DE CINCIAS VETERINRIAS RPCV (2001) 96 (539) 145-148 Padres de distribuio e mtodos de identificao de cios em vacas de corte submetidas a sincronizao com progestagneo/prostaglandina e monta natural Methods of estrus identification and distribution patterns in beef cows submitted to synchronization of estrus with progestagen/prostaglandin treatment and natural mating Horn 1 , M.M., Galina 2 , C.S., Moraes 3 , J.C.F. 1 Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brasil; 2 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia Universidad Nacional Autnoma do Mxico, DF, Mxico; 3 Embrapa Pecuria Sul, Bag, RS, Brasil. Resumo: Este estudo teve como objetivo verificar a distribui- o e a preciso da identificao de cios aps sincronizao escalonada de cios em vacas de corte. A hiptese testada foi de que os touros poderiam identificar com maior eficcia as fmeas em cio, o que poderia contribuir para a reduo do erro na identificao de cio apenas pelo comportamento homossexual. Foi constatado que mesmo em presena de touros, a distribuio esperada diria de cios em sistemas de sincronizao escalonada maior nos primeiros dias de servio, reiterando aspectos relativos bioestimulao na conduta sexual. Adicionalmente, foi verificado que os touros identifi- cam frequncias distintas de vacas em cio em sistemas de sincronizao escalonada de cios. Os resultados sugerem a necessidade de averiguar o momento e a efetiva taxa de ovu- lao das vacas includas nestes sistemas de sincronizao de cios. Summary: The objective was to evaluate the distribution and acuracy of oestrus identification in beef cows following synchronisation programmed to display behavioural oestrus at alternate days. The hypothesis to be tested was that bulls could be more efficient to detect cows in oestrus and therefore reducing the error on oestrous detection based only on homo- sexual activity. It was found that, even with the presence of bulls, the daily distribution of cows was skewed for the first three days of the trials suggesting bioestimulatory effects on the cows. Additionally, it was confirmed that bulls vary in their patterns to identify cows in oestrus under the scheme of alternating cows. Results suggest the need to further investi- gate the accuracy of oestrous detection based on the time of ovulation to determine the true moment of oestrus in synchronised cows. interferir na freqncia de estros detectados; ou seja, uma vaca em cio interage com outras fora de cio, o que pode favorecer uma maior manifestao de cios no rebanho. Adicionalmente Orihuela et al. (5) de- monstraram que a eficincia na deteco de cios diminui em grupos com menos de 20 animais. As- sim, pode-se inferir tambm, que o tamanho do reba- nho pode afetar o tipo de interao entre os animais modificando a distribuio dos cios. Medrano et al. (6) observaram que em sincronizaes escalonadas de uma fmea por dia, o cio tende a manifestar-se de maneira conjunta, ilustrando que a resposta individual ao cio em grupos pequenos me- nos eficaz do que em grupos maiores (2) . Em grupos pequenos, apenas 40% das vacas manifestam sinais de estro dentro do perodo esperado de 31 a 57 horas, o que sugere a necessidade da participao de maior nmero de animais em cio para uma identificao mais eficaz da expresso da conduta estral (5) . Por outro lado, quando a sincronizao de cios re- alizada na presena de touros, estes podem restringir a formao de grupos homossexuais, ou seja, muitas fmeas so montadas pelo macho e no por uma de suas companheiras do rebanho (7, 8) . Este fato, teorica- mente, reduziria a possibilidade de montas em vacas que no esto efetivamente em cio naquele momento. Neste sentido, a hiptese testada neste estudo foi de que os touros poderiam identificar com maior facili- dade as fmeas realmente em cio, reduzindo o erro na identificao de vacas que se deixam montar por outras sem estar em cio. O objetivo deste estudo foi o de verificar a distri- buio e a preciso da identificao de cios aps sin- cronizao utilizando touros como indicadores do comportamento sexual de vacas em um sistema escalonado de sincronizao de estros. Material