HIDRLISIS ENZIMTICA DE LOS LPIDOS

Introduccin
Lipasas pancreticas
La hidrlisis de los triglicridos que se consumen se lleva a cabo principalmente en el
intestino delgado, por medio de enzimas lipolticas elaboradas en el pncreas. Una de ellas
son las lipasas pancreticas, de las cuales existen en dos tipos: las especficas para
romper la unin ster en la posicin alfa o alfa prima de los triglicridos, y las especficas
para las uniones beta.
Los lpidos alimentarios (triglicridos, fosfolpidos y steres del colesterol) son sustancias
hidrfobas. Sin embargo, tienen que integrarse en el medio acuoso predominantemente
que existe a nivel intestinal. Adems, tiene que alcanzar un alto grado de dispersin de
manera que presenten una superficie suficientemente grande para que sean atacados por
la lipasa pancretica. Todo esto se consigue por medio de las sales biliares, que dispersan
las
grandes
partculas
grasas
formando
una
emulsin.

Materiales
8 matraces Erlen Meyer de 125 ml
Pinza para bureta
1 pipeta de 10 ml
1 Pipeta de 1 ml
Reactivos:
Pancreatina al 1% en agua
KOH 0.05 N
Leche homogeneizada

1 pipeta de 5 ml
1 bureta de 25 ml
1 soporte universal
bao mara a 37 C
Etanol al 95%
Fenolftalena
Bilis.

Sales biliares
En efecto, el carcter anfiptico de las sales biliares les permite recubrir las gotas lipdicas,
disponiendo su parte apolar esteroide sobre ella mientas que los grupos polares
interactan con el medio acuoso.
Sobre estos lpidos emulsionados actan las enzimas pancreticas liberando
monoglicridos, cidos grasos, colesterol y lisofosfolpidos (fosfolpidos que han perdido
uno de sus cidos grasos). Todas estn molculas son tambin liposolubles. Para ser
absorbidas necesitan ser incluidas en micelas, partculas en las que estas sustancias
grasas estn recubiertas tambin por sales biliares.

Equipo 3

Azucena Esmeralda Remedios Santiago

Rosario Gonzlez Rodrguez
Gabriel Escorcia Saucedo
Bibliografa
Mtodos recomendados para la determinacin de la concentracin
de colesterol en suero o plasma y en otros especmenes biolgicos, QUMICA CLNICA 1994, Documento F, Fase 3, Cuestionario

Conclusin
Despus de analizar y discutir los resultados de la prctica, llegamos a la conclusin de que la funcin que tuvo la bilis en este experimento fue
favorecer la hidrolisis enzimtica, por lo que los cidos grasos se liberaron ms rpidamente en el lapso de los 30 minutos de incubacin, por lo
que se requiri un mayor volumen de KOH para neutralizar la solucin acida.
Discusin de resultados
Los resultados una vez graficados y corregidos nos indican que la presencia de un agente emulsificante como lo fueron las sales biliares,
favorecen la hidrolisis ya que en los intervalos de entre 25 y 30 min de incubacin el salto que hubo en la titulacin fue ms grande, esto quiere se
requiri de ms titulante para neutralizar la solucin lo que indica que la presencia de cidos grasos fue mayor.

Leche
La leche contiene cientos de tipos de protenas, muchas de ellas en cantidades muy
pequeas. Las protenas pueden ser clasificadas por varios caminos de acuerdo a sus
propiedades fsicas o qumicas y sus funciones biolgicas. Tradicionalmente las protenas
de leche fueron clasificadas en casenas, protenas de suero y protenas menores. Las
protenas presentan glbulos de grasa en la superficie y enzimas pertenecientes al grupo
de protenas menores.
Las grasas en la leche se encuentra en una proporcin que vara entre 2.2 y 8.0% (m/v).
Est formada por varios compuestos que hacen de ella una sustancia de naturaleza
relativamente compleja y es la responsable de ciertas caractersticas especiales que posee
la leche, tales como el sabor, el color la viscosidad y la densidad. La grasa de la leche se
encuentra en forma de pequeos glbulos en emulsin temporal. Cada glbulo posee un
ncleo constituido por triacilgliceroles de alto punto de fusin encajados en una capa
externa
de
fosfolpidos,
vitamina
A,
colesterol
y
otras
sustancias.
La grasa de la leche es hidrolizada en el tracto digestivo por la lipasa pancretica con la
consecuente formacin de glicerina y una mezcla de cidos grasos saturados e insaturados
La pancreatina es un preparado enzimtico obtenido del pncreas de ganado bovino o
porcino, en cuya composicin se incluyen proteasas, amilasas, lipasas, fosfolipasas y otras
enzimas. Su pH de accin oscila entre 7.5 8.0; su temperatura ptima es de 37C y se
requiere una emulsificacin eficiente de la grasa para ser hidrolizada.

