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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA

DE MÉXICO
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Producción de Antibióticos, vitaminas y enzimas


Equipo: 7
Rueda Candelaria Robinson
González Hernández Ricardo A.
Ortiz San Agustín Alejandra

Grupo: 1602

México D.F . 5 de Noviembre de 2009


Antibiótico
Producto metabólico de un microorganismo que
tiene la propiedad de inhibir o destruir a otros
microorganismos
Microorganismos productores
Hongos filamentosos (Eumycetes) : Producen el
25 % de los antibioticos conocidos
Géneros principales: Aspergillus , Monilia,
Penicillum, Cephalosporium

Penicillum Aspergillus
Microorganismos productores
Bacterias:Producen el 75 % de los antibioticos
conocidos
Actinomycetes: Generos Streptomyces y
Nocardia(65%)
Pseudomonales y Bacillus (10%)
Algunos antibióticos producidos comercialmente
Antibiótico Microorganismo productor Tipo de microorganismo

Bacitracina Bacillus licheniformis Bacteria esporulada


Cefalosporina Cephalosporium sp. Hongo
Chloranfenicol Streptomyces venezuelae Actinomiceto
(hoy síntesis química)
Cicloheximida Streptomyces griseus Actinomiceto
Cicloserina Streptomyces orchidaceus Actinomiceto
Eritromicina Streptomyces erytreus Actinomiceto
Griseofulvina Penicillium griseofulvin Hongo
Kanamicina Streptomyces kanamyceticus Actinomiceto
Lincomicina Streptomyces Lincolnesis Actinomiceto
Neomicina Streptomyces fradiae Actinomiceto
Nistatina Streptomyces noursei Actinomiceto
Penicilina Penicillum chrysogenum Hongo
Polimixina B Bacillus polymyxa Bacteria esporulada
Estreptomicina Streptomyces griseus Actinomiceto
Tetraciclina Streptomyces rimosus Actinomiceto
Características de los microorganismos
productores de antibióticos
1. La cepa a utilizar debe ser genéticamente estable.
2 Su velocidad de crecimiento debería ser alta.
3. La cepa debe estar libre de contaminantes, incluidos
fagos.
4. Sus requerimientos nutricionales deberían ser
satisfechos a partir de medios de cultivo de costo
reducido.
Características de los microorganismos
productores de antibióticos

5. Debe ser de fácil conservación por largos períodos de


tiempo, sin pérdida de sus características particulares.
6. Debería llevar a cabo el proceso fermentativo
completo en un tiempo corto.
7. Si el objetivo del proceso es un producto, éste debería
ser de alto rendimiento y de fácil extracción del medio de
cultivo.
Métodos para el estudio de
microorganismos antagónicos

1. Método de estría cruzada de Garré


2. Método de las estrías alternas
3. Método de los discos de agar
4. Método de las estrías radiales
5. Método de las cajas superpobladas
6. Método del celofán
Búsqueda de antibióticos: Rastreo
Mejoramiento de microorganismos de uso
industrial

1. Selección natural
2. Mutación inducida
3. Recombinación genética
PROCESO DE OBTENCIÓN DE ANTIBIÓTICOS
Esquema general de fermentación para la obtención de
antibióticos
Fermentador.
Esquema de producción de penicilina
El término vitamina se le da al Bioquímico polaco
Casimir Funk quien lo planteó en 1912.
Consideraba que eran necesarias para la vida y la
terminación Amina es por que creía que todas estas
sustancias poseían la función Amina.
QUE ES UNA VITAMINA

