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Revista Mexicana de Ciencias Agrcolas

ISSN: 2007-0934
revista_atm@yahoo.com.mx
Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales, Agrcolas y Pecuarias
Mxico

Snchez-Prez, Ma. Isabel; Muoz-Meja, Carmen Yazmn; Quiroz-Velsquez, Jess Di Carlo; MayekPrez, Netzahualcoyotl; Hernndez-Mendoza, Jos Luis
CAMBIOS FSICO-QUMICOS DURANTE LA GERMINACIN DEL MAZ
Revista Mexicana de Ciencias Agrcolas, vol. 1, nm. 1, enero-marzo, 2010, pp. 89-93
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias
Estado de Mxico, Mxico

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=263120585009

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Revista Mexicana de Ciencias Agrcolas Vol.1 Nm. 1 1 de enero- 31 de marzo, 2010 p. 89-93

CAMBIOS FSICO-QUMICOS DURANTE LA GERMINACIN DEL MAZ*


PHYSICAL-CHEMICAL CHANGES DURING MAIZE SEED GERMINATION
Ma. Isabel Snchez-Prez1, Carmen Yazmn Muoz-Meja1, Jess Di Carlo Quiroz-Velsquez1, Netzahualcoyotl Mayek-Prez1
y Jos Luis Hernndez-Mendoza1
Centro de Biotecnologa Genmica. Instituto Politcnico Nacional. Blvd. del Maestro s/n. Esq. Elas Pia. Col. Narciso Mendoza. C. P. 88710. Reynosa, Tamaulipas,
Mxico. Tel. 01 555 7296000 y 01 899 9243627. Ext. 87749 y 87714. (msanchezp0700@ipn.mx), (jquiroz@ipn.mx), (nmayekp@ipn.mx). Autor para correspondencia:
jhernandezm@ipn.mx.
1

RESUMEN
Se determinaron los cambios fsico-qumicos que ocurren
en el medio de germinacin de la semilla de maz (Zea mays
L.) in vitro. Se colocaron 10 semillas del hbrido 83G66 en
cajas petri con 9 mL de agua desionizada estril e incubadas
para su germinacin. A la solucin resultante despus de
la germinacin se determin el pH y los contenidos de
triptfano, kinetina, benciladenina, cido indolactico, cido
antranlico y cido giberlico por medio de cromatografa
de lquidos de alta presin. Durante la germinacin el pH
del medio se redujo de 6.9 a 4.8 y se produjo triptfano y
pequeas cantidades de cido indolactico, cido antranlico,
kinetina, cido giberlico y benciladenina. La presencia de
los compuestos detectados podra favorecer el crecimiento
inicial al maz.
Palabras clave: Zea mays L., cido antranlico, cido
indolactico, crecimiento vegetal, triptfano.
ABSTRACT
The aim of this research was to determine the physicalchemical changes that occur in the medium during the
germination of maize seed (Zea mays L.) in vitro. Ten
seeds of the hybrid 83G66 were incubated to germination
in petri dishes with 9 mL of deionized sterile water. During
germination pH changes, indolacetic acid, anthranilic
* Recibido: marzo de 2009
Aceptado: marzo de 2010

