INFORME DE PRCTICA N 7

NOMBRES Y APELLIDOS
Apaza.
DOCENTE ENCARGADO
ASIGNATURA
GRUPO DE PRACTICA
FECHA DE ENTREGA
TEMA

: Josue Fidel Limahuaya

: Q.F. Bertha Viza Quispe
: Bioqumica II
: lunes de 9:30 a 11:30
: 15 / 06 /2015
: HIGADO GRASO

HIGADO GRASO EXPERIMENTAL

I-. MARCO TEORICO:

El hgado es el rgano diana que sirve de indicador para las alteraciones metablicas inducidas por
txicos. El dao estructural o funcional que se produce por estas sustancias se denomina
hepatotoxicidad. Se ha reportado gran cantidad de agentes hepatotxicos entre los que se
encuentra el tetracloruro de carbono. El mecanismo de dao heptico inducido por este agente
qumico genera peroxidacin lipdica a travs de los radicales libres (01).
El cloruro de carbono puede entrar al cuerpo por va endgena o exgena, ya sea por va
inhalatoria o aspirado, por absorcin a travs de la piel y mucosas, por va ocular, por va oral o por
heridas abiertas sin cicatrizar. Se elimina por orina o exhalacin. Si uno hubiese ingerido
depresores del sistema nervioso central como diazepam o clonazepam, o una ingesta abusiva de
alcohol, el cuadro clnico se vera mucho ms comprometido, pudiendo ocasionar la muerte por
fallo heptico grave llegando a mostrar una grfica plana o paro cardiorespiratorio.
Asimismo es un cancergeno conocido, y puede ser causa de leucemia linfoide, tricoleucemia,
cirrosis y cncer de hgado y cncer de pulmn. Todos estos daos son irreversibles. Afecta al
sistema nervioso siendo depresor del mismo y conllevando leves alucinaciones. Tambin,
dependiendo la cantidad ingerida, puede causar mareos, visin borrosa, desmayos, vrtigo,
vmitos, arcadas, graves alucinaciones con prdida del conocimiento, bajada en la presin arterial,
aumento de la temperatura corporal, fiebres, delirios, agresividad, estados sedativos similares al del
coma y dolores de cabeza(02).

El tetracloruro de carbono -.es un lquido voltil transparente, incoloro, con un olor dulce
caracterstico. Es miscible con la mayor parte de los disolventes alifticos y tiene a su vez
propiedades disolventes. Se lleg a la conclusin de que puede inducir efectos embriotxicos y
embrioletales, pero slo a dosis txicas para la madre, como se observ en los estudios de
inhalacin realizados en ratas y ratones. El tetracloruro de carbono no es teratognico. Se han
realizado numerosas valoraciones de la genotoxicidad del tetracloruro de carbono. Tomando

como base los datos disponibles, se puede considerar que este producto es un compuesto no
genotxico.
Induce la formacin de hepatomas y carcinomas hepatocelulares en ratones y ratas. Las dosis
que inducen la formacin de tumores hepticos son ms elevadas que las que producen
toxicidad celular. En el ser humano, los sntomas agudos tras la exposicin a tetracloruro de
carbono son independientes de la ruta de ingestin y se caracterizan por sntomas
gastrointestinales y neurolgicos, como nuseas, vmitos, dolor de cabeza, desvanecimiento,
disnea y la muerte. Despus de las 24 horas o ms aparecen lesiones hepticas. Son
evidentes los trastornos renales con frecuencia slo dos o tres semanas despus de la
intoxicacin.
2.1.- TOXICOCINETICA:
La va de entrada del txico puede ser respiratoria, por inhalacin de vapores, digestiva, o a
travs de la piel, concentrndose posteriormente en el tejido adiposo. Aproximadamente el 50%
de la dosis absorbida se excreta a travs de los pulmones sin metabolizar, y la mayor parte del
otro 50% restante se metaboliza en el hgado. Tiene una vida media muy prolongada en el
cuerpo(04).
Su absorcin lenta en el tracto gastrointestinal se ve favorecida por la presencia de aceites y
grasas de origen animal o vegetal esto se debe a que las sustancias no polares que se
disuelven en lpidos difunden con mayor rapidez, ya que, la membrana celular que es
permeable, se encuentra constituida principalmente por fosfolpidos, y cuya permeabilidad est
determinada por las caractersticas fisicoqumicas de las sustancias.
2.2.- TOXICODINAMIA:
El CCl4 ejerce su efecto txico al generar el radical libre altamente txico (CCl3) por accin de
oxidasas ligadas al sistema P-450 en el retculo endoplsmico, paralelamente por una reaccin
de reduccin (va de eliminacin cloro), se formara el CCl2. El CCl3 inicia la rpida
peroxidacin de lpidos de membrana, lo que provoca una reduccin de la fluidez de la
membrana la cual es esencial para preservar la funcin celular. Se rompen las membranas del
RE, se liberan los ribosomas.
Se acumulan triglicridos al no existir sntesis de las apoprotenas necesarias para su salida del
hgado. Esto se traduce en esteatosis. Por otro lado, la peroxidacin de lpidos que afecta a la
membrana plasmtica se traduce en trastornos en el transporte de iones, ingreso masivo de
agua, sodio y calcio.
De manera que dependiendo de la magnitud y tiempo de la accin del txico las consecuencias
fisiopatolgicas difieren, pudiendo encontrarse esteatosis o necrosis masiva. UNIVERSIDAD
LOS NGELES DE CHIMBOTE CURSO: TOXICOLOGIA I
Tetracloruro de Carbono Pgina 7

