculares.

Se encuentran incrustados en el revlver
Son unos pequeos cilindros colocados
en el revlver que proporciona el poder
de
DIAFRAGMA
resolucin
del
microscopio
determinan la cantidad total de aumento.

Existe un diafragma en el condensador,
que elimina el exceso de luminosidad
para tener una buena iluminacin del
FUENTE DE LUZ
objeto a observar
Para observar la muestra microscpica
es necesario que sta se ilumine con
algn tipo de luz y nuestros microscopios
cuentan con un foco que da energa
elctrica que dirige sus rayos luminosos
hacia el sistema condensador
Las enterobacteriaceae
Trabajar con un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas viables, as como un
aislamiento adecuado de colonias.

Es una tcnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado nmero de bacterias, un
nmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubar sta, cada una de las bacterias originar una colonia.

Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entricos relacionados. Contiene sales
biliares y cristal violeta que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas y de algunas
gramnegativas exigentes. Contiene lactosa como nica fuente de carbono. Identificando
con un color rojo las bacterias fermentadoras de lactosa.
Cualquier sustancia que puede ser usada para el cultivo de microorganismos,
especficas, aminocidos, protenas y otros nutrientes claramente definidos como tales.
Se utilizan para favorecer el crecimiento de ciertas especies bacterianas al mismo tiempo
que inhibe el desarrollo de microorganismos no deseados.
Son aquellos que favorecen el crecimiento especfico de un microorganismo particular (o

grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a
partir de una poblacin microbiana mixta.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias grampositivas y

gramnegativas, resaltando sus diferencias.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Poseen una pared celular interna y una pared Poseen una pared celular ms compleja:
de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que da
consistencia y forma esencial para replicacin y
-pared celular interna

-pared de peptidoglucano
supervivencia de la bacteria.
- bicapa lipdica externa
No tiene membrana externa
Membrana externa: forma un saco rgido

alrededor de la bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a macromolculas,
Espacio
No tiene espacio periplasmtico
superficie
periplasmtico:
externa
de
espacio
la
entre
la
membrana
citoplasmtica y la interna de la membrana

externa.
La red de murena est muy desarrollada y llega
La red de murena presenta una sola capa
a tener hasta 40 capas

La penicilina mata a las gram positivas, ya que
La penicilina no mata a las Gram negativas, a
bloquea la formacin de enlaces peptdicos
causa de la capa de lipopolisacridos situada
entre las diferentes cadenas del peptidoglucano
en la parte externa de la pared celular.

Contiene
No contiene LPS
LPS:
estimulador
de
respuestas
inmunes: activa clulas B, liberacin de IL,

FNT, IL 6 por macrfagos.
En la tincin de Gram, retienen la tincin azul
Quedan decoloradas.
Conservan el complejo yodocolorante
Pierden el complejo yodocolorante
Pueden ser anaerobios o aerobios

Son esporulantes y no esporulantes, como
Streptococcus, Cisteria, Frankia.
Poseen otros componentes: cidos teicoicos y Poseen

lipoteicoicos, y polisacridos complejos.
protenas
con
concentraciones
elevadas.
Los coliformes son un grupo de bacterias que comparten caractersticas bioqumicas en

comn y son tiles como microorganismos indicadores de sanidad de alimentos y agua.
Entre los coliformes se encuentran las enterobacterias. Poseen morfologa bacilar, pueden
ser aerobias o anaerobias facultativas. No forman endosporas, son gramnegativas,
fermentan la lactosa produciendo cido y gas en 24 a 38 horas a 36 C.
Indican la presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgnicos sin tratar,
que pueden tener un alto impacto en el ambiente. Indican la sanidad de alimentos y agua.
Es un indicador de calidad de los alimentos.
La determinacin de la calidad bacteriolgica reviste gran importancia en el mbito de

la salud pblica ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al consumo
evitando as epidemias gastrointestinales.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias en la

muestra de agua que colectaste?
Las bacterias coliformes fecales pueden tener efectos graves en la salud pblica. Los
volmenes de agua con altos niveles de esta bacteria pueden contener una amplia gama
de parsitos, bacterias y virus causantes de enfermedades, las cuales pueden variar
desde condiciones leves como las infecciones agudas del odo, hasta otras ms graves
que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y la hepatitis. Los gusanos parsitos y
los patgenos bacterianos tales como Salmonella, tambin se encuentran comnmente
en el agua que da positivo en la prueba que busca altos niveles de bacterias coliformes
fecales.
23. Qu
enfermedades
gastrointestinales
pueden
transmitirse
en
el
agua
Salmonelosis, Fiebre paratifoidea, shiguelosis, Colera
IMVIC es una prueba utilizada en biologa para la identificacin bacterias. Se compone de

cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
Se emplean fundamentalmente para la identificacin de las Enterobacterias (bacilos Gram

negativos, anaerobios facultativos con metabolismo fermentador).
26. Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para realizar la

prueba de oxidasa?
Pueden alterar el resultado dando falsos positivos
27. Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de 24 horas de
incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se orgina a partir de una
sola bacteria (UFC) y stas se dividen en un tiempo promedio de 30 minutos.
24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco
Cuestionario de Laboratorio.
Por: Carlos Martnez Martnez
Lic. en Medicina Veterinaria y Zootecnia
Docente:
Grupo: BB12A
Mtodos bsicos para el aislamiento e identificacin de enterobacterias del agua.

Cuestionario de Laboratorio.

esterilizacin.
Depende de factores como tiempo, exposicin y temperatura. El calor se puede
aplicar como agente esterilizante de dos formas: El calor hmedo el cual destruye
a los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. El calor es
considerado como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y cuando el
material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir algn dao.

indica cundo es recomendable utilizar cada una de estas.
Mtodos fsicos:
-Ventajas
No es corrosivo para metales e instrumentos.

Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas y sustancias
viscosas no voltiles.
-Desventajas
Requiere de mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo
debido a la baja penetracin del calor.
Mtodos qumicos:
-Ventajas
No deja ningn residuo txico.

Se convierte en agua y oxgeno al final del proceso.
El material no precisa aeracin.
El ciclo de esterilizacin dura entre 54 y 75 min.
-Desventajas
No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa. Algodn, lquidos,
humedad o instrumental con lmenes largos y estrechos.
Es el mtodo de esterilizacin ms caro.

desinfeccin.
Desinfectantes: Cloro y compuestos clorados, aldehdos, xido de etileno,
compuestos fenlicos, cidos y colorantes.
Antispticos: Alcoholes, Iodo, agentes catinicos y anfteros.

superficies?
Hipoclorito de sodio o solucin benzal.

Crea corrientes de aire caliente que arrastran partculas de polvo y
microorganismos dispersos en el aire que rodea el rea de trabajo, es decir el aire
caliente que genera la flama arrastra hacia fuera toda partcula y microorganismos.
(convencin de masas de aire).
6. Menciona mtodos usados en la industria y en laboratorios de investigacin

para crear zonas de trabajo estriles.
El uso de bata, guantes y cubrebocas con la finalidad de evitar contaminacin.
Lavar con hipoclorito de sodio al 10% la mesa de trabajo.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones o accidentes de contaminacin as como
romperse dicho material de vidrio y cortarse.

trabajo.
9. Realiza el diagrama de un microscopio y describe cada una de las partes y

su funcin.
Brazo: Es la parte donde se debe sujetar.
Base o pie: Proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las partes del
microoscopio.
Platina: Tiene en su centro una cobertura circular por la que pasar la luz.
Macromtrico: Permite hacer un movimiento rpido hacia arriba o hacia abajo del
tubo para localizar la imagen a observar.
Micromtrico: Permite colocar en posicin cualquiera de los objetivos que se
encuentran en l.
Tubo: Proporciona sostn a los oculares y los objetivos.
Ocular: Lentes que captan y amplian la imagen formada para los objetivos.
Objetivos: Pequeos cilindros colocados en el revolver quue proporciona poder de
resolucin del microscopio.
Fuente de luz: Foco de energa elctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el
sistema condesador.
10. Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.

Enterobacterias como Shigella, Salmnoella, Yersina pestis.

Trabajar con un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas viables, as
como aislamiento adecuado de colonias.

El objetivo es obtener a partir de un nmero elevado de bacterias, uno ms
reducido de ellas, distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
13. Explica qu tipos de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
En un medio diferencial para la seleccin y recuperacin de enterobacterias y

bacilos gram negativas entricas relacionadas.
14. Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico.

Sustancias que pueden ser lquidas o slidas que contienen los nutrientes
necesarios para que una bacteria pueda crecer y desarrollarse.
15. Explica a qu se llama medio de cultivo enriquecido.

Estn compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le
puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos. Ej.
sangre, suero, lquidos etctera. Se utiliza para microorganismos que tienen
grandes exigencias nutricionales.

Son slidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
fsicas del medio aadiendo o suprimiendo componentes qumicos especficos con
el fin de inhibir el crecimiento de especies qumicos cuyo crecimiento no interesa.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias gram+ y
gram-, resaltando sus diferencias.
Gram-positivas:
Se tien de azul oscuro o violeta.
Membrana citoplasmtica.
Capa gruesa de peptidoglicano.
cidos teicicos y lipoteicicos, que sirven como agentes quelantes y en
ciertos tipos de adherencia.
Polisacridos de la cpsula.
Gram-negativas:
Se tien de un color rosado oscuro.
Pobre membrana celular (externa y citoplasmtica)
Membrana externa.
Tanto las bacterias gram+ como las gram- pueden presentar una capa
superficial cristalina denominada capa S; en las gram- la capa S est unida
directamente a la membrana externa. Mientras que en las gram+, la capa S
est unida a la capa peptidoglicano.

Coliforme signifca con forma de coli, refirindose a la bacteria del grupo, la
Escheriachia Coli. Pero en s consta de un grupo homogneo de bacterias que se
encuentran normalmente y en abundancia en el intenstino humano. Se utiliza
cmo ndice de contaminacin de las aguas y por lo general estn desprovistas de
peligrosidad.

Su presencia se interpreta como una indicacin de que los organismos patgenos
pueden estar presentes y su ausencia indica que el agua se halla exenta de
organismos productores de enfermedades.

La determinacin de la calidad bacteriolgica resiste gran importancia en el mbito
consumo evitando as epidemias gastrointestinales.

No, tambin estn las coliformes totales que se encuentran en aguas
contaminadas (aguas negras y otro tipo de desechos en descomposicin).
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de entero-bacterias

en la muestra de agua que se colect?
Cuando se tiene un nivel alto con presencia de entero-bacterias en el agua
pueden contener todo tipo de microorganismos tales como parsitos, bacterias y
virus causantes de enfermedades como infecciones urinarias, pulmona,
septicemia o sobreinfecciones, en especial en inmunosuprimidos, en el uso de

ciertos antibiticos, desnutricin, tc.

Fiebre tifoidea (Sallmonella typhi)
Disentera bacilar (Shigella dysenteriae)
Gastroenteritis infantil (Escherichia Coli)
Peste (Yersinia pestis)
24. Qu significa las siglas IMViC?

Se emplea en biologa para la identificacin de bacterias. I = Indo, M = Rojo de
Metilo, V = V-P (Voges Proskquer) y iC = Citrato de Simons.
25. Cul es el objeto de realizar las pruebas de IMViC?

Para la identificacin de enterobacterias (bacilos gram-, anareobios facultativos
con metabolismo fermentado).

realizar las pruebas de oxidasa?
Porque se utiliza un reactivo llamado Kovacs, el cual est compuesto de alcohol y
cido clorhdrico. El cido puede reaccionar con el metal y dar falsos-positivos.

hrs. de incubacin.
281, 474, 976, 710, 656 (aprx. 290, 000, 000,

Unidad Xochimilco
Prctica: Mtodos bsicos para el aislamiento e identificacin de enterobacterias

en el agua
Por: Brenda Cruz Hernndez

Mdico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A
Prctica: MTODOS BSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE

ENTEROBACTERIAS EN EL AGUA
1) Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de
esterilizacin.
Mtodos fsicos: Dependen de factores como el tiempo, exposicin y
temperatura. El calor se puede aplicar como agente esterilizante de 2
formas: a) el calor hmedo, el cual destruye a los microorganismos por
desnaturalizacin de las protenas; y, b) el calor seco, que destruye a los
microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares.
Mtodos qumicos: Algunas sustancias qumicas pueden ser usadas como
agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o ms
reacciones qumicas capaces de daar los componentes celulares de los
microorganismos.
2) Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior e
indica cuando es recomendable utilizar cada uno de ellos.
MTODO
Calor hmedo
Calor seco
Filtracin
Aldehdos
VENTAJAS
Rpido, no deja residuos
txicos, bajo deterioro del
material expuesto,
econmico.
No es corrosivo para
metales e instrumentos,
permite esterilizacin de
materiales en polvo.
Esteriliza aceites,
pomadas, soluciones
oftlmicas.
Mtodo rpido y nico
esterilizante fro.
DESVENTAJAS
No se permite para
emulsiones con agua, es
corrosivo sobre algunos
materiales
Mayor tiempo de
esterilizacin, baja
penetracin del calor.
No retiene virus ni
microplasma.
No se pueden esterilizar
objetos con celulosa,
algodn, lquidos, etc.
3) Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

desinfeccin.
Desinfectantes y esterilizantes: Alcohol, detergentes catinicos, compuestos