acid, kinetin, giberelic acid and benciladenine content


were determined in the solution by liquid high-resolution
chromatography. During germination the pH of the medium
was significantly reduced from 6.9 to 4.8. Tryptophan
and small quantities of indolacetic acid, anthranilic acid,
kinetin, giberelic acid and benciladenine were detected.
The presence of the compounds detected might favor early
maize growth.
Key words: Zea mays L., anthranilic acid, indolacetic acid,
plant growth, tryptophan.
En la regin norte del estado de Tamaulipas, Mxico se
cultivan entre 80 000 y 100 000 ha con maz (Zea mays
L.) (SIAP, 2008). En esta regin los suelos predominantes
son alcalinos y el pH del agua de riego es alto. El agua
modifica las propiedades fsico-qumicas de la rizsfera y
el pH de la solucin del suelo donde germinan las semillas
(De Mendona et al., 2005). Los iones cloruro inhiben la
germinacin y sntesis de protenas del maz, trigo (Triticum
aestivum L.) y ajonjol (Sesamum indicum L.) (RomnPalacios, 2000). Como estrategia para reducir los daos por
salinidad y otros factores adversos, aproximadamente 10%
de la superficie se inocula con hongos micorrzicos (HM)
(Glomus intrarradicens) o con la rizobacteria promotora
del crecimiento vegetal (RPCV) Azospirillum brasilense
(Garca-Olivares et al., 2008). Los HM y las RPCV

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Ma. Isabel Snchez-Prez et al.

incrementan de 12 a 36% y de 15 a 35% respectivamente, el


rendimiento de grano del maz en comparacin con plantas
no inoculadas (Daz-Franco et al., 2005; Garca-Olivares
et al., 2007). Adems, los HM y las RPCV favorecen la
movilizacin de P y la fijacin de N y reducen la necesidad
de fertilizantes qumicos.

de cada una de los metanolitos por analizar. Para ello, se


utiliz una columna RP-18 de 150 mm de largo, 4.6 mm
de dimetro interno y tamao de partcula de 5 m. La fase
mvil fue acetonitrilo-fosfato 30/70 y se us un volumen
de inyeccin de 20 L. El detector se ajust a una longitud
de onda de 220 nm. A los valores observados se les
calcul la media error estndar por fecha de muestreo.
La informacin se someti al anlisis de regresin lineal
simple donde la variable independiente fue el tiempo de
incubacin y la dependiente, el pH del agua.

En los dos experimentos, cada tratamiento se repiti 10


veces, mismas que se incubaron con un fotoperiodo
de 12 h luz-obscuridad a 25 2 C. A la solucin
resultante despus de la germinacin de las semillas se
le determinaron las cantidades presentes de triptfano,
kinetina, benciladenina, cido indolactico (AIA), cido
antranlico (AA) y cido giberlico (AG) por medio de
cromatografa de lquidos de alta presin (HPLC, Hewlett
Packard modelo 1100, Ramsey, EUA) de acuerdo con
el procedimiento de Hernndez-Mendoza et al. (2008),
que consiste en tomar 4 mL de solucin de cada caja petri
y filtrarla con acrodiscos LC PVDF con membranas
de 0.45 m de porosidad y 25 mm de dimetro interno.
Posteriormente, la muestra se inyecta al HPLC previamente
acondicionado y calibrado con concentraciones conocidas

400

0.7

350

0.6

300

0.5

250

0.4

200
0.3

150

0.2

100
Volumen de agua
Peso
hmedo
Volumen
de agua
Pesoseco
hmedo
Peso

50
0

Peso seco

0h

24 h

48 h

Peso de semilla (g)

En el primer experimento, se colocaron en un tubo de ensayo


de 18150 mm dos semillas del hbrido 83G66 (Pioneer) y
se agreg 3 mL de agua desionizada estril. Posteriormente,
se registr la cantidad de agua embebida y se midi el
pH del agua con un potencimetro modelo pHmeter 440
(Corning) durante cuatro das. El equipo se calibr con
los amortiguadores comerciales de pH= 4 y pH= 7 (Micro
Essential Laboratory; Brooklyn, EUA). En el segundo
experimento se colocaron 10 semillas de maz en una caja
petri con 9 mL de agua desionizada estril y el pH del medio
se determin durante cuatro das.

