ii

iii

A minha famlia, em especial aos meus pais

Elio e Geralda, por todo apoio e incentivo e
pelo amor incondicional, dedico.

iv

AGRADECIMENTO
Primeiramente a Deus, por estar sempre presente.
A minha famlia, pelo apoio e compreenso nos momentos difceis.
Universidade Estadual de Campinas, especialmente ao Departamento de Biologia
Vegetal e ao Programa de Ps-Graduao em Biologia Vegetal, sem os quais seria
impossvel o desenvolvimento deste trabalho.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), pelo
apoio financeiro.
minha orientadora Dra. Marlene Aparecida Schiavinato, pela orientao, apoio,
amizade e confiana dedicada realizao deste trabalho.
minha co-orientadora Dra. Sara Adrin Lopez de Andrade, tambm pela
orientao, pelo apoio, amizade e confiana dedicada realizao deste trabalho.
Aos funcionrios do Departamento de Biologia Vegetal, especialmente Nia e ao
Luciano pela ajuda nas anlises, no cuidado s plantas e pela amizade.
A todos os colegas e amigos do departamento, em especial, Adases, Raphael, Lvia,
Lucas Cutri, Lucas Anjos, Luciana Menolli, Adriana e Luciano, pela amizade, ajuda,
compreenso e pelos momentos de descontrao proporcionados.
Aos professores Ladaslav Sodek, Ana Laga, Adriana Parada Dias, pelas valiosas
crticas e sugestes durante a realizao da pr banca.
A todos os que de alguma forma contriburam para a execuo deste trabalho.

NDICE
RESUMO ................................................................................................................................ viii
SUMMARY ................................................................................................................................ x
1. INTRODUO ..................................................................................................................... 12
1.1 Consideraes gerais ....................................................................................................... 12
1.2 Metais Pesados: Chumbo e Zinco ................................................................................... 13
1.3 Fitorremediao ............................................................................................................... 16
1.4 Fungos Micorrzicos arbusculares (FMAs) e MPs .......................................................... 19
1.5 Fixao Biolgica de Nitrognio em leguminosas .......................................................... 21
1.6 Leguminosas arbreas e recuperao de reas degradadas ............................................. 24
2. OBJETIVO ............................................................................................................................ 25
3. MATERIAL E MTODOS ................................................................................................... 26
3.1 Delineamento Experimental ............................................................................................ 26
3.2 Material vegetal ............................................................................................................... 26
3.3 Amostragem e preparao do solo................................................................................... 27
3.4 Condies de crescimento das plantas............................................................................. 27
3.5 Inoculao de FMA e rizbio .......................................................................................... 28
3.6 Variveis analisadas ........................................................................................................ 29
3.6.1 Medidas de crescimento ...................................................................................... 29
3.6.2 Determinao de Pb e nutrientes na parte area e nas razes das plantas ............ 29
3.6.3 Teores de clorofilas e carotenides ..................................................................... 30
3.6.4 Atividade especfica da nitrogenase .................................................................... 30
3.6.5 Determinaes bioqumicas................................................................................. 31
vi

3.6.6 Colonizao micorrzica ...................................................................................... 31

3.7 Anlise Estatstica............................................................................................................ 32
4. RESULTADOS ..................................................................................................................... 33
4.1 Experimento I Zn .......................................................................................................... 33
4.1.1 Germinao .......................................................................................................... 33
4.1.2 Resultados das medidas de crescimento .............................................................. 33
4.1.3 Nutrio Mineral.................................................................................................. 37
4.1.4 Pigmentos ............................................................................................................ 43
4.1.5 Atividade da Nitrogenase .................................................................................... 45
4.1.6 Determinaes bioqumicas................................................................................. 45
4.1.7 Colonizao Micorrzica...................................................................................... 46
4.2 Experimento II Pb ......................................................................................................... 47
4.2.1 Germinao .......................................................................................................... 47
4.2.2 Resultados das medidas de crescimento .............................................................. 47
4.2.3 Nutrio Mineral.................................................................................................. 50
4.2.4 Pigmentos ............................................................................................................ 57
4.2.5 Atividade da nitrogenase ..................................................................................... 59
4.2.6 Determinaes bioqumicas................................................................................. 59
4.2.7 Colonizao Micorrzica...................................................................................... 61
5. DISCUSSO ......................................................................................................................... 62
6. CONCLUSO ....................................................................................................................... 73
7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS .................................................................................. 74

vii

RESUMO
A contaminao do solo por metais pesados (MPs), causada por processos naturais ou
atividade humana, um dos mais graves problemas ambientais devido persistncia e alto
poder de toxicidade dos MPs. Em ambientes contaminados por MPs, as plantas podem
apresentar uma srie de distrbios fisiolgicos e nutricionais. No entanto, algumas espcies
de plantas so tolerantes aos MPs e essa tolerncia tem sido selecionada durante a
evoluo, e envolve diversos mecanismos. A associao com fungos micorrzicos
arbusculares (FMAs) pode reduzir os efeitos negativos do estresse induzido por altas
concentraes de metais sobre a planta hospedeira. Considerando a existncia de plantas
tolerantes, a fitorremediao, especialmente com espcies arbreas, aparece como uma
estratgia eficiente para a reabilitao de reas contaminadas com MPs, uma vez que essas
espcies imobilizam os metais absorvidos por mais tempo em seus tecidos. Assim, este
estudo teve como objetivos: avaliar a tolerncia, o acmulo e a distribuio dos MPs, Pb e
Zn, em trs espcies de leguminosas nas diferentes partes das plantas; avaliar a influncia
destes metais na colonizao micorrzica e na fixao biolgica de nitrognio e avaliar o
potencial fitorremediador de cada espcie. Foram realizados dois experimentos, um com Pb
e outro com Zn, com delineamento experimental totalmente casualizado e em esquema
fatorial 3 x 4. Os tratamentos consistiram em trs espcies de leguminosas arbreas Mimosa
caesalpiniaefolia

(sanso-do-campo),

Erythrina

speciosa

(eritrina-candelabro)

Schizolobium parahyba (guapuruvu) e quatro concentraes de metais, 0, 250, 500 e 1000

mg.dm-3 de Pb e 0, 200, 400 e 600 mg.dm-3 de Zn, adicionados ao solo na forma de acetato
de chumbo e sulfato de zinco. Aps aproximadamente 180 dias de cultivo as mudas foram
coletadas. Determinaram-se altura, rea foliar total, massa da matria seca (MS) da parte
viii

area e razes, nmero de ndulos e MS de ndulos das espcies que nodulam. Na espcie
que no nodula, S. parahyba, foi feita a medio da raiz pivotante e o volume total de
razes. Foram feitas as determinaes dos teores de Pb e Zn, dos nutrientes essenciais e
calculado o ndice de translocao (IT). Foram determinados o contedo de pigmentos
fotossintticos, a atividade da nitrogenase, aminocidos livres, nitrato, amnia, peroxidao
lipdica (MDA) e a taxa de colonizao micorrzica. Os dados foram submetidos anlise
de varincia, anlise de regresso e teste de Tukey. Verificou-se que altas concentraes de
Zn adicionadas ao solo afetam mais significativamente o desenvolvimento de mudas de
espcies arbreas quando comparadas s concentraes de Pb utilizadas. Todas as espcies
apresentam maiores concentraes de Zn e Pb nas razes que agem como uma barreira
translocao dos MPs, considerado um mecanismo de fitoestabilizao. O fato de serem
espcies de leguminosas arbreas de crescimento rpido, de fcil propagao, sistema
radicular extenso e aliado ao fato de conseguirem absorver e concentrar os metais pesados
Pb e Zn em suas razes, sugere que estas espcies arbreas analisadas podem ser potencias
plantas fitorremediadoras de solos moderadamente contaminados, sendo que, para o Pb a
espcie mais tolerante seria M. caesalpiniaefolia e para o Zn, a E. speciosa.

ix

SUMMARY
Soil contamination by heavy metals (HM), caused by natural processes or human activity,
is one of the most serious environmental problems due to their persistence and high toxicity
potential. In HM contaminated environments, plants may present a series of physiological
and nutritional disorders. However, some plant species are tolerant to HM and this
tolerance has been selected during evolution. The mechanisms involved in plant tolerance
to HM excess are diverse and varied. The association with arbuscular mycorrhizal fungi
(AMF) can reduce the negative effects of stress induced by high concentrations of metals to
the host plant. Considering the existence of tolerant plants, phytoremediation appears as an
efficient strategy for the rehabilitation of areas contaminated with HM, especially using tree
species, since these species immobilize absorbed metals for greater time periods in their
tissues. Thus, this study aimed to evaluate the tolerance, accumulation and distribution of
Pb and Zn in three species of leguminous trees, and further, to evaluate the influence of
these metals in mycorrhizal colonization and nitrogen fixation and evaluate the
phytoremediator potential of each of the studied species. For this purpose, two experiments
were conducted, one with Pb and another with Zn, with a completely randomized
experimental design in a factorial 3 x 4 scheme. The treatments consisted of three species
of tree legumes Mimosa caesalpiniaefolia (sanso-do-campo), Erythrina speciosa (eritrinacandelabro) and Schizolobium parahyba (guapuruvu) and four concentrations of metal, 0,
250, 500 and 1000 mg.dm-3 Pb and 0, 200, 400 and 600 mg.dm-3 Zn added to soil in the
form of lead acetate and zinc sulfate. Approximately 180 days after sowing, the seedlings
were collected. We determined the height and total leaf area, the dry matter (DM) of shoots
and roots, nodule number and nodule DM of nodulating species. In species that do not
x

nodulate, S. parahyba, measurements were made of the tap root and root volume.
Determinations were made of the levels of Pb and Zn as well as essential nutrients and the
rate of translocation (IT) was calculated. The content of photosynthetic pigments was
determined as well as photosynthesis, nitrogenase activity, amino acids, nitrate, ammonia
and lipid peroxidation (MDA) and the rate of colonization was estimated. The data were
subjected to analysis of variance, regression analysis and the Tukey test (5% significance).
It was found that the higher concentrations of Zn added to soil affected the development of
seedlings of the tree species studied more significantly than those of Pb. All species had
higher Zn and Pb concentrations in their root, indicating this organ acts as a barrier for
metal translocation to the shoots in these plants, considered a phytostabilization
mechanism. The fact that these species are fast growing, easily propagated and have a
extensive root system that can absorb and concentrate Pb and Zn, suggests that they have
potential for use in phytoremediation of contaminated soils.

xi

1. INTRODUO

1.1 Consideraes gerais

A contaminao do solo por metais pesados (MPs), causada por processos naturais
ou pela atividade humana, um dos mais srios problemas ambientais, devido
persistncia e alto poder de toxicidade dos MPs (Reddy & Prasad, 1990), alm de provocar
efeitos prejudiciais, diminuindo a qualidade dos ecossistemas e impedindo o
desenvolvimento da agricultura (Grato et al., 2005; Gohre & Paszkowski, 2006).
Em ambientes contaminados por MPs, as plantas podem apresentar uma srie de
distrbios fisiolgicos e nutricionais, tais como diminuio da biomassa, clorose, inibio
da fotossntese, alterao no balano hdrico e hormonal (Paiva et al., 2002; Andrade, et al.,
2004; Sharma & Dubey, 2005; Broadley et al., 2007)
Algumas espcies vegetais, no entanto, so tolerantes aos MPs (Hall, 2002) e essa
tolerncia tem sido selecionada durante a evoluo (Patra et al. 2004).
Os mecanismos envolvidos na tolerncia das plantas ao excesso de MPs so
diversos e variados, incluindo a exsudao de substncias quelantes; a produo intracelular
de substncias quelantes, tais como cidos orgnicos e fitoquelatinas; metalotionenas;
alteraes na compartimentalizao dos metais na clula; reteno do metal na raiz,
evitando sua translocao para a parte area; biotransformao e mecanismos de reparo
celular; imobilizao do metal na parede celular; desenvolvimento de enzimas tolerantes ao
metal; aumento da tolerncia deficincia mineral e aumento da absoro de certos
macronutrientes (Shaw, 1989; Almeida et al. 2007). Alm disso, a associao com fungos
12

micorrzicos arbusculares (FMAs) pode ser considerada um mecanismo de tolerncia das

plantas, j que pode diminuir os efeitos negativos do estresse induzido por altas
concentraes de MPs e exercer efeito protetor planta hospedeira (Hall, 2002; Andrade et
al., 2003).

1.2 Metais Pesados: Chumbo e Zinco

Os metais pesados so elementos que ocorrem naturalmente no solo, sendo que
alguns so essenciais para o desenvolvimento vegetal, como Fe, Cu, Mo, Mn, Zn e outros
metais como Cr, Cd, Pb, As e Hg que no tm ao biolgica conhecida nas plantas .
Porm, todos os MPs, quando ocorrem em elevadas concentraes, podem causar danos ao
meio ambiente e cadeia alimentar (Malavolta, 1994).
So considerados MPs cerca de 65 elementos metlicos, de densidade maior que 5
g.cm-3, que apresentam a capacidade de promover efeitos txicos em clulas microbianas e
em outras formas de vida (Gadd, 1992; Tan, 2000).
ons metlicos potencialmente txicos penetram nas clulas usando os mesmos
processos de absoro de ons considerados nutrientes essenciais. A quantidade absorvida
pela planta depende da concentrao de MPs e da disponibilidade destes no solo, sendo esta
ltima dependente do pH (Patra et al., 2004; Almeida et al. 2007). A quantidade desses
ons metlicos translocada para a parte area depende da espcie vegetal, do metal em
questo e das condies ambientais (Paiva et al., 2002; Liu et al., 2007).

13

O zinco (Zn) o segundo metal mais abundante nos organismos depois do ferro
(Fe), sendo o nico metal representado nas seis diferentes classes de enzimas:
oxidoredutases, transferases, hidrolases, ligases, liases e isomerases (Broadley et al., 2007).
um elemento essencial ao desenvolvimento normal das plantas, sendo absorvido
da soluo do solo primariamente como Zn2+, mas tambm pode estar complexado a
compostos orgnicos ligantes, sendo absorvido pela raiz e transportado ao caule via xilema
(Broadley et al., 2007). Entretanto, em elevadas concentraes, principalmente em solos
cidos, esse elemento pode se tornar txico, levando reduo do crescimento vegetal.
Sintomas de toxicidade ao Zn incluem deficincia induzida de Fe, levando clorose pela
diminuio da sntese de clorofila e degradao dos cloroplastos, alm de interferir na
entrada de fsforo (P), magnsio (Mg) e mangans (Mn) (Carroll & Loneragan, 1968;
Chaney, 1993; Broadley et al., 2007).
O chumbo (Pb) um metal no essencial s plantas e um dos maiores poluentes de
ecossistemas, pois se acumula prontamente nos solos e sedimentos. Alm dos processos
naturais de intemperismo, as principais fontes de Pb no solo so os escapamentos de
automveis, chamins de indstrias que utilizam Pb, minerao e fundio do minrio de
Pb, fertilizantes, pesticidas, pigmentos e a deposio atmosfrica do Pb presente na
gasolina que o possui como aditivo (Sharma & Dubey, 2005a).
O Pb est disponvel para as plantas no solo e em fontes aerossis. Estudos sobre
entrada de Pb nas plantas demonstram que as razes tem habilidade de retirar grandes
quantidades desse MP do solo, enquanto que simultaneamente tem o grande poder de
restringir seu transporte parte area (Lane & Martin, 1977).

14

Sintomas no-especficos de toxicidade ao Pb so a rpida inibio do crescimento

radicular, o crescimento retardado da planta e a clorose. (Burton et al., 1984). Ao atingir o
interior das clulas, o Pb mesmo em pequenas quantidades, produz efeitos adversos nos
processos fisiolgicos. A fitotoxicidade por Pb inibe a atividade de algumas enzimas,
promove distrbios na nutrio mineral, no balano hdrico vegetal, nas mudanas no
estado hormonal e pode alterar a permeabilidade das membranas celulares (Sharma &
Dubey, 2005a).
Muitos pases desenvolvidos, como Holanda, Frana, Alemanha, Canad e Estados
Unidos, apresentam rgos especializados em controle e inspeo da poluio de solos, ar e
guas subterrneas (CETESB, 2001). No Brasil o nico rgo dessa competncia est no
Estado de So Paulo, a Companhia de Tecnologia de Saneamento Ambiental, CETESB. Os
valores orientadores com relao contaminao estabelecidos pela CETESB so, dessa
forma, utilizados como referncia para todo o pas.
A CETESB estabelece valores de referencia, de alerta e de interveno: que
representam a concentrao de uma determinada substncia, acima da qual podem ocorrer
alteraes prejudiciais qualidade do solo. Tm carter preventivo, evitando que o solo em
estudo torne-se uma rea contaminada. No caso de solos, o valor de referncia de
qualidade, que foi baseado em anlises qumicas dos diversos tipos de solos do Estado de
So Paulo, indica o nvel de qualidade para um solo considerado limpo, a ser utilizado em
aes de preveno da poluio do solo e no controle de reas contaminadas. O valor de
alerta, baseado no caso de metais na sua fitotoxicidade, indica uma possvel alterao da
qualidade natural dos solos, e utilizado em carter preventivo. O valor de interveno
indica o limite de contaminao do solo, acima do qual, existe risco potencial sade
15

humana, e quando excedido requer alguma forma de interveno na rea avaliada, de forma
a interceptar as vias de exposio (CETESB 2001, 2005).
A CETESB adota os valores orientadores acima estabelecidos, por um perodo de
vigncia de quatro anos, aplicando-os tanto na preveno da poluio de solos e guas
subterrneas, como no controle de reas contaminadas (CETESB 2001).
Os valores orientadores de contaminao para o Pb e Zn no solo, em mg.kg-1, no
Estado de So Paulo so respectivamente: valores de preveno: 72 e 300; valores de
interveno em rea agrcola, residencial e industrial; 180, 300 e 900, e 450,1000 e 2000
(CETESB, 2005).
Com relao concentrao dos MPs Pb e Zn consideradas txicas nos tecidos
vegetais, Kabata-Pendias & Pendias (2001) sugerem que concentraes na planta entre 100
e 400, e, entre 30 e 300 mg.kg-1 de massa seca de tecido da parte area para o Zn e Pb,
respectivamente, so txicas.

1.3 Fitorremediao
A fitorremediao uma tcnica que utiliza plantas para remover poluentes do solo
ou torn-los inofensivos (Salt et al., 1998). As diferentes categorias de fitorremediao
incluem: fitoextrao, fitodegradao, fitovolatilizao, fitoestimulao e fitoestabilizao.
A fitoestabilizao consiste no uso de plantas para imobilizar contaminantes, reduzindo a
sua disponibilidade no solo. Na fitoextrao a planta absorve o contaminante,
transportando-o para a parte area onde acumulado em altas concentraes. Na
fitovolatilizao as plantas ou a atividade da microbiota associada s razes ajudam a
16

aumentar a taxa de volatilizao de contaminantes. Na fitodegradao as plantas absorvem

e metabolizam o contaminante tornando-o menos txico. J na fitoestimulao, as razes
das plantas, em conjunto ou no com a microbiota associada, e os produtos excretados na
rizosfera decompem o contaminante (Accioly & Siqueira 2000).
Essa tcnica tem se tornado uma importante ferramenta para a remediao de solos
contaminados, uma vez que proporciona a recuperao do local, a descontaminao, a
manuteno da atividade biolgica e a estrutura fsica dos solos, sendo potencialmente mais
barata que outras tecnologias. Alm disso, existe a possibilidade de recuperar os metais
acumulados na planta, por meio da chamada biominerao, na qual podem ser recuperados
metais de interesse econmico, ou, ainda, no caso de metais essenciais, podem ser
utilizados como fertilizantes para plantas (Baker et al., 1981, 1994). Aliado a isso, a
existncia de plantas que conseguem acumular grandes quantidades de metais,
hiperacumuladoras, otimizaram o uso da fitorremediao. Segundo Raskin et al. (1994),
plantas hiperacumuladoras so capazes de extrair e acumular mais de 10.000 mg.kg-1 de Zn
e Mn, mais de 1.000 de Pb, Ni e Cu, e mais de 100 de Cd, sendo consideradas promissoras
para uso na fitorremediao de solos contaminados com metais.
A fitorremediao, utilizando especialmente espcies arbreas, uma estratgia
para a reabilitao de reas contaminadas com MPs uma vez que estas espcies imobilizam
os metais absorvidos (fitoestabilizao) por mais tempo em seus tecidos, reduzindo os
impactos ambientais destes elementos (Accioly & Siqueira 2000; Soares et al. 2001;
Pulford & Watson 2003).
Espcies arbreas em geral produzem alta biomassa, tem sistema radicular extenso e
determinadas espcies tem uma enorme variabilidade gentica (Pulford & Watson, 2003).
17

Esta variedade de genomas e tolerncia facultativa, como por exemplo, a redistribuio das
razes para as zonas menos contaminadas do solo, permite a sobrevivncia das rvores no
selecionadas para tolerncia a metais em solos poludos. Vrios estudos tm mostrado que a
aclimatao de rvores para o ambiente do solo pos-transplantio de grande importncia e
pode ser um fator significativo na sobrevivncia da rvore em solo contaminado com
metais. Entretanto a fertilidade do solo, assim como a presena de fungos micorrzicos, so
importantes, pois podem aumentar a resistncia das rvores aos metais (Dickinson et al.,
1992; Pulford & Watson, 2003).
Soares, et al. (2001) reportaram, no entanto, que mudas de diferentes espcies
arbreas apresentaram comportamento distinto em relao aos teores, distribuio/
acmulo de metais nos diferentes rgos vegetais e tambm quanto tolerncia ao excesso
de MPs no meio.
So escassos os estudos de fitorremediao utilizando espcies arbreas. No
entanto, a falta de relatos acerca de sintomas de toxicidade em espcies arbreas indica que
os mecanismos de tolerncia nelas existentes lhes permitem suportar melhor a
contaminao do solo com MPs do que as culturas agrcolas (Pulford & Watson, 2003).
Algumas rvores, apesar de no serem especialmente selecionadas para tolerncia a metais,
geralmente conseguem sobreviver em solo contaminado, ainda que apresentando
crescimento normalmente muito reduzido em relao quelas crescendo em solos no
contaminados (Dickinson et al., 1992; Pulford & Watson, 2003). Assim, importante que
mais esforos sejam realizados em estudos de fitorremediao de solos contaminados com
MPs, utilizando espcies arbreas (Caires, 2005, Cupertino, 2006).

18

1.4 Fungos Micorrzicos arbusculares (FMAs) e MPs

A simbiose entre fungos micorrzicos arbusculares (FMAs) e plantas
provavelmente a mais generalizada das simbioses terrestres, sendo formada em 70-90% das
espcies de plantas terrestres com fungos do filo Glomeromycota (Schler et al., 2001). O
desenvolvimento simbitico resulta no estabelecimento do fungo no crtex radicular e na
formao de estruturas intracelulares altamente ramificadas chamadas arbsculos, os quais
so o principal local de troca de nutrientes entre o fungo e planta (Parniske, 2008). Os
FMAs associados s raizes crescem tambm extra-radicalmente, podendo estender suas
hifas vrios centmetros da raiz, aumentando o volume de solo explorado pelas plantas.
Estas hifas so especializadas na absoro de nutrientes, predominantemente fosfato, e gua
(Finlay, 2008). Os efeitos benficos dos FMAs so mais evidentes em condies de
limitada disponibilidade de nutrientes. Embora os mecanismos reguladores no sejam
totalmente compreendidos, a colonizao radicular normalmente diminui quando os
nutrientes esto em abundncia ou altamente disponveis para as plantas (Liu et al., 2007).
Recentemente, estudos tm demonstrado que a inoculao de FMAs promove
benefcios para o crescimento de plantas em solos contaminados com MPs, como
verificado para soja (Andrade et al., 2003), milho (Weissenhorn & Leyval, 1995), outras
plantas herbceas (Carneiro et al., 2001; Silva et al., 2004) e mudas de plantas arbreas
(Soares et al., 2006; Arriagada et al., 2007; Lins et al., 2007). Esses estudos evidenciam o
efeito protetor desta simbiose para a planta hospedeira, mas os mecanismos envolvidos
ainda no so bem conhecidos (Schutzendubel & Polle, 2002). No entanto, a tolerncia de
plantas associadas a FMAs aos MPs pode variar em larga extenso dependendo do metal,
do fungo e da espcie hospedeira envolvidos, da concentrao do metal no solo, do padro
19

de colonizao fngica e das condies de crescimento das plantas (Weissenhorn & Leyval,
1995).
Arriagada et al. (2007) observaram que a presena de alta concentrao de Pb no
solo reduziu o desenvolvimento intra-radical do FMA e conseqentemente diminuiu a sua
contribuio para o acmulo de Pb em Eucalyptus globulus.
Alguns autores tm proposto que FMAs agem como uma barreira para a
transferncia de metais do solo para as plantas, reduzindo a transferncia do metal para a
parte area e, conseqentemente, diminuindo a fitotoxicidade. Isso pode estar relacionado
com a capacidade de reteno de MPs nas estruturas fngicas (Carneiro et al., 2001;
Andrade et al. 2003; Andrade et al., 2004). Alm disso, provvel que as micorrizas
possam contribuir para reduzir a fitotoxicidade dos metais em decorrncia do aumento da
absoro de P pela planta hospedeira (Andrade et al., 2003; Andrade et al., 2004; Soares et
al., 2006).
Diferenas na eficincia de FMAs em relao absoro e tolerncia a MPs por
plantas tm sido relatadas por vrios autores, evidenciando que a associao entre planta e
FMA importante para que haja um efeito benfico da micorriza em solos contaminados
por metais (Hildebrandt et al., 1999; Joner et al., 2004; Zhang et al., 2005; Silva et al.
2006; Arriagada et al., 2007).
Hildebrandt et al. (1999) observaram que o isolado de FMA Glomus intraradices
Br1, obtido de solo contaminado com MPs, conferiu tolerncia a uma variedade de plantas,
em diversos solos pouco frteis e contaminados com MPs. Alm disso, o isolado Br1 foi
mais efetivo em transferir tolerncia a MPs em tomate, milho e Medicago truncatula que o
isolado originrio de solos no contaminados, G. intraradices Sy167, freqentemente
20

utilizado por esses pesquisadores para diferentes estudos de interao entre FMA-planta
(Hildebrandt et al., 2007). Esses resultados reforam a importncia de FMAs nativos, os
quais apresentam maior potencial de adaptao s altas concentraes de metais no solo
(Del Val et al., 1999; Silva et al., 2006; Hildebrandt et al., 2007).
Trabalhando com a gramnea Brachiaria decumbens, Silva et al. (2006) observaram
que vrios isolados de FMA contriburam para a reduo dos teores de Zn e de Cd na parte
area desta planta.
Dessa forma, como so escassos os estudos relacionados influncia de MPs sobre
espcies arbreas, as quais normalmente so muito dependentes de micorrizas, devem-se
empenhar esforos no sentido de conhecer as conseqncias da inoculao de FMAs e da
contaminao por MPs em termos de tolerncia, acumulao e influncia na colonizao
micorrzica.

1.5 Fixao Biolgica de Nitrognio em leguminosas

Algumas bactrias so capazes de fixar nitrognio atmosfrico (N2) e convert-lo
em amnio, forma disponvel para as plantas, processo conhecido por fixao biolgica de
nitrognio (FBN). A maior parte dessas bactrias tem vida livre no solo e algumas se
associam simbioticamente com algumas espcies de plantas, principalmente da famlia
Leguminosae. Na associao simbitica entre leguminosas e estas bactrias coletivamente
chamadas de rizbios, a planta supre s bactrias com fotoassimilados, que so fonte de
energia para a atividade da enzima nitrogenase e os rizbios, por sua vez, suprem as plantas
com amnio o qual posteriormente utilizado por estas para a produo de compostos
21

nitrogenados. Tal simbiose ocorre nos ndulos formados nas razes destas plantas. Os
rizbios reduzem o N2 em amnio com ajuda da enzima nitrogenase. Por ser
irreversivelmente inativada pelo oxignio, a nitrogenase fixa N2 em condies anaerbicas,
sendo que o processo utiliza uma grande quantidade de energia (Dixon & Wheeler, 1986;
Zahran, 1999). A simbiose entre rizbios e leguminosas a principal fonte de nitrognio
fixado em sistemas baseados no solo e pode fornecer mais da metade da origem biolgica
do nitrognio fixado (Mulongoy et al. 1992). A deficincia de nitrognio mineral, muitas
vezes limita o crescimento da planta (Graham & Vance, 2000) e, assim, essas relaes
simbiticas podem desempenhar um papel fundamental no desenvolvimento vegetal e na
recuperao de solos degradados ou com deficincia desse elemento.
Diversas condies ambientais podem ser fatores limitantes ao crescimento e
atividade das plantas que apresentam simbiose com rizbios. Na simbiose Rhizobiumleguminosa, o processo de fixao de N2 est fortemente relacionado ao estado fisiolgico
da planta hospedeira. Portanto, sob efeito persistente de fatores limitantes, tais como
salinidade, deficincia de nutrientes, MPs, temperaturas extremas, entre muitos outros, o
rizbio no capaz de expressar sua capacidade total no processo de fixao (Brockwell, et
al. 1995; Zahran, 1999).
Os MPs podem prejudicar as associaes simbiticas e afetar o adequado
desenvolvimento das plantas hospedeiras (Porter & Sheridan, 1981; Obbard & Jones,
2001).
Porter & Sheridan (1981) trabalhando com alfafa em solo contaminado com MPs
alm de observarem reduo na atividade da nitrogenase e consequentemente na FBN,
verificaram tambm uma alta sensibilidade do sistema de fixao de nitrognio ao Zn, e
22

acreditam que esta sensibilidade reside nos rizbios, uma vez que estes so altamente
sensveis a baixas concentraes de Zn no meio de crescimento. Esses autores tambm
afirmam que a reduo ou inibio da atividade da nitrogenase durante um perodo de anos,
pode diminuir a fertilidade e a capacidade de produo dos sistemas naturais e agrcolas
afetados, o que no deve ser ignorado, considerando-se a importncia da contribuio do
nitrognio fixado pelas leguminosas nesses ambientes.
A infeco micorrzica nas razes de leguminosas tem sido relatada por estimular
tanto a nodulao quanto a fixao de N2, especialmente em solos com baixa
disponibilidade em P (Ganry et al., 1982; Redecker et al.,1997).
Redecker et al. (1997) trabalhando com as interaes entre feijo (Phaseolus
vulgaris), cepas de Rhizobium spp. e FMAs, observaram um envolvimento especfico das
espcies de FMAs na aquisio de nitrognio nessas leguminosas tanto na fixao
simbitica de nitrognio (FBN), quanto na aquisio do nitrognio do solo. Verificaram
tambm, que em solos de baixo P disponvel, os efeitos da simbiose micorrzica podem
levar a melhoria da eficincia da FBN e/ou levar a melhora na absoro de N no solo.
Os processos biolgicos como a fixao de N2 mantm a dinmica do solo, sendo
importantes para o ecossistema, alm disso, so capazes de melhorar a produtividade
agrcola, minimizando as perdas do solo, melhorando as condies edficas adversas,
tornando a FBN essencial para a manuteno da estrutura do solo (Zahran, 1999; Barea et
al., 2005).

23

1.6 Leguminosas arbreas e recuperao de reas degradadas

A famlia Leguminosae a terceira maior famlia de Angiospermas e compreende
aproximadamente 650 gneros e 18.000 espcies, distribudas nas subfamlias
Caesalpinioideae, Faboideae (Papilionoideae) e Mimosoideae (Polhill et al., 1981).
A capacidade de fixao de nitrognio pelo rizbio associado, aliada ao extenso
sistema radicular possibilita o crescimento de leguminosas arbreas em locais sujeitos
eroso, com baixa fertilidade do solo ou em outras condies adversas. Uma vez
estabelecidas, elas podem criar condies favorveis para o crescimento de outras espcies
vegetais levando a um ecossistema equilibrado (Gutteridge & Shelton, 1998).
Estudos demonstram que o estabelecimento de leguminosas arbreas micorrizadas e
noduladas, em reas remanescentes de minerao, tem obtido sucesso, permitindo o
posterior estabelecimento de espcies nativas por regenerao natural (Franco et al. 1996).
Prticas de reflorestamento e recuperao de solos com leguminosas arbreas
constituem uma opo para a restaurao de solos degradados, uma vez que muitas dessas
rvores tm rpido crescimento, mltiplo uso, alm de fcil propagao e estabelecimento,
favorecido por seu extenso sistema radicular, pela associao micorrzica e pela fixao
biolgica de nitrognio.

24

2. OBJETIVO

- Avaliar a tolerncia de trs espcies de leguminosas arbreas a diferentes concentraes

de chumbo e zinco no solo, com vista fitorremediao e verificar o efeito do excesso
desses metais no estabelecimento das relaes simbiticas com FMAs e bactrias fixadoras
de N2.

25

3. MATERIAL E MTODOS

3.1 Delineamento Experimental

Foram realizados dois experimentos no mesmo perodo:
Experimento I: Influncia do Zn no desenvolvimento, na tolerncia e no acmulo de
Zn em trs espcies arbreas.
Experimento II: Influncia do Pb no desenvolvimento, na tolerncia e no acmulo
de Pb em trs espcies arbreas.
Com delineamento experimental completamente casualizado e em esquema fatorial 3 x 4,
os tratamentos consistiram de trs espcies de leguminosas arbreas e quatro concentraes
de metal. Foram realizadas sete repeties para cada um dos 12 tratamentos de cada um dos
experimentos, o que totalizou 168 parcelas experimentais.

3.2 Material vegetal

Foram utilizadas sementes de Mimosa caesalpiniaefolia - Leg. Mimosoideae
(sanso-do-campo), provenientes do Instituto Florestal de So Paulo, Erythrina speciosa Leg. Faboideae (eritrina-candelabro) provenientes de um indivduo presente na rea
experimental do Departamento de Biologia Vegetal da Universidade Estadual de Campinas
(UNICAMP) e Schizolobium parahyba - Leg. Caesalpinoideae (guapuruv), provenientes
de um indivduo do arboreto da mesma Universidade.

26

3.3 Amostragem e preparao do solo

O solo utilizado nos experimentos foi submetido a anlise fsico-qumica e, com
base nos resultados desta anlise, foi realizada correo da fertilidade e do pH com o fim de
garantir o crescimento das plantas. O Pb e o Zn foram adicionados na forma de solues
aquosas de acetato de chumbo [Pb(CH3COO)23H2O] e sulfato de zinco [Zn(SO4)], nas
concentraes de 0, 250, 500 e 1000 mg dm-3 de Pb e 0, 200, 400 e 600 mg dm-3 de Zn..
Aps isso, o solo foi incubado por 20 dias para permitir a reao dos metais com os
componentes do solo. Depois desse perodo de incubao, amostras compostas do solo de
cada tratamento foram enviadas para anlise fsico-qumica no Laboratrio de Anlise de
Solos do Instituto Agronmico de Campinas IAC (Tabela 1).

Tabela 1: Anlise fsico-qumica do solo contaminado e no-contaminado com Zn no

experimento I e com Pb no experimento II.

Amostra

M.O.

-3

-3

mg dm
0
250 Pb
500 Pb
1000 Pb
200 Zn
400 Zn
600 Zn

g dm
18
18
18
18
20
19
19

pH

Ca

Mg

-3

5,0
4,8
4,9
4,9
4,8
4,7
4,8

mg dm
17
22
21
24
20
18
18

H+Al

S.B. C.T.C. V%

-3

3,6
3,3
3,4
3,5
3,2
3,1
3,1

24
22
24
25
32
23
24

mmol dm
6
34
5
34
6
31
6
28
6
38
5
38
6
38

33,6
30,3
33,4
34,5
41,2
31,1
33,1

68
65
64
62
79
69
71

%
50
47
52
55
52
45
47

Cu

Fe

Mn

Zn
-3

4,1
4,8
4,6
4,8
5,0
5,0
5,2

8
10
9
9
9
9
9

mg dm
7,5
0,9
4,5
6,8
0,8 117,5
6,3
0,8 228,0
5,6
0,6 489,0
5,8
101
7,7
5,3 174,4 2,6
5,3 236,9 1,6

3.4 Condies de crescimento das plantas

O experimento foi realizado sob condies de casa de vegetao, no Departamento
de Biologia Vegetal da UNICAMP, Campinas SP, com coordenadas geogrficas 22 49
45 S, 47 06 33W e altitude mdia 670 metros.
27

Pb

A semeadura foi realizada diretamente em vasos com capacidade de 2 L, contendo o

solo contaminado. As sementes de M. caesalpiniaefolia e S. parahyba foram previamente
esterelizadas em hipoclorito 25% durante 10 minutos. As sementes de E. speciosa foram
escarificadas em cido sulfrico concentrado durante 10 minutos, sendo este procedimento
j considerado esterilizante. As sementes de S. parahyba tambm foram escarificadas, de
forma mecnica com o uso de uma lixa. A germinao foi acompanhada diariamente e
considerada quando observada a emergncia do hipoctilo. Aps a emergncia de todas as
sementes, realizou-se um desbaste mantendo apenas uma planta por vaso. As sementes de
Schizolobium parahyba foram germinadas em bandejas com o substrato vermiculita e aps
aproximadamente sete dias da germinao e expanso do primeiro par de folhas, as
plntulas foram transplantadas para os vasos com solo.

3.5 Inoculao de FMA e rizbio

O solo utilizado nos experimentos no foi esterilizado. Dessa forma mantiveram-se
os possveis propgulos infectivos de fungos micorrzicos nativos presentes naturalmente
no solo utilizado, bem como a comunidade de rizbios. Para garantir a presena de
propgulos micorrzicos foi inoculado o FMA Glomus macrocarpum cedido pela Seo de
Microbiologia do Solo, do Centro de Solos e Recursos Ambientais do IAC. O inculo
consistiu de aproximadamente 1400 esporos, hifas e razes colonizadas de Brachiaria sp. A
inoculao foi realizada por ocasio da semeadura e para S. parahyba durante o transplante
das plantas para os vasos.

28

As sementes de M. caesalpiniaefolia e E. speciosa foram colocadas em erlenmeyer

contendo uma suspenso de rizbios especficos, em meio lquido para rizbios YMB
(yeast mannitol broth) (Vicent, 1970) para a primeira espcie utilizou-se rizbio especfico
para a espcie e na segunda especfico para o gnero (Erythrina). Depois de
aproximadamente um ms foi feita reaplicao do inculo de rizbios no solo. Esses
rizbios foram obtidos da coleo do Departamento de Biologia Vegetal, da UNICAMP.
Este procedimento no foi realizado na espcie S. parahyba, pois esta no associase simbioticamente com rizbios e portanto no forma ndulos radiculares.
3.6 Variveis analisadas
3.6.1 Medidas de crescimento
Aps aproximadamente 180 dias de cultivo, quando as plantas apresentavam
biomassa suficiente para as anlises, foi realizada a coleta. Foram determinadas a altura e a
rea foliar total, a massa da matria seca (MS) da parte area e das razes, o nmero de
ndulos, e a MS de ndulos nas espcies capazes de nodular. Na espcie que no nodula, S.
parahyba, foi feita a medio da raiz pivotante e do volume da raiz, pelo mtodo da proveta
(Lima & Athanzio, 2008).

3.6.2 Determinao de Pb e nutrientes na parte area e nas razes das plantas

Aps a pesagem da parte area e das razes, estas foram modas e submetidas
digesto ntrico-perclrica. Nos extratos foram determinados os teores de Pb e Zn por
espectrofotometria de emisso em plasma (ICP-OES), bem como os nutrientes essenciais
Fe, Mg, Mn, P, S, K, Ca e Cu (Abreu et al., 2000). Com os resultados das concentraes
29

destes elementos na raiz (R) e parte area (PA), foi calculado o ndice de translocao (IT),
que corresponde porcentagem total absorvida que foi transportada da raiz para a parte
area, segundo a frmula: IT = 100x concentrao na PA/(concentrao na PA+
concentrao na R) (Abichequer & Bohnen, 1998).
3.6.3 Teores de clorofilas e carotenides
Os teores de pigmentos fotossintticos foram determinados segundo Hiscox &
Israelstam (1979). Para o clculo das concentraes de clorofila a, b, clorofila total (a+b) e
carotenides foram utilizadas as frmulas propostas por Lichtenthaler (1987).

