Apostila Bioquimica Clinica Prof Tarcizio

Centro Universitrio Augusto Motta Faculdade de Farmcia Bioqumica Clnica
APOSTILA DE BIOQUMICA CLNICA

Prof. Tarcizio Jos dos Santos Filho
Farmacutico Bioqumico (FF/UFRJ) Mestre em Cincias Qumica de Produtos Naturais Sntese Orgnica (NPPN/UFRJ) Professor de Bioqumica Clnica UNISUAM (BS-JP-CG)
tarciziosantos@gmail.com
Rio de Janeiro 2010
Relao de Captulos dos Livros-Texto Utilizados neste Curso

ASSUNTO 1. Tcnicas Analticas em Bioqumica Clnica 2. Protenas Plasmticas 3. Nitrogenados No-Proticos 4. Eletrlitos e Gases Sanguneos 5. Carboidratos 6. Lipdios 7. Doena Heptica 8. Doena Cardiovascular 9. Urinlise
Captulo
TIETZ 4e6 18 21 24 22 23 19 e 36 19 e 33 HENRY 3 13 10 9 11 12 14 15 18
Bioqumica Clnica - Prof. Tarcizio J.S. Filho, M.Sc
Bibliografia Recomendada
HENRY, John Bernard. Diagnsticos Clnicos e Tratamento por Mtodos Laboratoriais. 20 ed. So Paulo: Editora Manole, 2008.
BURTIS, Carl A.; ASHWOOD, Edward R. Tietz: fundamentos de qumica clnica. 6 ed. Rio de Janeiro: Editora Saunders Elsevier, 2008.
Tcnicas Analticas em
Bioqumica Clnica
Sumrio
TCNICAS ANALTICAS EM BIOQUMICA CLNICA
Fotometria de Reflexo
Espectrofotometria de Emisso de Chama
Fotometria e Espectrofotometria
Espectrofotometria de Absoro Atmica Fluorimetria
Citometria de Fluxo
Hematofluormetro
Fosforimetria
Quimioluminescncia
Luminometria Nefelometria e Turbidimetria
Bioluminescncia Eletroquimioluminescncia
Gel de Amido e Acetato de Celulose ELETROFORESE Gel de Agarose Gel de Poliacrilamida

MTODOS PTICOS TIPO

Absoro atmica Densitometria ABSORO Espectroscopia de luz IV/FT Fotometria Espectrofotometria Espectrofotometria de emisso de chama Fluorimetria EMISSO Luminometria (luz emitida de Luminescncia, Quimioluminescncia ou reao de Eletroquimioluminescncia) Fosforimetria POLARIZAO DISPERSO Espectroscopia de polarizao de fluorescncia, polarimetria Nefelometria e Turbidimetria
EXEMPLO
Tcnicas pticas
Fotometria Medida da intensidade luminosa ou a quantidade de luminosidade incidente em uma superfcie, independente do comprimento de onda.
Espectrofotometria Trata da medida da intensidade da luz EM COMPRIMENTOS DE ONDAS SELECIONADOS (Espectros)
Comprimentos de onda
Luz: energia radiante das regies de luz visvel e ultravioleta do espectro (290 a 800 nm)
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Luz: Dualidade Onda-Partcula A luz no somente uma onda eletromagntica, podendo tambm se comportar como se fosse composta de pacotes discretos de energia chamados ftons, cuja energia inversamente proporcional ao comprimento de onda.
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Transmitncia e Absorbncia Quando um feixe de luz incidente com intensidade I0 passa atravs de uma clula quadrada contendo uma soluo com um composto que absorve luz em comprimento de onda especfico, , a intensidade do feixe de luz transmitida IS inferior a I0, e a luz transmitida definida como:
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Transmitncia e Absorbncia Parte da luz incidente, entretanto, pode ser refletida pela superfcie ou absorvida pela parede da clula ou solvente. Estes fatores so eliminados pela utilizao de uma clula de referncia idntica da amostra. Absorbncia:
Transmitncia:
Na prtica, faz-se o ajuste com o branco (as duas cubetas so inseridas simultaneamente)
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Transmitncia e Absorbncia
Conceitualmente: Transmitncia = A medida da intensidade de um feixe luminoso que atravessa um meio (no caso, a soluo analisada) cuja densidade seja diferente da densidade do solvente (utilizado na soluo). Absorbncia = O quanto de luz que esse meio capaz de absorver em relao clula de referncia (branco).
Ou: Transmitncia = o quanto que passa de luz Absorbncia = o quanto que fica de luz
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Lei de Lambert-Beer
Lei resultante da fuso dos conceitos estabelecidos pela lei de Lambert e a Lei de Beer. Lei de Lambert A TRANSMITNCIA diminui exponencialmente medida que a ESPESSURA DO MEIO ABSORVENTE aumenta aritmeticamente.
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Lei de Beer
A TRANSMITNCIA diminui exponencialmente medida que a CONCENTRAO do meio aumenta aritmeticamente.
Assim, a lei de Beer a mais adequadamente aplicada s tcnicas de espectrofotometria. Porm, no podemos esquecer da lei de Lambert, pois certos concursos gostam de perguntar justamente o que voc acha que sabe! Querem ver?
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Lei de Beer
Matematicamente, a lei de Beer pode ser expressa por:
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Lei de Beer
A proporcionalidade direta entre a absorbncia e a concentrao deve ser estabelecida experimentalmente para um determinado instrumento sob condies especificadas. Freqentemente existe uma relao linear at certa concentrao ou absorbncia, at onde a soluo respeita a Lei de Beer. Na prtica, quando a soluo alcana concentrao tal que a relao linear com a absorbncia perdida, procede-se a diluio da amostra, multiplicando o valor experimental obtido pelo nmero de diluies realizadas.
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Lei de Beer
Assim, a Lei de Beer s seguida se:
1. A radiao incidente sobre a substncia de interesse monocromtica 2. A absoro pelo solvente insignificante, quando comparada com a absorbncia do soluto 3. A concentrao do soluto est dentro dos limites 4. No h interferncia ptica 5. No ocorre reao qumica entre a molcula de interesse e outra molcula do soluto ou solvente
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Espectrofotometria
Espectrofotometria de UV quando a fonte luminosa emite radiao na faixa ULTRAVIOLETA (entre 180 e 390 nm). Espectrofotometria de IV quando a fonte luminosa emite radiao na faixa do INFRAVERMELHO (770 e 12.000 nm).
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Fotometria de Reflexo
A luz difundida incide em uma mistura de reao localizada em um carreador, e a luz refletida medida. A intensidade da luz refletida comparada, ento, com a intensidade da luz refletida em uma superfcie de referncia.
Espectrofotometria de Emisso de Chama Baseia-se nas caractersticas de emisso de luz por tomos de diversos elementos metlicos quando fornecida energia suficiente, como, por exemplo, uma chama quente. Principal uso dosagem de : LTIO SDIO POTSSIO
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Espectrofotometria de Absoro Atmica Nesta tcnica, o elemento contido na amostra excitado pela chama (que no o faz
adequadamente), e a energia radiante, obtida ao longo do processo, medida enquanto o

elemento retorna ao nvel de mais baixa energia.
Quando a luz da lmpada de catodo oco penetra na chama produzida pela queima do
elemento na amostra, parte dessa luz absorvida pelos tomos no estado fundamental, levando reduo da intensidade dos raios na chama. Este processo denominado Absoro Atmica.
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Espectrofotometria de Absoro Atmica A lmpada de ctodo oco utilizada constituda do prprio material a ser analisado, a fim
de produzir um comprimento de onda de luz especfico do material.

Ex.: Catodo de sdio comprimento de onda 589 nm indicado para medir sdio. Em geral, a AA 100 vezes mais sensvel que a emisso de chama, e tambm mais especfica
para cada elemento, graas ao comprimento de onda da lmpada de catodo seco.
Lmpada de Brio
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Fluorimetria
A fluorescncia ocorre quando uma molcula absorve luz em um comprimento de onda e a reemite em comprimento de onda maior. A fluorimetria definida como a medio da fluorescncia da luz emitida por um tomo ou molcula.
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Tipos de fluormetros e espectrofluormetros

Citmetro de fluxo Citometria refere-se medida fsica e/ou qumica de caractersticas celulares, ou por
extenso, outras partculas biolgicas (plaquetas, por exemplo). A citometria de fluxo combina fluorimetria induzida por laser e anlise de disperso da luz
em partculas pela forma e tamanho, utilizando luz baixa e disperso de luz em ngulo reto.
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Citmetro de fluxo
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Hematofluormetro O hematofluormetro um fotofluormetro de superficie frontal com canal simples dedicado anlise de zinco protoporfirina no sangue total Um hematofluormetro tpico utiliza uma lmpada de quartzo e tungstnio. Uma gota de sangue total depositada sobre um pequeno vidro retangular que funciona como cubeta.
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Nefelometria e Turbidimetria
A disperso da luz um fenmeno fsico resultante da interao da luz com partculas em

soluo. A nefelometria e a turbidimetria so tcnicas analticas utilizadas para medir a luz dispersa.
Turbidimetria: A turbidez diminui a intensidade do feixe de luz incidente enquanto este passa por uma
soluo contendo partculas. A turbidimetria mede a diminuio desta intensidade.
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Nefelometria
A nefelometria definida como a deteco de energia da luz dispersa ou refletida em direo a um detector que no se encontra na trajetria direta da luz transmitida.
Alguns nefelmetros so projetados para medir a luz dispersa em ngulos diferentes de 90 para aproveitar o aumento na intensidade para frente causada pela disperso da luz por partculas maiores (Ex.: Complexos Imunes)
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ELETROFORESE
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ELETROFORESE
Refere-se migrao de partculas ou solutos carregados em um meio lquido sob a influncia de um campo eltrico.
ELETROFORESE ZONAL
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a tcnica mais comumente usada em aplicaes clnicas, onde as molculas carregadas migram em zonas, normalmente em um meio de suporte poroso, como um gel de agarose, aps a amostra ter sido misturada a uma soluo-tampo. gerado um eletroferograma, uma representao de zonas de protenas, cada uma finamente separada das zonas vizinhas sobre o material de suporte.
Eletroferograma e zonas de protenas
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ELETROFORESE ZONAL
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As zonas de protena so visualizadas quando o meio de suporte corado com um corante especfico para protena. O meio, ento, seco, e as zonas so quantificadas em um densitmetro. O meio de suporte seco e mantido como um registro permanente.
TEORIA DA ELETROFORESE
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- Espcies qumicas carregadas eletricamente (por ionizao) movem-se em direo ao catodo
(eletrodo negativo) ou ao anodo (eletrodo positivo), dependendo da carga que possuem.

- Os ons positivos (ctions) migram em direo ao catodo, e os ions negativos (nions) migram em direo ao anodo.
- Molculas ANFLITAS, que so carregadas tanto positiva quanto negativamente, adquirem

uma carga positiva em uma soluo mais cida do que seu ponto isoeltrico, e migram em direo ao catodo.
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RELEMBRANDO: Ponto Isoeltrico!
O VALOR DO pH ONDE UMA MOLCULA, POR EXEMPLO UMA PROTENA OU AMINOCIDO,

APRESENTA CARGA ELTRICA LQUIDA IGUAL A ZERO = H EQUILBRIO ENTRE AS CARGAS NEGATIVAS E POSITIVAS DOS GRUPOS INICOS DE UM AA OU PROTENA
TEORIA DA ELETROFORESE A velocidade de migrao dependente de fatores tais como: 1. Carga eltrica lquida da molcula 2. Tamanho e forma da molcula 3. Fora do Campo Eltrico 4. Propriedades do meio de suporte 5. Temperatura de operao
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A mobilidade eletrofortica () definida como a velocidade de migrao (cm/s) por unidade de fora de campo (volts/cm):
DESCRIO TCNICA Tampo 1. Conduz a corrente aplicada 2. Estabiliza o pH no qual a eletroforese realizada 3. Determina a carga eltrica do soluto
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4. Sua fora inica influencia na condutncia do suporte, densidade da nuvem inica em torno da molcula carregada, a velocidade da sua migrao e a nitidez das zonas eletroforticas
Meios de suporte 1. Gel de amido e acetato de celulose 2. Agarose 3. Poliacrilamida
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Quantificao das Zonas de Protenas
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Tipo de separao
Colorao Amido Black (Naftol Azul Preto)
Protenas Sricas em geral
Azul Brilhante de Coomassie Ponceau-S Fat Red 7B (Vermelho de Sudan 7B)
Zonas de Lipoprotenas
leo vermelho 7B (Oil Red O) Preto de Sudan B (Sudan Black B)
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Protenas Plasmticas
Sumrio
PROTENAS PLASMTICAS
Pr-Albumina Albumina 1- Antitripsina 2 Macroglobulina Metabolismo da vitamina A (Transtiretina) Principal protena plasmtica Modula a protelise endgena Inibidor de proteinases / Ptn volumosa
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Haptoglobina
-Lipoprotena Transferrina (siderofilina)
Ligante da Hb livre
LDL Transporte de ferro para sntese de Heme
Complemento
Fibrinognio Ceruloplasmina
Protenas da imunidade humoral inata

Mais importante fator de coagulao Protena ligante do cobre
Globulina Gc
Hemopexina Glicoprotena 1-cida (orosomucide)
Ligante da vitamina D
Ligante do Heme Ligante de progesterona e outros lipfilos
Protena C-Reativa
Ligante de Fosfatidilcolina e cidos nucleicos
ESTRUTURA DAS PROTENAS
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Primria: Seqncia linear de aminocidos
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Secundria: Configuraes tridimensionais regulares = -hlice, -pregueadas e encurvadas

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Terciria: Tridimensional real ou padro de dobramento da protena singularmente determinado pela sua seqncia de aminocidos
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Quaternria: Complexos mais estveis, como dmeros, trmetros e tetrmeros

PADRO ELETROFORTICO DE SEPARAO
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Outros Mtodos de Separao Precipitao
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Desenvolvida para caracterizar a albumina e as globulinas em duas ou mais fraes que podem ser quantificadas em termos de contedo protico.
Com adio de Sulfato de Sdio, Sulfito de Sdio, Metanol ou Sulfato de Amnio, as

globulinas tendem a precipitar, deixando a albumina em soluo.
Outros Mtodos de Separao

Separao em Colunas - Prolas de Sephadex (excluso)
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- Cromatografia de troca inica
DETECO E QUANTIFICAO DE PROTENAS

Tcnica de Kjeldahl Mtodo de referncia baseado na anlise do teor de nitrognio
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Consiste da digesto cida para liberar os ons amnia de compostos contendo nitrognio (inespecfico)
DETECO E QUANTIFICAO DE PROTENAS

Tcnica de Kjeldahl
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A amnia ento quantificada por converso em gs amnia e titulao como uma base ou pela nesslerizao, na qual iodetos duplos (potssico e mercrico) formam um complexo colorido com a amnia em meio bsico.
OBS.: Por espectroscopia, as protenas em soluo absorvem a luz ULTRAVIOLETA em 280 nm, devido principalmente presena de TRIPTOFANO, TIROSINA E FENILALANINA
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MTODOS TURBIDIMTRICOS
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Mtodo do BIURETO Reao colorimtrica altamente especfica para protenas e peptdeos Detecta a presena de ligaes peptdicas. Ocorre em meio bsico
Padro negativo (Somente H2O) H2O + Biureto
Biureto + Albumina (Complexo prpura)
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Mtodo de FOLIN-CIOCALTEU
Altamente sensvel, detectando a presena de aminocidos aromticos Reagente tambm chamado:
REAGENTE FENOL ou CIDO FOSFOTUNGSTOMOLBDICO (mistura de fosfomolibdato e

fosfotungstato) Este reagente OXIDA os compostos fenlicos, como TIROSINA, TRIPTOFANO e HISTIDINA,
para fornecer uma colorao AZUL PROFUNDA
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Mtodo de LOWRY Consiste na utilizao do mtodo do Biureto seguido do reagente de Folin-Ciocalteu, a fim de potencializar a formao de cor.
CORANTE AZUL BRILHANTE DE COOMASSIE Confere ainda mais sensibilidade ao mtodo, com deteco de at 1 g de protena, e no sofre a interferncia de uma variedade de substncias.
CORANTE NINIDRINA
Possui sensibilidade semelhante ao anterior, mas desenvolve uma cor violeta ao reagir com aminas primrias.
QUANTIFICAO DE ALBUMINA
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possvel a deteco especfica de albumina atravs da ligao com os seguintes corantes: - AZUL DE BROMOFENOL - LARANJA DE METILA - CIDO HIDROXIBENZENOAZOBENZNIO (HABA) - PRPURA DE BROMOCRESOL - VERDE DE BROMOCRESOL Muito utilizado nos analisadores automatizados
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PROTENAS PLASMTICAS ESPECFICAS
Propriedades - As protenas normalmente esto listadas na ordem de duas mobilidades eletroforticas em gis de agarose em pH 8,6. - A maioria das protenas plasmticas sintetizada no fgado, com poucas excees (ex.: Imunoglobulinas) e l tambm catabolizada a maioria delas. - Aps uma leso, algumas protenas plasmticas apresentam alterao em suas concentraes, resultante de uma resposta ou REAO DE FASE AGUDA. As protenas que se alteram nesses casos so conhecidas como PROTENAS DE FASE AGUDA (APP). Essa resposta pode ser POSITIVA ou NEGATIVA, e as protenas listadas como APP+ ou APP-.
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APP + 1-Antitripsina 1-Glicoprotena cida
APPTranstirretina Albumina
Haptoglobina Ceruloplasmina C3 e C4
Protena C-Reativa
Transferrina
Principais Componentes
PROTENAS PLASMTICAS
Pr-Albumina Albumina 1- Antitripsina 2 Macroglobulina Haptoglobina -Lipoprotena Transferrina (siderofilina) Complemento Fibrinognio Ceruloplasmina Globulina Gc Hemopexina Glicoprotena 1-cida (orosomucide) Protena C-Reativa
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Metabolismo da vitamina A (Transtiretina) Principal protena plasmtica Modula a protelise endgena Inibidor de proteinases / Ptn volumosa Ligante da Hb livre LDL Transporte de ferro para sntese de Heme Protenas da imunidade humoral inata Mais importante fator de coagulao Protena ligante do cobre Ligante da vitamina D Ligante do Heme Ligante de progesterona e outros lipfilos Ligante de Fosfatidilcolina e cidos nucleicos
PR-ALBUMINA (transtiretina)
-Eletroforeticamente, a frao que migra mais rpido que a albumina em direo ao nodo - uma das menores protenas sricas
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- Contm stios de ligao aos hormnios T3 e T4, transportando 10% destes. - NO A PRINCIPAL TRANSPORTADORA DESSES HORMNIOS! a Globulina ligante da tiroxina.
- Possui papel importante no metabolismo da VITAMINA A, ao complexar-se com a PROTENA LIGANTE DO RETINOL (RBP). A RBP tem sntese dependente de zinco e ocorre no fgado. - rica em TRIPTOFANO APP-
- Possui meia vida de dois dias, sendo um importante marcador nutricional, visto sua sntese ser sensvel ingesto de dieta adequada e s alteraes da funo heptica. (KWASHIORKOR e MARASMO)
ALBUMINA
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- Protena mais abundante do plasma sanguneo e altamente solvel em gua, por sua alta carga negativa em pH fisiolgico. - Constitui at 2/3 das protenas plasmticas totais. - Sintetizada no fgado, atua como repositrio mvel de aminocidos para incorporao a outras protenas. - Importante transportador de vrias substncias pelo plasma, tais como tiroxina, bilirrubina, penicilina, cortisol, estrognio, cidos graxos livres, warfarina, clcio, magnsio e outros ons metlicos, heme e fosfolipdios. - Meia vida de +/- 17 dias importante para o monitoramento de curto prazo da glicemia mdia (ensaio da frutosamina)
APP-
ALBUMINA
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- Sua principal funo manter a presso osmtica coloidal, tanto nos espaos vasculares quanto extravasculares.
AUMENTO Raro, como na desidratao (aumento relativo)

REDUO Secundria desnutrio Cirrose: A reduo na sntese heptica em hepatopatias compensada pela produo policlonal das imunoglobulinas (frao ) Sndrome Nefrtica (perda pela urina, albuminria macia): compensada pela 2macroglobulina Outras: - Analbuminemia (deficincia gentica rara) - Inflamao (hemodiluio, consumo pelas clulas, sntese reduzida) - Perda GI - M nutrio - Edema e ascite
ALBUMINA
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Anlise Laboratorial: Feita por mtodos automatizados de ligao a corantes, usando os corantes VERDE DE BROMOCRESOL ou PRPURA DE BROMOCRESOL.
Obs.: - A 1-fetoprotena um anlogo da albumina, sendo uma das primeiras -globulinas a aparecer no soro de mamferos durante o desenvolvimento do embrio. - Tambm a protena srica dominante no incio da fase embrionria.
- Ela reaparece no soro de adultos durante certas patologias, tais como Carcinomas
Hepatocelulares.
GLICOPROTENA 1-CIDA (OROSOMUCIDE)
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- Tambm conhecida como OROSOMUCIDE, pelo alto percentual de carboidrato com um grande nmero de resduos de cido silico Carga lquida negativa alta, alta solubilidade. - sintetizada pelo fgado e precipita-se com HClO4. - classificada como uma das LIPOCALINAS, protenas que se ligam a substncias lipoflicas.
- Liga-se a e inativa hormnios bsicos e lipoflicos, tais como a progesterona.

