Determinacin del fsforo aprovechable para suelos neutros y alcalinos se realizar a travs del

mtodo AS-10, por el procedimiento de Olsen modificado

Principio y aplicacin
Este mtodo, es ampliamente utilizado en estudios de fertilidad de suelos para la determinacin de
fsforo disponible tanto en suelos neutros como alcalinos. El fsforo determinado con este
procedimiento ha mostrado una estrecha relacin con la respuesta de los cultivos. El fsforo es
extrado del suelo con una solucin de NaHCO3 0.5 M ajustada a un pH de 8.5. En suelos neutros,
calcreos o alcalinos, conteniendo fosfatos de calcio, este extractante disminuye la concentracin
de Ca en solucin a travs de una precipitacin del CaCO3, por tanto la concentracin de P en
solucin se incrementa. En suelos cidos conteniendo fosfatos de Al y Fe tales como la variscita y
estrengita, la concentracin de P en solucin, se incrementa conforme el pH se eleva. Este
extractante evita que se presenten reacciones secundarias en suelos cidos y calcreos debido a
que el nivel de Al, Ca y Fe se mantiene muy bajo en dicha solucin.

Reactivos

Reactivo A: solucin de bicarbonato sdico (CO3HNa) 0.5 M, contiene 42 g/l de la sal. Ajustar
el pH de esta solucin a 8.5 con hidrxido sdico (NaOH) 1 M (40 g/l). Ensayar si contiene
fsforo segn el procedimiento que se describe ms abajo, desechndola en caso positivo.
Almacenar en envase de polietileno y comprobar el pH de la solucin semanalmente. El
bicarbonato sdico provoca la dispersin de partculas coloidales, que pueden provocar una
dispersin selectiva de la luz visible y la aparicin de color en el lquido, interfiriendo en la
determinacin colorimtrica del fsforo.
Reactivo B: solucin de molibdato amnico (Mo7O24(NH4)64H2O). Disolver 15 g de
molibdato amnico en 300 ml de agua destilada templada. Filtrar la mezcla si fuera
necesario (si aparece en superficie una sustancia blanca) y dejar enfriar. A continuacin
aadir 342 ml de HCL concentrado poco a poco y mezclando conforme se agrega. Diluir
hasta 1 litro con agua. Esta solucin contiene exceso de HCl para neutralizar el bicarbonato
sdico contenido en el extracto.
Reactivo C: solucin concentrada de Cloruro estanoso (Cl2Sn2H2O). Disolver 10 g de
Cloruro estanoso en 25 ml de HCl concentrado. Preparar solucin nueva, al menos, cada dos
meses. Utilizar cristales grandes de la sal mejor que polvo fino. Conserva la solucin en
atmsfera de hidrgeno generada por cinc y HCl, o en un refrigerador.
Reactivo D: solucin diluda del Cloruro estannoso. Aadir 0.5 ml de reactivo C a 66 ml de
agua. Preparar esta solucin para cada serie de determinaciones.
Solucin patrn de 100 ppm de fsforo. Pesar 0.4392 g de PO4H2K. Verter en un matraz
aforado de 1 litro y disolver en agua destilada. Diluir la solucin hasta 1 litro. Aadir 5 gotas
de tolueno para disminuir la actividad microbiana. Este patrn lo hacemos para obtener
posteriormente el de 2 ppm de fsforo.
Solucin patrn de 2 ppm de fsforo. Diluir 20 ml de la anterior hasta 1 litro con agua.

Procedimiento

Pesar 2.5 g de suelo previamente tamizado por malla de 2 mm y colocarlos en matraz Erlenmeyer
de 125 ml
2. Adicionar 15 ml de la solucin A tapar y agitar la suspensin en agitador de accin recproca
durante 30 min. a 180 oscilaciones por minuto.
3. Filtrar inmediatamente a travs de papel filtro
4. Preparar blancos a partir de alcuotas de solucin extractora y adicionando todos los reactivos
como en las muestras.
5. Tomar una alcuota de 5 ml (o 10 ml si la concentracin de P es muy baja) del filtrado y colocarla
en un matraz aforado de 50 ml.
6. Agregar 10 ml de la solucin B, agitar y llevar a un volumen aproximado de 45 ml, agregar despus
1 ml de la solucin D y aforar, esperar a que el color azul se desarrolle guardando las muestras en
un lugar oscuro. Leer despus de 30 min. pero antes de una hora a una longitud de onda 882 nm
(leer previamente la curva de calibracin).

Preparacin de curva de calibracin

1

En 9 matraces aforados de 25 ml poner las siguientes alcuotas de la solucin patrn de 2

ppm: 0-1-3-5-7.5-10-15-20-25 ml en matraces aforados de 50 ml. Las concentraciones en
fsforo de la curva de trabajo propuesta son las siguientes: 0-0.04- 0.12-0.20-0.30-0.400.60-0.80-1 ppm.
Agregar 10 ml del reactivo A y a continuacin 10 ml del reactivo B agitar y llevar a un
volumen aproximado de 45 ml, agregar despus 1 ml de la solucin D, aforar y agitar,
esperar a que el color azul se desarrolle guardando las muestras en un lugar oscuro. Leer
despus de 30 min. pero antes de una hora a una longitud de onda 882 nm

Clculos
( 1 ) =

P (mg Kg-1 de suelo) = CC x Vi/p x Vf/a

Donde:
CC= mg/L de P en la solucin. Se obtiene graficando la curva de calibracin (absorbancia contra
mg/L) e interpolando en la misma los valores de absorbancia de las muestras analizadas a las cuales

previamente se les ha estado el valor promedio de los blancos o por medio de una regresin simple.
Vi= volumen de la solucin extractora adicionada.
p= peso de la muestra de suelo seca al aire.
Vf= volumen final de la solucin colorimtrica a leer.
a= alcuota de la muestra empleada para la cuantificacin.