UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESINAL DE MEDICINA HUMANA

MASA PROTEICA
Y VICERAL

OBJETIVOS
Objetivo General:
Determinar los mtodos para evaluar las
protenas
compartimiento
visceral
mediante
los
niveles

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del
de

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Transferrina, Prealbmina, Protenas totales y Albmina en

suero, que por su relativamente corto tiempo de vida y las
protenas del compartimiento somtico esqueltico la
evaluaremos mediante la relacin entre la excrecin de la
creatinina urinaria en 24 horas y la talla de la persona,as
mismo mediante el Peso y la Talla se evaluar la masa corporal
total.

Objetivos Especficos:
Aprender la importancia de la masa proteica visceral y
esqueltica, y reconocer en qu consiste en relacin a la
bioqumica.
Aplicar adecuadamente los reactivos que intervienen en la
prctica.
Realizar y verificar correctamente observaciones que acten en
nuestras muestras, as como dicho instrumento.

INTRODUCIN:
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares,
ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida.
Actan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo
la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin,
etc. La protena ms abundante en plasma es la albmina. Una de sus
funciones ms importantes es la de permitir el transporte de cidos
grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma
libre son insolubles en medio acuoso. La concentracin de albmina
en plasma influye notablemente en el mantenimiento de la presin
coloidosmtica, lo que estara relacionado con su relativamente bajo

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peso molecular y su gran carga neta. En condiciones patolgicas

como prdidas renales, desnutricin, infecciones prolongadas, etc.,
suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como
mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de
diversos orgenes, se observan hiperproteinemias. En general, ambas
situaciones se ven acompaadas tambin por hipoalbuminemias. Los
aumentos anormales de albmina son ocasionales y se relacionan
casi siempre con deshidratacin que produce el consecuente
aumento en el contenido proteico del plasma. El anlisis del nivel de
protenas en sangre es un anlisis que se realiza por separado o en
una peticin general de bioqumico en la sangre. Mide la cantidad de
protenas presentes en el suero. Las protenas son un constituyente
muy importante de las clulas y los tejidos del cuerpo humano. Se
componen de aminocidos. Hay diferentes tipos de protenas con
diferentes funciones, son as protenas los enzimas, algunas
hormonas, la hemoglobina, el LDL (transportadora de colesterol), el
fibringeno, el colgeno, las inmunoglobulinas, etc. Las protenas
totales del suero se pueden separar en dos grandes grupos la
Albmina y las globulinas. La albmina es la protena de ms
concentracin en la sangre. La albmina transporta muchas
molculas pequeas (bilirrubina, progesterona, y medicamentos), y
tiene tambin la funcin de mantener la presin sangunea ya que
favorece la presin osmtica coloidal para mantener lquidos en el
torrente sanguneo y que no pasen a los tejidos, manteniendo un
equilibrio

EVALUACION DE LA MASA PROTEICA

VICERAL Y ESQUELETICA:
Evaluar el estado nutricional de un individuo consiste en sntesis en el
conocimiento de en qu grado las demandas bioqumicas, fisiolgicas
y metablicas estn siendo cubiertas por la ingestin de nutrientes,
por lo que reflejar, si la ingestin, absorcin y utilizacin de los
mismos son adecuadas a las necesidades del organismo teniendo en
cuenta su biodisponibilidad, prdidas y las reservas. Es tal la
preocupacin que existe de unos aos a esta parte por el estado
nutricional de los individuos, como un indicador de salud, que
desencaden en la bsqueda de parmetros que siendo fciles de

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medir y de clculo simple, especficos, fiables, no invasivos y pocos

costosos, puedan utilizarse como indicadores nutricionales de forma
rutinaria en la prctica diaria. Es fcil entender que muy pocos
parmetros van a cumplir todas las condiciones anteriormente
expuestas, por ello es indispensable un profundo conocimiento de su
metodologa e interpretacin para que puedan ser utilizados de la
forma ms conveniente.