- capaz de se ligar e reduzir a biodisponibilidade de frmacos como propranolol, quinidina, clorpromazina, cocana e benzodiazepnicos.
Aumento: Doena inflamatria GI e Neoplasias Malignas e em uso de corticosterides e AINES.

Reduo: Sndrome Nefrtica, durante a gravidez ou em uso de contraceptivos orais (sntese). Visualizada bem pelo CIDO PERIDICO DE SCHIFF (PAS) APP+
1- ANTITRIPSINA
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- uma SERPINA (inibidor da serina protease) que inativa as serinas proteases, especialmente as relacionadas com a tripsina. o inibidor de proteinase mais abundante no plasma. -Inibidor da elastase leucocitria liberada no processo de fagocitose pelos leuccitos, alm de reagir com a elastina da rvore traqueobrnquica e do endotlio vascular. - Inibe a resposta bioqumica inadequadamente grave inflamao (APP+) - A elastase no-inibida na rvore brnquica em virtude do excesso de elastase ou de deficincia de 1-antitripsina pode resultar em perda do recolhimento elstico e desenvolvimento do enfisema pulmonar (e outras condies, como sndrome do desconforto respiratrio neonatal). AUMENTO Gravidez REDUO Pancreatite Grave Sndrome Nefrtica
GLOBULINA Gc
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Importante no metabolismo da vitamina D, pois esta ligase a um componente grupo-especfico da globulina (Gc) Liga-se vitamina D e seus metablitos mol por mol.
Mostra-se reduzida na sndrome nefrtica, levando perda de vitamina D. Esta perda pode contribuir para os problemas subseqentes do metabolismo do clcio encontrados na sndrome nefrtica.
2 MACROGLOBULINA - um importante inibidor de proteinases do plasma.
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-No uma protena de fase aguda
- Diferente dos outros inibidores de proteinase, uma molcula MUITO GRANDE, e no se difunde do espao plasmtico para os lquidos extracelulares em quantidades significativas.
- Sua concentrao aumenta 10 vezes ou mais na sndrome nefrtica quando outras protenas menores so perdidas (mecanismo compensatrio osmtico)
- Concentraes baixas observadas em indivduos com pancreatite aguda grave e, antes do tratamento, em indivduos com carcinoma avanado de prstata.
HAPTOGLOBINA
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- Tem como principal funo a ligao hemoglobina liberada pela lise dos eritrcitos, a fim de preservar as reservas de ferro e protenas. - Os complexos Hp-Hb so grandes o suficiente para evitar a perda renal de Hb e seu Ferro. - Esse complexo uma peroxidase potente, capaz de hidrolisar perxidos liberados durante a fagocitose pelos leuccitos polimorfonucleares nos stios de inflamao. - Possui grande importncia como BACTERIOSTTICO para bactrias que requerem ferro, tais como Escherichia coli, evitando o uso do ferro por esses organismos.
- APP+: Concentrao srica elevada em resposta ao estresse, infeco, inflamao aguda ou necrose tecidual, provavelmente por estimulao sntese.
- Ela deve ser sempre analisada sempre em associao orosomucide, pois excesso das sndromes de perda protica, todos os outros fatores influenciam na concentrao de ambas em paralelo. Obs.: A mioglobina no se liga a ela! Logo, no h reduo em casos de rabdomilise
CERULOPLASMINA
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Contm aproximadamente 95% do cobre srico total, o que confere a ela uma colorao azulada (lembrar do biureto). Funciona como oxidante ou antioxidante, dependendo de fatores, tais como a presena de ons frricos livres e stios de ligao da ferritina. (APP+) Possui vital importncia na manuteno do estado inico do ferro.
-LIPOPROTENA
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Corresponde frao LDL das lipoprotenas plasmticas. Na eletroforese zonal, geralmente no visualizada quando utilizadas coloraes para protenas (azul brilhante de coomassie, amido black, ponceau S) Ser melhor abordada na aula de lipdios.
2-MICROGLOBULINA
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Encontrada nas superfcies celulares das clulas nucleadas (antgeno de superfcie) Corresponde cadeia leve dos antgenos leucocitrios humanos (HLA). AUMENTO Insuficincia Renal, Inflamao e Neoplasias, especialmente as associadas aos Linfcitos B. PRINCIPAL VALOR CLNICO Teste da funo tubular em indivduos expostos a metais pesados e transplantados
TRANSFERRINA (SIDEROFILINA) - a principal protena plasmtica de transporte de FERRO.
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-O complexo TRF-Fe3+ transporta o ferro para as clulas para incorporao nos citocromos, Hb e mioglobina e, para os locais de reserva, tais como fgado e sistema reticuloendotelial.
- A avaliao das concentraes plasmticas de TRF til para o diagnstico diferencial da anemia e para o monitoramento do tratamento da anemia ferropriva. DEFICINCIA DE FERRO: TRF Elevada, mas a protena est menos saturada com ferro.
FALHA NA INCORPORAO DE FERRO: TRF Normal ou Baixa, mas a protena est muito saturada com ferro.
SOBRECARGA DE FERRO: TRF Normal, com saturao aumentada. -Altas concentraes de TRF so observadas na gravidez e em administrao de estrgenos. OBS.: A Neisseria gonorrhoeae capaz de roubar o ferro da transferrina
HEMOPEXINA
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- Protena com a propriedade de se ligar ao HEME liberado pela degradao da hemoglobina, protegendo-a da excreo e contribuindo para a manuteno das reservas de ferro.
- Encontra-se em concentraes muito baixas (50 a 120 mg/dL), devendo ser quantificada por mtodos imunes.
- As redues mais profundas ocorrem aps hemlise intravascular, quando a quantidade de hemoglobina livre excede a capacidade de ligao da haptoglobina.
HEME + HPX FGADO

Enquanto a HPX no retorna, o HEME livre liga-se albumina
COMPLEMENTO - Conjunto de pelo menos 20 protenas pertencentes imunidade humoral inespecfica.
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-Interagem com complexos antgeno-anticorpo, ou entre si ou com membranas celulares de uma forma complexa, porm flexvel, para destruir vrus e bactrias e, em alguns casos, at mesmo as clulas do hospedeiro. APP+
Vias Clssica e Alternativa do Complemento
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Note que ambas dependem da presena de C3, justificando o fato desta ser a frao mais abundante das protenas do complemento.
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As fraes mais importantes so C3 e C4, principalmente C3, pois participa de todas as vias do complemento
FIBRINOGNIO o mais abundante dos fatores da coagulao sangunea, formador do cogulo de fibrina.
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FIBRINOGNIO
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FIBRINOGNIO
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AUMENTO - Sua concentrao encontra-se elevada com os outros reativos de fase aguda (APR+). - Neste caso, a Velocidade de Hemossedimentao (VHS) tambm encontra-se marcantemente elevada devido, diretamente, ao contedo de fibrinognio. - Na gravidez e uso de contraceptivos.
REDUO - Indicam extensa ativao da coagulao com consumo de fibrinognio.
Velocidade de Hemossedimentao (VHS) Ensaio no qual mede-se a taxa na qual os eritrcitos precipitam no perodo de uma hora.
PROTENA C-REATIVA
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- Foi descoberta como resultado da interao do soro de pacientes em recuperao de infeco pneumoccica com o polissacardeo C do pneumococo (Streptococcus pneumoniae). - As concentraes dela se elevam marcantemente sempre que houver necrose tecidual. - Est presente no soro e capaz de se ligar a restos celulares, agindo como uma seqestradora geral. Na presena de Ca2+ liga-se a vrios polinions (cidos nuclicos), fosfatidilcolinas e polissacardeos presentes em fungos, bactrias e protozorios. Na ausncia de Ca2+ se liga a polictions tais como as histonas. - Uma vez complexada, ativa a via clssica do complemento. uma das primeiras APR a se elevar em doenas inflamatrias e tambm a exibir os aumentos mais expressivos de concentrao. (APP+)
PROTENA C-REATIVA
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Geralmente quantificada pela sua capacidade de precipitar a substncia C (polissacardeo C), ou por mtodos imunes, incluindo nefelometria, precipitaes, radioimunoensaio e enzima imunoensaio. Um ensaio altamente sensvel para CRP pode contribuir com o valor preditivo dos lipdios sricos para identificar indivduos em risco de eventos cardiovasculares. muitas vezes utilizada pelos reumatologistas para monitorar a progresso ou a remisso de uma doena auto-imune. Em casos de infarto agudo do miocrdio, eleva-se 6 a 12 horas aps seu incio. Pode apresentar valores 2000 vezes maiores que o normal NORMAL: 100 ng/mL (recm-nascidos) 170 ng/mL (crianas) 430 a 1340 ng/mL (adultos) Com infeco intra-uterina, pode chegar a 26.000 g/mL
IMUNOGLOBULINAS
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IMUNOGLOBULINAS
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Tambm conhecidas como ANTICORPOS HUMORAIS, reconhecem antgenos estranhos e iniciam os mecanismos que os removem ou os destroem. Compostas de duas cadeias pesadas (H) iguais e duas cadeias leves (L) idnticas. So conhecidos 5 tipos: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM.
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IMUNOGLOBULINAS
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Imunoglobulina A - Existe como monmero de 4 cadeias (IgA1) ou como um dmero contendo duas dessas unidades (IgA2). - A forma dimrica chama-se IgA secretora, e encontra-se nas secrees corporais, tais como lgrimas, suor, saliva, leite, colostro, secreo gastrointesinal e secreo brnquica. - A IgA secretora composta das duas unidades monomricas com uma nica cadeia J (junction), (semelhante associada com a IgM pentamrica) e uma cadeia glicopeptdica adicional, denominada componente secretor. - Este componente secretor protege a IgA secretora (ou IgA2) da hidrlise por parte das enzimas proteolticas presentes nas secrees, e, por conseguinte, mais resistente destruio por bactrias patognicas. - Inibe a aderncia dos microorganismos superfcie das clulas da mucosa, impedindo sua penetrao. Envolvida em respostas contra parasitas por induzir a desgranulao dos eosinfilos.
- Tambm pode se ligar a antgenos alimentares, reduzindo a incidncia de reaes alrgicas.

IMUNOGLOBULINAS Imunoglobulina D
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Principal imunoglobulina de membrana na superfcie de Linfcitos B nav (virgens), especialmente de recm-nascidos. Ainda no possui funo primria conhecida (alm de ser marcador de superfcie de Linfcitos B, juntamente com a IgM)
IMUNOGLOBULINAS Imunoglobulina E
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A IgE to rapida e firmemente ligada a mastcitos que somente quantidades trao esto normalmente presentes no soro. Est envolvida nos processos de HIPERSENSIBILIDADE IMEDIATA. Quando o antigeno (alrgeno) faz ligao cruzada de duas molculas de IgE ligadas, o mastcito estimulado a liberar HISTAMINA e outras aminas vasoativas que so responsveis pela permeabilidade vascular e pela contrao do msculo liso, ocorrendo em reaes alrgicas como RINITE, ASMA, URTICRIA e ECZEMA.
Importante na resposta imune humoral a parasitas, uma vez que freqentemente encontrada em nveis elevados em soros de doentes parasitados por helmintos.
No atravessa a barreira placentria No fixa o complemento pela via clssica
IMUNOGLOBULINAS Imunoglobulina G
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- o istipo mais bem estudado, constituindo a principal imunoglobulina do sangue, produzida durante a RESPOSTA IMUNE SECUNDRIA. - So necessrias pelo menos duas molculas de IgG para a ativao do complemento. - So os nicos anticorpos capazes de atravessar a BARREIRA PLACENTRIA (proteo contra infeces nas duas primeiras semanas de vida do neonato) H 4 tipos de IgG: IgG1 IgG2 IgG3 IgG4
IMUNOGLOBULINAS Imunoglobulina G CLASSES FUNO
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IgG1
Principal a atravessar a placenta e a proteger os neonatos durante os primeiros 3 meses de vida. T1/2: 22 dias Subclasse dominante em humanos Forte relao com alergias em adultos Relacionada com as respostas celulares TCD8+ (T citotxicas) (patgenos intracelulares). Estimulada por IFN- e IL-2. T1/2: 22 dias NO ATRAVESSA A PLACENTA! a subclasse que mais eficientemente liga-se ao complemento pela via clssica. T1/2: 7 dias Incapaz de se ligar eficientemente ao complemento pela via clssica.
IgG2
IgG3
IgG4
IMUNOGLOBULINAS Imunoglobulina M
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- a classe mais abundante de anticorpos secretados no sangue na FASE INICIAL DE UMA RESPOSTA PRIMRIA POR ANTICORPOS. - Normalmente um pentmero: 5 unidades de 4 cadeias + cadeia J (junction) - uma MACROGLOBULINA! - a imunoglobulina mais primitiva e menos especializada, sendo a primeira classe de anticorpos a ser produzidas pelas clulas B em desenvolvimento. - Sua alta eficcia na ligao e ativao do sistema complemento, associada ao surgimento precoce durante o curso de uma infeco faz da IgM um agente particularmente potente no combate aos organismos invasores (s necessita de 1 molcula para ativar o complemento). - a nica imunoglobulina sintetizada por neonatos - No atravessa a placenta!!!
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Nitrogenados No-Proteicos
Sumrio
NITROGENADOS NO-PROTEICOS
Uria Condensao de CO2 + Amnia Reao de Fearon / Reao da Urease acoplada a Berthelot Reserva rpida de fosfato Reao de Jaffe (Reagente Picrato)
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Creatinina e Creatina
cido rico
Metablito de cidos Nuclicos (Purinas) Aumentada na Sndrome de Lesch-Nyhan Reao com Uricase Gera Alantona Mtodo de Caraway (Com Fosfotungstato Alcalino) Produto do catabolismo protico Aumentada na Sndrome de Reye Quantificao com Reagente de Nessler
Subunidades proticas Teste de Guthrie (Ensaio microbiolgico) TLC Fluorimetria com Fenilalanina + Cobre + Ninidrina
Amnia
Aminocidos
Nitrogenados No-Proticos (NPN)
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So formados no organismo como resultado do catabolismo de cidos nuclicos, aminocidos e protenas. A uria o principal composto NPN no plasma, constituindo 45% do total. A determinao de NPN no sangue tem sido usada como ndice da funo renal concentraes elevadas decorrem de funo renal reduzida [NPN] um ndice inespecfico para nefropatias, visto que outras doenas (gota, hepatopatias, hemorragias) podem variar a [NPN] plasmtica.
Principais NPN: - Creatinina - Uria - cido rico
Creatina e Creatinina
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- CREATINA: A creatina-fosfato a principal reserva de fosfato altamente energtico necessrio
ao metabolismo muscular.
- Sintetizada no fgado (principalmente), rins e pncreas a partir da arginina, glicina e metionina.
- A interconverso de fosfocreatina e da creatina uma caracterstica particular dos processos

metablicos da contrao muscular.
Creatina e Creatinina Importncia Clnica
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- A creatinina filtrada pelos glomrulos mas principalmente ou completamente reabsorvida pelos tbulos renais, sendo excretada a uma taxa constante, que proporcional massa muscular do indivduo. - Creatinina srica e urinria so usadas como ndices da funo renal, em virtude da constncia da formao da Creatinina (clearance) A renovao da creatinina constante: 1,0% a 2,0% da creatina total livre transformada a cada 24 h. - AUMENTO DA [CREATININA]srica REDUO DA TFGlomerular - A constncia da produo da creatinina a qualifica como MEDIDA DA TOTALIDADE DA COLETA DE URINA DE 24 h, atravs da quantificao da excreo urinria de creatinina. - [CREATININA] plasmtica Pouco afetada pela dieta
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Creatina e Creatinina Tcnicas Analticas: Mtodos Qumicos ou Enzimticos MTODOS QUMICOS
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Mtodo de JAFFE
-A creatinina reage com o on picrato num meio alcalino para resultar num complexo laranjaavermelhado. - atualmente o mtodo mais amplamente utilizado para a quantificao de creatinina.
Creatina e Creatinina Tcnicas Analticas: Mtodos Qumicos ou Enzimticos MTODOS QUMICOS
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Mtodo de JAFFE
- O mtodo est sujeito a interferncias de outras substncias: POSITIVAMENTE (reagem dando cor idntica): cido Ascrbico, Cefalosporinas, Glicose, Corpos Cetnicos, Piruvato, Frutose e cido rico. NEGATIVAMENTE: Bilirrubina, Hemoglobina, Amostras Lipmicas
ESTRATGIAS - Adio da Terra de Fuller (Reagente de Lloyd) Adsorvem os materiais no-creatinina das amostras. (desvantagem: trabalhoso!) - A correo do valor obtido com o branco capaz de eliminar a interferncia da bilirrubina.
Uria
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- A uria o principal produto excretado do catabolismo das protenas, sendo sintetizada no fgado a partir de CO2 e da amnia gerada pela desaminao dos aminocidos por meio do ciclo da ornitina ou do ciclo de Krebs-Henseleit.
- Mais de 90% excretada pelos rins, onde facilmente filtrada do plasma pelos glomrulos. Porm, de 40 a 80% so reabsorvidos por difuso passiva do tbulo renal para o interstcio, para retornar ao plasma. - Ela constitui aproximadamente metade dos slidos urinrios totais (~25g) e 80 a 90% do nitrognio urinrio total.
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Uria
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Uria
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- A doena renal associada ao acmulo de uria no sangue, visto esta ser excretada pelos rins. - O aumento da uria plasmtica caracteriza o estado urmico (azotemia).
IMPORTNCIA CLNICA -Tem sido utilizada como indicador da funo renal, embora a dosagem da creatinina proporcione informaes mais confiveis sobre essa atividade. - Atualmente, tem mais valor clnico como indicador da ingesto de nitrognio e do estado de hidratao do paciente do que da funo renal.
[URIA]plasmtica ELEVADA: Dieta rica em protenas Catabolismo protico elevado Reabsoro das protenas plasmticas aps hemorragia GI Tratamento com cortisol ou seus anlogos sintticos Desidratao Perfuso reduzida dos rins
Uria Tcnicas Analticas: Mtodos Qumicos ou Enzimticos MTODOS QUMICOS
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Reao de FEARON (mtodo direto)