3.6.4 Atividade especfica da nitrogenase

Para avaliar a eficincia dos ndulos radiculares quanto fixao de N2, foi realizada
a determinao in vivo da atividade especfica da enzima nitrogenase (N2ase) utilizando-se a
tcnica de reduo de acetileno em etileno, por cromatografia gasosa (Hardy et al., 1968).O
sistema radicular foi removido, lavado e imediatamente acondicionado em frascos de vidro
de aproximadamente 250 mL de volume, os quais foram vedados com tampas de borracha.
Em seguida introduziram-se 25 mL de acetileno nos frascos com uma seringa. Alquotas de
0,5 mL de gs foram retiradas dos frascos com seringa e injetadas no cromatgrafo a gs
para dosagem do etileno formado. A partir de testes prvios, estabeleceu-se o tempo total
de 45 minutos para avaliar a atividade especifica da nitrogenase na converso de acetileno
em etileno, com medidas nos tempos 0, 15, 30 e 45 minutos. A atividade da enzima
nitrogenase foi determinada pela quantidade de etileno produzida, utilizando-se um padro
de etileno como referncia, e expressa em micro mols de etileno produzidos por hora, por
grama de massa da matria fresca (MF) de ndulos (mol. h-1.g-1.MF).
30

3.6.5 Determinaes bioqumicas

Aproximadamente 3 g de tecido foliar foram coletados, e imediatamente congelados
em N2 lquido, liofilizados, macerados e guardados em dessecador a vcuo at o momento
das anlises bioqumicas. Para as anlises de aminocidos livres, nitrato e amnia, foram
preparados extratos em MCW (metanol:clorofrmio:gua; 12:5:3; v/v/v). A determinao
de aminocidos livres totais foi feita segundo o mtodo de Coocking & Yemm (1955), por
reao colorimtrica com ninhidrina. O NH4+ livre foi determinado de acordo com a reao
fenol-hipoclorito (Mitchell, 1972), modificada por Felker (1977) e o teor de nitrato segundo
Cataldo et al. (1975), numa reao entre cido sulfrico (H2SO4) concentrado e uma base, o
hidrxido de sdio (NaOH) 2 N.
A peroxidao lipdica no tecido foliar foi determinada por meio da concentrao de
malondialdedo (MDA), produto da peroxidao lipdica, como descrito por Calmak &
Horst (1991), utilizando material liofilizado e modo. A tcnica envolve extrao com o
cido tricloroactico (0,1 e 20%) e reao com cido tiobarbitrico (0,5%).

3.6.6 Colonizao micorrzica

A porcentagem de razes colonizadas por FMAs foi estimada microscopicamente
pelo mtodo da lmina no qual 10 segmentos de aproximadamente um centmetro so
dispostos em lmina microscpica e cada segmento subdividido visualmente em 10 partes
nas quais se marca positivo (+) para a presena de estruturas fngicas (vesculas
arbusculares, esporos, hifas externas ou internas) e negativo (-) para a ausncia destas

31

estruturas. A porcentagem de colonizao (%) dada pela seguinte frmula: (+)/ (+)+
(-)x 100= +/100x100 = % colonizao (Giovanetti & Mosse, 1980).
A estimativa da porcentagem de colonizao micorrzica realizada aps prvia
despigmentao da raiz com KOH a 10% e colorao com azul de tripano, sendo as razes
armazenadas em frascos contendo glicerol acidificado at o momento da contagem das
estruturas fngicas (Phillips & Hayman, 1970).

3.7 Anlise Estatstica

Os dados obtidos foram submetidos anlise da varincia, anlise de regresso e
teste de Tukey para comparao de mdias, pelo programa SISVAR. Os dados expressos
em porcentagem e os dados de contagem foram transformados para arcsen (x/100)1/2 e log
(x+1), respectivamente.

32

4. RESULTADOS
4.1 Experimento I Zn
4.1.1 Germinao
A adio de Zn ao solo influenciou de forma negativa a germinao de sementes de
M. caesalpiniaefolia. O tratamento controle, sem adio do metal, desde o 8 dia de
germinao at o desbaste, apresentou maior porcentagem de germinao em relao ao
tratamento com 400 mg dm-3 de Zn no solo (Figura 1). A germinao das sementes de E.
speciosa no diferiu significativamente entre os tratamentos (dados no apresentados).
100
Controle

Germinao (%)

90

Zn 200 mg

80

Zn 400 mg

70

Zn 600 mg

a a

60
50

b b b

b b

40
30
20
10
0
0

10 11 12

13

14

15

Tempo (dias)

Figura 1: Porcentagem de germinao em Mimosa caesalpiniaefolia, sob diferentes

concentraes de Zn no solo. Anlise de varincia (n=7), significncia (p<0,05). Letras
diferentes indicam diferenas estatsticas pelo teste de Tukey a 5%.

4.1.2 Resultados das medidas de crescimento

Com relao aos parmetros utilizados para avaliar o crescimento das plantas,
observou-se que de forma geral o aumento das concentraes de Zn no solo influenciou
33

negativamente o crescimento das plantas, sendo que as medidas de crescimento foram

influenciadas de forma diferente nas espcies estudadas.
O crescimento em altura foi influenciado pela adio de Zn nas trs espcies
avaliadas, sendo que em M. caesalpiniaefolia houve uma reduo de 81% em relao ao
tratamento controle (Figuras 2 e 3).

5 cm

Figura 2: Mudas de Mimosa caesalpiniaefolia, cultivadas em concentraes crescentes de Zn

adicionadas ao solo.

A rea foliar foi afetada nas trs espcies reduzindo-se linearmente com a adio de
concentraes crescentes de Zn, de forma mais acentuada em M. caesalpiniaefolia e E.
speciosa (Figura 3).
A produo de MS da parte area e da raiz tambm foi afetada nas trs espcies,
assim como a rea foliar e a altura (Figura 3).

34

800
2222

40

))))

a
r
u
t
l
A

m
c

50

0
2
8
,
0
=
2222
R
;
x
7
5
,
0
4
8
,
6
5
7
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

1
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
3
0
,
0
7
4
,
9
4
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

900

60

m
c

0
6
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
9
,
0
3
3
,
2
5
5
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

1000

1
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
6
9
,
0
9
7
,
5
1
7
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

1100

8
5
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
8
0
,
0
8
0
,
3
6
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

70

(B)

4
4
8
,
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
8
3
,
4
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

(A)
80

((((

r
a
i
l
o
f
a
e
r

30

700
600
500
400
300
200

20

100

10

3,2

8
7

2,8

R
S
M

2,4

( )

( )

3,6

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

4,0

))))

4
2
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
3
7
,
3
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

10

600

8
6
4
8
,
0
=
2222
R
;
x
4
0
1
.
8
9
,
9
3
6
,
0
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

4,4

400

4
9
5
7
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
1
,
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

12

4,8

5
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
7
0
,
8
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

A
P
S
M

(D)

7
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
0
0
,
0
4
4
,
3
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

((((

13
11

200

))))

0
7
8
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
0
,
0
9
1
,
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

(C)

600

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

2,0

1,6

1,2

0,8

0,4

0,0

600

200

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

))))

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

600

))))

Figura 3: Altura mdia (A), rea foliar (B), massa da matria seca de parte area (MSPA) (C),
massa da matria seca de raiz (MSR) (D), das espcies E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.
parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.

A MS da raiz foi afetada em E. speciosa e S. parahyba (Figura 3). Quanto MS de

ndulos, o aumento da concentrao de metal influenciou de forma negativa apenas a
espcie E. speciosa, em que observa-se reduo de at 83% na MS e, pela anlise de
35

regresso, uma tendncia estabilizao da MS dos mesmos. No houve influncia das

concentraes de Zn sobre a quantidade de ndulos em M. caesalpiniaefolia, mas em E.
speciosa observou-se que em baixa concentrao de Zn o nmero de ndulos foi
influenciado, havendo um aumento da quantidade de ndulos na concentrao de 200 mg
dm-3 em relao ao controle, mas depois deste aumento a quantidade de ndulos se reduz
consideravelmente (Figura 4).
Na espcie que no nodula (S. parahyba), na qual foram feitas medies de
comprimento e volume da raiz, observou-se que ambos os parmetros foram influenciados
pelo incremento de Zn no solo, com reduo de 30% no volume e tambm no comprimento
da raiz, em relao ao tratamento sem adio de Zn (dados no apresentados).
(A)

(B)
9
9
9
,
0
=
2222
R
;
2
1
,
0
+
x
4
0
1
.
8
8
,
4
2222
xxxx
7
0
1
.
9
3
,
5
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
o
l
u
d

N
e
d
o
r
e
m

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

300

0,14
0,12

250

s
o
l
u
d

N
e
d
S
M

200
150
100

0,10
0,08
0,06
0,04

50

0,02
0

0,00
600

200

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

))))

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

600

))))

Figura 4: Nmero de ndulos (A) e massa da matria seca de ndulos (B) das espcies E.
speciosa e M. caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.

36

4.1.3 Nutrio Mineral

Concentrao de Zn e outros elementos na parte area
Com o aumento da concentrao de Zn no solo houve aumento da concentrao
deste metal na parte area (caule e folhas) das espcies estudadas (Figuras 5). Alm disso, o
Zn levou a uma reduo na concentrao de Fe e Cu nas folhas de M. caesalpiniaefolia
(Tabela 2). Observou-se que nas folhas de M. caesalpiniaefolia a concentrao de Fe foi
reduzida nos tratamentos de 200 e 400 mg.dm-3 mas aumentou consideravelmente na maior
concentrao (600 mg dm-3). Em E. speciosa o incremento do Zn no solo aumentou as
concentraes de P e S nas folhas e reduziu as de Mn, mas verifica-se uma tendncia
estabilizao, havendo um leve aumento da concentrao de Mn na maior concentrao de
Zn (regresso com ajuste de tipo quadrtico)

(Tabela 2). O Zn no influenciou

significativamente a concentrao dos outros minerais nas folhas de S. parahyba. Com

relao ao caule houve reduo na concentrao de Fe em M. caesalpiniaefolia e no houve
influncia nas concentraes dos minerais em E. speciosa (Tabela 3). Em S. parahyba a
concentrao dos minerais no foi determinada no caule, devido a problemas com as
amostras.

37

Tabela 2: Concentrao de nutrientes minerais nas folhas das espcies arbreas E. speciosa,
M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn.
Anlise de regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso
linear; x2= regresso quadrtica.

Folhas
Erythrina speciosa
-3

-1

mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
230,4
200
233,9
400
310,9
600
216,2

-1

g kg
Mg
3,9
3,7
3,9
4,0

Regresso
p

ns

Concentrao
0
200
400
600

Fe
109,7
99,1
98,7
280,8

Regresso
p

x
<0,05

ns

Concentrao
0
200
400
600
Regresso

Fe
93,6
112,7
117,6
106,7
ns

Mg
2,3
2,4
2,2
2,6
ns

mg kg
Mn
167,4
69,8
64,4
66,2

-1

-1

g kg
P
2,2
1,9
2,5
2,7

-1

g kg
S
2,8
2,2
3,1
4,3

x
x
x
<0,01 <0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
3,2
75,3
1,8
2,2
3,1
83,0
1,8
2,3
3,8
116,1
2,0
3,3
3,4
109,7
1,1
2,2
ns

ns

ns

ns

Schizolobium parahyba
Mn
P
S
52,9
0,8
2,6
57,9
1,2
3,1
46,1
1,2
3,2
54,6
1,2
3,2
ns
ns
ns

38

-1

-1

mg kg
Cu
12,1
10,2
13,3
12,1

-1

g kg
K
24,2
21,9
20,2
19,1

g kg
Ca
24,6
27,3
29,9
28,9

ns

ns

ns

K
16,2
15,2
15,3
12,5

Ca
18,6
17,2
22,7
15,7

Cu
7,5
7,4
9,8
4,8

ns

ns

x
<0,05

K
8,0
9,8
9,8
10,5
ns

Ca
20,2
21,0
19,9
23,6
ns

Cu
2,6
3,8
4,3
3,8
ns

Tabela 3: Concentrao de nutrientes minerais no caule das espcies arbreas E. speciosa e

M. caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso
(n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2= regresso
quadrtica.
Caule
Erythrina speciosa
-3

-1

mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
137,3
200
69,4
400
73,0
600
86,4
Regresso
ns
Concentrao
0
200
400
600
Regresso
p

Fe
158,0
65,9
58,5
ND
x
<0,05

-1

-1

-1

-1

))))

S
M
1
g
k
g
m

600
500

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

))))
((((

0
2
7
,
0
=
2222
R
;
x
8
3
,
0
+
4
5
,
7
4
2
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

600

700

400
300
200
100
0

K
10,8
9,9
15,3
ND
ns

Ca
8,8
8,1
7,9
ND
ns

Cu
6,3
5,9
7,2
ND
ns

-1

400

600

500
400
300
200
100
0
200

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

))))

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

mg kg
Cu
15,7
9,2
11,4
12,2
ns

6
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
6
9
,
0
+
2
7
,
0
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

7
5
7
,
0
=
2222
R
;
2222
x
5
2
0
0
,
0
+
x
2
5
,
2
+
0
5
,
8
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

g kg
Ca
13,6
13,9
11,5
13,0
ns

3
2
9
,
0
=
2222
R
;
x
9
8
,
0
+
9
0
,
8
9
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

2
1
7
,
0
=
2222
R
;
x
4
8
,
0
+
5
4
,
4
3
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

800

S
M
1
g
k
g
m

-1

g kg
K
27,6
26,4
25,2
23,3
ns

(B)

(A)
900

-1

g kg mg kg
g kg
g kg
Mg
Mn
P
S
2,5
113,0
1,9
2,8
2,3
68,5
1,5
2,3
2,4
69,9
1,9
3,6
2,5
67,5
2,9
4,2
ns
ns
ns
ns
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
0,7
18,6
0,9
0,9
0,9
24,1
1,4
1,6
1,3
19,4
1,4
1,7
ND
ND
ND
ND
ns
ns
ns
ns

600

))))

Figura 5: Concentrao de Zn nas folhas (A) e no caule (B) das espcies E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.
39

Concentrao de Zn e outros elementos na raiz

Observou-se um aumento na concentrao de Zn nas razes das trs espcies com o
aumento das concentraes de Zn no solo (Figura 6). A concentrao desse metal
influenciou a concentrao de outros minerais de forma diferenciada entre as espcies. Em
E. speciosa houve aumento nas concentraes de Fe, P, Ca e Cu com o incremento do Zn
no solo e reduo na concentrao de Mn nas concentraes de 200 e 400 mg dm-3 em
relao ao controle e aumento na concentrao de 600 mg dm-3, tendendo dessa forma
estabilizao (Tabela 4). Em S. parahyba observou-se reduo das concentraes de Fe e
Ca e aumento da concentrao de K. A nutrio mineral da espcie M. caesalpineaefolia foi
a mais influenciada, sendo que o aumento das concentraes de Zn no solo levaram
reduo das concentraes de Fe, Mn, K e Ca, e, em contrapartida, elevou os nveis de Mg,
P e S na raiz (Tabela 4).