La
ms
de

manera
adecuada
abordar la
evaluacin
del
estudio del
estado nutricional es realizarlo en forma gradual, donde el primer
paso sera conocer si existe algn problema nutricional, para en caso
afirmativo proceder a una valoracin ms especfica, determinando
que compartimentos corporales pueden estar afectados. El primer
compartimento que debe ser evaluado es el compartimento graso, ya
que las grasas son las primeras reservas que el organismo va a

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utilizar para aprovisionarse de energa, y en un segundo nivel

recurrir a otros sustratos como las protenas, pudiendo establecerse
finalmente el diagnstico nutricional.
La primera etapa abordable de
estos estudios ser la evaluacin
del estado nutricional global, que
se basa en determinar mediante
medidas indirectas si las
necesidades del organismo estn
siendo cubiertas, pero como
comentamos anteriormente, no
identificaremos la parte del cuerpo
que puede encontrase afectada.
Para este tipo de evaluacin
recurriremos al anlisis de la dieta,
la determinacin del peso y a la
capacidad de la repuesta inmune
del organismo.

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MARCO TEORICO:
MTODOS DE DETERMINACIN DE PROTENAS
TOTALES
Los mtodos para medir la concentracin de protenas totales
(PT) pueden clasificarse en:

1. Fsicos:
Absorbancia del enlace peptdico a 190 nm: se basa en la propiedad
que tiene el enlace peptdico de absorber a esa longitud de onda.
Absorbancia de los aminocidos aromticos a 280 nm: su
principal limitacin es que no todas las protenas tienen la
misma proporcin de estos aminocidos, lo que le resta exactitud.
Refractometra: mtodo de eleccin, pero hoy en da en la prctica
clnica se est dejando de usar.

2. Qumicos:
Reaccin de Kjeldahl: considerado histricamente como el
mtodo referencia.
Mtodo de Lowry: se basa en la reduccin del reactivo de
Folin-Ciocalteau provocada por el complejo unin peptdicoCu2+ en medio alcalino con la participacin de restos
fenlicos (tirosilos).
Reaccin de Biuret: se fundamenta en la formacin de un
complejo, en medio alcalino, entre el Cu2+y los enlaces
peptdicos (absorcin a 540 nm). En la prctica clnica, es una
de las metodologas ms usada para el dosaje de PT.
Mtodos turbidimtricos (precipitacin con cido
tricloroactico-TCA o sulfosaliclico)
Mtodo de Bradford

En el Trabajo Prctico se determinar la concentracin de

protenas por el Mtodo de Bradford.

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Fundamento: es una tcnica sensible que consiste en la

medicin de la extincin provocada por el cambio en el espectro
visible de un colorante (Coomasie Blue G-250) cuando ste se une a
las protenas (absorbiendo asa 595 nm). Esta unin se realiza a
travs de grupos ionizados y se comprueba proporcionalidad con
la concentracin de protenas contenidas en la muestra.
La determinacin del contenido proteico de una muestra requiere la
comparacin del valor de absorbancia de la muestra con los
obtenidos a partir de cantidades conocidas de protenas, con los
que se construye una curva de calibracin: a mayor cantidad
de protenas, mayor color desarrollado y por lo tanto,mayor
absorbancia. Recordar que esta proporcionalidad es slo lineal hasta
un cierto lmite de concentracin.

La curva de calibracin
Se requiere contar con un solucin testigo de protena de
concentracin conocida (generalmente se utiliza albmina srica
bovina o inmunoglobulina G). Se preparan por lo menos 4 tubos
testigos con distintas cantidades de protenas (T1, T2, T3 y T4) y otro
tubo denominado blanco (en el cual el volumen de la solucin de
protenas se reemplaza por agua). En forma simultnea, se
procesan las muestras incgnitas. Luego se agrega la misma
cantidad del reactivo de Bradford a cada tubo (dado que en
definitiva se compara el color desarrollado evidenciado por la
absorbancia de la solucin en cada tubo, sus volmenes finales deben
ser iguales).

