Sei sulla pagina 1di 26

INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

Bioequivalencia del cido acetilsaliclico como prueba de intercambiabilidad.


Nombre del laboratorio responsable del medicamento de prueba

Laboratorio de Biofarmacia del Departamento de Farmacologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Tercero autorizado que realiz el estudio

Responsable o coordinador del estudio

Biofarmacia, 8FV1

Dra. en C. Sandra Garca Medina

Investigador principal o analista

Responsable de aseguramiento de la calidad

Equipo 3
Esparza Yllescas Daniel Gonzlez Elizalde kateri Martinez Aguilar Ulises Rodrguez Garca Julio Csar

QFI Rafael Espaol Morales

Periodo en el que se llev a cabo el estudio: 10-Abr-13 al 24-Abr-13 Primer periodo: del 11-Abr-13 al 16-Abr-13 Segundo periodo: del 18 -Abr-13 al 23-Abr-13

Fecha de emisin: 21-May-13

RESUMEN GENERAL Objetivo: Determinar la bioequivalencia del cido acetilsaliclico en 2 productos farmacuticos (producto de prueba y producto de referencia) como prueba de intercambiabilidad. Productos evaluados. Denominacin Genrica Denominacin Distintiva (marca) CIDO ACETILSALICLICO Referencia: Prueba: Aspirina cido acetil saliclico

Diseo del estudio. Se realiz un estudio cruzado con 12 voluntarios sanos para determinar la bioequivalencia del cido acetilsaliclico en dos productos farmacuticos. : Los voluntarios recibieron en das diferentes dos tabletas de cido Acetilsaliclico (AAS) de 500 mg (medicamento de referencia y prueba). Tomndose diez muestras de orina por voluntario, posteriores a la administracin del medicamento (0.33, 0.83, 1.5, 2.5, 3.5, 5.5, 8, 11, 12.5, y 13.5 horas). El estudio se realiz en dos periodos, de una semana cada uno. Al final de cada periodo se cuantific la cantidad de cido acetilsaliclico en las muestras de orina. La cuantificacin del frmaco se realiz mediante un anlisis espectrofotomtrico Se cuantific cada muestra de acuerdo al siguiente procedimiento: a. Preparacin del blanco: Mezclar todas las muestras blanco de los seis equipos y cada equipo preparar su propio blanco, si la orina se encuentra muy concentrada hacer una dilucin (1:4). b. Preparacin de las muestras Dejar que las muestras se descongelen a temperatura ambiente, colocndolas en un bao de agua a temperatura ambiente. Cada muestra deber filtrarse antes del anlisis qumico. Tomar 1 mL de cada una de las muestras por analizar y colocarlo en matraz erlenmeyer de 50 mL, adicionar 5 mL de la solucin cloruro frrico, agitar y leer la absorbancia en el espectrofotmetro a una longitud de onda de 540 nm. Si la muestra est concentrada y el valor de la absorbancia no est dentro del rango de la curva de calibracin, diluir esa muestra con agua y anotar el factor de dilucin (1:2 o 1:4). 1. Medicamentos evaluados: medicamento de prueba y medicamento de referencia.
CARACTERSTICA Denominacin Internacional Denominacin Genrica Denominacin Distintiva (marca) Forma Farmacutica Contenido Dosis MEDICAMENTO DE MEDICAMENTO DE PRUEBA REFERENCIA cido 2-(acetiloxi)-benzoico CIDO ACETILSALICLICO Aspirina cido acetil saliclico TABLETA 500mg 1000mg