Dado lo anterior, la necrosis inducida por CCl4 es ms severa en las clulas centro lobulillares
del hgado quienes contienen la ms alta concentracin de la isoenzima P-450, la cual es la
responsable de la activacin del CCl4. Adems, se ha observado que el dao heptico, se
expresa a travs de dos tipos celulares morfolgicamente diferentes, necrosis balonizante y
necrosis hialina, los cuales alcanzan su mximo a las 24 horas luego de administrado el
txico(04).
Es una acumulacin de grasas en las clulas del hgado. Los sntomas del hgado graso suelen ser
fatiga crnica, dolor en la parte superior derecha del abdomen, malestar general y sensacin de
pesadez despus de las comidas aunque tambin es cierto que hay muchos pacientes sin ningn
sntoma.
El hgado graso (esteatosis) suele estar tambin un poco agrandado aunque no suele producir dolor. El
problema es que si no tratamos esta enfermedad (esteatosis) algunos casos pueden terminar en una
cirrosis irreversible.
Aunque algunos casos de hgado graso se relacionan con el alcoholismo la mayora se deben, hoy en
da, a la obesidad y a altos niveles de colesterol y triglicridos. La mayor incidencia de la diabetes tipo
dos (la que no necesita inyectarse insulina) tambin favorece el desequilibrio metablico.
Por qu se produce la esteatosis heptica?
La causa de la acumulacin de grasa en el hgado no se conoce con certeza, pero hay algunos
mecanismos que se han demostrado muy importantes en el desarrollo de la enfermedad:

Resistencia a la insulina, responsable del sndrome metablico, tan frecuente en el

hipertenso.

Estrs oxidativo.

Liberacin de citoxinas.

El hallazgo de hgado graso es extremadamente frecuente. Esta enfermedad se asocia a los

siguientes factores de riesgo:

Obesidad

Diabetes

Hipercolesterolemia

Hipertrigiceridemia

Sexo femenino

Produce sntomas?
El hgado graso frecuentemente es asintomtico y solo es descubierto a raz de una ecografa
abdominal.
La otra forma de llegar al diagnstico es a travs del hallazgo de elevaciones de las transaminasas
descubiertas en un anlisis de sangre realizado por cualquier motivo.
Algunas personas se quejan de dolor abdominal leve a moderado en el hipocondrio derecho.

Slo un pequeo porcentaje de pacientes presentan sntomas de insuficiencia heptica, como por
ejemplo trastorno de la coagulacin, aparicin de ictericia o retencin de lquido en el abdomen.

