EL MICROSCOPIA Y TCNICAS PARA HACER PREPARACIONES

MICROSCPICAS

Practica#2

Llamas Mezquita wislays, Castro Gonzlez Emelina, lvarez Ballesteros Lucenith, Mora
Quionez Wendy

INTRODUCCIN

El presente informe de laboratorio de microbiologa titulado el microscopio y tcnicas para
hacer preparaciones microscpicas pretende exponer mtodos y conceptos de gran
relevancia a la hora de preparar muestras con la ayuda del microscopio ptico, de manera
que optimice el entendimiento de seres supremamente pequeos es decir
microorganismos que no pueden ser vistos por el ojo humano y que para nosotros
estudiantes de ingeniera ambiental nos compete estudiar porque a causa de la accin
de estos microorganismos se presentan todos y cada uno de los fenmenos positivos y
negativos en el equilibrio natural del planeta tierra .
Las ciencias a travs de los tiempos han generado diversos medios tcnicos tangibles e
intangibles que nos han permitido avanzar en distintos aspectos en la investigacin de
nuestros orgenes naturales. Para el caso de la microbiologa ha sido necesario generar
herramientas de observacin de seres imposibles de detallar con la vista humana y
mucho menos determinar e identificar con claridad morfologas propiedades fsicas y
qumicas especficas que poseen cada muestra estudiada. El estudio de los
microorganismos a partir del microscopio es muy importante porque de estas invisibles
formas de vida se genera todo aquello que conforma la vida.
Remontndonos en las antigedades era casi imposible creer que existan diminutos
organismos vivos generando y degenerando vida en la tierra, de manera que se
engendr incgnitas a cerca de nuestro origen que tomaron forma a partir del estudio y
diseo del microscopio ptico diseado por primera vez por Anton Van Leeuwenhoek
quien construyo el microscopio en virtud de las leyes de formacin pticas aumentadas a
travs de lentes convergentes ,que permitieron obtener imgenes detalladas de los
microorganismos. Esto gran avance en materia de instrumentos de observacin influyo
grandemente en el avances de las ciencias biolgicas a nivel mundial.


MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

En el microscopio y tcnicas para hacer preparaciones microscpicas se emplearon
Microscopio ptico compuesto, Frascos con goteros con agua destilada, Porta objetos y
cubre objetos, papel impreso peridico con letra pequea. Corcho, lana. El polen de la
flor, hoja de afeitar y polvillo de ala de mariposa; el procedimiento descrito fue realizado
de la siguiente manera.

1. PREPARACION DEL CORCHO
Para todos los grupos, hicimos varios cortes delgados de corcho utilizando un
bistur, en el porta objeto colocamos una gota de agua destilada y en l
colocamos el pedazo de corcho y se le coloco el cubre objeto teniendo en cuenta
que no se le formaran burbujas de aire ni se levantara y observamos en 4x, 10x y
40x.

2. LETRA IMPRESA
Buscamos en el peridico la letra e recortamos la ms pequea que
encontramos y la colocamos en el porta objeto, procedimos a agregarle una gota
de agua destilada la cubrimos con el cubre objeto y observamos en 4x, 10x.

3. FIBRA DE LANA
Colocamos varias fibras de la lana en el porta objeto y le adicionamos la gota de
agua destilada y observamos.

4. GRANOS DE POLEN
Pusimos unos granos de polen de una flor en el porta objeto le agregamos agua y
observamos.

5. POLVILLO DE ALA DE MARIPOSA
Agitamos una mariposa suavemente contra el porta objeto, con golpes suaves
para que no se maltratara y saliera el polvillo de sus alas despus le agregamos
una gota de aguas destilada y observamos en 4x, 10x y 40x.


DISCUSION DE RESULTADOS

1. CORCHO
IMAGEN AUMENTADA 4 VECES (40) Se puede apreciar una figura
punteada ocasionada por el corte que se hizo sobre el corcho, adems se
logra observar un esparcimiento de lneas cortas o puntos y podemos
observas toda la muestra desplazando hacia delante y hacia atrs.

IMAGEN AUMENTADA 10 VECES (100) La esparcimiento de lneas y
puntos se sigue presentando pero mucho ms fibrosa y en 10 pudimos
observar mucho ms claro y ms cerca el corcho.

IMAGEN AUMENTADA 40 VECES (400) Se puede apreciar una especie
de malla muy fibrosa formada aleatoriamente, lo cual revela la estructura
del corcho.