9
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
8
,
8
+
4
7
6
,
3
9
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

))))
((((

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

9
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
8
,
1
+
7
1
,
6
7
5
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

4500

S
M
1
g
k
g
m

Raiz

1
0
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
,
5
+
4
5
,
6
3
3
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

5000

4000
3500
3000
2500
2000
1500
1000
500
0

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

600

))))

Figura 6: Concentrao de Zn nas razes das espcies E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.

parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.
40

Tabela 4: Concentrao de nutrientes minerais nas razes das espcies arbreas E. speciosa e
M. caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso
(n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2= regresso
quadrtica.
Raiz
Erythrina speciosa
-3

-1

mg dm
Concentrao
0
200
400
600

mg kg
Fe
3884,7
3180,2
3243,1
11728,6

Regresso
p

x
<0,001

Concentrao
Fe
0
9224,7
200
7449,9
400
5824,6
600
ND
Regresso
p

x
<0,05

Concentrao
0
200
400
600
Regresso
p

Fe
5430,4
3912,7
3777,0
2522,0
x
<0,05

-1

g kg
Mg
3,5
2,6
2,5
2,7

mg kg
Mn
100,8
52,7
58,6
95,3

-1

-1

g kg
P
1,5
1,5
2,1
2,1

-1

g kg
S
4,6
3,7
4,7
5,3

x
ns
x
0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mg
Mn
P
S
1,8
145,6
1,0
2,7
1,8
104,1
1,3
3,5
2,8
65,4
1,4
3,8
ND
ND
ND
ND
ns

x
x
x
x
<0,001 <0,01
0,01
<0,001
Schizolobium parahyba
Mg
Mn
P
S
4,8
106,2
0,9
3,9
2,7
67,1
1,1
3,5
2,9
60,9
0,8
3,6
2,8
67,9
1,2
3,9
ns
ns
ns
ns

-1

-1

g kg
Ca
7,1
6,8
8,2
8,7

ns

x
<0,05

x
<0,05

K
7,9
6,5
6,4
ND

Ca
9,1
9,6
8,4
ND

Cu
36,6
44,5
43,4
ND

x
<0,01

x
<0,01

ns

K
18,4
13,2
10,8
13,9
x
<0,05

Ca
7,5
7,5
5,1
5,5
x
<0,01

Cu
31,3
38,1
33,3
28,7
ns

mg kg
Cu
39,2
33,4
45,6
77,3

-1

g kg
K
22,7
23,4
21,9
19,9

Distribuio de Zn na planta e ndices de translocao dos nutrientes

A distribuio de Zn nos diferentes rgos das plantas apresentada na figura 7,
mostra que esse MP ficou retido preferencialmente nas razes e conforme aumenta a
concentrao deste elemento no solo maior a proporo retida nas razes (Figura 7).
Observa-se que plantas crescendo no solo controle (sem adio de Zn) apresentaram
41

maior translocao deste elemento para a parte area quando comparadas s plantas
crescendo em solos com altas concentraes de Zn. Em E. speciosa, da concentrao total
de Zn absorvida, em torno de 35% foi transportado para a parte area.

Figura 7: Distribuio do Zn absorvido nas diferentes partes da planta, nas espcies E.

speciosa e M. caesalpiniaefolia.

Com o aumento das concentraes de Zn no solo houve uma reduo no ndice de

translocao (IT) desse metal para a parte area em E. speciosa e M. caesalpiniaefolia
(Tabela 5). Os ITs de alguns minerais tambm foram influenciados pelo aumento da
concentrao de Zn no solo. Em E. speciosa, houve reduo do IT de Mn e Cu. Em M.
caesalpiniaefolia, houve um aumento no IT do Mn e do Ca, mas uma reduo do IT de P
(Tabela 5). Na espcie S. parahyba, as concentraes de minerais no puderam ser
determinadas nos caules e somente os ITs da raiz para as folhas so mostrados.

42

Tabela 5: ndice de translocao dos minerais nas espcies arbreas E. speciosa e M.

caesalpiniaefolia, cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso
(n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2= regresso
quadrtica.

ndice de Translocao (%)

Erythrina speciosa
Mn
P
S
K

Concentrao
-3
Zn (mg dm )

Fe

Mg

0
200
400
600
Regresso
p

8,8
8,8
10,6
2,5

65,2
69,3
71,7
70,7

ns

ns

Concentrao
0
200
400
600

Fe

Mg

x
ns
ns
0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S

2,8
2,3
2,1

67,2
69,3
66,4

41,4
50,7
84,1

72,9
71,5
57,2

ND

ND

ND

ND

72,4
72,4
69,5
58,4

72,5
69,6
67,8
71,9

Ca

Cu

Zn

69,6
67,1
67,5
67,9

83,9
85,8
83,5
82,4

42,4
36,5
35,6
23,8

46,1
30,4
26,1
26,0

ns

ns

x
<0,05

x
<0,05

Ca

Cu

Zn

53,6
52,0
52,4

77,0
79,4
58,0

75,2
72,6
87,8

27,0
24,9
24,4

41,9
22,8
21,7

ND

ND

ND

ND

ND

55,0
54,9
58,8
61,4

Regresso
p

ns

ns

Concentrao
0
200
400
600
Regresso

Fe

Mg

x
x
ns
<0,01
0,01
Schizolobium parahyba
Mn
P
S

1,8
3,2
4,6
4,1

35,8
46,8
44,8
50,8

33,5
46,6
44,4
47,8

49,7
54,9
60,1
50,0

ns

ns

ns

ns

ns

x
<0,05

ns

x
0,01

Ca

Cu

Zn

40,4
47,6
47,3
45,6

30,7
42,9
47,4
43,1

72,9
73,6
79,5
80,8

8,6
11,7
11,6
11,9

49,7
39,9
20,9
24,8

ns

ns

ns

ns

ns

4.1.4 Pigmentos
Observou-se que nas espcies estudadas os teores de todos os pigmentos
fotossintticos analisados foram influenciados de forma negativa com o incremento do Zn
no solo. Em S. parahyba e M. caesalpiniaefolia houve reduo de mais de 80% nos teores
de clorofila a no tratamento com maior concentrao de Zn em relao ao tratamento sem
43

adio do metal (Figura 8). O mesmo foi observado para os carotenides totais em S.
parahyba.
(B)
3
5
6
,
0
=
2222
R
;
x
5
1
0
,
0
1
3
,
5
3
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
6
7
6
,
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
7
9
,
2
4
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

50

14

45

12
2
-

m
c
.
g

10

30

bbbb

a
l
i
f
o
r
o
l
C

((((

((((

))))

35

))))

m
c
.
g

40

a
l
i
f
o
r
o
l
C

5
7
7
,
0
=
2222
R
;
2222
xxxx
5
0
1
.
6
9
,
1
x
3
0
0
,
0
+
4
4
,
7
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

8
1
9
,
0
=
2222
R
;
x
4
4
0
,
0
4
5
,
5
3
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

55

2
-

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

16

7
0
7
,
0
=
2222
R
;
x
8
0
0
,
0
6
1
,
2
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

(A)
60

25
20
15

10
2

((((

))))

(C)

48

))))

s
i
a
t
o
t
s
e
d
i

n
e
t
o
r
a
C

((((

))))

2
-

m
c
.
g

52

44
40
36
32
28

6
1
9
.
0
=
2222
R
;
x
8
1
0
,
0
6
5
,
4
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

18

6
9
7
.
0
=
2222
R
;
x
5
2
0
,
0
6
0
,
0
4
=
y

a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

((((

0
2
8
.
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
3
2
,
2
1
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

0
5
6
.
0
=
2222
R
;
x
6
2
0
,
0
2
4
,
2
5
=
y

a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

m
c
.
g

l
a
t
o
t
a
l
i
f
o
r
o
l
C

600

))))

7
6
7
.
0
=
2222
R
;
x
4
0
0
,
0
1
9
,
0
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

20

56
2
-

400

(D)
7
2
6
.
0
=
2222
R
;
x
3
2
0
,
0
4
3
,
7
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

60

200

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

600

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

16
14
12
10
8
6
4
2
0

600

200

((((

))))

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

400

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

600

))))

Figura 8: Teores de clorofila a (A), clorofila b (B), clorofila total (C) e carotenides totais (D)
em g cm-2 de massa fresca de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em
solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=5), significncia (p<0,05) e R2=
coeficiente de determinao.

44

4.1.5 Atividade da Nitrogenase

A adio de Zn no influenciou significativamente a atividade da enzima nos
ndulos de nenhuma das duas espcies avaliadas, (Tabela 7). Comparando-se as espcies
(Tukey a 5%), observou-se que a atividade da enzima, de maneira geral, foi maior nos
ndulos de E. speciosa.

Tabela 7: Atividade da enzima nitrogenase em por moles etileno.g-1.h-1 MF de ndulos de

E. speciosa e M. caesalpiniaefolia cultivadas em solos com doses crescentes de Zn. Anlise
de regresso (n=4), (p<0,05). Letras diferentes indicam diferenas estatsticas pelo teste de
Tukey a 5%, comparando as espcies.
Espcie/Concentrao

Erythrina speciosa

-3

mg dm de Zn no solo

0
200
400
600

moles etileno.g

Mimosa caesalpiniaefolia
-1

-1

.h . MF ndulo

6.726 a
6.716 a
12.924 a
6.623 a

3.966 b
4.463 b
1.745 b
1.533 b

4.1.6 Determinaes bioqumicas

O aumento das concentraes de Zn no solo afetou os resultados das anlises
bioqumicas avaliadas de maneira diferenciada entre as espcies. Em folhas de E. speciosa
houve aumento no teor de aminocidos solveis totais e nitrato. Em M. caesalpineaefolia,
tambm houve aumento no teor foliar de aminocidos totais. Em S. parahyba, a adio de
Zn aumentou a peroxidao lipdica das membranas nas folhas (Figura 9).

45

(A)

(B)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

9
6
6
,
0
=
2222
R
;
x
3
2
1
,
0
+
9
4
1
,
3
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

160

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

140

))))

((((

120
100

o
t
a
r
t
i
N

((((

a
i
n

m
A

g
m
l
o
m
n

))))

g
m
l
o
m
n

80
60
40

(C)

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

40

80
35

70

1
-

g
m
l
o
m
n

((((

60
50

))))

))))

600

))))

s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
i
a
t
o
T
s
o
d
i
c

o
n
i
m
A

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

1
g
m
l
o
m
n

45

8
4
8
,
0
=
2222
R
;
x
7
5
0
,
0
+
5
6
8
,
8
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

90

400

(D)

5
4
6
,
0
=
2222
R
;
x
8
2
0
,
0
+
9
5
2
,
3
6
=
y
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

100

200

((((

))))

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

600

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

25
20

((((

A
D
M

30

40

15

30
10

20
5

10

600

200

((((

))))

400

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

400

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

200

n
Z
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

600

))))

Figura 9: Teores de amnia (A), nitrato (B), aminocidos totais (C) e MDA (D) em nmol.mg-1
de massa seca de folhas de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em
solos com doses crescentes de Zn. Anlise de regresso (n=3), significncia (p<0,05) e ns=
no significativo.

4.1.7 Colonizao Micorrzica

De uma maneira geral, verificou-se que a colonizao micorrzica diferiu entre as
espcies, sendo que a menor porcentagem de raiz colonizada por FMAs ocorreu na espcie
46

E. speciosa. Nas diferentes concentraes de Zn, S. parahyba apresentou maiores taxas de

colonizao micorrzica nos tratamentos de maior concentrao do metal (400 e 600
mg.dm-3 de solo). Em M. caesalpiniaefolia a taxa de colonizao aumenta no tratamento de
200 mg dm-3 de solo, no entanto, reduz a porcentagem de colonizao no tratamento de 400
mg.dm-3, mas volta a aumentar no tratamento de 600 mg dm-3 de Zn no solo. O Zn no
influenciou significativamente a colonizao em E. speciosa com, em mdia, 55% de
colonizao (Tabela 7).

Tabela 8: Porcentagem de colonizao micorrzica nas espcies E. speciosa, M.

caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solo com doses crescentes de Zn adicionadas.
Porcentagem de colonizao micorrzica (%)
-3

Concentrao (mg dm )
0
200
400
600

Erythrina speciosa
62
44
57
56

Mimosa caesalpiniaefolia
39
88
57
71

Regresso
p

ns

x
0,001

Schizolobium parahyba
48
66
79
68
2

x
<0,01

4.2 Experimento II Pb
4.2.1 Germinao
A adio de Pb no solo, no influenciou significativamente a germinao das
espcies analisadas (dados no apresentados).
4.2.2 Resultados das medidas de crescimento
A produo de MS da parte area nas espcies E. speciosa e S. parahyba diminuiu
linearmente com a adio de Pb ao solo (Figura 5). No entanto, o crescimento em altura foi
47

influenciado somente nas plantas de S. parahyba, nas quais a maior concentrao de Pb

adicionada ao solo promoveu uma reduo de 28% na altura, em relao s plantas do
tratamento controle (Figura 10). Quanto rea foliar, apenas a espcie E. speciosa foi
afetada, de forma que na maior concentrao houve uma reduo de 33% em relao ao
tratamento sem adio de metal (Figura 10). A MS de raiz no foi influenciada
significativamente pelo Pb em nenhuma das espcies estudadas.
Considerando-se as espcies capazes de nodular, E. speciosa e M. caesalpiniaefolia,
observou-se que o nmero de ndulos no foi influenciado, entretanto, a MS de ndulos em
E. speciosa diminuiu at o tratamento com 400 mg.dm-3 com o aumento da concentrao de
Pb no solo (Figura 11).