 Son compuestos orgánicos relativamente sencillos,son


absolutamente insispensables para la existencia.
 Se utilizan en el interior de las células como antecesoras
de las coenzimas, a partir de las cuales se elaboran las
miles de enzimas que regulan las reacciones químicas
de las que viven las células.
CLASIFICACIÓN DE VITAMINAS
VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Vitamina A (Retinol)
Vitamina D (Calciferol)
Vitamina E (Tocoferol)
Vitamina K (Antihemorrágica)
CLASIFICACIÓN DE VITAMINAS
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Vitamina C. Ácido Ascórbico. Antiescorbútica.
Vitamina B1. Tiamina. Antiberibérica.
Vitamina B2. Riboflavina.
Vitamina B3. Niacina. Ácido Nicotinico. Vitamina PP.
Antipelagrosa.
Vitamina B5. Ácido Pantoténico. Vitamina W.
Vitamina B6. Piridoxina.
Vitamina B8. Biotina. Vitamina H.
Vitamina B9. Ácido fólico.
Vitamina B12. Cobalamina.
FUNCIONES
La función de las vitaminas en sistemas biologicos son
sustancias nutricionales importantes (factores de
crecimiento) y en el metabolismo tiene 4 principales
funciones que son:
-Estabilizadores de membranas.
-Hormonas.
-Electro donadores o aceptores de protones.
-Coenzimas.
FACTORES DE CRECIMIENTO
Los factores de crecimiento pueden ser de dos tipos.
1. Los que se necesitan en cantidades muy pequeñas y
que funcionen cataliticamente como parte de los
sistemas enzimáticos el complejo de vitamina B12 es
un ejemplo muy claro de este grupo.
2. aquellos que se necesitan en cantidades
sustancialmente grandes como aminoáciodos, purinas
y pirimidinas.
Avitaminosis
Avitaminosis por deficiencia de vitamina C
HIPOVITAMINOSIS

Ratiquismo causado por hipovitaminosis D


HIPERVITAMINOSIS

Hipervitaminosis causado por vitamina A


VITAMINA A
 Es una sustancia antioxidante ya que elimina radicales
libres y proteje al ADN de su acción mutágena,
contribuyendo, por tanto, a frenar el envejecimiento
célular.
 La función principal de la vitamina A es intervenir en
la formación y mantenimiento de la piel, membranas
mucosas, dientes y huesos. Tambien participa en la
elaboración de enzimas en el hígado y de hormonas
sexuales y suprarrenales.
PRODUCCIÓN DE VITAMINAS
 La mayor parte de las vitaminas se fabrican por síntesis
química. Sin embargo unas cuantas son demasiado
complicada de sintetizar de forma barata, pero pueden
fabricarse por fermentación microbiana. Las mas
importantes son la vitamina B12 y Riboflavina.
VITAMINA B12
 Es sintetizada en la
naturaleza
exclusivamente por
los microorganismos;
se encuentra presente
en cada tejido animal
en concentraciones
bajas.
La producción comercial se lleva a cabo en la
actualidad enteramente por fermentación. La
vitamina B12 fué obtenida comercialmente al
principio como un subproducto de las
fermentaciones de estreptomicetos para la
producción de los antibióticos estreptomicina,
cloranfenicol o neomicina, con un rendimiento de
aproximadamente 1 mg/l.
PROCESOS DE PRODUCCIÓN
1- Propionibacterium (freudenreichii y shermanii)
 Con estos microorganismos se conduce un proceso en
dos etapas.
 a- fase anaerobia de 2-4 dias: el producto de esta
etapa es el 5’desoxiadenosil cobinamida.
 b- fase aerobia de 3-4 dias: el producto de esta etapa
es el 5,6 dimetil benzimidazol. Estas dos estructuras se
condensan luego dando la coenzima B12.
 Para liberar la vitamina de las celulas se hace un
calentamiento (10 30 min a 80- 120 oC, pH= 6.5- 8.5)
donde se convierte en la forma mas estable
(cianocobalamina) El producto crudo se usa en piensos.
2- Pseudomonas denitrificans
 Con este microroganismo se conduce un proceso en
una sola etapa.
 El proceso de produccion es una fermentacion en
batch que se prolonga alrededor de 90 horas a 30
oC con agitacion y aireacion

