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iii
iv
AGRADECIMENTO
Primeiramente a Deus, por estar sempre presente.
A minha famlia, pelo apoio e compreenso nos momentos difceis.
Universidade Estadual de Campinas, especialmente ao Departamento de Biologia
Vegetal e ao Programa de Ps-Graduao em Biologia Vegetal, sem os quais seria
impossvel o desenvolvimento deste trabalho.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), pelo
apoio financeiro.
minha orientadora Dra. Marlene Aparecida Schiavinato, pela orientao, apoio,
amizade e confiana dedicada realizao deste trabalho.
minha co-orientadora Dra. Sara Adrin Lopez de Andrade, tambm pela
orientao, pelo apoio, amizade e confiana dedicada realizao deste trabalho.
Aos funcionrios do Departamento de Biologia Vegetal, especialmente Nia e ao
Luciano pela ajuda nas anlises, no cuidado s plantas e pela amizade.
A todos os colegas e amigos do departamento, em especial, Adases, Raphael, Lvia,
Lucas Cutri, Lucas Anjos, Luciana Menolli, Adriana e Luciano, pela amizade, ajuda,
compreenso e pelos momentos de descontrao proporcionados.
Aos professores Ladaslav Sodek, Ana Laga, Adriana Parada Dias, pelas valiosas
crticas e sugestes durante a realizao da pr banca.
A todos os que de alguma forma contriburam para a execuo deste trabalho.
NDICE
RESUMO ................................................................................................................................ viii
SUMMARY ................................................................................................................................ x
1. INTRODUO ..................................................................................................................... 12
1.1 Consideraes gerais ....................................................................................................... 12
1.2 Metais Pesados: Chumbo e Zinco ................................................................................... 13
1.3 Fitorremediao ............................................................................................................... 16
1.4 Fungos Micorrzicos arbusculares (FMAs) e MPs .......................................................... 19
1.5 Fixao Biolgica de Nitrognio em leguminosas .......................................................... 21
1.6 Leguminosas arbreas e recuperao de reas degradadas ............................................. 24
2. OBJETIVO ............................................................................................................................ 25
3. MATERIAL E MTODOS ................................................................................................... 26
3.1 Delineamento Experimental ............................................................................................ 26
3.2 Material vegetal ............................................................................................................... 26
3.3 Amostragem e preparao do solo................................................................................... 27
3.4 Condies de crescimento das plantas............................................................................. 27
3.5 Inoculao de FMA e rizbio .......................................................................................... 28
3.6 Variveis analisadas ........................................................................................................ 29
3.6.1 Medidas de crescimento ...................................................................................... 29
3.6.2 Determinao de Pb e nutrientes na parte area e nas razes das plantas ............ 29
3.6.3 Teores de clorofilas e carotenides ..................................................................... 30
3.6.4 Atividade especfica da nitrogenase .................................................................... 30
3.6.5 Determinaes bioqumicas................................................................................. 31
vi
vii
RESUMO
A contaminao do solo por metais pesados (MPs), causada por processos naturais ou
atividade humana, um dos mais graves problemas ambientais devido persistncia e alto
poder de toxicidade dos MPs. Em ambientes contaminados por MPs, as plantas podem
apresentar uma srie de distrbios fisiolgicos e nutricionais. No entanto, algumas espcies
de plantas so tolerantes aos MPs e essa tolerncia tem sido selecionada durante a
evoluo, e envolve diversos mecanismos. A associao com fungos micorrzicos
arbusculares (FMAs) pode reduzir os efeitos negativos do estresse induzido por altas
concentraes de metais sobre a planta hospedeira. Considerando a existncia de plantas
tolerantes, a fitorremediao, especialmente com espcies arbreas, aparece como uma
estratgia eficiente para a reabilitao de reas contaminadas com MPs, uma vez que essas
espcies imobilizam os metais absorvidos por mais tempo em seus tecidos. Assim, este
estudo teve como objetivos: avaliar a tolerncia, o acmulo e a distribuio dos MPs, Pb e
Zn, em trs espcies de leguminosas nas diferentes partes das plantas; avaliar a influncia
destes metais na colonizao micorrzica e na fixao biolgica de nitrognio e avaliar o
potencial fitorremediador de cada espcie. Foram realizados dois experimentos, um com Pb
e outro com Zn, com delineamento experimental totalmente casualizado e em esquema
fatorial 3 x 4. Os tratamentos consistiram em trs espcies de leguminosas arbreas Mimosa
caesalpiniaefolia
(sanso-do-campo),
Erythrina
speciosa
(eritrina-candelabro)
area e razes, nmero de ndulos e MS de ndulos das espcies que nodulam. Na espcie
que no nodula, S. parahyba, foi feita a medio da raiz pivotante e o volume total de
razes. Foram feitas as determinaes dos teores de Pb e Zn, dos nutrientes essenciais e
calculado o ndice de translocao (IT). Foram determinados o contedo de pigmentos
fotossintticos, a atividade da nitrogenase, aminocidos livres, nitrato, amnia, peroxidao
lipdica (MDA) e a taxa de colonizao micorrzica. Os dados foram submetidos anlise
de varincia, anlise de regresso e teste de Tukey. Verificou-se que altas concentraes de
Zn adicionadas ao solo afetam mais significativamente o desenvolvimento de mudas de
espcies arbreas quando comparadas s concentraes de Pb utilizadas. Todas as espcies
apresentam maiores concentraes de Zn e Pb nas razes que agem como uma barreira
translocao dos MPs, considerado um mecanismo de fitoestabilizao. O fato de serem
espcies de leguminosas arbreas de crescimento rpido, de fcil propagao, sistema
radicular extenso e aliado ao fato de conseguirem absorver e concentrar os metais pesados
Pb e Zn em suas razes, sugere que estas espcies arbreas analisadas podem ser potencias
plantas fitorremediadoras de solos moderadamente contaminados, sendo que, para o Pb a
espcie mais tolerante seria M. caesalpiniaefolia e para o Zn, a E. speciosa.
ix
SUMMARY
Soil contamination by heavy metals (HM), caused by natural processes or human activity,
is one of the most serious environmental problems due to their persistence and high toxicity
potential. In HM contaminated environments, plants may present a series of physiological
and nutritional disorders. However, some plant species are tolerant to HM and this
tolerance has been selected during evolution. The mechanisms involved in plant tolerance
to HM excess are diverse and varied. The association with arbuscular mycorrhizal fungi
(AMF) can reduce the negative effects of stress induced by high concentrations of metals to
the host plant. Considering the existence of tolerant plants, phytoremediation appears as an
efficient strategy for the rehabilitation of areas contaminated with HM, especially using tree
species, since these species immobilize absorbed metals for greater time periods in their
tissues. Thus, this study aimed to evaluate the tolerance, accumulation and distribution of
Pb and Zn in three species of leguminous trees, and further, to evaluate the influence of
these metals in mycorrhizal colonization and nitrogen fixation and evaluate the
phytoremediator potential of each of the studied species. For this purpose, two experiments
were conducted, one with Pb and another with Zn, with a completely randomized
experimental design in a factorial 3 x 4 scheme. The treatments consisted of three species
of tree legumes Mimosa caesalpiniaefolia (sanso-do-campo), Erythrina speciosa (eritrinacandelabro) and Schizolobium parahyba (guapuruvu) and four concentrations of metal, 0,
250, 500 and 1000 mg.dm-3 Pb and 0, 200, 400 and 600 mg.dm-3 Zn added to soil in the
form of lead acetate and zinc sulfate. Approximately 180 days after sowing, the seedlings
were collected. We determined the height and total leaf area, the dry matter (DM) of shoots
and roots, nodule number and nodule DM of nodulating species. In species that do not
x
nodulate, S. parahyba, measurements were made of the tap root and root volume.
Determinations were made of the levels of Pb and Zn as well as essential nutrients and the
rate of translocation (IT) was calculated. The content of photosynthetic pigments was
determined as well as photosynthesis, nitrogenase activity, amino acids, nitrate, ammonia
and lipid peroxidation (MDA) and the rate of colonization was estimated. The data were
subjected to analysis of variance, regression analysis and the Tukey test (5% significance).