Las semillas de maz se embebieron con agua e incrementaron


su peso fresco durante las primeras 48 h en incubacin.
El peso fresco ms alto se observ a las 24 h. El volumen
de agua retenido por la semilla alcanz hasta 200 L a
las 48 h en incubacin; en contraste, el peso seco total
de la semilla se redujo debido a la utilizacin de las
reservas del endospermo para la germinacin, las lneas
verticales indican el promedio de diez repeticiones
error estndar (Figura 1). A continuacin, la semilla
inici la germinacin con el crecimiento de la radcula y
del coleptilo (Figura 2), durante este proceso disminuy
el pH del medio (Figura 3). El anlisis por cromatografa
(Figura 4) mostr la presencia de triptfano a las 24 h en
incubacin y pequeas cantidades de AIA, AA, kinetina,
benciladenina y AG (Cuadro 1).

Imbibicin (L)

Durante la germinacin de la semilla se liberan exudados


radiculares que favorecen la asociacin de la planta con
los microorganismos del suelo. Estos a su vez liberan en
la rizsfera auxinas y citocininas que son promotoras del
crecimiento vegetal (Walker et al., 2003; Kamilova et
al., 2006). El xito de la asociacin entre las plantas y los
microorganismos est influenciada de manera determinante
por la relacin agua-suelo-planta-microorganismos y
de ella depende la productividad de los cultivos. En esta
investigacin se analizaron los cambios fsico-qumicos del
medio durante la germinacin de semilla de maz in vitro.

0.1
0

Tiempo en incubacin (h)

Figura 1. Volumen de agua embebida, peso fresco y seco


de semillas de maz (83G66 Pioneer) durante
la germinacin in vitro.

Cambios fsico-qumicos durante la germinacin del maz

91

Figura 2. Desarrollo de radcula y coleptilo del maz hbrido 83G66 germinada in vitro.
7
6

pH del agua

5
4

y= -0.434x + 6.321

R2= 0.89

2
Testigo

Lnea de tendencia

24

48

72

96

120

144

Tiempo de incubacin (h)

1.915
TRP

Figura 3. pH de la solucin durante la germinacin de semillas de maz hbrido 83G66.


mAU

450
400
350
300
250

1.5

2.5

3.814

3.650

3.5

4.720
4.720

AA (3.49)

3.332

0
1

3.107

2.912

50

2.376

2.197

100

AG (2.43)
BA (2.52)

KN (2.008)

150

AIA (4.52)

1.488

200

4.5

Tiempo de retencin (min)

Figura 4. Cromatograma HPLC a 48 h de incubacin de semillas de maz hbrido 83G66. TRP= triptofano;
KN= kinetina; AG= cido giberlico; BA= benciladenina; AA= cido antranlico y AIA= cido indolactico.

Ma. Isabel Snchez-Prez et al.

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Cuadro 1. Metabolitos en el medio de germinacin. Semillas de maz 83G66 (Pioneer) a diferentes tiempos
de incubacin.
Metabolitos
Triptfano (ppm)
cido indolactico (ppm)
cido antranlico (ppm)
Kinetina
Benciladenina
cido gibrelico

0
0.83
nd
nd
nd
nd
traza

Tiempo en incubacin (h)


24
48
14.62
2.95
0.09
nd
nd
0.05
nd
nd
nd
traza
nd
nd

72
3.86
nd
nd
traza
nd
traza

nd= no detectado por el HPLC; traza= compuestos detectados con un rea 26.9.