 El medio de cultivo contiene : melazas de


remolacha 10%, extracto de levadura 0.2%, fosfato
de amonio 0.5 %, sulfato de magnesio 0.1%, sulfato
de manganeso 0.02% y otros microelementos.
Debe agregarse Co2+ y 5,6 dimetil benzimidazol
(pH=7.4) Este es el proceso que desarrolla la firma
Merck desde 1971 y la productividad aproximada
es de 60 mg/litro.
 Se conocen varias cepas productoras que se encuentran aqui
con sus rendimientos.
Microorganismo Rendimiento de producción
de B12
Bacillus megaterium 0.45g/l
Butyribacterium rettgeri 5mg/l
Streptomyces olivaceus 3.3mg/l
Micromonaspara sp 11.5g/l
Klebsiella pneumoniae 0.2gm/l
Propionibacterium sherami 19mg/l
Pseudomonas dentrificans 60mg/l
Rhodopseudomonas protamicus 135mg/l
(hibrido) obtenida porla unión
de Protaminobacter ruber y
Rhosopseudomonas spheroides
VITAMINA B2
RIBOFLAVINA
Sintetizada por muchos microorganismos que incluyen
bacterias, levaduras y hongos, el hongo Ashbya gossypii
produce una enorme cantidad de esta vitamina. A pesar de
este buen rendimiento existe una gran competencia
economica entre este proceso microbiano y la sintesis
química.
PRODUCCIÓN POR FERMENTACIÓN DIRECTA

1- Microorgaismos productores:bacterias, hongos y


levaduras.
 El primer microorganismo empleado en la producción
industrial fue el hongo Eremothecium ashbyii, con
rendimientos maximos de 2 g/l. Luego fue remplazado
por Ashbya gossipi, que produce 10-15g/l.
2- Medios de cultivo.
Fermentador el cual contenía sacarosa 1.5 %, aceite de
maíz 2 %, extracto de malta 0.5%, extracto de levadura
0.5%, fosfato diamónico 0.025%. El pH del medio de
cultivo fue de 6.5 este se esterilizó a 121 ºC por 20
minutos.
3- Proceso fermentativo.
La producción de la vitamina en un fermentador. La
incubación se realiza a 30 ºC con aireación 7 dias de
fermentación y sin agitación para evitar daños en el
miscelio.
4- Extracción y purificación de la riboflavina.

La riboflavina contenida en el producto seco, fue


extraída con butanol, posteriormente se lleva a
cabo. La purificación se realiza en una columna
seca de silica gel utilizando una mezcla de solventes
formada por butanol/etanol/agua en proporción
7:2:1.
OTROS MICROORGANISMOS
En la actualidad se experimenta con levaduras de
los generos: pichia, usando alcanos como fuentes de
carbono; Hansenula,empleando etanol como fuente
de carbono; Saccharomyces empleando acetato
como fuente de carbono.

Estructura de la riboflavina, FMN y FAD


VITAMINA ORGANISMOS QUE FORMA DE FUNCIONES METABOLICAS
LA NECESITAN COENZIMA

Tiamina Staphylococcus aureus DPT Activación de cetoácidos y


Lactobacillus fermente cetoazucares; transferencia de
unidades de carbonos
Riboflavina Lactobacillus casei Riboflavin 5-P Transferencia de hidrogeno
Streptococcus lactis Dinucleotido de
Flavina-adenina

Ácido Lactobacillus NAD Y NADP Transferencia de hidrogeno


nicotínico plantarum
Proteus vulgaris
Ácido Brucella abortus CoA Activación y transferencia de
patonténico Proteus morgani 4- acilos.
Fosfapanteteína Sintesis de ácidos grasos.

Vitamina B6 Lactobacillus casei Peridoxal-P Descarboxilación,


Piridoxal Clostridium perfringens Piridoxamina-P desaminación,
piridoxamin Streptococcus fecalis transaminación y
a raceminación de a.a.
Ácido folico Lactobacillus casei Ácido Transferencia de 1 carbono
Clostridium tetani tetrahidrofólico
Ac. P- Clostridium Ácido Transferencia de 1
aminoben acetobutylicum tetrahidrofólico carbono
zoico Acetobacter suboxydans
Biotina Leuconostoc Biotina-CO2 Fijación de CO2,
mesenteroidesa Sintesis de acido graso.
Clostridium tetani
Lactobacillus lactis
Vitamina Lactobacillus leichmannili 5-desoxiadenosil- Transferencia de 1
B12 Lactobacillus lactis B12 carbono. Sintesis de
desoxirribósidos
isomerarización.