It was found that the higher concentrations of Zn added to soil affected the development of
seedlings of the tree species studied more significantly than those of Pb. All species had
higher Zn and Pb concentrations in their root, indicating this organ acts as a barrier for
metal translocation to the shoots in these plants, considered a phytostabilization
mechanism. The fact that these species are fast growing, easily propagated and have a
extensive root system that can absorb and concentrate Pb and Zn, suggests that they have
potential for use in phytoremediation of contaminated soils.
xi
1. INTRODUO
13
O zinco (Zn) o segundo metal mais abundante nos organismos depois do ferro
(Fe), sendo o nico metal representado nas seis diferentes classes de enzimas:
oxidoredutases, transferases, hidrolases, ligases, liases e isomerases (Broadley et al., 2007).
um elemento essencial ao desenvolvimento normal das plantas, sendo absorvido
da soluo do solo primariamente como Zn2+, mas tambm pode estar complexado a
compostos orgnicos ligantes, sendo absorvido pela raiz e transportado ao caule via xilema
(Broadley et al., 2007). Entretanto, em elevadas concentraes, principalmente em solos
cidos, esse elemento pode se tornar txico, levando reduo do crescimento vegetal.
Sintomas de toxicidade ao Zn incluem deficincia induzida de Fe, levando clorose pela
diminuio da sntese de clorofila e degradao dos cloroplastos, alm de interferir na
entrada de fsforo (P), magnsio (Mg) e mangans (Mn) (Carroll & Loneragan, 1968;
Chaney, 1993; Broadley et al., 2007).
O chumbo (Pb) um metal no essencial s plantas e um dos maiores poluentes de
ecossistemas, pois se acumula prontamente nos solos e sedimentos. Alm dos processos
naturais de intemperismo, as principais fontes de Pb no solo so os escapamentos de
automveis, chamins de indstrias que utilizam Pb, minerao e fundio do minrio de
Pb, fertilizantes, pesticidas, pigmentos e a deposio atmosfrica do Pb presente na
gasolina que o possui como aditivo (Sharma & Dubey, 2005a).
O Pb est disponvel para as plantas no solo e em fontes aerossis. Estudos sobre
entrada de Pb nas plantas demonstram que as razes tem habilidade de retirar grandes
quantidades desse MP do solo, enquanto que simultaneamente tem o grande poder de
restringir seu transporte parte area (Lane & Martin, 1977).
14
humana, e quando excedido requer alguma forma de interveno na rea avaliada, de forma
a interceptar as vias de exposio (CETESB 2001, 2005).
A CETESB adota os valores orientadores acima estabelecidos, por um perodo de
vigncia de quatro anos, aplicando-os tanto na preveno da poluio de solos e guas
subterrneas, como no controle de reas contaminadas (CETESB 2001).
Os valores orientadores de contaminao para o Pb e Zn no solo, em mg.kg-1, no
Estado de So Paulo so respectivamente: valores de preveno: 72 e 300; valores de
interveno em rea agrcola, residencial e industrial; 180, 300 e 900, e 450,1000 e 2000
(CETESB, 2005).
Com relao concentrao dos MPs Pb e Zn consideradas txicas nos tecidos
vegetais, Kabata-Pendias & Pendias (2001) sugerem que concentraes na planta entre 100
e 400, e, entre 30 e 300 mg.kg-1 de massa seca de tecido da parte area para o Zn e Pb,
respectivamente, so txicas.
1.3 Fitorremediao
A fitorremediao uma tcnica que utiliza plantas para remover poluentes do solo
ou torn-los inofensivos (Salt et al., 1998). As diferentes categorias de fitorremediao
incluem: fitoextrao, fitodegradao, fitovolatilizao, fitoestimulao e fitoestabilizao.
A fitoestabilizao consiste no uso de plantas para imobilizar contaminantes, reduzindo a
sua disponibilidade no solo. Na fitoextrao a planta absorve o contaminante,
transportando-o para a parte area onde acumulado em altas concentraes. Na
fitovolatilizao as plantas ou a atividade da microbiota associada s razes ajudam a
16
Esta variedade de genomas e tolerncia facultativa, como por exemplo, a redistribuio das
razes para as zonas menos contaminadas do solo, permite a sobrevivncia das rvores no
selecionadas para tolerncia a metais em solos poludos. Vrios estudos tm mostrado que a
aclimatao de rvores para o ambiente do solo pos-transplantio de grande importncia e
pode ser um fator significativo na sobrevivncia da rvore em solo contaminado com
metais. Entretanto a fertilidade do solo, assim como a presena de fungos micorrzicos, so
importantes, pois podem aumentar a resistncia das rvores aos metais (Dickinson et al.,
1992; Pulford & Watson, 2003).
Soares, et al. (2001) reportaram, no entanto, que mudas de diferentes espcies
arbreas apresentaram comportamento distinto em relao aos teores, distribuio/
acmulo de metais nos diferentes rgos vegetais e tambm quanto tolerncia ao excesso
de MPs no meio.
So escassos os estudos de fitorremediao utilizando espcies arbreas. No
entanto, a falta de relatos acerca de sintomas de toxicidade em espcies arbreas indica que
os mecanismos de tolerncia nelas existentes lhes permitem suportar melhor a
contaminao do solo com MPs do que as culturas agrcolas (Pulford & Watson, 2003).
Algumas rvores, apesar de no serem especialmente selecionadas para tolerncia a metais,
geralmente conseguem sobreviver em solo contaminado, ainda que apresentando
crescimento normalmente muito reduzido em relao quelas crescendo em solos no
contaminados (Dickinson et al., 1992; Pulford & Watson, 2003). Assim, importante que
mais esforos sejam realizados em estudos de fitorremediao de solos contaminados com
MPs, utilizando espcies arbreas (Caires, 2005, Cupertino, 2006).
18
de colonizao fngica e das condies de crescimento das plantas (Weissenhorn & Leyval,
1995).
Arriagada et al. (2007) observaram que a presena de alta concentrao de Pb no
solo reduziu o desenvolvimento intra-radical do FMA e conseqentemente diminuiu a sua
contribuio para o acmulo de Pb em Eucalyptus globulus.
Alguns autores tm proposto que FMAs agem como uma barreira para a
transferncia de metais do solo para as plantas, reduzindo a transferncia do metal para a
parte area e, conseqentemente, diminuindo a fitotoxicidade. Isso pode estar relacionado
com a capacidade de reteno de MPs nas estruturas fngicas (Carneiro et al., 2001;
Andrade et al. 2003; Andrade et al., 2004). Alm disso, provvel que as micorrizas
possam contribuir para reduzir a fitotoxicidade dos metais em decorrncia do aumento da
absoro de P pela planta hospedeira (Andrade et al., 2003; Andrade et al., 2004; Soares et
al., 2006).
Diferenas na eficincia de FMAs em relao absoro e tolerncia a MPs por
plantas tm sido relatadas por vrios autores, evidenciando que a associao entre planta e
FMA importante para que haja um efeito benfico da micorriza em solos contaminados
por metais (Hildebrandt et al., 1999; Joner et al., 2004; Zhang et al., 2005; Silva et al.
2006; Arriagada et al., 2007).
Hildebrandt et al. (1999) observaram que o isolado de FMA Glomus intraradices
Br1, obtido de solo contaminado com MPs, conferiu tolerncia a uma variedade de plantas,
em diversos solos pouco frteis e contaminados com MPs. Alm disso, o isolado Br1 foi
mais efetivo em transferir tolerncia a MPs em tomate, milho e Medicago truncatula que o
isolado originrio de solos no contaminados, G. intraradices Sy167, freqentemente
20
utilizado por esses pesquisadores para diferentes estudos de interao entre FMA-planta
(Hildebrandt et al., 2007). Esses resultados reforam a importncia de FMAs nativos, os
quais apresentam maior potencial de adaptao s altas concentraes de metais no solo
(Del Val et al., 1999; Silva et al., 2006; Hildebrandt et al., 2007).
Trabalhando com a gramnea Brachiaria decumbens, Silva et al. (2006) observaram
que vrios isolados de FMA contriburam para a reduo dos teores de Zn e de Cd na parte
area desta planta.
Dessa forma, como so escassos os estudos relacionados influncia de MPs sobre
espcies arbreas, as quais normalmente so muito dependentes de micorrizas, devem-se
empenhar esforos no sentido de conhecer as conseqncias da inoculao de FMAs e da
contaminao por MPs em termos de tolerncia, acumulao e influncia na colonizao
micorrzica.
nitrogenados. Tal simbiose ocorre nos ndulos formados nas razes destas plantas. Os
rizbios reduzem o N2 em amnio com ajuda da enzima nitrogenase. Por ser
irreversivelmente inativada pelo oxignio, a nitrogenase fixa N2 em condies anaerbicas,
sendo que o processo utiliza uma grande quantidade de energia (Dixon & Wheeler, 1986;
Zahran, 1999). A simbiose entre rizbios e leguminosas a principal fonte de nitrognio
fixado em sistemas baseados no solo e pode fornecer mais da metade da origem biolgica
do nitrognio fixado (Mulongoy et al. 1992). A deficincia de nitrognio mineral, muitas
vezes limita o crescimento da planta (Graham & Vance, 2000) e, assim, essas relaes
simbiticas podem desempenhar um papel fundamental no desenvolvimento vegetal e na
recuperao de solos degradados ou com deficincia desse elemento.