Reporte de resultado:
Los matraces que contenan bilis cambiaron a un color marrn al titularlos, anteriormente eran verdes.
Mientras que los matraces que contenan la leche sin bilis se observ un cambi de color rosa tenue al titular.

Volumen de KOH utilizado. (Corregido)

1-3.9 ml
4-0.4 ml
2-6.5 ml
5-7.7 ml
3-6.7 ml
6-8.2 ml

Fundamento:
La lipasas pancretica encontrada en la pancreatina hidrolizara los triacilgliceroles
presentes en la leche. La grasa de la leche es hidrolizada por la lipasa pancretica con la
consecuente formacin de glicerina y una mezcla de cidos grasos saturados e
insaturados.
La eficiencia de la hidrolisis mejora si las grasas estn emulsificadas, esta emulsificacin
se logra con las sales biliares.

Para determinar la velocidad de hidrlisis de la grase de la leche por accin de la

pancreatina, debe medirse en perodos definidos, la cantidad de cidos grasos formados
por medio de titulacin con una disolucin de base de concentracin conocida.

Procedimiento:

Colocar en los matraces Erlen Meyer lo siguiente:

Objetivos: Demostrar la accin de la lipasa pancretica en presencia y ausencia de la

bilis.

Reactivo (ml)
Leche homogeneizada

T1
5

1
5

2
5

3
5

4
5

5
5

6
5

T2
5

Pancreatina 1%
Pancreatina caliete

0
1.5

1.5
0

1.5
0

1,5
0

1.5
0

1.5
0

1.5
0

0
1.5

bilis

Tiempo de
incubacin a
45C

45

15

30

45

15

30

45

45

Despus de incubar, adicionar 12.5 ml de etanol y 3 gotas de

Cuestionario

Titular con KOH al 0.5 N y agitar vigorosamente durante la titulacin.

1Cul es la interpretacin de las grficas obtenidas?

La comparacin entre ambas graficas indica que los matraces a los que se les aadi
la bilis, tuvieron una reaccin ms grande, que a los que no se les aadi
posiblemente porque la bilis favorece la actividad enzimtica para la hidrolisis
2-cul es la funcin de la bilis en este experimento?
Generar una emulsificacion, para producir una estimulacin de la hidrolisis enzimtica
debido al incremento de la interface lpido - agua
3-Cmo se clasifican los lpidos?
Simples cidos grasos con glicerol completamente insolubles en agua
Compuestos adems del glicerol y el cido graso tiene un grupo funcional adicional

Derivados molculas lineales o cclicas con funciones muy variadas, provienen de un ancestro cido graso
4-Cules son los cidos grasos ms importantes de la grasa humana?
La mayor parte de los cidos grasos del cuerpo humano existen en forma de triacilgliceroles la mayor parte de los cidos
grasos del cuerpo humano tienen 16, 18 20 tomos de carbono, entre los ms importantes se encuentran el cido palmico,
esterico, palmitoleico, araquidnico.
5-Cul es la importancia clnica de la lipasa en un diagnostico?
Evala alguna patologa en el pncreas, con mayor frecuencia pancreatitis aguda. La lipasa aparece en la sangre cuando el
pncreas presenta dao
6-Cul es la composicin y fundamento del tejido adiposo?
El tejido adiposo se constituye por la unin, mediante fibras reticulares (colgena tipo iii), de los adipocitos. Entre ellos
discurre abundante irrigacin sangunea. Las clulas adiposas, al unirse, forman lobulillos constituyen lbulos adiposos el
tejido adiposo cumple las siguientes funciones:
Interviene como un reservorio de energa qumica., modela la superficie corporal., forma almohadillas amortiguadoras.