Aula prtica: Teste da eficincia dos desinfetantes domiciliares Material: - Desinfetantes domiciliares; - Tubos cnicos de 50 mL estreis; - Tubos de ensaio

de rosca estreis; - PBS; - Tubos de 1,5 mL estreis; - Discos de papel de filtro estreis; - Placas de gar Muller Hinton; - Swabs; - Estufa de 37oC; - Escala de McFarland (1,5 x 108 UFC/mL). - Pipetas de 1, 5 e 10 mL estreis; - Ponteiras de P10, P100 e P1000 estreis; - Cepas bacterianas: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebisiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa. Metodologia: 1) Nos tubos cnicos de 50 mL colocar 20 mL do desinfetante devidamente rotulado e com a diluio de uso indicada pelo fabricante. 2) Realizar mais 3 diluies, acima das sugeridas pelo fabricante. Usar como controle negativo a gua e como controle positivo o produto puro. 3) Preparar as cepas bacterianas colocando-as na concentrao de 0,5 x 108 UFC/mL distribuindo o PBS nos tubos e com o auxlio de uma ala microbiolgica tocar na colnia bacteriana e inocular no PBS at que a concentrao seja atingida. 4) Com o auxlio do Swab, molhar o algodo no inculo bacteriano (item3) e passar em toda a superfcie do gar Muller Hinton, de maneira que todos os quadrantes sejam cobertos (Figura 1A)

Figura 1B Figura 1A gua Puro

Diluio de uso

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5- Aps a semeadura como demonstrado na figura 1A, os discos sero colocados sobre a placa (Figura 1B) e 10uL de cada soluo (Puro, gua, diuluio de uso e outras diluies) sero adicionados sobre os discos. 6- As placas sero incubadas a 37OC por pelo menos 18h.