Diversas condies ambientais podem ser fatores limitantes ao crescimento e
atividade das plantas que apresentam simbiose com rizbios. Na simbiose Rhizobiumleguminosa, o processo de fixao de N2 est fortemente relacionado ao estado fisiolgico
da planta hospedeira. Portanto, sob efeito persistente de fatores limitantes, tais como
salinidade, deficincia de nutrientes, MPs, temperaturas extremas, entre muitos outros, o
rizbio no capaz de expressar sua capacidade total no processo de fixao (Brockwell, et
al. 1995; Zahran, 1999).
Os MPs podem prejudicar as associaes simbiticas e afetar o adequado
desenvolvimento das plantas hospedeiras (Porter & Sheridan, 1981; Obbard & Jones,
2001).
Porter & Sheridan (1981) trabalhando com alfafa em solo contaminado com MPs
alm de observarem reduo na atividade da nitrogenase e consequentemente na FBN,
verificaram tambm uma alta sensibilidade do sistema de fixao de nitrognio ao Zn, e
22
acreditam que esta sensibilidade reside nos rizbios, uma vez que estes so altamente
sensveis a baixas concentraes de Zn no meio de crescimento. Esses autores tambm
afirmam que a reduo ou inibio da atividade da nitrogenase durante um perodo de anos,
pode diminuir a fertilidade e a capacidade de produo dos sistemas naturais e agrcolas
afetados, o que no deve ser ignorado, considerando-se a importncia da contribuio do
nitrognio fixado pelas leguminosas nesses ambientes.
A infeco micorrzica nas razes de leguminosas tem sido relatada por estimular
tanto a nodulao quanto a fixao de N2, especialmente em solos com baixa
disponibilidade em P (Ganry et al., 1982; Redecker et al.,1997).
Redecker et al. (1997) trabalhando com as interaes entre feijo (Phaseolus
vulgaris), cepas de Rhizobium spp. e FMAs, observaram um envolvimento especfico das
espcies de FMAs na aquisio de nitrognio nessas leguminosas tanto na fixao
simbitica de nitrognio (FBN), quanto na aquisio do nitrognio do solo. Verificaram
tambm, que em solos de baixo P disponvel, os efeitos da simbiose micorrzica podem
levar a melhoria da eficincia da FBN e/ou levar a melhora na absoro de N no solo.
Os processos biolgicos como a fixao de N2 mantm a dinmica do solo, sendo
importantes para o ecossistema, alm disso, so capazes de melhorar a produtividade
agrcola, minimizando as perdas do solo, melhorando as condies edficas adversas,
tornando a FBN essencial para a manuteno da estrutura do solo (Zahran, 1999; Barea et
al., 2005).
23
24
2. OBJETIVO
25
3. MATERIAL E MTODOS
26
Amostra
M.O.
-3
-3
mg dm
0
250 Pb
500 Pb
1000 Pb
200 Zn
400 Zn
600 Zn
g dm
18
18
18
18
20
19
19
pH
Ca
Mg
-3
5,0
4,8
4,9
4,9
4,8
4,7
4,8
mg dm
17
22
21
24
20
18
18
H+Al
S.B. C.T.C. V%
-3
3,6
3,3
3,4
3,5
3,2
3,1
3,1
24
22
24
25
32
23
24
mmol dm
6
34
5
34
6
31
6
28
6
38
5
38
6
38
33,6
30,3
33,4
34,5
41,2
31,1
33,1
68
65
64
62
79
69
71
%
50
47
52
55
52
45
47
Cu
Fe
Mn
Zn
-3
4,1
4,8
4,6
4,8
5,0
5,0
5,2
8
10
9
9
9
9
9
mg dm
7,5
0,9
4,5
6,8
0,8 117,5
6,3
0,8 228,0
5,6
0,6 489,0
5,8
101
7,7
5,3 174,4 2,6
5,3 236,9 1,6
Pb
28
destes elementos na raiz (R) e parte area (PA), foi calculado o ndice de translocao (IT),
que corresponde porcentagem total absorvida que foi transportada da raiz para a parte
area, segundo a frmula: IT = 100x concentrao na PA/(concentrao na PA+
concentrao na R) (Abichequer & Bohnen, 1998).
3.6.3 Teores de clorofilas e carotenides
Os teores de pigmentos fotossintticos foram determinados segundo Hiscox &
Israelstam (1979). Para o clculo das concentraes de clorofila a, b, clorofila total (a+b) e
carotenides foram utilizadas as frmulas propostas por Lichtenthaler (1987).
31
estruturas. A porcentagem de colonizao (%) dada pela seguinte frmula: (+)/ (+)+
(-)x 100= +/100x100 = % colonizao (Giovanetti & Mosse, 1980).
A estimativa da porcentagem de colonizao micorrzica realizada aps prvia
despigmentao da raiz com KOH a 10% e colorao com azul de tripano, sendo as razes
armazenadas em frascos contendo glicerol acidificado at o momento da contagem das
estruturas fngicas (Phillips & Hayman, 1970).
32
4. RESULTADOS
4.1 Experimento I Zn
4.1.1 Germinao
A adio de Zn ao solo influenciou de forma negativa a germinao de sementes de
M. caesalpiniaefolia. O tratamento controle, sem adio do metal, desde o 8 dia de
germinao at o desbaste, apresentou maior porcentagem de germinao em relao ao
tratamento com 400 mg dm-3 de Zn no solo (Figura 1). A germinao das sementes de E.
speciosa no diferiu significativamente entre os tratamentos (dados no apresentados).
100
Controle
Germinao (%)
90
Zn 200 mg
80
Zn 400 mg
70
Zn 600 mg
a a
60
50
b b b
b b
40
30
20
10
0
0
10 11 12
13
14
15
Tempo (dias)
5 cm
A rea foliar foi afetada nas trs espcies reduzindo-se linearmente com a adio de
concentraes crescentes de Zn, de forma mais acentuada em M. caesalpiniaefolia e E.
speciosa (Figura 3).
A produo de MS da parte area e da raiz tambm foi afetada nas trs espcies,
assim como a rea foliar e a altura (Figura 3).
34
800
2222
40
))))
a
r
u
t
l
A
m
c
50
0
2
8
,
0
=
2222
R
;
x
7
5
,
0
4
8
,
6
5
7
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
1
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
3
0
,
0
7
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,
9
4
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
900
60
m
c
0
6
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
9
,
0
3
3
,
2
5
5
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
1000
1
4
9
,
0
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2222
R
;
x
6
9
,
0
9
7
,
5
1
7
=
y
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s
o
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c
e
p
s
.
E
1100
8
5
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
8
0
,
0
8
0
,
3
6
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
70
(B)
4
4
8
,
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
8
3
,
4
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
(A)
80
((((
r
a
i
l
o
f
a
e
r
30
700
600
500
400
300
200
20
100
10
3,2
8
7
2,8
R
S
M
2,4
( )
( )
3,6
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
4,0
))))
4
2
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
3
7
,
3
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
10
600
8
6
4
8
,
0
=
2222
R
;
x
4
0
1
.
8
9
,
9
3
6
,
0
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
4,4
400
4
9
5
7
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
1
,
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
12
4,8
5
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
7
0
,
8
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
A
P
S
M
(D)
7
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
0
0
,
0
4
4
,
3
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
((((
13
11
200
))))
0
7
8
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
0
,
0
9
1
,
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
(C)
600
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
2,0
1,6
1,2
0,8
0,4
0,0
600
200
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
))))
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
600
))))
Figura 3: Altura mdia (A), rea foliar (B), massa da matria seca de parte area (MSPA) (C),
massa da matria seca de raiz (MSR) (D), das espcies E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.
parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.
(B)
9
9
9
,
0
=
2222
R
;
2
1
,
0
+
x
4
0
1
.
8
8
,
4
2222
xxxx
7
0
1
.
9
3
,
5
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
o
l
u
d
N
e
d
o
r
e
m
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
300
0,14
0,12
250
s
o
l
u
d
N
e
d
S
M
200
150
100
0,10
0,08
0,06
0,04
50
0,02
0
0,00
600
200
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
))))
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
600
))))
Figura 4: Nmero de ndulos (A) e massa da matria seca de ndulos (B) das espcies E.
speciosa e M. caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.
36
37
Tabela 2: Concentrao de nutrientes minerais nas folhas das espcies arbreas E. speciosa,
M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn.
Anlise de regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso
linear; x2= regresso quadrtica.
