Aplicacin de UV- Vis en un estndar de Cafena

Sustancia de referencia: cafena secar 80 C durante 4 hrs. La cafena es un polvo

cristalino que generalmente esta aglomerado. Es fcilmente soluble en cloroformo y poco
soluble en agua y etanol; ligeramente soluble en ter dietlico.
La cafena se encuentra de forma anhidra o con una molcula de agua de hidratacin.
Contiene no menos del 98.5 % y no ms 101.0 %
El espectro UV de una solucin en etanol exhibe un mximo a 273 nm aproximadamente.

CALCULOS

1. Calculo de concentracin de la solucin stock

194.19 g
4x10-3 g

1 mol X= 2.059x10-5 moles

Por lo tanto: M= # moles/volumen en L

M= 2.059x10-5 moles/ 0.025 L

M= 8.236x10 -4

2. Calculo de concentracin de cada absorbancia, usando el coeficiente de absortividad

(): 9220 M-1cm-1 a
273 nm, la longitud de paso ptico (b): 1 cm y la concentracin de
la solucin stock (c): 8.236x10-4.
Ley de Beer: A= bc, entonces c= A / b

3. calculo de los volmenes a tomar de la solucin stock, para cada una de las
absorbancias. Se usara la siguiente formula, aplicando los datos correspondientes:
V1= C2V2/ C1 C2= cada una de las indicadas en la tabla.

V2= 10 mL C1= 8.236x10-4

Absorbancia

Concentracin

Volmenes

0.50

5.423x10-5

0.75

8.135x10-5

0.988 mL 1.0 mL

1.00

1.084x10-4

1.310 mL 1.3 mL

1.25

1.355x10-4

1.640 mL 1.6 mL

1.50

1.627x10-4

1.970 mL 2.0 mL

0.658 mL 0.7 mL

PROCEDIMIENTO
1. Solucin stock: Pesar 4 mg de cafena y diluirla en metanol (= 9220 M -1cm-1 a 273
nm), despus aforar a 25 mL
2. Disolucin A: tomar 0.7 mL de la solucin stock y llevar al aforo en un matraz
volumtrico de 10 mL.
3. Para preparar las siguientes cuatro disoluciones se realizar el mismo
procedimiento del paso dos pero cambiando los volmenes de solucin Stock
tomados.
Disolucin
B
C
D
E

Volumen tomado
1 mL
1.3 mL
1.6 mL
2 mL

4. Realizar una lectura en el UV-Vis con un blanco, en este caso ser metanol.
5. Posteriormente a cada una de las disoluciones anteriores (A, B, C, D y E)
realizarles 3 lecturas de UV-Vis en una celda de 1 cm a 273 nm.
6. Realizar tres curvas de calibracin por cada disolucin y los clculos pertinentes.
7. Para determinar la precisin del sistema realizar 6 disoluciones, a partir de la
solucin Stock, similares a la disolucin C (concentracin intermedia) y se llevaran
a aforo en un matraz volumtrico de 10 mL, analizarlas en el espectrofotmetro y
realizar los clculos necesarios.
Referencias
Secretara de Salud. Comisin Permanente de la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Volumen I. 10 ed. Mxico:
Secretara de Salud, Comisin Permanente de la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos; 2011.