clorados (cloraminas, cido paractico, compuestos fenlicos, etc.).
Antispticos: Alcohol, compuestos que tienen fenol (hexaclorofeno,
triclosan, cloroxinol), detergentes catinicos, compuestos de amonio
cuaternario, perxido de hidrgeno.
4) Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desinfectar
superficies?
Desinfectantes como bactericidas, fungicidas y virucidas.
5) Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la sustancia
creacin de la zona estril
Trabajar cerca del mechero crea corriente de aire caliente que impide la
entrada bacterias a sta zona, creando un inculo ms puro del
microorganismo a trabajar.
6) Menciona otros mtodos usados en la industria y en los laboratorios de
investigacin para crear zonas de trabajo estriles
Uso de bata y cubre bocas con la finalidad de evitar contaminacin; lavado
del rea de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido 1:10.
7) Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacin
8) Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de
trabajo despus de concluir la sesin.
Se puede provocar un foco de infeccin
9) Realiza el diafragma de un microscopio, describe cada una de sus partes e
indica su funcin.
a) Brazo: Es la parte de donde se debe ajustar las pinzas, al tubo del
microscopio y el revlver.
b) Base o pie: Proporciona estabilidad y soporte a todas las partes del
microscopio.
c) Platina: Pieza metlica cuadrada que tiene en su centro una abertura
circular por la que pasar la luz; aqu se coloca el portaobjetos.
d) Pinzas de sujecin: Sirve para sujetar la preparacin.
e) Tornillo macromtrico: Permite hacer un movimiento hacia arriba-abajo
del tubo o platina, se utiliza para localizar la imagen.
f) Tornillo micromtrico: Permite colocar en posicin cualquiera de los
objetos que se encuentran en l.
g) Tubo: Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos.
h) Cremallera: Permite que el movimiento de los tornillos macromtrico y
micromtrico sea de mayor o menor amplitud.
i) Ocular: Son los lentes que captan y amplan la imagen formada en los
objetivos.
j) Objetivos: Pequeos cilindros colocados en el revlver, que proporcionan
el poder de resolucin y determinan la cantidad del aumento.
k) Diafragma: Elimina el exceso de luminosidad para tener buena
iluminacin del objeto.
l) Fuente de luz: Foco que da energa elctrica que dirige sus rayos
luminosos hacia el sistema condensador.
10)Explica qu tipos de bacterias pueden aislarse en el agua
Entre las especies que se han aislado de aguas se pueden mencionar a las
pertenecientes a los gneros pseudomonas, flavobacterium, gallionella,
enterebacteriaceae, aeromonas, Vibrio, achromobacter, alcaligenes,
bordatella, neisseria, moraxella y acinetobacter.
11) Explica cul es el objetivo de sembrar diluciones del agua
Trabajar con un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas viables,
as como un aislamiento adecuado de colonias.
12)Explica el fundamento de aislamiento por estra cruzada
La tcnica de estra cruzada es un procedimiento semicuantitativo, se utiliza
para obtener a partir de un nmero elevado de bacterias, un nmero
reducido de ellas, distribuidas individualmente sobre la superficie de la
placa.
13)Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey
En el agar MacConkey es un medio diferencial para la seleccin y
recuperacin de enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entricos
relacionados.
14)Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico
Mezcla de nutrientes que en condiciones adecuadas permiten el
crecimiento de las bacterias.
15)Explica qu es un medio de cultivo enriquecido
Aquellos medios que han sido complementarios con lquidos corporales,
vitaminas especficas, aminocidos, protenas y otros nutrientes. Se utilizan
para favorecer el crecimiento de ciertas especies bacterianas al mismo
tiempo que inhibe el desarrollo de organismos no deseados.
16)Explica qu es un medio de cultivo selectivo
Favorecen el crecimiento especfico de un microorganismo en particular
17)Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias
grampositivas y gramnegativas, resaltando sus diferencias
a) Grampositivas: Poseen una pared celular interna y una pared de
peptidoglucano, no tiene membrana externa, no tiene espacio periplsmico,
no contiene LPS, en la tincin de Gram retienen la tincin azul.

b) Gramnegativas: Poseen una pared celular ms compleja, pared celular
interna, pared de peptidoglucano y bicapa lipdica externa, contiene espacio
periplsmico, contiene LPS, quedan decoloradas.
18)Cmo se definen las paredes coliformes?
Grupo de bacterias que comparten caractersticas bioqumicas en comn y
son tiles como microorganismos indicadores de sanidad de alimentos y
agua.
19)Qu indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
La presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales inorgnicos
sin tratar, que pueden tener un alto impacto en el ambiente.
20)Cul es la importancia clnica de las bacterias coliformes?
Determinacin de la calidad bacteriolgica, reviste una gran importancia en
el mbito de la salud pblica ya que garantiza la inocuidad del agua
destinada al consumo
21)Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No, existen muchos coliformes de vida libre
22)Qu implicaciones epidemiolgicas tiene la presencia de enterobacterias
en la muestra de agua que recolectaste?
Pueden variar desde condiciones leves como las infecciones agudas del
odo, hasta otras ms graves que amenazan la vida, tales como la fiebre
tifoidea y la hepatitis.
23)Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
Salmonelosis, fiebre paratifoidea, shiguelosis, clera
24)Qu significan las siglas IMVIC?
Prueba utilizada en biologa para la identificacin de bacterias. Se compone
de 4 temas: indol, rojo de metilo, Voges-Proskaver y citrato.
25)Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMCIV?
Fundamentalmente, para la identificacin de enterobacterias.
26)Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de 24
horas de incubacin. Recuerda que una colonia de bacterias se origina a
partir de una sola bacteria (UFC) y stas se dividen en un tiempo promedio
de 30 minutos.
28147497610636
Universidad Autnoma Metropolitana.

Unidad Xochimilco.
Tronco Divisional: Ciencias Biolgicas y de la
Salud.
Mdulo II: Procesos Celulares
Fundamentales.
Alumno: Irving Quiroz Martnez
Lic. Mdico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A
CUESTIONARIO.
1. EXPLICA EL FUNDAMENTO DE LOS DIFERENTES MTODOS FSICOS Y
QUMICOS DE ESTERILIZACIN.
Mtodo
Fsicos
Medio
Calor
hmedo
Opciones
Autoclave a vapor saturado
Pupinel
Calor seco
Qumicos
Lquidos
Gas
Plasma
Inmersin en glutotaldehido al 2%
Inmersin en perxido de hidrgeno
al 6%
Inmersin an cido paractico 0,2 al
30 %
Gas de xido de etileno
Gas de formaldehido
Vapor de perxido de hidrgeno
Plasma de perxido de hidrgeno
Plasma de cido peractico
Todos estos mtodos de esterilizacin responden a mnimo uno de los siguientes

modos de accin.
a. Dao al DNA. Las lesiones del DNA, aniquilan a la clula, principalmente al
inferir con la multiplicacin del DNA, puesto que los enlaces entre las bases
nitrogenadas, se ven cruzadas y combinadas entre s.
b. Desnaturalizacin de protenas. Las protenas existen en un estado de
plegamiento tridimensional que depende de enlaces disulfuro covalentes
intermoleculares y de varios enlaces no covalentes como puentes inicos,
hidrfobos y de hidrgeno. Al impulsar una energa que cambie o modifique
estos enlaces, la protena pierde su estructura y por lo tanto su funcin.
c. Desorganizacin de la membrana o pared celular. La membrana celular

acta como barrera selectiva, las sustancias que se concentran en la
superficie celular modifican las propiedades fsicas y qumicas de la
membrana, evitando sus funciones normales, por lo tanto las sustancias
destruyen o evitan su sntesis normal, provocando su lisis debido a la
presin osmtica.
d. Sustraccin de los grupos sulfhidrilo libres. La clula contiene
numerosas protenas enzimticas que contienen sulfhidrilo (cistena o como
ejemplo primordial la coenzima A); por lo tanto, los oxidantes y metales
pesados daan extensamente a la clula, al formar enlaces con estos
grupos libres y reducidos.
e. Antagonismo qumico. El antagonista se combina con una enzima por
afinidad qumica por un sitio esencial en esa enzima, desplazando al
sustrato normal impidiendo la reaccin adecuada. Se pueden describir bajo
dos ttulos, los antagonistas de los procesos que liberan energa (venenos
de las enzimas respiratorias, cianuro y dixido de carbono) y antagonistas
de los procesos biosintticos.
2. EXPLICA LAS VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MTODOS DE LA

PREGUNTA ANTERIOR E INDICA CUANDO ES RECOMENDABLE
UTILIZAR CADA UNO DE ESTOS.
a. Dao al DNA: Los rayos por la luz UV son poco penetrantes mientras que
los rayos gamma y haces de electrones de alta energa son muy eficaces
pero poco usados en la esterilizacin rutinaria. Son utilizadas para
esterilizar materiales farmacuticos, mdicos y dentales, un uso prctico y
comn es la lmpara germicida de rayos UV.
b. Desnaturalizacin de protenas. Mtodo de esterilizacin muy eficaz,
mata las formas vegetativas de los patgenos bacterianos, fngicos y
muchos virus en 10 minutos; menos eficaz sobre las endoesporas. Para la
ebullicin, vapor fluyente o llama azul el uso preferente se recomienda en
platos, palanganas, jarras e instrumental diverso, para una autoclave a una
Atm de presin (121C) por 15 minutos se recomienda para medios de
cultivo, soluciones, ropa de cama, utensilios, uniformes, instrumental
quirrgico, para el mtodo de pasteurizacin (tratamiento trmico a 72C 15
segundos) se recomienda su uso en leche, nata y algunas bebidas
alcohlicas y por ltimo el flameado (destruye) se recomienda en asas de
siembra.
c. Desorganizacin de la membrana o pared celular. Mtodo de

esterilizacin eficaz y accesible, su desventaja causante del derrame de
contenido intracelular (mientras este sea viable por el medio), como
endoesporas u otros por la accin de la lisis celular, adems que las
bacterias con capsla o glucalix se ven prcticamente inmunes.
d. Sustraccin de los grupos sulfhidrilo libres. Mtodo de esterilizacin
eficaz y accesible, poco eficaz en las bacterias cido alcohol resistentes.
e. Antagonismo qumico. Interrumpe el metabolismo de la clula,
provocando su muy segura muerte, a menos que se trate de una bacteria
con capacidad de formar esporas, usado en la industria de la conservacin
de alimentos.
3. INDICA LOS PRINCIPALES AGENTES DESINFECTANTES Y

ANTISPTICOS UTILIZADOS EN LA DESINFECCIN.
Desinfectantes: Sustancias de amplio espectro desactivador de

microorganismos utilizados para reducir el nmero de microorganismos
viables o carga biolgica, en un producto o superficie hasta obtener una
concentracin aceptable, el proceso de destruccin de las formas
vegetativas de los patgenos, pero no necesariamente de las endoesporas
o virus. Entender entre estos los alcoholes (etanol, isopropanol), aldehdos
(glutaraldehdo, formaldehdo), biguanidas (clorhexidina), compuestos de
amonio cuaternario (cetrimida, cloruro de benzalconio), fenoles y cresoles
(fenol, cresol), peroxgenos (perxido de hidrgeno, ozono, cido
peractico), sustancias liberadoras de halgenos (compuestos clorados,
compuestos de yodo).
Antispticos: Producto que destruye o inhibe el desarrollo de los

microorganismos en un tejido vivo, por ejemplo la piel. Entender entre estos
los alcoholes (etanol, isopropanol), biguanidas (clorhexidina), bisfenoles
(triclosn), compuestos de amonio cuaternario (cetrimida, cloruro de
benzalconio), sustancias liberadoras de halgenos (compuestos clorados,
4. QU TIPO DE SUSTANCIAS SUELEN UTILIZARSE COMUNMENTE PARA

DESINFECTAR SUPERFICIES?
Se sabe que de los microbianos, los productos biocidas son de mayor uso en la
desinfeccin de superficies pues son de un espectro de accin muy grande y de
fcil adquisicin, aunque tiene sus limitaciones con los virus y las esporas, su nivel
de eficiencia es del 80%, de mayor uso popular son los alcoholes (etanol,
isopropanol), compuestos de amonio cuaternario (cetrimida, cloruro de

benzalconio), sustancias liberadoras de halgenos (compuestos clorados,
5. EXPLICA CUL ES EL OBJETIVO DE UTILIZAR EL MECHERO PARA
PREPARAR LA ZONA ESTRIL PARA EL TRABAJO MICROBIOLGICO Y
SEALA QUE FACTORES INFLUYEN EN LA CREACIN DE LA ZONA
ESTRIL.
Calor, probablemente el mtodo de esterilizacin ms usado no slo debido a su
nivel de eficiencia del 100% por eliminar los organismos viables de una superficie
o producto, incluidas las esporas bacterianas, tambin por lo econmico y fcil que
resulta utilizarlo, el mtodo de usar el mechero es llamado tambin flameado
mtodo de esterilizacin muy eficaz puesto que brinda un rea limitada a 20cm de
temperatura variable, lo cual afecta en la composicin de la membrana proteica de
la bacteria, as mismo como una limitacin de oxgeno. Cuando se expone a la
llama directamente, cambia al mtodo a uno llamado incineracin, donde se
destruye por completo el medio de cultivo y con ello todos los microorganismos
alojados en l.
6. MENCIONA OTROS MTODOS USADOS EN LA INDUSTRIA Y EN LOS
LABORATORIOS DE INVESTIGACIN PARA CREAR ZONAS DE TRABAJO
ESTRILES.
Existen diferentes mtodos de esterilizacin que las industrias usan para sus
reas de trabajo, tenemos que se dividen en dos tipos, fsicos y qumicos.
Los fsicos a su vez se dividen en: Calor hmedo, calor seco, radiaciones y
mecnicos.
Los qumicos solo se dividen en gases.
Fsicos:
a) Calor hmedo: Ebullicin, Tindalizacin, Pasteurizacin y vapor a presin.
b) Calor Seco: Flameado, incineracin y horno Pasteur.
c) Radiaciones: Radiaciones ionizantes, rayos gamma, rayos X y rayos
ultravioleta.
d) Mecnicos: Filtracin y sedimentacin.
Qumicos:
Gases: xido de etileno y otros.
Desinfectantes
inanimados.
Cubiertas
de
instrumental
Deyecciones,
cmodos
de
medios Lisol a 5% o algn otro compuesto fenlico,

Formaldehdo a 1-10%, Glutaraldehdo
mesa
e acuoso a 2%, Bicloruro de mercurio a
0.1%, Compuestos de amonio cuaternario
a 0.1%
vendajes, Hipoclorito de sodio a 1%, Lisol a 5% o
algn otro compuesto fenlico
Aire
Instrumentos sensibles al calor
Neblina de propilenglicol o aerosol, Vapor

de formaldehdo
Gas xido de etileno (alquilacin de los
cidos nucleicos. El gas residual se debe
eliminar por aeracin)
7. EXPLICA LOS RIESGOS QUE PUEDES CORRER SI NO RECOGES EL

FRASCO, LOS TUBOS Y LAS PIPETAS DESPUS DE CONCLUIR LA
SESIN.
El dejar el material utilizado en la prctica principalmente el que estuvo en
contacto directo con el medio de infeccin en la zona de trabajo, puede implicar un
foco de infeccin y una zona de riesgo patolgico para los que se encuentran
compartiendo este mismo espacio.
8. EXPLICA LOS RIESGOS QUE PUEDES CORRER SI NO LAVAS Y
DESINFECTAS LA MESA DE TRABAJO DESPUS DE CONCLUIR CADA
SESIN.
El desplazar los materiales que ya no se estn utilizando en ese momento, y/o
flamearlos no representa ninguna garanta de eliminacin de los agentes
patgenos lo que representa un riesgo de infeccin, es necesario su correcta
esterilizacin y lavado para asegurar la eliminacin de cualquier agente que
pudiera encontrarse en el instrumental y as evitar un cultivo accidental en medios
no controlado.
9. REALIZA EL DIAGRAMA DE UN MICROSCOPIO, DESCRIBE CADA UNA
DE SUS PARTES E INDICA SU FUNCIN.
Las PARTES del Microscopio son:
A) OCULAR: Es la lente situada cerca del ojo del observador.
Su funcin: Capta y ampla la imagen formada en los objetivos.
B) OBJETIVO: Es la lente situada cerca de la preparacin.
Funcin: Ampla la imagen de sta, lo que significa que es muy importante

este elemento del microscopio, es un elemento vital que permite ver a
travs de los oculares
C) CONDENSADOR: Es la lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin.
Funcin: Concentra ms o menos el haz luminoso sobre la preparacin
mediante su acercamiento o alejamiento de la Platina, al accionar un tornillo
similar al macromtrico.
D) DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Funcin: Permite regular la cantidad de luz proveniente del Espejo
mediante un mecanismo de apertura y cierre similar al de la pupila del ojo
humano.
E) BRAZO es una pieza metlica de forma curvada que gira sobre el PIE.
Funcin: Sostiene por su extremo superior al Tubo ptico y en el inferior
lleva varias piezas importantes como la Platina, el Condensador y el
Diafragma.
F) FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
G) TUBO: Es una cmara oscura unida al brazo mediante una cremallera.
H) REVLVER: Es un sistema que agarra los objetivos y que rota para utilizar un
objetivo u otro.
I) TORNILLO MACRO y MICROMTRICO: Son tornillos de enfoque, mueven la
platina hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida y el
micromtrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija
la platina a una determinada altura.
J) PLATINA: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se
coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la
fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el
portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos
tornillos de desplazamiento. Funcin: Permite mover la preparacin de delante
hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa.
K) BRAZO: Soporte vertical del microscopio y lugar de agarre para su
transportacin.
10. EXPLICA QU TIPOS DE BACTERIAS PUEDEN AISLARSE EN EL AGUA.