e mtodos Foram utilizadas 48 fmeas, sendo 32 novilhas Introduo Nos sistemas de sincronizao de estros impor- tante considerar que existem problemas na preciso com que se detecta a manifestao da conduta estral, em funo da composio, tamanho dos rebanhos e hierarquia social (1) . O uso dos progestagneos per- mite a obteno de cerca de 80% de cios em at 120 horas da implementao dos tratamentos (2, 3, 4) . No entanto, sabe-se que fatores comportamentais podem 146 RPCV (2001) 96 (539) 145-148 Resultados A avaliao da incidncia de cios indicou que em 56% das oportunidades (48 vacas submetidas a trs sincronizaes) as vacas manifestaram estro. O tipo de sincronizao, com ou sem a suplementao com o progestagneo, no afetou a incidncia de cios. A frequncia de cios foi respectivamente de 67%, 54% e 50% para as trs sincronizaes efetuadas. As frequncias de vacas detectadas em estro nos lotes A,B,C e D foram de 58%, 75%, 47% e 47%, respectivamente. O resultado mais interessante foi a identificao de efeito significativo do dia na incidncia de cios. Na Figura 1 apresentada a distribuio observada, indicando que efetivamente a distribuio esperada de 2 (16%) vacas em cio por dia no foi confirmada. O que se constata uma maior concentrao nos primeiros trs dias, indicando que mesmo as vacas tendo sido preparadas para manifestar cio de forma escalonada, h uma reduo linear significativa ao longo dos seis dias de avaliao na manifestao de estros (R 2 = 0,75). Na Tabela 1 esto apresentadas as frequncias de vacas em cio identificadas pelo TP, B e OV. No que diz respeito ao tail painting, no geral, 75% das vacas foram marcadas, sem diferena significativa entre touros (P>0,05). J quando foi considerada a marcao pelo bual, decorrente de atividade exclusiva com os machos, foi evidenciada diferena entre touros (P<0,01), ou seja, os touros identificaram propores Hereford e 16 vacas Brangus-Ibag de propriedade da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria. Os animais foram mantidos em pastagem natural composta principalmente por Paspalum sp e Axono- pus sp, sem outro suplemento alimentar durante o perodo experimental (meses de maio e junho, final de outono - incio de inverno) e divididas em quatro lotes de 12 animais, denominados lotes A, B, C e D. Esses lotes de vacas foram empregados para averi- guar individualmente a qualidade do smen de 12 touros em um perodo de seis dias (9) . Foram sincro- nizadas duas vacas de dois lotes por dia, durante seis dias consecutivos, comeando pelos lotes Ae B, ten- do prosseguimento na semana posterior com os lotes C e D. A primeira sincronizao de cada lote de vacas foi efetuada com a colocao de pessrios vaginais impregnados com 250 mg de acetato de medroxi-progesterona por nove dias e na retirada foi aplicado 0,5 mg de cloprostenol (sincronizao 1). Todas as vacas foram sincronizadas mais duas vezes (sincronizaes 2 e 3) 14 dias aps com apenas uma aplicao de 0,5 mg de cloprostenol. Quarenta e oito horas depois da retirada do pess- rio e/ou aplicao de prostaglandina nas duas primei- ras vacas de cada lote, todo o grupo correspondente foi colocado no piquete juntamente com o touro a ser testado por seis dias, consistindo no Dia 1 da avaliao da manifestao dos estros. Contudo, as duas ltimas vacas do lote, foram separadas do macho quarenta e oito horas depois da aplicao de prostaglandina, que correspondia ao final do teste (Dia 6). Durante os seis dias de monta as vacas foram ob- servadas uma hora pela manh (08:00-09:00 h) e uma hora pela tarde (17:00-18:00 h) visando identi- ficar estro visual (OV) pela aceitao de monta. Como mtodos complementares a identificao visual as vacas foram pintadas na base da cauda com esmalte sinttico brilhante tail painting (TP) e os touros receberam bual marcador (B) com tinta a base de leo de soja e corante em p. A identificao de cada vaca em cio em cada uma das trs etapas do experimento foi anotada, tendo sido essa informao submetida a anlise de varin- cia considerando os efeitos de dia de manifestao do estro (1...6), lote (A...D) e sincronizao (1, 2 e 3), visando verificar a distribuio