Protocolo ejemplo de determinacin de protenas

porel mtodo de Bradford:
Una vez preparados los tubos, se lee la absorbancia de cada
uno de ellos a la longitud de onda de 595 nm. La absorbancia
obtenida en el tubo blanco debe ser restada a cada uno de los tubos
restantes. Una opcin es calibrar el equipo con el tubo blanco: esto
consiste en asignar a la absorbancia del blanco, una lectura igual a
cero. De esta manera, automticamente esta lectura es restada
por el fotocolormetro a todas las muestras posteriormente ledas
en el equipo. Los resultados obtenidos se vuelcan en una tabla como
la que sigue.

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Con las absorbancias de los tubos testigos obtenidas en el

fotocolormetro, se construye el grfico de Absorbancia a 595 nm en
funcin de la cantidad de protena (mg).
En el ejemplo, los tubos conteniendo testigos 4 y 5muestran una desviacin
de la zona lineal de cumplimiento de la Ley de Lambert- Beer, motivo por el
cual no se consideran al trazar la recta promedio.
Para determinar la concentracin de protenas en la muestra (X), se
interpolan en la curva de calibracin las absorbancia/s correspondientes a
el/los tubo/s que contenan la muestra. As, sabiendo la cantidad de protena
(X) contenida en el volumen de muestra utilizado en la medicin, puede

calcularse la concentracin proteica.

Bases
de
muestra :

clnicas

Bandas principales del proteinograma:

1. Pre-albmina:

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o Valor normal: 0,3 g/100 ml, incluye a la transtiretrina.

o La visualizacin depende de que todas las condiciones tcnicas
sean las ptimas.
o Su disminucin es un marcador sensible del estado
nutricional reaccin inflamatoria.
o La presencia de esta banda no se informa.

2. Albmina:
o Valor normal: 3,5-5,0 g/100 ml.
o Es la protena ms pequea y con mayor nmero de
grupos cargados negativamente; esta caracterstica le permite
migrar con mayor rapidez.
o Constituye una banda homognea, puesto que se trata de una
nica protena, acta como trasportador activo de diferentes
compuestos tales como cidos grasos, pigmentos biliares,
hormonas esteroides, frmacos y otros.
o Es un reactante de fase aguda negativo, por lo que en estados
infecciosos agudos est disminuida.
o Estados asociados con hipoalbuminemia: estados de
malnutricin o malabsorcin, enfermedad heptica severa
(por fallas en su sntesis) o aumento de su catabolismo,
no se conoce un estado patolgico con hiperalbuminemia.

3. A1-globulina:
o Valor normal: 0,1-0,3 g/100 ml.
o Banda formada principalmente por: 1-antitripsina
(mayoritaria), glucoprotena cida 1 u orososeromucoide,
transcortina y globulina fijadora de tirosina.
o Un aumento o disminucin de esta banda se debe a un
aumento o disminucin de 1-antitripsina (predomina en la
fraccin 1) - 1-antitripsina:
o Cumple con el 90% de la accin antiprotesica del
organismo; es el inhibidor biolgico de las enzimas
proteolticas de los lisosomas). Es un reactante de fase aguda
positivo.
o Aumento de 1-antitripsina: estrs, reactante de fase aguda,
tumores;

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o Disminucin de 1-antitripsina: estados de

malnutricin/malabsorcin, enfermedad heptica severa, o
aumento de su catabolismo (procesos relacionados con la
disminucin de cualquier protena).
o Glucoprotena cida 1: inhibe o inactiva a la
progesterona, es un reactante de fase aguda positivo.
o Transcortina: transporta 2/3 del cortisol y otros
corticoides. El cortisol circulante se une tambin
(minoritariamente) a la albmina. La transcortina se
sintetiza en el hgado.
Protena fijadora de tiroxina: une T3 (triyodotironina) y T4
(tiroxina). Las hormonas tiroideas circulantes se unen tambin a la
prealbmina.
o Tanto la transcortina como la protena fijadora detirosina
aumentan en el embarazo y tras la administracin de
estrgenos.

