GRADO DE MEDICINA

PRCTICAS DE HISTOLOGIA HUMANA

1 PRCTICA

TCNICA DEL P.A.S: cido perydico- reactivo de Schiff (fucsina bsica)

La reaccin del P.A.S tie:

- Carbohidratos ( Polisacridos y GAG)
- Molculas con abundancia de carbohidratos (glucoproteinas , mucina y glucolpidos)

Permite detectar:
- Glucgeno en las clulas.
- Moco en varios tipos de clulas y tejidos.
- La membrana basal que se encuentra debajo de los epitelios.
- Fibras reticulares del tejido conjuntivo.

Son P.A.S positivas:

- Depsitos de glucgeno, celulosa, etc.
- Glndulas productoras de mucina.
- Hipfisis (FSH, LH, TSH)
- Membrana basal y lmina externa.
- Fibras de reticulita.
- Glucocliz
- Tiroglobulina...

Fundamentos:
- Los anillos de hexosas de los carbohidratos poseen carbonos adyacentes, cada uno de
ellos con un grupo hidroxilo (-OH).
- Las hexosaminas de los glucosaminoglucanos tambin poseen carbonos adyacentes
con alternancia de grupos hidroxilo (-OH) y grupos amino (-NH2)
- El cido peridico rompe la unin entre estos tomos de carbono adyacentes y forma
grupos aldehdo.
- El reactivo de Schiff reacciona con estos grupos aldehdo para dar un color prpuramagenta.

PROTOCOLO:
La muestra se encuentra desparafinada y rehidratada.
PASO1:
Sacar la cuna con la muestra por la anilla y drenar el exceso de agua (agua1)
PASO2:
Sumergir la cuna en la solucin con cido Peridico durante 5 minutos.
Drenar el exceso de solucin.
Paso3:
Con objeto de eliminar la solucin anterior lavar durante inmersiones rpidas y
sucesivas en agua (agua2).
Paso4:
Tomar la muestra con las pinzas y drenar el exceso de agua.
Sumergir la muestra en la solucin del reactivo de Schiff durante 20 minutos.
Drenar el exceso de solucin.
PASO5:
Sumergir la muestra en agua (agua3) durante 5 minutos para eliminar el reactivo
anterior.
PASO6:
Sumergir en hematoxilina y drenar el exceso de solucin.
La finalidad es teir los ncleos celulares de azul oscuro.
PASO7:
Sumergir la muestra en agua (agua4) durante 5 minutos para eliminar el reactivo
anterior.
PASO8:
Deshidratar la muestra hacindola pasar por una batera de vasos con alcoholes de
graduacin ascendente, mecindola suavemente en cada alcohol y finalizando en el vaso
con xileno.
PASO9:
Cubrir la muestra con resina y un cubreobjeto de cristal.
Observar al microscopio.