Entre las especies que se han aislado de aguas, podemos mencionar a las
pertenecientes a los gneros:
A. Pseudomonas.
G. Alcaligenes.
B. Flavobacterium.
H. Bordetella.
C. Gallionella.
I. Neisseria.
D. Enterobacteriaceae.
J. Moraxella.
E. Aeromonas.
K. Acinetobacter.
F. Vibrio, Achromobacter.
11. EXPLICA CUL ES EL OBJETIVO DE SEMBRAR DILUCIONES DEL AGUA.

Cuando se trabaja con muestras con alto contenido de bacterias es recomendable
realizar disoluciones, esto nos permite trabajar con un nmero apropiado de
microorganismos para realizar cuentas viables, as como un aislamiento adecuado
de colonias, un nmero elevado de bacterias impide que se lleve a cabo un
conteo, con la suspensin se efectan disoluciones seriadas y se siembran en
placa muestras de cada dilucin en particular, si solamente crecen unas cuantas
muestras de una disolucin particular, se presume que algunos de esos cultivos
partieron de clulas nicas. Un carcter indeseable de este mtodo es que
solamente puede ser utilizado para aislar el tipo de microorganismo predominante
en una poblacin mixta.
12. EXPLICA EL FUNDAMENTO DEL AISLAMIENTO POR ESTRA CRUZADA.

El objetivo del aislamiento por estra cruzada es obtener a partir de un nmero de
elevado de bacterias un nmero reducido de ellas distribuidas individualmente por
toda la placa y as mediante la incubacin lograr que cada batera forme una
nueva colonia.
Las clulas que crecen sobre o dentro de medios slidos, se encuentran
inmviles; por consiguiente, si unas cuantas clulas se colocan en o sobre un
medio en forma de gel, cada clula crecer dando una colonia aislada.
13. EXPLICA QU TIPO DE BACTERIAS PUEDEN AISLARSE EN AGAR
MACCONKEY.
Enterobacteriaceae que son bacterias grammnegativas. Contiene sales biliares y
cristal violeta que inhiben el crecimiento de bacterias grammpositivas y de algunas
grammnegativas exigentes. Contiene rojo neutro como indicador. Su principal
aislamiento e identificacin son de bacilos entricos fermentadores y no
fermentadores de lactosa.
14. EXPLICA A QU SE LE LLAMA MEDIO DE CULTIVO BACTERIOLGICO.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de
microorganismos.
15. EXPLICA QU ES UN MEDIO DE CULTIVO ENRIQUECIDO.
Un medio de cultivo enriquecido es aquel que cuenta con las caractersticas

necesarias, como nutrientes y condiciones ambientales para favorecer el
crecimiento de ciertas especies bacterianas exigentes e inhibir las no deseadas,
ya que en ocasiones las bacterias no pueden detectarse porque se encuentran en
pequeas cantidades.
16. EXPLICA QU ES UN MEDIO DE CULTIVO SELECTIVO.
Un medio selectivo es aquel que cumple con la funcin de suprimir el crecimiento
de bacterias no deseadas y hace creer a un tipo selectivo de bacterias contenidas
en una poblacin polimicrobiana.
17. DESCRIBE LAS CARACTERSTICAS DE LA PARED CELULAR DE LAS

BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS, RESALTANDO SUS
DIFERENCIAS.
GRAMMPOSITIVAS
Capa gruesa y rgida

compuesta por varias
capas de peptidoglicano.
Contiene cidos teicoicos.
cido lipoteicoico que est
en la superficie en la capa
de peptidoglucano unido
a la membrana
citoplsmica.
cido teicoico se
encuentra en la
superficie de la pared y se
une a solo una capa del
peptidoglicano
La carga negativa de los
cidos con la unin de
cationes regulan el
movimiento hacia el
interior y exterior de la
clula.
Baja posibilidad de
ruptura de la pared
gracias a los cidos
teicoicos.
GRAMMNEGATIVAS
Capa delgada de
peptidoglicano
Contiene una membrana
externa.
El peptidoglicano est unido a
lipoprotenas de la membrana
externa.
Contiene periplasma, una
sustancia gelatinosa localizada
entre la membrana externa y
la membrana plasmtica.
Periplasma con enzimas
degradadoras de protenas de
transporte.
No contiene cidos teicoicos.
Alta posibilidad de ruptura
mecnica.
Membrana externa compuesta
por lipopolisacaridos,
lipoprotenas y fosfolpidos.
Membrana externa con
permeabilidad media.
DIFERENCIAS
Presencia de
periplasma en las
grammnegativas.
Presencia de cidos
teicoicos en las
grammpositivas.
Presencia de
membrana externa en
las grammnegativas.
Presencia de
lipopolisacaridos,
lipoprotenas y
fosfolpidos en la
membrana de las
grammnegativas.
En cuanto a la tincin
de gramm. Las
bacterias
grammpositivas
gracias a su espesa
capa de petidoglicano
son capaces de
retener el compuesto
cristal violeta dentro de
la pared celular.
Por el contrario las
grammpositivas son
incapaces de retener
el compuesto debido
a su delgada capa
de peptidoglicano.
18. CMO SE DEFINEN A LAS BACTERIAS COLIFORMES?

Coliformes significa en forma de coli que hace referencia directamente a la
bacteria principal del grupo llamado E.coli, mejor conocido como escherichia coli.
Bacilos gram negativos, pili formes, bacterias homogneas presentes en las aguas
negras, pero se mueren con el tiempo en las aguas naturales. Su hbitat natural
son los mamferos de sangre caliente y el suelo. Son utilizadas para medir el
ndice de contaminacin del agua.
Ejemplo: Escherichia coli, Citrobacter, Klebsiella y Enterobacter.
19. QU INDICA LA PRESENCIA DE BACTERIAS COLIFORMES EN EL

AGUA?
La presencia de E. coli, klebsiella, pneumoniae, proteus mirabilis y proteuses es
un indicio de contaminacin fecal reciente, el agua no ha pasado por un proceso
correcto de potabilizacin y que en el estricto manejo es un foco de infeccin, por
lo que tras su deteccin debera considerarse la toma de medidas adicionales,
como la realizacin de muestreos adicionales y la investigacin de las posibles
fuentes de contaminacin, como un tratamiento inadecuado o alteraciones de la
integridad del sistema de distribucin.
20. CUL ES LA IMPORTANCIA CLNICA DE LAS BACTERIAS

COLIFORMES?
Estas bacterias son usadas como indicadores en pruebas de agua. La presencia
de algunos tipos de bacterias coliformes en el agua seala la presencia de
excrementos o desechos de alcantarillas. Los organismos que causan
enfermedades usualmente vienen de los excrementos y desechos de alcantarillas.
Algunos organismos patgenos que pueden estar presentes en el agua son:
bacterias que causan diarrea y vmitos, protozoarios que causan disentera, virus
que causan poleo y hepatitis y helmintos, tales como los gusanos redondos
(lombrices) y los planos (tenia) que causan diarrea crnica.
21. TODAS LAS BACTERIAS COLIFORMES SON DE ORIGEN FECAL?

La mayora provienen del intestino humano o de heces fecales de mamferos de
sangre caliente. La familia Enterobacterieriaceae est formada por
aproximadamente 31 gneros y 139 especies y miles de serotipos. Algunos
miembros de la familia siempre se asocian a enfermedades cuando se aslan en el
hombre y su origen casi siempre se asocia a la materia fecal, procesos de
putrefaccin o sitios muy poco higinicos, por ejemplo shigella, salmonella,
yersinia pestis. Mientras que otros son miembros de la flora normal intestinal, que
slo producen infecciones oportunistas, por ejemplo: escherichia coli, klebsiella
pneumoniae, proteus mirabilis. Especies de proteus, escherichia coli y varios
miembros del grupo klebsiella enterobacter se aslan de heridas traumticas
contaminadas con tierra o materia vegetal o de incisiones abdominales despus
de una ciruga.
22. QU IMPLICACIONES EPIDEMIOLGICAS TIENE LA PRESENCIA DE

ENTEROBACTERIAS EN LA MUESTRA DE AGUA QUE ENCONTRASTE?
El gua puede ser beneficiaria para la salud si es potable y daina si est
contaminada debido a la propagacin rpida de enfermedades infecciosas. Como
grupo, las Enterobacterias son las responsables de una tercera parte de los
aislamientos en las bacteriemias, de dos tercios de los aislamientos en
gastroenteritis, y de tres cuartas partes de los aislamientos en infecciones del
tracto urinario. Habitualmente colonizan las diferentes mucosas, especialmente las
del tracto gastrointestinal y urinario, por lo que las infecciones suceden a partir de
estas localizaciones.
Las Enterobacterias son una familia heterognea y amplia de bacilos

gramnegativos que residen en el colon del hombre sin causar enfermedad aunque
con frecuencia son causantes de un nmero considerable de infecciones, tanto en
pacientes con inmunidad conservada como en inmunodeprimidos ya que en el
paciente hospitalizado las enterobacterias colonizan el tubo digestivo, la
orofaringe, el aparato genitourinario y la piel mientras que en el ambiente
hospitalario pueden aislarse del agua, catteres, sondas, sueros, antispticos,
equipos de respiracin mecnica, etc., nichos ambientales con los que pueden
entrar en contacto los pacientes hospitalizados y debido a su ubicuidad dentro y
fuera del cuerpo a menudo causan infecciones oportunistas.
23. QU ENFERMEDADES GASTROINTESTINALES PUEDEN

TRANSMITIRSE EN EL AGUA CONTAMINADA CON MATERIAL FECAL?
ENFERMEDAD
Shigelosis (disentera
bacilar)
Amebiasis
AGENTE
shigella
Quistes de Entamoeba
histolytica
Hepatitis A
Balantidiasis
Balantidium coli
Criptosporidiosis
Cryptosporidium
Esquistosomiasis
Schistosoma mansoni y
Schistosoma
intercalatum
SINTOMAS
Dolor abdominal, fiebre
aguda, sangre, moco o
pus en las heces, dolor
rectal, diarrea acuosa,
vomito, nauseas.
Clicos abdominales,
prdida de peso,
tenesmo, flatulencia
excesiva.
Orina oscura, ftiga,
picazn, inapetencia,
fiebre baja, heces color
arcilla o plidas, ictericia.
(Mayormente
asintomtico) cuadros
diarreicos, fiebre,
nausea, vomito
Deshidratacin, prdida
de peso, clicos
Dolor abdominal y
diarrea (que puede ser
sanguinolenta).
Giardiasis
Giardia intestinalis
Clera
Vibrio cholerae
(Mayormente
asintomtica) diarrea
repentina pastosa o
lquida, amarilla,
maloliente, con moco y
acompaada por clicos,
dolor abdominal,
nuseas, anorexia,
flatulencia, meteorismo,
aerogastria y prdida de
peso.
Vmito, diarrea,
calambres,
deshidratacin, shock
24. QU SIGNIFICAN LAS SIGLAS IMViC?

Son siglas en ingls que representan las pruebas bioqumicas cualitativas a las
que son sometidas las muestras para saber su origen bacteriolgico, es decir,
saber de qu bacteria se trata.
I: Indol
M: Rojo de Metilo
V: V-P(Voges-Proskauer)
IC: Citrato de Simmons.
25. CUL ES EL OBJETIVO DE REALIZAR LAS PRUEBAS DE

IDENTIFICACIN IMViC?
Son cuatro pruebas bioqumicas cualitativas (indol, rojo de metilo, vogesprosikaver y citrato) que se emplean fundamentalmente para la identificacin de
las Enterobacterias (bacilos gran negativos, anaerobios facultativos con
metabolismo fermentador), su nivel de patogeniesidad, su poder de reproduccin,
su virulencia, origen y medios en los que crece proliferantemente.
26. POR QU RAZN NO ES RECOMENDABLE UTILIZAR EL ASA

BACTERIOLGICA PARA REALIZAR LA PRUBA DE OXIDASA?
Porque es de metal. Para las pruebas de oxidasa se utiliza un reactivo llamado
Kovacs, el cual est compuesto de alcohol isoamlico, p-dimetilaminobenzaldehdo
y cido clorhdrico. El cido puede reaccionar con el metal y dar falsos positivos.
27. DETERMINA EL NMERO DE BACTERIAS QUE HAY EN UNA COLONIA

DESPUS DE 24 HORAS DE INCUBACIN. RECUERDA QUE UNA
COLONIA DE ENTEROBACTERIAS SE ORIGINA A PARTIR DE UNA SOLA
BACTERIA (UFC) Y STAS SE DIVIDEN EN UN TIEMPO PROMEDIO DE 30
MINUTOS.
(UFC) Unidades Formadoras de Colonias

Despus de 24 h de incubacin= 28,147,497,670 bacterias
30min= 2
60 min= 4
90 min= 8
120min= 16
1440 min = 2.814749767X 10
14

Unidad Xochimilco

Tema. Cuestionario sobre los

mtodos bsicos para el aislamiento
e identificacin de enterobacterias del
agua
Por: Delfina Garca Betanzo

Mdico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A
Cuestionario Laboratorio
esterilizacin
Garantiza la destruccin total de microorganismos presentes en sustancias o
alguna muestra provenga de la experimentacin y no de alguna contaminacin.
Fsicos:
a) Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la accin

del calor, el cual provoca una desnaturalizacin de protenas, fusin y
desorganizacin de membranas de los microorganismos.
b) Radiaciones: Se atribuye a la absorcin por DNA, existen uniones covalentes
entre residuos de pirimidina perteneciente a la misma cadena, distorsiona el DNA
e inhibe su sntesis por tanto el crecimiento. Su uso principal es para esterilizar
aire y superficies.
Qumicos:
a) Gaseosos: Los antispticos son considerados venenos que destruyen
grmenes, algunos ejercen su accin nociva sobre toda clula y otros sobre
algunas, son mas especficos. ptimos para antisepsia y en mesas de trabajo;
como el xido de etileno.
b) No gaseosos: Se encuentran los aldehdos, cido peractico y perxido de
hidrgeno.

a) Fsicos:
Ventajas: Son de rpido calentamiento y penetracin, destruyen bacterias en un
periodo corto, no hay residuos txicos y no son corrosivos.
Desventajas: El material a veces no soporta altas temperaturas y pueden sufrir
dao o incluso puede ser inflamable. Las radiaciones no penetran slidos y de
manera muy pobre a los lquidos.

la desinfeccin
-Desinfectantes: Productos qumicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados; como el glutaraldehdo, hipoclorito de sodio.
-Antispticos: Sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de los
tejidos vivos; como los alcoholes, tintura de yodo.

superficies?
Hipoclorito de sodio al 10%
Solucin de Benzal diluida 1:10
5.- Explica cual es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

Ayuda a mantener un ambiente de esterilidad, a travs del calor, cuando se trabaja
con siembra de microorganismos. Los factores que influyen: una manipulacin
correcta de la muestra y material ayudan a no contaminar, adems de evitar la
contaminacin por medio del aire externo o agentes provenientes del mismo
experimentador. De igual forma interviene aquel material que no es previamente
esterilizado para su uso.