2. LETRA
La imagen fue colocada en el portaobjetos de tal forma que poda leerse a
simple vista; pero en la imagen mostrada por el microscopio la letra E no
poda leerse, es decir estaba invertida horizontalmente y verticalmente.
Esto es motivado principalmente por los espejos o lentes convergentes que
permiten la amplificacin de la imagen a travs de reflexin y refraccin de
luz , es decir las lneas de la luz emitida por la fuente van todas hacia el
foco del lente ubicado en el centro de este, y van en lnea recta; entonces
cuando pasan al otro lado del lente quedan en el eje contrario produciendo
as la inversin de la imagen, como estos rayos comienzan desde todos los
puntos de la lnea del crculo, esta se invierte vertical y horizontalmente.
Como la imagen est completamente invertida, lo estn tambin los
movimientos como ocurri al realizar los desplazamientos del objeto.



3. FIBRA DE LANA
IMAGEN AUMENTADA 4 VECES (40) se apreciaban las lneas curvadas
de estas fibras.









IMAGEN AUMENTADA 10 VECES (100) Tambin se aprecian las lneas
curvas pero un poco ms grandes.











AUMENTADO 40 VACES (400) Se apreci la estructura de la fibra de lana
una columna bien marcada como un tubo curvado.





4. GRANOS DE POLES
IMAGEN AUMENTADA 4 VECES (40) se apreciaban muchos puntos muy
difciles de apreciar a simple vista.




IMAGEN AUMENTADA 10 VECES (100) Se apreciaban menor cantidad
de puntos en este caso figuras circulares con fibras.









IMAGEN AUMENTADA 40 VECES (400) Se observa ms detallado los
puntos de polen.

5. POLVILLO DE ALAS DE MARIPOSA
IMAGEN AUMENTADA 4 VECES (40) Se observaron puntos muy difciles
de apreciar a simple vista, conforme se fue amplificando la imagen haba
menos puntos.

IMAGEN AUMENTADA 10 VECES (100) Y LUEGO 40 VECES (400) Ms
amplificada la imagen se observ una sola figura elipsoidal saturada con
lneas rectas. Igualmente que en los granos de polen se especifica un
objetivo a observar y lo dems se deja de apreciar disminuyen as la
cantidad de alas de mariposa.








ANALISIS DE RESULTADO

Mediante la anterior procedimiento logramos comprender el estudio de las muestras x a
partir del uso del microscopio, para cada uno de los objetivos (enfoques: 4x, 10x y 40x)
observamos en cada nivel distintas imgenes reflejadas a partir del lente convergente,
localizadas en varias direccin al caso del objetivo 4x, se logra percibir la posicin de la
muestra, mas no todos y cada uno de los componentes grficos, que nos dan una idea de
las caractersticas fsicas y qumicas de la muestra y por ende del microorganismo,
cuando se coloca en el objetivo 4x se ve la muestra completa y podemos observar cada
parte de la muestra.

En cuanto al uso del objetivo 10x la imagen era mucho ms precisa, es decir ya se
alcanzan a determinar algunos componentes fsicos particulares de la muestra (x); para el
caso del objetivo de 40 (x) las muestras ya mostraban en totalidad cada uno de los
caractersticas estticas de la muestra, de manera que proporciona analogas y
diferencias para cada una de las muestras: corcho, letra, polen, polvillo de mariposa, fibra
de lana.

Para el caso de la escogencia de los objetivos de las muestras era necesario identificar el
tamao y forma de la muestra, para este caso las muestras eran diminutas pero no
invisibles al ojo humano, por tal razn no fue necesario pasar del objetivo (40x), ya que
en este nivel era posible ver con claridad todas las muestras.
La integracin de los lentes convergentes reflejados a partir de la reflexin lumnica que
se produce mediante la regulacin de objetivos 4x, 10x, 40x la imagen que el ojo humano
logre ver por medio de la interaccin de la luz ultravioleta (natural) las figuras plasmadas
en lente (ocular).
























PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. Cules son los poderes del microscopio y como pudo comprobarlos en su
trabajo?

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden
verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia
es menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de
onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder separador mximo
conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la longitud de onda de la luz
azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 y este es
comprobado al cambiar los objetivos vindose cada vez ms separadas las partculas de
polen o de polvillo de mariposa.

Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo
respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las
aberraciones de las lentes utilizadas y se comprob al enfocar la superficie del corcho
observndose una red producida por la celulosa que alguna perteneci a clulas vivas.
Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin entre
el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir
que si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos
viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de
la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est
proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al
objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y
un ocular de 10X, la ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X =
450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin
expresado como 450 dimetros.