- Condensao da diacetila com a uria para formar o cromgeno DIAZINA, que absorve fortemente a 540 nm. - Embora amplamente utilizado no passado, esse mtodo tem sido substitudo pelos mtodos enzimticos.
Uria Tcnicas Analticas: Mtodos Qumicos ou Enzimticos MTODOS ENZIMTICOS
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Hidrlise pela Urease Amnia : Quantificao por Espectroscopia A reao de BERTHELOT (mtodo indireto)
- A quantificao da amnia pode ser por vrios mtodos
Mtodo satisfatrio e de baixo custo, porm, com a desvantagem de ser muito sensvel contaminao com a amnia (de qualquer origem).
Uria Tcnicas Analticas: Mtodos Qumicos ou Enzimticos MTODOS ENZIMTICOS
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Ensaio Enzimtico com GLUTAMATO DESIDROGENASE (mtodo de referncia)
- Nos ensaios de plasma, o sistema reacional contm urease, de modo que a adio da amostra contendo uria inicia a reao.
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Relembrando: Estrutura de NAD+ e NADH
cido rico
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- O cido rico o produto final da degradao dos cidos nuclicos e do catabolismo das purinas em seres humanos (adenosina e guanosina). - Deriva de 3 fontes principais: Catabolismo das nucleoprotenas ingeridas Catabolismo das nucleoprotenas endgenas Transformao direta de purina-nucleotdeos endgenos - o principal composto nitrogenado do excremento dos rpteis e pssaros (e morcegos) - Encontrado em pequenas quantidades na urina dos mamferos, e seus sais ocorrem nas articulaes na gota. - um cido fraco, com pKa1 de 5,75 e um pKa2 de 10,3 A urina alcalina solubiliza o cido rico. Assim, no se formam clculos no trato urinrio.
cido rico Importncia Clnica
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- Existncia de diversos distrbios do metabolismo da purina.
Os sintomas que devem gerar suspeitas incluem: 1. Insuficincia renal ou clculos numa criana ou adulto jovem 2. Pedrinhas na fralda de um beb 3. Problemas neurolgicos inexplicveis num beb, criana ou adolescente. 4. Presena de gota num homem ou mulher com menos de 30 anos de idade. - A manifestao clnica mais evidente e importante da alterao plasmtica do cido rico a GOTA.
cido rico
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GOTA
- Condio hiperuricmica de variada etiologia. - Consiste no acmulo de cristais de cido rico nas articulaes. - Ocorre quando o urato monossdico se precipita dos lquidos corporais supersaturados. - A articulao do dedo do p (primeira metatarsofalngica) o stio clssico da gota.
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cido rico
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GOTA
- A artrite gotosa pode estar associada aos cristais de urato no lquido da articulao e a depsitos de cristais (tofos) no tecido que circunda a articulao. - Em qualquer lugar que ocorram, despertam uma resposta inflamatria intensa, consistindo de leuccitos polimorfonucleares e macrfagos. - A gota caracterizada por crises ocasionais e longos perodos de remisso. - Geralmente, durante uma crise gotosa a concentrao de cido rico plasmtica normal.
- A gota pode ser PRIMRIA ou SECUNDRIA:

PRIMRIA - Associao de superproduo metablica de purinas, excreo renal reduzida e ingesto alimentar elevada. - Pode tambm estar relacionada a defeitos enzimticos herdados na via metablica da purina.
cido rico
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GOTA
SNDROME DE LESCH-NYHAN - Caracteriza-se pela deficincia completa da enzima hipoxantina-guanina-fosforribosil transferase, a enzima principal da via alternativa da purina. - Manifesta-se clinicamente por: Retardo mental Movimentos musculares anormais Problemas comportamentais (automutilao e agressividade patolgica) -Nas primeiras semanas de vida: cristalria, insuficincia renal aguda e gota. -Os sintomas neurolgicos dessa sndrome podem estar relacionados com a disponibilidade de purinas para o crebro em desenvolvimento, o qual possui capacidade limitada para novas snteses de purina. Ele conta, portanto, com as vias alternativas de purina para abastec-lo com a maior parte dos nucleotideos purina que lhe so necessrios.
- Ocorre somente em indivduos do sexo masculino (relacionada ao cromossomo X).
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Sndrome de Lesch-Nyhan
Alopurinol
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OUTRAS FONTES PARA O CIDO RICO (ou melhor... Como voc quer piorar suas dores secundrias GOTA?)
Caf?
Chocolate?
Ou Ch?
cido rico
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GOTA
SECUNDRIA Resulta da hiperuricemia atribuvel a diversas causas identificveis. - Doena Renal aguda ou crnica de qualquer tipo. - Conseqncia da administrao de diurticos. - Acidemia orgnica ocasionada pela elevao do acetoacetato (cetoacidose diabtica) ou acidose lctica. - Aumento do catabolismo das purinas encontrado na proliferao rpida das clulas tumorais e na destruio ampla dessas clulas na terapia com certos agentes quimioterpicos.
cido rico Intervenes farmacolgicas
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- O Tratamento de crise aguda envolve uso de AINEs. Obs.: Convm evitar o uso de AAS, uma vez que os salicilatos provocam aumento de urato por inibir competitivamente com a excreo renal deste ltimo. - Abordagens especficas incluem: O uso de medicamentos uricosricos (probenecida, sulfinpirazona), que melhoram a excreo renal do cido rico, bloqueando os condutores nas clulas tubulares que modulam a reabsoro. Uso de alopurinol, que inibidor da enzima xantina oxidase.
cido rico Fatores que afetam a concentrao plasmtica de urato
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-Pacientes devem ser aconselhados a evitar: Alimentos que tenham contedo de purina elevado (fgado, rins, carne vermelha e sardinhas) Medicamentos que afetem a excreo de urato (diurticos tiazdicos e salicilatos) A ingesto de etanol freqentemente aumenta a concentrao plasmtica de urato e pode provocar crises de gota nos pacientes susceptveis.
O etanol altera o metabolismo do cido rico ao aumentar a produo de urato por aumentar o catabolismo da adenina-nucleotdeo mediado pelo acetato (lcool desidrogenase).
Tambm h supresso da excreo renal do cido rico, que se d atravs em virtude do excesso de lactato produzido pela oxidao do etanol em acetaldedo, que inibe competitivamente a secreo tubular de urato.
cido rico Fatores que afetam a concentrao plasmtica de urato - A produo e o catabolismo aumentados das nucleoprotenas so importantes na hiperuricemia que ocorre com leucemias, linfomas, policitemia, mieloma mltiplo, neuroblastoma e vrios outros neoplasmas amplamente disseminados.
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- Quimioterapias e a terapia por radiao ionizante das neoplasias malignas aumentam significativamente a formao de cido rico
cido rico
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Metodologia Analtica Mtodos de cido Fosfotngstico (PTA): Mtodo de CARAWAY Baseia-se no desenvolvimento de um cromgeno de reao azul (azul de tungstnio) medida que o PTA reduzido pelo urato num meio alcalino. Esto sujeitos a muitos interferentes, e os esforos para modific-los tm sido pouco eficazes na melhoria de sua especificidade.
cido rico Metodologia Analtica Mtodos de Uricase
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So mais especficos que as abordagens PTA A uricase utilizada como etapa nica ou inicial para oxidar o cido rico, produzindo alantona, H2O2 e CO2.
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Eletrlitos e Gases Sanguneos
Sumrio
INTRODUO 1.1. Funo Renal 1.2. Manuteno do Equilbrio Eletroltico 1.3. Manuteno do pH sanguneo 1.4. cidos e Bases: Aspectos qumicos GASES SANGUINEOS E pH 2.1. Comportamento dos Gases 2.2. Aplicao da Equao de Hendersson-Hasselbalch na Mensurao dos Gases 2.3. Distrbios cido-Base: ACIDOSE e ALCALOSE 2.4. Distrbios cido-Base METABLICOS 2.5. Distrbios cido-Base RESPIRATRIOS
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ELETRLITOS
3.1. Principais Eletrlitos
1.1. Funo Renal
141
- Os rins regulam as condies do fluido eletroltico e o equilbrio cido-base por meio da filtrao do sangue, seguida da reabsoro seletiva ou da secreo para o fluido tubular. - A alterao na funo renal uma das causas mais comuns de toxicidade medicamentosa, decorrente da excreo inadequada dos medicamentos ou de seus metablitos. Funo Endcrina dos Rins Regulao do metabolismo dos ossos e minerais [1,25-(OH)2 vitamina D3] Regulao da hematopoese (eritropoetina) Regulao de funo Adrenal (renina) Produo de Pr-renina inativa Reduo do fluxo sanguneo renal ativa a renina angiotensina I angiotensina II aldosterona Promove a reabsoro tubular de Na+ , vasoconstrico arteriolar, atividade simptica, etc, com a finalidade de aumentar a presso arterial.
142
1.1. Funo Renal Funo Glomerular
143
- Diferente dos filtros mecnicos, a membrana basal do glomrulo possui uma carga negativa forte, que leva a diferentes tamanhos de ponto de corte, dependendo da carga do composto. Molculas negativas (como a albumina) = 1,8 nm Molculas positivas (como os anticorpos) = 4,5 nm Em caso de dano membrana basal do glomrulo, a albumina (raio molecular de 3,6 nm), por exemplo, passa pela membrana basal
Funo Tubular - Com funo glomerular normal: 180 L de ultrafiltrado/dia - A funo dos tbulos recuperar seletivamente os componentes essenciais filtrados pelo glomrulo, reabsorver gua e eletrlitos em quantidades suficientes para manter as condies hidroeletrolticas normais, ajustar a excreo de bicarbonato e H+ e manter as condies de normalidade cido-base.
1.2. Manuteno do Equilbrio Eletroltico
144
- A ingesto e perda de lquidos se equivalem: eliminao diria de 2 a 2,5 L de gua pelo organismo, principalmente pela urina - A excreo mnima diria deve ser de 500 mL para controlar a carga osmtica de substncias filtradas que chegam ao nfron distal. - A eliminao de gua no suor e na urina controlada pelo hormnio antidiurtico (ADH), cuja produo estimulada pela presso arterial reduzida ou pela osmolalidade plasmtica aumentada, sendo este ltimo o fator mais importante na produo de ADH. - Osmolalidade: Representa a concentrao molar total dos solutos encontrados no sangue. O NaCl responsvel pela maior parte da osmolalidade do plasma. Outra substncia importante e osmoticamente ativa no plasma a glicose. OBS.: O Etanol no interfere no movimento da gua, por se encontrar (aps a ingesto) presente tanto no fluido extracelular quanto intracelular.
Estrutura do Nfron
145
146
1.3. Manuteno do pH sanguneo
147
- O processo de respirao celular requer O2, para fins de oxidao de substncias, em especial acares, para obteno de energia sob a forma de ATP, com conseqente formao de CO2 e H2O. - O CO2 produzido precisa ser eliminado por difuso atravs da membrana celular, entrando na corrente sangunea, onde absorvido pelos eritrcitos. - Como j abordado anteriormente, parte deste CO2 combina-se com NH3 oriundo da desaminao oxidativa de aminocidos para formar a Uria no ciclo da Uria.
- Na presena da enzima anidrase carbnica, o gs carbnico reage com a gua e estabelece um equilbrio com o cido carbnico, o qual se dissocia espontaneamente para o bicarbonato.
1.3. Manuteno do pH sanguneo
148
- O pH do sangue varia em uma faixa bem estreita, entre 7,35 e 7,40 para o sangue venoso e 7,40 e 7,45 para o sangue arterial. - O pH sanguneo ento, mostra-se ligeiramente mais bsico que a gua pura, e essa alcalinidade mantida por um sistema tampo bastante eficiente
- Assim, o sangue tamponado por quatro sistemas diferentes, sendo que o principal tampo composto por bicarbonato de sdio/ cido carbnico.
- Esse sistema essencial regulao do equilbrio cido-base, pois o metabolismo celular gera muitos cidos orgnicos que circulam no sangue at serem eliminados pelos rins.
Composio do tampo sanguneo Bicarbonato/ cido Carbnico Hemoglobina/ Oxi-Hemoglobina Protenas cidas/ Bsicas Fosfato Monocido / Fosfato Dicido
% 64 28 7 1
1.3. Manuteno do pH sanguneo CONTROLE CIDO BASE RENAL
149
- Os glomrulos so livremente permeveis aos ions H+, bicarbonato e aos nions de cidos inorgnicos (sulfato, fosfato).
- Os rins devem absorver a maior parte do bicarbonato filtrado e fixar o cido na urina por meio de ligao s bases (como fosfato e amonia) para manter o equilibrio normal do pH. - 90% do bicarbonato filtrado recuperado.
1.4. cidos e Bases: Aspectos qumicos
150
- Um cido pode ser definido como uma substncia capaz de dissociar-se para gerar on H+, enquanto uma base uma substncia capaz de aceitar um on H+, neutralizando-o (Teoria de Brnsted-Lowry). - H um equilbrio entre a quantidade de cido de um lado e de ons hidrognio e de base conjugada (produzida pela perda de H+) de outro. A Constante de Equilbrio denominada Ka:
Para cidos MUITO FORTES, Ka tende a infinito (equilbrio deslocado para a direita). Para cidos MUITO FRACOS, Ka tende a zero (equilbrio deslocado para a esquerda).
Nos casos intermedirios, os cidos encontram-se parcialmente dissociados, e o valor de Ka, que pode ser maior ou menor que 1, depender da fora do cido considerado.
151
cidos fortes se dissociam completamente, e a sua fora cida pode ser expressa pelo valor do Ka , como no exemplo abaixo:
Ao aplicarmos o logaritmo nesta equao, obtemos a chamada equao de Henderson Hasselbach , onde o pKa de um cido correlacionado com o valor do pH do meio e com a concentrao de suas espcies dissociadas e no dissociadas.

Tampes
152
- Qualquer soluo que contenha um cido fraco e uma base fraca tem a seguinte propriedade: Quando pequenas quantidades de um cido forte so adicionadas, elas so neutralizadas pela base fraca, enquanto pequenas quantidades de base forte so neutralizadas pelo cido fraco.
LOGO:
Tampes so solues capazes de absorver pequenas adies de cidos e bases concentradas sem mostrar variao significativa no pH da soluo. - A faixa de pH mais efetiva para um tampo est sobre ou prxima do pH em que as concentraes do cido e do sal so iguais. - Assim, o meio considerado tamponado se o pH da soluo oscila numa faixa de pKa +/- 1 (do cido em questo).
Sumrio
153
ELETRLITOS
GASES SANGUINEOS E pH
154
- O tratamento clnico de distrbios metablicos e respiratrios depende da mensurao rpida e precisa do oxignio e dixido de carbono sanguneos. - Medidas ativas para manter a vida em pacientes com dano cardiopulmonar dependem amplamente da ventilao assistida utilizando misturas de gases que so adaptadas em resposta aos resultados laboratoriais de cido-base e gases sanguneos.
155
A gasometria consiste na leitura do pH e das presses parciais de O2 e CO2 em uma amostra de sangue. A leitura obtida pela comparao desses parmetros na amostra com os padres internos do gasmetro. Essa amostra pode ser de sangue arterial ou venoso, porm importante saber qual a natureza da amostra para uma interpretao correta dos resultados. Obviamente, quando se est interessado em uma avaliao da performance pulmonar, deve ser sempre obtido sangue arterial, pois esta amostra informar a respeito da hematose e permitir o clculo do contedo de oxignio que est sendo oferecido aos tecidos. No entanto, se o objetivo for avaliar apenas a parte metablica, isso pode ser feito atravs de uma gasometria venosa. Parmetro pH PaCO2 PaO2
Sangue arterial 7.35 a 7.45 35 a 45 mmHg 70 a 100 mmHg
Sangue venoso 0.05 unidades menor 6 mmHg maior ~ 50% (35 a 50 mmHg)
GASES SANGUINEOS E pH 2.1. Comportamento dos Gases

Presso Parcial
156
- Lei de Dalton: A presso parcial de um gs dissolvido no sangue , por definio, igual presso parcial do gs em uma fase gasosa ideal imaginria em equilbrio com o sangue - Em equilbrio, a presso parcial (tenso) de um gs a mesma nos eritrcitos e no plasma, ento, a presso parcial de um gs a mesma em todo o sangue e plasma. - A presso parcial de um gs em uma mistura gasosa definida como a frao molar do gs vezes a presso total do sistema.
OU SEJA A presso medida de uma mistura de gases a soma das presses que os gases exerceriam se cada um estivesse sozinho no recipiente.
GASES SANGUINEOS E pH 2.1. Comportamento dos Gases