El uso de desinfectantes, antispticos y empleo de calor, tanto seco, como

hmedo, el uso de una estufa y de un autoclave.
Tambin se pueden emplear rayos infrarrojos, filtracin, el mtodo de tindalizacin
(autoclave que se purga) y radiaciones ionizantes.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges en frasco, los tubos y
las pipetas despus de concluir la sesin
Se corre el riesgo de la ruptura del material Causa un accidente Es importante
recoger el material y desinfectarlo para evitar la contaminacin bacteriolgica
de trabajo despus de concluir cada sesin
Se propaga la contaminacin y genera una alteracin en los resultados
9.- Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e

indica su funcin.
10.- Explica que tipos de bacterias puedes aislarse en el agua

Enterobacterias, como: Shigella, Salmonella, E.Coli, klebsiellla pneumoniae, etc.
11.- Explica cul es el objetivo de sembrar diluciones del agua

Se recomiendan debido al alto contenido de bacteria, ya que permite trabajar con
un nmero apropiado de clulas para realizar cuentas viables asi como el
aislamiento adecuado de las colonias
12.- Explica el fundamento de aislamiento por estra cruzada
El objetivo es obtener a partir de un nmero elevado de bacterias, un nmero

reducido de ellas, distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubarla, cada una de las bacterias originar una colonia (UFC) Y adems puede
estimarse la cantidad relativa de microorganismos en la muestra original.
13.- Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey

Se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram (-) de fcil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no lactosa en
muestras clnicas, de agua y alimentos. Se pueden aislar en este tipo de agar,
todas aquellas bacterias que pertenecen a la familia de las enterobacterias.
14.- Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico

Al proceso de crecimiento de microorganismos mediante la toma de bacteria de un
sitio de invencin (in vivo) por mtodos de recoleccin de muestra y crecimiento
en un ambiente artificial (in Vitro)
15.- Explica qu es un medio de cultivo enriquecido

Contiene nutrientes especficos requeridos para el desarrollo de determinados
patgenos; el enriquecimiento se hace por adicin de sangre y otros productos
biolgicos que aportan factores nutritivos al medio de cultivo y por tanto a las
bacterias.
16.- Explica qu es un medio de cultivo selectivo
Son aquellos medios que son utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas
bacterias; facilitan nutricionalmente el crecimiento de una poblacin microbiana
especfica.
17.- Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias Gram+ y

Gram-, resaltando sus diferencias
a) Gram (+) Tienen una capa gruesa de peptidoglucanos, presentan una gran
resistencia debido a esta capa que posee cidos lipoteicoicos y se tien de color
azul-prpura.
b) Gram (-) Poseen una capa de peptidoglucanos sin embargo es mas delgada, su
membrana externa contiene lipopolisacridos, fosfolpidos y protenas. Este tipo de
bacterias se tien de color rojo.

Se definen como indicadores de contaminacin fecal en el agua, que se
encuentran en el intestino del humano y animales homeotermos. Son bacterias
entricas en forma de bacilos cortos, Gram (-), aerobios o anaerobios facultativos,
no es pirgenos, fermentan lactosa y producen cido y gas.

Indican que el agua esta contaminada, con aguas negras o de otro tipo de
desechos en descomposicin.
Permite garantizar la inocuidad (incapacidad para hacer dao) del agua destinada
al
consumo,
evitando
as
epidemias,
enfermedades
gastrointestinales
enfermedades de tipo diarreicas muy fuertes, que inclusive pudieran ser mortales.

No, ya que las coliformes fecales, se encuentran en las coliformes totales.
22.-
Qu
implicaciones
epidemiolgicas
tienen
la
presencia
de
enterobacterias en la muestra de agua que recolectaste?

Una posible epidemia si es que esta agua se encuentra destinad apara el
consumo humano, epidemia de E. Coli, Salmonella, enfermedades diarreicas y
disentera.

contaminada con material fecal?
Transmitidas por el agua: Clera, fiebre, tifoidea, paratifoidea, disenteras, polio,
hepatitis, salmonelosis.
Con base en el agua: Ascariasis, paragonimiasis.
Vectoriales relacionadas con el agua: Dengue, filariasis, paludismo

I= Indol
M= Rojo de metilo
V= Vogues-Proskawer
iC= Citrato de Simmons.

Las bacterias pertenecientes a la familia de enterobacterias pueden identificarse a
travs de una serie de pruebas bioqumicas, que permiten notar la presencia o
ausencia de ciertas enzimas y la existencia de una secuencia metablica. Por lo
tanto el IMViC sirve para clasificar especies de la familia de las enterobacterias y
dependiendo los resultados arrojados por dichas pruebas, saber de que bacteria
se trata.

Porque los metales pueden inferir de manera oxidativa, ya que las enzimas estn
ntimamente relacionadas a la cadena de transporte de electrones. La prueba
tiene como objetivo demostrar la presencia de un sistema citocromooxidasa que
activa la oxidacin del citocromo, el cual es reducido por el oxgeno molecular que
produce agua o perxido de hidrgeno, segn la especie bacteriana.
27.- Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de

las 24 horas de incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se
origina a partir de una sola bacteria (UFC) y stas se dividen en un tiempo
promedio de 30 minutos.
281,474,976,710,656 bacterias en 24 horas.

Unidad Xochimilco
CUESTIONARIO DE LABORATORIO
Alumna: Ventura Maqueda Diana
Docente:
Grupo: BB12A

esterilizacin.
Agentes fisicos: el calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas:
el calor humedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalizacion de las

protenas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidacin de sus
componentes celulares.
La radiacin, la emisin y propagacin de la energa puede ser utilizada como agente
para la eliminacin de microorganismos
Radiaciones ionizantes se pueden utilizar para esterilizar materiales platicos y la luz uv
para reas cerradas
Quimicos: capaces de daar los componentes clulares (protenas, membranas, etc)
Gaseosos-----> oxido de etileno
No gaseosos ---------> alheidos ej: glutaraldehido cido paractico y peroxido de
hidrgeno
factores.
Calor Hmedo
VENTAJAS
Rpido calentamiento y penetracin.

Destruccin de bacterias y esporas en poco tiempo.
No deja residuos txicos.
Bajo deterioro del material expuesto.
Econmico.
DESVENTAJAS
No se permite para emulsiones con agua.

Es corrosivo sobre algunos metales.
Calor Seco
VENTAJAS
Permiten esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas y de viscosas no

voltiles.
DESVENTAJAS
Mayor tiempo esterilizacin.

Baja penetracin del calor.
Radiaciones de acuerdo al tiempo de radiacin, tiempo exposicin y dosis
QUIMICOS (Oxido de Etileno)

VENTAJAS
Esteriliza
material
cardiorrespiratorias, metal etc.
termosensible,
equipos electrnicos,
bombas
DESVENTAJAS
Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, ademas cancergeno.

Aldehdos
VENTAJAS
Mtodo rpido y nico esterilizanrte fro.

DESVENTAJAS
No se pueden esterilizar algunos objetos con celulosa, algodn,, lquidos,

humedad, madera, etc
Gas-Plasma de Perxido de Hidrgeno
VENTAJAS
No deja ningn residuo toxico.

Se convierte en agua y oxigeno al final del proceso.
Material sin aireacin.
Ciclo dura entre 54 y 75 min.
DESVENTAJAS
Mtodo mas costoso.

desinfeccin.
Detergentes catinicos (compuestos de amonio cuaternario)
hipoclorito sdio 1%
cloroxilenol
Formaldehdo.
Glutaraldehdo.
Perxido de hidrgeno.
Dicloruro de mercurio.
Antispticos:
Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua).
Tintura de Yodo
Providona yodada
Clorhexidina
Triclosn
superficies?
bactericidas, fungicidas,fungistatica y virusidas
estril.
Al Trabajar cerca del mechero se crea una corriente de aire clido que no permite que las
bacterias entren a la zona de trabajo.

El uso de equipo para evitar contaminacin (bata, guantes y cubrebocas) as como el
lavado del area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido adems del
uso del mechero.
Se puede sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.
Riesgo de contaminacin (foco de infeccin.)
su funcin.
PARTE
BRAZO
BASE O PIE
PLATINA
FUNCION
microscopio
iluminacin.
Aqu
se
coloca
el
PINZAS DE SUJECION
TUBO
OCULAR
OBJETIVOS
DIAFRAGMA
FUENTE DE LUZ

preparacin. La mayora de los
imagen a observar.
encuentran en l
amplia la imagen formada en los
objetivos. Los primeros microscopios
de resolucin del microscopio y
objeto a observar


Proceso semicuantitativo.Tcnica que se utliza para obtener apartir de un elevado nero
de bacterias un nmero reducido de ellas distribuidas individualmente, cada una originar
una colonia.


Favorecen el crecimiento especfico de un microorganismo particular (o grupo de

microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de
una poblacin microbiana mixta.

*Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano.
*No tiene membrana externa
* No tiene espacio periplasmtico
* La red de murena est muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
* La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formacin de enlaces
peptdicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano
* No contiene LPS
* En la tincin de Gram, retienen la tincin azul
* Conservan el complejo yodocolorante
* Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
* Poseen otros componentes: cidos teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos complejos.

Poseen una pared celular ms compleja:
Membrana externa: forma un saco rgido alrededor de la bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a macromolculas, ofrece proteccin en condiciones adversas
Espacio periplasmtico: espacio entre la superficie externa de la membrana
citoplasmtica y la interna de la membrana externa.
La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa de la capa de lipopolisacridos

situada en la parte externa de la pared celular.
Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa clulas B, liberacin de IL,
En la tincin son rosas
Poseen protenas con concentraciones elevadas.

Son un grupo de bacterias que se comparten caracteristicas bioquimicas en comun y son
utiles microorganismos indicadores de sanidad de alimentos y agua en el que se
encuentran las enterobacterias
presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgnicos
Tiene gran importancia en el mbito de la salud pblica ya que permite saber la calidad
del agua destinada al consumo humano evitando as epidemias gastrointestinales.


Pueden sucitarse enfermedades leves como las infecciones agudas del odo, hasta otras
ms graves como la fiebre tifoidea y la hepatitis.
50. Qu enfermedades gastrointestinales

pueden
transmitirse
en
el
agua

es una prueba utilizada en biologa para la identificacin bacterias. Se compone de cuatro
pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.

24hrs=281
474
976
710
656

Unidad Xochimilco

Cuestionario previo a la prctica en el

laboratorio
Por: Lucero Edith Gonzlez Cruz

Mdico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A
Octubre 22 del 2015

esterilizacin
Mtodos fsicos:
-
Calor: Provoca una desnaturalizacin de protenas, fusin desorganizacin

de las membranas en los microorganismos.
Radiacin: Se distorsiona el DNA inhibiendo su sntesis as como el
crecimiento y respiracin de los microorganismos. Su uso principal es para
esterilizar el aire y superficies.
Mtodos qumicos:
-
Gaseosos (xido de etileno)

No Gaseosos (Aldehdos, cido peractico y perxido de hidrgeno)
Antispticos (venenos que al actuar sobre grmenes para su destruccin)

e indica cundo es recomendable utilizar cada uno de stos
Mtodos fsicos:
-
Ventajas: Rpido calentamiento y penetracin, destruccin de bacterias en

un periodo corto, no hay residuos txicos, adems de que no es corrosivo.
Desventajas: Algunas ocasiones el material a esterilizar no soporta altas
temperaturas y pueden sufrir algn dao o simplemente el material a
esterilizar es flamable. En cuanto a las radiaciones, no penetran en slidos.
Mtodos qumicos:
-
Ventajas: El ciclo de esterilizacin dura de 54-75 minutos, el material

sometido a estos procesos no precisa de aireacin.
Desventajas: Se necesita un mayor tiempo, las sustancias son inflamables,
txicas y de muy alto costo.

la desinfeccin
-
Desinfectantes: Productos qumicos que matan a los microorganismos y se

utilizan sobre objetos inanimados. Ej. Hipoclorito de Sodio.
Antispticos: Sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de
los microorganismos y no son lo suficientemente txicos para ser aplicados
a los tejidos vivos. Ej. Alcoholes y tintura de Yodo.

superficies?
-
Hipoclorito de sodio al 10%

Solucin de benzol diluido 1:10
5.- Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

a su uso.