Vitamina E Necesaria para la


síntesis de células y
macromoléculas
Vitamina K Bacteroides Coenzima utilizada en
melaninogenicus transporte de
elctrón(naftoquinones y
quinones)
 PRODUCCION VITAMINICA DE ALGUNAS LEVADURAS (mcg/g de
celulas)
ESPECIES TIAMINA RiBOFLAVINA NIACINA AC. FOLICO
Saccharomyce 28-37 44 296-402 34
s cereviciae
Candida utilis 21-26 53 213-282 10-15
Candida 16-22 58-60 301-313 12-20
arborea
O. lactis 12-14 40 196 12-15
OTRAS BACTERIAS (mcg/g de celulas)
VITAMINAS Enterobacter Pseudomonas Clostridium
aerogenes fluorescens butyricum
Ac. nicotinico 240 210 250
Riboflavina 44 67 55
Tiamina 11 26 9
Piridoxina 7 6 6
Ac. pantotenico 140 91 93
Ac. folico 14 9 3
biotina 4 7 -------------
¿QUE ES LA BIOTECNOLOGIA?
 Tecnologia basada en la biologia
que es usada sobre todo en la
industria alimenticia,
farmaceutica, textil, y que sea
benefico para el hombre,
la biotecnología ha sido
utilizada por el hombre desde
los comienzos de la historia en
actividades tales como la
preparación del pan y de bebidas
alcohólicas
¿QUE SON LAS ENZIMAS?
 Las enzimas son catalizadores de
naturaleza proteíca son
macromoleculas complejas que
producen un cambio químico
específico en otras sustancias,
sin que exista un cambio en ellas
mismas.
 Las enzimas son esenciales para
todas las funciones corporales y
se encuentran en la boca
(saliva), el estómago (jugo
gástrico), los intestinos (jugo
pancreático, jugo y mucosa
intestinal), la sangre y en cada
órgano y célula del cuerpo.
¿CÓMO ESTA FORMADA LA
ENZIMA?
 Algunas enzimas son proteínas
conjugadas; ya que poseen un
grupo no proteico o prostético,
Una enzima completa se
denomina holoenzima, y está
formada por una parte proteica
(apoenzima) y un cofactor no
proteico (coenzima).

 HOLOENZIMA = APOENZIMA
+ COENZIMA
LA REACCION DE LA ENZIMA-
SUSTRATO
 El sustrato es una molécula
sobre la que actúa una
enzima .El sustrato se une
al sitio activo de la enzima,
y se forma un complejo
enzima-sustrato. El
sustrato por acción de la
enzima es transformado en
producto y es liberado del
sitio activo, quedando libre
para recibir otro sustrato
 No todos los
catalizadores
bioquímicos son
proteínas, pues algunas
moléculas de ARN son
capaces de catalizar
reacciones (como el
fragmento 16S de los
ribosomas en el que
reside la actividad
peptidil transferasa).
IMPORTANCIA
 Permiten aprovechar las funciones del metabolismo
interno y de la vida de relación, como la locomoción, la
excitabilidad, la irritabilidad, la división celular, la
reproducción, etc.
IMPORTANCIA
 Las enzimas, por lo tanto, se consideran como
catalizadores altamente específicos que modifican la
velocidad de los cambios promovidos por ellas.
TIPOS Y FUENTES DE OBTENCION
DE ENZIMAS
 Enzimas vegetales: La mayoría de las enzimas
vegetales se encuentran disponibles en forma de polvo
sin una purificación muy elevada. También se
encuentran disponibles líquidos de papaína de baja
actividad. El aumento de la disponibilidad de las
enzimas vegetales depende de diversos factores
TIPOS Y FUENTES DE OBTENCIÓN
DE ENZIMAS
 Enzimas animales: Aquí se incluyen lipasas
pancreáticas y proteasas, pepsinas, estereasas .Son
producidas ultrapuras en cantidades industriales
TIPOS Y FUENTES DE OBTENCIÓN
DE ENZIMAS
 Enzimas microbianas: Las enzimas producidas por la
fermentación de microorganismos representan
aproximadamente el 90% de todas las enzimas
producidas para los procesos industriales.
CONSIDERACIONES ESPECIALES
 Especificidad
 Consideraciones del pH
 Consideraciones térmicas
 Activadores e inhibidores
 Métodos de análisis
 Disponibilidad
 Soportes técnicos
 Costos
 Vida Media
ENZIMAS EN LA INDUSTRIA
TIPO DISPONIBILIDAD PRECIO PUREZA