efetiva das vacas em estro, ao longo dos seis dias de avaliao, ajus- tando para possveis efeitos de lote e sincronizao. Uma outra abordagem sobre o tema, foi a de ave- riguar como, cada touro identificou o estro em cada grupo de vacas submetido a sincronizao escalona- da de cios, com respeito ao mtodo de avaliao empregado, ou seja, observao visual (atividade com fmeas), marcao pelo bual (atividade com os touros) e tail painting (atividade homo e heteros- sexual). Os dados de cio medidos dessa forma foram submetidos a one-way anova, considerando os dados de apenas 10 dos 12 touros avaliados, em funo da disponibilidade de informao, e, tambm a concordncia entre os mtodos empregados para o diagnstico de estro foram comparados por Qui- quadrado. Horn, M.M. et al Tabela 1 - Percentagem de vacas em cio em cada grupo de ani- mais acasalados durante seis dias com um touro, discriminadas em funo do mtodo de identificao de estro. Figura 1 - Distribuio de cios detectados ao longo dos seis dias de cobrio nas trs sincronizaes 147 distintas de fmeas em cio. Alm disso, os dados da Tabela 1, indicam que os touros no consideraram em cio 11% das vacas marcadas pelo TP. A observa- o visual de duas horas por dia foi ainda menos efe- tiva na identificao da manifestao do estro, uma vez que apenas 60% das vacas foram consideradas como em cio, porm, sem diferena significativa com respeito ao grupo de acasalamento. A discrepncia entre os critrios para identificao dos cios pode ser visualizada na Figura 2, sendo em "a" a interao entre a marcao com B e TP e em "b" a entre B e OV. Na avaliao da eficcia de TP com respeito a marcao efetiva dos touros, pode-se constatar que em 63% dos casos h concordncia positiva e em 23% negativa, ou seja, vacas identifi- cadas corretamente em cio ou fora dele. Chama a ateno o fato de que 12% das vacas que foram identificadas como em cio por TP no foram cober- tas pelos touros (X 2 =58,16; 1GL; P<0,0001). J na comparao da eficcia da observao visual e a marcao pelo bual dos touros, as freqncias ob- servadas tambm foram significativamente diferentes (X 2 =9,50; 1GL; P<0,01) e caracterizadas por 34% de discrepncia, ou seja, 15% de vacas observadas como em cio que no foram marcadas pelos touros e 19% marcadas que no foram observadas em ativi- dades homossexuais. Discusso A resposta a sincronizao de estro com prosta- glandina no foi alta, possivelmente devido a que os experimentos foram realizados no incio do inverno, sob condies climticas adversas e de baixa dispo- nibilidade de forragem natural de boa qualidade (10) . No entanto, o fato da primeira sincronizao ter includo a suplementao com progestagneo no determinou diferena nas mdias de manifestao de cios, indicando que o modelo avaliado repetitivo apesar do uso do progestagneo na primeira etapa. As diferentes freqncias de cio entre os lotes A, B, C e D corroboram o esperado, ou seja, respostas individuais diferenciadas e da composio distinta de cada lote de animais, incluindo vacas e novilhas de duas raas. Os resultados relativos distribuio diria de cios concordam com os de outro estudo que tambm incluiu sincronizao escalonada de estro, resultando em modestos 40% de cios dentro do perodo esperado aps a remoo de um implante de progesterona (6) . Isto pode ser um indicativo de que as fmeas anteci- pam o proestro ou prolongam o metaestro, visando encontrar companheiras para as atividades de monta. Da mesma forma estes resultados tambm so consentneos com os de Lamothe et al. (11) , que demonstraram ampla variabilidade na durao do metaestro e proestro, mesmo em estros naturais. Es- tes dados concordam com os do presente experimento uma vez que a sincronizao escalonada de duas fmeas por dia, resultou em 45% de cios dentro das 48 horas previstas. Uma provvel explicao para estes resultados, talvez seja, o fato de que em pequenos conjuntos de animais em estro, esto diminudas as oportunidades para as atividades de monta. Os resultados apresentados na Figura 2, fornecem evidncias da impreciso com a qual so identificadas as vacas em cio nos sistemas de sincronizao de cios e inseminao