Nmero de Lote Fecha de Caducidad Fabricante

X2IILN AGO 14 BAYER

1231955 NOV 14 ALPHARMA

Listado de la secretaria de salud donde indica que es medicamento de referencia: ANEXO 1 Carta cumplimiento de buenas prcticas de manufactura del fabricante, firmada por el responsable sanitario. ANEXO 2 Resultados de valoracin y uniformidad de dosis expresada como uniformidad de contenido. La diferencia entre los productos preferentemente no debe ser mayor del 5 % Valoracin: 92.55 % Uniformidad de contenido: 92.542 % C.V.= 0.76% 2.- REPORTE CLNICO 2.1 Resumen Se realiz el estudio cruzado de bioequivalencia de dos medicamentos de cido acetilsaliclico, tabletas de 500 mg. 2.1.1 Introduccin Actualmente los estudios de bioequivalencia son parte fundamental para el registro de formas farmacuticas nuevas, la renovacin de los ya existentes y la intercambiabilidad de los mismos, nos permiten establecer si el producto de prueba tiene equivalencia teraputica en la velocidad de absorcin y la cantidad de frmaco absorbido en relacin con el producto de referencia. Estos estudios comparan la biodisponibilidad de 2 (o ms) formulaciones con el mismo ingrediente activo. El propsito del estudio es determinar si la biodisponibilidad de las formulaciones es igual. 2.1.2 Diseo del estudio Se realiz un estudio cruzado en voluntarios, los cualesrecibieron en das diferentes dos tabletas de cido Acetilsaliclico (AAS) de 500 mg (medicamento de referencia y prueba). Participaron sujetos sanos con edad entre 18 y 55 aos y con un ndice de masa corporal entre 18 a 26.9 Kg /m2, sin antecedentes de hipersensibilidad o alergias. Todos los voluntarios participantes leyeron y firmaron el formato de aceptacin para participar en la investigacin Los sujetos voluntarios declararon no estar tomando medicamento una semana previa al estudio, ni durante este. Tampoco consumieron caf, tabaco o bebidas con Xantinas y bebidas alcohlicas al menos 10 h. antes del inicio del estudio, ni durante este. Los medicamentos fueron asignados a una secuencia de tratamiento A-B o B-A en una proporcin balanceada de 1:1 (ver Tabla de aleatorizacin). Se hizo entrega a los voluntarios del formato F03-P06Horarios para administracin de tratamientos, toma de muestras e ingesta de alimentos. Los das en que se realiz la toma de muestras, se prosigui de acuerdo al siguiente protocolo:

1.

Permanecer en ayuno a partir de las 22:00 h. del da anterior al estudio. Los participantes guardarn ayuno mnimo de 10 horas antes del inicio del estudio. Permanecern en ayuno hasta la segunda hora postadministracin del medicamento. Posteriormente se le proveer de una dieta balanceada estandarizada, ver formato F02-P06.

2. Previo a la administracin del medicamento, vaciar la vejiga y tirar la orina (ver formato F03-P06). 3. A las 7 A.M. Ingerir 500 mL de agua en ayuno 1 hora antes de la administracin del medicamento (ver formato F03-P06). 4. Recolectar una muestra de orina de 50 mL que servir como blanco. 5. A las 8 A.M. tomar dos tabletas de cido acetilsaliclico con 250 mL de agua. Anotar el tiempo en el que se administro el medicamento (ver formato F03-P06). 6. Tomar 200 mL de agua cada hora durante las primeras 4 horas despus de medicamento (ver formato F03-P06). la administracin del

7. Recolectar 10 muestras de orina despus de la administracin del medicamento a los siguientes tiempos: 20, 50 minutos 1hora 30minutos, 2 horas 30 minutos, 3 horas 30 minutos, 5 horas 30 minutos, 8 horas, 11 horas, 12 horas 30 minutos, 13 horas 30 minutos (ver formato F03-P06). 8. Medir el volumen de cada muestra colectada (en probeta) y almacenar una alcuota de 15 mL en congelacin.

NOTAS IMPORTANTES: Anotar en cada envase de muestra la fecha, volumen total y tiempo real de muestreo. Durante el tiempo de colecta no deber perderse ninguna muestra de orina, porque se invalida el estudio. 2.2 Tabla de aleatorizacin.
Instituto Politcnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas Laboratorio de Biofarmacia Lista de aleatorizacin Codigo: F01-P06 Semestre:ENE- JUL 2013

Grupo:

Periodo Voluntario 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Primero B A A A A A A B B B B B Segundo A B B B B B B A A A A A

2.3 Resultados 2.3.1 Variables demogrficas. No. vol. Gnero Edad (aos) Peso (Kg) Talla (m) IMC (Kg/m2) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 F F F M F M M F M F F M 22 23 22 23 21 23 22 21 23 23 21 22 62 64 60 84 58.5 74 64 53 64 59 55 82 1.59 1.56 1.54 1.75 1.70 1.73 1.74 1.52 1.74 1.62 1.56 1.80 24.52 26.29 25.29 27.42 20.22 24.72 21.14 22.94 21.14 22.48 22.60 25.3

