Apuntes de Bioreactores Ver 1-1-2014

Universidad de Santiago de Chile.
Facultad de Ingeniera.
Departamento Ingeniera Qumica
APUNTES DE CLASES:
DISEO DE B IOREACTORES
Version 1
Profesor: Csar Huiliir C.
Prologo
El siguiente apunte tiene por objetivo presentar de manera sencilla y aplicada los principios
fundamentales que rigen el diseo de bioreactores microbianos, y se basa principalmente en
tres textos: Archivos de Ingeniera Bioqumica: Fundamentos de Ingeniera Bioqumica,
de los autores Fernando Acevedo, Juan Carlos Gentina y Andrs Illanes; Bioprocess
Engineering Principles de Pauline Doran y Bioprocess Engineering de Michael L.
Shuler y Fikret Kargi.
La estructura de este apunte est enfocado principalmente en mostrar las bases y
posteriormente desarrollar varios ejemplos de aplicacin. A juicio del autor hay una serie
de excelentes textos que muestran los principios bsicos (como los arriba citados), pero
muchos de stos no contienen material didctico que permita a los alumnos que por primera
vez estudian esta materia a ejercitar los principios aprendidos. As, estos apuntes buscan
mejorar esa falencia y presentar no slo las bases tericas, sino tambin presentar ejercicios
resueltos y propuestos que permitan una mejor comprensin de los principios en que se
basa el diseo de un bioreactor microbiano. Cabe sealar que en este primer intento, slo se
muestra el diseo de reactores microbianos con biomasa suspendida, sin tomar en cuenta
reactores heterogneos (con biomasa adherida), reactores con plantas o reactores de clulas
animales.
Este apunto ser de utilidad para todos los alumnos de Ingeniera en Biotecnologa,
Ingeniera Civil Qumica e Ingeniera en Ejecucin Qumica del departamento de Ingeniera
Qumica de la Universidad de Santiago de Chile.
Captulo 1: Crecimiento Microbiano

Cuando se siembran microorganismos en un medio de cultivo apropiado, los mismos
comienzan a dividirse activamente empleando los nutrientes que le aporta el medio de
cultivo para "fabricar" nuevos microorganismos. Este proceso contina hasta que algn
nutriente del medio de cultivo se agota (sustrato limitante) y el crecimiento se detiene. No
todo el sustrato se usa para crecimiento, tambin se usa para la produccin de energa y
para la formacin de producto, si es el caso. Como resultado del uso de nutrientes, la masa
microbiana incrementa con el tiempo, pudiendo ser descrita como:
Sustrato + clulas productos extracelulares + ms celulas
(1.1)
S X P nX
El crecimiento microbiano es un buen ejemplo de una reaccin autocataltica, es decir, la
velocidad de crecimiento est directamente relacionada al crecimiento celular, siendo ste a
su vez el resultado de la reaccin.
1.- Cultivo discontinuo:
1.1.- Patrn de crecimiento microbiano.
Un sistema discontinuo se caracteriza por el no intercambio de materia con los alrededores,

excepto lo referente a los gases. En esta modalidad de cultivo, se cargan losnutrientes y
posteriormente se inocula con una determinada cantidad de biomasa viable, entre 5-10%
v/v.
Una curva tpica de crecimiento incluye las siguientes etapas: a.- Fase de latencia; b.- Fase
de crecimiento exponencial; c.- fase de crecimiento des-acelerado; d.- Fase estacionaria; e.Fase de muerte o decaimiento. La Figura 2.1 ilustra el ciclo.
d
e
Ln X
X (g SS/ml)
t
Figura 2.1: Curva de crecimiento tpico de una poblacin bacteriana.
a.- Fase de latencia: Etapa de adaptacin de los microorganismos al nuevo ambiente. La

idea a nivel industrial es disminuir lo ms posible esta etapa. Para lo anterior, se aplican las
siguientes acciones: Adaptacin de microorganismos al medio antes de la inoculacin; uso
de inculos con biomasa joven y activa; usar gran cantidad de inculo (5-10% v/v).
b.- fase de crecimiento exponencial o logartmica: En esta etapa, las clulas se reproducen a
la mxima velocidad posible de acuerdo a las condiciones ambientales existentes. Este es
un perodo de crecimiento balanceado, es decir, todos los componentes de una clula crecen
a una misma velocidad, suponiendo que la composicin promedio de una clula se
mantiene constante.
Durante la fase de crecimiento exponencial, la velocidad de crecimiento celular esta
descrita por la pendiente de la recta entre los puntos inicial y final de la zona b de la Fig. 1:
m
ln X
t
(1.2)
La ecuacin (1.2) se transforma en una derivada cuando t tiende a cero:

m
d ln X 1 dX
dt
X dt
(1.3)
La pendiente de esta recta se define como la velocidad especfica neta de crecimiento,

cuyo smbolo es :
1 dX
X dt
(1.4)
donde X es la concentracin de masa celular (g/l), t es el tiempo y es la velocidad de

crecimiento especfico (h-1 ).
As, la ecuacin que describe el cambio de concentracin de biomasa en la zona de

crecimiento exponencial est dada por:
dX
X
dt
(1.5)
Con la condicin inicial de X = X 0 , en t = t 0 . Integrando la ecuacin (1.5) entre t = 0 y t = t f,

se obtiene:
X
ln
tf
X0
X X0 e
t f
(1.6)
Frecuentemente se expresa la velocidad de crecimiento en trminos del tiempo de

duplicacin, t d , definido como el tiempo que media entre 2 duplicaciones sucesivas, es
decir, X = 2X 0 . As, la ecuacin (1.6) se expresa como:
td
ln 2
(1.7)
c.- Fase de crecimiento des-acelerado: El crecimiento desacelerado se debe al

decrecimiento de 1 o ms nutrientes escenciales o a la acumulacin de componentes
txicos. El rpido cambio ambiental resulta en un crecimiento desbalanceado, es decir, la
biomasa activa no necesariamente est relacionada con el crecimiento en la masa de la
misma.
d.- Fase estacionaria: En esta etapa se agota algn nutriente, razn por la cual se detiene el
crecimiento, es decir, 0 . En esta etapa se producen los metabolitos secundarios debido
a la desregulacin metablica. Durante la fase estacionaria, la clula cataboliza las reservas
celulares para crecimiento y energa. A este proceso se le llama metabolismo endgeno. El
gasto energtico para mantener la membrana energizada, para el transporte de nutrientes y
para funciones metablicas esenciales (movilidad, reparacin de daos estructurales) se le
llama energa de mantencin.
e.- Fase de muerte o decaimiento: Se presentan en aquellos cultivos en los que se inducen
enzimas autoltica (enzimas localizadas en las paredes celulares que provocan la
desintegracin de la clula) en condiciones de inanicin.
1.2.- Cintica de formacin de productos
Se considerar la produccin de compuestos de bajo peso molecular, como etanol, aminocidos, antibiticos y vitaminas que son excretados desde la clula. La clasificacin de los
productos se realiza de acuerdo a la relacin entre sntesis de productos y generacin de
energa en la clula. Esta clasificacin se conoce como Clasificacin de Gaden en honor al
cientfico que la propuso. As, se tiene que:
a.- Formacin de producto directamente acoplado a metabolismo energtico: Materiales
sintetizados en la cadena de reacciones que producen ATP. Se caracteriza por ser
proporcional a la velocidad de crecimiento especfica, . El esquema se muestra en la
Figura 2.2.
Figura 2.2: Esquema del proceso de formacin de producto asociado a crecimiento.
b.- Formacin de producto indirectamente asociado a metabolismo energtico: Productos

que requieren energa adicional para sntesis. Toma lugar durante la etapa de crecimiento
lento y la fase estacionaria. Por ejemplo, cido ctrico. La figura 2.3 muestra un esquema de
los perfiles en el tiempo.
Figura 2.3: Esquema del proceso de formacin de producto indirectamente asociado a

crecimiento.
c.- Formacin de producto no asociado a la formacin de producto: Toma lugar durante la

fase estacionaria, cuando = 0. La figura 2.4 muestra un esquema de los perfiles en el
tiempo.
Figura 2.4: Esquema del proceso de formacin de producto no asociado a crecimiento.
1.3.1.- Expresiones matemticas de formacin de productos
Independiente de la clase de producto, la formacin de producto puede ser definida en

funcin de la biomasa como:
rP q P X
(1.8)
Donde
rP = velocidad volumtrica de formacin de producto, kg P/m3 s
q P = velocidad especfica de formacin de producto, kg P kg-1 X s-1 .
Dependiendo de la forma en que se genera el producto (clasificacin de Gaden), la forma

matemtica de qP ir cambiando. De esta manera, se tiene que:
a.- Formacin de producto acoplado directamente a metabolismo energtico: En este caso,
qP es proporcional a la velocidad especfica de crecimiento, .
qP
rP
YP / X
X
(1.9)
As
rP YP/ X X
(1.10)
b.- Formacin de producto indirectamente asociado a metabolismo energtico: Incluye la

cantidad de producto asociado a mantencin a travs del parmetro mP (velocidad
especfica de formacin de producto debido a mantencin, s-1 ). Idealmente, la relacin es la
siguiente:
rP qP X YP/ X
dX
mP X
dt
(1.11)
Si
dX
X
dt
(1.12)
Reemplazando ecuacin (1.12) en ec. (1.11), se tiene:
rP YP/ X mP X
(1.13)
Donde
mP = velocidad especfica de formacin de producto debido a mantencin, s-1 .
La ecuacin (1.13) fue generalizada por el modelo de Luedeking y Piret (1959):

qP
(1.14)
La ecuacin (1.14) es la ms utilizada en la prctica, ajustando los valores de y a los

datos experimentales a travs de mtodos de ajuste no lineal.
c.- Formacin de producto no asociado a crecimiento: La formacin simplemente se

expresa a travs de una constante, la cual no depende del crecimiento microbiano:
qP
(1.15)
1.4.- Cintica de consumo de sustrato.
El consumo de sustrato puede expresarse matemticamente de diferentes formas,

dependiendo de si hay formacin de producto o no. Para entenderlo de manera sencilla, el
sustrato se puede dividir en 3 partes: Sustrato para crecimiento (Sc), sustrato para
mantencin (Sm) y sustrato para producto (Sp ). El sustrato destinado a mantencin vara
considerablemente, dependiendo del organismo o cultivo del que se trate.
1.4.1.- Consumo de sustrato en ausencia de formacin de producto.
En este caso, el sustrato se distribuye slo entre el crecimiento y mantencin. As, el

consumo de sustrato se puede expresar como:
Consumo de sustrato = Consumo por crecimiento
+ Consumo por mantencin
(1.16)
Matemticamente:
dX
dS dt
X mS X
dt
YX / S
(1.17)
dX
X
dt
(1.18)
Si
Finalmente
dS
X ms X
dt YX /S
(1.19)
donde ms es el coeficiente de mantencin y est en g sustrato g-1 biomasa s-1 . Este

coeficiente hace referencia a la cantidad de sustrato requerida para mantener las funciones
bsicas del microorganismo.
Se puede hacer notar que el consumo de sustrato vara de la velocidad de crecimiento como
de la concentracin celular.
1.4.2.- Consumo de sustrato con formacin de producto.
El flujo de sustrato en cultivos que forman producto depende de si la formacin est

asociada o no al crecimiento.
a.- Producto asociado a la generacin de energa (crecimiento microbiano): En este caso,
dado a que no hay un consumo especial o exclusivo para la formacin de producto, el
consumo de sustrato puede ser descrito por la ecuacin (1.19).
10
b.- Producto indirectamente asociado y no asociado a generacin de energa (crecimiento

microbiano): La velocidad de consumo de sustrato se asocia a tres factores: Sustrato para
crecimiento (Sc), sustrato para mantencin (Sm) y sustrato para producto (Sp ). As:
Consumo de sustrato = Sustrato asociado a crecimiento +

Sustrato asociado a formacin de producto +
Sustrato asociado a mantencin
En trminos matemticos:
dS
r
r
X P ms X
dt YX /S YP/ S
(1.20)
(1.21)
Luego
dS
X P X ms X
dt YX /S
YP / S
(1.22)
donde qP es la velocidad especfica de formacin de producto, g P g-1 X s-1

En resumen, la formacin de biomasa, la formacin de producto y el consumo de sustrato
en un bioreactor discontinuo se pueden expresar de diferentes maneras, dependiendo del
tipo de proceso. As:
Sin formacin de producto:

Biomasa:
dX
X
dt
(1.23)
Sustrato:
dS
X ms X
dt YX /S
(1.24)
Con formacin de producto

o Asociado a crecimiento
Biomasa:
dX
X
dt
(1.25)
Sustrato:
11
dS
X ms X
dt YX /S
(1.26)
Producto:
dP
YP / X X
dt
(1.27)
o Indirectamente asociada a crecimiento:

Biomasa
dX
X
dt
(1.28)
Sustrato:
dS
X P X ms X
dt YX /S
YP / S
(1.29)
dP
qP X
dt
(1.30)
Producto:
En la ecuacin (1.30), y se deben determinar experimentalmente.
o Producto no asociado a crecimiento:

Biomasa
dX
X
dt
(1.31)
Sustrato
dS
X P X ms X
dt YX /S
YP / S
(1.32)
Producto
dP
X
dt
(1.33)
1.4.- Concepto de rendimiento celular aparente u observado.
12
1.4.1.- Coeficiente de rendimiento celular observado
En el captulo 1 se mostr el concepto de factor de rendimiento terico, el cual defina el

valor mximo de biomasa que se puede obtener del sustrato si no hay consumo de sustrato
para mantencin y/o formacin de producto. Sin embargo, lo anterior es ideal y
generalmente la formacin de biomasa real no coincide con el valor obtenido
experimentalmente.
Al final del perodo de crecimiento batch, se puede calcular la cantidad de biomasa
producida por el consumo de un sustrato. Si la masa total de sustrato consumida es ST, una
parte (SC ) ser usada exclusivamente para crecimiento, mientras el resto (Sm y SP) ser
canalizado a otros productos o actividades metablicas no relacionadas al crecimiento,
como la mantencin o la formacin de producto. Por lo tanto:
Y X' / S
X
X
ST
S C Sm S P
(1.34)
El trmino YX' / S es el llamado coeficiente de rendimiento celular observado. As, para un

reactor discontinuo, se puede indicar que:
dS
X ms X P X
dt YX /S
YX/S
(1.35)
En la ecuacin (1.35) el primer trmino de la derecha representa el sustrato consumido para

crecimiento, el segundo trmino de la derecha representa el consumo de sustrato para
mantencin mientras que el tercer trmino de la derecha representa el consumo de sustrato
para la generacin de producto. Reescribiendo la ecuacin anterior, se tiene que:
dX
dS
q
dt ms X P X
dt YX /S
YX / S
(1.36)
Dividiendo la ecuacin (1.36) por dX/dt:

dS
dt 1 m X qP X
s
dX
dX YP/ S dX
YX / S
dt
dt
dt
(1.37)
La ecuacin (1.37) se puede reescribir utilizando la definicin de coeficiente de

rendimiento celular observado y la definicin de velocidad especfica de crecimiento:
13
1
Y
'
X/S
1
YX/S
ms
qP
YP / S
(1.38)
La ecuacin (1.38) es vlida para todo sistema. Cabe hacer notar que YX' / S YX / S .
1.3.2.- Coeficiente de rendimiento observado de formacin de producto.
En el caso de formacin de producto indirectamente asociado a producto, se tiene que:
rP
dP
dX
YP / X
dt
dt
Dividiendo la ecuacin por el trmino
dX
dt
mP X
(1.39)
asoc. crec.
:
asoc. crec.
dX dP
YP / X m P X
dt dt
dX
dt
(1.40)
Dado que:
1 dX
X dt
(1.41)
crec
dP dX
'
YP / X
dt dt
(1.42)
As, reemplazando ec. (1.41) y (1.42) en ec. (1.40), se tiene:
YP' / X YP / X
mP
(1.43)
Cabe hacer notar que YP' / X YP / X .
1.5.- Efecto de las condiciones de cultivo en la cintica microbiana.
1.5.1.- Efecto de la concentracin de sustrato.
Durante la fase de crecimiento y declinacin de un cultivo discontinuo, depende de la

concentracin de nutrientes en el medio. Frecuentemente, un nutriente ejerce una influencia
14
dominante en . Este componente es el sustrato limitante. Frecuentemente es el carbono,

nitrgeno, oxgeno (si es un cultivo aerbico) o NO 3 - (si es un cultivo anxico).
La relacin entre y la concentracin de sustrato, S, frecuentemente supone una cintica de
saturacin, llamada ecuacin de Monod (equivalente a la ec. de Langmuir-Hinshelwood en
cintica qumica o Michaelis-Menten en cintica enzimtica). As:
max
S
KS S
(1.44)
La ecuacin de Monod es una ecuacin semi-emprica, que se basa en la suposicin de que

una enzima (descrita por la cintica de Michaelis-Menten) es responsable del consumo de
sustrato. En la ecuacin (1.44), KS es la constante de saturacin, cuyo valor representa la
concentracin donde la velocidad especfica de crecimiento () es la mitad de la velocidad
mxima especfica de crecimiento (max ). El comportamiento tpico de la velocidad
especfica de crecimiento se muestra en la Figura 2.5.
Figura 2.5: Variacin de en funcin del sustrato limitante S.
Existen otras ecuaciones que describan la fase de crecimiento bajo limitacin por sustrato?
S, existen varias:
- Ecuacin de Blackman:
g max Si S 2 K S
(1.45)
15
max
2 KS
Si S < 2 K S
(1.46)
- Ecuacin de Tessier:
g max 1 e K
(1.47)
- Ecuacin de Moser:
g max
Sn
n
KS S
(1.48)
Como se aprecia en la ecuacin (1.48), si el valor de n = 1, entonces tenemos la ecuacin de

Monod. As, la ecuacin de Moser es una generalizacin de la ecuacin de Monod.
- Ecuacin de Contois:
g max
KSX
S
X S
(1.49)
La ecuacin de Contois tiene una constante de saturacin proporcional a la concentracin

de biomasa. As, a medida que aumenta la concentracin de biomasa, disminuye la
velocidad especfica de crecimiento. Esta ecuacin es muy til para altas concentraciones
de biomasa.
1.5.3.1.- Modelo con inhibidores de crecimiento.
Dado que en la naturaleza existen un sinnmero de compuestos que pueden ser inhibidores,
es necesario tener formas de expresar estas inhibiciones para incluirlas en los anlisis de los
bioreactores. En qu situaciones hay inhibicin? Cuando hay altas concentraciones de
sustrato o por la existencia de inhibidores. Las formas matemticas de la inhibicin son
anlogas a la inhibicin enzimtica. Frecuentemente, el mecanismo de inhibicin es
complicado y las constantes cinticas no tienen significado biolgico. As, las constantes se
calculan ajustndose a los datos experimentales.
a.- Inhibicin por sustrato:
- Cintica no competitiva
max
S
KS
1
1
S KI
(1.50)
16
Cuando KI >> KS, entonces
g max
S
S2
KS S
KI
(1.51)
La ecuacin (1.51) es la ecuacin de Andrew o Haldane, la cual es muy usada en procesos

biolgicos.
Cmo se evita este tipo de inhbicin? A travs de la adicin de S lenta e
intermitentemente.
b.- Inhibicin por compuestos txicos: Cinticas similares a ecuaciones anteriores. La ms
usada es la cintica no-competitiva. Tambin en este caso aparece la inhibicin acompetitiva:
max S
S KS
1
KI
1 I
K I

(1.52)
c.- Inhibicin por producto: Altas concentraciones de producto pueden inhibir el

crecimiento microbiano. La inhibicin por producto puede ser competitiva como no
competitiva.
- Competitiva:
max S
P
KS 1
S
KP
(1.53)
- No-competitiva: ecuacin ms usada. Por ejemplo, la produccin de etanol por

fermentacin de glucosa por levaduras.
max
KS
1
S
P

1
KP

(1.54)
Cuando el mecanismo no es conocido, la inhibicin puede ser aproximada a expresiones

exponenciales o lineales.
1.5.1.- Efecto de la Tempe ratura.