Desinfectantes: Productos qumicos que matan a los microorganismos y se

Antispticos: Sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de
los microorganismos y no son lo suficientemente txicos para ser aplicados
a los tejidos vivos
Calor: Metodo ms utilizado para la esterilizacin
Calor seco con hornos con una temperatura de 170C por una hora
Calor hmedo con autoclaves con una temperatura de 121C a 15 libras de
presin por pulgada durante 20minutos.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
las pipetas despus de concluir la sesin
de trabajo despus de concluir cada sesin.
manejo de las muestras y evitar alteraciones en los resultasdos.
9.- Realiza un diagrama se un microscopio, describe cada una de sus partes

e indica su funcin
Imagen
10.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

En el agua se pueden aislar Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina
pestis y algunas pertenecientes a la flora oportunista como Escherichia coli,
Klebsiella pneumoniae y Proteus mirabilis.
11.- Explica cul es el objetico de sembrar diluciones de agua

12.- Explica el fundamento del aislamiento por estra cruzada

13.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey

14.- Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico

Es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como bacterias,
hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el
proceso deseado.
15.- Explica que es un medio de cultivo enriquecido

Es una tcnica que utiliza un medio selectivo lquido para permitir el desarrollo de
un microorganismo a partir de una muestra que contiene una gran variedad de
microorganismos para los que el ambiente sea ms favorable crecern ms que
los otros y finalmente sern predominantes.
16.- Explica que es un medio de cultivo selectivo
Medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en

una poblacin polimicrobiana. El fundamento de estos medios consiste en facilitar
nutricionalmente el crecimiento de una poblacin microbiana especfica.
17.- Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias Gram

positivas y Gram negativos, resaltando sus diferencias
-
Su envoltura celular comprende:

La pared celular est compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano o
con N-acetil murmico)
Su grosor le confiere una gran resistencia, las protege de una ruptura
osmtica en ambientes acuticos, les confiere forma y es la responsable de
retener el tinte azul oscuro o violeta durante la tincin de Gram.
Presentan slo una membrana lipdica y la capa gruesa de peptidoglicano.
No existe presencia de endotoxinas.

-
Conformada por 4 zonas:

peptidoglicano.
4. Membrana externa que contiene fosfolpidos, lipopolisacrido (LPS) y
protenas
Pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la
membrana externa.

bioqumicas:
-

Ser bacilos Gram negativos
Incluye los gneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter.

suministro de agua puede estar contaminado, ya sea con aguas negras u otro tipo
de desechos en descomposicin. Generalmente este tipo de bacterias se
encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en el fondo
sedimentoso.

consumo.

No, dentro del grupo de los coliformes totales (que comprende la totalidad del
grupo) existe un subgrupo que es el de los coliformes fecales (solo los de origen
fecal).
22.- Qu implicaciones epidemiolgicas tienen

la
presencia
de
tambin de Salmonella.

Clera, Fiebre Tifoidea y Paratifoidea, Disenteras, Poliomelitis, Hepatitis,
Salmonelosis, Cryptosporidiosis, Gastroenteritis, Ascariasis, Clonorquiasis,
Dracunculosis, Paraginimiasis, Esquistosomiasis y Paludismo.

I: Indol
M: Rojo de metilo
V: V-P (Voges-Proskauer)
iC: Citrato de Simmons

Permiten determinar la presencia o ausencia de ciertas enzimas y a veces incluso
permiten determinar la existencia de una secuencia metablica.
El IMViC se desarroll para clasificar especies de la familia antes mencionada y
correspondiente al grupo de bacterias coliformes.

bacteriana.

Unidad Xochimilco
MTODOS BSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN
DE ENTEROBACTERIAS DEL AGUA)
Por: Eduardo Jernimo Hernndez

Lic. Mdico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A

esterilizacin.
Mtodos fsicos
Depende de factores como tiempo, exposicin y temperatura. El calor se puede aplicar
como agente esterilizante de dos formas: el calor hmedo el cual destruye a los
microorganismos por desnaturalizacin de las protenas y el calor seco que destruye a
los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. El calor es considerado
como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar
soporte altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de dao.
Mtodos qumicos

factores.
Mtodo
Calor hmedo
Calor seco
Mtodos Fsicos
Ventajas
Rpido, no deja residuos
txicos, bajo deterioro del
material expuesto, econmico
No es corrosivo para metales
e
instrumentos,
permite
esterilizacin de sustancias en
Desventajas
No se permite para emulsiones
con agua, es corrosivo sobre
algunos metales
Mayor tiempo de esterilizacin.
Radiaciones de acuerdo al
Ionizantes RUV
Filtracin
polvo
Esterilizan superficies
Esteriliza aceites, pomadas,
soluciones oftlmicas
tiempo de radiacin.
Escasamente penetrantes
No
retienen
virus
microplasma.
ni
Mtodo
Mtodos Qumicos
Ventajas
Desventajas
xido de Etileno
Esteriliza material
que es Peligroso por ser altmente
termosensible, como equipos inflamable y explosivo, adem+s
electrnicos, et.
de ser cancergeno
Aldehidos
Mtodo
rpido
y
nico No se puede estrilizar objetos
esterilizante fro.
con celulosa, algodn, lquidos,
humedad, madera, etc.
Gas-Plasma de No deja ningn residuo txico, Muy costoso.
Perxido
de se convierte en agua y
Hidrgeno
oxgeno al final del proceso,
material sin aireacin, dura
aproximadamente entre una
hora y hora y media.
desinfeccin.

Nitrato de Plata.
superficies?
estril.



su funcin.
PARTE
BRAZO
BASE O PIE
FUNCION
PLATINA
PINZAS DE SUJECION
TUBO
CREMALLERA
OCULAR
OBJETIVOS
DIAFRAGMA
FUENTE DE LUZ

microscopio
iluminacin.
Aqu
se
coloca
el
imagen a observar.
encuentran en l
Permite que el movimiento de los
tornillos macro y micromtrico sea de
mayor o de menor amplitud.
objeto a observar




Es una tcnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado nmero de bacterias,
unnmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al




Poseen una pared celular interna y una pared

de peptidoglucano.

consistencia y forma esencial para replicacin y

Membrana externa: forma un saco rgido
alrededor de la bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a macromolculas,
Espacio periplasmtico: espacio entre la

superficie externa de la membrana
citoplasmtica y la interna de la membrana
externa.
La red de murena est muy desarrollada y llega

a tener hasta 40 capas
La penicilina mata a las gram positivas, ya que

bloquea la formacin de enlaces peptdicos
entre las diferentes cadenas del peptidoglucano
La penicilina no mata a las Gram negativas, a

causa de la capa de lipopolisacridos situada
en la parte externa de la pared celular.
No contiene LPS
Contiene LPS: estimulador de respuestas

inmunes: activa clulas B, liberacin de IL,
Quedan decoloradas.

Son esporulantes y no esporulantes, como
Streptococcus, Cisteria, Frankia.
Poseen otros componentes: cidos teicoicos y

lipoteicoicos, y polisacridos complejos.
Poseen protenas con concentraciones

elevadas.





que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y la hepatitis. Los gusanos parsitos y
los patgenos bacterianos tales como Salmonella, tambin se encuentran comnmente
en el agua que da positivo en la prueba que busca altos niveles de bacterias coliformes
fecales.

pueden
transmitirse
en
el
agua


incubacin.Recuerdaqueunacoloniadeenterobacteriasseorginaapartirdeunasola
bacteria (UFC) y stas se dividen en un tiempo promedio de 30 minutos.
24hrs=281474976710656

Unidad Xochimilco
MTODOS BSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN
DE ENTEROBACTERIAS DEL AGUA.
Por: Dimas Guzmn Cristian.
Lic. Mdico cirujano.
Docente:
Grupo: BB12A

esterilizacin.
El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor hmedo el cual
destruye a los microorganismos por desnaturalizacin de las protenas y el calor seco
que destruye a los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares.
El calor es considerado como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y cuando
el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de dao.
factores.
MTODOS FSICOS.
Calor hmedo.
Ventajas: Rpido, no deja residuos txicos, bajo deterioro del material expuesto,
econmico.
Desventajas: No se permite para emulsiones con agua, es corrosivo sobre algunos
metales.
Calor seco.
Ventajas: No es corrosivo para metales e instrumentos, permite esterilizacin de
sustancias en polvo.
Desventajas: Mayor tiempo de esterilizacin. Baja penetracin del calor. Radiaciones de

acuerdo al tiempo de radiacin.
Ionizantes RUV.
Ventajas: Esterilizan superficies.
Desventajas: Escasamente penetrantes.
Filtracin.
Ventajas: Esteriliza aceites, pomadas, soluciones oftlmicas.
Desventajas: No retienen virus ni microplasma.
MTODOS QUMICOS.
xido de Etileno.
Ventajas: Esteriliza material que es termo sensible, como equipos electrnicos, etc.
Desventajas: Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, adems de ser
cancergeno.
Aldehdos.
Ventajas: Mtodo rpido y nico esterilizante fro.
Desventajas: No se puede estrilizar objetos con celulosa, algodn, lquidos, humedad,
madera, etc.
Gas-Plasma de Perxido de Hidrgeno.

Ventajas: No deja ningn residuo txico, se convierte en agua y oxgeno al final del
proceso, material sin aireacin, dura aproximadamente entre una hora y hora y media.
Desventajas: Muy costoso.

desinfeccin.


Nitrato de Plata.
superficies?
estril.

su funcin.
PARTE
BRAZO
BASE O PIE
PLATINA
PINZAS DE SUJECION
TUBO
CREMALLERA
OCULAR
FUNCION
pinzas el carro el tubo del microscopio y el
revlver. Adems sirve para trasladar el
Es una pieza que proporciona estabilidad y
sirve de soporte a todas las partes del
microscopio
Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene
en su centro una abertura circular por la
que pasar la luz del sistema de
iluminacin. Aqu se coloca el portaobjetos
con la muestra a observar
preparacin.
La
mayora
de
los
adosadas a un carro con dos tornillos, que
permiten un avance longitudinal y
Permite hacer un movimiento rpido hacia
arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y
se utiliza para localizar la imagen a
observar.
encuentran en l
Permite que el movimiento de los tornillos
macro y micromtrico sea de mayor o de
menor amplitud.
ocular y son las lentes que Capta y amplia
la imagen formada en los objetivos. Los
primeros microscopios eran monoculares,
es decir, posean una sola lente. Los
OBJETIVOS
DIAFRAGMA
FUENTE DE LUZ
microscopios
actuales
poseen
dos
oculares, uno para cada ojo y se les llama
binoculares.
Son unos pequeos cilindros colocados en
el revlver que proporciona el poder de
resolucin del microscopio y determinan la
cantidad total de aumento.
que elimina el exceso de luminosidad para
tener una buena iluminacin del objeto a
observar
Para observar la muestra microscpica es
necesario que sta se ilumine con algn
tipo de luz y nuestros microscopios cuentan
con un foco que da energa elctrica que
dirige sus rayos luminosos hacia el sistema
condensador



Es una tcnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado nmero de bacterias,
unnmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al





Bacterias Gram positivas.
1. Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano. Peptidoglucano:
es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial para replicacin y
2. No tiene membrana externa.
3. No tiene espacio periplasmtico
4. La red de murena est muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas.
5. La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formacin de enlaces
peptdicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano.
6. No contiene LPS.
7. En la tincin de Gram, retienen la tincin azul.
8. Conservan el complejo yodocolorante.

9. Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
10. Poseen otros componentes: cidos teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos
complejos.
Bacterias Gram negativas.
1. Poseen una pared celular ms compleja:
Pared celular interna
Pared de peptidoglucano bicapa lipdica externa
2. Membrana externa: forma un saco rgido alrededor de la bacteria, mantiene
estructura y es barrera impermeable a macromolculas, ofrece proteccin en
condiciones adversas.
3. Espacio periplasmtico: espacio entre la superficie externa de la membrana
4. La red de murena presenta una sola capa.
5. La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa de la capa de
lipopolisacridos situada en la parte externa de la pared celular.
6. Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa clulas B, liberacin de
IL, FNT, IL 6 por macrfagos.
7. Quedan decoloradas.
8. Pierden el complejo yodocolorante.
9. Pueden ser anaerobios o aerobios.
10. Poseen protenas con concentraciones elevadas.




que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y la hepatitis.

pueden
transmitirse
en
el
agua


24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco

Cuestionario Laboratorio
Por: Sofia Lizeth Valerio Ordua

Lic. Medicina Veterinaria y Zootecnia
Docente:
Grupo: BB12A
CUESTIONARIO.

esterilizacin.
R. Medios fsicos:
-Vapor saturado a presin: autoclave: es el medio ms especfico y efectivo de
menor costo para esterilizar la mayora de los objetos de uso hospitalario
-Calor seco: pupinel: este sistema elimina microorganismos por coagulacin de las
protenas de estos. Su efectividad depende de la cantidad de calor, la cantidad de
calor disponible y los niveles de perdida de calor, requiere largos periodos de
exposicin.
Medios qumicos:
-xido de etileno: este es un producto qumico con un alto poder desinfectante, su
presencia est en forma lquida y se volatiza formando un compuesto gaseoso que
elimina microorganismos por cualquier alquilacin de la pared celular del
microorganismo.
-Perxido de hidrogeno: es un agente qumico que se ha utilizado como
desinfectante de alto nivel y esterilizante por inmersin, esteriliza a baja
temperatura por medio de plasma de perxido de hidrogeno
-cido paracetico: esterilizante de alto nivel, es esporicida, por lo tanto esteriliza
en tiempos menores al glutaraldehido, hay dos formas por este agente: lquido y
plasma.
indica cuando es recomendable utilizar cada uno de estos.
R. Fsicos: ventajas: ms efectivo y de bajo costo, eleva la temperatura tiempo
corto y no deja residuos txicos.
Desventajas: su efectividad depende de la cantidad de calor disponible, largos
periodos.
Qumicos: ventajas: alto poder desinfectante.
Desventajas: alto costo, largos periodos de esterilizacin y alto nivel de
infraestructura.

desinfeccin.
R. Antispticos: alcoholes, tintura de yodo, povidona yodada, clorhexidina,
triclosan.
Desinfectantes: glutaraldehido, hipoclorito de sodio1%
4. Qu tipo de sustancias suele utilizarse continuamente para desinfectar
superficies?
R. Para las superficies muy comnmente es usado el cloro y productos a base de
cloro, incluidas los compuestos de hipocloruro, yodoforos, amonio, cidos, fenol y
agentes gaseosos.
5. Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estril
para el trabajo microbiolgico y seala que factores influyen en la creacin de la
zona estril.
R. El mechero te ayuda a crear corrientes de aire caliente que arrastran partculas
de polvo y microorganismos dispersos en el rea que rodea tu rea de trabajo, es
decir el aire caliente que genera la flama arrastra hacia afuera toda partcula y
microorganismo.
investigacin para crear zonas de trabajo estril.
R. Se pueden realizar limpiezas con agua jabonosa, se limpian con una compresa
impregnada de alcohol al 70%.
Limpieza de la cabina, desinfeccin de todo el material que se vaya a introducir a
la cabina sumergindola en un bao de alcohol.
7. Explica los riesgos que puede correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas despus de concluir cada sesin.
R. Los riesgos que se corren son primero que el material pueda caerse y por lo
tanto romperse, tambin puede quedar sucio y contaminarse al hacerse una nueva
tcnica.
R. Al no lavar los materiales de laboratorio corremos el riesgo que queden sucios y
por lo tanto despus se contaminen o se infecten o algn virus se quede ah.
9. Realiza el diagrama del microscopio describe cada una de sus partes e indica
su intencin.
Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador (por donde mira). Su misin es
ampliar la imagen del objetivo. Suelen tener dos oculares, por eso se llaman
binoculares, si solo tiene uno se llama monocular.
Tubo: El tubo ptico se puede acercar o alejar de la preparacin (lo que se quiere
ver).
Tornillo macromtrico: Sirve para realizar un primer enfoque, permite hacer un
movimiento rpido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para
localizar la imagen a observar.
Revlver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos. La esfera se suele llamar cabezal y contiene los sistemas de lentes
oculares (monoculares o binoculares (2 lentes)).
Brazo: Es una pieza metlica de forma curvada que puede girar; sostiene por su
extremo superior al Tubo ptico y en el inferior lleva varias piezas importantes.
Platina: Lugar donde se deposita la preparacin que se quiere observar. Tiene en
su centro una abertura circular por la que pasar la luz del sistema de iluminacin.
Objetivo: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta
determinando la cantidad de aumentos con la que queremos observar.

Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos que inciden sobre la
preparacin. El condensador de la parte de abajo tambin se llama FOCO y es el
que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Tornillos de enfoque: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que
consigue el enfoque correcto.
Base: Sujetador de todo el microscopio.
Espejo: Con una cara plana y otra cncava, est montado sobre un eje giratorio
ubicado en la zona ms inferior del brazo por debajo de la Platina.
10. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.
R. Se han encontrado bacterias como por ejemplo Vibrio, e-coli, pseudomonas.
R. Su principal propsito es disminuir la concentracin bacteriana de una muestra
especfica.
R. Es la tcnica ms utilizada, para aislar los microorganismos en un placa de
agar, se colocan muestras y se realiza un barrido con una asa inoculada hasta
13. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
R. Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos gram negativos de fcil
desarrollo aerobios y anaerobios facultativos.
14. Explica que se le llama medio de cultivo bacteriolgico.
R. Son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y
condiciones fsicas optimas, permite el crecimiento de microorganismos.
R. Son aquellos que adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores, indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por medio de adicin de sangre u otros
tipos biolgicos.
R. Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias

contenidas en una poblacin poli microbiana. El fundamento de estos medios
especfica.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias grampositivas
y gram negativas, resaltando las diferencias.
R. Bacterias gram positivas: pared celular interna y una pared de peptiduglucano
que es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial para replicacin y
supervivencia de la batera, no tiene membrana externa, no tiene espacio peri
plasmtico.
Bacterias gram negativas: pose una pared celular ms compleja , pared celular
interna, pared de peptiduglucano, bicapa lpida externa, membrana externa,
espacio peri plasmtico.
18. Cmo se diferencia las bacterias coliformes?
R. Las bacterias del grupo coliformes totales que son capaces de fermentar
lactosa a 44-45 se conocen como coliformes termo tolerantes.
R. Lo que indica es que el agua est contaminada y por lo tanto no puede ser
consumida por el ser humano.
R. Su importancia se debe que al ser analizadas se pueden crear procesos y
tratamientos para el agua y as lograr que el agua est libre de e-coli.
R. Todas estn y se considera que el Escheria coli es el ndice de contaminacin
fecal ms adecuado.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias en
la muestra de agua que colectaste?
R. Puede contener parsitos en el agua y as desencadenar unan posible
contaminacin y un riesgo de una suma importancia de la salud humana.
R. Shigellae dysenteriae, Salmonella, Fiebre tifoidea, Salmonella ssp, Vibrio,

Escheria Colli.
R. I: Indol, M: rojo de metilo, V: V-P (Voges- Proskauer), iC: citrato de Simons
R. Se utiliza en la biologa para identificar bacterias. El resultado de test expresa
mediante smbolos de positivo o negativo (+,-) segn el resultado de cada prueba
siguiendo siempre el orden establecido por las iniciales del mtodo.
26. Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para realizar
la prueba de la oxidasa?
R. Para las pruebas de oxidasa, se utiliza un reactivo llamado Kovacs, el cual est
compuesto de alcohol osaomlico, p-dimetilaminobenzaldehdo, y cido
clorhdrico. El cido puede reaccionar con el metal y darles falsos positivos.
horas de incubacin. Recuerda que una colonia de enterobacterias se origina a
partir de una sola bacteria (UFC) y estas de dividen en un promedio de 30
minutos.
R. El nmero de bacterias resultante depende mucho del tipo de muestra pero lo
aproximado es que se generen alrededor de unas 4 a 6 bacterias.
Unidad Xochimilco

Diana Alejandra Navarrete Gonzlez

2152033613
Lic. Agronoma
Docente:
Grupo: BB12A
1.-Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

esterilizacin.
Agentes fisicos: el calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas:
el calor humedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalizacion de las
protenas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidacin de sus
componentes celulares.
La radiacin, la emisin y propagacin de la energa puede ser utilizada como agente
para la eliminacin de microorganismos
Radiaciones ionizantes se pueden utilizar para esterilizar materiales platicos y la luz uv
para reas cerradas
Quimicos: capaces de daar los componentes clulares (protenas, membranas, etc)
Gaseosos-----> oxido de etileno
No gaseosos ---------> alheidos ej: glutaraldehido cido paractico y peroxido de
hidrgeno
2.-Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior e indica
factores.
Calor Hmedo
VENTAJAS
Rpido calentamiento y penetracin.
Destruccin de bacterias y esporas en poco tiempo.
No deja residuos txicos.
Bajo deterioro del material expuesto.
Econmico.
DESVENTAJAS
No se permite para emulsiones con agua.
Es corrosivo sobre algunos metales.
Calor Seco
VENTAJAS
Permiten esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas y de viscosas no voltiles.
DESVENTAJAS
Mayor tiempo esterilizacin.
Radiaciones de acuerdo al tiempo de radiacin, tiempo exposicin y dosis
QUIMICOS (Oxido de Etileno)

VENTAJAS
Esteriliza material termosensible, equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, metal

etc.
DESVENTAJAS
Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, ademas cancergeno.
Aldehdos
VENTAJAS
Mtodo rpido y nico esterilizanrte fro.
DESVENTAJAS
No se pueden esterilizar algunos objetos con celulosa, algodn,, lquidos,
humedad, madera, etc
Gas-Plasma de Perxido de Hidrgeno
VENTAJAS
No deja ningn residuo toxico.
Se convierte en agua y oxigeno al final del proceso.
Material sin aireacin.
Ciclo dura entre 54 y 75 min.
DESVENTAJAS
Mtodo mas costoso.
3.- Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

desinfeccin.
Detergentes catinicos (compuestos de amonio cuaternario)
hipoclorito sdio 1%
cloroxilenol
Formaldehdo.
Glutaraldehdo.
Perxido de hidrgeno.
Dicloruro de mercurio.
Antispticos:
Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua).
Tintura de Yodo
Providona yodada
Clorhexidina
Triclosn
4.-Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desifenctar superficies?
bactericidas, fungicidas,fungistatica y virusidas
5.-Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estril para
estril.
Al Trabajar cerca del mechero se crea una corriente de aire clido que no permite que las
bacterias entren a la zona de trabajo.
6.-Menciona otros mtodos usados en la industria y en la industria y en los

El uso de equipo para evitar contaminacin (bata, guantes y cubrebocas) as como el
lavado del area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido adems del
uso del mechero.
7.-Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y las pipetas
despus de concluir la sesin.
Se puede sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.
8.-Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de trabajo
Riesgo de contaminacin (foco de infeccin.)
9.-Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e indica su

funcin.
PARTE
BRAZO
BASE O PIE
PLATINA
PINZAS DE SUJECION
TUBO
OCULAR
FUNCION
microscopio
iluminacin. Aqu se coloca el
imagen a observar.
encuentran en l
OBJETIVOS
DIAFRAGMA
FUENTE DE LUZ

objeto a observar
10.-Explica qu tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

11.-Explica cual es el objetivo de sembrar diluciones de agua.

12.-Explica el fundamento del aislamiento por estra cruzada.

Proceso semicuantitativo.Tcnica que se utliza para obtener apartir de un elevado nero
de bacterias un nmero reducido de ellas distribuidas individualmente, cada una originar
una colonia.
13.-Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.

14.-Explica a que se llama medio de cultivo bacteriolgico.

15.-Explica qu es un medio enriquecido.

16.-Explica qu es un medio de cultivo selectivo.

Favorecen el crecimiento especfico de un microorganismo particular (o grupo de
microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de
una poblacin microbiana mixta.
17.-Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias grampositivas y

Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano.
La red de murena est muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formacin de enlaces
peptdicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano
No contiene LPS
Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
Poseen otros componentes: cidos teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos complejos.

pared celular interna
pared de peptidoglucano
bicapa lipdica externa
Membrana externa: forma un saco rgido alrededor de la bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a macromolculas, ofrece proteccin en condiciones adversas
Espacio periplasmtico: espacio entre la superficie externa de la membrana
La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa de la capa de lipopolisacridos
situada en la parte externa de la pared celular.
Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa clulas B, liberacin de IL,
En la tincin son rosas
Poseen protenas con concentraciones elevadas.
18.-Cmo se definen a las bacterias coliformes?
Son un grupo de bacterias que se comparten caracteristicas bioquimicas en comun y son

utiles microorganismos indicadores de sanidad de alimentos y agua en el que se
encuentran las enterobacterias
presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgnicos
20.-Cul es la importancia clnica de las bacterias coliformes?
Tiene gran importancia en el mbito de la salud pblica ya que permite saber la calidad
del agua destinada al consumo humano evitando as epidemias gastrointestinales.
21.-Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?

22.-Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias en la

Pueden sucitarse enfermedades leves como las infecciones agudas del odo, hasta otras
ms graves como la fiebre tifoidea y la hepatitis.
23.-Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua

24.-Qu significan las siglas IMViC?

es una prueba utilizada en biologa para la identificacin bacterias. Se compone de cuatro
pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
25.-Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMViC?

Se emplean fundamentalmente para la identificacin de las Enterobacterias
(bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos con metabolismo
fermentador).
26.-Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia despus de 24 horas de

24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco

Por: Tania Gabriela Corrales Andrade

Lic. En Nutricin Humana
Docente:
Grupo: BB12A
Cuestionario
Mtodos bsicos para el aislamiento e identificacin de enterobacterias en el agua

esterilizacin
Esterilizacin es la eliminacin completa de toda forma microbiana.

Los mtodos de esterilizacin del material se pueden clasificar en fsicos y
qumicos.
Mtodo
Fsicos
Medio
Opciones
Calor hmedo
Autoclave a vapor saturado
Calor seco
Pupinel
Lquidos
Qumicos
Gas
Plasma
Inmersin en glutotaldehido al 2%
Inmersin en perxido de hidrgeno al
6%
Inmersin en cido paractico 0,2 al
30 %
Gas de xido de etileno
Gas de formaldehido
Vapor de perxido de hidrgeno
Plasma de perxido de hidrgeno
Plasma de cido peractico

indica cuando es recomendable utilizar cada uno de ellos.
El calor hmedo proporcionado por autoclave a vapor es el mtodo de
esterilizacin ms efectiva, econmica y rpida disponible en la actualidad, por lo
tanto, debe ser la primera opcin si el material lo permite.
3.
Indica los principales desinfectantes y antispticos utilizados en la

desinfeccin
Antispticos
Son compuestos qumicos con efecto antimicrobiano que se pueden aplicar en
tejido vivo, localmente, de forma tpica en piel sana.
Al ser sustancias que se utilizan en tejidos vivos requieren de propiedades

especiales.
ANTISPTICO
Producen muerte o inhibicin celular, en las bacterias, por oxidacin, hidrlisis e inactivacin de
Son ms selectivos
Son los nicos de uso en tejidos vivos

superficies?
La limpieza requiere de tres tiempos diferentes
Lavado con detergente.
Enjuague y secado.
Desinfeccin con productos de nivel intermedio/bajo
Lavar, desinfectar y secar el contenedor utilizado para preparar la solucin de
limpieza con detergente liquido, enjuagar con agua y desinfectar con el
desinfectante de nivel intermedio/bajo en uso para minimizar el grado de
contaminacin bacteriana.

creacin de la zona estril
El mechero te ayuda a crear corrientes de aire caliente que arrastran partculas de
polvo y microorganismos dispersos en el aire que rodea a tu rea de trabajo, es
decir, el aire caliente que genera la flama arrastra hacia fuera toda partcula y
microorganismo (conveccin de masas de aire)
Al mismo tiempo, la temperatura que alcanza la flama destruye cualquier

organismo, adems te sirve para esterilizar tu asa bacteriolgica. un mechero
Bunsen alcanza un radio de esterilidad de 20 a 30 cm dependiendo la intensidad y
el color de la flama.

investigacin para crear zonas de trabajo esteriles
a) Esterilizacin: Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto
estril (en sentido microbiolgico) est libre de microorganismos vivos.
b) Desinfeccin: Es la destruccin, inactivacin o remocin de aquellos
microorganismos que pueden causar infeccin u ocasionar otros efectos
indeseables; la desinfeccin no implica necesariamente esterilizacin.
c) Desinfectante: Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento
de los microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere
a sustancias utilizadas sobre objetos inanimados.
d) Antisptico: Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los
microorganismos, ya sea destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad.
Se aplica sobre superficies corporales.
e) Sanitarizante : Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros,
segn los requerimientos de salud pblica. Se aplica en objetos inanimados de
uso diario, por ejemplo utensilios y equipos para manipular alimentos, vasos,
platos y otros objetos de uso similar.
f) Germicida: Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a
sus esporas.
g) Bactericida: Agente que mata a las bacterias.
h) Bacteriosttico: Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias, mientras
permanece en contacto con ellas.
i) Fungicida: Agente que mata los hongos.
j) Fungisttico: Agente que inhibe el crecimiento de los hongos, mientras
permanece en contacto con ellos.
k) Virucida: Agente que destruye los virus.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y recoges el frasco, los
tubos y las pipetas despus de concluir la sesin
Si se recoge el material cuando no este contaminado puede provocar daos a
futuros experimentos, se pueden romper y producir pequeos fragmentos de
vidrios o incluso pueden tocar agentes provocndole alguna reaccin.

trabajo despus de concluir cada sesin
Se vierte solucin de hipoclorito de sodio al 10% o benzxal en el frasco que
contienen la muestra de agua que colocaste en los tubos que utilizaste la solucin
de hipoclorito de sodio al 10% debes cerrar el frasco muy bien.
9. Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e

indica su funcin
10. Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua
Son los diferentes tipos de bacterias, virus, protozoos y otros organismos que
transmiten enfermedades como el clera, tifus, gastroenteritis diversas, hepatitis,
etc. En los pases en vas de desarrollo las enfermedades producidas por estos
patgenos son uno de los motivos ms importantes de muerte prematura, sobre
todo de nios.
Normalmente estos microbios llegan al agua en las heces y otros restos orgnicos
que producen las personas infectadas. Por esto, un buen ndice para medir la
salubridad de las aguas, en lo que se refiere a estos microorganismos, es el
nmero de bacterias coliformes presentes en el agua. La OMS (Organizacin
Mundial de la Salud) recomienda que en el agua para beber haya 0 colonias de
coliformes por 100 ml de agua.
11. Explica cul es el objetivo de sembrar diluciones del agua
el objetivo de hacer diluciones es simplemente disminuir la concentracion
bacteriana de una muestra.
12. Explica el funcionamiento del aislamiento por estra cruzada
Es la tcnica ms utilizada para aislar a los microorganismos en una placa de
agar.
Se coloca la muestra y se realiza un barrido con un asa de inoculacin hasta
13. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar de MacConkey

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el
desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las
colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
14. Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han
preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.
15. Explica que es un medio de cultivo enriquecido
Es un medio de cultivo que contiene los nutrientes necesarios para apoyar el
crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, entre ellos algunos de
los ms exigentes. Se utilizan comnmente para la cosecha de diferentes tipos de
microbios que estn presentes en la muestra.
Ciertos organismos no crecen en medios de cultivo ordinarios. Requieren
ingredientes que promueven el crecimiento, como la sangre, glucosa, suero,
huevo, entre otros. Los medios de enriquecimiento contienen ingredientes que
aumentan las cualidades estimulantes del medio propiciando un crecimiento
elevado.Otra caracterstica de los medios de enriquecimiento es que pueden
contener componentes qumicos que inhiben ciertos tipos de microorganismos. De
este tipo de Medios de cultivo se puede obtener un subcultivo de una colonia
aislada.
16. Explica que es un medio de cultivo selectivo
es un medio de cultivo en el que slo puede crecer un tipo de microorganismo
(hongos, bacterias entricas, protozoos.
Un ejemplo de medio selectivo sera usar un medio rico en un antibitico, como la
ampicilina, para permitir nicamente el crecimiento de las bacterias resistentes a
ste.
17. Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias gram

positivas y gram negativas, resaltando sus diferencias
Poseen una pared celular interna y una
pared de peptidoglucano.
consistencia y forma esencial para
replicacin y supervivencia de la bacteria.