2.3.1.1 Nmero de muestras recolectadas. Primer periodo: 10 por voluntario, en total 120 muestras. Segundo periodo: slo voluntarios 1, 2, 3, 4, y 5, recolectaron 10 muestras cada uno. Los voluntarios 6 y 12 recolectaron 9 cada uno. En total 118 muestras recolectadas. 2.3.2 Desviaciones al protocolo. Da de toma de muestra. Los voluntarios tuvieron la libertad de elegir el da de administracin, entre el 11-Abr-13 y 16-Abr-13 para el Primer periodo, y entre el 18 -Abr-13 y 23-Abr-13 para el Segundo periodo. Muestras recolectadas. Los voluntarios 6 y 12 no recolectaron la primer muestra, tiempo0.33 h. 2.3.3 Reacciones adversas. Ningn voluntario inform sobre alguna reaccin adversa durante el estudio, tampoco dos semanas despus del mismo. 2.3.4 Tratamientos concomitantes. Ningn voluntario report consumir otros medicamentos durante el estudio. 2.3.5 Reporte de aseguramiento de calidad. Durante el desarrollo del protocolo no se presentaron anomalas. Los materiales, equipo utilizados por el personal que llevo a cabo el experimento se encontraban calibrados; asi mismo, el personal profesional se encontraba capacitado; por lo que se puede asegurar que las actividades

desarrolladas fueron realizadas de la manera correcta y con ello se asegura la calidad de los resultados. BIBLIOGRAFIA Proyecto de la NOM-177-SSA1-2008 3. REPORTE ANALTICO 3.1 Introduccin Los mtodos que son utilizados en el laboratorio , para la determinacin de la bioequivalencia de los medicamentos estudiados, necesitan una validacin; esto, para asegurar la fiabilidad y seguridad de que los resultados obtenidos son confiables y reales; para esto se deben realizar las diferentes pruebas que marca el proyecto de la NOM-177-SSA1-2008, entre los cuales tenemos: selectividad, linealidad, lmite de cuantificacin, exactitud, precisin (repetibilidad y reproducibilidad intralaboratorio), recobro absoluto, y estabilidad de la muestra (condiciones de almacenamiento a corto y largo plazo, ciclos de congelacindescongelacin); los resultados obtenidos en cada una de estas pruebas deben concordar de acuerdo a lo establecido en los criterios de aceptacin de dicha NOM. 3.2 Descripcin de la muestra biolgica La muestra tiene que ser de coloracin amarilla clara, con ausencia de partculas extraas, sedimentos o sangre. 3.3 Descripcin del mtodo analtico Se recibieron las muestras de orina y se procedi a filtrarlas con papel Whatman de ah se tomaron muestras de un 1 mL y se transfirieron a matraces de 50 mL para finalmente adicionar 5 mL de reactivo de Trinder y proceder a leer en un espectrofotmetro UV- visible a una longitud de onda de 540 nm. Se realiz un ajuste del espectrofotmetro a cero con el blanco que se prepar con 1 mL de orina y 5 mL de reactivo de Trinder. 3.4 Resumen de la validacin del mtodo Parmetro Linealidad del sistema Linealidad del mtodo Recobro absoluto Lmite de cuantificacin Resultado c.v= 5.31%, r2=0.9935 r2 de 3 anlisis>0.98 c.v 5.46% D.R 5% Criterio c.v<15%, r2>0.98 r2>0.98 c.v <15% D.R 32.52 Conclusin CUMPLE CUMPLE CUMPLE NO CUMPLE

Repetibilidad Reproducibilidad

Estabilidad de la muestra

Ciclos de congelacin-descongelacin Efecto de la dilucin

C.V 12.41, 6.88, 6.26 % c.v 28.7, 23.3, 21.05, D.R 7.9, 10.7, 5.6 C.V 3.59, 0.256, D.R 36.7, 22.98 C.V 36.08, 36.80 C.V. 1.16, 8.30 %

C.V<15% C.V<15%, D.R. 15%

CUMPLE NO CUMPLE

C.V <15%, D.R 15% C.V <15% C.V <15%

NO CUMPLE

NO CUMPLE CUMPLE

3.5 Descripcin del anlisis de las muestras

Las muestras fueron analizadas con un espectrofotmetro de UV-Vis a una longitud de onde de 540 nm, realizando el correspondiente ajuste del espectofotmetro a cero con el blanco preparado.

3.6 Seguimiento del mtodo analtico durante el anlisis de muestras Curva de calibracin 03 de Abril de 2013. CURVA 100 Absorbancia 1 2 3 ECUACIN R R2 0.129 0.129 0.158 CONCENTRACIN NOMINAL (mg/mL) 200 0.277 0.278 0.270 400 0.598 0.585 0.600 600 0.879 0.904 0.890 800 1.226 1.231 1.249 1000 1.594 1.590 1.594

Y = 0.00161X -0.0446 0.9991 0.998

Curva de calibracin 10 de Abril del 2013. CURVA 100 Absorbancia 1 2 3 ECUACIN R R2 0.339 0.302 0.293 CONCENTRACIN NOMINAL (mg/mL) 200 0.453 0.514 0.444 400 0.734 0.730 0.750 600 1.009 1.019 1.015 800 1.375 1.331 1.373 1000 1.668 1.720 1.760