Folhas
Erythrina speciosa
-3
-1
mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
230,4
200
233,9
400
310,9
600
216,2
-1
g kg
Mg
3,9
3,7
3,9
4,0
Regresso
p
ns
Concentrao
0
200
400
600
Fe
109,7
99,1
98,7
280,8
Regresso
p
x
<0,05
ns
Concentrao
0
200
400
600
Regresso
Fe
93,6
112,7
117,6
106,7
ns
Mg
2,3
2,4
2,2
2,6
ns
mg kg
Mn
167,4
69,8
64,4
66,2
-1
-1
g kg
P
2,2
1,9
2,5
2,7
-1
g kg
S
2,8
2,2
3,1
4,3
x
x
x
<0,01 <0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
3,2
75,3
1,8
2,2
3,1
83,0
1,8
2,3
3,8
116,1
2,0
3,3
3,4
109,7
1,1
2,2
ns
ns
ns
ns
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
52,9
0,8
2,6
57,9
1,2
3,1
46,1
1,2
3,2
54,6
1,2
3,2
ns
ns
ns
38
-1
-1
mg kg
Cu
12,1
10,2
13,3
12,1
-1
g kg
K
24,2
21,9
20,2
19,1
g kg
Ca
24,6
27,3
29,9
28,9
ns
ns
ns
K
16,2
15,2
15,3
12,5
Ca
18,6
17,2
22,7
15,7
Cu
7,5
7,4
9,8
4,8
ns
ns
x
<0,05
K
8,0
9,8
9,8
10,5
ns
Ca
20,2
21,0
19,9
23,6
ns
Cu
2,6
3,8
4,3
3,8
ns
-1
mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
137,3
200
69,4
400
73,0
600
86,4
Regresso
ns
Concentrao
0
200
400
600
Regresso
p
Fe
158,0
65,9
58,5
ND
x
<0,05
-1
-1
-1
-1
))))
S
M
1
g
k
g
m
600
500
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
))))
((((
0
2
7
,
0
=
2222
R
;
x
8
3
,
0
+
4
5
,
7
4
2
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
600
700
400
300
200
100
0
K
10,8
9,9
15,3
ND
ns
Ca
8,8
8,1
7,9
ND
ns
Cu
6,3
5,9
7,2
ND
ns
-1
400
600
500
400
300
200
100
0
200
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
))))
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
mg kg
Cu
15,7
9,2
11,4
12,2
ns
6
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
6
9
,
0
+
2
7
,
0
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
7
5
7
,
0
=
2222
R
;
2222
x
5
2
0
0
,
0
+
x
2
5
,
2
+
0
5
,
8
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
g kg
Ca
13,6
13,9
11,5
13,0
ns
3
2
9
,
0
=
2222
R
;
x
9
8
,
0
+
9
0
,
8
9
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
2
1
7
,
0
=
2222
R
;
x
4
8
,
0
+
5
4
,
4
3
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
800
S
M
1
g
k
g
m
-1
g kg
K
27,6
26,4
25,2
23,3
ns
(B)
(A)
900
-1
g kg mg kg
g kg
g kg
Mg
Mn
P
S
2,5
113,0
1,9
2,8
2,3
68,5
1,5
2,3
2,4
69,9
1,9
3,6
2,5
67,5
2,9
4,2
ns
ns
ns
ns
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
0,7
18,6
0,9
0,9
0,9
24,1
1,4
1,6
1,3
19,4
1,4
1,7
ND
ND
ND
ND
ns
ns
ns
ns
600
))))
Figura 5: Concentrao de Zn nas folhas (A) e no caule (B) das espcies E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.
39
9
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
8
,
8
+
4
7
6
,
3
9
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
))))
((((
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
9
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
8
,
1
+
7
1
,
6
7
5
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
4500
S
M
1
g
k
g
m
Raiz
1
0
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
,
5
+
4
5
,
6
3
3
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
5000
4000
3500
3000
2500
2000
1500
1000
500
0
((((
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
600
))))
Tabela 4: Concentrao de nutrientes minerais nas razes das espcies arbreas E. speciosa e
M. caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso
(n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2= regresso
quadrtica.
Raiz
Erythrina speciosa
-3
-1
mg dm
Concentrao
0
200
400
600
mg kg
Fe
3884,7
3180,2
3243,1
11728,6
Regresso
p
x
<0,001
Concentrao
Fe
0
9224,7
200
7449,9
400
5824,6
600
ND
Regresso
p
x
<0,05
Concentrao
0
200
400
600
Regresso
p
Fe
5430,4
3912,7
3777,0
2522,0
x
<0,05
-1
g kg
Mg
3,5
2,6
2,5
2,7
mg kg
Mn
100,8
52,7
58,6
95,3
-1
-1
g kg
P
1,5
1,5
2,1
2,1
-1
g kg
S
4,6
3,7
4,7
5,3
x
ns
x
0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
1,8
145,6
1,0
2,7
1,8
104,1
1,3
3,5
2,8
65,4
1,4
3,8
ND
ND
ND
ND
ns
x
x
x
x
<0,001 <0,01
0,01
<0,001
Schizolobium parahyba
Mg
Mn
P
S
4,8
106,2
0,9
3,9
2,7
67,1
1,1
3,5
2,9
60,9
0,8
3,6
2,8
67,9
1,2
3,9
ns
ns
ns
ns
-1
-1
g kg
Ca
7,1
6,8
8,2
8,7
ns
x
<0,05
x
<0,05
K
7,9
6,5
6,4
ND
Ca
9,1
9,6
8,4
ND
Cu
36,6
44,5
43,4
ND
x
<0,01
x
<0,01
ns
K
18,4
13,2
10,8
13,9
x
<0,05
Ca
7,5
7,5
5,1
5,5
x
<0,01
Cu
31,3
38,1
33,3
28,7
ns
mg kg
Cu
39,2
33,4
45,6
77,3
-1
g kg
K
22,7
23,4
21,9
19,9
maior translocao deste elemento para a parte area quando comparadas s plantas
crescendo em solos com altas concentraes de Zn. Em E. speciosa, da concentrao total
de Zn absorvida, em torno de 35% foi transportado para a parte area.
42
Concentrao
-3
Zn (mg dm )
Fe
Mg
0
200
400
600
Regresso
p
8,8
8,8
10,6
2,5
65,2
69,3
71,7
70,7
ns
ns
Concentrao
0
200
400
600
Fe
Mg
x
ns
ns
0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
2,8
2,3
2,1
67,2
69,3
66,4
41,4
50,7
84,1
72,9
71,5
57,2
ND
ND
ND
ND
72,4
72,4
69,5
58,4
72,5
69,6
67,8
71,9
Ca
Cu
Zn
69,6
67,1
67,5
67,9
83,9
85,8
83,5
82,4
42,4
36,5
35,6
23,8
46,1
30,4
26,1
26,0
ns
ns
x
<0,05
x
<0,05
Ca
Cu
Zn
53,6
52,0
52,4
77,0
79,4
58,0
75,2
72,6
87,8
27,0
24,9
24,4
41,9
22,8
21,7
ND
ND
ND
ND
ND
55,0
54,9
58,8
61,4
Regresso
p
ns
ns
Concentrao
0
200
400
600
Regresso
Fe
Mg
x
x
ns
<0,01
0,01
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
1,8
3,2
4,6
4,1
35,8
46,8
44,8
50,8
33,5
46,6
44,4
47,8
49,7
54,9
60,1
50,0
ns
ns
ns
ns
ns
x
<0,05
ns
x
0,01
Ca
Cu
Zn
40,4
47,6
47,3
45,6
30,7
42,9
47,4
43,1
72,9
73,6
79,5
80,8
8,6
11,7
11,6
11,9
49,7
39,9
20,9
24,8
ns
ns
ns
ns
ns
4.1.4 Pigmentos
Observou-se que nas espcies estudadas os teores de todos os pigmentos
fotossintticos analisados foram influenciados de forma negativa com o incremento do Zn
no solo. Em S. parahyba e M. caesalpiniaefolia houve reduo de mais de 80% nos teores
de clorofila a no tratamento com maior concentrao de Zn em relao ao tratamento sem
43
adio do metal (Figura 8). O mesmo foi observado para os carotenides totais em S.
parahyba.
(B)
3
5
6
,
0
=
2222
R
;
x
5
1
0
,
0
1
3
,
5
3
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
6
7
6
,
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
7
9
,
2
4
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
50
14
45
12
2
-
m
c
.
g
10
30
bbbb
a
l
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f
o
r
o
l
C
((((
((((
))))
35
))))
m
c
.
g
40
a
l
i
f
o
r
o
l
C
5
7
7
,
0
=
2222
R
;
2222
xxxx
5
0
1
.
6
9
,
1
x
3
0
0
,
0
+
4
4
,
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a
b
y
h
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r
a
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.