17
En general, la temperatura tiene 2 efectos: un efecto de activacin y el otro de inactivacin.

La divisin entre cada zona la entrega la temperatura ptima. Si la temperatura aumenta, la
velocidad se dobla por cada 10 C. Sin embargo, al aumentar la temperatura por sobre la
temperatura ptima, se produce una muerte celular. El efecto de activacin de la reaccin
puede ser modelada por una expresin de tipo Arrhenius:
A e
Ea
RT
(1.55)
donde
Ea = energa de activacin para crecimiento, que cae entre 10 a 20 kcal/mol
Cabe hacer notar que la ubicacin de la temperatura ptima determina tambin la

clasificacin de los microorganismos en psicrfilos (0 15 C), mesfilos (20 40 C) y
termfilos (45C o ms).
1.5.2.- Efecto del pH.
El pH afecta la actividad enzimtica, y por lo tanto, el crecimiento del microorganismos. El

rango aceptable de pH vara 1 o 2 unidades de pH del ptimo. Generalmente, el efecto del
pH se puede modelar por la ecuacin de Michaelis, aunque no hay modelos definitivos.
Como regla general, el pH ptimo para bacterias est ubicado en el rango de 6 a 7,5, el de
levaduras est entre 3,5 y 5,5 mientras que el de mohos se extiende entre 3 y 7, aunque
existen variadas excepciones a ella.
1.5.4.- Efecto del oxgeno disuelto.
El oxgeno disuelto no es un sustrato comn, puesto que ste debe ser ingresado desde una
fase gaseosa. De esta manera, siempre que incluyamos el oxgeno como un sustrato
importante en nuestro sistema, debemos incluir un trmino de entrada del O2 debido a
transferencia de masa desde la fase gas a la fase lquida. As, para un sistema discontinuo se
tiene que:
18
Velocidad de
Acc consumo
de oxgeno
Velocidad de

transferencia
de oxgeno

gas-lquido
(1.56)
La velocidad de transferencia de O2 (oxygen transfer rate) desde la fase gas a la fase lquida
est dada por:
OTR k L a S O*2 S O2 , L
(1.57)
Donde:
SO*2 = concentracin de O2 saturado.

SO2 , L = concentracin de O2 en el seno del fluido.
La velocidad de consumo de oxgeno (oxygen uptake rate, OUR) se calcula como:
OUR qO2 X
g
YX / O2
(1.58)
Donde
qO2 = velocidad especfica de consumo de O2 , mg O2 / g celula seca h
YX / O2 = rendimiento de biomasa sobre O2 , g clula seca/g O2.
As, el balance de oxgeno en un reactor discontinuo queda expresado como:
dSO2
(1.59)
X k L a SO*2 SO2 , L
dt
YX / O2
El efecto del oxgeno puede ser descrito como una cintica de tipo saturacin, al igual que
muchos otros sustratos. Si el O2 es bajo, puede llegar a ser un factor limitante. Por el
contrario, si el O2 es alto, ste no es un factor limitante y puede ser representado como una
cintica de orden cero o primer orden. Sin embargo, en la mayora de los casos, tanto el
oxgeno (aceptor de electrones) como algn dador de electrones (generalmente algn
compuesto orgnico) son sustratos limitantes, por lo que la velocidad especfica de
crecimiento se ve afectado por ambos sustratos. En este caso, se usa una cintica de Monod
de mltiples sustratos:
S1
SO2
K S S1 K S SO
1
O2
2
max
(1.60)
19
La concentracin crtica de O2 (en la cual = max /2) est entre el 5 a 10% de la

concentracin de saturacin de O2 en lquido, para bacterias y levaduras. La concentracin
de saturacin de O2 en agua a 25 C y 1 atm es de 7 mg/L.
Qu pasa si slo el O2 es el sustrato limitante? La velocidad de consumo de O2 es igual a
la velocidad de transferencia de O2 . As, tomando la ecuacin (1.59) e igualndola a cero:
g X
YX /O2
kL a SO* 2 SO2 , L
dX
YX /O2 k L a SO*2 SO2 , L
dt
(1.61)
(1.62)
As, es posible obtener la variacin de la concentracin de biomasa en el tiempo slo en

funcin de la concentracin de O2 en el medio.
Ejercicios de aplicacin
1.- Escherichia coli se est usando para la produccin de una hormona de crecimiento
porcina. La bacteria se hace crecer aerbicamente en un cultivo discontinuo con glucosa
como fuente limitante de sustrato. Tanto la biomasa como el sustrato se miden en el tiempo.
Los resultados se muestran a continuacin:
Tabla 1: Variacin de X y S en funcin del tiempo:

tiempo (h) X (kg/m3 )
0
0,2
0,33
0,21
0,5
0,22
0,75
0,32
1
0,47
1,5
1
2
2,1
2,5
4,42
2,8
6,9
3
9,4
3,1
10,9
3,2
11,6
S (kg/m3 )
25
24,8
24,8
24,6
24,3
23,3
20,7
15,7
10,2
5,2
1,65
0,2
20
3,5
3,7
11,7
11,6
0
0
Se pide calcular el valor de e YX' / S . Analizar los resultados graficando la biomasa

calculada con la biomasa medida experimentalmente. Qu sucede con el consumo de
sustrato?Se podra predecir?
Resolucin
Como primer paso, calculamos el valor de , usando la ecuacin (1.6):
X
ln
t
X0
(1.63)
Luego, graficando ln(X/X0 ) v/s t (Figura 2.6) se puede observar que existe una etapa lag (0
< t < 0,5) y otra de no crecimiento o estancamiento (t > 3,5 h). La zona donde es posible
calcular es slo la zona lineal, es decir, cuando 0,5 < t < 3. Al calcular la pendiente de la
zona lineal, se obtiene = 1,5 h-1 .
El clculo de YX' / S resulta sencillo, aplicando la ecuacin (1.34):

YX' / S
X
(11,60 0, 2)
0, 456 g X g -1S
(0 25)
ST
(1.64)
Finalmente, se hace el anlisis para el consumo de sustrato. Dado que en este caso no hay
formacin de producto y suponiendo que mS = 0 y que = max , se tiene que:
dS max
X
dt YX / S
(1.65)
21
ln(X/X0)
4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
0
0,5
1,5
2,5
3,5
tiempo, h
Figura 2.6: Grfico de ln(X/X0 ) vs tiempo.
Integrando la ecuacin (1.65):

S S0
X0
e max t 1
YX / S
(1.66)
Finalmente:
S S0
X0
e max t 1
YX / S
(1.67)
Al aplicar la ecuacin (1.67) y comparar los resultados obtenidos con los resultados
experimentales, se observa que esta ecuacin puede predecir el comportamiento slo desde
la zona posterior a la fase lag del sistema (desde t = 0,33 h), pero con errores involucrados,
los cuales no son superiores al 5% dadas las suposiciones y simplificaciones realizadas. La
comparacin se muestra en la Figura 7. En esta figura, YX /S YX' / S = 0,456 g X g-1 S.
22
Figura 7: Comparacin de S medido y S calculado por ecuacin (1.67).
2.- Se desea producir un cierto metabolito extracelular por cultivo por lotes de una bacteria
aerbica en un medio con sacarosa como nica fuente de carbono y energa. La produccin
del metabolito sigue una cintica de Luedeking y Piret:
dP
dX
X
dt
dt
Donde = 0,27 (g producto/g clula), = 0,31 (g producto/g clula h)

La clula posee un m = 0,44 (h-1 ) y un rendimiento global de sustrato ( YX' / S ) en clulas de
0,28. Adems, X0 = 0,15 g/L y P0 = 0,08 g/L. El rendimiento mximo de producto (YP/S) es
0,65. Considere una fase de latencia despreciable y un contenido celular de C del 47%.
a) Determine el valor del coeficiente de mantencin
b) Concentracin celular y el consumo de sacarosa despus de 10 horas de cultivo
c) Concentracin de producto despus de 10 horas de fermentacin
d) Porcentaje de la fuente de carbono destinado a crecimiento, mantencin y produccin
Resolucin
23
a) Se sabe que el proceso es la formacin de producto que est indirectamente

asociado a crecimiento. As, los balances en un reactor discontinuo sern:
Biomasa:
dX
X
dt
(1.68)
dP
dX

X X X
dt
dt
(1.69)
Producto:
As, combinando (1.68) y (1.69):

dP
X
dt
(1.70)
El consumo de sustrato para un sistema donde la formacin de producto est indirectamente

asociado al crecimiento est dada por:
dS
X P X mS X
dt YX / S
YP / S
(1.71)
Realizando un anlisis similar al realizado para obtener la ecuacin (1.38), se tiene que:
1
'
X /S
1
YX / S
qP
m
S
YP / S
(1.72)
En la ecuacin (1.72), son conocidos los valores de YX' / S , YP/ S y q P . El valor de YX / S debe
ser determinado. Cmo se determina? Usando una metodologa presentada por Acevedo et
al. (1995), quienes indican que YX / S puede ser aproximado por la siguiente ecuacin:
YX / S f X
% elemento C en nutriente
% elemento C en biomasa
(1.73)
Los valores de f X varan entre 0,5 y 0,6 para cultivos aerbicos, mientras que para cultivos
anaerbicos f X = 0,1. En nuestro caso tenemos sacarosa, C12 H22 O11 .
% sacarosa = 12x12/(22 + 12x12 + 16x11) x 100 = 42,1.
% biomasa = 47
f X = 0,6
As:
YX / S
42,1
0, 6 0,54 g X g -1S
47
(1.74)
24
Para calcular el valor de qP, se requiere el valor de . En este caso, se supone que = max .
As:
q P max 0,27
gP
gP
gP
0, 44 h -1 + 0,31
0, 4288
gX
gXh
gXh
(1.75)
Despejando mS desde ecuacin (1.72):
1
1
qP
mS '

YX /S YX / S YP/ S
mS
mS
'
X /S
YX / S
(1.76)
qP
YP /S
(1.77)
0, 44 0, 44 0, 4288
gS
0,097
0, 28 0, 54
0, 65
g Xh
(1.78)
b) El clculo de la biomasa se hace con la ecuacin (1.6):

X X 0 e max t 0,15
g 0, 4410
e
12, 22 g/L
L
(1.79)
Para estimar el consumo de sustrato, debemos integrar la ecuacin (1.35):

dS
X ms X P X
dt YX / S
YX / S
(1.80)
dS
X 0 e max t ms X 0 e max t P X 0 e m ax t
dt YX / S
YX / S
(1.81)
Luego:
S

X t e max t dt
dS
X 0 ms X 0
0
YX / S
YX / S
0
S0
(1.82)
m X max
S0 S 0 s 0
X 0 e max t 1
max
YX /S max
YX / S
(1.83)
Reemplazando datos:
S0 S 46.66 g S/L
(1.84)
Otra forma ms sencilla para realizar este clculo es utilizando el concepto de YX' / S :
S
X
Y
'
X/S
12,22
43, 63 g S/L
0,28
(1.85)
c) La concentracin de producto debe ser determinada integrando la ecuacin (1.69):
25
dP
max X X
dt
(1.86)
Luego
10
10
P P0 max X dt X dt
0
(1.87)
Reemplazando (1.6) en (1.87):

10
10
P P0 max X 0 e max t dt e max t dt

0
(1.88)
P P0 X 0 e max t 1
X0
max
e max t 1
(1.89)
Reemplazando valores en ecuacin (1.89), se obtiene

P 11,84 g P/L
(1.90)
d) Los porcentajes se pueden calcular de la siguiente manera:

Sustrato dedicado a crecimiento:
Sustrato dedicado a mantencin:
1
YX / S
mS
max
1,852
0, 22
Sustrato dedicado a formacin de producto:
El consumo de sustrato total fue:
1
'
X /S
gS
gX
gS
gX
qP
gS
1, 499
YP / S g
gX
3, 57
gS
gX
As, los porcentajes son:

1
% crecimiento:
YX / S
100 51,86%
1
YX' / S
% mantencin: 6,6 %
% producto: 41,97 %
2.- Crecimiento celular en cultivos continuos.
26
Para el estudio de cultivos continuos, generalmente se usan 2 sistemas: el Turbidostato y el

Quimiostato. El turbidostato se basa en mantener la concentracin celular constante, a
travs del monitoreo de la densidad ptica del cultivo y el manejo de la velocidad de flujo.
El quimiostato se basa en mantener constante su medio qumico, controlando la
composicin de la alimentacin y su velocidad de flujo. Debido a que este ltimo sistema
es el ms usado, el presente apunte trabajar este sistema.
2.1.- Quimiostato ideal.
Las suposiciones en las cuales se basa el siguiente desarrollo son:

a. Fase lquida completamente mezclada y homognea
b. Volumen de reactor constante
c. X es la masa celular total (medida como masa seca), NO el nmero de clulas.
d. Concentracin de biomasa en la alimentacin (X0 ), el flujo de entrada (Q) y el
coeficiente de rendimiento ( YX / S ) constante.
e. El sustrato usado para mantencin es despreciable, por lo tanto, mS = 0.
El esquema del quimiostato se muestra en la Figura 8.
27
Figura 8: Esquema de un quimiostato ideal.
A continuacin se presentan los balances de masa del sustrato limitante, de la biomasa y de

producto, suponiendo producto directamente asociado a crecimiento.
Biomasa
V
dX
Q X 0 Q X V X
dt
(1.91)
En la ecuacin (1.91), V es el volumen de lquido en el reactor. Luego

dX Q
X0 X X
dt V
(1.92)
Definiendo la velocidad o tasa de dilucin:

D
F
1
V TRH
(1.93)
Suponiendo que la alimentacin no contiene microroganismos.

dX
D X X
dt
(1.94)
(1.95)
En estado estacionario:
28
Balance de sustrato limitante

V
dS
1
Q S0 Q S V X
dt
YX / S
(1.96)
Luego
dS
X
D S 0 S
dt
YX / S
(1.97)
En estado estacionario
D S0 S
YX / S
(1.98)
Despejando X de ecuacin (1.98), se tiene:
X YX / S S 0 S
(1.99)
Balance de producto
V
dP
Q P0 Q P V qP X
dt
(1.100)
dP
D P0 P q P X
dt
(1.101)
Luego
En estado estacionario y suponiendo que la alimentacin tiene una concentracin de

producto despreciable, se tiene
D P qP X
(1.102)
Finalmente, el valor de S, P y X es el siguiente, indicando que:
max
S
KS S
(1.103)
As:
S
D KS
max D
D KS
X YX / S S 0
max D
qP X
D
(1.104)
(1.105)
(1.106)
29
Las ecuaciones anteriores fueron desarrolladas suponiendo que la cantidad de sustrato

usado para mantencin es despreciable, pero, Qu pasa si ste es importante?
Considerando el efecto de la mantencin, el balance de sustrato en el bioreactor queda:
dS
Q S0 Q S V
mS X
dt
YX / S
(1.107)
Luego, en estado estacionario:

D S 0 S D mS YX / S
X
YX / S
(1.108)
Luego
D
S0 S
X
1
YX / S
D mS X 0
(1.109)
De acuerdo a lo visto anteriormente, los valores de S0 , S y X se relacionan con el coeficiente

de rendimiento observado, YX' / S :
YX' / S
Xf
X
ST S 0 S
(1.110)
S0 S
X
(1.111)
As
1
'
X /S
Reemplazando la ec. (1.111) en la ec. (1.109):

D D mS YX / S
0
'
YX / S
YX / S
1
YX / S
mS
1
'
D YX / S
(1.112)
(1.113)
Los valores de YX / S y mS pueden calcularse graficando 1/ YX' / S v/s 1/ D . Lo anterior se

muestra en la Figura 9.
30
Figura 9: Clculo de YX/S a travs de datos experimentales en un quimiostato.
Consideremos ahora que la formacin de producto est indirectamente o no asociada al

crecimiento y que mS > 0. As:
-
Balance Biomasa en estado estacionario
D
-
(1.114)
Balance de sustrato en estado estacionario
D
q
D S0 S
mS P X
YP / S
YX / S
(1.115)
En la ecuacin (1.115), qP puede ser cualquiera de las funciones vistas anteriormente.

-
Balance de producto en estado estacionario
D P P0 qP X
(1.116)
D P qP X
(1.117)
Haciendo P0 = 0, entonces:
As, suponiendo que obedece a una cintica tipo monod:

S
KS D
max D
D S0 S
1
YX / S
q
D mS YX /S P
YP /S
(1.118)
(1.119)
31
Ahora, volvamos a considerar las ecuaciones (1.104) y (1.105), adems del factor
D X X . Al graficar X y DX en funcin de D, se obtiene una grfica como la de la
Figura 10. All aparece un punto llamado Dcrit , a partir del cual la biomasa en el sistema se
hace cero, o se lava. Es en este punto donde se indica que el quimiostato se lava. El Dcrit
para un cultivo sin formacin de producto y mS = 0 es:
Dcrit max
S0
K S S0
(1.120)
450
60
50
40
250
200
150
30
100
50
0
20
DX
10
DX
400
350
300
0
0
0,05
0,1
0,15
0,2
Figura 10: Variacin de X y DX en funcin del factor de dilucin D. YX/S = 0,5; K S = 50

mg/L; max = 0,2 h-1 ; S0 = 800 mg/L.
Cul ser el D ptimo, donde se maximiza la concentracin de biomasa?

Se obtiene derivando D X con respecto a D e igualando a cero:
D X g X max
S
X
KS S
(1.121)
Adems
S
D KS
max D
X YX / S S 0 S
(1.122)
(1.123)
Reemplazando las ecuaciones (1.122) y (1.123) en (1.121) y derivando, se obtiene:
32

KS
Dop max 1
K S S0
(1.124)
La ecuacin (1.124)es vlida slo para el caso en que mS = 0, aunque de todas maneras
puede ser usada como primera aproximacin en caso de no conocer los valores de mS y qP.
Ejercicio de aplicacin
1.- 2.- Una nueva cepa de levadura esta siendo considerada para la produccin de biomasa.
Los siguientes datos fueron obtenidos usando un quimiostato. Una concentracin de entrada
de 800 mg/L y un exceso de oxgeno fue usado a pH = 8,5 y T = 35 C. Usando los
siguientes datos, calcule
max , K S , YX / S y ms . Determine adems la productividad
volumtrica de biomasa, el Dcrit y el D ptimo para el crecimiento de la cepa.

