Prof. Dr.

Carlos Alberto de Almeida Gadelha

Protenas
Novembro de 201
Universidade Federal da Paraba
Departamento de Biologia Molecular
Disciplina de Bioqumica
Estrutura de Protenas
Nveis Estruturais das Protenas
Estrutura de Protenas
ESTRUTURA SECUNDRIA
Estrutura de Protenas
ESTRUTURA SECUNDRIA
Estrutura de Protenas
ESTRUTURA TERCIRIA
Estrutura de Protenas
FORAS QUE ESTABILIZAM A ESTRUTURA TERCIRIA
Estrutura de Protenas
FORAS QUE ESTABILIZAM A ESTRUTURA TERCIRIA
Estrutura de Protenas
ESTRUTURA QUATERNRIA
Desnaturao
Perda da estrutura secundria e terciria da protena fazendo
com que a mesma mude a sua estrutura tridimensional natural
(conformao nativa ou funcional) para uma estrutura ao acaso.
DESNATURAO Perda da atividade biolgica da protena
Pode ser um processo reversvel (Anfisen, 1964).
Fatores que provocam desnaturao:
- Mudanas de pH;
- Mudanas de temperatura;
- Solventes orgnicos;
- Detergentes;
- Uria.
Desnaturao
Experimento de Anfisen
Desnaturao
Exemplos
Protenas diferem em contedo e sequncia de
aminocidos e, portanto, tambm diferem nas
suas curvas de titulao cido-base e nos seus pH
isoeltricos. Essas diferenas so aproveitadas na
separao e purificao de protenas.
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
INTRODUO
As protenas tm solubilidade mnima no seu pH
isoeltrico (pI); podendo ser separadas de outras
numa mistura por precipitao no pH isoeltrico
com sais neutros, tal como sulfato de amnio ou
solutos neutros, tais como etanol e acetona, que
fazem com que as protenas tornem-se menos
solveis.
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
PRECIPITAO NO pH ISOELTRICO
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
PONTO ISOELTRICO (pI) DE ALGUMAS
PROTENAS
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
ELETROFORESE
Uma molcula com carga eltrica lquida move-se
em um campo eltrico. Esse fenmeno, denominado
eletroforese, oferece um meio poderoso de separao
de protenas.
Mobilidade da Protena Carga Eltrica
Massa
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
ELETROFORESE
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
ELETROFORESE
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
ELETROFORESE
Filtrao molecular - separa com base no
tamanho ou peso molecular.
Troca inica - separa com base na carga
lquida das protenas.
Afinidade - separa com base na afinidade de
muitas protenas por grupos qumicos
especficos.
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
CROMATOGRAFIA
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
COLUNA CROMATOGRAFICA
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
CROMATOGRAFIA DE EXCLUSO
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
CROMATOGRAFIA DE EXCLUSO
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
CROMATOGRAFIA DE TROCA INICA
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
CROMATOGRAFIA DE TROCA INICA
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
SEQUENCIAMENTO
TCNICAS DE SEPARAO E
PURIFICAO DE PROTENAS
ARVORES FILOGENTICAS