S
8
1
9
,
0
=
2222
R
;
x
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4
0
,
0
4
5
,
5
3
=
y
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b
y
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r
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.
S
55
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0
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,
0
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;
x
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0
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2
1
=
y
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s
o
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c
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p
s
.
E
(A)
60
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20
15
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))))
(C)
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s
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t
o
r
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))))
2
-
m
c
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g
52
44
40
36
32
28
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1
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.
0
=
2222
R
;
x
8
1
0
,
0
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5
,
4
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
18
6
9
7
.
0
=
2222
R
;
x
5
2
0
,
0
6
0
,
0
4
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
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0
2
8
.
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
3
2
,
2
1
=
y
a
i
l
o
f
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a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
0
5
6
.
0
=
2222
R
;
x
6
2
0
,
0
2
4
,
2
5
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
m
c
.
g
l
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t
o
t
a
l
i
f
o
r
o
l
C
600
))))
7
6
7
.
0
=
2222
R
;
x
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0
0
,
0
1
9
,
0
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
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.
E
20
56
2
-
400
(D)
7
2
6
.
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
4
3
,
7
4
=
y
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s
o
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c
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p
s
.
E
60
200
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m
d
g
m
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n
Z
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r
t
n
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c
n
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C
((((
400
o
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o
s
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3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
16
14
12
10
8
6
4
2
0
600
200
((((
))))
400
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
400
n
Z
e
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o
a
r
t
n
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c
n
o
C
((((
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
600
))))
Figura 8: Teores de clorofila a (A), clorofila b (B), clorofila total (C) e carotenides totais (D)
em g cm-2 de massa fresca de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em
solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=5), significncia (p<0,05) e R2=
coeficiente de determinao.
44
Erythrina speciosa
-3
mg dm de Zn no solo
0
200
400
600
moles etileno.g
Mimosa caesalpiniaefolia
-1
-1
.h . MF ndulo
6.726 a
6.716 a
12.924 a
6.623 a
3.966 b
4.463 b
1.745 b
1.533 b
45
(A)
(B)
s
n
a
i
l
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e
n
i
p
l
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s
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M
9
6
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,
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R
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x
3
2
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,
0
+
9
4
1
,
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4
=
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c
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p
s
.
E
160
s
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s
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s
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b
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.
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s
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.
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))))
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n
m
A
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l
o
m
n
))))
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l
o
m
n
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40
(C)
s
n
a
s
o
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s
.
E
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
40
80
35
70
1
-
g
m
l
o
m
n
((((
60
50
))))
))))
600
))))
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
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p
l
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c
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M
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A
s
n
a
b
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a
p
.
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g
m
l
o
m
n
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8
4
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,
0
=
2222
R
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x
7
5
0
,
0
+
5
6
8
,
8
1
=
y
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s
o
i
c
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p
s
.
E
90
400
(D)
5
4
6
,
0
=
2222
R
;
x
8
2
0
,
0
+
9
5
2
,
3
6
=
y
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n
i
p
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a
c
.
M
100
200
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))))
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3
m
d
g
m
600
n
Z
e
d
o
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r
t
n
e
c
n
o
C
((((
400
o
l
o
s
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d
3
m
d
g
m
200
n
Z
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d
o
a
r
t
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e
c
n
o
C
25
20
((((
A
D
M
30
40
15
30
10
20
5
10
600
200
((((
))))
400
o
l
o
s
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d
3
m
d
g
m
400
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
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c
n
o
C
((((
o
l
o
s
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d
3
m
d
g
m
200
n
Z
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
600
))))
Figura 9: Teores de amnia (A), nitrato (B), aminocidos totais (C) e MDA (D) em nmol.mg-1
de massa seca de folhas de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em
solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=3), significncia (p<0,05) e ns=
no significativo.
Concentrao (mg dm )
0
200
400
600
Erythrina speciosa
62
44
57
56
Mimosa caesalpiniaefolia
39
88
57
71
Regresso
p
ns
x
0,001
Schizolobium parahyba
48
66
79
68
2
x
<0,01
4.2 Experimento II Pb
4.2.1 Germinao
A adio de Pb no solo, no influenciou significativamente a germinao das
espcies analisadas (dados no apresentados).
4.2.2 Resultados das medidas de crescimento
A produo de MS da parte area nas espcies E. speciosa e S. parahyba diminuiu
linearmente com a adio de Pb ao solo (Figura 5). No entanto, o crescimento em altura foi
47
48
(B)
(A)
1
1
6
,
0
=
2222
R
;
x
4
4
,
0
8
6
,
2
1
5
1
=
y
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s
o
i
c
e
p
s
.
E
s
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s
o
i
c
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p
s
.
E
9
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
1
0
0
,
0
7
6
2
,
2
5
=
y
a
b
y
h
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a
p
.
S
1950
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
2100
s
n
a
i
l
o
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e
a
i
n
i
p
l
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s
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a
c
.
M
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
80
1800
70
1650
a
r
u
t
l
A
1500
r
a
i
l
o
f
a
e
r
1350
))))
m
c
((((
m
c
2222
60
50
40
1200
1050
900
750
30
600
450
20
1000
))))
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
5,0
13
4,5
12
4,0
11
10
R
S
M
( )
( )
1000
s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
5
9
5
,
0
=
2222
R
;
x
2
2
0
,
0
2
1
,
3
6
=
y
A
P
S
M
5,5
8
2
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
6
5
,
8
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
6,0
s
n
a
i
l
o
f
e
a
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n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
14
750
(D)
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c
e
p
s
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E
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500
((((
))))
(C)
16
250
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s
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3
m
d
g
m
((((
750
b
P
e
d
o
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t
n
e
c
n
o
C
500
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
250
b
P
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o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
3,5
3,0
7
0,5
6
5
4
0,0
1000
250
500
((((
))))
750
o
l
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s
e
d
3
m
d
g
m
((((
750
b
P
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e
c
n
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C
500
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
1000
))))
Figura 10: Altura (A), rea foliar (B), massa da matria seca da parte area (MSPA) (C) e
massa da matria seca da raiz (MSR) (D) em E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.
parahyba, em diferentes concentraes de Pb. Anlise de regresso (n=3), significncia
(p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de determinao.
49
(A)
(B)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
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M
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
0,35
s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
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6
5
9
,
0
=
2222
R
;
6
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1
,
0
+
x
4
0
1
.
0
7
,
4
+
2222
xxxx
7
0
1
.
2
6
,
5
=
y
a
s
o
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c
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p
s
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0,30
70
( )
g
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n
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M
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l
u
d
N
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d
o
r
e
m
0,25
0,20
0,15
0,10
0,05
60
50
40
30
20
10
0,00
0
500
1000
250
500
((((
750
o
l
o
s
e
d
3
m
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g
m
))))
b
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n
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c
n
o
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o
l
o
s
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3
m
d
g
m
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
1000
))))
Figura 11: Massa da matria seca de ndulos (A) e nmero de ndulos (B) de E. speciosa e
M. caesalpiniaefolia em resposta ao incremento da concentrao de Pb no solo. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de
determinao.
50
(A)
))))
))))
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
((((
150
100
50
105
90
75
60
45
30
15
0
250
500
((((
))))
750
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
1000
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
((((
750
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
500
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
250
3
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
,
0
+
4
5
,
0
=
y
a
b
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h
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r
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p
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S
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8
9
,
0
=
2222
R
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x
5
2
,
0
+
6
8
,
3
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
120
S
M
1
g
k
g
m
200
2
9
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,
0
=
2222
R
;
x
5
0
,
0
+
7
1
,
9
1
=
y
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i
l
o
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i
p
l
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c
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M
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c
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M
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P
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r
t
n
e
c
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o
C
2
5
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
,
0
+
9
,
6
1
=
y
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s
o
i
c
e
p
s
.
E
9
3
7
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
,
0
+
8
8
,
3
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
250
S
M
e
d
1
g
k
g
m
135
1000
))))
Figura 12: Concentrao de Pb nas folhas (A) e no caule (B) das espcies E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3), (p<0,05)e R2= coeficiente de determinao.
51
Tabela 10: Concentrao de nutrientes minerais no caule das espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.