48

(B)

(A)

1
1
6
,
0
=
2222
R
;
x
4
4
,
0
8
6
,
2
1
5
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E
9
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
1
0
0
,
0
7
6
2
,
2
5
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

1950

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

2100

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

80

1800

70

1650

a
r
u
t
l
A

1500

r
a
i
l
o
f
a
e
r

1350

))))

m
c

((((

m
c

2222

60
50
40

1200
1050
900
750

30

600
450

20

1000

))))

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M
s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

5,0

13

4,5

12

4,0

11
10

R
S
M

( )

( )

1000

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

5
9
5
,
0
=
2222
R
;
x
2
2
0
,
0
2
1
,
3
6
=
y

A
P
S
M

5,5

8
2
9
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
6
5
,
8
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

6,0

s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

14

750

(D)
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

15

500

((((

))))

(C)
16

250

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

((((

750

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

500

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

3,5
3,0

7
0,5

6
5
4

0,0

1000

250

500

((((

))))

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

((((

750

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

500

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

1000

))))

Figura 10: Altura (A), rea foliar (B), massa da matria seca da parte area (MSPA) (C) e
massa da matria seca da raiz (MSR) (D) em E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.
parahyba, em diferentes concentraes de Pb. Anlise de regresso (n=3), significncia
(p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de determinao.

49

(A)

(B)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

0,35

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

6
5
9
,
0
=
2222
R
;
6
8
1
,
0
+
x
4
0
1
.
0
7
,
4
+
2222
xxxx
7
0
1
.
2
6
,
5
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

90
80

0,30

70

( )

g
s
o
l
u
d

n
e
d
S
M

s
o
l
u
d

N
e
d
o
r
e
m

0,25
0,20
0,15
0,10
0,05

60
50
40
30
20
10

0,00

0
500

1000

250

500

((((

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

))))

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

1000

))))

Figura 11: Massa da matria seca de ndulos (A) e nmero de ndulos (B) de E. speciosa e
M. caesalpiniaefolia em resposta ao incremento da concentrao de Pb no solo. Anlise de
regresso (n=3), significncia (p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de
determinao.

4.2.3 Nutrio Mineral

Concentrao de Pb e outros elementos na parte area
O aumento da concentrao de Pb no solo aumentou linearmente a concentrao
deste metal na parte area (folhas e caule) de E. speciosa e S. parahyba, mas somente no
caule de M. caesalpiniaefolia (Figura 12).
O Pb afetou a concentrao de Mg que diminuiu e de Mn que aumentou na dose de
250 mg.dm-3, mas foi diminuindo nas duas maiores concentraes com valores prximos ao
tratamento controle, nas folhas de E. speciosa e a concentrao de Zn nas folhas de S.
parahyba. Com relao ao caule, o Pb contribuiu para a reduo da concentrao de Fe e
Mn e para o aumento da concentrao de S em E. speciosa. Tambm afetou a concentrao

50

de Fe, que diminuiu fortemente em M. caesalpiniaefolia, mas no influenciou a

concentrao dos minerais no caule de S. parahyba.
(B)

(A)
))))

))))

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

((((

150

100

50

105
90
75
60
45
30
15
0
250

500

((((

))))

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

1000

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

((((

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

500

b
P
e
d
o

a
r
t
n
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c
n
o
C

250

3
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
,
0
+
4
5
,
0
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

4
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
2
,
0
+
6
8
,
3
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

120

S
M
1
g
k
g
m

200

2
9
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
0
,
0
+
7
1
,
9
1
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

2
5
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
,
0
+
9
,
6
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

9
3
7
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
,
0
+
8
8
,
3
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

250

S
M
e
d
1
g
k
g
m

135

1000

))))

Figura 12: Concentrao de Pb nas folhas (A) e no caule (B) das espcies E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3), (p<0,05)e R2= coeficiente de determinao.

51

Tabela 10: Concentrao de nutrientes minerais no caule das espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.
Folhas
Erythrina speciosa
-3

mg dm
Concentrao
0
250
500
1000

mg kg
Fe

-1

-1

g kg
Mg

mg kg
Mn

-1

g kg
P

-1

g kg
S

-1

g kg
K

-1

g kg
Ca

-1

mg kg
Cu

-1

mg kg
Zn

-1

193,2
203,5
168,6
190,6

4,2
3,9
3,4
3,5

120,9
178,5
135,3
126,7

1,7
1,5
1,7
1,8

2,2
2,1
2,2
2,5

20,5
17,4
21,4
21,3

25,5
27,8
24,2
26,2

12,6
12,4
13,0
14,4

29,3
27,4
24,7
33,4

Regresso
p

ns

x
<0,05

x
<0,05

ns

ns

ns

ns

ns

ns

Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p

Fe
125,9
119,1
129,0
136,7
ns

Mg
3,5
3,4
3,8
3,7
ns

Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
93,4
2,3
2,2
83,7
1,9
2,1
86,8
2,1
2,1
93,2
2,3
2,2
ns
ns
ns

K
16,7
16,9
17,2
17,8
ns

Ca
22,8
25,2
22,2
24,2
ns

Cu
10,6
8,9
8,3
7,9
ns

Zn
33,0
27,3
25,3
27,5
ns

Concentrao
0
250
500
1000

Fe
102,2
101,4
94,4
96,8

Mg
2,7
2,1
2,3
2,6

Schizolobium parahyba
Mn
P
S
51,8
1,1
2,5
56,3
1,3
3,3
65,6
1,1
2,8
69,0
1,2
3,2

K
8,2
12,0
9,2
7,9

Ca
27,0
26,0
30,6
32,3

Cu
4,0
4,7
3,3
3,6

Zn
31,0
19,9
16,9
17,1

Regresso
p

ns

ns

ns

ns

ns

x
<0,01

ns

ns

52

ns

Tabela 10: Concentrao de nutrientes minerais no caule das espcies arbreas E.

speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes
de Pb. Anlise de regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x=
regresso linear e x2= regresso quadrtica.

Caule
Erythrina speciosa
-3

-1

mg dm
mg kg
Concentrao
Fe
0
155,0
250
67,4
500
27,6
1000
45,4

-1

g kg
Mg
2,5
2,5
2,3
2,4

Regresso
p

x
0,05

ns

Concentrao
0
250
500
1000

Fe
217,1
79,8
45,0
50,7

Mg
1,0
0,8
1,0
1,0

Regresso
p

x
<0,05

ns

Concentrao
0
250
500
1000
Regresso

Fe
182,8
112,8
136,8
175,9
ns

Mg
0,8
0,9
0,7
0,6
ns

mg kg
Mn
117,2
142,8
124,7
92,5

-1

-1

g kg
P
1,6
1,2
1,3
1,6

-1

g kg
S
1,7
2,5
2,2
2,7

-1

g kg
K
21,6
19,2
20,3
23,1

ns
x
ns
x
<0,05
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
22,9
1,8
0,8
15,0
23,4
1,4
1,0
14,3
19,4
1,2
0,8
13,9
23,3
1,5
0,9
14,9
ns

ns

ns

Schizolobium parahyba
Mn
P
S
9,1
0,7
1,3
9,6
0,9
1,7
9,2
0,7
1,5
8,9
1,0
1,4
ns
ns
ns

-1

g kg
Ca
11,5
10,6
10,8
11,6

mg kg
Cu
16,3
14,8
15,7
12,4

-1

mg kg
Zn
11,4
9,0
12,4
13,6

ns

ns

ns

Ca
9,1
10,1
8,2
9,4

Cu
10,5
10,5
6,8
9,0

Zn
17,0
15,9
11,1
13,4

ns

ns

ns

ns

K
10,3
13,1
10,9
8,8
ns

Ca
6,7
7,6
7,3
6,4
ns

Cu
4,0
4,1
3,0
2,8
ns

Zn
15,1
15,7
13,9
10,9
ns

-1

Concentrao de Pb e outros elementos na raiz

Como observado para o Zn, o aumento das concentraes de Pb no solo levou ao
aumento da concentrao desse metal, principalmente nas razes das espcies estudadas
(Figura 13). O incremento de Pb no solo reduziu a concentrao de Mn e P em M.
caesalpiniaefolia, reduziu a concentrao de Mg, e aumentou as concentraes de Mn, S, K
e Cu em S. parahyba, e reduziu a concentrao de Cu em E. speciosa (Tabela 11).
53

Tabela 11: Concentrao de nutrientes minerais na raiz das espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.

Raiz
Erythrina speciosa
-3

mg dm
Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p

-1

mg kg
Fe
5659,7
4392,0
6067,8
4972,3
ns

-1

g kg
Mg
2,4
2,0
2,2
2,0
ns

Concentrao
0
250
500
1000

Fe
2827,2
3782,1
5167,4
4332,9

Mg
3,3
1,8
2,9
3,2

Regresso
p

ns

ns

Concentrao
0
250
500
1000

Fe
5332,7
3821,0
4572,1
5835,7

Mg
4,1
2,5
6,2
2,8

Regresso
p

ns

x
0,05

mg kg
Mn
102,6
85,5
139,4
80,2
ns

-1

-1

-1

g kg
S
3,4
3,7
3,6
2,7
ns

-1

-1

-1

g kg
K
17,6
18,0
15,7
18,0
ns

g kg
Ca
7,3
5,4
6,5
6,8
ns

mg kg
Cu
56,9
35,6
46,4
37,1
x
0,05

Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
226,3
2,1
2,0
16,7
85,5
1,3
2,9
15,4
108,6
1,4
2,4
14,4
78,6
1,7
2,4
14,4

Ca
6,3
6,0
6,3
6,7

Cu
25,9
17,0
29,4
31,4

Zn
20,3
22,0
23,4
19,8

ns

ns

ns

ns

K
19,3
18,9
27,6
24,9

Ca
6,1
6,1
6,8
6,3

Cu
30,3
24,8
26,2
44,4

Zn
26,6
24,9
23,7
22,3

x
<0,01

ns

x
<0,05

ns

g kg
P
1,4
1,2
1,1
1,4
ns

x
x
ns
<0,01 <0,01
Schizolobium parahyba
Mn
P
S
120,2
1,0
3,6
130,4
1,1
3,9
176,8
0,9
5,3
124,2
1,0
4,3
2

x
<0,05

ns

54

x
0,05

mg kg
Zn
36,6
34,7
36,2
28,0
ns

-1

2
4
9
,
0
=
2222
R
;
x
0
8
,
0
+
9
8
,
5
6
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

Raiz

0
8
9
,
0
=
2222
R
;
x
4
0
,
1
+
7
4
,
2
7
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

2400

))))
((((

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

8
9
9
,
0
=
2222
R
;
2222
x
1
0
0
,
0
+
x
4
1
,
1
+
4
1
,
7
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

S
M
1
g
k
g
m

2100
1800
1500
1200
900
600
300
0
500

((((

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

1000

))))

Figura 13: Concentrao de Pb nas razes das espcies E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S.

parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05) e R2= coeficiente de determinao.

Distribuio de Pb na planta e ndices de translocao

A distribuio de Pb na planta diferiu em plantas crescendo no solo controle sem
adio de Pb, e em solos com adio de doses elevadas deste metal (Figura 14). Nas plantas
do solo controle, e com baixas concentraes de Pb, houve alta translocao do metal
absorvido para rgos da parte area, especialmente no caule, enquanto que nas plantas
crescendo em solo com altos nveis de Pb, o acmulo ocorreu preferencialmente nas razes,
em torno de 85-90% do Pb total absorvido pelas plantas.

55

Figura 14: Distribuio do Pb total absorvido nas diferentes partes da planta, nas espcies
arbreas E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba.

Com o aumento das concentraes de Pb no solo, houve uma reduo no ndice de

translocao (IT) desse metal para a parte area de todas as espcies estudadas. Alm disso,
a adio de Pb ao solo, influenciou os ITs de alguns minerais.. Em E. speciosa, houve
aumento do IT de S e Zn e em S. parahyba houve reduo dos ITs de K e Cu. Em M.
caesalpiniaefolia houve aumento no IT do Mn e reduo nos ITs de Fe, Cu e Zn (Tabela
13).

56

Tabela 13: ndice de translocao dos minerais nas espcies arbreas E. speciosa, M.
caesalpiniaefolia e S. parahyba cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. . Anlise de
regresso (n=3). ns= no significativo; p= significncia (p<0,05); x= regresso linear; x2=
regresso quadrtica.

Concentrao

Fe

Mg

ndice de Translocao (%)

Erythrina speciosa
Mn
P
S
K

Pb (mg dm-3)
0
250
500
1000

5,8
6,2
3,5
4,6

73,6
76,4
72,2
74,2

70,2
78,4
64,4
73,6

70,1
69,1
72,5
69,1

Regresso
p

ns

ns

ns

ns

Concentrao
0
250
500
1000

Fe
10,9
5,0
3,3
4,2

Mg
58,5
69,7
62,6
59,5

Regresso
p

x
<0,01

ns

x
<0,001

Concentrao
0
250
500
1000
Regresso
p

Fe
5,0
5,6
5,3
5,0
ns

Mg
48,7
54,9
35,3
53,9
ns

Mn
33,5
33,6
30,2
39,6
ns

54,4
55,2
55,7
66,0

70,5
67,0
72,7
70,6

x
ns
<0,05
Mimosa caesalpiniaefolia
Mn
P
S
K
34,3
66,7
60,3
65,8
55,5
72,4
51,7
66,5
50,1
70,5
53,9
68,4
59,4
69,6
55,9
69,2
ns

ns

ns

Schizolobium parahyba
P
S
K
65,5
51,6
49,0
66,1
55,8
57,1
66,5
44,5
42,0
68,5
51,7
40,4
ns
ns
x
<0,01

Ca

Cu

Zn

Pb

83,4
87,8
83,9
84,7

33,8
43,4
39,1
42,1

53,0
51,4
52,2
62,2

73,9
22,0
17,6
15,8

ns

ns

x
<0,05

x
0,01

Ca
83,5
85,5
82,9
83,4

Cu
44,9
53,5
34,0
35,3

Zn
71,2
65,8
61,1
67,9

Pb
58,4
21,0
14,0
8,9

ns

x
<0,001

x
<0,05

x
<0,05

Ca
84,6
84,4
84,5
86,0
ns

Cu
21,5
27,2
19,3
12,6
x
<0,001

Zn
63,6
59,0
56,6
55,7
ns

Pb
52,6
17,2
15,3
13,4
x
<0,05

4.2.4 Pigmentos
Assim como ocorrido com a adio de Zn, a adio de Pb ao solo tambm
influenciou os teores dos pigmentos fotossintticos. Observou-se que os teores da clorofila
a, foram influenciados negativamente pela adio de Pb em E. speciosa e S. parahyba
(Figura 15). Os teores de clorofila b tambm reduziram em M. caesalpiniaefolia e E.
57

speciosa. Dessa forma, o contedo total de clorofila diminuiu nas trs espcies estudadas e
o teor de carotenides totais diminuiu em S. parahyba, mas aumentou em E. speciosa.
(A)