4. A2-globulina:
o Es una fraccin heterognea, valor normal: 0,5-0,75 g/100 ml.
o Est integrada por: haptoglobina, 2-macroglobulina y
ceruloplasmina.
- haptoglobina:
o Su funcin es captar hemoglobina (Hb): La formacin del
complejo Hb-haptoglobina impide que la pequea cantidad de
Hb liberada por hemlisis normal intravascular sea excretada
por orina, evitando as el efecto txico de la Hb libre y la
prdida de Fe.
o Es un reactante de fase aguda positivo, (aumenta en estados
infecciosos agudos).
o Su disminucin se asocia a cualquier estado patolgico
que curse con hemlisis intravascular debido a un aumento
de su consumo (anemia hemoltica, etc). - 2-macroglobulina:
o Est aumentada fisiolgicamente en el embarazo y en
nios (dada su funcin relacionada con el desarrollo). ceruloplasmina:

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o Participa en el metabolismo del hierro y el Cu++, ya que una

molcula puede fijar hasta 8 tomos de Cu++, es un reactante
de fase aguda positivo, y aumenta en tumores y leucemias.
o La deficiencia congnita de ceruloplasmina desarrolla la
enfermedad de Wilson.

5. -globulinas:
o
o
o
o
o

o
o

Valor normal: 0,6-1,1 g/100 ml

1-globulina: incluye a la transferrina y la hemopexina.
2-globulina: incluye a C3 - transferrina:
Es una protena que fija Fe (cada molcula puede fijar 2 Fe).
Es un reactante de fase aguda negativo, pero adems siempre
que disminuya la albmina, disminuye 1 (excepto en el
embarazo) por disminucin de la transferrina.
En procesos con dficit de Fe (por estimulacin de la
sntesis de su protena transportadora) aumenta sus niveles,
al igual que en el embarazo; - Hemopexina:
Ffija y transporta al grupo hemo liberado de la Hb en la
hemlisis, cuando est saturada su capacidad de captacin
por la haptoglobina. - C3:
Participa del sistema del complemento.
Un reactante de fase aguda positivo y disminuye (adems
de las situaciones generales) y en enfermedades autoinmunes
(LES, AR).

6. -globulinas:
o Es una zona heterognea
o Si la muestra es plasma, aparece en esta regin
(post-2 o g-rpida) una banda homognea que
corresponde al fibringeno (0,3 g/100 ml), esto
constituye una interferencia y debe pedirse nueva
muestra (suero);
o Est constituido mayoritariamente por
inmunoglobulinas (sin embargo es importante
recordar en la bsqueda de algn componente

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monoclonal que stas protenas pueden migrar desde

2 hasta el punto de siembra), incluye:
o IgG: monmero de 160 kDa, se reconocen 4
subclases, es la mayoritaria, puede atravesar la
placenta y es la principal inmunoglobulina en la
respuesta inmune secundaria;
o IgA: se puede encontrar como monmero, dmero o
trmero, media la inmunidad de mucosas;
o IgM: es una inmunoglobulina pentamrica,
asimtrica, de PM hasta 1000 kDa, no atraviesa la
placenta y es la inmunoglobulina que media la
respuesta inmune primaria;

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Desarrollo experimental :
MATERIALES
Espectrofotmetro.
Tubos de ensayo
Pipetas.
Agua destilada.Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l
en NaOH 875 mmol/l y alquil aril politer (AAP).
o Reactivo BCF: solucin de Bromo Cresolsulfon Ftalena (en
polioxietiln lauril ter).
o Micropipetas.
o
o
o
o

MTODO
Se procede por administrar las determinadas cantidades sugeridas
para cada uno de los tubos de reactivo que son dos, continuacin se
aplicaran distintas cantidades que variaran de acuerdo a la indicacin
del cuadro representado, el cual se distingue debido a las
excepciones que se acentan dependiendo de las sustancias tanto en
suero como en orina. Se procede a mezclar cada sustancia aplicada
en los diferentes tubos, y, se lleva a bao mara a 37 C durante 11
minutos y 30 segundos y se leer ante el espectrofotomtro a 600 nm
colocando en la celda cada determinada muestra de cada uno de los
tubos en el caso del experimento A que consta de suero, a diferencia
del experimento B que trabajamos con orina el cual se incuba a
temperatura ambiente y durante 20 minutos.

