DILUCIONES SERIADAS

Nombre del alumno (a):

Introduccin:
Una parte importante del entrenamiento que recibe el estudiante de microbiologa en el
manejo de los microorganismos, lo constituye el uso adecuado del material del laboratorio,
como tubos, pipetas y matraces. As de la habilidad adquirida en el manejo adecuado de
este material, depender el resultado de los experimentos realizados y su
reproducibilidad.
Para el aislamiento de los microorganismos a partir de diversas muestras, se recurre al
mtodo de las diluciones para obtener suspensiones, en las cuales la concentracin de los
microorganismos es inversamente proporcional a la dilucin efectuada en cada caso. En
esta tcnica es importante manejar la pipeta adecuadamente (ver figura) ya que cada
dilucin sucesiva amplifica los errores previos, de modo que cualquier medicin
volumtrica debe hacerse con exactitud.
Al hacer las diluciones se debe succionar y soplar fuertemente en cada tubo, por lo menos
5 veces antes de transferir la dilucin al siguiente tubo, siempre el mismo nmero de
veces.
Al usar las pipetas siempre se debe medir el volumen desplazado desde el cero de la
pipeta; lo que sobre del lquido debe regresarse al tubo del que se tom, soplando para
eliminar la mayor cantidad de lquido de la pipeta.
Nunca debe de tener en su mano dos tubos al mismo tiempo mientras hace las diluciones,
cuando utilice tubos con tapn, debe de quitar el tapn con el dedo meique de la mano
que sujeta la pipeta.
Cuando succione lquido de un tubo, debe hacer llegar la punta de la pipeta hasta el fondo
del tubo (a menos que el profesor indique lo contrario) y al soplar, deber sacar la pipeta
del lquido para evitar que al salir el aire el lquido se derrame.
Cada alumno deber hacer las diluciones sin ayuda de sus compaeros.
Objetivo:
El alumno aprender a utilizar en forma adecuada el material del laboratorio.
Material:
a) Por mesa:
30 ml de solucin de sacarosa al 40%
3 ml de solucin de azul de metileno al 1%
130 ml de solucin de NaOH 0.001 M de reciente preparacin
3 ml de solucin de HCl 1 N
3 ml de solucin de fenolftaleina al 0.01 %

Gradilla
b) Por persona:
8 tubos de 16 X 150 mm
8 tubos de 16 X 150 mm con tapn de rosca
3 pipetas de 5 ml
3 pipetas de 1 ml
Gradilla
Mtodo:
A) Diluciones decimales en serie de la solucin de azul de metileno
Tubo nmero
solucin de sacarosa al 40%
solucin de azul de metileno al 1%
Volumen de transferencia

1
4.5
0.5
-

2
4.5
0.5

3
4.5
0.5

4
4.5
0.5

5
4.5
0.5

6
4.5
0.5

7
4.5
0.5

8
4.5
0.5

4
4.5
0.5
0.1

5
4.5
0.5
0.1

6
4.5
0.5
0.1

7
4.5
0.5
0.1

8
4.5
0.5
0.1

B) Diluciones decimales en serie de la solucin de HCl.

Tubo nmero (tapn de rosca)
solucin de NaOH 0.001 M ml
solucin de HCl 1 N ml
Volumen de transferencia ml
solucin de fenolftaleina al 0.01 % ml
Informe:

1
4.5
0.5
0.1

2
4.5
0.5
0.1

3
4.5
0.5
0.1

1. Diga a partir de que dilucin ya no se observa el azul de metileno.

2. Diga a partir de que dilucin vira la fenolftalena.
3. Que significa una dilucin 1:2, 1:9, 1:1.5, y 1:10?
4. Si usted mezcla 1 ml de soluto ms 4 ml de solvente, Qu dilucin realiz?
____________________________
Y si mezcla 0.3 ml de soluto ms 2.7 ml de diluente Qu dilucin realiz?
_______________________________.
5. Diga tres ejemplos para realizar una dilucin 1:10 (variando los volmenes de soluto y
solvente).
6. Cul es la dilucin final de la siguiente serie de diluciones? 1:2, 1:5,
1:10____________________

Bibliografa: Manual de prcticas del laboratorio de microbiologa general. Departamento

de microbiologa. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas.