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Prov & , botinghe, 3) Aone cud & ( wate ¥ mubut este) ie Contre Mo Teme JraT une, puperetive fT) Vucte 6) Gefen othves b dua be PeoveCe veloute te ang Tensone dk uals dal cane cut: Iago (a) 3) Weaito che © diutto rascetmuste vero butane - ik cauafo cute: logo a fewmone delle velow ba” auqohu AR whore (Wom 2edcewt nee“) ¢ of We, de Mama radia delle fem celte delhi ame de roteniom (2, van tus) Gz we Vow “Kvoluncome dl wow 2” er 2 redken: | fee Cw w (radiant: at setonslo | pe Hee shame. me Tepmainan de Uvolumom al mumuto ( wu. pean che U cl mde pre Comune de dpc mare ben vboes Fer del rofore we 2 oy win! 7 Zo “ gut mala Ca Ceumtad dl Uvebane oe! fosien 2 ype ue Gq: 4t 2 [(os. mew fow ; 3.600 q Lo gen tia muta Ubune we imu Urefe Act camelo queer Fervouale tarufie (q- 420 Ge cea | Woe Come vellorte Tre fae Alle jertreelle ¢ S pottolortae- ae ca mfo tui: Pago Ad ih dere delle, otuge fer vee tae mepen ve Aelhe gle fore di grave: wm tele Ayunaiome Qe deface Comer caulo aaTu fee relstivo (rce ) ° pe Comuntnute Come munttro i ¢ ( quante \yokre lo Ree de gravee") RUE = mumuo de q = ave su ata) ee Serie © eed Ag xyes abheevreande Re Fe (444-107) z [ea meet] |Ce velo fo” dy Mdimeartone dlhe eteth ole cle dad Comfo Che Pugs afbreate defede gucke de : A) Nemita” eo demeurione dulle pevtieatle 2) Dunbar 2 vemom' tem de mmonne im cur avvcame Ca, tle ment 3) Forma duble fe ele Ke 0 muse user) Queute We pemcedhe, Mute we yetou uma faite del Lequedo Cm dud 0 felt Gucade re vee uma Houta Vuso A'elho pe al jus de Liquide sped eto , intomtiaude ume fue P pom 2 1 Gq 2 3 . 2 F nae (e, b, ) wet dove Axe} = yohume dhe jest ele Huaice Oe ragyco z fr s dan be dle potrate Gm > duane” ded monne D2 dxotamne dolla foie tle hel mito Oe zolarcome lan bine Fu quclle »}\Geate fhe (eevette quaute AAimaole- Tyree guabe be fevteestte megraus al aves La polurione tunueno atiute 2 be Jorre ae abfbs of, Me Nowe Qf proto die JerkreRe 1” deto Lehe. de i Ken » i “ae 92 6Ym tpy dove i: beflicoure ib ebachs for be lertvertle Anion 7 Coe l ocr de weceet be” Jel acemne ) Ve veboesbem de nedemeutencome feMe fee Ue, 2 —__ ~~Quads wave jek etl Naver aeatrte mc comme eke ge weudo fa lore afpecete w & me rreo aguante aa ome d'attuts , woe: Fe {¢ ome: 3 x Ate, (ft, - Pn )w ts bin tp v dividuacde abo © muatbu’ Aw ope Gs em pe bre, ay ofeame é “ (e,-e. ees yi po es aceay amo Vow fe che fs Vote Ae oka anions Ace pevtvee Ue £: {= ar = £2u (lem wre a4 a La. veloc te7 i oede murtanione de una pertveete C diulamute propre & as 4) 2*hs muro dle fever I ! (queda \ ee ff 2) ( ; . Fork ha M es f,- Ca) > dhe frmne, Tra ba qua duarite” ec {ute dk momne 3) wt = veloute” angolare dl vote 4) Ls Ae afeme delle fone fates dc wtertone BA Law ore mute frefermonete Q@. nm 2 Cot cecete Ei veseositer del mennoiT ar . Mle BS radial eniomee CL = Witleure adied | © ult ane Xe vstenions det mutate del Capa Ny) | Ls dtlene wdicd | Bet em dé tenon t det fondo Aube f— ¢———>{ \ ze | | proves zo Velocctet ob’ aedimeuta-z ome Ve dz = 2 ZplO-An).w* it $ ele vz @ dt = 2 _% de TET S, : Sat =2 —1___. § de 0 2 wiz (@,- £,| iy Tt v= O puado (Z-2)= 0 Per tute pray ote della 2 m olbrour 10 tengo dy aol, ca dacottcls' ¢ t- 3 @ fo a& 2 ate (4-f2) 2 @ Cottons de PEJAUR AOA, a) Sejera wou du ie fe Vel