- III-. OBJETIVOS:

o Conocer el mecanismo bioqumico por el cual el tetracloruro induce el hgado graso.

o Demostrar mediante la practica las diferencias entre un hgado normal y un hgado
inducido a hgado graso.
o Determinacin experimental del porcentaje de gasto de la muetra patrn y la muestra
a experimentar.
o Demostrar la mportancia que tiene la determinacin de un hgado graso. Y las
posibles consecuencias que esta podra realizar en el organismo humano.
o Poder de demostrar las posibles formas de producir hgado graso .tanto de forma
aguda o crnica.
o Inducir a hgado graso aun animal de experimentacin,
III-. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Mtodos:
Observacin, experimentacin
1 era experiencia: induccin de hgado graso experimental.
Para la realizacin de la prctica de laboratorio se utilizaron dos cobayos, de las cuales una fue
administrado con 3.0 ml de una solucin compuesta de tetracloruro de carbono y aceite mineral en
partes iguales. Y el otro cobayo fue administrado con una solucin salina tomndolo como patrn para
la comparacin en la prctica,( la solucin de tetracloruro de carbono debe ser administrada un da
antes de la realizacin de la prctica.

2da experiencia: determinacin de los acido grasos en el hgado.

Como primera parte de la experiencia 2,
sacrificamos los animales ,con la posterior
diseccin del cobayo con el objetivo de extraer el
hgado de cada uno de los cobayos.

Para continuar con la practica ser necesario,

primero pesar cada uno de los hgados
extrados de forma separada .anotar los
resultados .
Luego
proseguir
con
la
observacin
caracterstica de cada uno de los hgados y
notamos las observaciones.

Luego proseguimos con la trituracin de una

cantidad determinada de cada uno de los
hgados luego pesamos 2.5 gramos de
muestra de hgado, la cual la depositamos en
un Erlenmeyer.
Para la determinacin de los cidos grasos ,
antes debemos preparar la soluciones
siguientes:
-

Solucin de KOH AL 33 % cps 50 ml

Solucin de NaOH 0.1 N csp. 100 ml
Solucin de HCl al 2.5 % cps. 50ml

Para proseguir con la prctica empezamos

cargando, la bureta con la solucin de NaOH
0.1 N

Luego de esto preparamos la muestra para

titular :
-

La cual preparamos en el matraz

colocando la muestra ,luego 10 ml de
KOH AL 33% y 40 ml de una solucin
preparada de ( 20 ml de etanol y 20 ml
de alcohol isoamilico).
Luego lo llevamos a bao maria
durante 20 minutos.
Una vez sacada del bao maria
proseguimos colocando 17 ml de HCl
al 2,5 %
Dejamos en reposo 5 minutos.
Luego a l matraz aadimos 25 ml de
ter de petrleo aadimos
enrgicamente durante un minuto.
Dejamos en reposo 10 minutos para
conseguir una adecuada separacin de
las fases.
-

Una vez separada en dos fases ,con

la ayuda de una pipeta extraemos
5 ml de la capa etrea ( superior) y
colocamos en otro matraz para su
posterior titulacin.
Antes debemos colocar un indicador
que es el azul de timol.
Finalmente titulamos y anotamos las
observaciones y el gasto generado.

Resultados:
1era. Experiencia: caractersticas del hgado

PESO

COLOR
normo color
(un

CONSISTENCIA
Contenido biliar: normal.

color consistencia: normal

normal propio Superficie

COBAYO CONTROL normal

del hgado)

heptica:

lisa,

presenta rugosidades.
Contenido biliar: aumentado (1.5
ml.)
consistencia: rgida

Presento un superficie heptica:

COBAYO CON CCl4

ligeramente aumentado

color oscuro

, presenta rugosidades

2da-. experiencia: determinacin de los

cidos grasos.
Contenido de cidos grasos
Gasto de la solucin patrn de NaOH
0.1 N

COBAYO CONTROL
COBAYO CON Cl4C
DISCUSION DE LOS RESULTADOS:
- la practica se realizo de manera satisfactoria pudiendo ver la diferencia de las titulacines de
cada uno de las muetras utilizadas, donde podemos ver que el gasto que mas se obtuvo fue de

la muestra de hgado con Cl4C. lo cual significa que hay mayor porcentaje de acidez en la
muestra de hgado con Cl4C.

CONCLUSIONES:

Concluimos que el tetraclururo a parte de producir hgado graso ,tambin es un

potente toxico que produjo ciertas causas al cobayo

Adems se demostr que las consecuencias que produce un hgado graso ,pudindolo
observar las claras diferencias de cada hgado que se extrajo de los cobayos.

la esteatosis es la alteracin morfolgica ms frecuente, hallable en un 80% de los pacientes

estudiados. Entre las grasas se encuentran triglicridos en una concentracin 10 veces superior
a lo habitual.