Presso Parcial - A lei de Dalton pode ser determinada para o ar ambiente como:
157
- A lei de Dalton no se aplica aos gases em soluo, ou seja, a soma de todos os gases dissolvidos pode ser menor, igual ou maior que a presso da soluo mensurada.
- Se a soma das tenses dos gases significativamente maior que a presso da soluo, pode ocorrer a formao de bolhas, como acontece no sangue de mergulhadores emergindo de locais profundos (doena descompressiva), ou na amostra de sangue resfriada sendo aquecida para a realizao da anlise.
2.2. Aplicao da Equao de Hendersson-Hasselbalch na Mensurao dos Gases
158
-O dixido de carbono e a gua reagem para formar cido carbnico, que, por sua vez, se dissocia em ons hidrognio e bicarbonato:
- Hendersson, a partir da combinao das reaes de hidratao e dissociao, encontrou um valor de K = 4,68 . 10-7 (pK = 6,33), onde:
159
Assim, as concentraes totais de CO2 (ctCO2), bicarbonato (cHCO3-), CO2 dissolvido (cdCO2) e on H+ (cH+) so inter-relacionadas. Pela mensurao de quaisquer dois dos quatro parmetros, PCO2 ou cdCO2, pH, ctCO2 ou cHCO3-, e utilizando a equao com os valores de pK e (coeficiente de solubilidade para o CO2), os outros dois parmetros podem ser calculados.
- A equao de Hendersson-Hasselbalch resultante aplicada quantificao dos gases sanguneos que temos :
160
importante ressaltar, ento, que o valor de bicarbonato expresso na gasometria no medido diretamente e sim calculado atravs da equao de Henderson-Hasselbach, usando os valores de pH e presso parcial de gs carbnico (PaCO2) medidos, onde:
- Os distrbios metablicos alteram o numerador da equao, atravs de diminuio (acidose) ou aumento (alcalose) no clculo da concentrao de bicarbonato. -Os distrbios respiratrios interferem com o denominador da equao, elevando (acidose) ou reduzindo (alcalose) a PCO2. - Os distrbios metablicos so compensados, inicialmente, por alteraes na PCO2 (compensao pulmonar) e, posteriormente, atravs de mudanas na excreo renal de cidos e na reabsoro de lcalis (compensao renal). Os distrbios respiratrios possuem mecanismos mais precrios de compensao que dependem, j de incio, de mecanismos renais de compensao.
2.4. Distrbios cido-Base: ACIDOSE e ALCALOSE
161
-Os distrbios cido-base so frequentemente classificados em dois grandes grupos: Metablicos e Respiratrios. - Nos distrbios metablicos, o problema primrio reside no metabolismo anormal, que leva a alteraes no bicarbonato plasmtico. - Os distrbios respiratrios resultam de alteraes na excreo pulmonar do dixido de carbono. ACIDEMIA: sangue arterial de pH < 7,35 ALCALEMIA: sangue arterial de pH > 7,45
Acidose e Alcalose referem-se aos estados patolgicos que levam acidemia ou alcalemia.
162
Relao entre o pH e a razo da concentrao de HCO3-/CO2 dissolvido
A linha pontilhada mostra um caso de alcalose descompensada (excesso de bicarbonato), com uma concentrao de bicarbonato de 44 mmol/L e um cdCO2 de 1,1 mmol/L. Logo, a razo 40:1 e o pH resultante 7,7.
2.5. Distrbios cido-Base METABLICOS
163
- O distrbio cido-bsico que mais freqentemente se observa na prtica clnica a acidose metablica. Existem algumas controvrsias em relao ao uso de lcalis para a correo desse distrbio. Isso se deve ao fato de existirem os seguintes riscos relacionados principalmente a infuso rpida e excessiva de HCO3Acidose metablica: Decorrente da produo aumentada de cidos (acidose lctica, cetoacidose diabtica, inanio) Por ingesto de cidos ou seus precursores (etilenoglicol, metanol e salicilatos) Por excreo reduzida de cidos (insuficincia renal oligrica, raro) Por excreo aumentada de bicarbonato (leva a um aumento da reabsoro renal de cloreto e de sdio para manter a eletroneutralidade)
2.5. Distrbios cido-Base METABLICOS
164
- Para abordar as alcaloses metablicas importante a avaliao dos seguintes parmetros: volemia, presso arterial, eletrlitos na urina e no soro e, em casos selecionados, o sistema renina-angiotensina-aldosterona.
- O tratamento deve ser dirigido causa bsica do distrbio, sendo restritas as indicaes de uso de cidos.
- Quando a alcalose resulta da administrao excessiva de lcalis exgenos, basta a suspenso dessa administrao para a normalizao do pH. Esse distrbio ocorrer com mais freqncia se houver comprometimento da funo renal. Alcalose Metablica Como resultado da excreo aumentada de cido do estmago e rins (vmito, suco nasogstrica, bulimia, aumento de cortisol ou aldosterona Sndrome de Cushing) Resultante da ingesto de base (ingesto de citrato, na transfuso sangunea massiva e bicarbonato de sdio oral). Por excreo reduzida de bicarbonato (nos quadros de depleo de cloreto, a deficincia de cloreto leva a reabsoro do bicarbonato junto com o sdio, mantendo a alcalose)
2.6. Distrbios cido-Base RESPIRATRIOS - So assim classificados os distrbios primrios em cdCO2.
165
- Pode resultar da alterao da excreo de CO2 pela respirao externa, mecanismo primrio de regulao da concentrao plasmtica de CO2.
DISTRBIO ACIDOSE METABLICA ALCALOSE METABLICA ACIDOSE RESPIRATRIA ALCALOSE RESPIRATRIA
ALTERAO DFICIT DE HCO3EXCESSO DE HCO3EXCESSO DE CO2 DFICIT DE CO2
2.6. Distrbios cido-Base RESPIRATRIOS Acidose Respiratria (Aumento da PCO2)
166
Qualquer fator que reduza a ventilao pulmonar, aumenta a concentrao de CO2 (aumenta H+ e diminui pH) resultando em acidose respiratria. Hipoventilao Hipercapnia (PCO2 > 45mmHg) Acidose respiratria Causas de Acidose Respiratria: Leso no Centro Respiratrio (AVE, TCE, tumor); Depresso no Centro Respiratrio (intoxicaes, anestsicos, sedativos, leses, narcticos); Obstruo de Vias Areas (Asma, DPOC, secreo, corpo estranho); Infeces agudas (Pneumonias); Edema Pulmonar; Trauma torcico, deformidades torcicas severas; P.O cirurgia abdominal alta, toracotomias; Distenso abdominal severa; Doenas Neuromusculares (Poliomielite, Polirradiculoneurites); Tromboembolia Pulmonar; Fadiga e falncia da musculatura respiratria.
2.6. Distrbios cido-Base RESPIRATRIOS Alcalose Respiratria (diminuio da PCO2)
167
Quando a ventilao alveolar est aumentada a PCO2 alveolar diminui, conseqentemente, haver diminuio da PCO2 arterial menor que 35mmHg, caracterizando uma alcalose respiratria (diminuio de H+, com aumento do pH).
Hiperventilao Hipocapnia (PCO2 < 35mmHg) Alcalose respiratria

Causas de Alcalose Respiratria: Hiperventilao por ansiedade, dor, hipertermia, hipxia, grandes altitudes; Hiperventilao por VM; Leses do SNC, tumores, encefalites, hipertenso intracraniana; Salicilatos e sulfonamidas; Alcalose ps acidose. Manifestaes Clnicas: A principal caracterstica clinica a hiperventilao. Em casos graves, pode ser observado tetania com sinais de Chvostek e de Trousseau, parestesia circumoral, acroparestesia, cimbra nos ps e mos resultante de baixas concentraes de Clcio ionizado no soro.
Sumrio
168
ELETRLITOS
169
ELETRLITOS - Os eletrlitos so classificados como nions, ons com carga negativa que se movem em direo a um anodo, ou ctions, ons carregados positivamente que se movem em direo a um catodo. Ctions nions
Na+ K+ Ca+2
Mg+2
ClHCO3H2PO4-2
SO4-2 Lactato-
- Os principais eletrlitos (Na+, K+, Cl- e HCO3-) ocorrem primariamente como ons livres, enquanto quantidades significativas (>40%) de Ca+2, Mg+2 e elementos-trao esto ligados a protenas, como a albumina. - A determinao de Na+, K+, Cl- e HCO3- conhecida como Perfil Eletroltico.
170
3.1. Principais Eletrlitos Sdio (Na+) - Principal ction do fluido extracelular, representa cerca de 90% dos ~154 mmol de ctions inorgnicos por litro de plasma. Assim, responsvel por quase metade da fora osmtica do plasma.
- Apresenta uma funo central na manuteno da distribuio normal de gua e presso osmtica no compartimento de fluido extracelular.
- A dieta diria contm 8 a 15 g (130 a 260 mmol) de NaCl, que quase completamente absorvido no TGI, embora o organismo somente requeira 1 a 2 mmol/dia, e o resto seja excretado pelos rins.
171
3.1. Principais Eletrlitos Sdio (Na+)
Amostras 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Soro Plasma Heparinizado Sangue Total Suor Urina Fezes (lquidas, diarreicas) Fluidos GI
Os eritrcitos contm ~10% do Na+ no soro ou plasma. Amostras lipmicas devem ser ultracentrifugadas e analisa-se o infranadante
(LEMBRANDO: Soro = Plasma Fibrinognio)

172
3.1. Principais Eletrlitos Sdio (Na+)
Metodologia Analtica
1. Espectroscopia de Absoro Atmica 2. Espectroscopia de Emisso de Chama 3. Eletroquimicamente, com Eletrodos on-Seletivos (ISE) para Na+.
Intervalo de Referncia
Para o Na+ srico 135 a 145 mmol/L A concentrao do sdio urinrio varia de acordo com a dieta alimentar. Com a dieta padro com 8 a 15 g/dia, o intervalo de ~ 40 a 220 mmol/dia.
173
3.1. Principais Eletrlitos Potssio (K+)
- Principal ction intracelular, com concentrao celular mdia de 150 mmol/L (nos eritrcitos de 105 mmol/L ~ 23 vezes sua concentrao plasmtica). - Sua concentrao extracelular mantida menor s expensas de ATP, atravs da ao da bomba de Na+/K+ : Esta um fator crtico na manuteno e ajuste dos gradientes inicos dos quais dependem os impulsos nervosos e a contratilidade do msculo. - Algumas condies, como a Paralisia Peridica Hipocalmica manifestam-se por perda transiente da capacidade de utilizao dos msculos. Esto relacionadas a diversas condies, como Hipertireoidismo, Hiperaldosteronismo ou uso crnico de corticides. - A necessidade diria de K+ satisfeita com a ingesto de 50 a 150 mmol/dia. Do potssio absorvido no TGI, a maior parte eliminada pelos rins.
174
3.1. Principais Eletrlitos Potssio (K+) Amostras Basicamente, as mesmas amostras vlidas para Na+. Intervalo de Referncia
Referncia: 3,5 a 5,0 mmol/L (adultos) e 3,7 a 5,9 mmol/L (neonatos)

As concentraes de K+ no sangue total so 0,1 a 0,7 mmol/L menores que no soro. Os intervalos de referncia para o K+ srico so 0,2 a 0,5 mmol/L mais altos que aqueles para o K+ plasmtico. Os mtodos para determinar potssio devem minimizar a hemlise, e qualquer hemlise deve ser relatada junto aos valores de potssio.
Hemlise Leve
Moderada Intensa
Aumento de K+ (%) 3
12 30
~ 50 mg Hb/dL
~200 mg Hb/dL > 500 mg Hb/dL
175
3.1. Principais Eletrlitos Cloreto (Cl-) - o principal nion extracelular, com concentraes medianas no plasma e fluido intersticial de ~103 mmol/L (a concentrao total de nions inorgnicos de 154 mmol/L). - Est envolvido de forma significativa em diversos processos: Manuteno da distribuio da gua Controle da Presso Osmtica Balano ction-nion no fluido extracelular (ECF).
- Sua concentrao intracelular em eritrcitos de 45 a 54 mmol/L, e nas demais clulas teciduais de apenas ~1 mmol/L.
- Diurticos de ala como furosemida e cido etacrnico inibem a bomba Na/K/2Cl, a qual responsvel por promover a absoro ativa de Cl-, com reabsoro passiva de Na+. O cloreto excedente eliminado na urina e suor.
176
3.1. Principais Eletrlitos Cloreto (Cl-)
Amostras
O Cloreto mais freqentemente mensurado no soro, plasma, urina e no suor. Ele muito estvel no soro e no plasma, mesmo com hemlise intensa ou alterao na concentrao de protenas plasmticas. A anlise do suor para verificar a concentrao do eletrlito utilizada para confirmar o diagnstico de fibrose cstica.
Fibrose Cstica
Possui apresentaes clnicas de amplo espectro, tais como doena pulmonar obstrutiva crnica e insuficincia pancretica. causada por um defeito em uma protena reguladora do transporte de eletrlitos atravs das membranas epiteliais (protena reguladora da condutncia transmembrana da fibrose cstica). Embora existam anlises genticas mais especficas, o teste quantitativo de cloreto no suor continua sendo o teste de diagnstico padro.
177
3.1. Principais Eletrlitos Cloreto (Cl-)
Historicamente, o cloreto era mensurado por titulao mercurimtrica e mtodos de espectrofotometria. Titulao Coulomtrica-Amperomtrica: Cloridrmetro de Cotlove Dependem da gerao de Ag+ a partir do eletrodo de prata, a uma taxa constante, e da reao de Ag+ com Cl-, para formar cloreto de prata insolvel.
Aps atingir o ponto estequiomtrico, o excesso de Ag+ na mistura paralisa a gerao de Ag+. Um cronmetro marca o tempo passado entre o inci e a pausa na gerao de Ag+. O intervalo de tempo proporcional quantidade de Cl- presente na amostra.
INTERFERENTES: CN- e SCN-, grupos sulfdricos (S-2) e metais pesados.

179
Carboidratos
180
Sumrio
CARBOIDRATOS
Monossacardeos Dissacardeos Polissacardeos Amido e Glicognio Celulose Glicoprotenas Regulao da concentrao da Glicose Sangunea Transporte de Glicose Formao de Hb-Glicada Hormnios Contra-Reguladores Diabetes Mellitus: - Tipo1 - Tipo 2 - Diabetes Gestacional Determinao da Glicose em Fluidos Corporais Mtodos que usam a Hexoquinase Mtodos que usam a Glicose Oxidase Mtodos que usam a Glicose Desidrogenase Ensaio da Frutosamina Teste de Tolerncia Oral Glicose
Qumica
Bioqumica e Fisiologia
Significncia Clnica
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Carboidratos Introduo - Principais constituintes dos sistemas fisiolgicos, os carboidratos so compostos orgnicos constitudos de carbono, hidrognio e oxignio [Cx(H2O)y] que, juntamente com os lipdios e as protenas, fornecem energia e contribuem com a estrutura dos organismos. - Eles realizam mltiplas funes, tais como componentes estruturais em RNA e DNA (ribose e desoxirribose) e fornecerem uma fonte de energia (glicose). A glicose forma-se a partir de: 1. Quebra de Carboidratos na dieta (gros, vegetais amilceos e legumes) ou de estoques corporais (glicognio) 2. Sntese endgena a partir de protenas ou da poro glicerol dos triglicerdeos
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Fontes de Carboidratos
183
Carboidratos
Quando o gasto energtico excede a ingesto calrica, a formao de glicose endgena ocorre a partir da quebra dos estoques de carboidratos e de fontes no-carboidratos (aminocidos, lactato e glicerol).
184
Carboidratos Quando a ingesto de energia excede o seu gasto, o excesso convertido em gordura e glicognio para armazenamento no tecido adiposo e no fgado ou msculo, respectivamente.
187
Carboidratos Qumica Carboidratos so derivados aldedicos ou cetonas de lcooils poliidroxilados (mais de um grupo OH) ou de compostos que produzem esses derivados quando hidrolisados. Tipo Monossacardeos Dissacardeos Exemplo Glicose, galactose, frutose Maltose = Glicose + Glicose Lactose = Glicose + Galactose Sacarose = Glicose + Frutose Amido Glicognio Celulose
Polissacardeos
188
Carboidratos Qumica Amido e Glicognio O amido constitui a principal reserva glicdica vegetal, composto de amiloses (-1,4; noramificada) e amilopectinas (-1,4; ramificaes -1,6 a cada 24 a 30 resduos). O glicognio a reserva glicdica animal, e em muito se assemelha amilopectina, porm, possui mais ramificaes (a cada 8 ou 12 resduos de glicose).
189
Carboidratos Qumica Glicoprotenas - Muitas protenas integrais de membrana possuem oligossacardeos covalentemente ligados na regio extracelular, formando as glicoprotenas. Alm disso, muitas protenas que so secretadas, tais como anticorpos, hormnios e fatores de coagulao so glicoprotenas. - Uma funo biolgica das cadeias de carboidratos regular a vida til das protenas. Por exemplo, a perda dos resduos de cido silico da extremidade das cadeias oligossacardicas nos eritrcitos resulta na remoo dos glbulos vermelhos do sangue.
190
Carboidratos Qumica Glicoprotenas
Os carboidratos tambm esto envolvidos nos reconhecimento clula-clula, na secreo e no direcionamento de protenas para domnios celulares especficos.
191
Carboidratos Qumica Glicoprotenas As glicoprotenas de interesse especial so a Hemoglobina Glicada (GHb) e outras protenas (Albumina Glicada) que so utilizadas para monitorar o controle da glicemia a longo prazo em pessoas com diabetes mellitus. Alm disso, a GHb uma medida de risco do desenvolvimento de complicaes do diabetes. Quimicamente, a GLICAO a adio no enzimtica de um resduo de acar aos grupos amino de protenas. Obs.: NO CONFUNDIR GLICAO COM GLICOSILAO!
REFUTE A IDIA DE QUE O TESTE O DA HEMOGLOBINA GLICOSILADA!
A glicosilao um processo enzimtico, responsvel pela ligao de acares a protenas, lipdios e outras molculas orgnicas, produzindo diversos importantes biopolmeros.
192
Carboidratos Qumica - A glicao da hemoglobina uma reao no-enzimtica dependente da concentrao de glicose no plasma. - Se d em duas etapas, sendo a primeira uma etapa reversvel e a segunda irreversvel
193
Carboidratos Qumica
A maioria dos testes quantifica a cetoamina estvel, visto que a concentrao da aldimina plenamente influenciada pela ingesto recente de carboidratos.
194
Carboidratos Qumica - A HbA composta por 4 cadeias polipeptdicas: 2 alfa e 2 beta - A anlise cromatogrfica da Hb A identifica vrias hemoglobinas menores: Hb A1a, Hb A1b, Hb A1c
Tipos de Hb Adulta Humana Hb A (Hb A1 ou Hb rpida) Hb A2 Hb F

Percentual 97 2,5 0,5
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Carboidratos Bioqumica e Fisiologia -Glicognese: converso da glicose em glicognio
-Glicogenlise: processo reverso da glicognese