Tabla de resultados experimentales:
D, (h-1 )
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
S (mg/L)
16,7
33,5
59,4
101
169
298
702
X (mg/L)
366
407
408
404
371
299
59
Resolucin
Para determinar los parmetros cinticos, debemos calcular primero mS e YX / S . De acuerdo
a la ecuacin (1.113), mS puede calcularse de un grfico 1/ YX' / S v/s 1/ D . Usando la
ecuacin (1.110), se calcula YX' / S para todos los valores de D. Los resultados se muestran
en la Tabla 2.
Tabla 2: Valores de YX' / S en funcin de D.
X
366
407
408
404
371
S0 -S
783,3
766,5
740,6
699
631
YX' / S
0,467
0,531
0,551
0,578
0,588
33
299
59
502
98
0,596
0,602
Una vez calculados los valores de YX' / S , construimos la grfica 1/ YX' / S v/s 1/ D , como se
muestra en la Figura 11.
2,5
1/Yap
1,5
puntos experimentales
Linealizacin
1
y = 0,0555x + 1,5958
2
R = 0,9899
0,5
0
0
10
12
1/D
Figura 11: Grfico 1/ YX' / S v/s 1/ D para los datos del problema.
De la ecuacin de la recta obtenida de la Figura 11, se pueden obtener los parmetros k d , mS
e YX / S . As:
Pendiente de la recta = mS = 0,055 g S/ g X h
Intersecto en el eje Y cuando X = 0:
1/ YX / S = 1,5958. Por lo tanto, YX / S = 0,627 g X/ g S.
El clculo de max y K S se realiza usando la relacin (1.114), suponiendo que obedece a
una cintica tipo Monod.
S
D max
(1.125)
KS S
La ecuacin (1.125) se linealiza usando la tcnica de Lineweaber Burk (o de los
recprocos). As:
1
1
K 1
S
(1.126)
D max max S
Al graficar 1/ D v/s 1/ S , se puede obtener max y KS. El grfico se muestra en la Figura 12.
34
Figura 12: Linealizacin de ecuacin (1.125) para el clculo de parmetros cinticos.

Con los datos obtenidos de la grfica:
Intersecto en el eje Y cuando X = 0:
1/ max = 1,0637. Por lo tanto, max = 0,94 h-1 .
Pendiente de la recta = K S / max = 145,34. Por lo tanto, KS = 136,64 mg/L.
Una vez calculados todos los parmetros cinticos, se calcula el Dopt, el Dcrit y finalmente la
productividad volumtrica mxima.
Para el ptimo:
KS
-1
Dopt max 1
0,58 h
K S S0
Para el crtico:
S0
Dcrit max
0,80 h -1
K S S0
El valor de Dcrit fue calculado sin incluir mS , an as, es vlido para realizar el anlisis.
Finalmente, la productividad ptima:
(1.127)
Q X Dopt X opt
Sin considerar efectos de mantencin, se calcula Sopt y Xopt :
Dopt KS
Sopt
220,14 mg/L
max Dopt
X opt S0 Sopt YX / S 363,57 mg/L
As:
QX 210, 87 mg X/L h
4.- Eje rcicios propuestos
35
1.- Un fermentador de 10 litros de medio es inoculado con 500 mL de inculo de 4,1 g/L.
Se sabe que si se deja crecer la cepa, al cabo de 6 horas la biomasa en el fermentador ser
de 6 g/L. Determinar el tiempo de duplicacin y el tiempo que deber permanecer la cepa
en el fermentador para alcanzar la misma concentracin del inculo. (Resp: td = 1,23 h; t (X
= 4,1) = 5,35 h.)
2.- Se quiere preparar un cultivo aerobio de Klebsiella aerogenes en un fermentador de 10

litros, inoculando con 500 mL de inculo (4,1 g/L). El nutriente limitante, glucosa, estar
inicialmente presente en una concentracin de 18 g/L.
a) Estimar el tiempo de cultivo para el consumo total de glucosa, si la velocidad especfica

de crecimiento a la temperatura de fermentacin (28 C) es de 0,67 hr-1 . Considere
despreciable la fase de latencia y que la clula posee 50% de carbono. (Resp: tb = 5,62 h)
b) Cuando transcurra la mitad del tiempo determinado en (a), se agregaron 3 litros de una
solucin estril de glucosa de 25 g/L, adems de los otros componentes de medio. Adems,
se cambia la temperatura de 28 C a 34 C. Calcular el tiempo total de cultivo y la
concentracin celular final, si la energa necesaria para activar su metabolismo reproductivo
es de 13 kcal/mol (Resp: tb = 4,98 h; X = 9,57 g/L).
3.- En un experimento de laboratorio se cultiva E. Coli en medio mnimo. El cultivo se
realiz en un incubador rotatorio, primero a 37 C hasta consumir la mitad del nutriente
limitante, y despus a 24 C hasta alcanzar la fase estacionaria. Si se ha determinado que la
cepa utilizada tiene un tiempo de duplicacin de 49 minutos a 37 C, y que la energa
necesaria para activar su crecimiento es de 16200 cal/mol, calcule el tiempo al cual se
realiz el cambio de T y el tiempo total de cultivo si se inocula 1 mL de cultivo de 4 g/L a
un matraz conteniendo 80 mL de medio estril. Suponga que S0 = 1 g/L y YX/S = 0,45 g X/g
S. (Resp: tcambio = 2 h; ttotal = 4,24 h)
36
4.- Una fermentacin batch de una bacteria aerbica que usa como fuente de carbono
metanol entrega los resultados siguientes:
Tiempo,
0
2
4
8
10 12 14
16
18
h
Biomasa 0,2 0,211 0,305 0,98 1,77 3,2 5,6 6,15 6,2
(X), g/l
Sustrato 9,23 9,21 9,07 8,03 6,8 4,6 0,92 0,077 0
(S), g/l
Determine:
a.- velocidad mxima de crecimiento especfico, max . (Resp: 0,28 h-1 )
b.- Coeficiente de rendimiento observado, YX/S (Resp: 0,65)
c.- tiempo de duplicacin, td (Resp: 2,48 h)
d.- Constante de saturacin, K S (Resp: 1,13 g/L)
e.- Velocidad especfica de crecimiento ( g) a t = 10 h (Resp = 0,24 h-1 )
5.- Se requiere producir un metabolito en un cultivo discontinuo aerobio de cierto

microorganismo en un fermentador piloto de 100 litros de trabajo. Se sabe que la
generacin del metabolito esta indirectamente relacionado al crecimiento. El inculo
consistir en 5 litros de un cultivo de 7 g/L, y se espera lograr una concentracin celular de
20 g/L en el fermentador piloto, usando glucosa como fuente de carbono. Se conoce
experimentalmente que en este medio el td es de 1,5 horas, YP/S = 0,66, f = 0,6 y el
coeficiente de mantencin es 0,1.
a) Determinar la concentracin inicial mnima de glucosa y el tiempo total de cultivo para

lograr 20 g/L de biomasa si se sabe que la fase de latencia es de 2 horas y la fase
estacionaria es de 4 horas. La cintica de generacin de metabolito esta dada por:
dP
dX
0, 27
2 X qP X
dt
dt
La biomasa contiene un 47% de C. (Resp: S0 = 179,89 g/L, t b = 14,79 h).

37
b) Determinar la concentracin final de P, conociendo que inicialmente no hay P presente.

(Resp: 90,54 g/L)
6.- En el desarrollo de una tecnologa microbiana para tratar un efluente industrial se

requiere operar un quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 L/h,
que corresponde a una velocidad de dilucin equivalente a un 82% del valor crtico. La
poblacin presenta un m de 0,22 h-1 , un K S de 1000 mg/l y un rendimiento de sustrato en
clulas de 0,28 g/g. Bajo estas condiciones, determinar la concentracin de sustrato en la
alimentacin, en la descarga y la concentracin celular en estado estacionario. (Resp: S0 =
12,41 g/L; S = 3,151 g/L; X = 2,59 g/L)
7.- Usted dispone de la siguiente informacin experimental del crecimiento de una bacteria,
obtenida en cultivo batch:
Tiempo,
0
0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 3,50 4,00 4,50 5,00 5,50 6,00
h
Biomasa 0,10 0,13 0,16 0,21 0,27 0,35 0,45 0,57 0,74 0,94 1,21 1,56 2,00
(X), g/l
Sustrato 100 99,93 99,84 99,72 99,57 99,38 99,13 98,82 98,41 97,89 97,22 96,36 95,26
(S), g/l
Tiempo, 6,50 7,00 7,50 8,00 8,50 9,00 9,50 10,00 10,50 11,00 11,50 12,00 12,50
h
Biomasa 2,56 3,29 4,22 5,42 6,95 8,93 11,45 14,70 18,86 24,19 31,01 39,60 41,0
(X), g/l
Sustrato 98,34 92,02 89,69 86,70 82,86 79,94 71,62 63,51 53,11 39,78 22,71 1,25 0,00
(S), g/l
a) Cul es la velocidad mxima de crecimiento (Resp: 0,5 h-1 )
b) Cul es el valor del rendimiento global de sustrato en clulas, YX' / S (Resp: 0,409)
c) En un quimiostato ideal, cul sera el rango de velocidad de flujo de alimentacin que
usted usara en fermentaciones de cultivo continuo de esta bacteria si el reactor tiene una
capacidad de 20 litros (Resp: 10 L/h)
d) Usted realiza un experimento de cultivo continuo a velocidad de dilucin 0,35 h-1 .
Transcurrido un tiempo se observa que el cultivo est contaminado. El microorganismo
38
contaminante se identifica y se sabe que ste tiene una velocidad mxima de crecimiento de
0,4 h-1 . Es posible eliminar el contaminante? Justifique.
8.- Los siguientes datos fueron obtenidos en un quimiostato para el crecimiento de E.

aerogenes en un medio limitado por glicerol con un S0 = 10 mg/ml.
D, h-1
0,05
0,1
0,2
0,4
0,6
0,7
0,8
0,84
Biomasa
(X),
mg/ml
Sustrato
(S),
mg/ml
3,2
3,7
4,0
4,4
4,75
4,9
4,5
0,5
0,012
0,028
0,05
0,1
0,15
0,176
0,8
9,0
Determine los valores de KS, max , YX/S y ms. (Resp: Ks = 0,1346 mg/ml; max = 0,925 h-1 ;
YX/S = 0,496 mgX/mgS; mS = 0,0593.
9.- Considere la operacin en estado estacionario de un quimiostato. Suponga que el
crecimiento bacteriano esta inhibido por sustrato y que el metabolismo endgeno es
despreciable tal que:
net max
S
KS S
S2
KI
a.- Derive una expresin para la concentracin de sustrato residual (S) como funcin de la
tasa de dilucin y los parmetros cinticos ( max , KS, KI).
b.- Cuales son las implicancias de operar un quimiostato cuando el organismo esta sujeto a
inhibicin por sustrato?
10.- Pseudomona putida con un max = 0,5 h-1 es cultivada en un reactor continuo bajo
condiciones aerbicas usando un D = 0,28 h-1 . La fuente de carbono y energa es lactosa, la
cual es alimentada con una concentracin de S0 = 2 g/L. La concentracin de lactosa en el
efluente es de 0,1 g/L. Si la velocidad de crecimiento esta limitada por la transferencia de
O2 , usando la siguiente informacin: YX / S = 0,45 gX/gS; YX / O2 = 0,25 gX/gO2 , KH =
1,19x10-3 mol/atm L, calcule:
39
a.- la concentracin de biomasa en estado estacionario y la velocidad especfica de

consumo de oxgeno ( qO2 ). (Resp: X = 0,855 g/L; qO2 = 1,12 gO2 /gX h)
b.- Cul debe ser el coeficiente de transferencia de oxgeno (kLa) a 1 atm de presin total
para superar la limitacin por transferencia de O2 , es decir, tener concentraciones de O2 en
la fase lquida superiores a 2 mg/L? (kLa = 160 h-1 )
Captulo 2: Diseo de Reactores Microbianos
En el captulo de crecimiento microbiano, ya se mostraron las ecuaciones de diseo para un

sistema discontinuo como para un sistema continuo completamente agitado (quimiostato).
En este captulo se estudiarn 2 de los sistemas ms usados en biotecnologa: El
quimiostato con recirculacin y el sistema Fed-Batch o por lote alimentado.
2.1.- Quimiostato con recirculacin.
En este sistema, la principal diferencia con el quimiostato convencional es la recirculacin

de biomasa en el reactor para incrementar el tiempo de retencin celular y mejorar la
eficiencia tanto de consumo de sustrato como de formacin de producto. Lo anterior obliga
a la instalacin de un separador a la salida del quimiostato que permita la sedimentacin y
recirculacin de la biomasa. Existen 2 parmetros asociados a este tipo de sistema: La tasa
de reciclo, , y el factor de concentracin celular (o razn de concentracin), c. Las
definiciones se muestran a continuacin:
- Taza de reciclo:
Qr
Q
(2.1)
donde Qr es el caudal de recirculacin, mientras que Q es el caudal de entrada.

- Factor de concentracin celular:
40
Xr
X
(2.2)
donde Xr es la concentracin de biomasa en la corriente recirculada, mientras que X es la

concentracin de biomasa en el reactor.
El esquema del quimiostato con recirculacin se muestra en la Figura 2.1.
Figura 1: Esquema del quimiostato con recirculacin.
De ahora en adelante, se har referencia a la nomenclatura de la Figura 1. As, presentamos

los balances de masa para microorganismos y sustrato limitante.
- Balance de Biomasa
V
dX
Q X 0 Q c X Q 1 X net X V
dt
(2.3)
Dividiendo por V y en estado estacionario:

0
Q
Q
Q
X 0 c X 1 X net X
V
V
V
(2.4)
En esta ecuacin podemos ingresar un nuevo parmetro, conocido como tasa de dilucin, el
cual es el inverso del tiempo de residencia hidrulico:
41
Q
V
(2.5)
Utilizando esta definicin y si X0 = 0, la ecuacin (2.5) se reduce a:
D 1 c
(2.6)
Esta ltima relacin es importante y muestra que, en caso de reactores con recirculacin, la
velocidad especfica de crecimiento se puede aumenta en 1 c veces respecto a un
quimiostato sin recirculacin.
Suponiendo un comportamiento tipo Monod, entonces:
max
S
D 1 c
KS S
(2.7)
Despejando el valor de S:
S
K S D 1 c
(2.8)
max D 1 c
- Balance de sustrato limitante

V
dS
X
Q S0 Q S Q 1 S net
V
dt
YX/S
(2.9)
Dividiendo por V y en estado estacionario:

0 D S0 D S D 1 S
net X
YX / S
(2.10)
Despejando X:
X
D S0 S
net
YX / S
(2.11)
Qu pasa en el separador?
- Balance biomasa en el separador en estado estacionario:
Q 1 X Q1 X 1 Q2 c X Q c X
(2.12)
Q Q1 Q2
(2.13)
Despejando X1 de ecuacin (2.12) y reemplazando F2 por (F-F1 ), se obtiene:

X1 c X
Q
c 1 1 X
Q1
(2.14)
2.2- Reactor Fed-Batch

42
El reactor Fed-batch es un reactor especial en el cual se agrega cierto flujo con sustrato a un
reactor, sin salida de lquido del mismo. As, a medida que se agrega flujo, el volumen
aumenta. El objetivo del reactor Fed-Batch es controlar la velocidad de crecimiento ()
mediante la velocidad de alimentacin al reactor. El sistema se puede resumir en la Fig.2.2.
Figura 2.2: Esquema del proceso Fed-batch.
Este tipo de reactores se aplica en la produccin de levadura, de penicilina, entre otros.

Las ecuaciones generales para este tipo de cultivo se basan en las siguientes suposiciones:
YX /S = constante
Crecimiento balanceado.
Metabolismo no se relaciona directamente con la edad del cultivo
El consumo de sustrato para mantencin es despreciable
La formacin de producto est directamente relacionado con el metabolismo
energtico.
El aumento del volumen de reactor es igual al volumen de solucin nutriente
alimentada.
De esta manera, los balances para cada componente son:

Volumen
dV
Q t
dt
(2.15)
43
Masa de microorganismos
d XV
XV
dt
(2.16)
d SV
XV
Q S1
dt
YX / S
(2.17)
d PV
qP XV
dt
(2.18)
S
KS S
(2.19)
Masa de sustrato limitantek
Masa de producto
Cintica de crecimiento
max
As, se tienen 5 ecuaciones y 7 incgnitas: V, XV, SV, PV, , Q y S1 . Por lo tanto, el sistema
requiere fijar al menos 2 variables para tener una solucin. En este apunte, se fijarn los
valores de Q y S1 , aunque tambin pueden fijarse otras variables como o la concentracin
de sustrato en el medio.
En este apunte se analizarn 2 formas de operacin Fed-Batch, siempre usando un flujo y

una concentracin de sustrato de entrada constante. La primera ser considerando que la
alimentacin comienza cuando el sustrato limitante se ha agotado (operacin en pseudoestado estacionario) y otra ser la alimentacin en una etapa previa al agotamiento del
sustrato, haciendo que la oferta de sustrato sea mucho mayor a la demanda de ste.
Caso 1: Se comienza alimentar cuando el sustrato es cercano a cero (Pseudo estadoestacionario)
En este caso, se inicia la alimentacin cuando el sustrato limitante en el sistema discontinuo

tiene una concentracin muy baja (S0). Se muestra esquemticamente en la Fig. 2.3,
aprecindose que la alimentacin comienza una vez que se logra la mxima concentracin
de biomasa y la mnima concentracin de S en un cultivo batch normal.
44
12
concentracion, g/L
10
F, S1
4
S
X
0
0
10
12
14
tiempo, h
Figura 2.3: Aplicacin de la alimentacin una vez lograda la fase pseudo-estacionaria. max
= 0,3 h; K S = 0,1 g/L; YX/S= 0,5; Q = 0,2 L/h; S1 = 30 g/L; V = 1 L.
Como se aprecia en la figura, no slo la concentracin de S se acerca a cero, sino tambin
dS
. A pesar que la concentracin de sustrato es muy baja, el valor de no puede ser cero
dt
y debe ser calculado. A partir de la ecuacin (2.15) se tiene que:
V0 V f Q t
(2.20)
Del balance de sustrato limitante, se puede calcular el valor de . Aplicando la ley de la

cadena a la ecuacin (2.17):
dS
dV
XV
V S
Q S1
dt
dt
YX / S
Dado que S 0 y que
(2.21)
dS
0 entonces:
dt
Q S1
XV
YX/S
(2.22)
Despejando el valor de la velocidad especfica de crecimiento, se tiene:

45
Q S1 Y X / S
XV
(2.23)
Reemplazando la ecuacin (2.23) en el balance de masa de microorganismos (ec. (2.16)):

d XV
XV Q S1 YX /S
dt
(2.24)
Integrando la ecuacin (2.24) entre XV0 y XV :

XV
dXV Q S1 Y X / S dt
XV0
(2.25)
XV XV0 Q S1 YX /S t
(2.26)
De la ecuacin (2.26) es fcil determinar el valor de la masa final de microorganismos en el

proceso Fed-Batch:
XV Q S1 Y X / S t XV0
(2.27)
As, el valor de esta dado por:
Q S1 Y X / S
Q S1 YX /S t XV0
(2.28)
Cul puede ser el criterio para disear una alimentacin adecuada? De acuerdo a un texto
argentino, la oferta del sustrato debe ser igual o superior a la demanda de sustrato por parte
del microorganismo. As, se tiene que:
demanda
XV
YX / S
oferta Q S1
(2.29)
(2.30)
As, se adems se tiene que deber ser como mximo max , entonces la oferta debe
equiparar a la demanda mxima:
Q S1
XV max
YX/S
(2.31)
Qu pasa con el producto? Dado que todo el sustrato slo se utiliza en el crecimiento,
entonces:
qP Y P / X
(2.32)
Luego:
46
d PV
qP XV
dt
(2.33)
d PV
YP/ X XV
dt
(2.34)
Reemplazando la ecuacin (2.23) en la ecuacin (2.34):

d PV
Q S1 Y X / S Y P / X
dt
(2.35)
Integrando la ecuacin anterior entre t = 0 y t y entre PV0 y PV:

PV PV0 Q S1 YX /S YP / X t
(2.36)
Finalmente, la masa de producto al final de la etapa Fed-Batch:

PV Q S1 YX /S YP /X t PV0
(2.37)
Caso 2: se inicia la alimentacin antes que el sustrato se acabe: Este tipo de sistema se
muestra esquemticamente en la Fig. 4. All se aprecia que la alimentacin no comienza
una vez que se logra el pseudo-estado estacionario (S 0), sino que antes, mientras el
sistema est en pleno desarrollo, como se muestra en la Figura 2.4.
16
F, S 1
Concentracion, g/L
14
12
10
8
S
X
6
4
2
0
0
10
15
20
tiempo, h
Figura 2.4: Operacin del sistema fed-batch para una alimentacin cuando S 0. Datos
graficados con max = 0,3 h; KS = 0,1 g/L; YX/S= 0,5; Q = 0,2 L/h; S1 = 30 g/L; V = 1 L.
47
Dado la complejidad de este tipo de operacin, Acevedo et al. (2002) 1 desarrollaron una
forma simple de calcular S y X, basados en dividir la operacin en zonas, de acuerdo al
crecimiento celular.
En la primera fase, cuando S >> KS se tiene un sistema donde se aproxima a max , por lo
tanto, tenemos una fase de crecimiento exponencial. En la segunda fase, cuando S 0,
se aproxima a la cintica de Monod (si corresponde), por lo que estamos en la fase de
crecimiento limitado.
a) Zona de crecimiento exponencial: Para esta etapa, los balances de masa son:
- Flujo
dV
Q
dt
(2.38)
d XV
max XV
dt
(2.39)
d SV
XV
Q S1 max
dt
YX / S
(2.40)
d PV
qP XV
dt
(2.41)
- Biomasa
- Sustrato
- Producto:
Integrando la ecuacin (2.39) entre XV y XV0 :
XV
ln
max t
XV0
(2.42)
XV XV0 e max t
(2.43)
Luego
La ecuacin (2.43) es la masa de microorganismos para cualquier tiempo t en la fase de

crecimiento exponencial.
1
Acevedo F, Gentina JC, Illanes A. Fundamentos de Ingeniera Bioqumica (2002)
48
Para determinar la masa de sustrato (SV), tomamos la ecuacin (2.43) y la reemplazamos en

la ecuacin (2.40):
d SV
Q S1 max XV0 e max t

dt
YX / S
(2.44)
Integrando entre SV y SV0 :
XV0
e max t 1
YX/S
(2.45)
XV0
e m ax t 1 SV0
YX / S
(2.46)
SV SV0 Q S1 t
As:
SV Q S1 t
La ecuacin (2.46) permite determinar la masa de sustrato en cualquier tiempo t de la fase

de crecimiento exponencial.
Para determinar la cantidad de producto, reemplazamos la ecuacin (2.43) en la ecuacin

(2.41) e integramos entre PV y P0 V0 , y el tiempo t:
P V P0 V0 qP X 0 V0
max
(2.47)
(2.48)
e m ax t 1
Finalmente
P V P0 V0 qP X 0 V0
max
e max t 1
Donde
q P max YP / X
(2.49)
Para encontrar el valor de X, S y P, se divide el valor de las ecuaciones (2.43), (2.46) y

(2.48) por el valor de V en el tiempo t.
b) Zona de crecimiento limitado: para esta etapa, los balances son similares a los
presentados para la zona de crecimiento exponencial. As:
49
- Flujo
dV
Q
dt
(2.50)
d XV
XV
dt
(2.51)
d SV
XV
Q S1
dt
YX / S
(2.52)
d PV
qP XV
dt
(2.53)
S
KS S
(2.54)
- Biomasa
- Sustrato
- Producto
-Velocidad de crecimiento especfico
max
Para poder encontrar la masa de microorganismos, reemplazamos la ecuacin (2.51) en

(2.52)
d SV
1 d XV
Q S1
dt
YX / S
dt
(2.55)
Haciendo arreglos matemticos, se tiene que:

d SV Q S1dt
1
YX / S
d XV
(2.56)
Integrando la ecuacin (2.56) entre SV y S0 V0 , XV y X0 V0 , t y t = 0, se tiene:

SV S0V0 Q S1 t
1
YX / S
XV XV0
(2.57)
Dado que SV 0, despejamos XV:

XV Q S1 t YX /S SV0 YX /S XV0
(2.58)
Para encontrar el valor de , derivamos la ecuacin (2.58) respecto al tiempo:

d XV
Q S1 YX /S
dt
(2.59)
Igualando la ecuacin (2.51) y la ecuacin (2.59):

50
XV Q S1 YX /S
(2.60)
De la ecuacin (2.60) despejamos :
Q S1 Y X / S
XV
(2.61)
Para calcular el valor del producto, se tiene que:

d PV
qP XV YP / X XV
dt
(2.62)
d PV
Q1 S1 YX /S YP / X
dt
(2.63)
Integrando entre PV y P0 V0 , y el tiempo t:

PV Q S1 YX /S YP /X t PV0
(2.64)
Para poder saber en que zona de crecimiento se est operando, es necesario determinar el
tiempo de transicin (t T), que es equivalente al tiempo que dura la operacin en fase de
crecimiento exponencial. Para calcular el tiempo de transicin, se igualan las ecuaciones
(2.43) y (2.58), dado que la masa celular en el tiempo t T debe ser la misma calculada tanto
por la ecuacin de la fase exponencial como por la fase limitante. Se calcula como el
tiempo fronterizo donde termina la fase exponencial y comienza la zona de crecimiento
limitado.
As:
X 0 V0 e max tT F S1 tT YX / S S0 V0 YX / S X 0 V0
(2.65)
De ecuacin (2.65) se despeja t T o, en su defecto, se obtiene iterando.

Qu pasa cuando la mantencin no es despreciable o cuando el producto no est
directamente relacionado al crecimiento?
Cuando la mantencin es importante, entonces la ecuacin del balance de masa de sustrato
cambia. Para un sistema en estado pseudo-estacionario se puede indicar que:
Volumen
dV
Q t
dt
(2.66)
Microorganismos
51
d XV
XV
dt
(2.67)
d SV

Q S1 ms
XV
dt
YX /S
(2.68)
d PV
q p XV
dt
(2.69)
qP Y P / X
(2.70)
Sustrato limitante
Producto
Donde
max
S
KS S
(2.71)
Nuevamente, de ecuacin (2.68) despejamos :

dS
dV
XV
V S
Q S1 ms XV
dt
dt
YX/S
(2.72)
Lo anterior se reduce a:
Q S1 YX /S
ms Y X / S
XV
(2.73)
Reemplazando la ecuacin (2.73) en ecuacin (2.67):
d XV
Q S Y
XV 1 1 X /S ms YX /S XV
dt
XV
(2.74)
d XV
Q1 S1 YX /S ms YX /S XV
dt
(2.75)
d XV
ms Y X / S XV Q1 S1 YX /S
dt
(2.76)
As:
La ecuacin(2.76) es una ecuacin diferencial lineal de 1er orden, cuya forma general se
escribe como:
dy
P x y Q x
dx
(2.77)
Para este tipo de ecuaciones, la solucin general est dada por:
52
P x dx
P x dx
y e
Q x e
dx C
(2.78)
donde C es una constante.

Para el caso que queremos resolver, se tiene que:
P x ms Y X / S
(2.79)
Q x Q S1 YX /S
(2.80)
Por lo tanto, se tiene que:

t
Y X / S m s dt
XV e
YX / S ms dt
0
Q S1 Y X / S e
dt C
0
(2.81)
Desarrollando la primera integral:

t
X /S
ms dt YX /S ms t
(2.82)
Reemplazando la ecuacin (2.82) en la ecuacin (2.81)

Y X / S m s t
XV e
m t
Y
Q S1 Y X / S e X / S s dt C
0
(2.83)
Desarrollando la segunda integral:
Q S Y
1
X/S
eYX / S ms t dt
Q S1 YX /S
eYX / S ms t 1
Y X / S ms
(2.84)

Y X /S ms t
XV e
1
Y m t
Q S1 YX / S
e X /S s 1 C
YX / S m s
(2.85)
Despus de trabajo algebraico se llega a que:
XV
Q S1
Q S1 YX /S ms t
C
e
ms
ms
(2.86)
Para calcular C, se sabe que a t = 0, XV XV0 , reemplazando, se encuentra que:

C XV0
(2.87)
Por lo tanto, se puede indicar que:
XV
Q S1
Q S1 YX /S ms t
XV0
e
ms
ms
(2.88)
53
2.3.- Eje mplos de aplicacin.

1.- Un quimiostato aireado con recirculacin, comnmente conocido como lodo activo,
es usado para la remocin de materia orgnica desde aguas residuales. Una empresa lleva a
cabo un estudio a nivel piloto usando un reactor de 500 L, operando con un flujo de 250
L/h y una concentracin de alimentacin de 50 g/L de DBO5 . Un estudio cintico previo
demostr que el cultivo mixto obedece a una cintica tipo Monod. Se le pide calcular:
a. Calcular el valor de X, S y X1 cuando se trabaja sin una purga en el sistema.
b. Calcular el valor de X, S y X1 cuando se trabaja con un flujo de purga de 50 L/h.
c. Dado que hay restricciones ambientales en cuanto a la concentracin de biomasa en
el efluente, calcule el flujo de salida necesario para que la concentracin de salida
sea nula.
d. Calcule para el sistema el Dcrit .
(Datos adicionales: max = 0,5 h; K S = 2 g/L DBO5 ; YX/S = 0,5; = 0,7; c = 1,5).
Solucin
a) Del balance de masa celular en el reactor, se obtiene la ecuacin (2.8) y con sta
obtenemos el valor de S:
S
K S D 1 c
max D 1 c
(2.89)
Reemplazando valores:
2 (mg/L) 0,5 h -1 1 0, 7 0,7 1, 5

3,71 mg/L
0, 5 h -1 0,5 h -1 1 0, 7 0, 7 1,5
(2.90)
Para calcular el valor de X, debemos calcular el valor de :
max
S
3, 71 mg/L
0,5 h -1
0,325 h-1
KS S
2 mg/L + 3, 71 mg/L
(2.91)
Luego, a partir del balance de masa de sustrato, obtenemos la expresin que nos permite
calcular X (ecuacin (2.11)). As:
54
D S0 S YX / S
-1
0,5 h 50 3, 71 mg S/L 0,5 mg X/mg S
-1
0, 325 h
(2.92)
X 35, 65 mg/L
Para calcular el valor de X1 , usamos el balance de masas celular en el separador (ecuacin
(2.14)):
X1 c X
Q
c 1 1 X
Q1
(2.93)
Dado que Q = Q 1 (no hay purga, es decir, Q2 = 0), entonces la ecuacin (2.93) se simplifica.
X1 1,5 35,65 mg/L 1, 5 1 0, 7 1 35, 65 (mg/L) 23,17 mg/L
(2.94)
b) En este caso, debemos primero obtener el valor de Q1 :

Q1 Q Q2 200 L/h
(2.95)
Los valores de S y X no varan de lo calculado en la letra (a) (realice ud. los clculos). La
variacin principal se da en la concentracin de salida del reactor, X1 .
Aplicando la ecuacin (2.93), se obtiene:
250 L/h
X1 1,5 35,65 mg/L
1,5 1 0, 7 1 35, 65 (mg/L)
200 L/h
X1 15,6 mg/L
(2.96)
c) En este caso, nos piden calcular el valor de Q1 y Q2 para que X1 = 0. Nuevamente,

usamos la ecuacin en el separador (ecuacin (2.14)):
X1 c X
Q
c 1 1 X
Q1
(2.97)
Si X1 = 0 y despejando Q1 se obtiene:
Q c 1 1
c
(2.98)
250 (L/h) 1,5-1 0,7 1

141, 67
1,5
(2.99)
Q1
Reemplazando valores, se obtiene:
Q1
Luego
Q2 Q Q1 108,33 L/h
(2.100)
55
d) Para calcular el Dcrit , debemos suponer que: X = 0 (el reactor se lava) y S = S0 (no hay
consumo de sustrato en el reactor). As, igualando la ecuacin (2.6) y la ecuacin de
Monod, se obtiene la siguiente expresin (ecuacin (2.7)):
Dcrit 1 c max
S0
K S S0
(2.101)
Despejando Dcrit y reemplazando valores, se obtiene:

Dcrit
0,5 h -1
50 g/L
0,739 h -1
1 0, 7 0,7 1, 5 2 g/L+50 g/L
(2.102)
2) Una empresa recientemente compr un nuevo microorganismo para producir un

producto P. Los datos cinticos de este nuevo microorganismo son: max = 0.3 h-1 ; KS = 0,1
g/L; YX/S = 0,4 g b.s./g sustrato; YP/X = 0,5 g P/g b.s h. Se sabe que la formacin de
producto est directamente asociada a crecimiento. De acuerdo a la empresa que distribuye
el microorganismo, la mejor forma de operacin es del tipo Fed-Batch. As, se le pide a ud.
determinar los siguientes puntos:
a) El tiempo despus del cual Ud. puede comenzar a alimentar el bioreactor para operar un
cultivo Fed-batch en estado pseudo-estacionario. Suponga las siguientes condiciones
iniciales: S0 = 10 g/L; X0 = 0.5 g/L; P0 = 0.02 g/L.
b) Si las condiciones de operacin recomendadas para un Fed-Batch en estado pseudoestacionario son: F = 85 L/h; V0 = 1000 L; S1 = 12 g/L, con F y S1 constantes, calcular el
tiempo de operacin, la masa total de clulas y la masa total de producto si el volumen
mximo del reactor es de 3000 L.
c) Qu pasara si el reactor comenzara a alimentarse a un tiempo t = 2,5 h despus de
iniciar el sistema en discontinuo?Cual ser el tiempo de transicin?Los valores de XV y
PV?
Resolucin
a.- Para solucionar este punto, debemos calcular el tiempo que demora el sistema batch en
llegar a una concentracin de sustrato cercana a 0. As, haciendo S = 0, se calcula el tiempo
de operacin batch:
56
S S0
X0
e max t 1
YX / S
(2.103)
Luego:
S0
X0
e max t 1
YX / S
(2.104)
Despejando t se tiene:
max
S Y
ln 0 X / S 1
X0
(2.105)
Reemplazando valores, se obtiene que:

t
10 0, 4
1
ln
1 7, 32 h
-1
0, 3 h
0,5
(2.106)
b) En general, para este tipo de ejercicios debemos realizar varios pasos:

Paso 1: Clculo de las concentraciones iniciales de X y P, es decir X0 y P0 . Teniendo el
valor de t, se puede obtener el valor final de X y P en la fase batch:
X X 0 e max t 0,5 e 0,3 7, 32 4,5 g/L
(2.107)
El valor anterior es el valor inicial de la concentracin de biomasa de la etapa fed-batch

Para P:
dP
qP X q P X 0 e max t
dt
(2.108)
Integrando la ecuacin (2.108) y reemplazando valores, se tiene:

P P0 qP
X0
max
e max t 1
g X
0,5
gP
L e 0,3 7,32 1 2, 02 g P/L
P 0,02 g/L+0,15
-1
g X h 0,3 h
(2.109)
(2.110)
El valor anterior es el valor de la concentracin de P al inicio de la etapa fed-batch.
Paso 2: El segundo paso es calcular el tiempo de operacin Fed-batch, es decir, el tiempo

que demora en pasar de 1000 L a 3000 L. Dado que Q y S1 son constantes y el volumen
mximo del reactor es de 3000 L, se puede determinar t operacin:
V V0 Q t
(2.111)
57
As:
t
V V0 3000 1000
23, 53 h -1
Q
85
(2.112)
Por lo tanto, el tiempo de operacin es de 23 horas.
Paso 3: Ahora procedemos a calcular la masa de biomasa (XV) y de producto (PV), usando
las ecuaciones determinadas anteriormente para el caso de pseudo-estado estacionario.
Para la masa de biomasa (ecuacin (2.27):
XV YX / S S1 Q t X 0 V0
(2.113)
g X g S
L
gX
XV 0.4
12
85 23, 53 h + 4,49
1000 L
h
L
gS L
XV 14090, 24 g
(2.114)
Para el producto ligado directamente a crecimiento (ecuacin (2.37)):

PV PV
0 0 Q S1 YX / S t YP / X
(2.115)
Reeemplazando los valores:

g X
gP
g P
L g S
PV 2,02
1000 L + 85 12
0,4
0, 5
23,53 h
L
h L
gS
g X
PV 2020 g P + 4800,12 g P
(2.116)
PV 6820,12 g P
c) Para desarrollar este punto, se realizan los siguientes pasos:

Paso 1: Calcular los valores de S, X y P a tiempo t = 2,5 h, operando en discontinuo.
As, se tiene para el sustrato:
S S0
X0
e max t 1
YX / S
(2.117)
Reemplazando valores
S 10
0,5 0,3 2,5

e
1 8, 6 g/L
0, 4
(2.118)
Para la biomasa:
X X 0 e max t 0,5 e 0,3 2,5 1,06 g/L
(2.119)
58
Para el producto:
P P0 X 0 YP/ X e
max t
gP
g X 0,3 2,5
P 0,02 g P/L 0, 5
0, 5
1 0, 3 g/L
e
L
g X
(2.120)
Los valores calculados anteriormente pasan a ser los valores iniciales de la etapa FedBatch.
Paso 2: Dado que en este caso la alimentacin comenz antes de lograr el pseudo-estado
estacionario, nos encontramos en la situacin b, es decir, alimentacin en cualquier tiempo.
As, debemos calcular el tiempo operacin de la etapa de crecimiento exponencial y el
tiempo de operacin de la etapa de crecimiento limitado. Para realizar lo anterior, es
necesario calcular el tiempo de transicin, que no es otra cosa que el tiempo de operacin
bajo la condicin de crecimiento exponencial. Usando la ecuacin (2.65) y definiendo:
a X 0 V0 e max tT
(2.121)
b F S1 tT YX / S S0 V0 YX / S X 0 V0
(2.122)
Luego, definiendo una funcin que debe ser cero:
c a b
(2.123)
As, se realiza una iteracin. La Tabla 1 muestra los resultados.

Tabla 1: Resultados las funciones a, b y c en funcin del tiempo t T.
tT
c (a-b)
6,3
7016,5308
7070,4
-53,8691981
6,31
7037,612
7074,48 -36,8679997
6,32
7058,75654
7078,56 -19,8034628
6,33
7079,9646
7082,64 -2,67539695
6,34
7101,23639
7086,72
14,5163886
6,35
7122,57209
7090,8
31,7720853
En la Tabla 1 se aprecia claramente como se produce un cambio de signo entre 6,33 < t T <
6,34. As, dado que se logra el cero entre 6,33 < t T < 6,34, se puede indicar que el tiempo de
transicin debe ser aproximadamente 6,33 h. As:
59
tT 6,33 h -1
(2.124)
Por lo tanto, necesariamente a las 23 horas de operacin el sistema opera bajo la modalidad
de crecimiento limitado.
Paso 3: Clculo de XV y PV utilizando las expresiones de crecimiento limitado.

