[CURSO DE CONTROL DE CALIDAD EN SEROLOGA- PROECO- 2014 ] Trabajo Final

Implementacin de Control de Calidad Interno en Banco de Sangre

Autores

Dugaro Paola
Saiz Beatriz

Objetivo
Evaluacin de sueros multirreactivos y dilucin de los mismos para el monitoreo de las
pruebas de ELISA para Chagas (recombinante) y Hepatitis B (HBsAg y anti-HBc) en Banco de Sangre.

Desarrollo

El Control de Calidad Interno (CCI) tiene el objetivo de asegurar el cumplimiento de todos los
procedimientos establecidos para el trabajo del laboratorio y el monitoreo de la precisin de los
resultados (construccin de grfica de control) con el propsito de detectar y de corregir eventuales
errores.
En el Laboratorio de Serologa del Banco de Sangre, procesamos las muestras de donantes y
pacientes a ser transfundidos, para la determinacin de Infecciones Transmisibles por Transfusin
(ITT). Entre dichas determinaciones se encuentra el tamizaje para Trypanosoma cruzy y para Virus de
Hepatitis B por tcnicas de Enzimoinmunoensayo (ELISA), las cuales arrojan resultados Reactivos y
No Reactivos. Por ese motivo, en la implementacin del CCI es suficiente el uso de dos controles, uno
NEGATIVO y otro POSITIVO.
Para cumplir con el objetivo y obtener el control positivo, procesamos dos sueros
multirreactivos (MR1 y MR2) para diferentes ITT, provistos por el Centro Regional de Hemoterapia
del Hospital de Pediatra SAMIC Prof. Dr. Juan Pedro Garrahan. Los reactivos utilizados fueron los
siguientes:
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CHAGAS: Chagatek Elisa Recombinante- Biomerieux (ELISA no competitivo).

HEPATITIS B (Ags): ELISA HBsAg- Wiener (ELISA no competitivo).
HEPATITIS B (anti-HBc): Hepanostika anti-HBc Uni-Form- Biomerieux (ELISA competitivo).

En primera instancia evaluamos por duplicado los sueros sin diluir en la corrida diaria,
obteniendo los siguientes resultados:

SUERO
PARMETROS
MULTIRREACTIVO
MR1 (1)
DO
CO
RP
RESULTADO
MR1 (2)
DO
CO
RP
RESULTADO
MR2 (1)
DO
CO
RP
RESULTADO
MR2 (2)
DO
CO
RP
RESULTADO
Tabla 1
Referencias:

CHAGAS

HBsAg

anti-HBc

0,354
0,182
1,942
REACTIVO
0,324
0,182
1,777
REACTIVO
0,602
0,182
3,302
REACTIVO
0,538
0,182
2,951
REACTIVO

0,147
0,075
1,951
REACTIVO
0,125
0,075
1,659
REACTIVO
0,735
0,075
9,757
REACTIVO
0,730
0,075
9,690
REACTIVO

0,532
0,377
1,412
NO REACTIVO
0,439
0,377
1,166
NO REACTIVO
0,122
0,377
0,324
REACTIVO
0,149
0,377
0,396
REACTIVO

DO: Densidad ptica

CO: valor Cut-Off
RP: Relacin de Positividad= DO/CO

Como especificacin de reactividad elegimos utilizar un rango de RP de 2,0-5,0 para los

mtodos no competitivos y de 0,2- 0,7 para mtodos competitivos. En base a esto seleccionamos los
sueros para CCI de la siguiente manera:
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CHAGAS: tanto MR1 como MR2 arrojaron resultados reactivos, siendo la RP de MR2 la que se
ajusta mejor al rango elegido (2,0-5,0). De esta manera optamos por el suero multirreactivo
MR2 para utilizarlo como CCI.

anti-HBc: en este caso tambin elegimos MR2 por presentar resultado reactivo con un RP
dentro del rango de especificidad elegido (0,2- 0,7).

HbsAg: nuevamente observamos resultados reactivos con ambos sueros. Para MR1 los valores
de RP estn por debajo del rango elegido (2,0-5,0) mientras que para MR2 los valores de RP
fueron mayores. Por este motivo optamos preparar el CCI a partir de una dilucin del suero
MR2. Ensayamos dos diluciones por duplicado: MR2 1:2 y MR2 1:4:

DILUCIN

MR2 1:2 (1)

MR2 1:2 (1)

MR2 1:4 (2)

MR2 1:4 (2)

PARMETROS
DO
CO
RP
RESULTADO
DO
CO
RP
RESULTADO
DO
CO
RP
RESULTADO
DO
CO
RP
RESULTADO

HBsAg
0,548
0,089
6,157
REACTIVO
0,538
0.089
6,048
REACTIVO
0,238
0,089
2,674
REACTIVO
0,249
0,089
2,798
REACTIVO

Tabla 2
Decidimos usar como CCI para la determinacin de HBsAg el suero MR2 diludo 1:4 por
encontrarse la RP dentro del rango elegido.

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Habiendo realizado los ensayos y seleccionado el suero multirreactivo a usar como CCI de las
tcnicas mencionadas, procedimos a preparar una dilucin en batch para el CCI a usar en la tcnica
de Antgeno de superficie para Hepatitis B. Realizamos dicha dilucin con un pool de sueros negativos
a fin de mantener la matriz. Posteriormente, fraccionamos alcuotas de dicha dilucin y del suero
multirreactivo MR2 en tubos Eppendorf, los cuales almacenamos en freezer a 20 C bajo cero.

Conclusin
Luego de analizar los sueros multirreactivos provistos por el Hospital Garrahan, con las
tcnicas para determinar Chagas y Hepatitis B, observamos que el de eleccin era el MR2 sin diluir
para la reaccin de Chagas y anticore y con una dilucin 1:4 para el Antgeno de Superficie de
Hepatitis B.

Bibliografa
Organizacin Panamericana de la Salud: Manual de procedimientos de control de calidad para
los laboratorios de Serologa de los Bancos de Sangre. 1994.
Fernndez Espina, Mazziotta: Gestin de la calidad en el laboratorio clnico. Ed. Mdica
Panamericana, 2005.
Material Terico del presente curso. 2014.

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