divine fo dean hem EONS Wado cou oulure ot Temje meadene ba. ly tno Cour) Cle sedi ue uC erncoue of pute 2) Ce aeak maeak @cour che ar oUvece dole ua ento TengoParkechle frrecdd: Con oben dourwte’ C/o dine, Perens guxul: nepoore eu Cuvk Br forrne 4. whbzpudo Lda tuamows go fa bro cougiale medaortay one [ ee) 2. whch) annals Le deckutrtoqole cba > other logs un enrts douypo (op, t) Orotere de Beperpor Le” Gornp rath’ Malo con ba Meer, Cb fnpahisa qd. ceblule cuterg 3. mache 4. chorvopley . Ss. mtocoudrs b. rorawr RK. dhvorun ([Pus- wehrete eds borate: to boos yf) § berets Fer perralle a Pons molt, Luhoua ae 2 cou elevoty: Cooff. ole: Pope > fe '¢p. 4 devas a) V> ae = + 2p (a-L2 wee He cg dives “(tfo/ + ee eineFL__Cosf) sccuelt ok poche orrolre Za vel. de sedear. gue’ erabe Defoe vA toumiss de Volo’ 2 water dt Counpo auhfye Opp acol> . Tu dl Coro eran Wire capruatr Goof cowl hb aodiuruleproue A. V= Az A=2=C0 = ded at “ez et ay degnah, da Aa: Prtartir’ powers /é, ee 9) eu ar om gupre erprcmrarte tx deren: Cort ww tk af Woo oyna a. 20% S20 w © Coe. ol aed. rhoudorl Tube 3 demon olllauwdin atl, Que. Boss Sro uw Uda Udon a vowe Core oe px orhrepolats Q Cue 2 Seow Le cltinunrw dt’ S sour pulls ole wun toprol) “13 en d Sved bey x 10 40cVelow olee pr bite of Eagiun , Orme prghilece ) profecte oobabrde 2) Be. murhucors 3) Rebs: ¢ pobisane 4) Vea 5) Lereoous 6) Meunbrare Z) Mc bo eondu: 8) Nuke 1 0 Dedinouta ane Ure ° 3.0 2-258 3~ 100 & 20~ 200 8 40 - L000,.8 4000 Wo - toro? S 3 2010'S - 0-108 4 000x108 - 4h 200nOSyy) tae Cale pega : V2: 7d) Gece S cha ven we 70 K Wilson KH. Goulding as che OP © @ © 2 mye Tote Solvente Cowles moor Panicellepiccole - Paticalle di Hegtcore wok intermedie Con uw dye Paice SSE oak teat ts ge om dee Figura 2.7 Sedimentazionedifereciale diva sospensione diparicelleinuncampocentiiugoS ed sem wk, (a) Particelie distribuite in modo unilorme nella provetta; (b)-(e) sedimentazione delle particelle nel { corso dela cenrtugazione in base ala loro forma e cimensione. i Campo eenuituge Tempo di centritugazione ‘Camprone Panicelle piccole Panicelle di ‘dimension intermedie Particle i grosse cimensioni Figura 2.9 Sepsrazione. separazione isopicsica su graciente di densita. fa) Compre ob Rae eRe nate et ttigadice eT SEM ot Gensia pretrmato. () Ceniniugazione del campione. Nea separanone zonale oi velocta, la fraxione che si vuole Separare non ragguunge la posizione isopicnica. Nella separazione isopienita,invece, sicentntuga ‘sino @ quando la stessa Irazone raggiunge Ia sua posizione isopicnica nel gradiente. (a) (b) — Panticelle piccole — Particelle at dimension’ intermedie — Paricelte di grosse dimension’ Figura 2.10 Separazione isopicnica senza gradiente preforrratn. (a) Prima della centrifugazione le patticelle del campione sono distrbule unilormemente nella provetta.