Reconocer cada uno de los materiales a utilizar.

Seguir de manera rigurosa las cantidades establecidas por el

profesor en el cuadro de la pizarra, de lo contrario puede afectar a la
experiencia.

Los estudiantes se turnan ante todos los miembros de la mesa

para realizar ste procedimiento.

Con ayuda de la otra pipeta empezamos a utilizar cada una de

las soluciones aadindola de forma exacta para que cada uno de los
tubos que ocuparan las muestras.

Se lleva a cabo el proceso de determinar la diferencia ante el

reconocimiento de masa visceral y esqueltica en ambos
experimentos.

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Resultados :
Experimento A
DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES Y
ALBMINA EN SUERO

Fundamentos del mtodo:

Determinacin de Protenas Totales:
Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico,
en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con mximo de
absorcin a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la
concentracin de protenas totales en la muestra.
Determinacin de Albmina:
La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la
forma aninica de la Bromo Cresolsulfon Ftalena (BCF), en presencia
de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El
aumento de absorbancia a 625 nm respecto al blanco de reactivo, es
proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.

Procedimientos:
DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES
Blanco

Standard

Muestra

Reactivo

3ml

3ml

3ml

Agua destilada

30uL

Standard

30uL

Muestra

30uL

Mezclar por agitacin. Incubar por 11min y 30 s. Leer en espectrofotmetro a

546nm.

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Calculo

A muestra
n
A stardard

0.573
6=7.67
0.448

DETERMINACIN DE ALBMINA
Blanco

Standard

Muestra

Reactivo

3.1ml

3.1ml

3.1ml

Agua destilada

10uL

Standard

1.83uL

20uL

Muestra

20uL

Mezclar por agitacin. Incubar por 25 s. Leer en espectrofotmetro a 600nm.

Calculo

A muestra
n
A stardard

1.948
5=3.32
1.83

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Experimento B
DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA
Fundamentos del mtodo:
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado,
previa desproteinizacin con cido pcrico, obtenindose un
cromgeno que se mide a 510 nm.

Procedimiento:
DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA

Blanco

Standard

Muestra

Standard

0.5ml

Orina Diluida

0.5ml

Agua destilada

1ml

0.5ml

0.5ml

Reactivo 1

2ml

2mL

2ml

Reactivo2

0.5ml

0.5ml

0.5ml

Mezclar por agitacin. Incubar por 20 min. Leer en espectrofotmetro a 510nm.

Calculo

A muestra
n
A stardard

0.093
2=1068.96
0.174

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Resultados:
Las protenas totales se solicitan frecuentemente en una analtica
rutinaria. Proporcionan una informacin general sobre el estado
nutricional, por ejemplo si se ha sufrido una prdida de peso
injustificable recientemente. Tambin se solicita junto con otras
pruebas para proporcionar informacin si se presentan sntomas
sugestivos de alteracin heptica o renal, o si se sospecha la
existencia de un trastorno de la mdula sea o para investigar la
causa de una retencin anormal de lquido en los tejidos (edema).
Los resultados de las protenas totales se suelen interpretar junto con
los de otras pruebas y pueden porporcionar al mdico informacin
acerca del estado general del individuo en relacin a la nutricin y/o a
la existencia de trastornos que afecten a rganos vitales como el
hgado y el rin. Si los niveles de protenas totales estn alterados,
ser
necesario
realizar
otras
pruebas
para
alcanzar
el
diagnstico.Unos niveles bajos de protenas pueden sugerir una
enfermedad heptica, una enfermedad renal o un trastorno en el que
las protenas no se digieren o no se absorben adecuadamente a nivel
intestinal. Pueden observarse concentraciones disminuidas de
protenas en malnutricin severa y en trastornos que causan
malabsorcin, como enfermedad celaca o enfermedad inflamatoria
intestinal Pueden observarse niveles elevados de protenas totales en
procesos inflamatorios o infecciosos crnicos como hepatitis vricas o
infeccin por el VIH. Niveles elevados de protenas tambin pueden
asociarse a trastornos de la mdula sea como el mieloma mltiple

