Guia Patologia e Inmunologia de Camarones Penaeidos

GUÍA TÉCNICA
PATOLOGÍA E INMUNOLOGÍA
DE CAMARONES PENAEIDOS
PROGRAMA CYTED
ÁREA DE AGROALIMENTACIÓN
RED II-D: Red Vannamei
Editores:
Vielka Morales Q.
Jorge Cuéllar-Anjel
Autores:
María José Almanza Abud
Margherita Anna Barracco
Donald V. Lightner
Emiko Shinozaki Mendes
Alitiene Moura Lemos Pereira
María Soledad Morales Covarrubias
Carlos Pantoja
Luciane María Perazzolo
Rafael Diego Rosa
Agnés Saborio Coze
Tereza Cristina Vasconcelos Gesteira
Guía Técnica - Patología e Inmunología de Camarones Penaeidos
La presentación y disposición en conjunto de:

GUÍA TÉCNICA - PATOLOGÍA E INMUNOLOGÍA DE
CAMARONES PENAEIDOS
son propiedad de los editores. Ninguna parte de esta obra
puede ser reproducida o transmitida, mediante ningún
sistema o método, electrónico o mecánico (incluyendo
fotocopiado, la grabación o cualquier sistema de recuperación
y almacenamiento de información), sin consentimiento por
escrito de los editores.
Derechos reservados:
© 2008 Vielka Morales Q. y Jorge Cuéllar-Anjel
(507) 6671-8936
(507) 6616-0756
email: vielkamorales2003@yahoo.com
email: jocuan@gmail.com
Panamá
Primera edición en español

Hecho en Panamá
ISBN: 978-9962-661-02-3
Esta obra se citará de la siguiente manera:

Todo el libro:
Morales, V. y J. Cuéllar-Anjel (eds.). 2008. Guía Técnica - Patología e Inmunología de Camarones
Penaeidos. Programa CYTED Red II-D Vannamei, Panamá, Rep. de Panamá. 270 pp.
Ejemplo para citar un capítulo:
Pantoja, C. y D.V. Lightner. 2008. Enfermedades virales pp. 55-114. En: Morales, V. y J. Cuéllar-
Anjel (eds.). 2008. Guía Técnica - Patología e Inmunología de Camarones Penaeidos. Programa
CYTED Red II-D Vannamei, Panamá, Rep. de Panamá. 270 pp.
Diseño e impresión:
New Concept Publications, Inc.
(507) 226-7694
Panamá
Daniel Ho - Fotografías de portada, contraportada, páginas 1, 55, 117, 135, 159, 169, 225, 243 y 254
ii
AGRADECIMIENTOS
Los editores agradecen la colaboración de Reinaldo Morales y Hugo Pérez

Athanasiadis, por la traducción preliminar del portugués al español, de varios capítulos
del libro, así como a Roberto Chamorro (Licencia de intérprete público autorizado del
Ministerio de Gobierno y Justicia de Panamá, Resolución Nº 28, de 8 de marzo de 1984)
por la revisión y perfeccionamiento de los documentos traducidos.
De igual manera por la revisión y aportes de la Dra. Patricia Del Portillo (Métodos
Moleculares), Dra. Margherita Barracco (Parámetros Inmunológicos), Dr. Carlos Pantoja
y Kenneth W. Hasson (Parásitos en Camarones), Ing. Roberto Chamorro y Dra. María del
Pilar Moyano (Métodos de Diagnósticos) y Oscar Olivares (glosario y correcciones de
texto).
iii
IN MEMORIAM
ELPIDIO BELTRAME, el hombre incansable y luchador por la camaronicultura en

la región, hoy no se encuentra con nosotros, no obstante, su recuerdo permanecerá por
siempre en el corazón de todos los que tuvimos la suerte de trabajar a su lado.
El Grupo Técnico Asesor (GTA) de la Red Vannamei del CYTED y los autores de esta
Guía Técnica - Patología e Inmunología de Camarones Penaeidos, deseamos dedicarla
a nuestro amigo, hermano y compañero, ELPIDIO. El fue uno de nuestros pilares en el
GTA de la Red Vannamei, con aportes de grandes ideas y colaboración desinteresada para
LSI\LUTHULQVÌLULÄJPVKLSHHJ[P]PKHKJHTHYVULYHUVZ}SVLU)YHZPSZ\WHxZUH[HS
sino también en el resto de los países iberoamericanos que conforman esta importante
familia CYTED.
Gracias por tu contribución a una actividad que seguirá dando respuestas en la