Y= 1.22X10-3 X + 0.0649 0.99687 0.99376

Curva de calibracin 17 de Abril del 2013 CURVA 100 Absorbancia 1 2 3 ECUACIN R R2 0.109 0.141 0.103 CONCENTRACIN NOMINAL (mg/mL) 200 0.279 0.236 0.267 400 0.493 0.431 0.436 600 0.779 0.736 0.701 800 0.976 1.005 1.038 1000 1.231 1.207 1.261

Y = 0.0012X -0.0089 0.997 0.998

4 Reporte de aseguramiento de calidad.

Durante el desarrollo del protocolo no se presentaron anomalas. Los materiales, equipo utilizados por el personal que llevo a cabo el experimento se encontraban calibrados; asi mismo, el personal profesional se encontraba capacitado; por lo que se puede asegurar que las actividades desarrolladas fueron realizadas de la manera correcta y con ello se asegura la calidad de los resultados.

BIBLIOGRAFIA Proyecto de la NOM-177-SSA1-2008

4. Reporte farmacocinetico estadstico 1. Introduccin La biodisponibilidad de un frmaco da idea de su velocidad de absorcin y de la cantidad del mismo que llega a la biofase de los receptores tisulares, en los que debe ejercer su accin. Si el valor de su biodisponibilidad oral se acerca a la unidad, el frmaco se absorbe bien y sufre escaso metabolismo (poco efecto de primer paso de la barrera heptica). Por el contrario, si su biodisponibilidad es slo una fraccin pequea de 1, indica que el frmaco se absorbe peor, o que sufre un metabolismo heptico acusado. El trmino bioequivalencia se refiere a la velocidad y proporcin en que el mismo principio activo de dos medicamentos iguales alcanza la circulacin sistmica. Por ello, la bioequivalencia se cuantifica mediante la determinacin de los niveles plasmticos del frmaco contenido en los dos medicamentos (biodisponibilidad). El estudio suele ser cruzado y consiste en la administracin de una sola dosis de cada formulacin a un grupo de voluntarios sanos; a veces, dependiendo de las propiedades farmacocinticas del principio activo, se requieren mltiples dosis o estudios en el equilibrio estacionario. En la actualidad se acepta que un correcto estudio de bioequivalencia debe incluir entre 12 y 30 voluntarios sanos. Sin embargo, el nmero preciso de voluntarios necesarios en cada estudio depender de la variabilidad intra e interindividual que cabe esperar de cada frmaco, y de la precisin estadstica exigida por las indicaciones clnicas del frmaco. Si existiera un riesgo inaceptable para los voluntarios sanos, como ocurre con los frmacos antineoplsicos, el estudio de bioequivalencia debe hacerse en pacientes. El nmero de sujetos se calcula atenindonos al coeficiente de variacin de los parmetros que vayamos a medir 2. Descripcin de los tratamientos. Participaron 12 voluntarios sanos de entre 18 y 55 aos, con un ndice de masa corporal entre 18 a 26.9 kg/m2 , los cuales recibieron en das diferentes dos tabletas de cido acetilsaliclico de 500 mg (medicamento de referencia y prueba). 3. Resultados a) Estadstica descriptiva de datos las variables demogrficas. ERROR STD. 0.245 0.34 0.2396 4.261 1.439 2.87

VARIABLE Edad (aos)

Peso (kg)

GENERO HOMBRES MUJERES GLOBAL HOMBRES MUJERES GLOBAL

N 5 7 12 5 7 12

MEDIA 22.6 21.857 22.16 73.6 58.786 64.95

D.E. 0.54 0.9 0.83 9.529 3.806 9.95

MIN. 22 21 21 64 53 53

MEDIANA 23 22 22 74 59 62

MAX 23 23 23 84 64 84

C.V. % 2.42 4.11 3.76 12.94 6.47 15.32

Talla (m)

IMC (kg/m2)