artificial, podendo ser um dos fatores responsveis, em algumas situaes pela ocorrncia de baixas taxas de fecundao em programas de sin- cronizao de cios e inseminao artificial. Em um sistema escalonado de sincronizao de estros em que 16% das vacas foram programadas para manifestar cio por dia, h maior concentrao de cios nos primeiros dias, provavelmente em decor- rncia do fator bioestimulatrio (12) , que exercem as primeiras fmeas em cio, sobre as demais compa- nheiras do rebanho. Alm disso, foi constatado que os touros identificam de maneira distinta as fmeas em estro, comparativamente aos outros mtodos de identificao de cios testados (visual e "tail painting"), salientando a necessidade de maiores estudos sobre a efetiva ovulao das fmeas identificadas como em cio pela apreciao visual de duas horas por dia e tail painting. Esses resultados, se confirmados, em condies adequadas de alimentao e em pocas mais favorveis para controle de cios (primavera-ve- ro), podero fornecer evidncias de que: apenas duas horas de reviso de cio dirias no so suficien- tes para a obteno de bons resultados em servios de inseminao artificial; e, que as maiores freqn- cias de cio indicadas pela TP (atividade homossexual) apenas seriam restritivas quanto a um maior consu- mo de smen em vacas que poderiam no se encon- trar aptas fertilizao. RPCV (2001) 96 (539) 145-148 Horn, M.M. et al Figura 2 - Frequncia de estros identificados pelos diferentes m- todos avaliados: Tail painting (TP), observao visual de estro (OV) e bual marcador (B), sendo que (-), corresponde a no identificao de estro e (+) corresponde a estro identificado. Horn, M.M. et al 148 Bibliografia 1 - GALINA, C.S.; MONTIEL, F.; MARTNEZ, L.E. (1996). Deteccin de Calores y Jerarqua Social. Revista Ceb, Mxico, julio-agosto, 7-10. 2 - PORRAS, A.I.; GALINA, C.S. (1992). Utilizacin de Pro- gestagneos para la manipulacin del Ciclo Estral Bovino. Vet. Mex,. 23:31-36. 3 - GORDON, I. 1996. Controlled Reproduction in Cattle and Buffaloes. CAB International, Cambridge, 492. 4 - MORAES, J. C.F.; JAUME, C. M. (1997). Sincrobovi: um pessrio para sincronizao de cios em bovinos. In: XII Congres- so Brasileiro de Reproduo Animal, Caxamb. Rev. Bras. Re- prod. Anim. Belo Horizonte, 13: 99-101. 5 - ORIHUELA, T.A.; GALINA, C.S.; DUCHATEAU, A. (1989). The Efficacy of Oestrus Detection and Fertility Following Synchronization with PGF2a and SMB in Zebu Cattle. Therioge- nology, 32:745-753. 6 - MEDRANO, E.A; HERNANDEZ, O.; LAMOTHE, C.; GALINA, C.S. (1996). Evidence of asynchony in the onset of signs of oestrus in zebu treated with a progestogen ear implant. Res. Vet. Sci., 60:51-54. 7 - PLASSE, D.; WARNICK, A.C.; KOGER, M. (1970). Re- productive Behaviour of Bos indicus females in a Subtropical En- vironment IV. Length of Estrous Cycle, Duration of Estrous, Time of Ovulation, Fertilization and Embryo Survival in Grade Brah- man Heifers. J. Anim. Sci., 30:63-72. 8 - ORIHUELA, T.A.; GALINA, C.S.; ESCOBAR, J.; RI- QUELME, E. (1983). Estrous Behavior Following Prostaglandin F2a Injection in Zebu Cattle under Continuous Observation. The- riogenology, 19:795-809. 9 - HORN, M.M.; MORAES, J. C.F.; GALINA, C.S. (1999). Semen quality in purebred and crossbred beef bulls after six days of natural mating to synchronised females. Ciencias Veterinarias, Costa Rica, 22: 51-58. 10 - RUBIO I., MORENO I.Y.D., GALINA C.S., ESCOBAR F.J., RAMIREZ B., NAVARRO-FIERRO R. (1989). Progesterona srica, expresin de estro y fertilidad despus de la inyeccin de prostaglandina F2& en ganado Ceb en verano e invierno. Vet. Mex., 20: 145-149. 11 - LAMOTHE, C.; MONTIEL, F.; FREDRIKSSON, G.; GA- LINA, C.S. (1995). Reproductive performance of zebu cattle in Mxico. Influence of season and social interaction on the timing of expressed oestrus. Trop. Agric., Trinidad, 72:1-5. 12 - BOLAOS, JM; ., GALINA C. S., ESTRADA S. AND FORSBERG, M. (1997). Resumption of post-partum ovarian acti- vity monitored by plasma progesterone in anoestrous Zebu (Bos indicus) cattle following temporary weaning and progestogen treatment. Rep. Dom. Anim., 32 :363-367. RPCV (2001) 96 (539) 145-148