-Gliconeognese: formao da glicose a partir de fontes no-glicdicas, tais como aminocidos, glicerol ou lactato. -Gliclise: converso da glicose ou outras hexoses em lactato ou piruvato. A oxidao completa at CO2 e H2O ocorre atravs do Ciclo de Krebs e da Cadeia de transporte de Eltrons acoplada fosforilao oxidativa na mitocndria, gerando ATP.
196
Via Glicoltica
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Carboidratos Bioqumica e Fisiologia - Durante um breve jejum, ocorre a preveno de um grande declnio da concentrao de glicose sangunea atravs da quebra de glicognio armazenado no fgado e da sntese da glicose no fgado. Uma pequena quantidade de glicose tambm, pode ser produzida a partir de sntese renal (G6Pase). - Nos casos de jejum mais prolongado (> 42 h), a gliconeognese a responsvel por essencialmente toda a produo de glicose. - Independentemente das grandes flutuaes no suprimento e na demanda de carboidratos a concentrao da glicose no sangue normalmente mantida em um intervalo estreito por hormnios que modulam o movimento da glicose dentro do corpo.
198
Carboidratos: Bioqumica e Fisiologia Insulina Hormnio produzido pelas clulas das ilhotas de Langerhans (pncreas) que estimula a captao da glicose pelos tecidos adiposo e muscular, promove a converso de glicose em glicognio ou gordura para armazenamento, inibe a produo de glicose pelo fgado, estimula a sntese protica e inibe a quebra protica.
199
200
Canetas de insulina Human Pen Memoir A caneta autobiogrfica ou Human pen memoir pode ajudar pacientes administrarem suas dosagens de insulina evitando assim uma overdose. O laboratrio farmacutico, Eli Lilly, em Indianapolis/EUA, inventou este injetor que na verdade esconde uma agulha hipodrmica. Integra cartuchos de insulina que permitem o operador discar a quantia de insulina exata que necessita tomar. O HumaPen registra a dose, data e tempo das ltimas 16 injees tomadas. Assim o diabtico no precisa preocupar-se caso esquea o nmero de doses injetadas. Preo: 45 dlares SQ Pen Administra a insulina sob presso elevada em micro-jato, no tecido subcutneo, o que permite que a insulina penetre na pele, sem dor e de forma eficaz. Laboratrio: MediRex Pharma (Portugal) Preo: 260 euros
Canetas descartveis de insulina
201
Regulao Hormonal da Glicose Sangunea
201
202
203
Carboidratos Bioqumica e Fisiologia Hormnios Hiperglicemiantes Glucagon Secretado pelas clulas do pncreas, tem como maior alvo o fgado, estimulando a produo de glicose por glicogenlise ou gliconeognese. Tambm atua nos adipcitos, estimulando a liplise. Epinefrina Estimula a glicogenlise e diminui a utilizao da glicose, aumentando, portanto, as concentraes de glicose sangunea. Tambm estimula a secreo de glucacon e inibe a secreo de insulina pelo pncreas. GH Estimula a gliconeognese, aumenta a liplise e antagoniza a captao de glicose estimulada pela insulina. Cortisol Estimula a gliconeognese e aumenta a quebra de protenas e gorduras.
204
Carboidratos Significncia Clnica O diabetes mellitus e a hipoglicemia so condies clnicas associadas ao metabolismo anormal dos carboidratos. Diabetes Mellitus tipo 1 Os indivduos possuem insulinopenia por perda das clulas das ilhotas de Langerhans e dependem de tratamento com insulina para sustentar a vida e evitar a cetose. Diabetes Mellitus tipo 2 Tambm conhecidos como no-dependentes de insulina As concentraes de insulina podem estar dentro do intervalo de referncia, elevadas ou diminudas e, na maioria dos casos, a ao da insulina est prejudicada (resistncia insulnica) Est fortemente relacionada obesidade. Diabetes Mellitus Gestacional a intolerncia a carboidratos de gravidade varivel durante a gravidez.
205
Diabetes Mellitus Tipo I O diabetes Tipo 1 (DM1) uma doena auto-imune caracterizada pela destruio das clulas beta produtoras de insulina. Isso acontece por engano porque o organismo as identifica como corpos estranhos. A sua ao uma resposta auto-imune. Este tipo de reao tambm ocorre em outras doenas, como esclerose mltipla, Lupus e doenas da tireide. A DM1 surge quando o organismo deixa de produzir insulina (ou produz apenas uma quantidade muito pequena.) Quando isso acontece, preciso tomar insulina para viver e se manter saudvel. As pessoas precisam de injees dirias de insulina para regularizar o metabolismo do acar. Pois, sem insulina, a glicose no consegue chegar at s clulas, que precisam dela para queimar e transform-la em energia. As altas taxas de glicose acumulada no sangue, com o passar do tempo, podem afetar os olhos, rins, nervos ou corao.
206
Diabetes Mellitus Tipo I Os fatores genticos so predominantes na manifestao do Diabetes tipo 1, evidenciados pela freqente presena de certos antgenos de histocompatibilidade (HLA) no brao curto do cromossomo 6. Em vrios grupos ocidentais a prevalncia para os antgenos DR3, DR4, e DQ. A presena de diabetes tipo 1 em gmeos univitelinos menor do que 50%, o que sugere que fatores ambientais alm de genticos, devem colaborar para a manifestao da doena. Na populao no diabtica a presena destes antgenos (Dr3 / Dr4) em torno de 40 % e, na populao de diabticos de 95%. A definio de Diabetes tipo 1 portanto reservada aos indivduos que apresentam falncia na secreo de insulina por destruio autoimune das clulas beta e, apresentam positividade para os antgenos de histocompatibilidade DR3 e ou DR4. Sintomas Poliria; Fome freqente; Sede constante; Perda de peso;
Fraqueza; Fadiga; Nervosismo;
Mudanas de humor; Nusea; Vmito
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Diabetes Mellitus Tipo II Sabe-se que o diabetes do tipo 2 possui um fator hereditrio maior do que no tipo 1. Alm disso, h uma grande relao com a obesidade e o sedentarismo. Estima-se que 60% a 90% dos portadores da doena sejam obesos. A incidncia maior aps os 40 anos.
Uma de suas peculiaridades a contnua produo de insulina pelo pncreas. O problema est na incapacidade de absoro das clulas musculares e adiposas. Por muitas razes, suas clulas no conseguem metabolizar a glicose suficiente da corrente sangnea. Esta uma anomalia chamada de "resistncia Insulnica". O diabetes tipo 2 cerca de 8 a 10 vezes mais comum que o tipo 1 e pode responder ao tratamento com dieta e exerccio fsico. Outras vezes vai necessitar de medicamentos orais e, por fim, a combinao destes com a insulina.
Principais Sintomas: Infeces freqentes; Alterao visual (viso embaada); Dificuldade na cicatrizao de feridas; Formigamento nos ps; Furunculose.
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Diabetes Mellitus Gestacional
Na gravidez, duas situaes envolvendo o diabetes podem acontecer: a mulher que j tinha diabetes e engravida e o diabetes gestacional. O diabetes gestacional a alterao das taxas de acar no sangue que aparece ou detectada pela primeira vez na gravidez. Pode persistir ou desaparecer depois do parto. Diabetes Mellitus Gestacional (DMG) definido como qualquer nvel de intolerncia a carboidratos, resultando em hiperglicemia de gravidade varivel, com incio ou diagnstico durante a gestao. Sua fisiopatologia explicada pela elevao de hormnios contra-reguladores da insulina, pelo estresse fisiolgico imposto pela gravidez e a fatores predeterminantes (genticos ou ambientais). O principal hormnio relacionado com a resistncia insulina durante a gravidez o hormnio lactognico placentrio, contudo, sabe-se hoje que outros hormnios hiperglicemiantes como cortisol, estrgeno, progesterona e prolactina tambm esto envolvidos.
Mecanismos que levam s complicaes crnicas do diabetes melito
209
Glicao das protenas: consiste na adio de glicose na poro terminal N da cadeia protica e dos aminocidos dentro da cadeia. A adio de glicose protena faz-se lentamente e, depende tanto do tempo de contato entre a glicose a protena como tambm da concentrao da glicose. A Glicao atinge praticamente todos os rgos e tecidos Atividade da via dos Poliis: consiste na converso da glicose em seu derivado, o lcool sorbitol, com a presena da enzima Aldose redutase. O sorbitol por sua vez, entra livremente nas clulas e se metaboliza muito lentamente, acarretando um acmulo de sorbitol intra-celular. O sorbitol se acumula na bainha de Schwann do tecido nervoso, acarretando mudana na funo dos nervos, com alterao na conduo nervosa, mudana na sensibilidade, e perda de fibras nervosas. Mio-inositol, Fosfoinositdeos e Na,K-ATPase : No tecido nervoso, e provavelmente na retina e rim, a hiperglicemia inibe competitivamente a captao de inositol dependente de sdio, levando reduo do mio-inositol intra-celular e do fosfatidilinositol da membrana celular. A reduo da atividade da enzima Na,K-ATPase acarreta a reduo da conduo nervosa.
Mecanismos que levam s complicaes crnicas do diabetes melito
210
Glicao das membranas basais: caracteriza a microangiopatia. Consiste no espessamento da membrana basal dos capilares (MBC) , pelo acmulo de carboidratos, principalmente heteropolissacardeos complexos e dissacardeos (galactose e glicose) unidos hidroxilisina. A glicose acelera a atividade das enzimas que participam na formao da MBC Plaquetas e Funo endotelial: No diabetes ocorre aumento da agregao plaquetria, aparecimento de microtrombos, diminuio da via mdia das plaquetas, diminuio da atividade fibrinoltica e aumento do Fator de von Willebrand
Alteraes hemodinmicas: A hiperglicemia provoca aumento do volume vascular e do fluxo sangneo nos leitos capilares de alguns tecidos, no rim h aumento da presso transcapilar glomerular, que produzem leso celular direta, com aumento da matriz mesangial, proteinria e glomerulosclerose. A leso renal progressiva acarreta mudanas na permeabilidade da barreira glomerular agravando a proteinria. A mesma seqncia de fatos ocorre na retina provocando a retinopatia.
Alteraes no metabolismo dos lipdeos: Associado ao diabetes freqente haver diminuio do HDL colesterol que so aos partculas alta densidade e reduo das partculas de Baixa e muito baixa densidade (LDL e VLDL) que esto associadas ao aparecimento da placa de aterosclerose.
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Carboidratos Significncia Clnica Diagnstico de DM Depende unicamente da demonstrao da hiperglicemia
Para o tipo 1 mais fcil, pois a hiperglicemia aparece mais abruptamente, grave e acompanhada por srios distrbios metablicos.
No tipo 2 o diagnstico pode ser dificultado pelo fato das alteraes metablicas no serem graves o suficiente para o paciente notar os seus sintomas. Sintomas cardiais de DM-1 Poliria (muita urina) Polidipsia (muita sede) Perda de peso
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico GLICEMIA DE JEJUM: BREVE HISTRICO - Os primeiros mtodos utilizavam o Reagente de Fehling, que dava resultado positivo em presena de aldedos (pouco especfico) - Veio ento o Reagente de Benedict (ou Reagente de Gayder), que se baseia na reduo do cobre por acares. Tinha como inconveniente a inespecificidade para a glicose (dava positivo para qualquer ose). - O Reagente de Tollens foi amplamente utilizado e era aplicado na diferenciao de carbonilas de cetona das de aldedo. Utilizava nitrato de prata em soluo amoniacal. - Tambm h o mtodo da Ortotoluidina. Neste mtodo, a glicose reage especificamente com a ortotoluidina, a quente e em presena de cido actico glacial, produzindo uma mistura, em equilbrio, uma glicosilamina e a correspondente base de Schiff. A intensidade da cor medida, fotometricamente
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico GLICEMIA DE JEJUM Metodologia utilizando a Hexoquinase
Embora altamente acurado e preciso, o mtodo de referncia requer muita preciso e muito demorado para ser utilizado rotineiramente em um laboratrio clnico.
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico GLICEMIA DE JEJUM Mtodos que usam a Glicose Oxidase A glicose oxidase catalisa a oxidao da glicose em cido glicnico e perxido de hidrognio: (etapa especfica para a glicose)
A adio da enzima peroxidase e um aceptor de oxignio cromognico, como a o-dianisidina, resulta na formao de um composto colorido que medido:
Esta etapa bem menos especfica, e est sujeita a interferentes, tais como bilirrubina, cido rico, hemoglobina, tetraciclina, cido ascrbico dentre outros que inibem a reao, produzindo valores menores)
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico GLICEMIA DE JEJUM Reao de Trinder
- O produto H2O2 titulado por reao com a 4-aminoantipirina e fenol, gerando o produto colorido antipiril quinonimina.
- Essa reao amplamente utilizada para dosagem de vrios analitos, tais como colesterol e cido rico.
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico
Teste de Pedersen Indicado para o diagnstico de Diabetes Mellitus Gestacional Consiste na ingesto de 50 g de dextrosol e mensurao da glicemia 1 hora aps. Caso o valor da glicemia seja superior a 140 mg/dL, a gestante dever fazer o TTOG. Teste de Tolerncia Oral Glicose (TTOG)
Tambm conhecido como Curva Glicmica Administra-se uma carga de 75 g de glicose dissolvida gua So feitas medies sucessivas da glicemia, desde o tempo 0, com 30 min, 60 min, 90 min e 120 min. Gera desconforto e estresse no paciente, podendo aumentar a glicemia (adrenalina).
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Carboidratos Significncia Clnica: Diagnstico Para realizao do teste, utiliza-se como material de anlise soro ou plasma de paciente em jejum por pelo menos 8 horas. aplicvel a acomodao da amostra em tubo contendo NaF, que alm de ser inibidor da via glicoltica, em certas concentraes tambm atua como anticoagulante (evitar hemlise). - Valores de referncia: 70 a 99 mg/dL < 140 mg/dL aps 2 horas de infuso de 75 g de glicose Para o diagnstico de DM, a glicemia de jejum dever ser igual ou superior a 126 mg/dL e/ou maior que 200 mg/dL aps carga de 75 g de glicose.
218
Sobre o Diabetes mellitus, correto afirmar que:

a) A frutosamina tem importncia no acompanhamento de pacientes diabticos e serve para avaliar o controle metablico das ltimas 2 - 3 semanas que antecedem o exame.
b) O teste de tolerncia oral glicose (TTOG) o exame mais indicado para o acompanhamento
de pacientes hospitalizados com doena aguda. c) A hemoglobina glicada serve para monitoramento do paciente diabtico a curto prazo. d) A hemoglobina glicada e a frutosamina so exames confiveis para deteco do diabetes gestacional.
219
220
Lipdios Sricos
221
Sumrio
LIPDIOS SRICOS
Colesterol cidos Graxos Acilgliceris Prostaglandinas
Lipidios Bsicos
Lipoprotenas
Qumica Metabolismo Exgeno Metabolismo Endgeno Transporte de Colesterol Intracelular Transporte Reverso de Colesterol
Anlise Laboratorial
Mensurao de Lipdios Bsicos: Colesterol, TAG, HDL e LDL.
222
Lipidios Bsicos
O termo lipdio empregado para denominar uma classe de substncias solveis em solventes orgnicos e quase insolveis em gua.
Quimicamente, contm principalmente, ligaes C-H no-polares, e tipicamente produzem cidos graxos e ou lcoois complexos aps hidrlise.
Lipidios Bsicos
223
De modo geral, so subdivididos em seis grupos, com base em sua estrutura:
- Colesterol - cidos Graxos - Acilgliceris

- Esfingolipdios - Prostaglandinas - Terpenos
224
Lipidios Bsicos Colesterol - um lcool esteride com 27 tomos de carbono, dispostos num anel tetracclico de esterano, com uma cadeia lateral C-H. - Diversas substncias de interesse biolgico tm sua origem no esqueleto esteride (peridrociclopentanofenantreno), e a biossntese desses depende da presena do colesterol, seja de origem endgena ou exgena.
225
Lipidios Bsicos Colesterol: Absoro

Antes de ser absorvido, o colesterol precisa ser solubilizado por emulsificao, que a formao de micelas mistas, contendo colesterol no-esterificado, cidos graxos, monoglicerdeos, fosfolipdios e cidos biliares conjugados. Os cidos biliares agem como detergentes e so o fator mais crtico na formao das micelas. Em sua ausncia, a digesto e a absoro tanto de colesterol como de triglicerdeos ficam gravemente prejudicadas. A maior parte da absoro de colesterol ocorre no jejuno mdio e leo terminal do intestino delgado, e mediada pela protena de superfcie do entercito NPC1L1. Esta protena o alvo para o frmaco EZETIMIBE, que bloqueia a absoro do colesterol. Quando o colesterol entra na clula da mucosa intestinal, acondicionado junto com triglicerdeos, fosfolipdios e uma grande protena chamada Apo B48, em partculas grandes de lipoprotena chamadas Quilomcrons.
Lipidios Bsicos Colesterol: Biossntese
226
- Pouco mais da metade do colesterol no organismo origina-se de sua sntese (cerca de 700 mg/dia) e o restante fornecido pela dieta.
- Quase 3/4 de sua biossntese endgena ocorre no fgado e intestino. - A maior parte das clulas perifricas, ao contrrio, depende de distribuio exgena do colesterol pelas lipoprotenas.
Lipidios Bsicos Colesterol: Biossntese A biossntese do colesterol ocorre em trs etapas: 1. Formao de HMG-CoA a partir de Acetil-CoA
227
2. Reduo do HMG-CoA em Mevalonato e descarboxilao deste ltimo em uma srie de unidades isoprnicas de 5 carbonos. H ento a condensao dessas unidades isoprnicas para formar intermedirios de 10 carbonos (geranil pirofosfato) e 15 carbonos (farnesil pirofosfato). Duas molculas C15 ento se condensam para formar o produto final do segundo estgio, o esqualeno (C30). 3. O terceiro estgio ocorre no retculo endoplasmtico, onde h a epoxidao do esqualeno, com sucessivas reaes de oxidao-descarboxilao e remoo de cadeias laterais, para formar a molcula de 27 carbonos de colesterol. Obs.: A segunda etapa importante porque contm a enzima HMG-CoA redutase, que a enzima limitadora da velocidade na biossntese de colesterol, sendo inibida por frmacos do tipo estatinas
228
229
Lipidios Bsicos Colesterol: Esterificao
230
O colesterol esterificado com cidos graxos para formar um ster de colesteril por meio de duas enzimas diferentes: Na clula, o excesso de colesterol esterificado pela acilcolesterol aciltransferase (ACAT), que ajuda a reduzir a citotoxicidade do excesso de colesterol livre. Uma vez esterificados, os steres de colesteril so armazenados nas gotas lipdicas intracelulares.
Os steres de colesteril tambm so formados na circulao pela ao da lecitina colesterol aciltransferase (LCAT) no colesterol presente nas lipoprotenas, particularmente nas lipoprotenas de alta densidade (HDL).
Os steres de colesteril so responsveis por cerca de 70% do colesterol total no plasma, e a LCAT responsvel pela formao da maior parte dos steres de colesteril presentes no plasma. A LCAT produzida no fgado e secretada na circulao e ativada pela Apo AI, a principal protena no HDL.
Quando o colesterol esterificado, ele perde seu grupo hidroxil livre e torna-se muito mais hidrofbico, indo da superfcie das partculas da lipoprotena para o centro hidrofbico.
Lipidios Bsicos Colesterol: Catabolismo
231
exceo das clulas endcrinas especializadas, que usam colesterol como substrato na sntese de hormnios esterides, a maioria das clulas perifricas apresenta capacidade limitada de catabolizar o excesso de colesterol. Aproximadamente um tero da produo diria de colesterol, ou cerca de 400 mg/dia, convertida no fgado em cidos biliares. Cerca de 90% dos cidos biliares so reabsorvidos no tero inferior do leo e so subseqentemente retornados para o fgado pela circulao entero-heptica. Os cidos biliares que entram no intestino grosso so parcialmente desconjugados pelas enzimas bacterianas em cidos biliares secundrios: (clico desoxiclico; quenodesoxiclico litoclico)
Uma parte do colesterol distribudo para o fgado convertida em sais biliares, mas a maior parte novamente secretada na circulao em lipoprotenas, e o restante diretamente excretado na bile sem alteraes, onde solubilizado em micelas mistas pelos cidos biliares e fosfolipdios.
Quando a quantidade de colesterol na bile excede a capacidade destes agentes solubilizantes, possvel que o colesterol precipite e forme clculos biliares de colesterol.
Colesterol: Sntese de cidos Biliares
232
Lipidios Bsicos cidos Graxos A frmula qumica geral de cidos graxos RCOOH, onde R uma cadeia alquil. Classificao Tamanho (tomos de carbono)
233
Cadeia curta
Cadeia mdia Cadeia longa
2a4
6 a 10 12 a 16
Os cidos graxos importantes na nutrio e metabolismo humanos so a classe de cadeia longa que contm um nmero par de tomos de carbono.
Lipidios Bsicos cidos Graxos
234
Os seres humanos so capazes de sintetizar a maioria dos cidos graxos. Entretanto, somos incapazes de sintetizar alguns cidos graxos, tais como cido linolico (C18:29,12), que encontrado apenas nas plantas. Pelo fato de ser essencial sade, crescimento e desenvolvimento, chamado de cido graxo essencial. O cido linolico convertido em cido araquidnico, que um precursor para a sntese de prostaglandinas e tambm importante na mielinizao do sistema nervoso central. Animais mantidos em uma dieta livre de gordura desenvolvem uma condio que pode ser fatal, caracterizada inicialmente por pouco crescimento, m-cicatrizao e dermatite. O cido linolico mostra-se como um importante constituinte dos esfingolipdios da epiderme, que funcionam como uma barreira de impermeabilidade da pele.
Doenas relacionadas desmielinizao: Doena de Siemerling-Creutzfeldt ou Addison-Schilder ou Adrenoleucodistrofia (ADL) (Doena de Lorenzo) Sndrome de Guillain-Barr (SNPerifrico) Esclerose Mltipla
234
Lipidios Bsicos cidos Graxos: Catabolismo ou -oxidao
235
Lipidios Bsicos cidos Graxos: Formao dos Corpos Cetnicos
236
Durante jejum prolongado ou quando o metabolismo de carboidratos deficiente (DM1), a formao de acetil-CoA excede o suprimento de oxaloacetato
A abundncia de acetil-CoA resulta da extensa mobilizao de cidos graxos por -oxidao no fgado.
O excesso de acetil-CoA produzido desviado para uma via alternativa na mitocndria, para produzir os corpos cetnicos.
Apolipoprotenas
237
Apo
Funo
Lipoprotena
Apo A I
Apo A II Apo A IV Apo B 100
Co-fator LCAT
No conhecida Ativa LCAT Secreo de TAG da protena de ligao do fgado para o receptor LDL
Q, HDL
HDL Q, HDL VLDL, IDL, LDL
Apo B 48
Apo C I Apo C II Apo C III Apo E Apo(a)
Secreo de TAG no intestino