Folhas
Erythrina speciosa
-3
mg dm
Concentrao
0
250
500
1000
mg kg
Fe
-1
-1
g kg
Mg
mg kg
Mn
-1
g kg
P
-1
g kg
S
-1
g kg
K
-1
g kg
Ca
-1
mg kg
Cu
-1
mg kg
Zn
-1
193,2
203,5
168,6
190,6
4,2
3,9
3,4
3,5
120,9
178,5
135,3
126,7
1,7
1,5
1,7
1,8
2,2
2,1
2,2
2,5
20,5
17,4
21,4
21,3
25,5
27,8
24,2
26,2
12,6
12,4
13,0
14,4
29,3
27,4
24,7
33,4
Regresso
p
ns
x
<0,05
x
<0,05
ns
ns
ns
ns
ns
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p
Fe
125,9
119,1
129,0
136,7
ns
Mg
3,5
3,4
3,8
3,7
ns
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
93,4
2,3
2,2
83,7
1,9
2,1
86,8
2,1
2,1
93,2
2,3
2,2
ns
ns
ns
K
16,7
16,9
17,2
17,8
ns
Ca
22,8
25,2
22,2
24,2
ns
Cu
10,6
8,9
8,3
7,9
ns
Zn
33,0
27,3
25,3
27,5
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Fe
102,2
101,4
94,4
96,8
Mg
2,7
2,1
2,3
2,6
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
51,8
1,1
2,5
56,3
1,3
3,3
65,6
1,1
2,8
69,0
1,2
3,2
K
8,2
12,0
9,2
7,9
Ca
27,0
26,0
30,6
32,3
Cu
4,0
4,7
3,3
3,6
Zn
31,0
19,9
16,9
17,1
Regresso
p
ns
ns
ns
ns
ns
x
<0,01
ns
ns
52
ns
Caule
Erythrina speciosa
-3
-1
mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
155,0
250
67,4
500
27,6
1000
45,4
-1
g kg
Mg
2,5
2,5
2,3
2,4
Regresso
p
x
0,05
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Fe
217,1
79,8
45,0
50,7
Mg
1,0
0,8
1,0
1,0
Regresso
p
x
<0,05
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
Fe
182,8
112,8
136,8
175,9
ns
Mg
0,8
0,9
0,7
0,6
ns
mg kg
Mn
117,2
142,8
124,7
92,5
-1
-1
g kg
P
1,6
1,2
1,3
1,6
-1
g kg
S
1,7
2,5
2,2
2,7
-1
g kg
K
21,6
19,2
20,3
23,1
ns
x
ns
x
<0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
22,9
1,8
0,8
15,0
23,4
1,4
1,0
14,3
19,4
1,2
0,8
13,9
23,3
1,5
0,9
14,9
ns
ns
ns
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
9,1
0,7
1,3
9,6
0,9
1,7
9,2
0,7
1,5
8,9
1,0
1,4
ns
ns
ns
-1
g kg
Ca
11,5
10,6
10,8
11,6
mg kg
Cu
16,3
14,8
15,7
12,4
-1
mg kg
Zn
11,4
9,0
12,4
13,6
ns
ns
ns
Ca
9,1
10,1
8,2
9,4
Cu
10,5
10,5
6,8
9,0
Zn
17,0
15,9
11,1
13,4
ns
ns
ns
ns
K
10,3
13,1
10,9
8,8
ns
Ca
6,7
7,6
7,3
6,4
ns
Cu
4,0
4,1
3,0
2,8
ns
Zn
15,1
15,7
13,9
10,9
ns
-1
Tabela 11: Concentrao de nutrientes minerais na raiz das espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.
Raiz
Erythrina speciosa
-3
mg dm
Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p
-1
mg kg
Fe
5659,7
4392,0
6067,8
4972,3
ns
-1
g kg
Mg
2,4
2,0
2,2
2,0
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Fe
2827,2
3782,1
5167,4
4332,9
Mg
3,3
1,8
2,9
3,2
Regresso
p
ns
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Fe
5332,7
3821,0
4572,1
5835,7
Mg
4,1
2,5
6,2
2,8
Regresso
p
ns
x
0,05
mg kg
Mn
102,6
85,5
139,4
80,2
ns
-1
-1
-1
g kg
S
3,4
3,7
3,6
2,7
ns
-1
-1
-1
g kg
K
17,6
18,0
15,7
18,0
ns
g kg
Ca
7,3
5,4
6,5
6,8
ns
mg kg
Cu
56,9
35,6
46,4
37,1
x
0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
226,3
2,1
2,0
16,7
85,5
1,3
2,9
15,4
108,6
1,4
2,4
14,4
78,6
1,7
2,4
14,4
Ca
6,3
6,0
6,3
6,7
Cu
25,9
17,0
29,4
31,4
Zn
20,3
22,0
23,4
19,8
ns
ns
ns
ns
K
19,3
18,9
27,6
24,9
Ca
6,1
6,1
6,8
6,3
Cu
30,3
24,8
26,2
44,4
Zn
26,6
24,9
23,7
22,3
x
<0,01
ns
x
<0,05
ns
g kg
P
1,4
1,2
1,1
1,4
ns
x
x
ns
<0,01 <0,01
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
120,2
1,0
3,6
130,4
1,1
3,9
176,8
0,9
5,3
124,2
1,0
4,3
2
x
<0,05
ns
54
x
0,05
mg kg
Zn
36,6
34,7
36,2
28,0
ns
-1
2
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
8
,
0
+
9
8
,
5
6
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
Raiz
0
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
4
0
,
1
+
7
4
,
2
7
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
2400
))))
((((
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
8
9
9
,
0
=
2222
R
;
2222
x
1
0
0
,
0
+
x
4
1
,
1
+
4
1
,
7
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
S
M
1
g
k
g
m
2100
1800
1500
1200
900
600
300
0
500
((((
750
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
1000
))))
55
Figura 14: Distribuio do Pb total absorvido nas diferentes partes da planta, nas espcies
arbreas E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba.
56
Tabela 13: ndice de translocao dos minerais nas espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. . Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.
Concentrao
Fe
Mg
Pb (mg dm-3)
0
250
500
1000
5,8
6,2
3,5
4,6
73,6
76,4
72,2
74,2
70,2
78,4
64,4
73,6
70,1
69,1
72,5
69,1
Regresso
p
ns
ns
ns
ns
Concentrao
0
250
500
1000
Fe
10,9
5,0
3,3
4,2
Mg
58,5
69,7
62,6
59,5
Regresso
p
x
<0,01
ns
x
<0,001
Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p
Fe
5,0
5,6
5,3
5,0
ns
Mg
48,7
54,9
35,3
53,9
ns
Mn
33,5
33,6
30,2
39,6
ns
54,4
55,2
55,7
66,0
70,5
67,0
72,7
70,6
x
ns
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
34,3
66,7
60,3
65,8
55,5
72,4
51,7
66,5
50,1
70,5
53,9
68,4
59,4
69,6
55,9
69,2
ns
ns
ns
Schizolobium parahyba
P
S
K
65,5
51,6
49,0
66,1
55,8
57,1
66,5
44,5
42,0
68,5
51,7
40,4
ns
ns
x
<0,01
Ca
Cu
Zn
Pb
83,4
87,8
83,9
84,7
33,8
43,4
39,1
42,1
53,0
51,4
52,2
62,2
73,9
22,0
17,6
15,8
ns
ns
x
<0,05
x
0,01
Ca
83,5
85,5
82,9
83,4
Cu
44,9
53,5
34,0
35,3
Zn
71,2
65,8
61,1
67,9
Pb
58,4
21,0
14,0
8,9
ns
x
<0,001
x
<0,05
x
<0,05
Ca
84,6
84,4
84,5
86,0
ns
Cu
21,5
27,2
19,3
12,6
x
<0,001
Zn
63,6
59,0
56,6
55,7
ns
Pb
52,6
17,2
15,3
13,4
x
<0,05
4.2.4 Pigmentos
Assim como ocorrido com a adio de Zn, a adio de Pb ao solo tambm
influenciou os teores dos pigmentos fotossintticos. Observou-se que os teores da clorofila
a, foram influenciados negativamente pela adio de Pb em E. speciosa e S. parahyba
(Figura 15). Os teores de clorofila b tambm reduziram em M. caesalpiniaefolia e E.
57
speciosa. Dessa forma, o contedo total de clorofila diminuiu nas trs espcies estudadas e
o teor de carotenides totais diminuiu em S. parahyba, mas aumentou em E. speciosa.
(A)
(B)
4
6
7
.
0
=
2222
R
;
x
2
2
0
,
0
5
1
,
5
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
9
5
6
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
0
,
0
9
7
,
7
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
75
35
8
7
7
.