HOMBRES MUJERES GLOBAL HOMBRES MUJERES GLOBAL

5 7 12 5 7 12

1.752 1.584 1.65 23.944 23.477 23.67

0.0277 0.605 0.098 2.705 2.039 2.25

0.0184 0.0229 0.028 1.23 0.771 0.64

1.73 1.52 1.52 21.14 20.22 20.22

1.74 1.56 1.62 24.72 24.94 24.52

1.8 1.7 1.8 27.42 26.29 27.42

1.58 38.19 5.96 11.29 8.68 9.51

d) Datos individuales y promedio de concentracin en el fluido biolgico en funcin del tiempo de muestreo y formulacin. MEDICAMENTO REFERENCIA CONC. URINARIA g/mL TIEMPO (h) 0.33 0.83 1.5 2.5 3.5 5.5 8 11 12.5 13.5 1 13.64 26.64 38.39 72.09 221.74 545.94 583.64 690.54 806.56 857.48 2 3.83 13.65 39.07 78.93 204.35 370.11 661.16 767.95 825.58 3 20.22 65.29 81.96 89.52 114.47 129.64 216.22 261.69 310.16 4 6.5 13.69 47.37 57.22 136.98 154.71 293.79 568.07 653.5 676.1 5 11.75 17.789 66.959 121.359 153.08 337.57 403.37 495.13 6 12.54 45.48 90.83 145.6 237.94 446.35 557.12 600.89 632.7 7 4.54 11.67 36.35 130.55 221.8 410.56 505.34 571.83 582.75 605.62 8 2.27 24.66 81.4 166.46 224.95 334.14 517.78 744.53 799.97 853.16 9 4.91 44.13 84.51 139.02 217.4 323.47 485.59 583.2 631.48 701.16 10 8.55 26.76 61.32 123.21 254.39 318.53 427.37 579.36 698.48 732.41 11 10.88 38.16 97.07 151.74 334.92 473.74 611.7 622.1 1.87 14.68 31.55 53.82 86.16 146.18 212.74 255.46 284.2 12 PROM 8.94 22.08 49.39 87.86 157.40 266.81 384.93 531.63 594.39 666.35

MEDICAMENTO PRUEBA CONC. URINARIA g/mL Tiempo (h) 0.33 0.83 1.5 2.5 3.5 5.5 8 11 12.5 13.5 1 2 3.84 14.84 35.26 66.78 91.21 480.81 590.61 682.27 757.36 839.42 3 5.7 29.95 72.19 114.59 131.79 229.66 301.82 534.19 615.21 668.03 4 15.11 35.71 78.14 152.97 199.42 303.07 418.31 537.82 588.85 622.99 5 7.85 19.72 56.38 100.82 147.91 252.18 380.83 522.04 570.36 599.41 6 18.05 54.63 97.35 159.35 242.04 375.09 498.87 557.58 583.79 7 8.2 21.81 57.19 150.09 228.58 282.21 342.38 432.33 462.83 456.3 8 91.68 196.22 251.63 291.42 303.32 416.42 651.02 995.52 109.6 1241.1 9 11.96 29.01 56.68 96.99 309.37 466.89 811.59 992.04 1149.6 1243.1 10 18.16 45.65 106.01 197.58 253.57 382.58 605.1 745.15 811.54 991.66 11 13.54 28.4 43.79 64.88 93.86 154.85 254.35 392.74 453.77 619.87 12 12.27 28.87 80.76 94.33 116.24 251.58 409.39 444.91 504.32 549.99 PROM. 18.83 42.57 76.76 124.45 180.47 304.68 461.87 614.13 601.36 766.63

28.48 65.62 131 193.84 401.91 591.71 635.35 783.81

e) Estadstica descriptiva de los parmetros farmacocinticos Xu infinito (mg/mL) MED. REF. MED. PRUEBA CONC. CONC. voluntario (mg/mL) (mg/mL) 1 857.48 783.81

2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 MEDIA D.E. C.V.

825.58 310.16 676.1 495.13 632.7 605.62 853.16 701.16 732.42 622.1 284.2 632.98 190.24 30.05

839.42 668.03 622.99 594.41 583.79 465.3 1241.1 1243.14 991.66 619.87 549.49 766.92 263.08 34.30

F) Resultados de parmetros farmacocinticos Xu infinito (mg/mL) MED. REF. voluntario 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 MEDIA D.E. C.V. CONC. (mg/mL) 857.48 825.58 310.16 676.1 495.13 632.7 605.62 853.16 701.16 732.42 622.1 284.2 632.98 190.24 30.05 MED. PRUEBA CONC. (mg/mL) 783.81 839.42 668.03 622.99 594.41 583.79 465.3 1241.1 1243.14 991.66 619.87 549.49 766.92 263.08 34.30 PRUEBAREF -73.67 13.84 357.87 -53.11 99.28 -48.91 -140.32 387.94 541.98 259.24 -2.23 265.29 186.98 173.41 92.74 LOG COCIENTE

PRUEBA/REF (PRUEBA/REF)*100 0.91 1.02 2.15 0.92 1.20 0.92 0.77 1.45 1.77 1.35 1.00 1.93 1.28 0.46 35.43 91.41 101.68 215.38 92.14 120.05 92.27 76.83 145.47 177.30 135.39 99.64 193.35 128.41 45.50 35.43