Para la biomasa (ecuacin (2.58)):
XV Q S1 t YX / S S0V0 YX /S XV0
(2.125)
Reemplazando datos:
g X
gX
L g S
g S
g X
XV 85 12
23 h 0, 4
8, 6
1000 L 0, 4
1, 06
1000 L
h L
L
L
gS
gS
(2.126)
XV 9384 g X + 3440 g X + 1060 g X = 13.884 g X
(2.127)
Para el producto (ecuacin (2.64)):

PV PV0 Q S1 YX /S YP/ X t
(2.128)
Reemplazando datos:
gS
gP
gP
L g S
PV 0, 3
1000 L + 85 12
0, 4
0, 5
23 h
L
h L
g X
g X
PV 300 g P + 4692 g P
(2.129)
PV 4992 g P
Al comparar la masa de P formado en ambos casos, se aprecia que el sistema en pseudoestado estacionario es un 26,80 % ms productivo para este proceso.
3.- Una planta de bioprocesos necesita incrementar la produccin de cierto microorganismo

desde el cual se extrae un valioso producto. Para lo anterior, se tiene un bioreactor que se
operar en Fed-Batch. De acuerdo a varios estudios, la mejor manera de incrementar la
biomasa es operar en estado pseudo-estacionario, pero manteniendo el valor de la velocidad
especfica de crecimiento () constante. As, se le pide a ud:
a) Determinar la expresin matemtica para calcular la masa final de microorganismo (XV)
si el caudal de alimentacin (Q) y la velocidad especfica de crecimiento son constantes.
60
b) Determinar la expresin matemtica para calcular la masa final de microorganismo (XV)

si la concentracin de alimentacin (S1 ) y la velocidad especfica de crecimiento son
constantes.
Solucin
En el caso a), tenemos 6 incgnitas (V, Q, S1 , , XV y SV) y slo 4 ecuaciones:

dV
Q
dt
(2.130)
d XV
XV
dt
(2.131)
d SV
dt
Q S1
max
XV
YX / S
S
KS S
(2.132)
(2.133)
Por lo tanto, de las 6 incgnitas, necesariamente debemos fijar 2. Cules se fijan? Las que
aparecen en el enunciado, es decir, Q y . Por lo tanto, las incgnitas sern V, S1 , XV y SV.
Lo primero que podemos calcular es el volumen final:
V Q t V0
(2.134)
Para el clculo de la masa microbiana, integramos la ecuacin (2.131) ya que es

constante:
XV XV0 e t
(2.135)
Para el clculo de S1, hacemos uso del balance de sustrato. Al aplicar la regla de la cadena
a la ecuacin (2.132):
dS
dV
XV
V
S Q S1
dt
dt
YX / S
(2.136)
Dado que es constante, entonces S tambin es constante (ver ecuacin (2.133)), por lo
tanto la ecuacin anterior se reduce a:
S
dV
XV
Q S1
dt
YX / S
(2.137)
Luego
61
S Q Q S1
XV
YX/S
(2.138)
Despejando S1:
S1 S
XV
Q YX / S
(2.139)
Dado que XV es una funcin exponencial y S1 depende de XV, entonces la concentracin

de alimentacin debe ir incrementndose exponencialmente para mantener un cte.
Finalmente, calculamos SV tambin a partir del balance de sustrato:
dSV
XV
Q S
dt
Q YX / S
XV
Y
X /S
(2.140)
As:
d SV
QS
dt
(2.141)
SV Q S t SV 0
(2.142)
Integrando:
En el caso b), el razonamiento es similar, slo que en este caso las variables conocidas son
y S1. Por lo tanto, es el mismo sistema anterior. Del balance de masa microbiano, se tiene
que:
XV XV 0 e t
(2.143)
Nuevamente del balance de sustrato calculamos el valor de Q:

d SV
XV
Q S1
dt
YX / S
(2.144)
Aplicando la regla de la cadena y haciendo que dS/dt = 0:

Q S Q S1
XV
YX/S
(2.145)
Luego:
XV
Y X / S S1 S
(2.146)
62
XV 0
YX /S S1 S
e t
(2.147)
As, para este tipo de proceso, se necesita un caudal que aumente exponencialmente. Para
determinar el cambio de volumen, utilizamos la ecuacin (2.130):
XV 0
dV
e t a e t
dt YX / S S1 S
(2.148)
Al realizar la integracin, se tiene que:

t
V V0 a e tdt
0
e t 1
(2.149)
e t 1
(2.150)
As, finalmente:
V V0
XV 0
YX /S S1 S
En este caso, tanto el Q como el V aumentan en forma exponencial.

2.4.- Eje rcicios propuestos
1.- Un quimiostato simple de 5 litros de volumen til presenta algunos problemas de diseo
que ocasionan una imperfecta agitacin. El equipo se va a utilizar para cultivar una
levadura de max = 0,48 h-1 y KS = 0,072 g/L. La alimentacin se har a 1,1 L/h con una
concentracin de nutriente limitante S0 = 65 g/L. En esa condicin YX/S = 0,43 g/g. Para
predecir los resultados de esa experiencia se plantea un modelo que supone que un 35% del
flujo de alimentacin no pasa por el fermentador, sino que se une a la corriente de salida y
que el resto ingresa al quimiostato que se considera perfectamente agitado.
a) Determine los valores estacionarios de , X, S y QX. (Resp: = 0,143 h-1; X = 27,94
g/L; S = 0,031 g/L; QX = 3,99 g/L h)
b) Comparar los resultados anteriores con los valores generados considerando un
fermentador perfectamente agitado.
2.- Considere un reactor de mezcla completa de 1 m3 de volumen (Quimiostato) donde se
produce biomasa con glucosa como sustrato. El sistema sigue una cintica tipo Monod con
max = 0,4 h-1 y KS = 1,5 g/L, con un factor de rendimiento de 0,5 g biomasa/g sustrato. Si
63
la operacin normal es con una alimentacin estril de 100 l/h que contiene 10g/l de
glucosa:
a.- Cul es la tasa especfica de produccin de biomasa (g/L h) en estado estacionario?
(Resp: Qx = 0,475 g/l h)
b.- Si se usara un reciclo de 10 l/h y una concentracin de biomasa en el reciclo 5 veces
mayor a la concentracin a la salida del reactor, Cul ser la nueva tasa especfica de
produccin de biomasa (g/L h)? (Resp: Qx = 0,81 g/l h)
c.- Explique cualquier diferencia entre los valores encontrados en a y b.
3.- Un fermentador de tanque agitado de 1500 litros de volumen de operacin es utilizado

en un proceso continuo con una levadura de max = 0,34 h-1 y un KS= 80 ppm. La levadura
presenta auxotrofa de un metabolito intermedio que es usado como nutriente limitante con
un Yx/s= 0,45 y una concentracin en la alimentacin de 5 g/L para un flujo de 165 L/h. El
efluente del fermentador pasa por una centrfuga continua que produce una corriente
concentrada de clulas, que es bombeada a otra seccin de la planta, y otra corriente clara
que es recirculada parcialmente al fermentador, purgndose el resto. El factor de
concentracin es 3,3 y el factor de recirculacin medido despus de la purga es de 1,8. Si se
desea que el flujo de la purga sea un 65% del flujo de la corriente concentrada de clulas,
determine los valores de los flujos y la concentracin de clulas y nutrientes limitantes de
todas las corrientes, cuando se opera en estado estacionario (Resp: S = 183,36 mg/L; Xreactor
= 1,01 g/L).
4.- Un quimiostato de 12 m3 de volumen con recirculacin de clulas y sin purga, posee una
alimentacin fresca de 6240 L/h con una concentracin de 1,2 g/L. Se pide determinar el
factor de concentracin en el separador, la concentracin celular en el fermentador y la
concentracin de sustrato en el efluente para un factor de recirculacin de 0,6.
Datos: max = 0,62 h-1 = 0,35 h-1 KS = 0,2 g/L Yx/s = 0,5 g/g.
(Resp: S = 0,259 g/L; Xreactor = 0,7 g/L; c = 1,55).
5.- Un fermentador continuo de laboratorio de 2,5 litros est acondicionado para operar con
retencin de clulas, para lo cual tiene dos salidas: una con un filtro absoluto que retiene la
64
biomasa (y cuya fase lquida es completamente eliminada) y la otra directa desde el

fermentador. A travs de la salida con el filtro fluye un 30% de la alimentacin al sistema,
mientras el porcentaje restante fluye por la salida directa. Se pide:
a) Establecer las ecuaciones que describan totalmente la operacin del fermentador en
estado estacionario.
b) Calcular la concentracin celular y concentracin de nutriente limitante en el
fermentador en estado estacionario si max = 0,83 h-1 , KS= 0,377 g/L e Yx/s= 0,33 g/g, con
un medio conteniendo 4 g/L de nutrientes y un flujo de 8,5 mL/min. (Resp: S = 0,0783 g/L;
X = 1,85 g/L)
c) Calcule la mxima productividad celular (Resp: Qmax = 0,38 g/l h)
6.- Penicilina es producida por P. chrysogenum en un cultivo fed-batch con adicin
intermitente de glucosa al medio de cultivo. El volumen inicial del cultivo en cuasi-estado
estacionario es 500 l, y la solucin que se agrega a 50 l/h tiene una concentracin de
glucosa de 300 g/l. La concentracin inicial de biomasa en cuasi-estado estacionario en el
reactor es de 20 g/l. La cintica del microorganismo obedece a una tipo monod, con max =
0,2 h-1 y K S = 0,5 g/L, con un factor de rendimiento de 0,3 g biomasa/g sustrato. Bajo estas
condiciones, determine:
a.- El volumen del cultivo despus de 10 h.
b.- La concentracin y masa total de clulas en cuasi-estado estacionario cuando t = 10 h.
(Resp: X = 55 g/L; XV = 55.000 g biomasa)
d.- Suponga la penicilina sea un producto directamente relacionada al crecimiento. Si YP/X
= 0,5 g producto/g biomasa h y P0 = 0,1 g/l, determine la concentracin de producto en el
reactor en t = 10 h. (Resp: P = 22,55 g P/L).
e.- Estudios posteriores para este microorganismo indicaron que el coeficiente de
mantencin ms de este cultivo era bastante alto (10% de max ). Para este nuevo escenario,
calcule la masa total de clulas en cuasi-estado estacionario cuando t = 10 h. Compare con
resultado de letra a) y discuta el error de no incluir la mantencin cuando sta es elevada.
7.- Una fermentacin se realiza en un cultivo fed-batch utilizando una alimentacin

constante de 0,8 L/h, con una concentracin de sustrato limitante de 120 g/L. El cultivo se
65
inicia por lotes con un volumen de lquido de 20 litros. La concentracin celular despus de
inocular es de 0,1 g/L, en un medio de cultivo con 7,5 g/L de nutriente limitante. El cultivo
por lotes contina hasta que la masa celular se quintuplica, inicindose entonces la
alimentacin.
Determine:
a. Condiciones iniciales del cultivo por lotes alimentado. (Resp: S = 6,61 g/L)
b. Condiciones de transicin. (Resp: tT = 5,53 h; S = 0,0047 g/L; X = 12,62 g/L)
c. Condiciones finales, correspondientes al momento en que el volumen de caldo es de 30
litros. (Resp: X = 20,58 g/L; S = 0,0102 g/L).
Datos: max = 0,62 h-1 , KS = 80 mg/L, Yx/s = 0,45
8.- Se le ha solicitado a usted disear una fermentacin por lotes alimentado con
alimentacin constante (F y Sf constantes). El microorganismo a cultivar es una bacteria
que posee un max = 0,4 h-1 , Yx/s= 0,4 y KS= 0,010 g/L, cuando se utiliza glucosa como
fuente de carbono y energa. Para estos efectos se cuenta con un fermentador piloto de 200
litros de volumen total, al cual parte en rgimen discontinuo con un S0 = 2 g/L, X0 = 0,05
g/L y V0 = 140 litros. Despus de 3 horas, comienza a alimentarse una solucin con Sf y F
desconocidos. Usando glucosa como nutriente limitante, se observ que en un tiempo de
4,6 horas se termin la fase de crecimiento exponencial, llegando a un volumen de lquido
de 142,3 L y una concentracin de sustrato de 4,72 mg/L. El tiempo total del cultivo por
lote alimentado no debe sobrepasar las 6 horas.
a. Cul debe ser el valor de F y Sf? (Resp: F = 0,5 L/h; Sf = 30 g/L)
b. Cul es la concentracin final de microorganismos alcanzada al final del cultivo por lote
alimentado? (X = 1,08 g/L)
9.- En un sistema de 2 quimiostatos en serie, el volumen del primer y segundo reactor son
V1 = 500 l y V2 = 300 l, respectivamente. El primer reactor es usado para produccin de
biomasa y el segundo es para formacin de un metabolito secundario. El caudal de
alimentacin al primer reactor es de 100 l/h, con una concentracin de S = 5,0 g/l. Usando
las siguientes constantes: max = 0,3 h-1 ; KS = 0,1 g/L; YX/S = 0,4 g X/g sustrato:
66
a.- Determine la concentracin de biomasa y sustrato en el efluente de la primera etapa.

(Resp: S1 = 0,2 g/L; X1 = 1,92 g/L)
b.- Suponga que el crecimiento es despreciable en la segunda etapa y que la velocidad
especfica de formacin de producto es qP = 0,02 g P/g biomasa h, con YP/S = 0,6 g P/g S.
Determine la concentracin de sustrato y producto en el efluente del segundo reactor.
(Resp: P2 = 0,1152 g/L; S2 = 8 mg/L)
10.- Se propone un sistema de fermentacin continua en rgimen estacionario que consta de

un fermentador con reciclo de clulas cuyo efluente alimenta un segundo fermentador.
Sugiera una expresin que relacione la tasa especfica de crecimiento en el segundo reactor
con los parmetros D, S0 , 1, Ks, max y X2.
Considere:
D=Q/V es la tasa (velocidad) de dilucin, igual en ambos fermentadores
La alimentacin fresca es estril.
es la razn de reciclo y Cf es el factor de concentracin.
11.- En una planta piloto se dispone de un sistema de fermentacin continua consistente en

dos quimiostatos en serie de 50 litros de volumen de trabajo cada uno. Se desea cultivar una
determinada bacteria (55% C; 11% N; 1,2% S; 2,0% Mg; 1,3% P) cuya velocidad
especfica de crecimiento mxima es de 0,45 h-1 en las condiciones del ensayo y su
constante de afinidad es de 28 mg/L para glicerol, que ser utilizado como nutriente
limitante. Considere un rendimiento en clulas constante de 0,45 g/g. La primera etapa se
operar a D= 0,23 h-1 , con una concentracin de glicerol en la alimentacin de 18 g/L. La
segunda etapa tiene una alimentacin secundaria de 6 L/h con 100 g glicerol/L.
a) Determinar los valores estacionarios de X, S y en cada etapa.
(Resp: S1 = 0,029 g/L; X1 = 8,09 g/l; 1 = 0,23 h-1 ; S2 = 0,0384 g/L; X2 = 20,67 g/l; 2 =
0,26 h-1 )
b) Determinar las productividades volumtricas de clulas en la primera y en la segunda
etapa. (Resp: Qx1 = 1,86 g/l h; Qx2 = 7,24 g/l h
c) Cmo varan los resultados de (a) si la alimentacin secundaria incluye adems 5 g/L de
clulas?
67
(Resp: S2 = 0,032 g/L; X2 = 22,45 g/l; 2 = 0,24 h-1 )
Captulo 3: Mezclado y Aireacin
3.1.- Mezclado
Mezclado es una operacin fsica que reduce la no-uniformidad en un fluido a travs de la

eliminacin de gradientes de concentracin, temperatura y otras propiedades.
Importante tanto tecnolgica como econmicamente.
Porqu es conveniente agitar un cultivo?
Obtener buen grado de mezclado (homogeneidad)
Obtener mayores valores de velocidades de transferencia de masa.
Obtener mayores velocidades de transferencia de calor (enfriamiento)
Agitacin es imprescindible en fermentaciones aerbicas
Fermentaciones anaerbicas requieren agitacin slo para homogeneizar.
El mezclado involucra:
Mezclar los componentes solubles en el medio, tales como azcares.
Dispersar los gases, tales como aire, en el lquido en la forma de pequeas

burbujas.
Mantener en suspensin los slidos particulados tales como las clulas.
68
Cuando fuera necesario, dispersar los lquidos inmiscibles para formar una
emulsin o una suspensin de finas gotas.
Promover la transferencia de calor desde o hacia el lquido.
El mezclado se puede lograr de diferentes formas. En este curso nos concentraremos en la

forma ms comn de mezclar: Agitacin mecnica usando un impulsor (impeller).
3.1.1.- Equipamiento para me zclado.

El equipamiento bsico se muestra en la Figura 3.1 2 .
Figura 3.1: Equipamiento para el mezclado en un bioreactor.

Notas:
Para fluidos newtonianos, DT :DI = 3:1.
Para un eficiente mezclado con 1 solo impulsor, la profundidad del lquido en el

reactor no de ser ms de 1-1,25 veces el dimetro del reactor.
Del te xto Bioprocess Engineering Principles de Pauline Doran
69
Baffle (Placa deflectora): Usado para evitar los vortex y remolinos en el lquido.
Deflectores: Son puestos en el bioreactor a travs de soportes soldados; cuatro deflectores

igualmente espaciados son suficientes para evitar los vortex. Ancho de los deflectores?
Depende del diseo del impulsor y la viscosidad del fluido. Generalmente, para fluido
newtonianos es del orden de 1/10-1/12 del dimetro del reactor. Para fluidos no
newtonianos, son del orden de 1/50 del dimetro del reactor.
La posicin del deflector depender de la viscosidad del fluido (Ver Figura 3.2).
Figura 3.2: Visin perpendicular de la posicin del deflector, dependiendo de la

viscosidad: (a) baja viscosidad (< 10 cp); (b) Lquidos de viscosidad moderada.
(10< < 103 cp); (c) Lquidos muy viscosos ( > 103 cp).
70
Impulsor: Existen variedad de diseos para diferentes tipos de fluidos. La Figura 3.3
muestra los ms comunes. En cuanto a su uso, depende de la viscosidad del fluido. La
Figura 3.4 muestra las diferentes posibilidades.
Figura 3.3: Diseo de diferentes tipos de impulsores 3 .
Del te xto Bioprocess Engineering Principles de Pauline Doran.
71
Figura 3.4: Rango de viscosidad para diferentes tipos de impulsores4 .
3.1.2.- Efectividad de Mezclado.
El tiempo de mezclado (tm) es un parmetro til para estudiar la eficiencia de mezclado y se

aplica para caracterizar el mezclado en reactores.
tm : tiempo requerido para lograr un grado de homogeneidad dado, comenzando desde un
estado completamente segregado.
Cmo se mide tm?
Se inyecta una concentracin dada de un compuesto (trazador) en el reactor y se muestrea
su concentracin en un punto fijo del reactor. Trazadores comunes son cidos, bases y
soluciones de sales concentradas. Detectores pueden ser pHmetros o conductmetros. La
Figura 3.5 muestra un perfil tpico de concentracin en la medicin de tm.
72
Figura 3.5: Perfil de concentracin despus de inyeccin de un pulso de trazador al reactor.

tm: tiempo de mezclado; tc : tiempo promedio que toma el fluido para hacer 1 circuito en el
reactor (tiempo de circulacin). 5
Para un lquido en un reactor con varios deflectores y un pequeo impulsor, existe una
relacin aproximada entre el tiempo de mezclado y el tiempo de circulacin:
t m 4 tc
(3.1)
En reactores de mezcla completa industriales con volmenes de trabajo entre 1-100 m3

tienen tiempo de mezclado entre 30 a 120 s.
El tiempo de mezclado en reactores agitados depender de variables tales como el tamao
del estanque y el impulsor, las propiedades del fluido y la velocidad de agitacin. La
relacin entre estas variables y el tiempo de mezclado ha sido experimentalmente
determinado para diferentes tipos de impulsores. Para Rei (Numero del Reynolds del
impulsor) > 5x103 y un impulsor tipo turbina Rushton, se puede calcular:
Ni t m
1,54 V
3
Di
(3.2)
Donde
73
Ni : Velocidad rotacional del impulsor.