Empleadas a gran Elevada Bajo Relativamente


escala baja

Ampliamente Pequeña Alto Alta


empleadas

Especializados Muy limitada Muy alto Variable


ENZIMAS MICROBIANAS
 Son más útiles que los derivados de las plantas o
animales por la su gran variedad de actividades
catalíticas que disponen, y porque generalmente
pueden obtenerse en cantidades abundantes, baratas,
de forma regular y de calidad uniforme. Además las
enzimas microbianas son más estables que sus
homólogos animales y vegetales, y su proceso de
obtencion es más fácil y seguro.
ENZIMAS MICROBIANAS MAS
UTILIZADAS
 Las enzimas más utilizadas son la -amilasa, la
glucoamilasa, la glucosa isomerasa y varias proteasas.
Solamente se emplean unas 20 enzimas en cantidades
apreciables. De ellas, algunas tienen el suficiente
interés industrial como para ser comercializadas en los
mercados de materias primas.
USOS INDUSTRIALES

 DETERGENTES
 MANUFACTURACION
DE LA CERVEZA
 CONSERVACION DE
ALIMENTOS
 INDUSTRIA TEXTIL
 INDUSTRIA
FARMACEUTICA
 ANALISIS CLINICOS
ESQUEMA DE PRODUCCION
PROTEASAS
 ORIGEN: Se obtienen
por cultivos de cepas
seleccionadas de hongos
(Aspergillus oryzae) o
bacterias (Bacillus
subtilis).
 pH ÓPTIMO: 4-8
(vegetal); 2-10 (fúngico);
6-2 (bacteriano).
MECANISMO DE ACCION
 Todas estas proteasas hidrolizan gran número de
proteínas diferentes a través de polipéptidos hasta
aminoácidos; también desdoblan amidas y ésteres de
aminoácidos.
APLICACIONES DE LAS
PROTEASAS
 En los detergentes proteolíticos
se hallan en el mercado este tipo
de enzimas.
 Durante el proceso de
maduración de la carne y el
pescado ,actuan estas enzimas
proteolíticas que suministran a
la carne una textura blanda,
jugosa, masticable, de sabor
agradable y apta para la cocción
y digestión
 Usada en el tratamiento de
fibras proteínicas (seda y lana)
AMILASAS
 ORIGEN: Bacillus
subtilis (bacteriano)
 Ph optimo: 7
MECANISMO DE ACCION
 Las amilasas provocan la coagulación del almidón al
hidrolizarlo. Se adhieren a las superficies textiles y
actúan como pegamento para los compuestos de
almidón. Las amilasas empleadas en los detergentes
son la -amilasas. Hidrolizan los enlaces -1, 4
glucosídicos
USOS DE LAS
AMILASAS
 Las amilasas tambien se
emplean en los detergentes para
eliminar las manchas que
contienen almidón.
 Se usan en la fermentacion
alcoholica, Estas enzimas son 
y  amilasas
 Hidrólisis parcial del almidón
para generar dextrinas que son
utilizadas como espesantes.
 Hidrólisis del almidón para ser
utilizado como fuente de
carbono en diversas
fermentaciones, entre ellas la
producción de etanol para uso
alimenticio y combustible.
USOS DE LAS
AMILASAS
 Obtención de jarabe de alta  Remoción del almidón utilizado
maltosa (Glu-Glu) utilizados en como apresto en la industria
la fabricación de la cerveza y textil.
confituras (dulces, helados,
tortas).
 Obtención de jarabes de alta
glucosa utilizados en la
fabricación de cerveza, panes y
repostería, confituras y bebidas
no alcohólicas.
 Hidrólisis parcial del almidón en
la industria panadera para la
liberación de glucosa que es
sustrato de fermentación de las
levaduras para producir el
leudamiento de la masa.
LIPASAS