Es una consecuencia directa de la oxidacin del etanol en el hgado,

CUESTIONARIO :
1-.porque resulta conveniente la utilizacin de ratas
hembras en el experimento de induccin de hgado
graso por tetracloruro de carbono?
- En varias investigaciones experimentales que se hicieron ,para determinar
el efecto toxico de ciertas sustancias se pudo demostrar que las ratas
hembras son mas susceptibles a desarrollar los efectos toxicos de ciertas
sustancias como es el caso en esta que es el tetracloruro de carbono
produciendo a la rata hembra mayores efectos toxicos que a los machos.

2-.porque mecanismo el etanol induce el hgado

graso?
Aparecen diferentes grados de dao heptico ante la exposicin a dosis similares de
alcohol, se ha postulado que el avance de formas leves a formas graves de dao heptico
alcohlico exige losefectos acumulados de varias noxas separadas (es decir, mltiples
injurias). Por falta de tiempo, en estaexposicin se tratar la manera como el alcohol daa
los hepatocitos, que son las clulas predominantes en el hgado; pero es importante
reconocer que otras clulas, particularmente las clulas de Kpffer,macrfagos residentes
en el hgado, y las clulas estrelladas, que producen el tejido fibrtico que se acumula en
los hgados cirrticos, tambin se alteran con la exposicin al alcohol.
De acuerdo con esta teora, el etanol se metaboliza a acetaldehdo, producto intermedio
txico, por accin de enzimas del hepatocito (diapositiva 10). En condiciones de exposicin
infrecuente al etanol, ste se oxida y forma acetaldehdo, predominantemente por accin de
la alcohol deshidrogenasa (ADH) citoslica,y el acetaldehdo resultante es destoxificado
rpidamente convirtindose en acetato por accin de la aldehdo deshidrogenasa (ALDH)
mitocondrial. El acetato, a su vez, pasa a ser un sustrato para el metabolismo intermediario

y genera CO2 y H2O. Los polimorfismos de ADH/ALDH y los frmacos (Antabuse) que
causan la sobreactividad de la ADH respecto a la ALDH, se han asociado con aumento del
dao heptico en las personas, lo que apoya la importancia del acetaldehdo como
sustancia hepatotxica

3-.porque la deficiencia de acido pantotenico puede

determinar el hgado graso?
El cido pantotnico tambin se conoce como vitamina B 5. El cido pantotnico se forma de
-alanina y cido pantoco. El pantotenato se requiere para la sntesis de la coenzima A
(CoA), y es un componente del dominio de la protena transportadora de grupos acilos
(ACP) de la sintasa de cidos grasos
La deficiencia del cido pantotnico es extremadamente rara debido a su extensa
distribucin en los cereales integrales, las legumbres y la carne. Los sntomas de la
deficiencia del pantotenato son difciles de determinar puesto que son sutiles y se asemejan
a los de otras deficiencias de la vitamina B.
En conclusin una deficiencia de cido pantotenico, producir que el cido graso no se
active y esto produzca que no pueda empezar la beta oxidacin esto producir que el acido
graso se vaya acumulando y produzca una acumulacin de acidos grasos ,lo cual producir
la condicin clnica de hgado graso.

4-.cite por lo menos 4 alteraciones bioqumicas que

se producen en los animales con tetracloruro de
carbono?

incremento del nivel de los perxidos lipdicos y las transaminasas sanguneas

induce la formacin de hepatomas y carcinomas hepatocelulares
inducen la formacin de tumores hepticos
trastornos en el transporte de iones, ingreso masivo de agua, sodio y calcio.
Nefrotoxicidad
necrosis balonizante y necrosis hialina,

5-.que es esteatosis heptica?

1. Qu es la esteatosis heptica o hgado graso?
Es la acumulacin de grasa en las clulas hepticas (hepatocitos). Otro trmino
frecuentemente utilizado para llamar esta condicin es infiltracin de grasa en el hgado o
esteatosis.
Se presenta entre el 10 a 24% de la poblacin.