Di : Dimetro del Impeller.
La ecuacin anterior fue graficada experimentalmente para una turbina Rushton. En la

Figura 3.6, el clculo de Rei se realiza como:
Re i
Ni Di2
(3.3)
donde Ni es Velocidad de rotacin expresada en revoluciones por unidad de tiempo (rpm).
74
Figura 3.6: Variacin del tiempo de mezclado con el N de Reynolds para un impulsor tipo
turbina Rushton. Impulsor localizado a un tercio del dimetro del estanque sobre el fondo
del reactor. Reactor con 4 deflectores. 6
3.1.3.- Clculo de Potencia para la agitacin en un bioreactor.
La energa elctrica se usa para mover el impulsor en los reactores agitados. Para una
velocidad de agitacin dada, la potencia requerida depende de la resistencia ofrecida por el
fluido a la rotacin del impulsor.
Consumo de energa reactores pequeos (< 0,1 m3 ) = 10 kW m-3
Consumo de energa reactores grandes (100 m3 ) = 1-2 kW m-3 .
La potencia se puede calcular en base al nmero adimensional llamado nmero de potencia,

Np. Dicho valor determina la potencia absorbida por el fluido.
NP
Fuerza Externa Aplicada

Fuerza Inercial del Fluido
(3.4)
Para fines de normalizacin, se definir una nomenclatura y se establecern rangos

recomendables para las proporciones lineales de un fermentador.
3.1.3.1.- Potencia de agitacin en reactores no-gaseados (aire) con fluido ne wtoniano.
El nmero de potencia se define como:

Np
P
5
N Di
3
i
(3.5)
donde P es la potencia, es la densidad del fluido, Ni es la velocidad de rotacin (rpm) y Di

es el dimetro del impulsor. Una vez que el valor de Np es conocido, la potencia requerida
se calcula como:
P N p Ni3 Di5
(3.6)
75
Experimentalmente se determinaron diferentes valores de Np en funcin de Rei. Los

resultados para 5 impulsores se muestran en las Figuras 3.7 y 3.8. All tambin se muestran
los diferentes valores de los parmetros geomtricos.
Figura 3.7.1: Np en funcin del Rei para impulsores del tipo turbina Rushton (1), canalete
(2) y hlice (3). 7
76
Figura 3.7.2: Dimensiones y especificaciones para Figura 7.1. Turbina Rushton (1),
canalete (2) y hlice (3). 8
Figura 3.8.1: Np en funcin del Rei para impulsores del tipo ancla (1) y tornillo helicoidal
(2). 9
8
9

77
Figura 3.8.2: Dimensiones y especificaciones para Figura 1.1. Ancla (1), tornillo helicoidal
(2). 10
El valor de Np y P va a depender del rgimen de flujo. Dado que tres regmenes de flujo
pueden ser identificados, las siguientes simplificaciones se pueden usar:
En rgimen laminar (Rei < 10)
P k1 liq Ni2 Di3
(3.7)
P N 'p Ni3 Di5
(3.8)
En rgimen turbulento
Para impulsores tipo ancla y tipo tornillo helicoidal, el flujo laminar persiste hasta Rei =
100.
Tanto k1 como NP son valores constantes que deben ser especificados. Algunos valores se
muestran en la Tabla 1.
10
78
Tabla 1: Constantes en ecuacin (3.7) y (3.8).
Tipo de Impulsor
Turbina Rushton
Canalete
Hlice
Ancla
Cinta Helicoidal
k1
N P'
(Rei = 1) (Rei = 105 )
70
5-6
35
2
40
0,35
420
0,35
1000
0,35
Con las Figuras 3.7 y 3.8, se puede calcular la potencia de agitacin P, conociendo la
densidad y la viscosidad del caldo, el dimetro del rotor y la velocidad de rotacin. Como
una gua, se puede decir que:
Velocidad de rotacin en reactores de laboratorio: 200-1000 rpm
Velocidad de rotacin en reactores industriales: 50-300 rpm
Qu pasa si proporciones geomtricas difieren de Figura 2.7 o 2.8? En ese caso, se debe
aplicar una correccin, la cual se basa en la siguiente ecuacin:
P Pf
( Dt / Di ) ( H L / Di )
( Dt / Di ) f ( H L / Di ) f
(3.9)
donde subndice f representa los datos de las Figuras 7 y 8.

Qu pasa si el reactor tiene 2 o ms rotores?
Se debe calcular la potencia por:
Pi i P1
(3.10)
Donde i es el nmero de rotores en el sistema y P1 es la potencia calculada para 1 rotor.

3.1.3.2.- Potencia de agitacin en reactores gaseados (aire) con fluido ne wtoniano.
Cuando existe aireacin, se observa una baja de la potencia necesaria del orden del 40-60%,
en los rangos usuales de aireacin. Lo anterior se aprecia claramente en la Figura 3.9,
79
donde Na representa el nmero de aireacin, P representa la potencia sin aireacin y Pg

representa la potencia con aireacin. El nmero de aireacin se define como:
Na
Fg
(3.11)
Ni Di
Figura 3.9: Relacipn entre la potencia con y sin aireacin y el nmero de aireacin Na.
(1) Turbina de 8 paletas; (2) Turbina de disco Rushton ; (3) Turbina de 4 paletas.
La potencia con aireacin se puede calcular mediante la ecuacin de Michel y Miller

(1962):
P 2 Ni Di3
Pg K
F 0, 56
g
0, 45
(3.12)
Al usar el sistema internacional de unidades, SI, se recomienda un valor de K = 1 para

volmenes de fermentacin mayores que 1 m3 y K = 0,72 para tamaos menores.
Otra correlacin til es (Hughmark, 1980):

Pg
Fg
0,10
P
NiVL
0, 25
Ni2 Di4
2/ 3
g Wi V
0,20
(3.13)
Donde Wi : ancho del impulsor; g: aceleracin de gravedad; VL : volumen de lquido.

3.2.- Aireacin.
80
3.2.1.- Demanda de O2 de un cultivo.

La demanda de oxgeno, NO2 ,se define como: La cantidad de oxgeno requerida por
unidad de tiempo y por unidad de volumen de cultivo. La demanda de O2 de un cultivo
est dada por:
NO2
X
YX / O2
(3.14)
En ecuacin (3.14), el valor de YX/O2 debe ser calculado desde estequiometra. Otra
definicin comnmente usada est dada por:
nO2 NO2
YX / O2
(3.15)
Esta ltima ecuacin no es otra cosa que la demanda especfica de oxgeno, cuyas unidades
tpicas son g O2 / g biomasa h.
Los valores ms usuales de NO2 estn alrededor de 50 a 200 m- moles de O2 /L h (1.6-3.2 g
O2 / L h). Valores superiores a 120 m- moles de O2 /L h son difciles de satisfacer en equipos
de diseo estndar y en condiciones de operacin econmicas.
3.2.1.1.- Condiciones que afectan la demanda de oxgeno
Especie celular
Naturaleza de fuente de carbono: Sustratos ms fcilmente biodegradables, mayor

es la demanda de oxgeno. Ej: Para Penicillium, las velocidades mximas de
consumo de oxgeno han sido 5.5, 6.1 y 12 mmol l-1 h-1 para lactosa, sucrosa y
glucosa, respectivamente.
Concentracin de O2 : Cuando el nivel del oxgeno disuelto cae bajo cierto valor, la
demanda de O2 tambin depende de la concentracin de O2. La dependencia de nO2
con la concentracin de oxgeno molecular se muestra en la Figura 3.10. Si la
concentracin de oxgeno est sobre la concentracin crtica de O2 , nO2 es constante
e independiente del O2 . Por el contrario, si cO2 < cO2,crit , la demanda especfica de
oxgeno depende linealmente de la concentracin de O2 .
81
Figura 3.10: Efecto de la concentracin de O2 en un cultivo.
3.2.2.- Proceso de transferencia de O2 .

En un proceso aerbico, las molculas de oxgeno deben vencer una serie de resistencias al
transporte antes de ser utilizadas por la clula. De acuerdo a Doran11 , 8 pasos de
transferencia de masa estn involucrados en el paso del oxgeno desde el interior de la
burbuja de aire al interior de la clula. Estos pasos se muestran esquemticamente en la
Figura 3.11.
(i)
Transferencia desde el interior de la burbuja a la interfase gas-liquido: Etapa

rpida.
(ii)
Movimiento a travs de la interfase gas-lquido. La interfase posee una

resistencia despreciable.
(iii)
Difusin a travs de una capa de lquida estancada que rodea la burbuja. Debido
a la baja solubilidad del oxgeno en soluciones acuosas, se puede suponer que
esta etapa domina la transferencia de masa gas-lquido.
11
Bioprocess Engineering Principles de Pauline Doran
82
(iv)
Transporte en del seno del lquido. En lquidos no viscosos, los gradientes de

concentracin son minimizados en reactores bien mezclados. En lquidos
viscosos, esto no necesariamente se cumple, y esta resistencia comienza a ser
importante.
(v)
Difusin a travs de una capa de lquido estancado que rodea a la clula.

Cuando la biomasa esta suspendida, la capa de lquido estancado que rodea la
clula es muy delgada en comparacin a la capa que se forma en la burbuja,
dado que la clula es mucho ms pequea que la burbuja de aire. As, esta
resistencia puede ser despreciada. En caso de agrupaciones de clulas muy
grandes (biofilms), la resistencia en esta zona puede ser significativa.
(vi)
Movimiento a travs de una interfase lquido-clula.
(vii)
Si las clulas estn floculadas o adheridas a un soporte slido, existe difusin a

travs del slido hasta la clula individual. Esta resistencia depende del tamao
del flculos o biopelcula. Si las clulas estn suspendidas, esta etapa
desaparece.
(viii)
Transporte a travs del citoplasma al sitio de reaccin. Generalmente se

desprecia por efectos de las distancias involucradas.
83
Figura 3.11: Etapas para la transferencia de oxgeno desde las burbujas de gas hasta la
clula.
3.2.2.1.- Transferencia de O2 en la etapa limitante gas-lquido.

Como se indic en el punto anterior, cada proceso de transporte de oxgeno involucra una
cierta velocidad, pero el proceso global se realizar a la velocidad del paso ms lento,
llamado paso limitante. En el caso de la transferencia de oxgeno desde el aire a la clula, el
paso limitante es la transferencia desde la burbuja hacia el seno del fluido a travs de la
pelcula de lquido alrededor de la burbuja de aire (fase (iii)).
Para la determinacin de la velocidad de transferencia de oxgeno (VTO) se hace uso de la
hiptesis de las 2 pelculas estticas, una a cada lado de la interfase, a travs de las cuales se
producen los gradientes de presin parcial y concentracin que inducen el transporte de O2 .
La Figura 3.12 muestra la situacin de una interfase lquido- gas que contiene un
componente A.
Para determinar la velocidad de transferencia por unidad de volumen de fluido, se puede
realizar el siguiente razonamiento:
En estado estacionario, la velocidad de transferencia de masa de A a travs de la capa de
gas estancado puede escribirse como:
WAG kG a c AG c AG ,i
(3.16)
A su vez, para la velocidad de transferencia de masa en la capa de lquido estancado se

tiene que:
WAL k L a cAL ,i cAL
(3.17)
84
Figura 3.12: Gradientes de concentracin para la transferencia de masa lquido-gas.
En las ecuaciones (3.16) y (3.17), kG es el coeficiente de transferencia de masa en fase gas

(en m s-1 ) y kL es el coeficiente de transferencia de masa en fase lquida (en m s-1 ). A su
vez, a es el rea interfacial disponible para la transferencia de masa por unidad de volumen
(en m2 m-3 ). En este punto, supongamos que existe equilibrio en la interfase lquido-gas, y
que las concentraciones c AG , i y c AL ,i estn relaciondas. Para concentraciones diluidas (como
lo es el oxgeno en el agua), c AG , i es una funcin lineal de c AL ,i , as:
c AG ,i m c AL, i
(3.18)
donde m es el coeficiente de particin o factor de distribucin.

Dado que c AG , i y c AL ,i son difciles de medir, se deben trabajar las ecuaciones (3.16) y
(3.17) para eliminarlas de las ecuaciones, usando para eso la ecuacin (3.18). As,
reemplazando la ecuacin (3.18) en las ecuaciones (3.16) y (3.17):
WAG
c AG m c AL , i
kG a
(3.19)
W AL c AG ,i
c AL
kL a m
(3.20)
85
Ahora, multiplicando la ecuacin (3.17) por m y dividiendo la ecuacin (3.16) por m, se

tiene:
c AG ,i
WAG
c
AG
kG a m m
m
(3.21)
W AL m
m cAL ,i m c AL
kL a
(3.22)
Despejando c AG ,i / m de ecuacin (3.21) y m cAL, i de la ecuacin (3.22):
c AG , i cAG WAG 1
m
m kG a m
m cAL ,i
W AL m
m cAL
kL a
(3.23)
(3.24)
Reemplazando la ecuacin (3.23) en ecuacin (3.20) y la ecuacin (3.24) en la ecuacin

(3.22), se puede eliminar las concentraciones en la frontera lquido-gas:
W AL cAG WAG 1

c AL
kL a m k G a m
(3.25)
W m
W AG
c AG AL
m c AL
kG a
kL a
(3.26)
Ahora, en estado estacionario WAL WAG WA . As, despejando WA de las ecuaciones

(3.25) y (3.26), se tiene:
1
c AG
1
WA
c AL
k L a m kG a m
(3.27)
Multiplicando la ecuacin (3.27) por m se tiene:
m
1
WA
c AG m cAL
k L a kG a
(3.28)
1
m
WA
cAG m cAL
kG a kL a
(3.29)
Ahora, la ecuacin (3.26):
Dividiendo la ecuacin (3.29) por m:
1
1 c AG
WA
c AL
kG a m kL a m
(3.30)
86
Definiendo un coeficiente de transferencia de masa total, tanto en la fase lquida como en la

fase gas, se tiene:
1
KG a
1
KL a
1
m
kG a k L a
(3.31)
1
1
kL a k G a m
(3.32)
Donde
KG = coeficiente de transferencia de masa total en fase gas.
K L = coeficiente de transferencia de masa total en fase lquida.
As, la velocidad de transferencia de masa en sistemas gas-lquido puede ser expresada

como:
WA KG a c AG m cAL
(3.33)
WA K L a AG cAL
m
(3.34)
Dado que m c AL es igual a la concentracin en la fase gas que est en equilibrio con
c AL ( c*AG ) y, a su vez, c AG / m es igual a la concentracin de A en fase lquida en equilibrio
con c AG ( c*AL ), entonces las ecuaciones (3.33) y (3.34) son:
WA KG a c AG c *AG
(3.35)
WA K L a c*AL cAL
(3.36)
Dado que el O2 es pobremente soluble en lquido, la resistencia a la transferencia de masa

en la fase liquida es la domina, por lo tanto, k G a k L a . As, de la ecuacin (3.32),
k L a K L a . Por lo tanto:
WO2 k L a cO* 2 cO2
(3.37)
Dado que el parmetro a es muy difcil de evaluar experimentalmente, se evalua

experimentalmente el parmetro completo k L a , llamado simplemente k L a . ste
parmetro tiene unidades de s-1 .
87
La diferencia entre la mxima posible concentracin en el lquido ( cO*2 ) y la actual

concentracin ( cO2 ) representa la fuerza impulsora de la transferencia de masa en este
sistema.
3.2.2.2.- Efecto de diferentes factores sobre la velocidad de transferencia de O2 .

a.- Tempe ratura:
La temperatura afecta principalmente la solubilidad del O2 y el valor del coeficiente de

transferencia de masa. En cuanto a la solubilidad, a medida que aumenta la temperatura, la
solubilidad del oxgeno decrece. Lo anterior reduce la fuerza impulsora de la transferencia
de masa, la diferencia c*O2 cO2 .La solubilidad en agua pura entre 0 y 36 C puede ser
calculada como:
c*O2 14,161 0, 3943 T 0,007714 T 2 0, 0000646 T 3
(3.38)
A su vez, la difusividad del O2 en la capa de lquido estancado alrededor de la burbuja

aumenta con el incremento de la temperatura. As, el efecto neto de T sobre la VTO
depende del rango de T. Entre 10 y 40 C, el incremento de T generalmente incrementa la
velocidad de transferencia de oxgeno. Sobre los 40 C, la solubilidad del O2 cae
significativamente, afectando adversamente la fuerza impulsora de transferencia de masa.
b.- Tamao de Burbuja
La eficiencia de la transferencia liq-gas depende en gran medida de las caractersticas de las

burbujas en el medio lquido, afectando as el kLa. La ms importante propiedad de las
burbujas de aire en el reactor es su tamao. Porqu?
Mayor rea interfacial se logra si el gas se dispersa en pequeas burbujas.
Burbujas ms pequeas tienen menores velocidades, permaneciendo ms tiempo en

el reactor y permitiendo mayor transferencia de O2 a la fase lquida.
88
As, pequeas burbujas crean altas tasas de retencin de gas (gas hold- up), la cual se define
como la fraccin volumen que ocupa el gas en el reactor:
VG
VG VL
(3.39)
Donde VG es el volumen de gas, y VL es el volumen de lquido en el reactor.

No siempre burbujas pequeas son sinnimo de una eficiente transferencia de materia.
Burbujas con dimetros menores a 1mm se deben evitar, especialmente en caldos viscosos.
Lo anterior debido a que muy pequeas burbujas quedan demasiado tiempo en el lquido
por efecto de la reduccin de velocidad. As, no se aprecian mejoras en las VTO. Por otro
lado, burbujas de dimetros menores a 3 mm reducen el kL debido al efecto de la tensin
superficial. Pequeas burbujas generan burbujas de superficie inmvil y baja circulacin de
gas interno.
c.- Presin de gas usado para oxigenar y presin parcial del oxgeno.
La presin del gas usado para oxigenar y la presin parcial de o2 afectan el valor de cO*2 .
La relacin de equilibrio entre estos parmetros para soluciones diluidas esta dada por la
ley de Henry:
pO2 pT yO2 H cO*2
(3.40)
Donde pO2 es la presin parcial del O2 en el gas, pT es la presin total de gas, yO2 es la
farccin molar de oxgeno en el gas, H es la constante de Henry y cO*2 es la solubilidad. De
esta manera, se puede incrementar la VTO usando las siguientes mejoras:
aire enriquecido con O2 u O2 puro.
Aireacin con aire comprimido a mayor presin.
3.2.3.- Balance de oxgeno en un bioreactor discontinuo.
Una vez determinada la forma en que se transfiere el O2 desde la fase gas a la fase lquida,
se puede plantear la ecuacin general del balance de oxgeno para un bioreactor
discontinuo:
89
dcO2 , L
dt
k L a c*O2 cO2 , L
X
YX / O2
(3.41)
Para que el cultivo pueda crecer sin limitacin de oxgeno, el suministro de oxgeno debe al
menos igualar la demanda de oxgeno por el cultivo, esto es:
k L a cO*2 cO2 , L
X
YX / O2
(3.42)
As, el parmetro k L a es usado para caracterizar la capacidad transferencia de O2 al

fermentador. Si k L a es pequeo, la habilidad del sistema para entregar oxgeno es pequea.
Se puede usar la ecuacin (3.42) para deducir 2 importantes relaciones:
Concentracin de biomasa mximo, Xmax: Este valor se obtiene cuando la fuerza

motriz de transferencia de masa es la ms alta posible, es decir, cO2 , L = 0. As:
xmax
kL a cO*2
(3.43)
YX / O2
Coeficiente de transferencia de masa volumtrico mnimo, k L amin : Este valor es el

valor mnimo para obtener una concentracin de O2 superior a la cO2 , crit :
k L amin
YX /O2
(cO* 2 cO2 ,crit )
(3.44)
3.2.4.- Determinacin del coeficiente volumtrico de transferencia de masa, kLa.