2. Por qu es importante utilizar el microscopio en el estudio de la biologa?
Es importante el uso del microscopio en el estudio de la biologa debido a que los
microrganismo tienen intervencin en todos los procesos biolgicos que demandan una
interaccin de estos as como clulas y tejidos a nivel microscpico que para su estudio
se hace necesario superar estas limitaciones, gracias al desarrollo tecnolgico que ha
permitido la construccin de instrumentos de laboratorio, tales como el microscopio, el
cual permite la observacin y obtencin de imgenes aumentadas de esos especmenes
diminutos, que a simple vista resultan invisibles.
El microscopio ha sido y ser el instrumento de mayor utilidad en el estudio de las clulas
y tejidos.

3. Qu relacin existe entre el poder de aumento de los objetivos y el rea del
campo visual?
El campo del microscopio es el crculo visible que se observa a travs del microscopio,
por lo que podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a travs del
microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el
campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio.

4. Explique Por qu en la medida que aumenta los objetivos disminuye el nmero
de alas de mariposa y granos de polen?
En la medida en que se aumentan los objetivos el nmero de alas disminuye debido al
poder separador del microscopio lo que permite una mayor definicin pero de un rea de
campo ms pequea puesto que la lente del objetivo es ms convexa y registra un campo
menor de visin.




5. Cules pueden ser las causas de daos de los lentes del microscopio?

Los lentes del microscopio se marquen con el uso normal aunque los limpies
inadecuadamente. La mayora de las veces es un hongo que se implanta por humedad y
otras causas. Tantos los objetivos como los oculares son lentes compuestos y en el
acople se utilizan adhesivos transparentes y si quedaron vacos inter lentes pueden ser
ocupados por dicha infeccin y dar la impresin visual que son daos.

6. Consulte los tipos de microscopios y sus caractersticas principales
El microscopio compuesto u ptico utiliza lentes para ampliar las imgenes de
los objetos observados. El aumento obtenido con estos microscopios es reducido,
debido a la longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones. El
microscopio ptico puede ser monocular, y consta de un solo tubo. La observacin
en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La
observacin se hace con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor
percepcin de la imagen, ms cmoda la observacin y se perciben con mayor
nitidez los detalles.
Microscopio estereoscpico: el microscopio estereoscpico hace posible la
visin tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos
pares para cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones
que requieren pequeos aumentos. El ptimo de visin estereoscpica se
encuentra entre 2 y 40X o aumento total del microscopio.
Microscopio de campo oscuro. Este microscopio est provisto de un
condensador paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren
directamente en el objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparacin. Los
objetos aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.
Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen
algunas sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones
energticas. El tratamiento del material biolgico con flurocromos facilita la
observacin al microscopio.
Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la
trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la
preparacin.

7. Por qu la imagen aparece invertida en el microscopio compuesto?
Dado que dos lentes convexas bastan para construir un microscopio, donde cada lente
hace converger los rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se
sita cerca del objeto que se quiere estudiar. El objetivo forma una imagen real
aumentada e invertida. Se dice que la imagen es real porque los rayos luminosos pasan
realmente por el lugar de la imagen. La imagen es observada por la segunda lente,
llamada ocular, que acta sencillamente como una lupa. El ocular est situado de modo
que no forma una segunda imagen real, sino que hace divergir los rayos luminosos, que al
entrar en el ojo del observador parecen proceder de una gran imagen invertida situada
ms all del objetivo. Como los rayos luminosos no pasan realmente por ese lugar, se
dice que la imagen es virtual.

































CONCLUSION

Desde hace siglos desde que Antonie van Leeuwenhoek realiz las primeras
observaciones de microorganismos en un microscopio ideado por l, las siguientes
generaciones no se detuvieron y realizaron importantes avances en el desarrollo
de ella como ciencia. Hoy en da existen potentes microscopios y al ser tan costos
y delicados, por ello y para as tener xito al momento de realizar observaciones
es necesario identificar y recocer cada una de sus partes y la forma en cmo se
deben manejar los enfoques presentes en el revlver (4x, 10x, 40x, 100x)
haciendo observaciones con cada uno de ellos, con polen se observ a de dalle
una especie de escama de que cubre el ala de la mariposa, seguidamente se
realiz con xito observaciones en los tres enfoque de diferente aumento el polen
de la flor de boche, microfibras de lana, la estructura del corcho y la letra e de un
peridico.




































BIBLIOGRAFIA

REID, Chan. Microbiologa Cuarta Edicin. Editorial Mc Graw Hill.,Mxico, 1993.
BROCK, Thomas. MADIGAN, Michael. Microbiologa. Editorial Prentice Hall,
Mxico, 1993.