(B)
4
6
7
.
0
=
2222
R
;
x
2
2
0
,
0
5
1
,
5
2
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

9
5
6
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
0
,
0
9
7
,
7
4
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

75

35

8
7
7
.
0
=
2222
R
;
x
9
0
0
,
0
8
3
,
9
=
y
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

1
3
9
,
0
=
2222
R
;
x
8
1
0
,
0
4
8
2
,
3
4
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

70

30

65
25

60

((((

aaaa

a
l
i
f
o
r
o
l
C

m
c
g

55
50

))))

))))

m
c
g

2
-

bbbb

((((

2
-

45

a
l
i
f
o
r
o
l
C

40
35

25

1
3
9
,
0
=
2222
R
;
x
5
0
0
,
0
3
7
,
3
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

34

))))

))))
((((

s
i
a
t
o
t
s
e
d
i

n
e
t
o
r
a
C

32
30
28
26
24
22
20

((((

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

b
P
e
d
o

a
t
n
e
c
n
o
C

500

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

s
n
a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

2
-

m
c
g

36

250

1000

))))

1
0
5
,
0
=
2222
R
;
x
3
0
0
,
0
+
5
3
,
2
1
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

22

38

750

(D)

0
1
4
,
0
=
2222
R
;
x
6
0
0
,
0
8
1
,
2
3
=
y

a
i
l
o
f
e
a
i
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

40

500

((((

))))

6
0
9
,
0
=
2222
R
;
x
7
0
0
,
0
5
7
,
7
2
=
y

42

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

1000

6
5
7
,
0
=
2222
R
;
x
2
1
0
,
0
9
8
,
4
3
=
y

a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

(C)

750

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

500

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

250

((((

((((

10

m
c
g

l
a
t
o
t
a
l
i
f
o
r
o
l
C

15

30

2
-

20

20
18
16
14
12
10
0

1000

250

500

750

1000

-3

))))

Concentrao de Pb (mg dm de solo)

Figura 15: Teores de clorofila a (A), clorofila b (B), clorofila total (C) carotenides totais
(D) em g.cm-2 de massa fresca de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, em
resposta ao incremento da concentraode Pb no solo. Anlise de regresso (n=3),
significncia (p<0,05), ns= no significativo e R2= coeficiente de determinao.

58

4.2.5 Atividade da nitrogenase

A adio de Pb reduziu linearmente e fortemente a atividade da enzima nitrogenase
em E. speciosa (Tabela 15). No foi possvel realizar esta anlise na espcie M.
caesalpiniaefolia, uma vez que no se obteve um nmero consistente de indivduos com
ndulos para as anlises.
Tabela 15: Atividade da enzima nitrogenase em moles etileno.g-1.h-1. MF de ndulos em
plantas de E. speciosa em diferentes concentraes de Pb. Anlise de regresso (n=4) e
significncia (p<0,05).

Erythrina speciosa

Concentrao
-3

mg dm de Pb no solo

moles etileno.g

0
250
500
1000

-1

-1

.h . MF ndulo

4,705
0,003
0,006
1,587

4.2.6 Determinaes bioqumicas

Observou-se que o Pb influenciou os parmetros bioqumicos avaliados de maneira

diferenciada nas espcies arbreas estudadas. Em E. speciosa o aumento das concentraes
de Pb influenciou o teor de amnia, havendo um aumento nas concentraes 250 e 500 mg
dm-3 e uma diminuio na concentrao de 1000 mg dm-3. Em M. caesalpineaefolia o Pb
leva reduo no teor de nitrato nas concentraes de 250 e 500 mg dm-3 e aumento na
concentrao de 1000 mg dm-3. J, em S. parahyba houve um aumento no teor de
aminocidos totais, e assim como em M. caesalpineaefolia houve reduo do teor de nitrato
nas concentraes 250 e 500 mg dm-3. Alm disso, na espcie S. parahyba o incremento do

59

Pb no solo aumentou o teor de MDA (peroxidao lipdica) nas folhas, comparado ao

tratamento controle (Figura 16).
(A)

90

4
3

))))

g
m
l
o
m
n

o
t
a
r
t
i
N

((((

))))
((((

9
8
9
,
0
=
2222
R
;
6
3
,
6
8
+
x
6
0
,
0
2222
xxxx
5
-

a
i
n

m
A

0
1
.
9
3
,
6
=
y
a
b
y
h
a
r
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p
.
S

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m
l
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m
n

s
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a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

s
n
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

105

6
1
-

a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

120

4
7
7
,
0
=
2222
R
;
7
1
,
0
+
x
1
0
,
0
+
2222
xxxx
6
0
1
.
4
2
,
8
=
y
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

5
4
7
,
0
=
2222
R
;
5
0
,
3
8
+
x
9
0
,
0
2222
xxxx
5
0
1
.
2
9
,
9
=
y

(B)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

2
1

75
60

30

0
15

-1

1000

))))

))))

13,5
1

12,0

40

))))

g
m
l
o
m
n

60

((((

s
i
a
t
o
T
s
o
d
i
c

o
n
i
m
A

1
7
8
,
0
=
2222
R
;
3
0
,
5
+
x
3
0
,
0
+
2222
xxxx
5
0
1
.
2
1
,
2
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

9
9
9
,
0
=
2222
R
;
8
1
,
2
3
+
x
9
0
,
0
2222
xxxx
4
0
1
.
5
1
,
1
=
y
a
b
y
h
a
r
a
p
.
S

15,0

1000

))))

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

s
n
a
s
o
i
c
e
p
s
.
E

16,5

750

s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

(D)
s
n
a
i
l
o
f
e
a
e
n
i
p
l
a
s
e
a
c
.
M

80

A
D
M

10,5
9,0
7,5

((((

500

((((

(C)

g
m
l
o
m
n

250

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

((((

750

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

500

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

6,0
4,5

20

3,0
1,5
0

1000

200

400

((((

))))

600

800

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

((((

750

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

500

o
l
o
s
e
d
3
m
d
g
m

250

b
P
e
d
o

a
r
t
n
e
c
n
o
C

1000

))))

Figura 16: Teores de amnia (A), nitrato (B), aminocidos totais (C) e MDA (D) em
nmol.mg-1 de massa seca de folhas de E. speciosa, M. caesalpiniaefolia e S. parahyba, em
diferentes concentraes de Pb. Anlise de regresso (n=3), significncia (p<0,05), ns= no
significativo e R2= coeficiente de determinao.

60

4.2.7 Colonizao Micorrzica

Como observado para o Zn, a porcentagem de colonizao diferiu entre as espcies.
Sendo que os valores mdios de colonizao micorrzica foram de 67% em E.
speciosa,42% em M. caesalpiniaefolia e de 50% em S. parahyba. Entretanto, nas diferentes
concentraes de Pb, somente em M. caesalpiniaefolia observou-se diferena entre os
tratamentos, havendo um aumento da colonizao entre as concentraes 250 e 500 mg dm3

, mas reduo na concentrao de 1000 mg dm-3 (Tabela 16).

Tabela 16: Porcentagem de colonizao micorrzica nas espcies E. speciosa, M.

caesalpiniaefolia e S. parahyba, cultivadas em solos com doses crescentes de Pb. Anlise
de regresso (n=3), p= significncia (p<0,05), ns= no significativo e x2= regresso
quadrtica.

Porcentagem de colonizao micorrzica (%)

-3

Concentrao (mg dm )
0
250
500
1000

Erythrina speciosa
64
67
71
68

Mimosa caesalpiniaefolia
39
55
43
30

Regresso
p

ns

x
0,05

61

Schizolobium parahyba
48
50
47
56
ns

5. DISCUSSO

A contaminao de solos com MPs tem se tornado um assunto bastante discutido,

devido ao seu elevado poder de toxicidade e pelo fato de se acumularem na cadeia
alimentar (Sharma & Dubey, 2005a; Almeida, et al., 2007). Dessa forma, o avano nos
estudos que visam melhorar as tecnologias de remediao existentes tem crescido. A
utilizao de plantas como ferramentas para descontaminar o ambiente tem sido comum,
uma vez que a fitorremediao uma tecnologia limpa, barata e eficiente em longo prazo
(Grato et al.,2005).
A germinao de sementes um estdio crtico para a utilizao de plantas com
potencial para a fitorremediao de solos contaminados por MPs, uma vez que esta fase do
desenvolvimento pode ser extremamente vulnervel s condies ambientais. No presente
estudo, verificou-se reduo da germinao de sementes de M. caesalpiniaefolia devido ao
incremento de Zn no solo, isto pode estar relacionado ao fato de o excesso de Zn interferir
no transporte de outros nutrientes para o embrio, gerando disfunes na nutrio mineral,
no balano hdrico entre outros, causados tambm pelo estresse oxidativo, promovido pelo
excesso de radicais livres gerados devido fitotoxicidade causada pelas elevadas
concentraes deste metal (Broadley et al., 2007).
O fato do Pb no ter alterado a germinao das sementes de M. caesalpiniaefolia,
as quais no foram previamente escarificadas, pode ser atribudo presena da testa nas
sementes, visto que esta impede o influxo de Pb que poderia afetar o desenvolvimento do
embrio (Lane & Martin, 1977). Segundo Lane & Martin (1977), em rabanete (Raphanus
sativus), o Pb quando absorvido acumulado na poro distal do cotildone e normalmente
62

no transportado s regies meristemticas da radcula e do hipoctilo. Isto pode ter

ocorrido nas sementes de E. speciosa, que foram escarificadas, visto que o crescimento
inicial da raiz tambm no foi afetado pelo aumento das concentraes de Pb no solo.
Diversos estudos demonstram os efeitos nocivos de MPs no solo s plantas (Robb,
1981; Soares et al. 2001; Singh & Agrawal, 2007). Distrbios no crescimento, como
diminuio na produo de biomassa e reduo da rea foliar, tm sido comumente
observados (Romeiro et al., 2007; Singh & Agrawal, 2007). Neste trabalho tambm houve
efeito nocivo dose MPs sobre o crescimento das mudas das espcies estudadas. Verificouse ainda, que o Zn, afetou o crescimento das plantas de forma mais evidente que o Pb,
principalmente, para a espcie M. caesalpiniaefolia, visto que vrios indivduos no
tratamento com maior concentrao de Zn no solo (600 mg dm-3) no conseguiram
sobreviver. As plantas remanescentes deste tratamento apresentaram sintomas de
fitotoxicidade por Zn como clorose, principalmente nas folhas mais jovens, promovida pela
deficincia induzida de Fe, relacionada a redues na sntese de clorofila e degradao dos
cloroplastos. Esses resultados corroboram os encontrados por Marques et al. (2000),
trabalhando com esta mesma espcie e metal, inferindo que esta espcie sensvel a
concentraes elevadas de Zn no solo.
O Pb afetou de forma diferente o crescimento das espcies estudadas, e, no geral, de
forma menos pronunciada que o Zn. Isto pode ser explicado pelo fato de o Zn ser um metal
essencial s plantas, facilmente absorvido e que tem uma mobilidade entre mdia e alta
dentro da planta, sendo facilmente translocado para a parte area (Kabata-Pendias &
Pendias, 2001). Em contrapartida o Pb um metal no essencial ao desenvolvimento das
plantas que, apesar de ser prontamente absorvido pelas mesmas, fica principalmente retido
63

nas razes, sendo o seu transporte para a parte area bastante limitado (Brennan & Shelley,
1999; Kabata-Pendias & Pendias, 2001). A espcie S. parahyba foi a mais afetada pelo
excesso de Pb no solo e M. caesalpiniaefolia a menos afetada.
Ambos os metais estudados provocaram uma reduo do contedo foliar de
clorofilas a e b, bem como o contedo de carotenides totais, pigmento acessrio na
fotossntese que apresenta efeito fotoprotetor, reduzindo os efeitos nocivos do excesso de
luz no aparelho fotossinttico e evitando assim a danificao das membranas fotossintticas
(Uenojo et al., 2007). Com o incremento de Zn no solo houve drsticas redues nos teores
de clorofila nas folhas das trs espcies estudadas, o que, provavelmente, se deve ao fato de
o Zn influenciar o influxo de Fe afetando a produo de clorofila. Segundo Kabata-Pendias
& Pendias (2001), altas concentraes de Zn no solo diminuem a concentrao de Fe nas
plantas induzindo sua deficincia. Ambos so metais de transio e os possveis
mecanismos desse antagonismo so a competio entre Zn2+ e Fe2+ nos processos de
absoro, e a interferncia nos processos de quelao, durante a absoro e translocao de
Fe das razes para a parte area. Alm disso, o Fe diminui a absoro do Zn e a toxicidade
do Zn que foi absorvido.