Cuestionario :
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1.- Con los datos obtenidos en los experimentos,

realizar la valoracin nutricional de dicha persona
sabiendo que es varn, pesa 60 Kg, su talla es 1,56
m y su volumen urinario en 24 horas fue de 1000 ml.
Hombre:
- Peso: 60 kg
- Talla: 1.56 m
- C x U: 1000 ml
Relacin C x U 24h/Talla
1000
=641.02
1.56
DESNUTRICIN

Relacin Peso/Talla
60
=38.46
1.56
NORMAL

Protenas totales
0.573
6=7.67
0.448
NORMAL

Albmina
1.948
5=5.32
1.83
NORMAL

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2.- Cmo hubiera sido la valoracin nutricional en el

caso que la persona hubiera sido mujer?
Mujer:
- Peso: 60 kg
- Talla: 1.56 m
- C x U: 1000 ml
Relacin C x U 24h/Talla
1000
=641.02
1.56
BAJO

Relacin Peso/Talla
60
=38.46
1.56
ELEVADO

Protenas totales
0.573
6=7.67
0.448
NORMAL

Albmina
1.948
5=5.32
1.83
NORMAL

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3.- Mencione las caractersticas generales de las

protenas y su clasificacin.
Las protenas deben su importancia biolgica al nmero de funciones
que desempean, entre las que podemos citar:
A. Catalticas; la prctica totalidad de las regiones biolgicas
estn catalizadas por enzimas especficas, de las que existen
unas 2.000 distintas en cada clula. Todas ellas son protenas.
B. Reguladoras; hormonas peptdicas como la insulina (que
regula el metabolismo de la glucosa), la hormona del
crecimiento o paratiroidea (que regula el metabolismo del calcio
y del fsforo).
C. Estructurales; forman parte de las membranas celulares, los
microtbulos, cilios, etc. Son parte importante de las uas, piel,
etc.
D. Transporte; como la hemoglobina que transporta oxgeno por
la sangre.
E. Acumulacin de sustancias; como la ovoalbmina de la clara
del huevo y la casena de la leche, que actan como protenas
de reserva.
F. Movimiento; la contraccin muscular se debe a la interaccin
de filamentos proteicos de actina y miosina.
G. Defensa inmunitaria; las inmunoglobulinas dan lugar a los
anticuerpos, que se forma como respuesta a la presencia de
sustancias extraas o antgenos, a los que aglutinan o
precipitan.
Las protenas pueden clasificarse en tres grupos, en funcin de su
forma y su solubilidad.

Protenas fibrosas: las protenas fibrosas tienen una

estructura alargada, formada por largos filamentos de
protenas, de forma cilndrica. No son solubles en agua. Un
ejemplo de protena fibrosa es el colgeno.
Protenas globulares: estas protenas tienen una naturaleza
ms o menos esfrica. Debido a su distribucin de aminocidos
(hidrfobo en su interior e hidrfilo en su exterior) que son muy

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solubles en las soluciones acuosas. La mioglobina es un claro

ejemplo de las protenas globulares. Estas se clasifican en:
Hlice alfa: esta estructura se desarrolla en forma de
espiral sobre s misma debido a los giros producidos
alrededor del carbono beta de cada aminocido. La
mioglobina es un claro ejemplo de protena de hlice alfa.
Hoja plegada beta: cuando la cadena principal se estira al
mximo, se adopta una configuracin conocida como
cadena beta. La tenascina es un ejemplo de las protenas
hoja plegada beta.
Alfa/beta: Las protenas que contienen una estructura
secundaria que alterna la hlice alfa y la hoja plegada beta.
Un ejemplo de protena alfa/beta es la triosa fosfato
isomerasa. Esta estructura es conocida como un barril TIM.
La helicoidal alterna y los segmentos de hoja plegada beta
forman una estructura de barril cerrado.
Alfa + Beta: En estas protenas, la hlice alfa y la hoja
plegada beta se producen en regiones independientes de la
molcula. La ribonucleasa A es un ejemplo de protena alfa
+ beta