18. Cmo se definen las bacterias coliformes?

La denominacin genrica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas
que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comn e importancia relevante
como indicadores de contaminacin del agua y los alimentos.
Coliforme significa con forma de coli, refirindose a la bacteria principal del grupo,
la Escherichia coli, descubierta por el bacterilogo alemn Theodor von Escherich
en 1860.
Tradicionalmente se los ha considerado como indicadores de contaminacin fecal
en el control de calidad del agua destinada al consumo humano en razn de que,
en los medios acuticos, los coliformes son ms resistentes que las bacterias
patgenas intestinales y porque su origen es principalmente fecal. Por tanto, su
ausencia indica que el agua es bacteriolgicamente segura.
Asimismo, su nmero en el agua es directamente proporcional al grado de
contaminacin fecal; mientras ms coliformes se aislan del agua, mayor es la
gravedad de la descarga de heces.
En la higiene de alimentos los coliformes no se consideran indicadores de
contaminacin fecal sino solamente indicadores de calidad.
Los coliformes totales se usan para evaluar la calidad de la leche pasteurizada,

leche en polvo, helados, pastas frescas, frmulas para lactantes, fideos y cereales
para el desayuno.
Los coliformes fecales se usan para evaluar los mariscos frescos.
Por ltimo, la E. coli se usa como indicador en quesos frescos, quesillos,
cereales , masas con relleno, alimentos infantiles, cecinas cocidas y verduras
frescas.

No todos los coliformes son de origen fecal, por lo que se hizo necesario
de contaminacin. Se distinguen, por lo tanto, los coliformes totales que
comprende la totalidad del grupo y los coliformes fecales aquellos de origen
intestinal.
Desde el punto de vista de la salud pblica esta diferenciacin es importante
puesto que permite asegurar con alto grado de certeza que la contaminacin que
presenta el agua es de origen fecal.
22. Qu implicaciones epidemiolgicas tiene la presencia de enterobacterias
en la mezcla de agua que colectaste?
La fiebre tifoidea es causada por la Salmonela typhi, que forma parte de una gran
familia entre las que se encuentran otro tipo de salmonellas responsables de
infecciones generalizadas asi como de cuadros de diarreas pasajeras. Estas
bacterias se encuentran ampliamente diseminadas en animales mamferos,
reptiles, aves e incluso insectos. Algunos como las salmonellas tiphi, paratiphi
estan altamente ligadas al ser humano y no tienen otros huspedes naturales.
23. Qu enfermedades gastrointestinales puedan transmitirse en el agua
contaminada con material fecal?
La diarrea es ocasionada por una variedad de grmenes, entre ellos los virus, las
bacterias y los protozoos. Esta enfermedad hace que las personas pierdan lquido
y electrolitos, lo cual puede provocar deshidratacin y, en algunos casos, causar la
muerte.
El clera es una infeccin bacteriana aguda del intestino que causa numerosos
episodios de diarrea, los cuales pueden derivar en deshidratacin aguda y
provocar la muerte si no se los trata de inmediato.
Los parsitos intestinales (tambin conocidos como helmintos) infectan a las

personas que entran en contacto con suelos contaminados con heces de un ser
humano infestado con los mismo, o a quienes consumen alimentos contaminados.
24. Qu significan las siglas IMVIC?

El IMVIC es una prueba utilizada en biologa para la identificacin bacterias. Se
compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato. El
resultado de este test se expresa mediante smbolos de positivo o negativo (+ o -)
segn el resultado de cada prueba, siguiendo siempre el orden establecido por las
iniciales del mtodo. As por ejemplo, el IMViC de la bacteria Salmonella y
Citrobacter es -+-+. Para E.coli es ++-- y para Klebsiella y Enterobacter es --++.
25. Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMVIC?

Poder identificar las bacterias por ejemplo, por el Indol que consiste en cultivar al
microorganismo en estudio en un caldo rico en triptfano; despus de 24-48 horas
de crecimiento se adiciona al tubo sobre el caldo xilol, para conseguir separar el
indol producido, y tras agitar se incorpora el reactivo de Kovacs (p-dimetil animo
benzaldehido) un resultado positivo mostrar la formacin de un anillo de color
rojo sobre el caldo de cultivo, lo cual pondr de manifiesto la presencia de Indol
debido a la utilizacin del triptfano por el microorganismo (la molcula de tritfano
se rompe y uno de esos productos es el Indol), un resultado negativo solo
mostrara un anillo de color amarillo propio del reactivo de Kovacs.
La prueba de oxidasa es una prueba usada en microbiologa para determinar si
una bacteria produce alguna de las citocromo c oxidasas.1 La prueba hace uso de
discos impregnados con el reactivo N,n,n,n-tetrametil-p-fenilendiamina (o TMFD) o
N,N-Dimetil-p-fenilendiamina (o DMFD), el cual tambin es un indicador redox. El
reactivo pasa de azul oscuro a granate al ser oxidado, y se vuelve transparente al
ser reducido. Las bacterias oxidasa positiva poseen citocromo oxidasa o indofenol
oxidasa (una hemoprotena).2 Ambas catalizan el transporte de electrones de
compuestos donantes (NADH) a receptores de electrones (por lo general el
oxgeno). En la prueba, el reactivo TMFD

acta como donante artificial de electrones
para la enzima oxidasa.

Unidad Xochimilco

CUESTIONARIO DE LABORATORIO
Por: Julia Maria Turcio Gil
Licenciatura: Medicina Veterinaria y Zootecnia.

Clave: 2152027893
Docente:
Grupo: BB12A
Cuestionario:
1.- Explica el fundamento de los diferente mtodos fsico-qumicos de
esterilizacin
-La eliminacin completa de toda forma de vida microbiana se puede conseguir a
travs de mtodos fsicos qumicos y gaseosos.
2.- explica la ventaja y desventaja de los mtodos de esterilizacin.
Autoclave: es el mtodo ms efectivo y de menos costo para esterilizar la mayora
de objetos de uso hospitalario.
Tiene la ventaja de producir un elevamiento de la temperatura de forma rpida,
con cortos tiempos de esterilizacin y no dejar residuos txicos en el material; la
presencia de material orgnico o suciedad interfiere con la accin del vapor por lo
que si el material se encuentra sucio antes de la esterilizacin no se puede
garantizar su esterilidad.
Perxido de hidrgeno: esterilizante por inmersin, puede dejar residuos y
recientemente se ha utilizado a baja temperatura con plasma de perxido.
Acido paractico: es esporicida desinfectante tiene 2 formas lquido y plasma.
Radiaciones ionizantes: pueden usarse rayos gamma o cobalto, es de alta
complejidad y debe realizarse bajo estrictas normas de seguridad adems
requiere infraestructura y no es posible en centros hospitalarios.

3.-Tipo de sustancias utilizadas para desinfectar:
Cloro, yodo, alcohol, amoniaco, agua caliente (vapor).
4.-Explica cual es motivo para usar el mechero para preparar la zona estril para
el trabajo microbiolgico y factores que influyen en la creacin de la zona estril.
Esteriliza con calor una zona de aproximadamente 20cm de dimetro
aproximadamente, dependiendo de la llama.
5.- menciona otros mtodos utilizados en la industria para preparar zonas
estriles:
Calor, radiacin UV, mecnica (maquinas especializadas) y cloro.
6.- riesgos de no recoger el material:
Contagio o ingestin, intoxicacin, cortes o heridas.
7.- riesgos de no lavar y desinfectar la zona de trabajo:
Infectarnos con las enterobacterias o contaminar las muestras.
8.- realiza un diagrama del microscopio:
9.-funcin de las partes del microscopio:

Ocular: lente situada cerca del ojo del observador su misin es ampliar la imagen
del objetivo.
Brazo: pieza metlica en forma curveada para sostn de los objetivos.
Revlver: contiene los objetivos permite girar y cambiar de objetivos.
Objetivos: lentes que amplan la imagen del porta y cubre objetos.
Platina: Lugar donde se deposita la preparacin que se desea observar.
Condensador: lente que concentra los rayos luminosos que inciden sobre la
preparacin.
Tornillos de enfoque: micro consigue el enfoque, macro acerca el enfoque.
Desplazamiento de la platina: permite subir o bajar la muestra.
Cabezal: contiene el revlver y los sistemas de lentes.
Base: sujecin de todo el microscopio.
10.-Qu tipo de bacterias pueden aislarse en el agua?:
Ms del 80% de las bacterias descritas por el manual de Berguey pueden aislarse
en e agua.
11.- Objetivo de sembrar diluciones en agua:
Permite trabajar con un nmero consideraba de manera que es posible

organizarlas para su estudio logrando separa colonias y su crecimiento.
12.- Explica el fundamento por estra cruzada:
Se coloca la muestra y se realiza un barrido con una asa de inoculacin hasta
lograr separar colonias individuales de la cepa se incuba a 35 por 24 horas.
13.- Explica el tipo de bacterias que pueden aislarse el agar Mc conkey
Se utiliza para el aislamiento de Gram negativas de fcil desarrollo anaerobios y
aerobios facultativos.
14.- A qu se llama medio de cultivo bacteriolgico?
Solucin lquida o slida que contiene todos los nutrientes necesarios para permitir
el crecimiento bacteriano tambin se les llama agares o caldos.
15.- qu es un medio de cultivo enriquecido?
Son aquellos que adems de las sustancias nutritivas normales incorporan una
serie de factores para microorganismos exigentes como sangre.
16.- Medios de cultivo selectivo:
contenidas en una poblacin polimicrobiana un ejemplo es el caldo selenito que se
usa para el crecimiento de la salmonnella y frenar el resto de las enterobacterias.
17.- describe la pared celular de las gram positiva y gram negativas:
18.- Cmo se definen las bacterias coliformes?
Bacilos cortos gramnegativos, anaerobios facultativos no esporulados que
fermentan la lactosa a 35C en menos de 48 horas con produccin de cidos y
gas.

la capacidad de stas de fermentar lactosa y producir gas.
El indicio de E. coli es un indicio de contaminacin por materia fecal reciente por lo
que el consumo de esa agua para la poblacin no es apto.
No, existen coliformes totales que se encuentran en el intestino del hombre y de
los animales.
22.- ?Qu implicaciones epidemiolgicas tiene la presencia de enterobacterias?
Algunas puedes causar fiebre, diarrea e incluso la muestre si no se controlan.
23.- Qu enfermedades pueden trasmitirse en el agua contaminada con heces
fecales?
Anemia, hepatitis, polio, tifoidea, diarrea, giardiasis, dengue, clera etctera.
24.- Qu significan las siglas IMVic?
Prueba itulizada para la identificacin de bacterias Secompone de 4 pruebas Indol,
rojo de metilo, Vogues-Proscauer y citratos.
25.- Cul es el objetivo de realizar la pruebas de identificacin?
Identificar enterobacterias.
26.- Por qu no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para realizar la
pureba de oxidasa?
para las pruebas de oxidasa de utiliza un reactivo llamado Koracs el cual est
compuesto de alcohol isoamlico, pdimetl amino, benzaldehido y cido clorhdrico,
el cido puede reaccionar con el metal y dar falsos positivos.