-0.04 0.01 0.33 -0.04 0.08 -0.03 -0.11 0.16 0.25 0.13 0.00 0.29 0.09 0.15 171.27

DIFERENCIA (PRUEBA-REF)
600.00 500.00 400.00 300.00 200.00 100.00 0.00 -100.00 -200.00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

VOLUNTARIO

COCIENTE (PRUEBA/REF)
2.50 2.00 1.50 1.00 0.50 0.00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 VOLUNTARIOS

LOG (PRUEBA/REFERENCIA)
0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10 0.05 0.00 -0.05 -0.10 -0.15

10

11

12

VOLUNTARIOS

Reporte de aseguramiento de calidad. Durante el desarrollo del protocolo no se presentaron anomalas. Los materiales, equipo utilizados por el personal que llevo a cabo el experimento se encontraban calibrados; asi mismo, el personal profesional se encontraba capacitado; por lo que se puede asegurar que las actividades desarrolladas fueron realizadas de la manera correcta y con ello se asegura la calidad de los resultados. Bibliografa Proyecto de la NOM-177-SSA1-2008 ANEXOS Anexo 1 Copia del listado u oficio emtido por la SSA donde se indique el medicamento de referencia

Anexo 2

Mxico, D.F., a 22 de Mayo de 2013

A QUIEN CORRESPONDA:

Por medio de la presente carta se hace constar que El Laboratorio de Biofarmacia de la ENCB cumple con el conjunto de lineamientos y actividades relacionadas entre si, destinadas a garantizar que los productos farmacuticos elaborados tienen y mantienen la identidad, pureza, concentracin, potencia e inocuidad requeridas para su uso, tal y como lo marca la legislacin Mexicana aplicable (NOM-059-SSA-1-2006).

_________________________________ Q.F.I Auditor Calificado por COFEPRIS

ANEXO 3. Resultados de los perfiles de disolucin comparativos.

120 PORCENTAJE DISUELTO DE AAS

PORCENTAJE DISUELTO DE AAS VS TIEMPO

100

80 MEDICAMENTO PRUEBA MEDICAMENTO REFERENCIA

60

40

20

0 0 10 20 30 TIEMPO (minutos) 40 50

TIEMPO

%DISUELTO %DISUELTO PROMEDIO PROMEDIO REFERENCIA PRUEBA 25.32 40.75 71.13 86.98 91.57 27.33 49.15 75.71 89.02 96.40

(At-Bt) -2.01 -8.40 -4.58

(At-Bt)2 4.04 70.56 20.97

5 10 20 30 45

-2.04 -4.83

4.16 23.32 123.0581

f = 64.78

Criterios Criterio de la NOM-177 El coeficiente de variacin del porcentaje disuelto debe ser menor o igual que el 20% para el primer tiempo de muestreo y menor o igual que el 10% para los tiempos subsecuentes Si el valor de f es mayor a 50, en los medios de disolucin, los perfiles de disolucin son similares.

n = Nmero de tiempos de muestreo Rt= % Disuelto promedio en el tiempo t del medicamento de referencia Pt= % disuelto promedio en el tiempo t del medicamento de prueba

Conclusin Los coeficientes de variacin son superiores a los aceptados, por lo cual la prueba no pasa, a pesar de que la f es de 64.78 valor que si cumple la NOM-177

ANEXO 4. Carta del Patrocinador, cumplimiento de la NOM-059-SSA-2006. Mxico, D.F., a 23 de Marzo de 2013.

A QUIEN CORRESPONDA:

Por medio de la presente carta se hace constar que los Laboratorios ALPHARMA, con operaciones en; Central de Adecuacin de Medicamentos AvKra 45 (Autop. Norte) No 103 B 35 Bogot, D.C. Colombia, cumple con el conjunto de lineamientos y actividades relacionadas entre si, destinadas a garantizar que los productos farmacuticos elaborados tienen y mantienen la identidad, pureza, concentracin, potencia e inocuidad requeridas para su uso, tal y como lo marca la legislacin Mexicana aplicable (NOM-059-SSA-1-2006).

--------------------------------------------------Firma Responsable Sanitario en ALPHARMA

--------------------------------------------------Firma Responsable encargado del caso en COFEPRIS

ANEXO 5. Autorizacin del protocolo.

Mxico, D.F., a 01 de Abril de 2013.

A QUIEN CORRESPONDA:

Por medio de la presente carta se hace constar que el Comit Nacional de Biotica autoriza el protocolo presentado por el Laboratorio de Biofarmacia del Departamento de Farmacologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicasya que cumple con el conjunto de lineamientos y actividades relacionadas entre si, destinadas a realizar un Estudio de Bioequivalencia en voluntarios adultos.