Protenas de membrana: son protenas que se encuentran en

asociacin con las membranas lipdicas. Esas protenas de
membrana que estn embebidas en la bicapa lipdica, poseen
grandes aminocidos hidrfobos que interactan con el entorno
no polar de la bicapa interior. Las protenas de membrana no
son solubles en soluciones acuosas. Un ejemplo de protena de
membrana es la rodopsina. Debes tener en cuenta que la
rodopsina es una protena integral de membrana y se encuentra
incrustada en la bicapa. La membrana lipdica no se muestra en
la estructura presentada.

4.- Qu son las globulinas y cules son sus clases?

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Las globulinas son un grupo de protenas insolubles en agua que se

encuentran en todos los animales y vegetales.
Entre las globulinas ms importantes destacan las:

Seroglobulinas (de la sangre).

Las lactoglobulinas (de la leche).
Las ovoglobulinas (del huevo).
La legumina.
El fibringeno.
Los anticuerpos (gamma-globulinas).

5.- Describa los mtodos de dosaje tanto qumicos

como enzimticos para protenas totales, albmina,
globulina y creatinina.
Los mtodos para medir la concentracin de protenas totales (PT)
pueden clasificarse en:
1. Fsicos:

Absorbancia del enlace peptdico a 190 nm: se basa en la

propiedad que tiene el enlace peptdico de absorber a esa
longitud de onda.
Absorbancia de los aminocidos aromticos a 280 nm: su
principal limitacin es que no todas las protenas tienen la misma
proporcin de estos aminocidos, lo que le resta exactitud.
Refractometra: mtodo de eleccin, pero hoy en da en la
prctica clnica se est dejando de usar.

2. Qumicos:

Reaccin de Kjeldahl: considerado histricamente como el

mtodo referencia.
Mtodo de Lowry: se basa en la reduccin del reactivo de FolinCiocalteau provocada por el complejo unin peptdico-Cu2+ en
medio alcalino con la participacin de restos fenlicos (tirosilos).

BIOQUIMICA Y NUTRICION

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESINAL DE MEDICINA HUMANA

Reaccin de Biuret: se fundamenta en la formacin de un

complejo, en medio alcalino, entre el Cu2+ y los enlaces
peptdicos (absorcin a 540 nm). En la prctica clnica, es una de
las metodologas ms usada para el dosaje de PT.
Mtodos turbidimtricos (precipitacin con cido tricloroacticoTCA o sulfosaliclico)
Mtodo de Bradford

Mtodo de Biuret

Se basa en la formacin de un complejo coloreado entre el

Cu2+y los grupos NH de los enlaces peptdicos en medio bsico.
1Cu2+seacompleja con 4 NH. La intensidad de coloracin es
directamente proporcin a la cantidad de protenas (enlaces
peptdicos) y la reaccin es bastante especfica, de manera que
pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del mtodo es muy
baja y slo se recomienda para la cuantificacin de protenas en
preparados muy concentrados (por ejemplo en suero).

Mtodo de Bradford

Se basa en la unin de un colorante, Comassie Blue G-250

(tambin Serva Blue) a las protenas. El colorante, en solucin
cida, existe en dos formas una azul y otra naranja. Las
protenas se unen a la forma azul para formar un complejo
protena-colorante con un coeficiente de extincin mayor que el
colorante libre. Este mtodo es sensible (1-15 g), simple,
rpido, barato y pocas sustancias interfieren en su
determinacin. Entre las sustancias que interfieren estn los
detergentes y las soluciones bsicas.

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