 Origen: Animal
(pancreática), vegetal
(semillas de soya, ricino,
algodón y cereales como
trigo y maíz) y fúngico
(Aspergillus, Rhizopus,
Mucor, Gandida).
 pH optimo: 8-9
(animal), 4-5 (vegetal) y
2-9 (fúngica).
MECANISMO DE ACCION
 Cataliza la hidrólisis de triglicéridos a diglicéridos,
monoglicéridos y ácidos grasos, más glicerina,
liberando de preferencia los ácidos grasos de las
posiciones 1 y 3 de los glicéridos.
APLICACIONES DE LAS
LIPASAS
 Se usa en el desdoblamiento de lípidos, en la
producción de aroma de quesos (crema, mantequilla,
margarina y productos de chocolatería). También se
usa en el desgrasado de proteína, en la industria textil.
LACTASA.

 Origen: Levaduras
(Saccharomyces lactis, S.
fragilis, Torula cremoris)
y Fúngico (Aspergillus
niger, Streptomyces
coelicor, más
termorresistente).
 pH óptimo: 4-7.
MECANISMO DE ACCION
 Cataliza la hidrólisis de la lactosa en glucosa y
galactosa, desde los extremos de los restos de
galactosa; siendo los dos monosacáridos resultantes
más dulces y más fácilmente asimilables.
APLICACIONES DE LA LACTASA
 La lactasa se utiliza en la elaboración de leches
deslactosadas, destinadas a la alimentación infantil y
de adultos que presentan una intolerancia a la lactosa
por déficit de su lactasa intestinal.
 Estabilidad y conservacion de la leche
PECTINO-ESTERASA (P.E.) O
PECTINO-METIL-ESTERASA.

 Origen: Es producida
por hongos (Aspergillus
niger, Fusarium
oxysporum), levaduras,
bacterias y algunos
vegetales, como tomates,
cebollas y frutas cítricas.
MECANISMO DE ACCION
 Produce la hidrólisis de
la pectina, formando
ácido péctico o
poligalacturónico y
metanol, al actuar de
preferencia sobre los
enlaces metílicos,
vecinos de grupos
carboxílicos libres ..
APLICACIONES DE PECTINO-
ESTERASA
 Estas enzimas son las
causantes de la pérdida de las
características de turbidez de
algunos jugos y néctares
obtención rápida de un
filtrado claro.
 También se aplica una
adición de esta enzima con el
objeto de lograr un mayor
rendimiento en jugo a partir
de algunas frutas que no se
pueden prensar con facilidad,
quedando retenida una
cantidad apreciable de jugo.
PECTINASA,POLIGALACTURONIDA
SA (PG) O
PECTINODEPOLIMERASA
 Origen: Fúngico
(Aspergillus, Penicillium
chrysogenum) y
bacteriano (Bacillus
subtillis).