generación de empleos y divisas a diferentes países de iberoamerica.
iv
PRÓLOGO
La camaronicultura tiene sus inicios en la década del ‘60 incrementándose

rápidamente en la del ‘70, surgiendo como una de las fuentes de mayores ingresos de
divisas por sus elevadas producciones. En la actualidad y según estudios de la FAO, aún
L_PZ[LUWHxZLZKL(TtYPJH3H[PUHX\LZLKLKPJHUHSHHJ[P]PKHKLZWLJxÄJHTLU[LJVU
especies del género Penaeus (también llamado Litopenaeus).
7HYHSHKtJHKHKLSº SHYLK\JJP}ULULSUTLYVKLÄUJHZKLJ\S[P]VZLKLIP}
a enfermedades que se reportaron desde la aparición del Taura en los años 93-94 y
el Síndrome de la Mancha blanca en los años 98-99, afectando grandemente las
producciones y dando como resultado el cierre de muchas empresas, pérdidas de
empleos y por ende de ingresos.
La industria ha tenido que ir implementando innovaciones tecnológicas y
mejoramiento en el manejo de los cultivos de camarón, observándose una lenta
recuperación en sus producciones y en la productividad.
Sin embargo, con la expansión territorial de esta actividad y el desarrollo de técnicas
KLKPHNU}Z[PJVKLLUMLYTLKHKLZOHUZPKVPKLU[PÄJHKVZU\L]VZHNLU[LZWH[}NLUVZ,Z
WVYLSSVX\LUVZZLU[PTVZJVTWSHJPKVZX\L\UNY\WVKLJPLU[xÄJVZWYLVJ\WHKVZWVYSH
situación actual en los temas de enfermedades, haya querido compartir sus conocimientos
y experiencias de muchos años, a través de esta importante Guía Técnica de Patología e
Inmunología de Camarones Penaeidos, diseñada para productores, técnicos, estudiantes
`J\HSX\PLYV[YVLU[\ZPHZ[HPU[LYLZHKVLUJVU[HYJVU\U[L_[VKLHWV`VX\LSLZPNUPÄX\L
una herramienta útil y práctica en su actividad diaria.
Como regente de un sector que vela por el desarrollo de las actividades acuícolas
en la República de Panamá, nos sentimos honrados de poder expresar la importancia de
LZ[H.\xHX\LJVUZPKLYHTVZ\UHWVY[LZPNUPÄJH[P]VWHYHLSZLJ[VYKLSHJHTHYVUPJ\S[\YH
en Iberoamérica.
GUILLERMO A. SALAZAR N.
Ministro de Desarrollo Agropecuario
Panamá, 2008
v
vi
INTRODUCCIÓN
El Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnología para el Desarrollo (CYTED)

