INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE ENFERMERA

Y OBSTETRICIA
LICENCIATURA EN ENFERMERA
TCNICAS BSICAS DE HISTOLOGA
Y PASOS PARA OBTENER UNA
MUESTRA HISTOLGICA.
Facilitadora: Nieto Macas, Ma. Eugenia
Lpez Gutirrez, Pablo R.
Snchez Sanchz, Jessica
1EV3

TCNICA HISTOLGICA
Se denomina TCNICA HISTOLOGICA
al
conjunto
de
procedimientos
aplicados a un material biolgico
(animal o vegetal) con la finalidad de
poder observar, examinar y analizar
sus componentes morfolgicos a
travs de unmicroscopio.

Tcnicas bsicas de
histologa
Para alcanzar este objetivo es necesario realizar los siguientes pasos:
Toma de la muestra
Fijacin
Inclusin
Microtoma
Coloracin o tincin
Montaje

Pasos para obtener una

muestra histolgica

1. Toma de la muestra

Biopsia

consiste en la toma de
un
fragmento de tejido u
rgano de un ser vivo

Necropsia

Las muestras se
obtienen de seres
muertos: Es
recomendable que se
obtengan
inmediatamente
despus de producida
la muerte.

2. Fijacin

Su finalidad es detener la vida de las clulas e impedir las

modificaciones post morten que pueda sufrir la clula, manteniendo la
estructura morfolgica de clulas y tejidos sin que ocurran cambios
notables en ellos.

3. deshidratacin

El exceso de fijador al momento de la infiltracin, incluso en la microtoma,

podra afectar los cortes histolgicos, y por ello se debe lavar. La deshidratacin
se hace empleando diferentes soluciones de alcohol de concentracin creciente.
Los deshidratadores ms usados son el alcohol etlico, el alcohol isoproplico,
el dioxano y el cloroformo

4. Aclaracin

En este paso se sustituye el

alcohol por un disolvente de
parafina. El ms usado es el xilol
(xileno) ya que como la muestra
est deshidratada, el xilol entrar
hasta lo ms profundo del tejido.
Tambin el tejido pierde color y
adquiere un tono acaramelado.

5. Infiltracion

En este paso se sustituye el

alcohol por un disolvente de
parafina. El ms usado es el xilol
(xileno) ya que como la muestra
est deshidratada, el xilol entrar
hasta lo ms profundo del tejido.
Tambin el tejido pierde color y
adquiere un tono acaramelado.

6. Inclusion

Tiene como finalidad proporcionarle al tejido un

soporte solido que posibilite realizar un corte
muy fino, por lo que es de suma importancia que
el medio utilizado para la inclusin penetre al
interior del tejido. Aqu se forman bloques de
parafina dentro de los cuales estn las muestras
a estudiar. Tambin hay mquinas especializadas
para la inclusin en parafina de tejidos. Despus
de su inclusin y posterior secado, estos se
deben poner a enfriar en un congelador para su
posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina

7. Corte

Se realizan cortes histolgicos muy delgados segn lo

requerido o la costumbre del laboratorio donde se
realice la tcnica. Los cortes van desde 0,5 micras hasta
8 u 10 micras. Los cortes se echan al bao de flotacin
y se pescan con un portaobjetos, se marcan con la
fecha, el tipo de tejido y la tincin con que se van a
procesar. El ngulo de corte entre el cuchillo del
microtomo y el bloque ha de estar entre 10 y 15. Una
vez realizado el corte se da un bao de agua destilada,
para que la parafina se estire. Un buen corte histolgico
debe tener un grosor aproximado de 3-5 micras para
que sea fcilmente atravesado por la luz del sol
atraviesa los poros celulares.

8. Tincin

El procedimiento de coloracin o tincin consiste en que una estructura celular o

tisular adquiere especficamente un color bajo la accin de una sustancia colorante.

El proporcionar color a las estructuras que constituyen un tejido o

un rgano se hace con la finalidad de distinguirlas entre s y
facilitar su observacin.

1.

Tipos de tincin:
Tincion simple: Se emplea solo un colorante
COLORANTES BASICOS:Cristal violeta, fucsina y safranina
COLORANTES ACIDOS: eosina

Tincion diferencial: se emplean dos o mas colorantes

Ej Tincion de gram
1.

9. Montaje

Este procedimiento consiste en colocar encima de el

corte coloreado y diafanizado una gota de una sustancia
adherente, diluida, generalmente en xilol (resina natural
como el blsamo de Canad o resinas sintticas, cuyos
ndices de refraccin son similares a los del vidrio) y
encima de ellos, una laminilla cubreobjetos, cuidando
que no queden burbujas de aire entre la resina.

10. Observacion.
Algunos autores no consideran la observacin como un
paso de la tcnica histolgica sino el objetivo final de
la misma. Como se puede deducir, se observa la
laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite
ver para llegar a un diagnstico.