 pH óptimo: 3-6 (fúngica)


y 5-8 (bacteriana).
MECANISMO DE ACCION
 Desdoblamiento hidrolítico de los enlaces glucosídicos
de las cadenas de pectina o del ácido péctico a
oligourónidos o a ácido galacturónico monómero (con
reducción rápida de la viscosidad)
APLICACIONES DE LA
PECTINASA
 Se usa en el procesamiento de frutas y hortalizas para
preparar jugos y néctares, formando también parte de
las ya mencionadas "enzimas clarificantes", junto a la
pectino-esterasa. También se emplea para la
maceración de tejidos vegetales con el objeto de
obtener aromas (16).
 Por otra parte, en la fermentación húmeda de las
semillas de café
INDUSTRIA TEXTIL
 Se divide en cuatro etapas principales:
 1) producción de la hebra
 2) hilado, tejido
 3) acabado de los tejidos
 4) fabricación del producto textil.
ENZIMAS EN LA INDUSTRIA TEXTIL
 Estas enzimas se usan en las fases de hilado, teñido y
acabado de los tejidos con el objetivo de limpiar la
superficie del material, reducir las pilosidades y
mejorar la suavidad.
ANALISIS CLINICOS
 Las enzimas se emplean
como reactivos estándar en
los laboratorios para el
diagnóstico de
enfermedades, para el
control y el seguimiento de
enfermedades y de la
respuesta del paciente
hacia la terapia seguida, y
para la identificación y
control de la concentración
de drogas o sus
metabolitos en la sangre u
otros fluidos corporales.
¿QUE ES EL PCR?
 El PCR es en si un técnica muy simple: dos oligonucleotidos son sintetizados
cada uno como secuencia complementaria de una hebra opuesta (secuencia de
un segmento en cada una de las hebras) del ADN blanco en posiciones que
estén mas allá de aquellas donde termina el segmento a ser amplificado. Los
oligonucleotidos sirven como cebadores con sus extremos 3' orientados en
direcciones opuestas.

 El ADN aislado que contiene el segmento a ser amplificado es calentado


levemente para ser desnaturalizado (separado en hebras sencillas), después se
enfría en presencia de grandes cantidades de los oligonucleotidos sintéticos, lo
que permite que por hibridización, se encuentren las secuencias
complementarias. En este momento se agregan los cuatro
desoxiribonucleotidos trifosfato y el segmento hibridizado sirve como cebador
para iniciar la amplificación. El proceso de calentamiento y enfriamiento se
lleva a cabo unas 25-30 veces en algunas horas en un aparato que lo hace
automáticamente, hasta que el fragmento puede ser analizado o clonado.
 Los segmentos son amplificados utilizando una ADN
polimerasa resistente a los cambios de temperatura
como la TaqI polimerasa (aislada de una bacteria
hipertermófila). Si se diseñan con cuidado los
cebadores de tal forma que contengan sitios de corte
para endonucleasas, se puede facilitar mucho la
clonación del ADN amplificado.
APLICACIÓN DEL PCR
 Con esta técnica se han podido amplificar segmentos
de ADN de 40,000 años de antigüedad como momias
humanas y animales extintos como el mamut, lo que
ha dado origen a la arqueología molecular y a la
paleontología molecular. Se utiliza mucho esta técnica
para rastrear el origen de los virus humanos y en
estudios forenses
PRODUCTOS FARMACEUTICOS
 A diferencia de otros
usos industriales para las
enzimas, las aplicaciones
médicas y farmacéuticas
de las mismas requieren
generalmente pequeñas
cantidades de enzimas
muy purificadas
 Esto es por que el destino
de una enzima o de un
producto obtenido por
métodos enzimáticos es
su administración a un
paciente, resulta
evidente que el
preparado debe contener
las menores cantidades
posibles de material
extraño para evitar
probables efectos
secundarios.
USOS DE LAS ENZIMAS EN LOS
MEDICAMENTOS
 Producción de
aminoácidos
 Tratamientos
terapéuticos con
enzimas
 Antibióticos semi-
sintéticos
 Esteroides
REFERENCIAS
 Producción de enzimas: Aliadas productivas de la
industria,http://www.bioplanet.net/magazine/bio_sep
oct_1999/bio_1999_sepoct_industria.htm
 Brock. T.D. Biología de los Microorganismos. 4ª
edición. España: Editorial Omega S.A. 1982.
 Koneman, E.W. Diagnóstico Microbiológico. México:
Editorial Panamericana. 1984.
 Marroquin, Sanchez Alfredo,Ed. Quimica S.A.,1960
 Mexico D.F.

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