FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

Antimicrobianos
Agentes fsicos, asepsia y esterilidad

Dr. Guido Mora L.

Conceptos generales
Esterilizacin: es el proceso mediante el cual clulas vivas, esporas viables y virus son destruidos o removidos de un objeto o hbitat. Un objeto estril es aquel que est libre de microorganismos vivos, esporas o cualquier agente infeccioso. Desinfeccin: es el proceso de eliminar, inhibir o remover microorganismos que puedan causar enfermedad. Desinfectante: agente, generalmente qumico, utilizado para llevar a cabo la desinfeccin, normalmente se utilizan sobre objetos inanimados. Antisptico: agente qumico utilizado sobre tejido vivo
Un desinfectante no necesariamente esteriliza un objeto, ya que pueden permanecer algunos microorganismos o esporas.

Sanitizacin: es el proceso de reducir la poblacin de microorganismos a niveles considerados seguros por los estndares de salud pblica.

Agentes antimicrobianos
Agentes Fsicos (esterilizantes) Calor: causa la denaturacin de las protenas y cidos nucleicos, destruye las membranas. Calor hmedo (20 min a 121C) y Calor seco (2 horas a 180C) Radiaciones: producen dao al DNA.

Horno Autoclave

Agentes antimicrobianos

Agentes Qumicos (desinfectantes)

Alcoholes, fenoles, sales de metales pesados: denaturan las protenas.

Agentes oxidantes: oxidan los grupos SH de las protenas. Agentes alquilantes: sustituyen los tomos de H por radicales alquilo. Detergentes: se insertan en la membrana celular e interfieren con sus funciones.

Agentes Quimioteraputicos

Actividad de los antimicrobianos

La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
1. Tamao de la poblacin: ... un mayor nmero de microorganismos demoran ms en morir que un nmero menor de ellos. 2. Composicin de la poblacin: ... la efectividad de un agente vara de acuerdo de acuerdo a la naturaleza del organismo; los microorganismos varan mucho en sensibilidad. (bacteria, levadura, espora, etc.) 3. Concentracin o intensidad del agente antimicrobiano: ... generalmente un agente ms concentrado o ms intenso elimina ms rpido a los microorganismos. (no siempre...etanol 70% ms efectivo que etanol 95%)

Actividad de los antimicrobianos

La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
4. Duracin de la exposicin: ... mientras ms tiempo este el microorganismo expuesto al agente, mayor ser el nmero de organismos eliminados. 5. Temperatura: ... un aumento de la temperatura en que se aplica el agente aumenta la efectividad de ste. 6. Medioambiente local: ... el medioambiente que rodea al microorganismo lo puede proteger de la accin del agente antimicrobiano. (la materia orgnica de la comida protege a las bacterias de la esterilizacin por calor) (todo el material quirrgico debe ser lavado antes de esterilizar)

Generalidades sobre antimicrobianos

Sustancia o Agente capaz de actuar sobre los microorganismos, ya sea inhibiendo su crecimiento o causando su muerte

ANTIMICROBIANOS (a) Bacteriostticos Inhiben el crecimiento del microorganismo (b) Bactericidas Matan a los microorganismos sin necesidad de destruirlos o lisarlos (c) Bacteriolticos Matan a los microorganismos por lisis

Requerimientos para un Antimicrobiano (Quimioterpico)

1.- Especificidad: Se refiere al espectro de la actividad antimicrobiana, definida por su capacidad de unin a un sitio especfico de la bacteria. 2.- Eficacia in vivo: Debe ser bacteriosttico o bactericida in vivo, es decir, su accin no debe ser revertida en el interior del organismo. 3.- Toxicidad selectiva: Debe ser txico para el microorganismo, pero ser inocuo para el hospedero. Esto es indispensable para la utilizacin del antimicrobiano en clnica.

Antecedentes histricos

Paul Ehrlich (1908): Cre el primer compuesto qumico sinttico (Salvarsan) que poda curar una infeccin, la sfilis (Treponema pallidum).

Estructura qumica del Salvarsan (La bala mgica)

Antecedentes histricos. Descubrimiento de los antibiticos

Alexander Fleming (1928): Observ que el hongo Penicillium notatum impeda el crecimiento de Staphylococcus aureus Florey y Chain (1939): aislaron Penicilina G

Penicillium notatum

Antecedentes histricos. Descubrimiento de los antibiticos

Foto original tomada por Fleming

Foto actual

El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de Staphylococcus aureus...