(u} Ourante la centrtuga- ‘one, il gradiente si forma da sé e i componenti del campione si iisribuiscono e bandano in wna ‘senie di zone comspondent alla loro densi. Campo centitugo Gradiente &:denst Campo centrilugoBiochimica applicats 1 ‘omagenato di fegato al 10% (peso/volume in saccarasio 0.25 mol dr? (volume circa 50 om®) ccentritugazione a 1.0009 ((m 8 cm) x 10 min ‘SEDIMENTO: ‘SOVRANATANTE 3 lavaggi di 20 om? in saccarosio 0,25 mol drm? Centritugazione a 1.000g (¢n 8 cm) x 10 min nad FRAZIONE NUCLEARE —— - ‘SOVRANATANTE Ccentritugazione a 3.3009 (fm 8 cm) x 10 min SEDIMENTG + strato fioccoso SOVRANATANTE 3 lavaggi ci 20 cm? in saccarosio 0,25 mol dro? Ccentrfugazione a 3.3009 {m8 om) x 10 min a FRAZIONE MITOCONORIALE + strato fioccoso SOvRANATANTE Ccentrfugazione a 16.3009 (im 8 cM) x 20 min ‘SEDIMENTO. ‘SOVRANATANTE + strato fioccaso 2 tavagg 20 om? in saccaroio 0.25 ml dr centritugazione a 16.300g (fm cm) x 20 min mee FRAZIONE USOSOMALE. SOVRANATANTE + strato fioccoso Centritugazione a 100.000g (ra 6 cm} x 30 min FRAZIONE MICROSOMALE ‘SOVRANATANTE FINALE Figura 2.8 Schema del razionamento di un omogenato di tegato ci ratto nelle diverse frazioni subcellular.(3); dS Ces: (spat me A (atu dy Aumy Fe. : | robancoms do deme” cunembe L NN ask wh Ureoatiaw fred AK com imun rats Code gue (com cautebe \ forme Fon 5 poet Ae pebancen de due ho” Acomante move! fam Lune gull! glue dum | i A Im 4 cqan mw ALANS pee tl pos panes uf wn one evant 1 aude yw a rrr . cyt Limaw Glee wn od maenals Ot ee ' mb el e Vo Ua col emele acl caudvone de rhpewn - Awats Peewee at ju cam|oue aul eons con twee contre dr u Resa\ue weds ars muake ( vate war bide} Reepus na dsenls afvennemonre [ powrpegyse mh une delle gore mudsouke wn 090 pollo kk une! wluntour od altimiua dune’) OS erademdt, view page iva apertare vere L'o. Harucales CoOL Ld eeceroni abeu onllacdele ( Prrsett t Calon), Gouna Rrematiec codcwels wom routes ( Hetacramcde My tod an \ Rewogra Itew) = Coraltw rida: pune $ Coutee | hon hath) ave ewReference: hole Figure 11-2 Coupling stem Support ring Cell hole Thermistor assembly }——— Rotor stand ‘An analytical rotor. [Courtesy of Beckman lnsteuments] Veoto \ cwscowemmnl et { S| Rattreccamento = 7 K Wikow KH. Goulding Lastra fotografica = S& Ocuiare Cavo tessione Calta anaitica Fa 1 Camera cet rotore scnermata al SS Termnstore WA Fitro cella iuce —— Fengaura Lente colimatnce b) Sobvente: Cella analtica Celt piianciamento F — Sorgente ci uce Fronte > souzore Fotogramma oh Sentieren 4 aun Fon di sllenmento ! lagi Distanza raciale al'asse ci rotazione Yom Figura 2.2 Schema ci un'utracentrtuga analtica (al edella cella analtica ediblanciamento (b)AL rrrtuna obteco 4) Plorsedimeuks matt! ultra volodte oppure 6) ba vonnpee leliudte db ufupes Cm SAL dowry’ — sah ‘otk Lucfe ba try, abe editor pongUb Mersenty je oma eee Af eer! om - siyg 4) ) eter mmiwes wveme jw molerlau go we matron lcecbe : a) mmudceute yubobe” dy tdi aTam one La vlowte dy nubimutamon U caleolele come Lo yo amore nh tuapo ad fenre fe cl golvunte puro tA cl plot ee Cae fuunente ik matacele che wile pa on 0 leolemto Vom quae mpio , dell qusniome O> Lm’ jam” cometeite wre 4 dle motenre 2 Cucnde Ara} ole mdo Sio,u it rad maleday H 1 aleolete da OL! of mans ome ae Sv bens ~ RT Siw De {4 - Vor? } deve R= Contaute des fon (ulrberrahrte poburcoue’ a el tuft T: tem pasture ' Deo 3 coef eruate ae de ffunome tbe medkrcole Vol > volume apeer feeo powee dle matrerbe (eum wake De jolume che wn ha Ja egqeante cn 43 ae Doluto od un vale mle guste we atv eate) , (= demyber del wlverte 2 20 2) Ouctus ui panne = Grugoto heute 3) Armelir eoufermarsonale - Ad tam? « ones voce? Lo qabcamuilantome Tee DUA cxreoler’ , Aimnre , & acgebe ° dope {ilemuto = [mits wome The frtune wh un gue begaute — ue Dodie Tero E