0
=
2222
R
;
x
9
0
0
,
0
8
3
,
9
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
1
3
9
,
0
=
2222
R
;
x
8
1
0
,
0
4
8
2
,
3
4
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
70
30
65
25
60
((((
aaaa
a
l
i
f
o
r
o
l
C
m
c
g
55
50
))))
))))
m
c
g
2
-
bbbb
((((
2
-
45
a
l
i
f
o
r
o
l
C
40
35
25
1
3
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
0
0
,
0
3
7
,
3
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
34
))))
))))
((((
s
i
a
t
o
t
s
e
d
i
n
e
t
o
r
a
C
32
30
28
26
24
22
20
((((
750
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
b
P
e
d
o
a
t
n
e
c
n
o
C
500
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
2
-
m
c
g
36
250
1000
))))
1
0
5
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
+
5
3
,
2
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
22
38
750
(D)
0
1
4
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
0
,
0
8
1
,
2
3
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
40
500
((((
))))
6
0
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
5
7
,
7
2
=
y
42
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
1000
6
5
7
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
0
,
0
9
8
,
4
3
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
(C)
750
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
500
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
250
((((
((((
10
m
c
g
l
a
t
o
t
a
l
i
f
o
r
o
l
C
15
30
2
-
20
20
18
16
14
12
10
0
1000
250
500
750
1000
-3
))))
Figura 15: Teores de clorofila a (A), clorofila b (B), clorofila total (C) carotenides totais
(D) em g.cm-2 de massa fresca de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, em
resposta ao incremento da concentraode Pb no solo. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de determinao.
58
Erythrina speciosa
Concentrao
-3
mg dm de Pb no solo
moles etileno.g
0
250
500
1000
-1
-1
.h . MF ndulo
4,705
0,003
0,006
1,587
59
90
4
3
))))
g
m
l
o
m
n
o
t
a
r
t
i
N
((((
))))
((((
9
8
9
,
0
=
2222
R
;
6
3
,
6
8
+
x
6
0
,
0
2222
xxxx
5
-
a
i
n
m
A
0
1
.
9
3
,
6
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
g
m
l
o
m
n
s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
105
6
1
-
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
120
4
7
7
,
0
=
2222
R
;
7
1
,
0
+
x
1
0
,
0
+
2222
xxxx
6
0
1
.
4
2
,
8
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
5
4
7
,
0
=
2222
R
;
5
0
,
3
8
+
x
9
0
,
0
2222
xxxx
5
0
1
.
2
9
,
9
=
y
(B)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
2
1
75
60
30
0
15
-1
1000
))))
))))
13,5
1
12,0
40
))))
g
m
l
o
m
n
60
((((
s
i
a
t
o
T
s
o
d
i
c
o
n
i
m
A
1
7
8
,
0
=
2222
R
;
3
0
,
5
+
x
3
0
,
0
+
2222
xxxx
5
0
1
.
2
1
,
2
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
9
9
9
,
0
=
2222
R
;
8
1
,
2
3
+
x
9
0
,
0
2222
xxxx
4
0
1
.
5
1
,
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S
15,0
1000
))))
s
n
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s
o
i
c
e
p
s
.
E
s
n
a
s
o
i
c
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.
E
16,5
750
s
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f
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a
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p
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a
c
.
M
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p
l
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a
c
.
M
80
A
D
M
10,5
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7,5
((((
500
((((
(C)
g
m
l
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m
n
250
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
((((
750
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
500
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
6,0
4,5
20
3,0
1,5
0
1000
200
400
((((
))))
600
800
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
((((
750
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
500
o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m
250
b
P
e
d
o
a
r
t
n
e
c
n
o
C
1000
))))
Figura 16: Teores de amnia (A), nitrato (B), aminocidos totais (C) e MDA (D) em
nmol.mg-1 de massa seca de folhas de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, em
diferentes concentraes de Pb. Anlise de regresso (n=3), significncia (p<0,05), ns= no
significativo e R2= coeficiente de determinao.
60
Concentrao (mg dm )
0
250
500
1000
Erythrina speciosa
64
67
71
68
Mimosa caesalpiniaefolia
39
55
43
30
Regresso
p
ns
x
0,05
61
Schizolobium parahyba
48
50
47
56
ns
5. DISCUSSO
nas razes, sendo o seu transporte para a parte area bastante limitado (Brennan & Shelley,
1999; Kabata-Pendias & Pendias, 2001). A espcie S. parahyba foi a mais afetada pelo
excesso de Pb no solo e M. caesalpiniaefolia a menos afetada.
Ambos os metais estudados provocaram uma reduo do contedo foliar de
clorofilas a e b, bem como o contedo de carotenides totais, pigmento acessrio na
fotossntese que apresenta efeito fotoprotetor, reduzindo os efeitos nocivos do excesso de
luz no aparelho fotossinttico e evitando assim a danificao das membranas fotossintticas
(Uenojo et al., 2007). Com o incremento de Zn no solo houve drsticas redues nos teores
de clorofila nas folhas das trs espcies estudadas, o que, provavelmente, se deve ao fato de
o Zn influenciar o influxo de Fe afetando a produo de clorofila. Segundo Kabata-Pendias
& Pendias (2001), altas concentraes de Zn no solo diminuem a concentrao de Fe nas
plantas induzindo sua deficincia. Ambos so metais de transio e os possveis
mecanismos desse antagonismo so a competio entre Zn2+ e Fe2+ nos processos de
absoro, e a interferncia nos processos de quelao, durante a absoro e translocao de
Fe das razes para a parte area. Alm disso, o Fe diminui a absoro do Zn e a toxicidade
do Zn que foi absorvido.
incremento de Zn ao solo reduziu a concentrao de Fe nas folhas (Tabela 2), o que pode
explicar a clorose observada nas folhas dessa espcie. Rai et al. (2004), observaram que o
excesso de Cr, que assim como o Zn um metal de transio e um micronutriente para as
plantas, reduziu o contedo foliar de clorofilas a e b, clorofila total e carotenides totais em
manjerico (Ocimum tenuiflorum).
A associao entre plantas e microrganismos do solo um fator importante para o
desenvolvimento vegetal, principalmente no que diz respeito aos benefcios relacionados
64
FBN e a associao com FMAs (Giller et al., 2009; Barea et al., 2005). Os MPs podem
prejudicar essas associaes simbiticas e afetar o adequado desenvolvimento das plantas
hospedeira (Sudov & Vostka 2007). Em alguns casos, a microbiota associada como os
FMAs pode contribuir para a tolerncia das plantas aos MPs (Barea et al., 1987; Andrade et
al., 2004; Hildebrandt, et al., 2007; Andrade et al., 2009). Entretanto, quando a
concentrao de MPs muito elevada esse efeito protetor da simbiose diminui, sendo que o
estabelecimento da associao pode ser prejudicado (Sudov & Vostka 2007; Jankonga &
Visoottiviseth 2008).
Com relao nodulao e FBN, foi verificado que enquanto a massa dos ndulos
foi reduzida com o aumento das concentraes de MPs, como tambm observado por
Almeida et al., (2008), a atividade especfica da nitrogenase no foi influenciada
significativamente pelo aumento da concentrao de Zn no solo.
A colonizao das razes por FMAs aumentou nos tratamentos com maior adio de
Zn em M. caesalpiniaefolia e este aumento pode ter favorecido a FBN nessa espcie, uma
vez que a atividade especfica da nitrogenase no foi influenciada pelo aumento do Zn no
solo. Alm disso, Redecker, et al.(1997), trabalhando com alfafa, observaram que os
rizbios so altamente sensveis ao Zn. Dessa forma, a inexistncia de alterao na
atividade da nitrogenase nos tratamentos com Zn e, ao mesmo tempo, o aumento da
colonizao micorrzica com o aumento das adies do metal, podem estar relacionados a
um efeito benfico da interao entre FMAs e rizbios.
Diversos estudos comprovam o efeito benfico dos FMAs na fixao biolgica de
nitrognio, contribuindo para o suprimento de nutrientes, principalmente o P (Barea et al.,
1987; Azcn, et al.,1991; Redecker, et al.,1997).
65
parte area, contribuindo na tolerncia destas plantas aos metais estudados, uma vez que
apesar dos efeitos nocivos causados pelo excesso dos metais Zn e Pb, a maior parte das
mudas conseguiu se desenvolver. Alm disso, as concentraes destes metais nas razes
atingiram nveis elevados e superiores aos considerados txicos para parte area (KabataPendias & Pendias, 2001). Pulford & Watson (2003) descrevem o fato de as espcies
arbreas normalmente reterem a maior parte dos MPs absorvidos do solo em suas razes,
evitando ou reduzindo o transporte para a parte area, o que tambm considerado um
mecanismo de tolerncia, e um mecanismo de fitorremediao, a fitoestabilizao.
Com relao concentrao desses metais nas folhas, observa-se que para o solo
contaminado com Zn, as trs espcies apresentaram nveis considerados txicos, e com o
aumento da concentrao de Zn no solo, houve aumento da concentrao do metal nas
folhas chegando at 700 mg.kg-1, no tratamento de 400 mg.dm-3 de Zn no solo na espcie
M. caesapiniaefolia. No entanto, nas mudas da espcie S. parahyba as concentraes
foliares de Zn no variaram com a adio doses crescentes de Zn no solo, estando em
aproximadamente 400 mg.kg-1. Essa espcie apresentou elevados nveis de Zn nas razes,
em relao s demais, que agiu como uma barreira entrada do metal.