Ativa LCAT Co-fator LPL Inibe ativao de C II de LPL Facilita captao de quilomcron remanescente e IDL. No conhecida
Q
Q, VLDL, HDL Q, VLDL, HDL Q, VLDL, HDL Q, VLDL, HDL Lp(a)
Lipoprotenas Quilomcrons Transportam colesterol e TAG exgenos do intestino para os tecidos
238
VLDL (Lipoprotenas de Muito Baixa Densidade) IDL (Lipoprotenas de Densidade Intermediria) LDL (Lipoprotenas de Baixa Densidade) Constituem um grupo de partculas relacionadas que transportam colesterol e TAG endgenos do fgado para os tecidos. HDL (Lipoprotenas de Alta Densidade) Realizam o transporte reverso do colesterol, levando-o dos tecidos para o fgado
238
Lipoprotenas Quilomcrons
239
So as lipoprotenas mais volumosas, compostas principalmente de triglicerceos, sendo pobres em colesterol livre. Carreiam 85 a 95% dos TAG da dieta (origem exgena)
Possuem 1 a 2% de protenas: (apolipoprotenas) Apo B48 Apo AI Originais do Quilomcron Apo AIV Apo CI Adquiridas de outras lipoprotenas da Apo CII circulao, principalmente de HDL. Apo CIII Apo E
Os quilomcrons aderem a stios de ligao no endotlio capilar dos msculos esquelticos e no tecido adiposo. Nestes locais, seus TAG so hidrolisados pela ao da lipoprotena lipase (LPL), uma enzima extracelular ativada por Apo CII. Os monoacilgliceris liberados e os cidos graxos resultantes da hidrlise so captados pelos tecidos. Os quilomcrons diminuem medida que seus TAG so hidrolisados, at serem reduzidos aos Quilomcrons Remanescentes, ricos em colesterol. Estes dissociam-se do endotlio capilar e novamente entram na circulao, sendo captados pelo fgado.
Lipoprotenas Lipoprotena lipase (LPL)
240
Localiza-se na parede dos capilares sanguneos, fixada ao endotlio por cadeias de proteoglicanas carreadas negativamente de sulfato de heparina.
Encontrada em vrios tecidos, tais como o cardaco, adiposo, bao, pulmonar, medula renal, aorta, diafragma, glandula mamria (durante a lactao) e fgado neonatal. O sangue normal no contm quantidades significativas desta enzima. Entretanto, aps injeo de heparina, a LPL liberada de sua ligao com o sulfato de heparina, na circulao, e o processo acompanhado pela diminuio da lipemia.
241
241
242
242
Lipoprotenas
243
VLDL (Lipoprotenas de Muito Baixa Densidade) Lipoprotena pr-beta

As VLDL so menores que os quilomcrons e so ricas em TAG endgeno (origem heptica). a lipoprotena responsvel pelo fornecimento de triglicerdeos durante o perodo de jejum, para as clulas perifricas manterem o metabolismo energtico. A VLDL contm Apo CII, que assim como nos quilomcrons, ativa a LPL nas clulas endoteliais, o que leva hidrlise de TAG a partir do ncleo da VLDL, transformando-a em IDL, e subseqentemente em LDL. Durante o processo de transformao lipoltica de VLDL em LDL, o excesso de fosfolipdios e apolipoprotenas (exceto Apo B-100) transferido para HDL. O colesterol que retorna ao figado reutilizado para a secreo de lipoprotenas ou utilizado na produo de sais biliares ou excretado diretamente na bile. VLDL Apo B-100 Apo C Apo E
Lipoprotenas LDL (Lipoprotenas de Baixa Densidade) Beta lipoproteina
244
Constituem cerca de 50% da massa total de lipoprotenas sanguneas. So muito menores que as lipoprotenas ricas em TAG (como quilomcron e VLDL), no turvam o plasma e nem alteram suas caractersticas O colesterol, em sua maioria esterificado, contribui com 50% da massa de LDL.
Cerca de 25% de sua massa composta de protenas: Apo B-100 Apo C
Sua principal funo fornecer colesterol para os tecidos perifricos.
Lipoprotenas HDL (Lipoprotenas de Alta Densidade) Alfa lipoprotena
245
HDL uma partcula pequena, constituda de aproximadamente 50% de protena, 20% de colesterol (principalmente esterificado), 30% de fosfolipdios e apenas traos de TAG . So sintetizadas e secretadas tanto pelo fgado quanto pelo intestino. Porm, a HDL nascente do intestino contm somente a Apo A, estando ausentes as Apos C ou E. Assim, as Apos C e E so sintetizadas no fgado e transferidas HDL intestinal quando esta entra no plasma. Uma importante funo da HDL atuar como depsito as Apos C e E, que so necessrias ao metabolismo dos quilomcrons e VLDL. Seu papel mais importante consiste na captao do excesso de colesterol nos tecidos perifricos, com remoo para o fgado, conhecido como transporte reverso de colesterol.
Apolipoprotenas: Apo AI Principal apo de HDL, ativadora da LCAT. Apo AII Apo C Apo E
Lipoprotenas Lp(a) (Lipoprotena A) Pr Beta
246
Lipoprotena semelhante LDL, porm de menor ocorrncia.
Os componentes apo de Lp(a) so a Apo B e a Apo(a), ligadas entre si por pontes dissulfeto.
A Apo(a) apresenta alto grau de homologia com o plasminognio, e assim foi sugerido que a presena de quantidades de Lp(a) proporcionaria uma interferncia no processo de tromblise. Essa suposio ajuda a explicar a associao entre valores elevados de Lp(a) e a ocorrncia de doenas cardiovasculares.
Metabolismo das Lipoprotenas Via exgena
247
Os quilomcrons so formados na mucosa intestinal e tm a funo de manter os lipdios exgenos em soluo aquosa. Essas lipoprotenas so liberadas na linfa intestinal (quilo), que circula pelos vasos linfticos at serem drenadas pelo ducto torcico para as grandes veias do corpo. Aps entrarem na circulao, adquirem do HDL lipoprotenas adicionais, como Apo E e Apo C (I, II e III).
Os quilomcrons, ento, aderem a stios de ligao na superfcie interna (endotlio) dos capilares nos msculos esquelticos e no tecido adiposo. Nestes locais, seus TAG so hidrolisados pela ao da lipoprotena lipase (LPL), uma enzima extracelular ativada por Apo C II. Os monoacilgliceris e cidos graxos liberados por hidrlise so carreados pela albumina e captados pelos tecidos adiposo, para armazenamento, e muscular, como fonte energtica. Assim, os quilomcrons vo diminuindo de tamanho, medida que os TAG so hidrolisados, at serem reduzidos forma de quilomcrons remanescentes, ricos em colesterol. Os remanescentes, ento, transferem o excesso de fosfolipdios de superfcie e as Apo A de volta para o HDL e dissociam-se do endotlio capilar, entrando novamente na circulao, sendo captados pelo fgado. Assim, os quilomcrons transferem TAG da dieta aos tecidos muscular e adiposo e o colesterol da dieta para o fgado.
Metabolismo das Lipoprotenas Via exgena
248
Metabolismo das Lipoprotenas Via endgena
249
A funo primria da via endgena transferir os lipdios derivados do fgado, especialmente TAG, para as clulas perifricas para o metabolismo energtico. Esse processo mediado pela Apo B 100, contida nas lipoprotenas carreadoras de lipdios endgenos (VLDL, IDL, LDL). Os lipdios hepticos representam lipdios que foram sintetizados pelo fgado ou lipdios dietticos que foram transferidos para o fgado pela via exgena. Assim como nos quilomcrons, a Apo C II na VLDL tambm ativa LPL nas clulas endoteliais. A liplise progressiva dos TAG a partir do ncleo da VLDL transforma-a em IDL e subseqentemente em LDL. Aproximadamente metade das partculas contendo Apo B 100 nesta via removida, pelos receptores hepticos de remanescentes, antes de passar pela liplise completa. A poro restante convertida por todo o caminho at LDL. O TAG neste LDL , ento, removido pela protena de transferncia de steres de colesterol (CETP),que remove o TAG do LDL e o troca pelos steres de colesteril do HDL. Durante a transformao lipoltica do VLDL em LDL, o excesso de fosfolipdios e apolipoprotenas transferido para o HDL, exceo de Apo B 100.
Metabolismo das Lipoprotenas Via endgena
250
Metabolismo das Lipoprotenas Via de Transporte de Colesterol Intracelular
251
Alm da produo a partir da biossntese celular, todas as clulas recebem colesterol por meio da captao de lipoprotenas extracelulares pelos receptores de superfcie, como o receptor para LDL (RLDL). A LDL seqestrada pelo RLDL que se liga especificamente a Apo B 100 e Apo E.
Indivduos homozigticos portadores de hipercolesterolemia familiar (HF), cujas clulas so totalmente desprovidas de receptores de LDL (RLDL) funcionais, acumulam grandes quantidades de colesterol na circulao sangunea. Este fato est fortemente relacionado ao aparecimento de placas de ateroma.
Pelo fato da maioria das clulas no catabolizar colesterol posteriormente, qualquer colesterol distribudo para a clula ou utilizado para a biognese da membrana, ou ser armazenado (o excesso) em gotas lipdicas intracelulares aps reesterificao pela ACAT ou ento ser carregado da clula pela via de transporte reverso de colesterol. OBS.: Qualquer excesso intracelular de colesterol inibir qualquer biossntese posterior deste, por meio da infra-regulao de HMG-CoA redutase e outras enzimas da via biossinttica de colesterol. O excesso de colesterol tambm inibir a expresso do receptor de LDL e induzir a sntese de protenas envolvidas no transporte reverso do colesterol.
252
Endocitose de LDL
252
Metabolismo das Lipoprotenas Via de Transporte de Colesterol Intracelular
253
Metabolismo das Lipoprotenas Via de Transporte Reverso de Colesterol
254
Embora o colesterol seja um componente necessrio e essencial a todas as membranas celulares, o excesso de colesterol alterar as propriedades biofsicas das membranas e mais tarde se tornar txico para a clula. O HDL ajuda as clulas em sua homeostase de colesterol removendo-o das clulas por meio de vrios mecanismos diferentes. O transportador ABCA1 medeia o efluxo de colesterol e fosfolipdios para as apolipoprotenas pobres em lipdios, Apo A I e Apo E (lipidao das apolipoprotenas em questo). Sem este processo, a Apo A I rapidamente catabolizada por meio de depurao renal e heptica devido ao seu tamanho pequeno. Este processo ocorre nos entercitos e hepatcitos, e resulta na formao de HDL nascente em forma de disco. O HDL discide tambm interage com ABCA1 presente nas membranas plasmticas das clulas perifricas e remove o colesterol em excesso nestas. O efluxo de colesterol dos macrfagos tambm amplamente dependente da atividade de ABCA1, e sem ele, eles rapidamente acumularo steres de colesterol e formaro clulas espumosas.
255
A LCAT, enzima plasmtica, liga-se ento ao HDL discide a fim de promover a esterificao do colesterol recm-captado das membranas das clulas, processo que se d por converso dos fosfolipdios e colesterol livre em lisolectina e steres de colesterol. Os steres de colesterol apolares penetram no interior hidrofbico da bicamada fosfolipdica, enquanto a lisolectina transferida para a albumina plasmtica.
A reao prossegue, gerando um ncleo apolar que empurra a dupla camada at que se forme uma HDL esfrica (HDL3, pobre em lipdios). Este HDL esfrico tambm age como um aceptor extracelular de colesterol, que pode ser removido pelo transportador ABCG1 (nos macrfagos) ou por um mecanismo de difuso passiva. Na etapa seguinte, o fgado remove os steres de colesteril do HDL esfrico rico em lipdios (HDL2) e libera o HDL3 para rodadas adicionais de remoo de colesterol das clulas perifricas. H outro mecanismo, onde a protena de transferncia de colesterol ster (CETP) atua, favorecendo a remoo dos TAG presentes nas partculas de LDL para o HDL, trocando estes TAG por steres de colesterol de HDL2, onde, ao fim do processo, a LDL removida da circulao pelos receptores hepticos de LDL. A CETP desempenha um papel importante nesta via, porque uma frao significativa de colesterol que removida das clulas pelo HDL transferida como steres de colesteril para o LDL pela CETP, e subseqentemente removida pela circulao pelos receptores hepticos de LDL.
256
257
Anlise Laboratorial: Mensurao dos Lipdios
Exames para Colesterol (Colesterol Total) Orientaes ao paciente: 1. Permanecer em jejum, exceo de gua, durante 12-14 h. 2. Abster-se de lcool durante 72 h antes do exame 3. Nenhuma atividade fsica vigorosa deve ser realizada nas 24 h que antecedem o exame 4. Se possvel, suspender os medicamentos que afetam os resultados nas 24 h que antecedem o exame.
Amostra Soro ou plasma heparinizado, isentos de hemlise Mtodos Liebermann e Burchard reao de cor verde ou verde-azulado do colesterol com H2SO4 e anidrido actico. Sofre interferncia de bilirrubina, protenas e hemoglobina. Abell-Kendall Mtodo multietapas, melhoria do mtodo anterior. Minimiza os efeitos dos interferentes positivos e negativos. Envolve a saponificao do colesterol ster por base forte (hidrxido), extrao com ter de petrleo, com finalmente o desenvolvimento da cor por adio de H2SO4 e anidrido actico.
258
Exames para Colesterol (Colesterol Total)

Mtodos Enzimticos
O grupo 3-OH do colesterol livre ento oxidado em cetona em uma reao que exige oxignio, catalisada pela colesterol oxidase.
259

Mtodos Enzimticos O H2O2 ento mensurado em uma reao catalisada por peroxidase, que forma um corante colorido, cuja absorbncia medida num comprimento de onda de cerca de 500 nm.
260

Mtodos Enzimticos Os mtodos enzimticos esto sujeitos a interferncias de outros compostos coloridos ou daqueles que competem com a reao de oxidao, tais como bilirrubina, cido ascrbico e hemoglobina. Esse tipo de reao no se mostra inteiramente especfica para o colesterol, j que outros esteris que contm hidroxil, como o esterol vegetal sitosterol. Porm, no to relevante, pois os interferentes esteris plasmticos encontram-se em concentraes muito baixas.
Os exames, em geral, so lineares at 600-700 mg/dL
Valores de Referncia para o colesterol total em adultos (mg/dL) timo Limtrofe Alto
<200 200 a 239 > 240
261
Exames para Triglicerdeos (TAG)

Orientaes ao paciente: 1. Permanecer em jejum, exceo de gua, durante 12-14 h. 2. Abster-se de lcool durante 72 h antes do exame 3. Nenhuma atividade fsica vigorosa deve ser realizada nas 24 h que antecedem o exame 4. Se possvel, suspender os medicamentos que afetam os resultados nas 24 h que antecedem o exame. Amostra Soro ou plasma heparinizado isentos de hemlise
Valores de Referncia para os triglicerdeos (mg/dL) timo Limtrofe Alto Muito Alto
<150 150 a 200 200 a 499 500
262

Mtodos Enzimticos
263

Mtodos Enzimticos
264

Alteraes As concentraes endgenas de glicerol introduzem um erro significativo em determinadas condies, tais como:
1. DIABETES MELLITUS;
2. ESTRESSE EMOCIONAL ; 3. ADMINISTRAO INTRAVENOSA DE FRMACOS OU NUTRIENTES CONTENDO GLICEROL; 4. CONTAMINAO DOS DISPOSITIVOS DE COLETA DE SANGUE PELO GLICEROL; 5. ARMAZENAMENTO REFRIGERADAS. PROLONGADO DO SANGUE TOTAL SOB CONDIES NO-
265
Quantificao de Lipoprotenas
Mtodos de ultracentrifugao Ultracentrifugao Preparativa O plasma centrifugado seqencialmente, em densidade = 1,006 kg/L e em d = 1,063 kg/L. As concentraes de colesterol da flutuao respectiva de VLDL e das fraes LDL so quantificadas como um ndice das concentraes dessas lipoprotenas. O colesterol no infranadante em d= 1,063 kg/L corresponde quase exclusivamente ao HDL
Densidade (kg/L)
1,006 1,063 1,210
Flutuam
Q e VLDL LDL e VLDL Todas
Precipitam
HDL, LDL HDL nenhuma
266
Mtodos de ultracentrifugao
267
Mtodos de ultracentrifugao
268
Mtodo de Friedewald (indireto) Emprega uma equao que capaz de estabelecer uma correlao entre a concentrao de colesterol total e triglicerdeos totais com a concentrao de cada lipoprotena. Neste mtodo, os valores de colesterol total (CT), triglicerdeos (TAG) e colesterol-HDL (HDLC) so medidos e o colesterol LDL (LDL-C) calculado a partir das mensuraes primrias por meio do uso da equao emprica de Friedewald, onde todas as concentraes so dadas em mg/dL :
Na prtica, no deve ser usada quando as amostras de TAG apresentam valores acima de 400 mg/dL, ou as amostras contm quilomcrons em quantidades significativas ou o paciente apresenta disbetalipoproteinemia.
269
VALORES DE REFERNCIA DOS LIPDIOS SRICOS EM ADULTOS
Analito
Valores (mg/dL)
< 150 150 a 199 200 a 499
500
Classificao
timo Limtrofe Alto Muito Alto timo Limtrofe Alto Ideal Prximo ou acima do ideal Limtrofe Alto Alto Muito Alto Desejvel Baixo Alto
TAG
< 200 CT
200 a 239
240
< 100 100 a 129 LDL-C 130 a 159 160 a 189 190 40 HDL-C < 40 > 60
270
VALORES DE REFERNCIA DOS LIPDEOS NO SORO ( entre 2 a 19 anos de idade) Analito