Unidad Xochimilco

Practica de Laboratorio.
Por: Loeza Coatzozon Grisel
Lic. Agrnoma
Docente:
Grupo: BB12A
1.- EXPLICA EL FUNDAMENTO DE LOS DIFERENTES MTODOS FSICOS Y

QUMICOS DE ESTERILIZACIN:
Dentro de los mtodos fsicos se pueden encontrar:
Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la accin
del calor, el cual provoca una desnaturalizacin de protenas, fusin
desorganizacin de las membranas en los microorganismos.
Radiaciones: se atribuye a la absorcin por DNA, existen uniones covalentes
entre residuos de primigenia pertenecientes a la misma cadena, se distorsiona el
DNA y se inhibe la sntesis del DNA, por tanto tambin el crecimiento y respiracin
de los microorganismos. Su uso principal es para esterilizar el aire y superficies.
Dentro de los mtodos qumicos: Pueden ser Gaseosos (xido de etileno) o no
Gaseosos (Aldehdos, cido peractico y perxido de hidrgeno)
Los antispticos son considerados venenos que al actuar sobre grmenes, estos
son destruidos. Algunos de ellos ejercen su accin nociva sobre todas las clulas y
otros actan sobre algunas especies bacterianas en especfico. Es ptimo para la
antisepsia de las manos del experimentador, mesas de trabajo, material, etc.
2.- EXPLICA LAS VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MTODOS DE LA
PREGUNTA ANTERIOR E INDICA CUNDO ES RECOMENDABLE UTILIZAR
CADA UNO DE STOS:
Mtodos fsicos:
Ventajas: Rpido calentamiento y penetracin, destruccin de bacterias en un
periodo corto, no hay residuos txicos, ademas de que no es corrosivo.
Entre sus desventajas se encuentra que: En algunas ocasiones el material a
esterilizar no soporta altas temperaturas y pueden sufrir algn dao o simplemente
el material a esterilizar puede ser inflamable. En cuanto a las radiaciones, no
penetran en slidos y pobremente en lquidos.
Mtodos qumicos:
Ventajas: el ciclo de esterilizacin dura de 54-75 minutos, el material sometido a
estos procesos no precisa de aireacin.
Desventajas: se necesita un mayor tiempo, las sustancias son inflamables, txicas

y de muy alto costo.
3.INDICA LOS
PRINCIPALES AGENTES
DESINFECTANTES
ANTISPTICOS UTILIZADOS EN LA DESINFECCIN:
Los desinfectantes son productos qumicos que matan a los microorganismos y

se utilizan sobre objetos inanimados. Como: Glutaraldehdo, hipoclorito de sodio
Los antispticos son sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de
los microorganismos y no son lo suficientemente txicos para ser aplicados a los
tejidos vivos. Como: Alcoholes, tintura de Yodo,
4.- QU TIPO DE SUSTANCIAS SUELEN UTILIZARSE COMNMENTE PARA
DESINFECTAR SUPERFICIES?
*Hipoclorito
de
*Solucin de benzal diluido 1:10
sodio
al
10%
5.- EXPLICA CUL ES EL OBJETIVO DE UTILIZAR EL MECHERO PARA

PREPARAR LA ZONA ESTRIL PARA EL TRABAJO MICROBIOLGICO Y
SEALA QU FACTORES INFLUYEN EN LA CREACIN DE LA ZONA
ESTRIL:
a su uso.
6.- MENCIONA OTROS MTODOS USADOS EN LA INDUSTRIA Y EN LOS
LABORATORIOS DE INVESTIGACIN PARA CREAR ZONAS DE TRABAJO
ESTRILES:
Desinfectantes: son productos qumicos que matan a los microorganismos y se
Antispticos: sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de los
tejidos vivos
El calor es el mtodo ms utilizado para la esterilizacin y puede emplearse calor
seco con hornos con una temperatura de 170C por una hora o como calor
hmedo con autoclaves con una temperatura de 121C a 15 libras de presin por
pulgada durante 20minutos.
7.- EXPLICA LOS RIESGOS QUE PUEDES CORRER SI NO RECOGES EL
FRASCO, LOS TUBOS Y LAS PIPETAS DESPUS DE CONCLUIR LA SESIN:
8.- EXPLICA LOS RIESGOS QUE PUEDES CORRER SI NO LAVAS Y
DESINFECTAS LA MESA DE TRABAJO DESPUS DE CONCLUIR CADA
SESIN:
manejo de las muestras y evitar alteraciones en los resultados.
10.- EXPLICA QUE TIPOS DE BACTERIAS PUEDEN AISLARSE EN EL AGUA:
Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina pestis y algunas
pertenecientes a la flora oportunista como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae
y Proteus mirabilis
11.- EXPLICA CUL ES EL OBJETICO DE SEMBRAR DILUCIONES DE AGUA:
12. EXPLICA EL FUNDAMENTO DEL AISLAMIENTO POR ESTRA CRUZADA:
13. EXPLICA QUE TIPOS DE BACTERIAS PUEDEN AISLARSE EN ANGAR
MACCONKEY:

Microorganismos
Colonias
Escherichia coli ATCC 25922
Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri ATCC 12022
Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Diminutas, incoloras, opacas
14. EXPLICA A QU SE LE LLAMA MEDIO DE CULTIVO BACTERIOLGICO:

Un cultivo es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para
favorecer el proceso deseado. Un cultivo es empleado como un mtodo
fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan
enfermedades en medicina humana y veterinaria.
15. EXPLICA QUE ES UN MEDIO DE CULTIVO ENRIQUECIDO:
El enriquecimiento es una tcnica que utiliza un medio selectivo lquido para
permitir el desarrollo de un microorganismo a partir de una muestra que contiene
una gran variedad de microorganismos. As, aquellos microorganismos para los
que el ambiente sea ms favorable crecern ms que los otros y finalmente sern
predominantes
Son aquellos que, adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por adicin de sangre u otros productos

biolgicos
que aportan dichos factores. En ocasiones es posible aadir
suplementos artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del mismo.
El gonococo, por ejemplo, necesita cistina y cistena para su crecimiento. Estas
sustancias son aportadas por la sangre calentada adicionada al medio de cultivo
(agar chocolate).
16. EXPLICA QUE ES UN MEDIO DE CULTIVO SELECTIVO:
contenidas en una poblacin polimicrobiana. El fundamento de estos medios
especfica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para
favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de enterobacterias.
17.- DESCRIBE LAS CARACTERSTICAS DE LA PARED CELULAR DE LAS
BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS, RESALTANDO SUS
DIFERENCIAS:
d) Su envoltura celular comprende:
e) La pared celular est compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano o
con N-acetil murmico), su grosor le confiere una gran resistencia, las
protege de una ruptura osmtica en ambientes acuticos, les confiere forma
y es la responsable de retener el tinte azul oscuro o violeta durante la
tincin de Gram.
f) Presentan slo una membrana lipdica (membrana citoplasmtica) y la capa
gruesa de peptidoglicano.
Ciertas bacterias Gram-positivas, cuando se someten a un rgimen de
limitacin de fosfato son incapaces de sintetizar cidos teicoicos, pero en su
lugar producen cidos teicurnicos. Los teicurnicos consisten en polmeros
aninicos formados por la alternancia de cidos urnicos (que tienen

grupos -COOH libres) y aminozcares como la N-acetil-galactosamina.
f) Pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S o
capa superficial (es la parte ms externa de la envoltura celular bacteriana)
unida a la capa de pptidoglicano.
g) No existe presencia de endotoxinas.
f) Conformada por 4 zonas:
peptidoglicano.
4. Membrana externa que contiene fosfolpidos, el lipopolisacrido (LPS) y
protenas (protenas de membrana 6 externa). Esta capa est
estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de
la pared celular.
g) Su estructura didrmica, es decir, de doble membrana celular (una externa
y la otra citoplasmtica) est ntimamente ligada al color rosado tenue que
presentan ante la tincin de Gram.
h) Presentan dos membranas lipdicas (membrana citoplasmtica y membrana
externa) entre la fina pared celular de peptidoglicano
Entre la membrana citoplasmtica interna y la membrana externa que
recubre la pared celular se localiza el espacio periplsmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes
para la nutricin en estas bacterias. Retienen la safranina.
La membrana externa contiene diversas protenas; entre ellas, las porinas o
canales proteicos que permiten el paso de ciertas sustancias, adems de
los lipopolisacridos (LPS), formados por tres regiones: el polisacrido O
(antgeno O), una estructura polisacrida central (KDO) y el lpido A
(endotoxina).
i) Pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la
membrana externa.
j) Presencia de endotoxinas: el lipopolisacrido (LPS)
18.- CMO SE DEFINEN A LAS BACTERIAS COLIFORMES?

bioqumicas:

Ser bacilos Gram negativos;
Incluye los gneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. Durante

mucho tiempo se consideraron evidencia de contaminacin fecal, pero se ha
demostrado que muchos de ellos pueden vivir e incluso crecer en el suelo, el agua
y otros ambientes. Actualmente se consideran un excelente indicador de la
eficiencia de los procesos de sanitizacin y desinfeccin, as como de calidad
sanitaria en agua, vegetales y diversos productos procesados. Su determinacin
se basa generalmente en la capacidad de fermentar lactosa. Se pueden utilizar los
mtodos del nmero ms probable (NMP MPN por sus siglas en ingls) que es
un mtodo estadstico en tres etapas y permite el hallazgo de cantidades muy
bajas de coliformes. Tambin se pueden detectar por cuenta en placa utilizando
agar bilis-rojo violeta (ABRV RVBA por sus siglas en ingls) en el cual las
colonias fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse
por filtracin en membrana (Millipore) e incubacin en medios adecuados, por
mtodos rpidos como Petrifilm y reacciones cromognicas o fluorognicas.
Coliformes fecales: dentro del grupo coliforme, los de origen fecal son capaces
de fermentar la lactosa tambin a 44.5 C; se consideran el indicador ms
adecuado de contaminacin con heces de animales y humanos, por ejemplo en
pescados y mariscos, carnes, leche, alimentos RTE, entre otros. La determinacin
se hace a partir de la segunda etapa (confirmativa) del mtodo de NMP, cultivando
en caldo lactosado con incubacin a 44.5 C. Generalmente se combinan las
determinaciones, segn se requiere.
Escherichia coli: se considera indicador de contaminacin fecal reciente, humana
o animal en productos como agua embotellada, leche y jugos, alimentos infantiles,
y alimentos procesados, en general. Se caracteriza por ser coliforme
termotolerante (fermenta lactosa a 44.5C) que produce indol a partir de triptofano
y produce -glucuronidasa, caractersticas que se usan para su identificacin en
laboratorio, generalmente en la etapa final del NMP o de alguno de los otros
mtodos, incluyendo Petrifilm.
19.- QU INDICA LA PRESENCIA DE BACTERIAS COLIFORMES EN EL
AGUA?
suministro de agua puede estar contaminada, ya sea con aguas negras u otro tipo
de desechos en descomposicin. Generalmente, las bacterias coliformes se

encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los
sedimentos del fondo.
20.- CUL ES LA IMPORTANCIA CLNICA DE LAS BACTERIAS
COLIFORMES?
de la salud pblica ya que permite garantizar la inocuidad (incapacidad para hacer
dao) del agua destinada al consumo, evitando as epidemias gastrointestinales, y
adems de descubrir enfermedades que son comunes al hombre y animales.
21.- TODAS LAS BACTERIAS COLIFORMES SON DE ORIGEN FECAL?
No todas las bacterias coliformes son de origen fecal, por lo que se hizo necesario
de contaminacin. Dentro del grupo de los coliformes totales (que comprende la
totalidad del grupo) existe un subgrupo que es el de los coliformes fecales (los de
origen fecal).
Vase pregunta nmero 18.
22.- QU IMPLICACIONES EPIDEMIOLGICAS TIENEN LA PRESENCIA DE

ENTEROBACTERIAS EN LA MUESTRA DE AGUA QUE COLECTASTE?
tambin de Salmonella y muy graves que no se puedan controlar.
23.- QU ENFERMEDADES GASTROINTESTINALES PUEDEN

TRANSMITIRSE EN EL AGUA CONTAMINADA CON MATERIA FECAL?
Enfermedades trasmitidas por el agua: Clera, Fiebre Tifoidea y

Paratifoidea,
Disenteras,
Poliomelitis,
Hepatitis,
Salmonelosis,
Cryptosporidiosis, Gastroenteritis.
Enfermedades con base en el agua: Ascariasis, Clonorquiasis,
Dracunculosis, Paraginimiasis, Esquistosomiasis.
Enfermedades vectoriales relacionadas con el agua: Dengue, Filariasis,
Paludismo, Oncocercosis, Fiebre del Valle del Rift (FVR).
24.- QU SIGNIFICAN LAS SIGLAS IMVIC?
I: Indol M: Rojo de metilo V: V-P (Voges-Proskauer) i C: Citrato de Simmons

25.- CUL ES EL OBJETIVO DE REALIZAR LAS PRUEBAS DE
IDENTIFICACIN IMVIC?
Las bacterias pertenecientes a la familia enterobacteriaceae, pueden identificarse
a travs de una serie de pruebas bioqumicas, que permiten determinar la
presencia o ausencia de ciertas enzimas y a veces incluso permiten determinar la
existencia de una secuencia metablica. Con este fin se han desarrollado diversos
esquemas de clasificacin, uno de los ms conocidos y utilizados corresponde al
IMVIC que se desarroll para clasificar especies de la familia antes mencionada y
correspondientes al grupo de bacterias coliformes (bacterias aerbicas o
anaerbicas facultativas, Gram (-), bacilares, no esporgenas que producen cido
y gas durante la fermentacin de la lactosa).
26.- POR QU RAZN NO ES RECOMENDABLE UTILIZAR EL ASA

BACTERIOLGICA PARA REALIZAR LA PRUEBA DE LA OXIDASA?
bacteriana.

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UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA

Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud

Por: Alberto Aroz Vsquez

1. Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

3. Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

10. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.

15. Explica que es un medio de cultivo enriquecido.

22. Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de enterobacterias en

UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA

Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud

Por: Alicia Maribel Curiel Rojo

1.- Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

2.- Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la pregunta anterior

Entre sus desventajas se encuentra que: En algunas ocasiones el material a

3.- Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en

4.- Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para desinfectar

5.- Explica cul es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

Factores que influyen en la zona estril: Una manipulacin correcta de las

10.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina pestis y algunas

11.- Explica cul es el objetico de sembrar diluciones de agua.

12. Explica el fundamento del aislamiento por estra cruzada.

Escherichia coli ATCC 25922

Rojas con halo turbio

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Shigella flexneri ATCC 12022

Proteus mirabilis ATCC 43071

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Diminutas, incoloras, opacas

14. Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico.

15. Explica que es un medio de cultivo enriquecido.

17.- Describe las caractersticas de la pared celular de las bacterias

b) Su estructura didrmica, es decir, de doble membrana celular (una externa

18.- Cmo se definen a las bacterias coliformes?

Ser aerobias o anaerobias facultativas

Incluye los gneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. Durante

colonias fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse

22.- Qu implicaciones epidemiolgicas tienen

23.- Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua

24.- Qu significan las siglas IMViC?

25.- Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin IMViC?

26.- Por qu razn no es recomendable utilizar el asa bacteriolgica para

Ya que la prueba tiene como fundamento demostrara la presencia de un sistema

UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA

Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud

Tronco Comn Divisional

Mdulo: Procesos Celulares Fundamentales

Por: Aura Ramirez Vega

1. Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y qumicos de

-Folmaraldehidos: Pastillas para formaraldehido, se disponen en el fondo de

2. Explica las ventajas y desventajas de los mtodos esterilizantes e indica

termosensible, equipos electrnicos, etc.

No se pueden esterilizar objetos con

3. Principales agentes desinfectantes y antispticos utilizados en la

4. Qu tipo de substancias suelen utilizarse comnmente para desinferctar

5. Explica cual es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona

6. Menciona otros mtodos usados en la industria en los laboratorios para

7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, tubos y

8. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de

9. Diagrama de un microscopio y describir cada una de sus partes e indica su

BRAZO: Sirve para trsladar el microscopio y es donde se sujetan las pinzas, el

DIAFRAGMA: Se encuentra en el condensador, elimina el exceso de

10. Explica tipos de bacterias que se pueden aislar en el agua.