Para la adecuada operacin de un fermentador se hace necesario conocer el valor del
coeficiente volumtrico de transferencia de O2 . Generalmente, este parmetro se determina
experimentalmente, aunque tambin existen variedad de correlaciones para distintos tipos
de sistemas. A continuacin, se presentan los mtodos ms conocidos.
3.2.4.1.- Mtodo qumico del Sulfito de Sodio (Cooper et al., 1944).
90
Se basa en la rpida reaccin qumica de oxidacin del sulfito a sulfato mediante O2 . Se

reemplaza el medio por solucin de sulfito de sodio (sulfato cprico como catalizador) y se
burbujea aire por un cierto tiempo. La reaccin puede ser expresada como:
2 SO42 O2 2 SO32 0
(3.45)
Hay un rango de concentracin de sulfito de sodio (entre 0,04 y 1 N) para el cual la

reaccin es tn rpida que la concentracin de O2 puede suponerse cero. Adems, la gran
velocidad de reaccin permite suponer que la fase limitante es la transferencia de masa.
Bajo estas condiciones, se tiene que:
kLa C *
Sulfitoinicial Sulfito final

t
(3.46)
La gran ventaja de este procedimiento es que no requiere ningn equipo analtico especial
(slo equipo colorimtrico) y es muy til para cuantificar cambios en el diseo de equipos.
Su principal desventaja es que no usa un caldo de cultivo real, lo cual incide en
determinaciones de kLa mucho mayores a los obtenidos por otras tcnicas, por lo que no es
una determinacin muy realista.
3.2.4.2.- Mtodo dinmico sin microorganismos
Este mtodo dinmico se basa en la medicin de la concentracin de oxgeno en el tiempo

cuando existe absorcin o desorcin de oxgeno. Al igual que en el mtodo qumico, en este
caso NO2 = 0. As, la ecuacin de variacin de O2 (ecuacin (3.41)) puede ser integrada
entre un tiempo t2 y t1 :
c*O cO ,2
2
ln *2
kL a t 2 t1
cO cO ,1
2
(3.47)
La tcnica por absorcin consiste en eliminar el O2 de la fase lquida, burbujeando

nitrgeno, por ejemplo, hasta que cO2 = 0. Luego, se inyecta nuevamente aire, midiendo el
incremento del oxgeno en la fase lquida con el tiempo. As, cO2 ,1 = 0 a t1 = 0 y la ecuacin
(3.47) es:
cO , L
ln 1 *2
cO2
k L a t
(3.48)
91
La tcnica por desorcin consiste en inyectar aire hasta que la concentracin de saturacin
sea lograda. Una vez lograda, se corta la aireacin y se inyecta nitrgeno, decreciendo la
concentracin de O2 . Esta disminucin es medida en funcin del tiempo. As, cO2 ,1 cO*2 a t1
= 0 y la ecuacin 17 es:
cO*
ln 2
cO , L
2
k L a t
(3.49)
vs
En ambos casos, k L a puede ser determinada desde la pendiente del grfico ln f cO2
tiempo. La Figura 3.13 muestra un ejemplo.
Figura 3.13: Descripcin esquemtica de la tcnica dinmica desorcin-absorcin de

oxgeno para condiciones inertes de medicin.
3.2.4.3.- Mtodo dinmico directo de Humphrey (Taguchi y Humphrey, 1966).
En este caso la medicin se realiza en el fermentador durante el crecimiento de un cultivo

activo, registrndose el oxgeno disuelto. El proceso tiene 2 etapas:
Etapa 1: Durante la fermentacin se corta el suministro de aire y se registra la disminucin
de O2 disuelto. Esta disminucin es igual al consumo de oxgeno por la respiracin de los
microorganismos. As, la pendiente de la curva es la demanda de O2 :
x
YO2 / X
dcO2
dt
(3.50)
92
La Figura 3.14 muestra esquemticamente la etapa 1 y 2
Figura 3.14: Esquema del mtodo dinmico directo.
Etapa 2: El flujo de aire se repone antes que se alcance la concentracin crtica de oxgeno,
cO2 , crit (bajo este valor la velocidad de metabolismo se hace dependiente de la concentracin
de oxgeno, pudindose causar daos irreversibles en los microorganismos). Como

aproximacin, se puede indicar que cO2 , crit cO*2 . Bajo estas condiciones se cumple que:
cO2 c*O2
1 x dcO2
kL a YO2 / X
dt
(3.51)
El valor de NO2 es conocido (determinado en etapa 1) y se mantiene constante durante esta

etapa. Adems, conocemos el valor de cO*2 y el valor de cO2 para cada tiempo. As, para
cada tiempo sacamos el valor de dcO2 / dt y con eso construimos un grfico de
x dcO
2
v/s cO2 , obteniendo un perfil como el que se muestra en la Figura 3.15. El

dt
YO2 / X
recproco de la pendiente de esa curva es el valor de kLa.
93
Figura 3.15: Esquema que muestra el grfico de la ecuacin (3.51).
3.2.5.- Determinacin del coeficiente volumtrico de transferencia de masa kLa a

travs de correlaciones.
Cuando no es posible medir el valor de kLa en nuestro sistema, se pueden usar

correlaciones. Existe gran variedad de correlaciones para diferentes tipos de reactores,
agitadores, Re, etc. Se deben elegir correlaciones cuya determinacin se realiz en un
sistema similar al que se desea estudiar. En general, las correlaciones para kLa presentan la
forma general:
Pg
k L a K vs N
V
(3.52)
donde vS : velocidad superficial del aire; Pg : potencia de agitacin con aireacin; V:

Volumen de lquido de reactor y N: frecuencia de rotacin del impulsor. Los valores de K,
, y son evaluados para el caso especfico de inters. Una ecuacin que ha tenido
aceptacin es la presentada por Richards (1961) 12 , ecuacin semi- terica que est dada por:
0, 4
Pg
kLa K
V
12
vs0,5 N 0,5
(3.53)
Richards , JW. Studies in aeration and agitation. Progress in Industrial Microbiology, 3 141, (1961).
94
Existen varias correlaciones en la literataura especializada. Una excelente revisin de stas

fue hecha por Garca-Ochoa y Gomez (2009) 13 . Para mayor informacin, revise esta cita.
3.2.6.- Condiciones de operacin.
En la prctica, la transferencia de oxgeno ofrece dificultades, por lo que en ocasiones las

operaciones industriales se realizan bajo limitacin de O2, con la consiguiente disminucin
en productividad y peligro de dao fisiolgico. Los problemas principales en esta tarea son:
Efecto temperatura: Si aumenta la T, disminuye solubilidad de O2. A 30 C, la

solubilidad de O2 en agua pura es de 7 mg/L.
Efecto de Solutos: Si aumenta concentracin de solutos tales como sales, cidos y

azucares, disminuye la solubilidad de O2 . Se han desarrollado correlaciones
empricas para corregir los valores de la solubilidad del oxgeno en agua (Quicker et
al., 1981). En una fermentacin tpica, la solubilidad del oxgeno es entre un 5 a
25% menor que en agua debido al efecto de solutos.
Resistencia disolucin O2, es decir, bajo valor de KLa. En la Tabla 2 se muestran

algunos valores tpicos de VTO y KLa en funcin del tamao del reactor. Estos
valores no consideran casos extremos, en los que ka magnitud de estas cifras pueden
variar considerablemente.
Tabla 2: Valores tpicos de VTO y KLa.14

VTO (mmol/L h)
Matraz
30-60
kLa (h-1)
200-400
F. Laboratorio
F. Industrial
60-120
70-100
60-500
100-400
Todo lo anterior incide en que sea dificultoso alcanzar altos valores de VTO.
En la mayora de los casos, la inyeccin de oxgeno se realiza a travs de la aireacin. Para
lo anterior, es necesario conocer la velocidad de flujo de aire que permita alcanzar cierta
13
Garcia-Ochoa F, Go mez E. Bioreactor scale-up and oxygen transfer rate in microbio l processes: An
overview. Biotechnology andvances, 27, pp 153-176 (2009).
14
Acevedo F, Gentina JC, Illanes A. Fundamentos de Ingeniera Bioqumica (2002).
95
concentracin de oxgeno en el lquido. Cmo se calcula la aireacin? Acevedo et al.

(2002)15 proponen calcular el flujo de aire en funcin de la demanda de oxgeno y la
eficiencia de absorcin de O2 en el lquido, valor que vara normalmente entre 3 y 30%. La
tasa especfica de aireacin, que se entrega normalmente en vvm (volumen de aire por
volumen de lquido por minuto,
Laire
) se calcula como:
Lliquido min
vvm
F
R T
N O2
V
P
1
1
f O2 / aire
(3.54)
donde f O2 / aire es la fraccin molar del O2 en aire (0,21), R es la constante de los gases
ideales (0,082 mol L/atm K), T es la temperatura y P la presin ambiente.
En laboratorio es comn usar 1-1,5 vvm, mientras que a nivel industrial estas cifras se
reducen a 0,2-0,7 vvm.
3.3.- Eje mplos de aplicacin
1.- Una fermentacin se lleva a cabo en un reactor con un caldo de densidad promedio
=1200 kg/m3 y una viscosidad de 0,2 cp, siendo agitado a una velocidad de 90 rpm. Fue
introducido aire a travs de un difusor a una velocidad de 0,4 vvm. El nmero de aireacin
se relaciona con el trmino Pg / P como se muestra en la Figura 3.16, para un sistema no
aireado. El fermentador fue equipado con 2 sets de turbinas Rushton y 4 deflectores. Las
dimensiones del estanque, agitadores y deflectores se muestran a continuacin:
Diametro de estanque, Dt = 4 m;
Dimetro del impulsor, Di = 2 m;
Ancho del deflector, Wb = 0,4 m;
Profundidad del lquido, H L = 6,5 m.
Calcule:
a.-La Potencia del sistema no aireado r;
b.- La potencia del sistema aireado;
15
Acevedo F, Gentina JC, Illanes A. Fundamentos de Ingeniera Bioqumica (2002).
96
c.- kLa calculada a travs de la correlacin de Richards, usando un valor de K = 2.

1,2
Pg/P
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0
0,05
0,1
0,15
0,2
Na
Figura 3.16: Relacin entre la razn Pg / P y el nmero de aireacin, Na.
Solucin
a.- Los pasos para calcular la potencia aireada y no aireada es la siguiente: 1.- Calcular el
valor de Re i ; 2.- Calcular, a travs de alguno de los grficos Np vs Rei, el nmero de
potencia; 3.- Calcular la potencia aireada (P) a travs de la ecuacin (3.6); 4.- Calcular el
factor de correcin geomtrica (ecuacin (3.9)) si corresponde; 5.- Calcular el valor de Pg a
travs de la correlacin de Michel y Miller a travs de algn grfico Pg/P vs Na; 6.Calcular para el nmero de impulsores.
Aplicando estos pasos al ejercicio:
1.- Clculo del Rei :
kg
1,5 rps 22 m 2 1200 3
N D
m 3, 6 105
Re i i
kg
0, 02
s m
2
i
(3.55)
As, el flujo es turbulento (Rei > 1x104).

2.- Usando el grfico Np vs Rei para una turbina Rushton (Figura 7.1), se aprecia que Np =
6.
3.- Ahora, calculamos P:
97
3 1
5
kg
P N p Ni3Di5 6 1,5 3 2 m 5 1200 3
s
m
kg
P 7, 776 105 2 3 W 777, 6 kW

m s
(3.56)
El valor anterior es slo para 1 impulsor. Dado que en este sistema hay 2 impulsores, se
tiene que:
P 777, 6 2 1555, 2 kW
(3.57)
4.- Debemos revisar si el sistema nuestro concuerda con el sistema de donde sacamos el
valor de Np . As:
Dt 4
2
Di 2
(3.58)
H L 6, 5
3, 25
Di
2
(3.59)
Luego, al comparar con las tablas ( Dt / Di 3 ; H L / Di 3 ) podemos ver que no coinciden.

As, debemos calcular el factor de correccin:
P Pf
( Dt / Di ) ( H L / Di )
2 3, 25
1555, 2
1321, 67 kW
( Dt / Di ) f ( H L / Di ) f
3 3
(3.60)
5.- Calculamos ahora el valor de Pg usando la Figura 16. Para lo anterior es necesario
calcular Fg y Na.
42
m3
m3
Fg 0, 4 VL 0, 4 6,5 32, 67
0,5445
min
s
(3.61)
m3
0, 5445
Fg
s
Na
0, 045
3
N i Di 1,5 1 23 m 3

s
(3.62)
Ahora
As, usando la Figura 16, se puede obtener un valor aproximado de:

Pg
P
0,74
(3.63)
As, calculamos el valor de Pg :

98
Pg 0, 74 1321,66 978 kW
(3.64)
c.- Para calcular el valor de KLa, necesitamos el valor de vS :
m3
0,5445
s 0, 0433 m
vS
12,57 m2
s
(3.65)
As, usando la correlacin:

Pg
K La K
V
0,4
0,4
0, 5
s
0, 5
978 103
0,5
0,5
-1
2
0, 0433 1, 5 21,81 s (3.66)
81,68
2.- Se dispone de un fermentador cilndrico de 42.000 L de volumen de trabajo, agitado con

dos rotores de turbina de disco, HL/Dt =1,3, Di/Dt =0,3 y motor de 100 kW para el agitador.
El motor y sistema de transmisin y eje tienen una eficiencia energtica global de 72%. El
fermentador se quiere usar para un cultivo cuyo caldo tendr una densidad de 1115 kg/m3 y
una viscosidad de 38 cp y que requerir de una aireacin de 0,72 vvm. Determinar una
velocidad adecuada de rotacin del agitador si se trabaja en un rgimen turbulento.
Solucin
Para este caso, la solucin es iterativa. Suponiendo la que relacin entre P y Pg puede ser
calculada por la correlacin de Michel y Miller, entonces, se puede hacer el siguiente
clculo iterativo para que se cumplan las siguientes condiciones:
1.- Rei mayor que 1x104 ; 2.- Np entre 5 y 6; 3.- Pg/P entre 0,8 y 0,5.
El primer paso es determinar el valor de P para 1 impulsor. Dado que la eficiencia
energtica es de 72%, la potencia total para el sistema es de 72 kW. Como tenemos 2
rotores, entonces el valor de P para 1 impulsor es de 36 kW. Adems:
D2
D3
VL H L t 1, 33 t
4
4
(3.67)
Despejando Dt en ecuacin (3.67):

Dt 3, 452 m
(3.68)
As:
99
Di 1, 036 m
(3.69)
H L 4,5 m
(3.70)
kg
Ni 1, 0362 m 2 1115 3
N D
m
Re i i
kg
0, 038
s m
(3.71)
Luego, se tiene que:

2
i
Np
kg
36000 2 3
m s
5
N Di Ni 3 1, 0365 m 5 1115 kg

3
m
3
i
(3.72)
Corrigiendo el valor de P (36 kW) en funcin del factor de forma

f
( Dt / Di ) ( H L / Di )
3,33 4,33
1, 27
( Dt / Di ) f ( H L / Di ) f
3 3
(3.73)
P
36
28346, 46 W
f 1, 27
(3.74)
Luego:
Pf
Ahora calculamos para un rgimen laminar y turbulento:

a.- Turbulento: en este caso, Np = 6. Despejando Ni desde ecuacin (3.72):
Ni 3
N p Di5
kg
28346, 46 2 3
m s
1, 62 rps
kg
6 1, 0365 m 5 1115 3
m
(3.75)
Reemplazando Ni calculado en (3.71):

1
kg
1,53 1, 036 2 m 2 1115 3
N D
s
m 4,82x10
Re i i
kg
0, 038
s m
2
i
(3.76)
Este valor es superior a 1x104 , por lo tanto, es flujo turbulento y cumple con los
requerimientos.
100
3.- En un bioreactor discontinuo con biomasa aerbica trabajando a 18 C, se obtuvieron

los siguientes valores de oxgeno disuelto en el lquido:
Tiempo
(min)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
10,4
11
11,5
12
12,5
13
13,5
14
14,5
15
15,5
16
cO2 , mg/L
5
4,67
4,33
3,97
3,66
3,34
3,03
2,72
2,42
2,14
1,86
1,7
2,37
3
3,26
3,5
3,54
4,22
4,45
4,65
4,83
4,94
5,07
Determine el valor de kLa a travs del mtodo dinmico y obtenga el valor de qO2 si la masa
de clulas secas es 2 g/L.
Solucin
Para encontrar el valor de kLa a travs del mtodo dinmico, la metodologa es como se
mostr en el documento, es decir, se calcula NO2 en la primera parte del experimento (en
este caso, entre t = 0 y t = 10 min), para posteriormente calcular el kLa.
Paso 1:
Graficamos cO2 vs t, ajustamos una lnea recta y calculamos el NO2 .
101
OD, mg/L
Calculo consumo de oxgeno

6
5
4
3
2
1
0
y = -0,3153x + 4,9527
R2 = 0,9988
10
12
tiempo, min
Datos experimentales
Ajuste
Figura 3.17: Clculo de NO2 a travs del mtodo dinmico.
As, de la lnea recta, podemos encontrar que NO2 = 0,315 mg O2 /L min.

Paso 2: En este caso, primero calculamos la derivada dc / dt a travs de la siguiente
frmula:
dc ci ci 1
dt ti ti1
(3.77)
Por ejemplo, para el intervalo entre 11 y 11,5 min, se tiene que:

dc 3 2,37
1, 26
dt 11, 5 11
(3.78)
Para establecer claramente a que concentracin es la derivada calculada por la ecuacin

(3.77), entonces se aproxima una concentracin promedio, cO2 .
Adems, debemos calcular el valor de cO*2 a 18 C. Aplicando la ecuacin (3.38):
c*O2 18 9,024 mg/L
(3.79)
Finalmente, calculamos el valor de NO2 dc / dt . Los resultados se muestran en la Tabla 3.
Tabla 3: Resultados para el clculo de kLa entre t = 11 min hasta t = 16 min.
cO2 cO* 2
2,685 -6,3391888
3,13 -5,8941888
3,38 -5,6441888
3,52 -5,5041888
cO2
dc / dt
1,26
0,52
0,48
0,08
NO2 + dc / dt
1,5753
0,8353
0,7953
0,3953
102
3,88
4,335
4,55
4,74
4,885
5,005
-5,1441888
-4,6891888
-4,4741888
-4,2841888
-4,1391888
-4,0191888
1,36
0,46
0,4
0,36
0,22
0,26
1,6753
0,7753
0,7153
0,6753
0,5353
0,5753
Una vez calculados estos valores, se grafica cO2 c*O2 vs NO2 + dc / dt , como se muestra en
la Figura 3.18. All, se aprecia que debemos descartar una serie de puntos para poder
obtener una tendencia lineal. Cmo se eliminan puntos? Se descartan aquellos que no
tienen una tendencia de acuerdo a lo esperado. Por ejemplo, en la Tabla 3 se puede eliminar
cO2 = 3,52 y cO2 = 3,88, dado que los valores de dc/dt son muy diferentes o no cumplen con
la tendencia con respecto al resto de los puntos.
OUR + dc/dt
c-c*
-1 0
-2
0,5
1,5
-3
-4
-5
-6
-7
datos experimentales
Figura 3.18: Grfico cO2 cO* 2 vs NO2 + dc / dt sin eliminacin de puntos.