< 10 anos
Valores (mg/dL)
100 >100 130 >130 < 170
Classificao
Desejvel Aumentado Desejvel Aumentado Desejvel Limtrofe Aumentado Desejvel Limtrofe Aumentado Desejvel Desejvel
TAG
10 a 19 anos
CT
170 a 199 200 < 110
LDL-C
110 a 129 130 40 35
HDL-C
< 10 anos 10 a 19 anos
Amostras de plasma Lipmico
271
Xantomas e Xantelasmas
272
273
Lipemia Retinalis
Retina de paciente hiperlipmico
Padro de Retina Normal

Associao entre nveis de colesterol e Coronariopatias Colesterol e Aterognese
274
J em 1910, Windaus descrevia o colesterol nas leses de artrias com doena aterosclertica. Inmeros estudos estabeleceram que quando as concentraes de colesterol total e de colesterol-LDL so altas, a incidncia e prevalncia de doenas cardiovasculares tambm so altas. Ao contrrio do colesterol-LDL, o colesterol-HDL mostrou ser protetor para a doena cardiovascular, tanto em estudos experimentais e epidemiologicos quanto clnicos. Pelo fato de a aterosclerose comear na infncia e poder levar dcadas para manifestar-se clinicamente, a mensurao dos lipdios e lipoprotenas plasmticas um meio valioso de identificar indivduos em risco para coronariopatias e determinar a terapia mais apropriada.
Associao entre nveis de colesterol e Coronariopatias Distrbios Genticos no Metabolismo de Lipoproteinas
275
A etiologia das dislipidemias bastante variada, podendo estar relacionada a fatores como dieta, frequencia de exerccios (e, por conseguinte, sedentarismo) e obesidade, que desempenham papis principais na contribuio para a hipercolesterolemia. Alm disso, existem polimorfismos de enzimas, protenas estruturais e receptores envolvidos no metabolismo de lipoprotenas que causam um impacto maior na tendncia de qualquer indivduo de desenvolver uma dislipidemia.
Classificao Fenotpica das Hiperlipoproteinemias segundo Fredrickson
Tipo I IIa IIb III IV V
Lipoprotena em excesso Quilomcrons LDL LDL e VLDL VLDL e IDL VLDL VLDL e Quilomcrons
Elevao Lipdica TAG Colesterol Colesterol e TAG Colesterol e TAG TAG TAG e Colesterol
Associao entre nveis de colesterol e Coronariopatias Colesterol e Aterognese
276
A aterosclerose caracterizada pela presena de ateromas (do grego: athera, mingau), espessamentos arteriais que, ao serem seccionados, mostram um depsito amarelado e pastoso feito quase somente de steres de colesteril. uma doena progressiva que se inicia com depsitos de lipdios no interior das clulas da musculatura lisa da parede interna das artrias. Essas leses acabam transformando-se em placas calcificadas fibrosas que reduzem a luz das artrias, podendo at mesmo bloque-las. A conseqente rugosidade da parede arterial induz a formao de cogulos sanguneos, que tambm podem ocluir as artrias.
A parada do fluxo sanguneo, conhecida como infarto, causa a morte dos tecidos privados de sangue.
Embora os ateromas possam ocorrer em muitas artrias diferentes, eles so mais freqentes nas artrias coronrias, que irrigam o corao, o que resulta nos infartos do miocrdio, ou ataques do corao, que constituem a causa mais freqente de morte nos pases ocidentais industrializados.
277
278
Sumrio
DOENAS CARDIOVASCULARES
Insuficincia Cardaca Cardiopatia Congnita
PRINCIPAIS DOENAS
Cardiopatia Isqumica: Infarto do Miocrdio (IM)

Miocardiopatias Cardiopatia Hipertensiva /Doena Vascular Hipertensiva Cardiopatia Valvar: Febre Reumtica e Endocardite Infecciosa
Estrutura das Artrias
ATEROSCLEROSE
FATORES DE RISCO
Modificveis No-Modificveis
Patogenia da Aterosclerose CK (famlia CK) Mioglobina BNP LDH PCR-S
MARCADORES DE SUSCEPTIBILIDADE E OCORRNCIA (IM)
Troponinas LDL oxidada Homocistena (Hcy)
Doenas Cardiovasculares
Introduo
279
Possuem diversas etiologias, tais como defeitos congnitos na estrutura do corao, doenas parasitrias (doena de Chagas), alteraes no fluxo sanguneo e alteraes cardacas por morte celular (infarto). O infarto do miocrdio (IM) pode ocorrer em qualquer idade, mas sua freqncia eleva-se progressivamente com o aumento da idade e na presena de fatores que predispem a aterosclerose.
Cerca de 10% dos infartos ocorrem em pessoas com menos de 40 anos e 45% acometem pessoas de menos de 65 anos. Negros e brancos so igualmente afetados.
Durante toda a vida, homens tm risco significativamente maior de desenvolver um IM do que as mulheres, em parte devido proteo gerada pela presena do estrognio (a menos que a mulher tenha outros fatores de risco).
Aterosclerose
280
A aterosclerose o padro mais freqente e clinicamente importante de espessamento arterial, ou arteriosclerose. A aterosclerose caracterizada pela presena de ateromas (do grego: athera, mingau; sklerosis, endurecimento), espessamentos arteriais que, ao serem seccionados, mostram um depsito amarelado e pastoso feito quase somente de CE. Uma placa ateromatosa, ento, consiste em uma leso elevada com centro mole, amarelo e grumoso de lipdios (principalmente CL e CE), coberta por uma cpsula fibrosa branca. Alm de obstruir mecanicamente o fluxo sanguneo, as placas aterosclerticas podem romper-se, levando a uma trombose catastrfica dos vasos. As placas tambm enfraquecem a mdia subjacente e, assim, levam formao de aneurisma. A aterosclerose causa muito mais morbidade e mortalidade (~50% dos bitos) no mundo ocidental do que qualquer outro transtorno.
Estrutura dos Vasos Sanguneos
281
Epidemiologia: Fatores de Risco para Aterosclerose
282
MODIFICVEIS
Obesidade
Sedentarismo Dislipidemia
NO MODIFICVEIS
Idade
Gnero Gentica
Diabetes
Hipertenso Estresse
lcool
Tabagismo Elevao da hs-CRP Elevao dos Fatores de Coagulao Elevao de Hcy Elevao de Lp(a)
Epidemiologia da Aterosclerose: Fatores de Risco NO-MODIFICVEIS
283
IDADE uma influncia dominante. Embora a aterosclerose seja tipicamente progressiva, geralmente no se torna evidente at a meia-idade ou mais tarde. Entre as idades de 40 e 60 anos, a incidncia de IM aumenta cinco vezes GNERO Mulheres pr-menopausa so relativamente protegidas contra aterosclerose e suas conseqncias em comparao com os homens. Assim, o IM e outras complicaes da aterosclerose so incomuns em mulheres pr-menopausa na ausncia de fatores de risco, tais como diabetes, hiperlipidemia ou hipertenso grave. Contudo, em idades ps-menopausa a incidncia de doenas relacionadas com a aterosclerose aumenta e, em idades mais avanadas, excede a dos homens. GENTICA Os antecedentes familiares so o fator de risco independente mais significativo para aterosclerose. Todavia, as doenas genticas so responsveis apenas por uma pequena porcentagem de casos.
Epidemiologia da Aterosclerose: Fatores de Risco MODIFICVEIS
HIPERLIPIDEMIA (mais especificamente, hipercolesterolemia)
284
um fator de risco importante para aterosclerose; at na ausncia de outros fatores, a hipercolesterolemia suficiente para estimular o desenvolvimento da leso. O principal componente do colesterol srico associado a aumento do risco o colesterol contido na lipoprotena de baixa densidade (LDL), que atua oferecendo colesterol aos tecidos. Em contrapartida, a lipoprotena de alta densidade (HDL) atua removendo o excesso de colesterol dos tecidos, mobilizando-o para a excreo heptica. Conseqentemente, nveis mais altos de HDL se correlacionam com reduo do risco. HIPERTENSO A hipertenso aumenta em at 60% o risco de desenvolver doena cardiovascular isqumica (DCI)
Epidemiologia da Aterosclerose: Fatores de Risco MODIFICVEIS
TABAGISMO
285
Nos homens um fator de risco bem estabelecido e provavelmente responsvel pelo aumento da incidncia e da intensidade da aterosclerose nas mulheres.
O tabagismo prolongado (anos) de um mao ou mais por dia duplica a taxa de mortes por DCI. O abandono do tabagismo reduz substancialmente o risco.
Patogenia da Aterosclerose
286
- H duas hipteses dominantes que buscam explicar os mecanismos por trs da aterosclerose: uma enfatiza a proliferao celular e a outra enfoca a formao repetitiva e a organizao dos trombos. O ponto de vista contemporneo incorpora elementos de ambas as teorias, e tambm integra os fatores de risco j citados. HIPTESE DA RESPOSTA LESO - Esta teoria v a aterosclerose como uma resposta inflamatria e de resoluo crnica da parede arterial leso endotelial. Ocorre progresso da leso atravs da interao de lipoprotenas modificadas, de macrfagos derivados de moncitos e de linfcitos T com os constituintes normais da parede arterial.
287
De acordo com esse modelo, a aterosclerose produzida pelos seguintes eventos patognicos: Leso Endotelial, que causa (entre outras coisas) aumento da permeabilidade vascular, adeso de leuccitos e trombose. Acmulo de Lipoprotenas, principalmente LDL e suas formas oxidadas, na parede do vaso. Adeso de Moncitos ao endotlio, seguida por migrao para a ntima e transformao em macrfagos e clulas espumosas. Adeso plaquetria Liberao de fatores das plaquetas, macrfagos e clulas da parede vascular ativados, induzindo recrutamento de clulas musculares lisas, seja da mdia, seja de precursores circulantes. Proliferao de clulas musculares lisas e produo de matriz extracelular (MEC)
Acmulo de lipdios extracelularmente e dentro das clulas (macrfagos e clulas musculares lisas)
288
LESO ENDOTELIAL A perda endotelial por qualquer tipo de leso induzida experimentalmente por desnudamento mecnico, foras hemodinmicas, deposio de imunocomplexos, irradiao ou substncias qumicas resulta em espessamento da ntima; na presena de dietas ricas em lipdios, surgem ateromas tpicos. No entanto, podem ocorrer leses em locais de endotlio morfologicamente intacto. Neste caso, clulas endoteliais disfuncionais mostram aumento da permeabilidade endotelial, aumento da adeso de leuccitos e alterao da expresso gentica. Dentre os fatores que contribuem para disfuno endotelial esto hipertenso, hiperlipidemia, toxinas do cigarro, homocistena e agentes infecciosos. As duas causas mais importantes de disfuno endotelial so: Desequilbrios Hemodinmicos Lipdios
LESO ENDOTELIAL
289
Desequilbrios Hemodinmicos
290
A importncia da turbulncia hemodinmica na aterognese ilustrada pela observao de que as placas tendem a ocorrer nos stios de sadas de vasos, nos pontos de ramificaes e ao longo da parede posterior da aorta abdominal, onde h distrbios dos padres de fluxo.
Estudos in vitro demonstraram melhor que o fluxo laminar no-turbulento na vasculatura normal leva induo de genes endoteliais, cujos produtos (ex.: antioxidante superxido dismutase) atuam como protetores contra a aterosclerose.
Lipdios
291
As evidncias que implicam a hipercolesterolemia na aterognese incluem as seguintes observaes: 1. Os lipdios dominantes nas placas ateromatosas so o colesterol e os steres de colesterol. 2. Os defeitos genticos na captao e metabolismo das lipoprotenas que causam hiperlipoproteinemia se associam a uma aterosclerose acelerada. (ex.: Hipercolesterolemia Familiar) 3. Outros distrbios genticos ou adquiridos (ex.: diabetes melito, hipotireoidismo) que causem hipercolesterolemia levam aterosclerose prematura. 4. Anlises epidemiolgicas demonstram uma correlao significativa entre a intensidade da aterosclerose e os nveis de colesterol total ou de LDL no plasma. 5. A reduo do colesterol srico por dieta ou medicamentos torna mais lenta a taxa de progresso da aterosclerose, causa regresso de algumas placas e reduz o risco de eventos cardiovasculares.
Lipdios
292
Os mecanismos pelos quais a hiperlipidemia contribui para a aterognese incluem os seguintes: Hiperlipidemia Crnica, particularmente hipercolesterolemia, pode comprometer diretamente a funo das clulas endoteliais por aumento da produo de radicais livres de oxignio locais; os radicais livres de oxignio podem lesar tecidos e acelerar o decaimento do xido ntrico, reduzindo sua atividade vasodilatadora.
292
293
Lipdios Com a hiperlipidemia crnica, as lipoprotenas se acumulam no interior da ntima. Esses lipdios so oxidados atravs da ao de radicais livres de oxignio gerados localmente por macrfagos ou clulas endoteliais. O LDL oxidado fagocitado pelos macrfagos atravs de um receptor depurador (receptor scavenger), distinto do receptor do LDL, e se acumula nos fagcitos, que so ento chamados de clulas espumosas (foam cells).
Alm disso, o LDL oxidado estimula a liberao de fatores de crescimento, citocinas e quimiocinas pelas clulas endoteliais e macrfagos, que aumentam o recrutamento de moncitos para as leses.
Inflamao
294
As clulas e vias inflamatrias contribuem para o incio, a progresso e as complicaes das leses aterosclerticas. Embora os vasos normais no se liguem a clulas inflamatrias, no incio da aterognese, as clulas endoteliais arteriais disfuncionais expressam molculas de adeso que incentivam a adeso de leuccitos.
A molcula de adeso a clulas vasculares-1 (VCAM-1), em particular, liga-se a moncitos e linfcitos T. Depois que estas clulas aderem ao epitlio, migram para a ntima sob a influncia de quimiocinas produzidas localmente.
Inflamao -Os moncitos se transformam em macrfagos e englobam avidamente as lipoprotenas, inclusive o LDL oxidado. - Ocorre o recrutamento e a diferenciao dos moncitos em macrfagos (e, finalmente, em clulas espumosas), que so teoricamente protetores, porque estas clulas removem partculas lipdicas potencialmente prejudiciais.
295
- No entanto, o LDL oxidado potencializa a ativao dos macrfagos e a produo de citocinas.
Inflamao
296
- Os macrfagos ativados tambm produzem espcies reativas de oxignio que agravam a oxidao do LDL e elaboram fatores de crescimento que impulsionam a proliferao de clulas musculares lisas.
Inflamao
297
-Os linfcitos T recrutados para a ntima interagem com os macrfagos e podem gerar um estado inflamatrio crnico.
- NO EST CLARO SE OS LINFCITOS T ESTO RESPONDENDO A ANTGENOS ESPECFICOS (ex.: antgenos bacterianos ou virais, ou constituintes modificados da parede arterial e lipoprotenas) OU SE SO ATIVADOS INESPECIFICAMENTE PELO MEIO INFLAMATRIO LOCAL.
- Todavia, os linfcitos T ativados nas leses da ntima em crescimento elaboram citocinas inflamatrias (ex.: IFN-), que podem estimular os macrfagos, bem como as clulas endoteliais e as clulas musculares lisas. - Em conseqncia do estado inflamatrio crnico, os leuccitos ativados e as clulas da parede vascular liberam fatores de crescimento que promovem a proliferao de clulas musculares lisas e sntese da matriz extracelular.
298
298
299
Aorta com estrias gordurosas, associadas amplamente aos stios dos ramos dos vasos
300
Fotomicrografia de estria gordurosa num coelho de experimentao hipercolesterolmico, demonstrando a ntima, clulas espumosas (setas)
Proliferao de Msculo Liso
301
A proliferao de clulas musculares lisas da ntima converte uma estria gordurosa, a leso mais inicial, em ateroma maduro e contribuem para o crescimento progressivo das leses aterosclerticas (As clulas musculares lisas da camada ntima podem ser recrutadas de precursores circulantes e que tm um fentipo proliferativo e sinttico distinto daquele subjacente s clulas musculares lisas da mdia)
- As clulas musculares lisas recrutadas sintetizam MEC (notavelmente colgeno), que estabiliza as placas aterosclerticas. No entanto, as clulas inflamatrias ativadas dos ateromas podem causar apoptose de clulas musculares lisas da ntima e tambm podem aumentar o catabolismo da MEC, resultando em placas instveis.
301
302
Seqncia hipottica de Interaes celulares na aterosclerose
Conseqncias da Doena Aterosclertica
Ruptura, ulcerao ou eroso trombose Hemorragia em uma placa Ateroembolia (produo de micrombolos por ruptura da placa) Formao de Aneurisma (perda de elasticidade, fraqueza, dilatao, ruptura
303
303
Infarto do Miocrdio (IM)
304
O evento inicial consiste em uma alterao sbita da morfologia de uma placa ateromatosa, que pode consistir em hemorragia no interior da placa, eroso ou ulcerao, ou ruptura ou fissuramento. Quando so expostas ao colgeno subepitelial e ao contedo necrtico da placa, as plaquetas do incio aos processos de adeso, agregao, ativao e liberao de potentes agentes agregadores para formar o trombo. O vasoespasmo estimulado por mediadores liberados das plaquetas. O fator tecidual ativa a cascata de coagulao, aumentando o volume do trombo.
Freqentemente, dentro de minutos, o trombo evolui e oclui completamente o lmen do vaso.

A obstruo da artria coronariana compromete o suprimento sanguneo a uma regio do miocrdio, provocando isquemia, disfuno do miocrdio e potencial morte celular. A regio irrigada por essa artria denominada rea de risco.
Patogenia do IAM
305
A conseqncia bioqumica imediata da isquemia do miocrdio a cessao do metabolismo aerbico em um perodo de segundos, levando produo inadequada de fosfatos de alta energia (creatina fosfato, p. ex) e ao acmulo de produtos de degradao potencialmente nocivos (como o cido lctico).
Por causa da extrema dependncia da funo do miocrdio do oxignio, a isquemia grave induz a perda de contratilidade dentro de 60 segundos.
Esse fato pode precipitar o aparecimento de uma insuficincia cardaca aguda bem antes do incio da morte celular do miocrdio.
O infarto, ento, consiste na morte do msculo cardaco resultante de isquemia grave prolongada.
306
Biomarcadores
307
Biomarcadores de Leso Muscular Cardaca Mioglobina Troponina I e C CK-MB LDH-1 e LDH-2
Biomarcadores de Susceptibilidade e Ocorrncia [LDL] x [HDL] Protena C-Reativa de Alta Sensibilidade (CRP-S)
Homocistena (Hcy) Peptdio Natriurtico Cerebral (BNP)
Biomarcadores 1. Incio do IM 2. Membrana plasmtica necrticos torna-se perfurada dos micitos
308
3. Molculas vazam para fora e chegam circulao
4. Essas molculas podem ser usadas biomarcadores para o diagnstico do IM.
como
309
Mioglobina Necrose: CK-MB Troponina
Bio-
Marcadores
Cardacos
Marcadores de Risco: CRP, LpPLA2, e Testes Avanados de Lipdios

Ativao Neuro-hormonal:
BNP e pro-BNP
IMPORTNCIA DA DETECO PRECOCE DOS MARCADORES
310
Nas fases iniciais da aterosclerose, medida que o fluxo sanguneo coronariano gradativamente reduzido, NO EXISTEM SINTOMAS TPICOS OU EVIDNCIAS CLNICAS OU
LABORATORIAIS DE LESO CARDACA.