Las semillas incrementaron el peso fresco durante las


primeras 48 h en incubacin, los valores ms altos se
observaron a las 24 h; el peso seco se redujo debido
a la utilizacin de las reservas del endospermo para
la germinacin y crecimiento de la radcula y del
coleptilo (Cruz-Prez et al., 2003; Mndez-Natera et
al., 2008). Durante la germinacin, la semilla del maz
acidific el agua del medio, similar a lo observado por
Vitoria y Mndez-Natera (2007), aunque al parecer este
cambio no se asocia con el vigor de la semilla de maz.
La germinacin involucra cambios a nivel celular y
gentico como la hidratacin de protenas, respiracin,
proliferacin celular o la activacin de genes para la
liberacin de exudados (Walker et al., 2003). Durante
la germinacin del cacahuate (Arachis hypogea L.)
se producen 11 compuestos fenlicos entre los cuales
el ms abundante es el cido clorognico (Reddy et
al., 1977); mientras que en hortalizas se ha detectado,
triptfano, azcares y cidos (ctrico, succnico, mlico
y clorognico) (Kamilova et al., 2006).
En esta investigacin se detectaron triptfano y pequeas
cantidades de otros cinco metabolitos (AIA, AA, kinetina,
BA y AG), almacenados en el endospermo de la semilla
(Mendoza-Elos et al., 2006) y en su mayora auxinas y
citocininas promotores del crecimiento vegetal y de la
asociacin entre las plantas con los microorganismos
benficos del suelo (Walker et al., 2003; Kamilova et
al., 2006).
Durante la imbibicin de la semilla, entran solutos disueltos
en la solucin del suelo y el agua es retenida principalmente
por las protenas, celulosa y sustancias ppticas. El almidn
aunque presente, no absorbe o retiene agua en las mismas
proporciones (Romn-Palacios, 2000).

El estrs salino o la inoculacin con hongos no fitopatgenos,


como el Penicillium notatum incrementan la exudacin de
carbono soluble y de metabolitos que podran favorecer
el crecimiento vegetal en Lolium perenne L. Las RPCV
como la A. brasilense producen fitohormonas (auxinas,
giberelinas, citocininas, cido abscsico) que promueven el
crecimiento vegetal (Walker et al., 2003; Bais et al., 2006).
De Mendona et al. (2005), observaron que con presencia de
nitrgeno en forma de nitratos, el pH de la solucin nutritiva
donde se sembr con arroz (Oriza sativa L.) se alcaliniz,
pero la presencia de nitrgeno en forma de amonio la
acidific. Las variedades de arroz tolerantes a la toxicidad
por aluminio absorben ms protones de la solucin nutritiva
en presencia de nitrato y menos protones en presencia de
amonio, de manera que el balance de protones y el cambio
del pH permiten asimilar poco aluminio y tolerarlo. Los
iones cloruro inhiben en mayor proporcin la germinacin y
sntesis de protenas del maz, trigo y ajonjol que los acetatos
(Romn-Palacios, 2000).
Entre las causas probables de la acidificacin del medio
durante la germinacin de la semilla del maz podra incluirse
la liberacin de metabolitos tales como: triptfano, AIA,
AA y AG, as como otros cidos orgnicos (Kamilova et al.,
2006; Mendoza-Elos et al., 2006). Para las condiciones de
cultivo del maz en el norte de Tamaulipas, Mxico; donde
existe alta prevalencia de suelos alcalinos (Daz-Franco
et al., 2005; Garca-Olivares et al., 2008), la liberacin de
metabolitos podra favorecer la acidificacin de la rizsfera
y facilitar el proceso de germinacin, desarrollo inicial del
cultivo, as como el rendimiento biolgico final del cultivo
(Biasutti y Galianes, 2001; Laynez-Garsaball et al., 2007).
Por lo tanto, es probable que las RPCV favorezcan el
establecimiento de las asociaciones planta-microorganismo
promotores del crecimiento vegetal.

Cambios fsico-qumicos durante la germinacin del maz

AGRADECIMIENTOS
Trabajo financiado por el Instituto Politcnico Nacional (IPN)
y el Patronato para la Investigacin, Fomento y Sanidad
Vegetal A. C. Ma. Isabel Snchez-Prez y Carmen Yazmn
Muoz-Meja fueron becarias PIFI-IPN y CONACYT. Jos
Luis Hernndez-Mendoza y Netzahualcoyotl Mayek-Prez
fueron becarios COFAA-IPN y EDI-IPN. As como el ltimo
autor es becario del Sistema Nacional de Investigadores (SNI).
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