VALTEK S.A.

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Santiago CHILE


GLUCOSA HEXOQUINASA
Reactivo nico para la determinacin enzimtica de Glucosa en suero,
plasma y otros fluidos biolgicos.

Para uso en el diagnstico in Vitro.

SIGNIFICANCIA CLINICA

La medicin de la Glucosa sangunea es importante en el
diagnostico y tratamiento de la diabetes y otras patologas, tales
como hipoglicemia y problemas renales, entre otras.
E-mail: info@valtek.cl WEB site: http://www.valtekdiagnostics.com - REV N 2


FUNDAMENTOS DEL METODO

La glucosa reacciona con el reactivo enzimtico que contiene
una mezcla de las enzimas Hexoquinasa (HK) y Glucosa-6-
Fosfato-deshidrogenasa.En la primera etapa la Glucosa
reacciona con el ATP para formar Glucosa-6-fosfato y ADP, En
presencia de NAD, la enzima glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa
oxida la glucosa-6-fosfato a 6-fosfogluconato., aumentando la
concentracin de NADH en cantidad proporcional a la cantidad
de Glucosa presente en la muestra.

D-Glucosa +ATP
HK
G-6-P +ADP

G-6-P +NAD
G6PDH
6-fosfogluconato +NADH

REACTIVOS

Conservado entre 2 y 8C., estable hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta. Estabilidad de la solucin reconstituida:
30 das entre 2 y 8C. Descartar el reactivo si su absorbancia a
340 nm. contra blanco de agua es mayor que 0.300 D.O.

Componentes del reactivo enzimtico
( concentraciones al reconstituir ) :

Buffer pH 7.5 100 mM
Glucosa Hexoquinasa >1U/ml
Glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa >1U/ml
ATP 1 nM
NAD 1 mM
Estabilizante y preservantes c.s.

Solucin Standard
D-Glucosa 100 mg/dl

MUESTRAS

La muestra a utilizar puede ser tanto suero como plasma, lquido
cerebro espinal, orina y otros fluidos biolgicos. La muestra debe
tomarse con el paciente en ayunas.
Separar el suero o plasma a la brevedad posible de las clulas
para evitar una disminucin de la glucosa debido a la gliclisis.
En caso de utilizar plasma, utilizar como anticoagulante fluoruro
de sodio que acta como inhibidor de la gliclisis. La glucosa es
estable en suero o plasma 5 horas a 30C y 24 horas a 4C.
Para perodos mas prolongados, congelar a -20C.


EQUIPO REQUERIDO

Espectrofotmetro o fotocolormetro de filtros capaz de medir
absorbancia a 340 nm, bao termoregulado, timer y pipetas.





TECNICA

Llevar el reactivo a la temperatura que se realizar el ensayo.

Blanco Standard Desconocido
Muestra (ml) -- -- 0.005
Standard (ml) -- 0.005 --
Reactivo (ml) 1.0 1.0 1.0
Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (20 a
25C.), o 3 minutos a 37C. Leer las absorbancias llevando a
cero el espectrofotmetro con el blanco de reactivo.

Adaptaciones para la aplicacin de este reactivo en
autoanalizadores estn disponibles a solicitud. Es
responsabilidad del laboratorio validar esta aplicacin.


CALCULOS

FACTOR = 100 .
Absorbancia Standard
Glucosa (mg/dl) =Factor x Absorbancia desconocido

ADVERTENCIA:

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros
controles valorados. VALTROL-N (cdigo 210-100) y
VALTROL-P (cdigo 210-110).
La calibracin con el Standard acuoso puede dar lugar a
errores sistemticos en mtodos automticos. En este
caso, se recomienda utilizar un calibrador srico VALTROL-
C (cdigo 210-130).
En el caso de sueros hiperlipmicos, deber hacerse un
blanco muestra con suero fisiolgico para eliminar la
posible interferencia por la turbidez del suero.
En caso de utilizar orina, esta se procesa igual que el
suero.
Este reactivo contiene Azida de Sodio como preservante.
No ingerir. Puede reaccionar con tuberas de cobre o
plomo, elimine los residuos con gran cantidad de agua.


ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO:

-Linealidad: hasta 600 mg/dl.
Para valores superiores a 600 mg/dl, diluir la muestra con suero
fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de
dilucin.

-Lmite de deteccin: 2,0 mg/dl.

-Interferencias: Hemoglobina sobre 0,3 gr/dl, bilirrubina sobre 10
mg/dl y la lipemia podran interferir en la tcnica. Otros
medicamentos y sustancias podran interferir (4).

-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias
sistemticas significativas cuando se comparan con otros
reactivos comerciales. Los detalles del estudio comparativo
estn disponibles bajo solicitud.

-Repetibilidad intraserie: n=20

Nivel Media (mg/dl) C.V.
Normal 93,7 0,62%
Patolgico 229,4 0,65%





-Reproducibilidad interserie: n=20

Nivel Media (mg/dl) C.V.
Normal 89,8 1,43%
Patolgico 195,9 1,53%


Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador. Los
resultados pueden variar al cambiar de instrumento o al realizar
el procedimiento manualmente.

- Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud

RANGO DE REFERENCIA

60 a 110 mg/dl

BIBLIOGRAFIA

1. Cooper, G.R., CRC Crit. Rev. Clin. Lab. Sci, 4(101), 1973.
2. Henry, R.J ., Clinical Chemistry, Principles and Technics.
Harper and Row Publishers. New York, 1964.
3. Young D.S., et al., Clin Chem. 18(10) 1972.
4. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests,
4
th
ed. AACC Press,1995.