Antibiticos
Antimicrobiano: Sustancia capaz de actuar sobre los microorganismos, inhibiendo su crecimiento o destruyndolos. Antibitico: Sustancia producida por el metabolismo de organismos vivos, principalmente hongos microscpicos y bacterias, que posee la propiedad de inhibir el crecimiento o destruir microorganismos. Segn su origen, los antibiticos pueden ser: Biolgicos (naturales): sintetizados por organismos vivos, ej. Penicilina, Cloranfenicol. Semisintticos: obtenidos por modificacin qumica de antibiticos naturales, ej. Ampicilina. Sintticos: generados mediante sntesis qumica, ej. Sulfas.

Evaluacin de la susceptibilidad a un antibitico

En el laboratorio se puede estudiar la susceptibilidad a antimicrobianos que presentan bacterias aisladas desde una muestra biolgica...

La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad de la bacteria aislada y ciertos factores del hospedero constituyen las bases para la eleccin de una terapia antimicrobiana adecuada
Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro: Test por dilucin Test por difusin Se realizan segn ciertas normas previamente estandarizadas (NCCLS)

Definiciones

Concentracin inhibitoria mnima (CIM) Corresponde a la menor concentracin de antimicrobiano que inhibe el crecimiento bacteriano luego de 18 a 24 horas de incubacin.

Concentracin bactericida mnima (CBM ) Corresponde a la menor concentracin capaz de matar un 99,9% la poblacin bacteriana.

Antibiograma por dilucin

Tcnica de referencia en la mayora de los estudios clnicos de susceptibilidad a antimicrobianos. Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite determinar la concentracin inhibitoria mnima (CIM). Se puede realizar en medio lquido (dilucin en caldo) o en medio slido (dilucin en agar). Mtodo complejo y de alto costo.

Lectura del CIM

Dilucin seriada en caldo

CIM

Antibiograma por difusin (Tcnica de Kirby-Bauer)

Es el mtodo ms usado Es prctico y sencillo de realizar e implementar Permite analizar un gran nmero de antibiticos al mismo tiempo y bajo las mismas condiciones

Entrega un resultado cualitativo (bacteria sensible o resistente)

Antibiograma por difusin (Tcnica de Kirby-Bauer)

Anlisis de varios antibiticos en un mismo ensayo

Resistente (No hay halo de inhibicin)

Sensible (Presencia de halos de inhibicin)

Factores que afectan la actividad antibacteriana in vitro pH del medio de cultivo: algunos antibiticos son activos a pH cido (nitrofurantona) y otros lo son a pH alcalino (aminoglucsidos). Componentes del medio de cultivo: pueden antagonizar al antibitico (extracto de levadura antagoniza a sulfonamidas). Estabilidad del medicamento: algunos antibiticos se inactivan a la temperatura de cultivo (clortetraciclina, en menor grado penicilina) Tamao del inculo: si hay muchas bacterias, la susceptibilidad es menor y pueden aparecer mutantes resistentes. Tiempo de incubacin: si es muy breve los m.o. no mueren; si es muy largo, pueden aparecer mutantes resistentes o inactivarse el medicamento.

Actividad antimicrobiana in vivo

Es mucho ms compleja, ya que hay que considerar la relacin con el hospedero
HOSPEDERO

ANTIBITICO

MICROORGANISMO

Prontosil

Metabolizacin en el ratn Sulfanilamida (sulfa)

Gerhard Domagk (1939)

Factores que afectan la actividad antibacteriana in vivo

Estado de actividad metablica de los m.o.: puede ser muy diferente, generalmente menor, que en el laboratorio. Distribucin del medicamento en los diferentes tejidos y rganos: es muy variable, ej. algunos medicamentos no penetran al SNC.

Localizacin de los microorganismos: pueden ser parsitos intracelulares, lo que dificulta la accin antimicrobiana.
Sustancias que interfieren con el medicamento: el medicamento puede ser inactivado por condiciones ambientales dentro del organismo (ej. pH) o fijado por protenas sanguneas o tisulares.