UNIDAD DE PATOLOGIA CLINICALaboratorio de Citometria de Flujo La Citometria de Flujo (CMF) es un método de anilisis celular multiparamétrico que permite la medicién rapida de ciertas carac- teristicas fisicas y quimicas de células o particulas suspendidas en liquido que producen una sefal de forma individual al inferir en una fuente de luz. El impacto de cada célula con el rayo de luz produce sefiales que corresponden a diferentes parametros de la célula y que son recogidos por distintos detectores. Estos convierten dichas sefiales en sefiales electrénicas que posteriormente seran digitaliza- das para permitir la medida simultanea de varios parametros en una misma célula. Una de las caracteristicas analiticas mas importantes de los citometros de flujo en su capacidad de medir multiples parametros celulares, como el tamafio, forma y complejidad y por supuesto, cualquier componente celular o funcién que pueda ser marcada con un fluorocromo. Las aplicaciones mas relevantes de la citometria de flujo en la practica médica se relacionan con la hematologia e inmu- nologia clinicas, midiendo parametros como nimeros y clasifi- cacion de células sanguineas. Esta técnica es empleada también en el conteo de subpobla- ciones de linfocitos en pacientes con el virus de la inmunodefi- ciencia humana, asi como la caracterizacion de leucemias agudas ysindromes linfoproliferativos crénicos, entre otros padecimientos. En el momento de realizar las mediciones en el citometro de flujo, las células pueden estar vivas 0 fijadas, pero obligadamente en LA EXCELENCIA EN LA CALIDAD ES NUESTRA METAab 10) Total suspension celular y en forma de célula Gnica. Al obligarlas a pasar alineadas una a una frente a un haz laser mediante un flujo con- tinuo, cada célula, a la vez que dispersa la luz, emite luz fluorescente como consecuencia de la excitacién laser a la que es sometida. Los parametros que tipicamente se miden de forma simulténea por cada célula son: 1. Dispersi6n frontal de la luz a 2° (forward scatter), valor proporcional al tamano celular. 2. Dispersion de la luz ortogonal (side scatter), propor cional a la cantidad de estructuras granulares 0 complejidad de la célula. 3. Intensidades de fluorescencia a diferentes longuitudes de onda. Los cit6metros de flujo estan formados por complejos sistemas fluidicos, Optica laser, detectores electrénicos, convertidores analdgico-digitales y digitales, y computadoras. Los sistemas 6pti- cos permiten el enfoque laser en un haz con un didmetro reducido para impactar sobre el menor ndmero de particulas posibles simul- taneamente. El sistema fluidico permite un enfoque hidrodinamico del flujo celular hasta conseguir el alineamiento de las particulas o células, y en los separadores celulares o “cell sosters”, se produce una rotura del flujo en gotas de tamafo uniforme para con- seguir la separacién de células individuales. El sistema elec- trénico se encarga de la cuantificaci6n de los destellos de fluo- rescencia y de la luz dispersada y bajo el control de la com- putadora, se consigue la carga electronica de las gotas que Aniversario ~contienen las células de intéres para poder someterlas a defleccion y recogerlas en tubos especificos para tal fin, o sobre pocillos de cultivo de tejidos. La computadora permite almacenar datos de miles de células por cada muestra y representar los resultados graficamente. mel | Apl as @ Inmunofenotipajes celulares: hasta 7 anticuerpos, ademas del ciclo celular y viabilidad. @ Ciclo celular en células fijadas o vivas, con Yoduro de Propidio. @ Estudios cinéticos de funcionalidad celular. @ Analisis Multiparamétricos funcionales y de expresiOn génica (GFP o antigenos de superficie). @ Analisis de moléculas en disoluci6n mediante bolas (Analisis Multiplexado). @ Separaciones celulares de alta velocidad con la posibilidad de usar cualquiera de los 16 modos de separacién LA EXCELENCIA EN LA CALIDAD ES NUESTRA METAPRUEBAS QUE REALIZAMOS EN ESTE LABORATORIO: ODIGO el Liao] te Sanu) [ey 1284 Analisis de DNA, contenido celular 1146 Anticuerpos Anti-plaquetas 512 Antiseno HLA-B27 1063 Células CD4 CD8 454 Células tronco asesinas naturales (NK/CD56) 1667 Células tronco (CD34) 1836 Enfermedad minima residual 1671 Hemoglobinuria paroxistica nocturnal 986 Inmunofenotipo de leucemia 317 Reticulocitos 522 Subpoblaci6n de Linfocitos AniversarioUNIDAD DE PATOLOGIA CLINICA UNIDAD DE PATOLOGIA CLINICA LABORATORIOS CENTRALES: AV. MEXICO 2341 C. P. 44650 ¢ GUADALAJARA, JAL., MEXICO TELS. (33) 3669 - 0310 CON 30 LINEAS. SERVICIO DE REFERENCIA (33) 3669 - 0314 FAX. (33) 3669 - 0311 © 3669 - 0312 * 3669 - 0313 www.upe.com.mx * E-mail: lab@upe.com.mx LADA SIN COSTO 01 - 800 - 364 - 6200 Aniversario