--------------------------------------------------Firma Dr. Manuel H Ruiz de Chvez Presidente del Consejo de la Comisin Nacional de Biotica

Anexo 12 Informe de validacin del mtodo para cuantificar muestras biolgicas. 1) Matriz biolgica en la que se valid el mtodo: Orina 2) Criterios de aceptacin

3) Recuperacin absoluta

CONCENTRACIN NOMINAL

ABSORBANCIA EN SOLUCIN

ABSORBANCIA EN ORINA

% RECOBRO

MUESTRAS CONTROL BAJO 300 0.458 0.395 0.494 PROMEDIO 0.449 0.470 0.413 0.418 0.433 96.57

MUESTRAS CONTROL MEDIO 500 0.779 0.772 0.753 PROMEDIO 0.768 0.723 0.722 0.688 0.711 92.57

MUESTRAS CONTROL ALTO 700 1.057 1.010 1.049 PROMEDIO 1.039 RECOBRO ABSOLUTO PROMEDIO C.V. % 1.058 1.074 1.078 1.07 97.36 5.46 103.08

CRITERIO NOM-177 No debe ser necesariamente del 100% pero deber ser consistente preciso y reproducible en todo el intervalo de la curva de calibracin. CONCLUSIN: No cumple

Linealidad del sistema


CURVA 100 Absorbancia 1 2 3 PROMEDIO D.E. C.V.% 0.154 0.159 0.150 0.154 0.0045 2.92 CONCENTRACIN NOMINAL (mg/mL) 200 0.300 0.316 0.286 0.300 0.015 4.99 400 0.499 0.553 0.551 0.534 0.031 5.73 600 0.844 0.844 0.845 0.843 0.00058 0.068 800 1.106 1.141 1.135 1.127 0.015 1.36 1000 1.376 1.464 1.535 1.458 0.079 5.46

LINEALIDAD DEL SISTEMA


1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 200 400 600 800 1000 CONCENTRACIN (g/mL) ABSORBANCIA

RESULTADOS Ecuacin R2 CV Y=-4.35X10-3 + 1.435X10-3 0.9835 5.3146%

4) Precisin.

MUESTRA

Repetibilidad
CONTROL MEDIO CONC. RECUPERADA 303.7239 388.6512 371.6263 291.2346 336.9849 338.4441 42.006 12.41 300 12.81 ABSORBANCIA CONC. RECUPERADA 525.5077 574.2160 561.9239 480.2833 526.7567 533.7375 36.7654 6.88 500 6.74 CONTROL ALTO ABSORBANCIA CONC. RECUPERADA 749.8551 679.9150 779.1064 691.4183 683.7933 716.8176 44.9135 6.26 700 2.4

CONTROL BAJO ABSORBANCIA

1 2 3 4 5 PROMEDIO D.E. % C.V. %

0.4497 0.5789 0.5530 0.4307 0.5003

0.7871 0.8612 0.8425 0.7183 0.7890

1.1284 1.020 1.1729 1.0395 1.0279

CONC. ADICIONADA DESV. RELATIVA %

CRITERIO NOM-177: El C.V. 15% en mtodos cromatogrficos e inmunolgicos 20%. CONCLUSIN: Si cumple

ANALIST A D A

Reproduciblidad intralaboratorio
REPLIC A NUMER O CONTROL BAJO ABSORBANC IA CONC. RECUPERA DA 330.6047 319.4286 326.8789 276.22 354.43 343.17 CONTROL MEDIO ABSORBANC IA CONC. RECUPERA DA 490.17 527.42 513.49 463.54 468.33 458.22 CONTROL ALTO ABSORBANC IA CONC. RECUPERA DA 686.37 673.96 644.15 691.25 652.47 682.47

1 2 3

0.488 0.47 0.482 0.396 0.52 0.503

0.745 0.805 0.783 0.696 0.703 0.687

1.061 1.041 0.993 1.060 0.998 1.045

1 2 3

1 2 3

0.364 0.388 0.443 0.423 0.416 0.47 0.413 0.418 0.149 0.062 0.191 0.190

256.20 243.06 271.21 302.66 290.24 285.90 322.52 286.85 289.86 289.98 122.54 63.96 268.7134 79.0778 29.4283

0.65 0.641 0.629 0.693 0.702 0.752 0.723 0.722 0.688 0.265 0.307 0.253

435.21 429.87 422.68 457.87 463.11 494.17 480.24 480.39 458.21 200.66 228.47 192.25 425.9242 104.2429 24.4745