2. Qu lo origina?
La acumulacin de grasa en el hgado puede verse en las
siguientes condiciones:
- Sndrome metablico.
- Desnutricin.
- Prdida rpida de peso.
- Ingesta excesiva de alcohol.
- Corticoesteroides.
- Estrgenos sintticos.
- Aspirina.
- Cocana.
- Medicamentos antirretrovirales.
- Lipodistrofias.
- Enfermedad heptica aguda del

embarazo.
- Enfermedades
inflamatorias
intestinales.
- Diverticulosis con sobrepoblacin
bacteriana.
- Virus de la inmunodeficiencia humana.
- Virus C de la hepatitis.
- Tuberculosis.
- Ciruga para obesidad.

3. Cules son los factores de riesgo?

La presencia de diabetes mellitus tipo 2, la obesidad, sobre todo a nivel del tronco, el aumento
de triglicridos y una historia familiar de esteatosis o esteatohepatitis son algunos de los
factores ms comnmente asociados a esta enfermedad.
4. Cules son los sntomas?
El hgado graso generalmente se sospecha en los pacientes con enfermedades o condiciones
descritas anteriormente. En la mayora de los casos el paciente se encuentra asintomtico;
pero puede presentar fatiga, sensacin de "llenura" abdominal o puede presentar aumento de
tamao del hgado.
5. Cmo se hace el diagnstico?
Varios estudios han demostrado que el hgado graso es la causa ms comn del aumento de
enzimas hepticas en los exmenes sanguneos de rutina. Pueden encontrarse otras
alteraciones sugestivas de disfuncin heptica avanzada, como son aumento de bilirrubinas y
disminucin de las protenas sanguneas.
Las imgenes por ultrasonido o tomografa computarizada nos pueden sugerir la presencia de
un hgado graso. En el ultrasonido, el hgado graso produce una imagen clara (brillante) y un
patrn ondulado. En la tomografa computarizada se observa un hgado con menor densidad
que el normal. La resonancia magntica nuclear con espectroscopia permite cuantificar la
infiltracin de grasa al hgado.
Para saber con seguridad si un paciente tiene hgado graso se requiere de la toma de una
biopsia heptica, la cual tambin nos permite investigar el avance de la enfermedad.
6. Cmo se acumula grasa en el hgado?
An no se sabe con certeza. Pero un paciente tiene un hgado graso, cuando la grasa
incrementa el peso del hgado un 5%. Una posible explicacin del hgado graso es que haya
una transferencia de grasa de otras partes del cuerpo, o una dificultad para eliminar grasas del
mismo hgado, o bien una alteracin con los sistemas antioxidantes del organismo. Tambin se
ha encontrado que la resistencia a la insulina es
otro factor precipitante. Se ha demostrado incluso, que el
consumo de alimento alto en grasas produce por si slo un hgado graso.
7. Puede originar otras enfermedades hepticas?
El hgado graso simple no est asociado con otras anormalidades hepticas como son la
cicatrizacin (cirrosis) o la inflamacin (hepatitis). Es comn encontrarlo en pacientes con
sobrepeso o con diabetes mellitus.
Los pacientes que tienen durante varios aos una alta ingestin de alcohol pueden desarrollar
un hgado graso.
La inflamacin del hgado asociada con un incremento en el depsito de grasa puede
presentarse a mediana edad, en personas con sobrepeso, y frecuentemente en diabticos que
no tienen ingestin de alcohol. Esta enfermedad se asemeja a una hepatitis por alcohol, la cual
es llamada esteatosis heptica no alcohlica.
Se considera que 3 de cada 10 pacientes con esteatosis pueden evolucionar a una forma ms
grave de dao heptico, inflamando las clulas del hgado, fenmeno llamado esteatohepatitis.
Esta condicin con el tiempo puede evolucionar
y el paciente puede desarrollar cirrosis (hgado cicatrizado).

8. Cul es el tratamiento?-.Se recomienda que los pacientes diabticos y con obesidad

tengan un adecuado control de sus padecimientos. Debido a que una disminucin acelerada
del peso puede ser nociva para el hgado, se ha recomendado una disminucin paulatina de
peso de 500 g por semana en nios y de 1600 g en adultos.
Ningn medicamento ha probado reducir 100% el acumulo de grasa en el hgado. Algunos
medicamentos que se utilizan son: Vitamina E, metformina, gemfibrozil, cido ursodeoxiclico,
betana, entre otros