Una vez eliminados los puntos mencionados anteriormente, se puede calcular la pendiente
de la curva (Figura 19). En este caso, an cuando R2 sea menor a 0,7, el valor de la
pendiente es representativo. Por ejemplo si se eliminan ms puntos ( cO2 = 3,13 y cO2 =
3,38), el valor de R2 mejorara a 0,98 (Ver Figura 20), sin embargo, el valor de la pendiente
vara slo en un 1%.
103
OUR + dc/dt
c-c*
-1 0
-2
0,5
1,5
-3
-4
-5
y = -2,2295x - 3,1289
R2 = 0,666
-6
-7
linealizacin
Figura 3.19: Grfico cO2 cO* 2 vs NO2 + dc / dt con eliminacin de puntos.
OUR + dc/dt
c-c*
-1 0
-2
0,5
1,5
y = -2,2104x - 2,8701
R2 = 0,989
-3
-4
-5
-6
-7
linealizacin
Figura 3.20: Tendencia lineal mejorada.
Usando el valor reportado en la Figura 3.19, se tiene que:

k L a 0, 45 min -1
(3.80)
b) Para calcular el valor de nO2 , se tiene que:
nO2
YX /O2
N O2
X
(3.81)
Dado que conocemos el valor de NO2 , calculamos:

nO2
0, 315
0,1575 mg O2 /mg X min
2
(3.82)
104
4.- En un quimiostato simple se realiza una fermentacin aerobia, con D = 0,3 h-1 e YX/O2
=1,45. El fermentador tiene un volumen total de 2000 L, estando lleno en un 75%. Las
relaciones geomtricas son HL/Dt=2, Di/Dt=0,3. El agitador es de dos turbinas de disco de
seis paletas operando a 200 rpm. Experimentalmente, se determin que:
P
kLa 6 g
V
0,9
vs0, 7
(3.83)
donde kLa est en h-1 . La relacin entre la potencia con aireacin y la potencia sin aireacin
puede ser descrita por la correlacin de Michel y Miller. En todo momento, la
concentracin de oxgeno disuelto debe mantenerse en un 10% de la de saturacin. La
temperatura de fermentacin es de 25 C. Cul debe ser la aireacin (vvm) para que la
concentracin celular sea de 5 (g/L)?
Solucin
El objetivo de este ejercicio es calcular el valor de los vvm para lograr una concentracin
de biomasa en el bioreactor de 5 g/L. Dado que:
vvm
Fg
(3.84)
VL
El volumen de lquido es fcil de determinar, por lo que el principal esfuerzo est en

calcular el valor de Fg . A su vez, el valor de Fg depende de la velocidade superficial de
ascensin del gas y del rea transversal del bioreactor :
(3.85)
Fg vs A
El valor de v S se calcula desde la correlacin, por lo que la tarea ahora es calcular el valor
de k La y Pg para reemplazar en la correlacin y determinar v S .
Paso 1: Clculo de k La. Para esto, realizamos el balance de oxgeno en el quimiostato.

Balance de O2 :
VL
dSO2
dt
Q SO2 Q S O2 ,0 k L a SO*2 SO2 VL
X VL
YX /O2
(3.86)
105
En estado estacionario y dividiendo por VL:
0 D SO2 k L a S O*2 S O2
X
YX /O2
(3.87)
Despejando el valor de k La
D SO2
kLa
*
O2
X
YX /O2
S O2
(3.88)
Como se aprecia en la ecuacin (3.88), se necesita calcular el valor de , SO2 y SO*2 para
determinar el valor de k La. Para calcular el valor de , realizamos el balance de masa
microbiano en el reactor:
Balance de biomasa:
VL
dX
Q X 0 Q X g X V L
dt
(3.89)
Dividiendo por VL y en estado estacionario, se tiene que:

D 0, 3 h 1
(3.90)
El valor de SO*2 se obtiene de la correlacin con la temperatura, mientras que de acuerdo al

enunciado, SO2 = 0,1 SO*2 . As, para una temperatura de 25 C:
SO*2 14,161 0,3943 T 0, 007714 T 2 0, 0000646 T 3
(3.91)
Reemplazando datos:
SO*2 8,115 mg/L
(3.92)
SO2 = 0,8115 mg/L
(3.93)
Reemplazando estos datos en la relacin de kLa:

k L a 141, 67 h 1
(3.94)
Paso 2: Clculo de Pg , el que se realiza a travs de la correlacin de Michel y Miller

(ecuacin (3.12)). Dado que el reactor tienen un volumen superior a 1 m3 , entonces el valor
de K = 1. El primer paso es determinar el valor de P sin aireacin a travs de las figuras. Se
sabe que:
106
Dt
3,333
Di
(3.95)
HL
6, 667
Di
(3.96)
Para calcular el Rei, debemos determinar el valor de Di. Si H L 2 Dt , entonces:

Dt
2 VL
2 1,5 m
0, 977 m
(3.97)
Por lo tanto:
H L 1,954 m
(3.98)
Di 0, 293 m
(3.99)
As, se tiene que:

2
kg
3, 333 s-1 0, 293 m 2 1000 3
m 2,86 105
Re i
kg
0, 001
m s
(3.100)
Claramente, el sistema est en rgimen turbulento. De all, dado que es una turbina
Rushton, el valor de NP = 6. Despejando el valor de P desde la relacin del nmero de
potencia NP :
NP
P
Ni3 Di5
(3.101)
P N P Ni3 Di5
(3.102)
Reemplazando datos:
3
3 1
5
5
kg
P 6 1000 3 3,333 0, 293 m
m
s
(3.103)
P 479,73 W
(3.104)
El valor anterior es vlido para 1 impeller. Dado que en el sistema hay 2 impeller, se tiene
que:
P 2 479,73 959, 46 W
(3.105)
Los valores anteriores son vlidos para sistemas con la msimas relaciones geomtricas que
las que se tienen en las grficas y tablas. Sin embargo, el sistema que se tiene en este
107
ejercicio difiere de esas relaciones, por lo que tenemos que calcular el factor de correccin
geomtrico. As:
Dt H L

Di Di
f
Dt H L

Di f Di
1, 57
(3.106)
Por lo tanto, la potencia final sin aireacin est dada por:

(3.107)
P P ' f 1506, 35 W
Paso 3: Clculo de Fg . Para esto, se reemplazar la ecuacin (3.85) en la correlacin de

kLa, para posteriormente despejar Pg . As:
Fg
vs
(3.108)
Reemplazando la ecuacin anterior en la ecuacin (3.83):

0, 9
Pg
kLa 6
V
Fg

A
0,7
(3.109)
Ahora reemplazamos la relacin de Michel y Miller en la ecuacin anterior:

P 2 N D 3 0,45
i
i

0,56
Fg

kLa 6
VL
0, 9
Fg

A
0,7
(3.110)
Despejando el valor de Fg:

1
k a V 0,9 A0, 7 0, 448

L
Fg L
6 P 2 N D3 0,45
i
i
(3.111)
Reemplazando datos, se tiene que:

Fg 0,008334
m3
s
(3.112)
Por lo tanto, los vvm sern:
108
m3
0,008334
Fg
s 60 s
vvm
0, 333 min 1
3
1, 5 m
1 min
VL
(3.113)
De esta manera, los vvm necesarios para mantener una concentracin de biomasa de 5 g/L
es de 0,33.
3.4.- Eje rcicios propuestos

1.- Se dispone de un fermentador cilndrico de 42 m3 de volumen de trabajo, agitado con
dos rotores de turbina de disco, HL/Dt =1,3, Di/Dt =0,3 y motor de 100 kW para el agitador.
El motor y sistema de transmisin y eje tienen una eficiencia energtica global de 72%. El
fermentador se quiere usar para un cultivo cuyo caldo tendr una densidad de 1115 kg/m3 y
una viscosidad de 38 cp y que requerir de una aireacin de 0,72 vvm si se trabaja en un
rgimen turbulento. Se sabe que para estas condiciones, la relacin entre Pg y P esta dada
por la corelacin de Michel y Millar. Determinar una velocidad adecuada de rotacin del
agitador. (Resp: Ni = 1,5-1,6 rps)
2.- Una cierta fermentacin discontinua que tiene una demanda mxima de oxgeno de 1,6
(g/L h), se lleva a cabo en un fermentador de 62.000 (L) de volumen til, provisto de un
agitador de dos turbinas de disco con un motor de 250 kW. La razn HL/Dt es 1,0, mientras
que la eficiencia de absorcin de oxgeno = 19%, la viscosidad es de 2 cp y la densidad de
1.200 (kg/m3 ). Si el motor tiene una eficiencia total de 66% y opera mediante un reductor a
130 rpm, Cul es el mximo dimetro que pueden tener los agitadores si se trabaja en un
rgimen turbulento? (Resp: Di = 1,01 m)
3.- En un fermentador de 1.121 L de medio lquido se realiza una fermentacin discontinua
de una levadura hasta llegar a una concentracin en biomasa igual a 14 g L-1 . La levadura
posee un max igual a 0,23 h-1 , siendo el YX/O2 igual a 1.4 g g-1 . Estime los vvm necesarios
para satisfacer las condiciones de cultivo en el fermentador y el flujo de aire requerido si la
eficiencia de aireacin es de 17%. Considere que el aire es alimentado a 30 C y 2 atm.
Podra estimar un valor del coeficiente volumtrico de transferencia de oxigeno (kLa)
109
sabiendo que al final de la fase exponencial la concentracin de oxgeno disuelto debe ser
al menos de 2,0 mg.L-1 ? La concentracin de oxgeno en saturacin es de 7,5 mg.L-1 .
(Resp: vvm = 0,418; kLa = 418,18 h-1 )
4.- En el desarrollo de un proceso de fermentacin se utiliza un fermentador piloto de 800 L
de volumen total en operacin discontinua. La relacin HL/Dt es 1,0 y Di /Dt es 0,33. El
fermentador est equipado con cuatro vanos deflectores y un agitador con tres rotores tipo
Rushton y se opera con un llenado de 72%. En cultivo discontinuo se desea obtener 28 g
clula/L de una bacteria que crece a 0,44 h-1 con un rendimiento de oxgeno de 1,2 g X/g
O2 . A la temperatura de fermentacin (30 C) el caldo tiene una densidad de 1,05 g/cm3 y
una viscosidad de 8 cp. Para obtener la capacidad de transferencia de oxgeno requerida, se
utilizar aire enriquecido con un contenido de 38% de oxgeno a una presin de 0,3 atm
manomtricas; adems, se desea que la concentracin de oxgeno disuelto no sea menor de
un 15% de saturacin.
a) Determinar el kLa requerido. (Resp: 1624,52 h-1 )
b) Determinar el flujo de aireacin, si la eficiencia de transferencia de oxgeno es 29%.
(Resp: vvm = 0,092)
c) Calcular la potencia de agitacin si se operar a una velocidad de agitacin cinco veces
la mnima para obtener rgimen turbulento. (Resp: Pg = 2,75 kW)
6.- Se dispone de un equipo de 2 rotores que funciona a una velocidad de rotacin constante
igual a 300 rpm, y cuyas caractersticas geomtricas son las siguientes, HL = 1 m, Dt = 0,5
m, Di=0,2 m. Experimentos efectuados durante la fermentacin en discontinuo derivan la
siguiente expresin, que relaciona el kLa con la velocidad superficial del aire en el equipo:
kLa = K * VS0.63
donde la constante K tiene un valor de 232, la VS se mide en m min-1 y el kLa en h-1 . Si la
velocidad de transferencia de oxigeno en un bioreactor discontinuo (VTO) es igual a 1500
mg O2 L-1 h-1 , y se desea que la concentracin en oxigeno sea al menos un 10% de la de
saturacin (C* igual a 7,5 mg.L-1 ), calcule el flujo de aire necesario para esta fermentacin
110
y verifique que los vvm se encuentren dentro de los rangos recomendados para
fermentaciones.
7.- El flujo de aire en 2 fermentadores fue cortado por un corto periodo de tiempo y luego
restaurado. El valor de C* fue determinado en las condiciones de operacin y fue de 7,3
mg.L-1 . Use los valores de oxigeno disuelto tabulados para el reactor A y reactor B y estime
el valor de kLa de ambos sistemas. Cul de los 2 sistemas se aproxima ms a un reactor
industrial? Justifique.
(Resp: Reactor A: 0,18 < kLa < 0,34 min-1 ; Reactor B: 5,6 < kLa < 8,7 min-1 ).
Reactor A:
Tiem
po,
-1 0
min
O2
3, 3,
(mg/
3 3
L)
Reactor B
Tie
mpo 0
,
1
min
O2 3 3
(mg/ , ,
L)
3 3
1
0
1
1
1
2
1
3
1
4
1
5
1
6
1
7
2,
4
1,
3
0,
3
0,
1
0,
0
0,
0
0,
3
1,
0
1,
6
2, 2,
0 4
2,
7
2,
9
3,
0
3,
1
3,
2
3,
2
0,1
33
0,
1
7
0
,
2
0,2
33
0,
2
7
0
,
3
0,
3
3
0,
3
7
0
,
4
0,
4
3
0,
4
7
0
,
5
0,
5
7
0
,
6
0,1
0,
0
0
,
0
0,3
1,
1
1
,
5
2,
1
2,
4
2
,
7
2,
9
3,
0
3
,
1
3,
2
3
,
2
0,0 0,0
33 67
0
,
1
0
2,5 1,2 ,
3
8.- Un quimiostato con recirculacin de clulas, sin purga, opera con 12000 L y una
alimentacin fresca de 6240 L/h, con una concentracin de 1,2 g N/L. La poblacin
microbiana contiene 11% N, el sustrato contiene un 1,21 % y presenta un max de 0,62 h-1 y
un Ks de 0,2 mg N/L. El factor de recirculacin es 1,0. El fermentador tiene un agitador con
dos rotores de turbina de disco, HL/T=1,8 y D/T=0,26 y se airea con 0,8 vvm. La densidad
del caldo es 1,05 g/ml y su viscosidad 4 cp.
a) Determinar el factor de concentracin del separador slido/lquido y la concentracin
celular en el fermentador y en el efluente clarificado, si la velocidad especfica de
crecimiento debe ser 0,35 h-1 . (Resp: c = 1,327; X = 0,196 g/L; X1 = 0,132 g/L)
b) Calcular la velocidad de rotacin del agitador para que la potencia aireada (Pg) sea de 6
kW si se requiere un flujo turbulento. (Resp: 2,55 rps)
111
112

Apuntes de Bioreactores Ver 1-1-2014

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Universidad de Santiago de Chile.

Profesor: Csar Huiliir C.

Captulo 1: Crecimiento Microbiano

Sustrato + clulas productos extracelulares + ms celulas

1.- Cultivo discontinuo:

1.1.- Patrn de crecimiento microbiano.

Un sistema discontinuo se caracteriza por el no intercambio de materia con los alrededores,

a.- Fase de latencia: Etapa de adaptacin de los microorganismos al nuevo ambiente. La

La ecuacin (1.2) se transforma en una derivada cuando t tiende a cero:

La pendiente de esta recta se define como la velocidad especfica neta de crecimiento,

donde X es la concentracin de masa celular (g/l), t es el tiempo y es la velocidad de

As, la ecuacin que describe el cambio de concentracin de biomasa en la zona de

Con la condicin inicial de X = X 0 , en t = t 0 . Integrando la ecuacin (1.5) entre t = 0 y t = t f,

Frecuentemente se expresa la velocidad de crecimiento en trminos del tiempo de

c.- Fase de crecimiento des-acelerado: El crecimiento desacelerado se debe al

1.2.- Cintica de formacin de productos

Figura 2.2: Esquema del proceso de formacin de producto asociado a crecimiento.

b.- Formacin de producto indirectamente asociado a metabolismo energtico: Productos

Figura 2.3: Esquema del proceso de formacin de producto indirectamente asociado a

c.- Formacin de producto no asociado a la formacin de producto: Toma lugar durante la

Figura 2.4: Esquema del proceso de formacin de producto no asociado a crecimiento.

1.3.1.- Expresiones matemticas de formacin de productos

Independiente de la clase de producto, la formacin de producto puede ser definida en

Dependiendo de la forma en que se genera el producto (clasificacin de Gaden), la forma

b.- Formacin de producto indirectamente asociado a metabolismo energtico: Incluye la

Reemplazando ecuacin (1.12) en ec. (1.11), se tiene:

La ecuacin (1.13) fue generalizada por el modelo de Luedeking y Piret (1959):

La ecuacin (1.14) es la ms utilizada en la prctica, ajustando los valores de y a los

c.- Formacin de producto no asociado a crecimiento: La formacin simplemente se

1.4.- Cintica de consumo de sustrato.

El consumo de sustrato puede expresarse matemticamente de diferentes formas,

1.4.1.- Consumo de sustrato en ausencia de formacin de producto.

En este caso, el sustrato se distribuye slo entre el crecimiento y mantencin. As, el

donde ms es el coeficiente de mantencin y est en g sustrato g-1 biomasa s-1 . Este

1.4.2.- Consumo de sustrato con formacin de producto.

El flujo de sustrato en cultivos que forman producto depende de si la formacin est

b.- Producto indirectamente asociado y no asociado a generacin de energa (crecimiento

Consumo de sustrato = Sustrato asociado a crecimiento +

donde qP es la velocidad especfica de formacin de producto, g P g-1 X s-1

Sin formacin de producto:

Con formacin de producto

o Indirectamente asociada a crecimiento:

En la ecuacin (1.30), y se deben determinar experimentalmente.

o Producto no asociado a crecimiento:

1.4.- Concepto de rendimiento celular aparente u observado.

1.4.1.- Coeficiente de rendimiento celular observado

En el captulo 1 se mostr el concepto de factor de rendimiento terico, el cual defina el

El trmino YX' / S es el llamado coeficiente de rendimiento celular observado. As, para un

En la ecuacin (1.35) el primer trmino de la derecha representa el sustrato consumido para

Dividiendo la ecuacin (1.36) por dX/dt:

La ecuacin (1.37) se puede reescribir utilizando la definicin de coeficiente de

1.3.2.- Coeficiente de rendimiento observado de formacin de producto.

En el caso de formacin de producto indirectamente asociado a producto, se tiene que:

Dividiendo la ecuacin por el trmino

As, reemplazando ec. (1.41) y (1.42) en ec. (1.40), se tiene:

Cabe hacer notar que YP' / X YP / X .

1.5.- Efecto de las condiciones de cultivo en la cintica microbiana.

1.5.1.- Efecto de la concentracin de sustrato.

Durante la fase de crecimiento y declinacin de un cultivo discontinuo, depende de la

dominante en . Este componente es el sustrato limitante. Frecuentemente es el carbono,

La ecuacin de Monod es una ecuacin semi-emprica, que se basa en la suposicin de que

Figura 2.5: Variacin de en funcin del sustrato limitante S.

Como se aprecia en la ecuacin (1.48), si el valor de n = 1, entonces tenemos la ecuacin de

La ecuacin de Contois tiene una constante de saturacin proporcional a la concentracin