1.030 1.043 1.040 1.029 1.071 1.08 1.058 1.074 1.078 1.075 1.056 1.044

672.14 681.25 679.14 666.21 692.14 698.24 690.21 700.24 702.32 703.35 699.69 695.64 699.5847 10.8547 10.3569

1 2 3

1 2 3

1 2 3

PROMEDIO D.E. % C.V. % CONC. ADICIONADA DESV. RELATIVA % CRITERIO NOM-177: El C.V.15%. CONCLUSIN: No cumple

5) Estabilidad - Condiciones de almacenamiento


Tie mp o RE PLI CA CONTROL BAJO ABSO RBAN CIA 0.782 0.785 CONC. RECUP 513.148 515.010 CONTROL ALTO ABSOR BANCIA 1.428 1.420 CONC. RECUP 919.247 909.279

1 2

3 Pro me dio D.E .% C.V .% 1 2 3

0.786

515.631 514.546

1.430

915.488 913.004

1.292 0.2511 0.490 0.48 0.454 335.038 329.407 312.513 1.080 1.075 1.080

3.285 0.354 704.203 701.075 704.202

PR 325.652 705.160 OM EDI O D.E 11.72 1.805 .% C.V 3.59 0.256 .% CRITERIO NOM-177: Debe cumplir con criterios repetibilidad y exactitud con un C.V.15%. CONCLUSIN: Si cumple

Ciclos de congelacin-descongelacin
REPLICA NUMERO CONTROL BAJO ABSORBANCIA CONC. RECUPERADA 336.192 350.473 313.219 333.294 18.795 5.639 0.390 0.277 272.468 201.763 0.955 0.625 CONTROL ALTO ABSORBANCIA CONC. RECUPERADA 718.664 697.554 716.802 711.006 11.6874 1.643 625.990 419.508

CICLO DE CONGELACIN DESCOLGELACION

1 2 3 PROMEDIO D.E. % C.V. %

0.497 0.520 0.460

1.113 1.079 1.110

1 2

3 PROMEDIO D.E. % C.V. % 7 1 2 3 PROMEDIO D.E. % C.V. %

0.338

239.931 238.054 35.389 143.866

0.791

523.375 522.9576 103.2416 19.74

0.455 0.215 0.455

372.284 179.716 372.284 308.094 111.179 36.08

0.352 0.464 0.728

289.641 379.506 591.331 420.154 154.89 36.80

CRITERIO NOM-177: Debe cumplir con criterios repetibilidad y exactitud con un C.V.15%. CONCLUSIN: No cumple

-Efecto de la dilucin
Muestra sin diluir Dilucion 1:2 Dilucion 1:4

Numer o de replica 1

Concentracio n Nominal (mg/ml) 1.4

Absorbanci a

Concentracio n Interpolada

Concentracio n real (f=2)

Absorbanci a

Concentracio n Interpolada

Concentracio n real (f=4)

0.939

612.8512

1225.7024

0.52

353.8099

1415.2396

1.4

0.96

629.1195

1258.239

0.451

310.6363

1242.5455

1.4

0.958

627.86

1255.72

0.537

364.446

1457.7888

Promedio

1246.5538

Promedio

1371.8573

Desv. Estandar

18.1017

Desv. Estandar

113.9903

C.V.% Desv Rel

1.4521 10.9604

C.V.% Desv Rel

8.3091 2.0161

6) Lmite de cuantificacin
REPLICA ABSORBANCIA CONCENTRACIN RECUPERADA

1 2 3 4 5

0.173 0.173 0.182 0.163 0.170 PROMEDIO DESVIACIN ESTANDAR C.V. % CONCENTRACIN ADICIONADA DESVIACION RELATIVA %

144.75 144.75 150.11 138.79 142.96 144.272 4.07 2.82 100 (g/mL) 44.272 %

CRITERIO NOM-177 : Se considera que el punto tiene validez como limite de cuantificacin si su valor promedio cae dentro de 20% del valor nominal, con un CV no mayor que 20% para mtodos cromatogrficos y 25% para mtodos inmunolgicos. CONCLUSION:

7) Selectividad
EQUIPO ABSORBANCIA % DE RESPUESTA

0.187

106.25

2 3 4 5 6

0.056 0.422 0.268 0.041 0.336

31.818 239.77 152.272 23.295 190.909

8) Conclusiones de la validacin del mtodo De acuerdo a los datos obtenidos, y basndonos en los criterios de aceptacin contenidos en la NOM-1772008, se concluye que este mtodo no cumple con las caractersticas necesarias para su validacin.

Potrebbero piacerti anche