Uma vez a luz estreitada a menos de 10 ou 20% do seu dimetro original, a dor no trax
(angina de peito) ocorre quando a demanda por O2 aumenta, particularmente por aumento
da atividade fsica (angina de esforo).
Cerca de 25% dos pacientes com IAM possuem CK ou CK-MB normais na amostra inicial,
o que levou recomendao de no utilizar, em casos de emergncia, determinaes nicas de marcadores.
Caractersticas dos Marcadores de Leso Cardaca
311
A capacidade de detectar a leso tecidual a partir do extravasamento celular de um determinado marcador depende de alguns fatores:
a) Gradiente de concentrao entre soro e plasma (CKmsculo >> CKcardaca) b) Tamanho relativo do marcador. (mioglobina < troponina < CK < LDH)
c) Depurao do marcador da circulao

d) Se o marcador se encontra livre ou ligado (troponina: ligada tropomiosina)
A especificidade do marcador muitas vezes estar relacionada com a concentrao de suas

isoenzimas, e no da simples presena da enzima. Ex.: CK e LDH so testes SENSVEIS para o dano muscular, mas somente suas isoenzimas so
capazes de distinguir a musculatura lesada, se cardaca ou esqueltica.

NO BASTA SER SENSVEL, TEM QUE SER ESPECFICO!
Biomarcadores de Leso Muscular Cardaca
312
MSCULO ESQUELTICO Mioglobina Troponina I e C CK-MM
MSCULO CARDACO Mioglobina Troponina I e C (cardaca) CK-MB
LDH-4 e LDH-5
LDH-1 e LDH-2
313
Catalisa a fosforilao reversvel da creatina por ATP
-Quando o msculo se contrai, o ATP convertido em ADP, e a CK catalisa a refosforilao de ADP a ATP, usando a creatina fosfato como reservatrio de fosforilao.
-Mg2+ on ativador obrigatrio de CK.
314
A atividade de CK maior no tecido muscular estriado e no tecido cardaco.
CK um dmero de duas subunidades (B e M).

Assim, existem 3 diferentes pares de subunidades:
a) BB (ou CK-1)
c) MM (ou CK-3)
b) MB (ou CK-2)
315
A distribuio das isoenzimas mostrada na tabela: Tecido Musculo Esqueltico (tipo I, contrao lenta ou fibras vermelhas) Msculo Esqueltico (tipo II, contrao rpida ou fibras brancas) Corao Msculo Liso: TGI Msculo Liso: Bexiga Urinria Prstata Placenta
CK-BB < 1% < 1% < 1% 96 % 92 % 95-100 % 100 %
CK-MB 3% 1% 22% 1% 6% 0-2 % 0%
CK-MM 97% 99% 78% 3% 2% 0-5% 0%
316
A atividade de CK tambm encontrada na forma macromolecular, chamada CK-Macro (ou Macro-CK). encontrada freqentemente no soro de at 6% de pacientes hospitalizados Existe em duas formas: 1 e 2 a) Tipo 1: complexo de CK (em geral, CK-BB) com uma Imunoglobulina (Ig), em geral IgG, mas pode ser tambm IgA b) Tipo 2: CK-Mt oligomrica, cujos monmeros esto presentes nas mitocndrias e raramente so liberados. Encontrada predominantemente em pacientes adultos, acometidos de malignidades ou doena heptica, ou crianas que tenham tecido com dano notvel - seu aparecimento no soro est ligado a um prognstico ruim A Macro-CK interfere na dosagem de CK-MB por mtodos de imunoinibio.
317
Significado Clnico: A atividade srica de CK est muito elevada em todos os tipos de distrofia muscular, na hipertermia maligna, aps exerccios intensos e em casos de traumas musculares. O aumento da atividade srica, ento, depende de leso muscular, com extravasamento do contedo intracelular, incluindo as enzimas, tais como CK. Porm, nas doenas musculares neurognicas, como miastenia gravis, esclerose mltipla, poliomielite e doena de Parkinson, a atividade srica da enzima normal. A isoenzima que apresenta sensvel alterao no msculo cardaco alterado a CK-2, ou CKMB, sendo aquela a ser dosada para avaliao do risco e leso do tecido muscular cardaco (de 2 a 3% eleva-se at 10-15%).
318
Dosagem da Atividade de CK: Mtodo de Oliver-Rosalki H vrios mtodos (fotomtricos, fluorimtricos, enzimticos) acoplados ao cataltica da
enzima utilizados para quantificar sua atividade.

Preferencialmente utiliza-se a fosforilao de ADP a partir de Creatina-Fosfato, porque se d de maneira mais rpida (at 6 vezes mais rpida) que a reao direta
Ao se formar NADPH, o aparecimento deste, ento, monitorado espectrofotometricamente
319
A atividade srica est sujeita a variveis, tais como sexo, idade, massa muscular, atividade fsica e raa (etnia) Ex.: Homens tm valores mais altos que as mulheres, e os negros mais baixos que os nonegros. Enzima Fonte Janela Diagnstica Utilidade Clnica
CK total
Msculo esqueltico, msculo cardaco, crebro e outros

Principalmente msculo cardaco; pequena frao no msculo esqueltico
Aumento: 6-8h Pico: 24-36h Normal: 3-4 dias
Danos musculares sistmicos
CK-MB (CK-2)
Aumento: 4-6h Pico: 12-24h Normal: > 48h
Auxlio no diagnstico do IAM
320
CK-MM (CK-3)
Presente efetivamente no msculo esqueltico Presente principalmente no crebro, mas dificilmente se eleva em virtude de leso cerebral
CK-BB (CK-1)
Elevaes podem ocorrer em casos de infarto intestinal, leses de tero, placenta, e devido a diversos tumores.
321
Aumentos: -Cateterismo -Choque eltrico -Eletrocauterizaes -Eletromiografia -Injees IM -Massagem Muscular Recente
Intervalo de Referncia: CK-total
Homens caucasianos: 46 a 171 U/L Mulheres caucasianas: 34 a 145 U/L

322
Dosagem das Isoenzimas: Eletroforese
Adulto sadio
Adulto infartado
323
Dosagem das Isoenzimas: Ensaios de Imunoinibio para CK-MB: Utilizam anticorpos para a subunidade CK-M e quantificam a atividade de CK residual. Esse mtodo multiplica a atividade residual por dois para converter em CK-MB, partindo do
pressuposto de que no existem outras fontes de atividade de CK.

Esses ensaios, porm, produzem valores falsamente elevados de CK-MB em amostras hemolisadas, com presena de CK-BB e em pessoas com Macro-CK1 ou CK2. Ocasionalmente, registram valores de CK-MB maiores que CK-total, um achado impossvel, produzido pela grande quantidade de macro-CK ou CK-BB (cuja atividade multiplicada por 2 no mtodo).
324
A tcnica mais comumente usada para quantificar CK-MB o IMUNOENSAIO DE MASSA (CKMASSA): Utiliza dois anticorpos diferentes (anti-M e anti B) ou o anticorpo monoclonal CONAN, que especfico para a isoenzima CK-MB.
Ao contrrio do observado nos ensaios de atividade, a quantificao por massa se mostra bastante estvel, mesmo em temperatura de refrigerador, apresentando pouco decrscimo quando mantida por vrios dias temperatura ambiente.
325
uma oxidorredutase: Presente somente no CITOPLASMA Contm zinco e participa da via glicoltica, catalisando a oxidao do lactato a piruvato O EDTA a inibe por ligar-se ao zinco, embora o papel do zinco ainda no esteja bem estabelecido. No plasma, a maior parte da LDH resulta da degradao de eritrcitos e plaquetas, com contribuies variveis de outros rgos.
326
um tetrmero de duas subunidades ativas: H (para corao) e M (para msculo).
Combinaes das subunidades geram 5 isoenzimas:
Tecido
Soro Corao Eritrcitos Crtex renal Pulmo Msculo esqueltico
LDH1
25 45 40 35 10 0
LDH2
35 40 35 30 15 0
LDH3
20 10 15 25 40 10
LDH4
15 5 10 20 30 30
LDH5
5 0 0 0 5 60
Fgado
10
15
70
LDH-X (ou LDHc) em humanos pr-pberes; LDH6 no soro de pacientes gravemente doentes
327
Significado Clnico Elevaes sricas ocorrem em vrias condies clnicas: 1. IAM (aumenta 8 a 12 h aps o infarto, com pico em 24-48 h, mantendo-se por 7 dias) 2. Hemlise 3. Doenas Hepticas (no tanto quanto TGO e TGP), Renais, Pulmonares e Musculares As anemias megaloblsticas, habitualmente resultantes da deficincia de folato (B9) ou vitamina B12, causam lise da clula precursora de eritrcitos na medula ssea (eritropoese ineficaz), resultando na liberao de grandes quantidades de LDH1 e LDH2 (aumento de at
50 vezes na atividade srica)

Pacientes com doena maligna mostram LDH aumentada
328
Quantificao:
A atividade de LDH pode ser mensurada atravs de sua reao direta
A quantidade de piruvato consumido determinada por adio de DINITROFENILIDRAZINA, para formar um composto colorido, a HIDRAZONA, que dosada por espectrofotometria
329
Dosagem das Isoenzimas de LDH Procedimento mais utilizado: Separao por Eletroforese em Gel de Agarose O NADH gerado sobre as zonas de LDH detectado por sua fluorescncia, quanto excitado por luz ultravioleta longa, ou por sua reduo com um sal tetrazlio, para formar um FORMAZANO colorido.
INTERVALOS DE REFERNCIA: Isoenzima LDH LDH-1 LDH-2 LDH-3 LDH-4 LDH-5

% (faixa) 14-26 29-39 20-26 8-16 6-16
330
Hemeprotena,que se liga ao oxignio nos msculos cardaco e esqueltico. Tem baixo peso molecular (18 kDa), o que permite um RPIDO EXTRAVASAMENTO CELULAR APS A LESO. Possui meia-vida plasmtica de aproximadamente 4 horas depurao renal Em indivduos normais, sua concentrao plasmtica depende da massa muscular do indivduo, alm de sua atividade muscular. Concentrao:homens > mulheres; pessoas de origem africana > de origem europia. Sua quantificao srica foi defendida, apesar de pouco especfica, por se elevar antes
da CK-MB (CK-2) aps um IAM.

Apresenta alta sensibilidade (80 a 100%), mas pouca especificidade em casos de leso ao msculo cardaco.
331
T (mdio) Horas
Marcador
Deteco Mioglobina Troponina I Troponina T CK 2-3 4-6 3-4 6-8
Valores de pico 6-8 20-24 20-24 18-24
Alterada 18-24 >144 >240 36-48
Aumento relativo mdio
12 50 50 8
CK-MB massa
Isoformas de CK-MB AST LDH
3-4
3-4 8-10 12-14
10-12
6-8 22-28 36-48
24-36
8-12 36-90 96-160
12
6 6 5
332
333
So protenas ligantes de tropomiosina, controladoras do acoplamento excitaocontrao no msculo Existem 3 subunidades: -T (ligante da tropomiosina)
- I (subunidade inibidora)
- C (ligante do clcio)
As formas de troponina encontradas no

msculo cardaco e esqueltico diferem entre si, tornando a forma cardaca um marcador
extremamente
cardaca.
especfico
para
leso
333
334
A troponina est localizada principalmente ligada s tropomiosinas (94 a 97%) , com uma
pequena frao livre no citoplasma (3 a 6%)

Diferentemente de outros marcadores cardacos, as troponinas cardacas T e I esto
essencialmente ausentes em grande parte dos soros normais mesmo com ensaios
altamente sensveis raro encontrar valores de troponina acima de 0,1 ng/mL em individuos normais. Ensaios de primeira gerao podiam fornecer resultados falsos positivos para cTnT de origem esqueltica reaes cruzadas. Ensaios de segunda gerao para cTnT e cTnI no apresentam reatividade cruzada.
335
CONDIES QUE AUMENTAM TROPONINA SEM CAUSAR INSUFICINCIA CARDACA ISQUMICA

TRAUMA CARDACO ICC HIPERTENSO HIPOTENSO DOENA NEUROLGICA AGUDA RABDOMILISE COM LESO CARDACA VASCULOPATIA POR TRANSPLANTE EMBOLISMO PULMONAR
PACIENTE PS-OPERATRIO DE CIRURGIA DOENAS INFLAMATRIAS NO-CARDACA (Ex.: MIOCARDITE)

INSUFICINCIA RENAL PACIENTES GRAVEMENTE DOENTES TOXICIDADE POR DROGA
SEPSE QUEIMADURAS HIPOTIREOIDISMO
336
336
337
T (mdio) Horas
Marcador
Deteco Mioglobina Troponina I Troponina T CK 2-3 4-6 3-4 6-8
Valores de pico 6-8 20-24 20-24 18-24
Alterada 18-24 >144 >240 36-48
Aumento relativo mdio
12 50 50 8
CK-MB massa
Isoformas de CK-MB AST LDH
3-4
3-4 8-10 12-14
10-12
6-8 22-28 36-48
24-36
8-12 36-90 96-160
12
6 6 5
338
Hormnio originalmente isolado do tecido cerebral de sunos, liberado principalmente dos ventrculos cardacos As principais formas circulantes so a poro N-terminal do pr-BNP (NTproBNP), que no possui funo conhecida, e o BNP (que a poro C-terminal). um marcador sensvel para mudanas na fisiologia vascular - ele significativamente afetado por mudanas no volume do fluido e no desempenho cardaco A secreo de BNP reflete o estresse na parede regional dos ventrculos, estando assim associado remodelagem ventricular adversa e a um pior prognstico ps-IAM.
339
Importante reagente de fase aguda (APP+), o que mais marcantemente se eleva em processos inflamatrios. Estudos epidemiolgicos prospectivos mostraram que uma nica mensurao por hsCRP um forte previsor de IM, AVC, DVP e morte cardaca sbita em indivduos sem uma histria de cardiopatia. Em uma comparao direta dos marcadores bioqumicos tradicionais e novos do risco de doenas cardiovasculares, a hs-CRP foi o preditor mais forte de eventos coronarianos futuros.
Atualmente no se sabe exatamente se a CRP um marcador que reflete a inflamao sistmica ou vascular ou se, na verdade, um participante na aterognese. CRP aumenta a expresso de molculas de adeso da superfcie celular endotelial local, protena-1 quimioatrativa do moncito, endotelina-1 e inibidor-1 do ativador do plasminognio endotelial.
O uso de estratgias farmacolgicas cardioprotetoras (AAS, estatinas) ir reduzir hs-CRP e/ou o risco de coronariopatias que est associado ao aumento de hs-CRP.
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A homocistena (Hcy), formada a partir da metionina heptica, metabolizada nas vias de desmetilao e de transulfurao, sendo que seus valores plasmticos e urinrios refletem a sntese celular. Sua determinao, realizada em jejum e aps sobrecarga de metionina, caracteriza as diferenas dessas vias metablicas, principalmente quando de natureza gentica. A hiper-homocisteinemia tem sido associada a maior risco de eventos aterotrombticos, e a literatura sugere associao causal, independente de outros fatores de risco para doena arterial.
Diminuio da homocistena plasmtica para valores normais seguida de reduo significante na incidncia de doena aterotrombtica.
A relao entre homocistena e o fgado vem adquirindo importncia nos dias atuais, uma vez que alteraes das lipoprotenas e da depurao de metionina so comuns em pacientes com doena heptica crnica (hepatocelular e canalicular). O tratamento da hiper-homocisteinemia (HHcy) fundamenta-se na suplementao alimentar e medicamentosa de cido flico e vitaminas B6 e B12.
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A patogenia da leso vascular determinada pela HHcy, embora seu mecanismo ainda seja incerto, inclui leso da clula endotelial, crescimento da musculatura lisa vascular, maior adesividade plaquetria, aumento da oxidao do LDL-colesterol com deposio na parede vascular e ativao direta da cascata da coagulao. H evidncias de que a Hcy seja um regulador natural dos leuccitos, incluindo adeso endotelial e migrao transendotelial, vieram de estudos in vivo, nos quais ela ativa independentemente cada tipo de leuccito e clula endotelial. Neutrfilos e moncitos expostos a Hcy, co-culturados com clulas endoteliais, englobam mecanismos que envolvem perxidos de hidrognio extracelular. A Hcy induz leuccitos e adeso endotelial, migrao transendotelial de leuccitos e leso endotelial mediada por leuccitos, que seletivamente muda o padro de expresso da protena de quimioatrao de moncitos (MCP-1) e interleucinas; estas sinalizam neutrfilos e respostas celulares com liberao de citocinas e agonistas inflamatrios como fator de necrose tumoral alfa (TNF-). Existe ainda muito a ser estudado sobre a influncia da He na funo das clulas sangneas e endotlio vascular.

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Centro Universitrio Augusto Motta Faculdade de Farmcia Bioqumica Clnica

APOSTILA DE BIOQUMICA CLNICA

Relao de Captulos dos Livros-Texto Utilizados neste Curso

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Espectrofotometria de Emisso de Chama

Espectrofotometria de Absoro Atmica Fluorimetria

Luminometria Nefelometria e Turbidimetria

Gel de Amido e Acetato de Celulose ELETROFORESE Gel de Agarose Gel de Poliacrilamida

MTODOS PTICOS TIPO

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Espectrofotometria Trata da medida da intensidade da luz EM COMPRIMENTOS DE ONDAS SELECIONADOS (Espectros)

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Assim, a Lei de Beer s seguida se:

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adequadamente), e a energia radiante, obtida ao longo do processo, medida enquanto o

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de produzir um comprimento de onda de luz especfico do material.

para cada elemento, graas ao comprimento de onda da lmpada de catodo seco.

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Tipos de fluormetros e espectrofluormetros

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A disperso da luz um fenmeno fsico resultante da interao da luz com partculas em

soluo contendo partculas. A turbidimetria mede a diminuio desta intensidade.

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Eletroferograma e zonas de protenas

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- Espcies qumicas carregadas eletricamente (por ionizao) movem-se em direo ao catodo

(eletrodo negativo) ou ao anodo (eletrodo positivo), dependendo da carga que possuem.

- Molculas ANFLITAS, que so carregadas tanto positiva quanto negativamente, adquirem

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RELEMBRANDO: Ponto Isoeltrico!

O VALOR DO pH ONDE UMA MOLCULA, POR EXEMPLO UMA PROTENA OU AMINOCIDO,

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Meios de suporte 1. Gel de amido e acetato de celulose 2. Agarose 3. Poliacrilamida

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