Isto foi observado em M. caesalpiniaefolia visto que o

incremento de Zn ao solo reduziu a concentrao de Fe nas folhas (Tabela 2), o que pode
explicar a clorose observada nas folhas dessa espcie. Rai et al. (2004), observaram que o
excesso de Cr, que assim como o Zn um metal de transio e um micronutriente para as
plantas, reduziu o contedo foliar de clorofilas a e b, clorofila total e carotenides totais em
manjerico (Ocimum tenuiflorum).
A associao entre plantas e microrganismos do solo um fator importante para o
desenvolvimento vegetal, principalmente no que diz respeito aos benefcios relacionados
64

FBN e a associao com FMAs (Giller et al., 2009; Barea et al., 2005). Os MPs podem
prejudicar essas associaes simbiticas e afetar o adequado desenvolvimento das plantas
hospedeira (Sudov & Vostka 2007). Em alguns casos, a microbiota associada como os
FMAs pode contribuir para a tolerncia das plantas aos MPs (Barea et al., 1987; Andrade et
al., 2004; Hildebrandt, et al., 2007; Andrade et al., 2009). Entretanto, quando a
concentrao de MPs muito elevada esse efeito protetor da simbiose diminui, sendo que o
estabelecimento da associao pode ser prejudicado (Sudov & Vostka 2007; Jankonga &
Visoottiviseth 2008).
Com relao nodulao e FBN, foi verificado que enquanto a massa dos ndulos
foi reduzida com o aumento das concentraes de MPs, como tambm observado por
Almeida et al., (2008), a atividade especfica da nitrogenase no foi influenciada
significativamente pelo aumento da concentrao de Zn no solo.
A colonizao das razes por FMAs aumentou nos tratamentos com maior adio de
Zn em M. caesalpiniaefolia e este aumento pode ter favorecido a FBN nessa espcie, uma
vez que a atividade especfica da nitrogenase no foi influenciada pelo aumento do Zn no
solo. Alm disso, Redecker, et al.(1997), trabalhando com alfafa, observaram que os
rizbios so altamente sensveis ao Zn. Dessa forma, a inexistncia de alterao na
atividade da nitrogenase nos tratamentos com Zn e, ao mesmo tempo, o aumento da
colonizao micorrzica com o aumento das adies do metal, podem estar relacionados a
um efeito benfico da interao entre FMAs e rizbios.
Diversos estudos comprovam o efeito benfico dos FMAs na fixao biolgica de
nitrognio, contribuindo para o suprimento de nutrientes, principalmente o P (Barea et al.,
1987; Azcn, et al.,1991; Redecker, et al.,1997).
65

Verifica-se que a concentrao de P na raiz de M. caesalpiniaefolia aumentou com

as adies de Zn ao solo o pode confirmar o observado por Redecker, et al.(1997), com
relao ao P.
Entretanto, no se pode confirmar, a partir dos resultados obtidos, o efeito benfico
direto dos FMAs, uma vez que o mesmo somente foi observado sobre a atividade da
nitrogenase (FBN) na espcie M. caesalpiniaefolia e tambm porque no foi observada
maior tolerncia ao Pb e ao Zn nas outras espcies, que tambm tiveram aumento da
colonizao micorrzica. Alm disso, todos os tratamentos receberam inculo micorrzico,
no havendo tratamento controle com ausncia de FMAs que comprove o efeito ou no
destes fungos simbiticos na tolerncia das plantas aos MPs.
Verifica-se que as mudas das trs espcies estudadas conseguiram extrair os metais
Pb e Zn do solo e concentrar nos rgos analisados: raiz, caule e folhas. E verifica-se que a
distribuio de Zn nas plantas seguiu o padro raiz>folhas caule.Apesar das concentraes
de metais consideradas txicas nos tecidos vegetais serem bastante desconhecidas no caso
de plantas arbreas das regies tropicais, podem ser encontrados na literatura alguns
valores orientadores sobre os concentraes consideradas fitotxicas (Kabata-Pendias &
Pendias, 2001). No caso dos MPs estudados, estes autores sugerem que concentraes na
planta entre 100 e 400, e, entre 30 e 300 mg.kg-1 de matria seca de tecido da parte area
para o Zn e Pb, respectivamente, so txicas. A maior parte do Zn e Pb absorvidos pelas
plantas, ficaram retidos nas razes, sendo que as espcies retiveram concentraes
superiores a 1000 mg.kg-1 de Zn mesmo nas baixas concentraes desse metal no solo e
superiores 300 mg.kg-1 de Pb nas razes dos tratamentos de maior concentrao de Pb no
solo. Esse fato mostra o papel da raiz como uma barreira ao transporte de metais para a
66

parte area, contribuindo na tolerncia destas plantas aos metais estudados, uma vez que
apesar dos efeitos nocivos causados pelo excesso dos metais Zn e Pb, a maior parte das
mudas conseguiu se desenvolver. Alm disso, as concentraes destes metais nas razes
atingiram nveis elevados e superiores aos considerados txicos para parte area (KabataPendias & Pendias, 2001). Pulford & Watson (2003) descrevem o fato de as espcies
arbreas normalmente reterem a maior parte dos MPs absorvidos do solo em suas razes,
evitando ou reduzindo o transporte para a parte area, o que tambm considerado um
mecanismo de tolerncia, e um mecanismo de fitorremediao, a fitoestabilizao.
Com relao concentrao desses metais nas folhas, observa-se que para o solo
contaminado com Zn, as trs espcies apresentaram nveis considerados txicos, e com o
aumento da concentrao de Zn no solo, houve aumento da concentrao do metal nas
folhas chegando at 700 mg.kg-1, no tratamento de 400 mg.dm-3 de Zn no solo na espcie
M. caesapiniaefolia. No entanto, nas mudas da espcie S. parahyba as concentraes
foliares de Zn no variaram com a adio doses crescentes de Zn no solo, estando em
aproximadamente 400 mg.kg-1. Essa espcie apresentou elevados nveis de Zn nas razes,
em relao s demais, que agiu como uma barreira entrada do metal.
Caires (2005), trabalhando com mudas de ip-roxo (Tabebuia impetiginosa) e
cedro-rosa (Cedrela fissilis) crescendo em solo contaminado com Cu e Zn, verificou que o
Zn ficou retido em sua maior parte nas razes, entretanto as duas espcies estudadas
conseguiram transportar grandes quantidades dos metais para a parte area. Cupertino
(2006), estudando os efeitos dos metais Al, Ni, Cd e Zn em soluo nutritiva com
seringueira (Hevea brasiliensis), tambm verificou que a maior parte do Zn ficou retido na
raiz, e neste caso, a planta se mostrou bastante sensvel s concentraes aplicadas (0, 250,
67

380, 510 mol.L-1), apresentado sintomas de fitotoxidade tais como clorose, murchamento
e necrose dos tecidos.
No experimento com Pb, tambm verificou-se aumento das concentraes deste
metal nas folhas conforme o aumento das concentraes de Pb no solo. Entretanto,
observou-se que somente E. speciosa e S. parahyba apresentaram concentraes
consideradas txicas nas folhas. Em M. caesapiniaefolia os valores encontrados ficaram
abaixo de 30 mg.kg-1, considerados no txicos s plantas. No entanto, essa espcie foi
bastante sensvel s elevadas adies de Zn ao solo, sendo fitotxica, portanto, a
concentrao de 30 mg.kg-1 para essa espcie.
As concentraes de Pb e Zn encontradas no caule esto na faixa de toxicidade,
acima de 30 e 100 mg.kg-1 para o Pb e Zn respectivamente, nas espcies avaliadas. O que
tambm demonstra o efeito barreira efetuado pela raiz, no permitindo o translocamento do
Pb para a parte area.
sabido que o Pb e o Zn podem promover distrbios fisiolgicos e nutricionais nas
plantas (Briat & Lebrun, 1999;Seregin & Ivanov, 2001). Apesar de, em todas as espcies
estudadas, a maior parte do Zn absorvido ter ficado retido nas razes, como descrito por
Kabata-Pendias & Pendias (2001), a fitotoxicidade do Zn e Pb foi observada
principalmente na parte area das plantas, uma vez quem os nveis foliares tambm foram
fitotxicos.
O ndice de translocao (IT) de um determinado elemento indica o transporte desse
elemento do lugar onde ele absorvido parte area ou s folhas, ou seja, o quanto do total
absorvido pela planta que transferido para a parte area da planta (Abichequer e Bohnen,
1998). Verifica-se que quanto maior a concentrao dos metais Zn e Pb no solo, menor o
68

ndice de translocao, ou seja quanto maior a concentrao no solo menor foi o transporte
proporcional para a parte area.
Tanto a adio de Zn quanto a adio de Pb ao solo influenciaram o acmulo de
determinados minerais nos diferentes rgos das plantas e tambm interferiram no ndice de
translocao dos mesmos, como observado em outros estudos (White et al., 1979; KabataPendias & Pendias 2001). Possivelmente as diferenas observadas nas concentraes dos
minerais, nas diferentes partes das plantas, esto envolvidas nos distrbios de crescimento
verificados.
Paiva et al. (2002), trabalhando com mudas de cedro (Cedrela fissilis) e ip-rxo
(Tabebuia impetiginosa), sob altas concentraes de Pb em soluo hidropnica,
observaram aumento no IT de Zn para a primeira espcie, assim como aqui observado para
as mudas da espcie E. speciosa. Entretanto, esses autores observaram reduo no IT de S
nas mudas de cedro, o que tambm observou-se em E. speciosa. Paiva et al. (2002),
tambm verificaram reduo do IT de Cu, Zn e Fe em mudas de ip-roxo, como encontrado
em M. caesalpiniaefolia, e reduo de K em mudas de cedro, como ocorreu em S.
parahyba. Esses autores verificaram tambm aumento no IT de Mn em cedro, como
observado em M. caesalpiniaefolia.
Vrios trabalhos relatam o aumento no teor de aminocidos livres em diferentes
tecidos vegetais em resposta ao estresse causado por MPs (Sharma & Dietz, 2006; Oliva et
al., 2009). Em alguns casos esse aumento visto como um mecanismo de defesa da planta,
principalmente quando os aminocidos envolvidos so a prolina (Sharma & Dietz, 2006;
Tripathi & Gaur 2004), a histidina (Callahan et al., 2006) e a asparagina (Lea et al., 2007;
Andrade et al., 2009), j que estes aminocidos podem agir como quelantes de alguns
69

metais, como Cu e Zn, e como molculas com propriedades antioxidantes (Sharma & Dietz,
2006). No geral, esses aminocidos livres podem atuar tambm como osmlitos mantendo
o equilbrio osmtico dentro da clula (Matysik et al., 2002; Lea et al., 2007). A adio de
Zn ao solo aumentou a concentrao de aminocidos totais livres nas folhas de E. speciosa
e M. caesalpiniaefolia, o que tambm foi observado em S. parahyba com o aumento da
concentrao de Pb no solo. O malondialdedo (MDA) um dos produtos resultantes da
peroxidao lipdica das membranas celulares e usado freqentemente como indicador de
estresse oxidativo (Rai et al. 2004; Sharma & Dietz 2006). Tanto o Pb quanto o Zn so
indutores potenciais de estresse oxidativo nas clulas vegetais, provavelmente pela gerao
de radicais livres (Alia et al., 1994; Sharma & Dietz 2006). Na espcie S. parahyba, o
aumento desses metais no solo causou peroxidao lipdica. Entretanto, as espcies M.
caesalpiniaefolia e E. speciosa apresentaram um sistema antioxidante eficiente no controle
de radicais livres, no se observando indicao de peroxidao lipdica.
O excesso de Pb e Zn no solo, tambm alterou os nveis de nitrato nas folhas de M.
caesalpiniaefolia e E. speciosa. Alm disso, observou-se aumento na concentrao de
amnia no interior das clulas foliares de E. speciosa. O aumento de nitrato pode estar
relacionado tanto s perturbaes no metabolismo de nitrognio como interferncia de
metais sobre enzimas como a redutase do nitrato (Mazzafera, 1998). A amnia um
produto do metabolismo que pode se tornar txico quando acumulado em altas
concentraes (Sharma & Dubey, 2005b) e, ao mesmo tempo, fonte imediata de
nitrognio nas clulas vegetais (Britto & Kronzucker, 2002). O metabolismo do nitrognio
na espcie E. speciosa tambm pode ter sido afetado pelo aumento do Pb no solo, uma vez
que houve reduo tanto a atividade da nitrogenase e na massa de ndulos. Estes resultados
70

evidenciam o efeito txico destes metais em alguns dos processos fisiolgicos das espcies
estudadas.
Neste trabalho utilizaram-se mudas de espcies arbreas que diferem das rvores
maduras de vrias maneiras, como na alocao de carbono, na frao de tecidos
fotossinteticamente inativos (Turner, 1994). Alm disso, as mudas so mais sensveis s
condies adversas, o que pode levar a falsa indicao da capacidade de acumulao de
plantas maduras. No entanto, a resposta de mudas expostas a solos contaminados com MPs
continua sendo a forma mais comum de avaliao da capacidade de diferentes espcies de
tolerar e sobreviver ao estresse (Pulford & Watson, 2003). Alm disso, Punshon &
Dickinson (1997) mostraram que a tolerncia aos metais pesados por diferentes clones do
gnero Salix (salgueiro) pode ser aumentada com a aclimatao gradual das rvores
mantidas sob o estresse induzido pelo metal, no solo contaminado. Por isso, importante
observar que neste trabalho, os efeitos do excesso de MPs no solo foram observados na fase
de formao de mudas. O mesmo experimento realizado a partir de mudas j formadas,
possivelmente revelaria resultados diferentes no que se refere ao potencial fitorremediador
destas espcies de leguminosa arbreas.
A partir das variveis analisadas, observou-se que de forma geral, os metais
adicionados afetaram o crescimento de todas as espcies estudadas. Alm disso, os MPs
acumularam-se principalmente nas razes. No entanto, estes elementos foram translocados
para a parte area, acumulando-se em concentraes consideradas fitotxicas. O excesso de
metais no solo influenciou a concentrao e ndices de translocao de vrios elementos
essenciais. Isto pode ter contribudo para o desequilbrio nutricional causando distrbios
metablicos que refletiram negativamente no crescimento.
71

O fato de as espcies arbreas analisadas serem espcies de leguminosas de

crescimento rpido, fcil propagao e sistema radicular extenso, aliado ao fato de
conseguirem absorver e concentrar os metais pesados Pb e Zn em quantidades consideradas
txicas em suas razes, sugere que podem ser potenciais plantas fitoestabilizadoras de solos
moderadamente contaminados.

72

6. CONCLUSO

As espcies arbreas analisadas podem ser potenciais plantas fitoestabilizadoras de

solos contaminados com os MPs Pb e Zn, sendo que, para o Pb a espcie mais tolerante
M. caesalpiniaefolia e para o Zn a E. speciosa.

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