Caires (2005), trabalhando com mudas de ip-roxo (Tabebuia impetiginosa) e
cedro-rosa (Cedrela fissilis) crescendo em solo contaminado com Cu e Zn, verificou que o
Zn ficou retido em sua maior parte nas razes, entretanto as duas espcies estudadas
conseguiram transportar grandes quantidades dos metais para a parte area. Cupertino
(2006), estudando os efeitos dos metais Al, Ni, Cd e Zn em soluo nutritiva com
seringueira (Hevea brasiliensis), tambm verificou que a maior parte do Zn ficou retido na
raiz, e neste caso, a planta se mostrou bastante sensvel s concentraes aplicadas (0, 250,
67
380, 510 mol.L-1), apresentado sintomas de fitotoxidade tais como clorose, murchamento
e necrose dos tecidos.
No experimento com Pb, tambm verificou-se aumento das concentraes deste
metal nas folhas conforme o aumento das concentraes de Pb no solo. Entretanto,
observou-se que somente E. speciosa e S. parahyba apresentaram concentraes
consideradas txicas nas folhas. Em M. caesapiniaefolia os valores encontrados ficaram
abaixo de 30 mg.kg-1, considerados no txicos s plantas. No entanto, essa espcie foi
bastante sensvel s elevadas adies de Zn ao solo, sendo fitotxica, portanto, a
concentrao de 30 mg.kg-1 para essa espcie.
As concentraes de Pb e Zn encontradas no caule esto na faixa de toxicidade,
acima de 30 e 100 mg.kg-1 para o Pb e Zn respectivamente, nas espcies avaliadas. O que
tambm demonstra o efeito barreira efetuado pela raiz, no permitindo o translocamento do
Pb para a parte area.
sabido que o Pb e o Zn podem promover distrbios fisiolgicos e nutricionais nas
plantas (Briat & Lebrun, 1999;Seregin & Ivanov, 2001). Apesar de, em todas as espcies
estudadas, a maior parte do Zn absorvido ter ficado retido nas razes, como descrito por
Kabata-Pendias & Pendias (2001), a fitotoxicidade do Zn e Pb foi observada
principalmente na parte area das plantas, uma vez quem os nveis foliares tambm foram
fitotxicos.
O ndice de translocao (IT) de um determinado elemento indica o transporte desse
elemento do lugar onde ele absorvido parte area ou s folhas, ou seja, o quanto do total
absorvido pela planta que transferido para a parte area da planta (Abichequer e Bohnen,
1998). Verifica-se que quanto maior a concentrao dos metais Zn e Pb no solo, menor o
68
ndice de translocao, ou seja quanto maior a concentrao no solo menor foi o transporte
proporcional para a parte area.
Tanto a adio de Zn quanto a adio de Pb ao solo influenciaram o acmulo de
determinados minerais nos diferentes rgos das plantas e tambm interferiram no ndice de
translocao dos mesmos, como observado em outros estudos (White et al., 1979; KabataPendias & Pendias 2001). Possivelmente as diferenas observadas nas concentraes dos
minerais, nas diferentes partes das plantas, esto envolvidas nos distrbios de crescimento
verificados.
Paiva et al. (2002), trabalhando com mudas de cedro (Cedrela fissilis) e ip-rxo
(Tabebuia impetiginosa), sob altas concentraes de Pb em soluo hidropnica,
observaram aumento no IT de Zn para a primeira espcie, assim como aqui observado para
as mudas da espcie E. speciosa. Entretanto, esses autores observaram reduo no IT de S
nas mudas de cedro, o que tambm observou-se em E. speciosa. Paiva et al. (2002),
tambm verificaram reduo do IT de Cu, Zn e Fe em mudas de ip-roxo, como encontrado
em M. caesalpiniaefolia, e reduo de K em mudas de cedro, como ocorreu em S.
parahyba. Esses autores verificaram tambm aumento no IT de Mn em cedro, como
observado em M. caesalpiniaefolia.
Vrios trabalhos relatam o aumento no teor de aminocidos livres em diferentes
tecidos vegetais em resposta ao estresse causado por MPs (Sharma & Dietz, 2006; Oliva et
al., 2009). Em alguns casos esse aumento visto como um mecanismo de defesa da planta,
principalmente quando os aminocidos envolvidos so a prolina (Sharma & Dietz, 2006;
Tripathi & Gaur 2004), a histidina (Callahan et al., 2006) e a asparagina (Lea et al., 2007;
Andrade et al., 2009), j que estes aminocidos podem agir como quelantes de alguns
69
metais, como Cu e Zn, e como molculas com propriedades antioxidantes (Sharma & Dietz,
2006). No geral, esses aminocidos livres podem atuar tambm como osmlitos mantendo
o equilbrio osmtico dentro da clula (Matysik et al., 2002; Lea et al., 2007). A adio de
Zn ao solo aumentou a concentrao de aminocidos totais livres nas folhas de E. speciosa
e M. caesalpiniaefolia, o que tambm foi observado em S. parahyba com o aumento da
concentrao de Pb no solo. O malondialdedo (MDA) um dos produtos resultantes da
peroxidao lipdica das membranas celulares e usado freqentemente como indicador de
estresse oxidativo (Rai et al. 2004; Sharma & Dietz 2006). Tanto o Pb quanto o Zn so
indutores potenciais de estresse oxidativo nas clulas vegetais, provavelmente pela gerao
de radicais livres (Alia et al., 1994; Sharma & Dietz 2006). Na espcie S. parahyba, o
aumento desses metais no solo causou peroxidao lipdica. Entretanto, as espcies M.
caesalpiniaefolia e E. speciosa apresentaram um sistema antioxidante eficiente no controle
de radicais livres, no se observando indicao de peroxidao lipdica.
O excesso de Pb e Zn no solo, tambm alterou os nveis de nitrato nas folhas de M.
caesalpiniaefolia e E. speciosa. Alm disso, observou-se aumento na concentrao de
amnia no interior das clulas foliares de E. speciosa. O aumento de nitrato pode estar
relacionado tanto s perturbaes no metabolismo de nitrognio como interferncia de
metais sobre enzimas como a redutase do nitrato (Mazzafera, 1998). A amnia um
produto do metabolismo que pode se tornar txico quando acumulado em altas
concentraes (Sharma & Dubey, 2005b) e, ao mesmo tempo, fonte imediata de
nitrognio nas clulas vegetais (Britto & Kronzucker, 2002). O metabolismo do nitrognio
na espcie E. speciosa tambm pode ter sido afetado pelo aumento do Pb no solo, uma vez
que houve reduo tanto a atividade da nitrogenase e na massa de ndulos. Estes resultados
70
evidenciam o efeito txico destes metais em alguns dos processos fisiolgicos das espcies
estudadas.
Neste trabalho utilizaram-se mudas de espcies arbreas que diferem das rvores
maduras de vrias maneiras, como na alocao de carbono, na frao de tecidos
fotossinteticamente inativos (Turner, 1994). Alm disso, as mudas so mais sensveis s
condies adversas, o que pode levar a falsa indicao da capacidade de acumulao de
plantas maduras. No entanto, a resposta de mudas expostas a solos contaminados com MPs
continua sendo a forma mais comum de avaliao da capacidade de diferentes espcies de
tolerar e sobreviver ao estresse (Pulford & Watson, 2003). Alm disso, Punshon &
Dickinson (1997) mostraram que a tolerncia aos metais pesados por diferentes clones do
gnero Salix (salgueiro) pode ser aumentada com a aclimatao gradual das rvores
mantidas sob o estresse induzido pelo metal, no solo contaminado. Por isso, importante
observar que neste trabalho, os efeitos do excesso de MPs no solo foram observados na fase
de formao de mudas. O mesmo experimento realizado a partir de mudas j formadas,
possivelmente revelaria resultados diferentes no que se refere ao potencial fitorremediador
destas espcies de leguminosa arbreas.
A partir das variveis analisadas, observou-se que de forma geral, os metais
adicionados afetaram o crescimento de todas as espcies estudadas. Alm disso, os MPs
acumularam-se principalmente nas razes. No entanto, estes elementos foram translocados
para a parte area, acumulando-se em concentraes consideradas fitotxicas. O excesso de
metais no solo influenciou a concentrao e ndices de translocao de vrios elementos
essenciais. Isto pode ter contribudo para o desequilbrio nutricional causando distrbios
metablicos que refletiram negativamente no crescimento.
71
72
6. CONCLUSO
73
7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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