LZ \U WYVNYHTH PU[LYUHJPVUHS T\S[PSH[LYHS KL JVVWLYHJP}U JPLU[xÄJH ` [LJUVS}NPJH KL
ámbito iberoamericano y carácter horizontal.
En el marco del CYTED, hay una serie de acciones dentro de las cuales se encuentran
las Redes Temáticas, que son asociaciones de grupos de I+D pertenecientes a entidades
públicas o privadas de al menos seis países miembros del Programa y cuyas actividades
JPLU[xÄJHZV[LJUVS}NPJHZLZ[mUYLSHJPVUHKHZJVULS[LTHKLSHYLK
En este caso en particular, la Red denominada FORO PARA LA GESTIÓN DE
CONOCIMIENTOS Y TRANSFERENCIA DE TECNOLOGÍAS SOBRE EL CULTIVO DE
PENAEUS VANNAMEI: RED VANNAMEIYLHSPa}\UHZLYPLKLHJ[P]PKHKLZLUILULÄJPV
de la industria camaronera de los países iberoamericanos que se dedican a la actividad.
Entre los objetivos logrados por la Red, están las siguientes: constitución de un foro
regional de convergencia para los grupos de investigación, productores y sector estatal;
fomento de la investigación interdisciplinaria que coadyuva al desarrollo tecnológico
en temas relativos al L. vannamei; la promoción en el intercambio de información
JPLU[xÄJH`[tJUPJHJVUTPYHZHMH]VYLJLYSHPUUV]HJP}U`MVTLU[HYSHZ\Z[LU[HIPSPKHK"
el establecimiento de un sistema de información electrónico de divulgación periódica,
el cual facilitó la transferencia de conocimientos; organización de actividades de
JHWHJP[HJP}UWHYHILULÄJPVKLSWLYZVUHSJPLU[xÄJV`[tJUPJV]PUJ\SHKVHSHZHJ[P]PKHKLZ
de investigación; la ayuda a la consolidación de grupos de investigación y desarrollo, lo
mismo que la interacción con los diferentes grupos, a través de redes o foros nacionales
WHYHLSHUmSPZPZPU[LNYHSKLSHJHTHYVUPJ\S[\YH`WYVWPJPHYSHTV]PSPKHKKLSVZJPLU[xÄJVZ
y miembros del sector productivo, quienes participaron en las actividades que coordinó
la red.
Entre los temas de mayor énfasis durante el desarrollo de las actividades de la
red, están los relacionados con la genética, buenas prácticas de manejo y, patología e
PUT\UVSVNxHKLSVZJHTHYVULZYLZ\S[HKVZX\LZL]LUYLÅLQHKVZLUSHOVQHLSLJ[Y}UPJHKL
la red: www.mida.gob.pa/CYTEDVANNAMEI.
Como última actividad de la red, estuvo la realización de un curso teórico-práctico
internacional sobre la patología e inmunología del camarón L. vannamei, donde
WHY[PJPWHYVUJPLU[xÄJVZKLYLJVUVJPKH[YH`LJ[VYPHLULZ[VZJHTWVZ*VTVWYVK\J[VÄUHS
para el cierre de la red, los facilitadotes del curso acordaron contribuir con el desarrollo
de cada capítulo a ellos asignados para la publicación de esta guía, la cual servirá de
herramienta básica para estudiantes, empresas y entidades estatales que se dedican a la
camaronicultura. Este compromiso desinteresado de parte de cada uno de ellos, es uno
de los mejores aportes que quedará plasmado en las acciones que vienen desarrollándose
H[YH]tZKLS*@;,+`HX\PLULZSLZHNYHKLJLTVZWVYOHILYKLWVZP[HKVZ\JVUÄHUaHWHYH
la coordinación de la Red Vannamei. A los autores, amigos y compañeros les extendemos
un cordial agradecimiento por toda su colaboración.
VIELKA MORALES Q.
Coordinadora Red Vannamei
vii
viii
ÍNDICE DE CONTENIDO
Prólogo v
Introducción vii
Reseñas de los editores y autores xi
Capítulo 1 Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en Camarones Marinos de 1
Cultivo (Jorge Cuéllar-Anjel)
1.1 Anamnesis 2
1.2 Examen clínico 2
1.3 Microscopía Directa 5
1.4 Montajes en Fresco (María Soledad Morales-Covarrubias) 8
1.5 Bacteriología 18
1.6 Histología 22
1.7 Pruebas con anticuerpos 29
1.8 Métodos moleculares 31
1.9 Parámetros inmunológicos 39
1.10 Microscopía electrónica de transmisión 45
1.11 Bioensayos 47
1.12 9LMLYLUJPHZIPISPVNYmÄJHZ 52
Capítulo 2 Enfermedades Virales (Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner) 55
2.1 Principales enfermedades y métodos de diagnóstico 58
2.2 Virus de la necrosis hipodérmica y hematopoiética infecciosa (Infectious 62
hypodermic and hematopietic necrosis virus, IHHNV)
2.3 Virus del Síndrome de la Mancha Blanca (White spot syndrome virus, 70
WSSV)
2.4 Virus del Síndrome de Taura (Taura syndrome virus, TSV) 79
2.5 Virus del síndrome de la cabeza amarilla (Yellow head syndrome virus, 87
YHV)
2.6 Virus de la mionecrosis infecciosa (Infectious myonecrosis virus, IMNV) 92
2.7 Mionecrosis infecciosa viral (IMNV) y sus implicaciones en los 96
cultivos de camarones brasileños (Alitiene Moura Lemos Pereira,
Emiko Shinozaki Mendes, Tereza Cristina Vasconcelos Gesteira)
2.8 Penaeus vannamei nodavirus (PvNV) 104
Capítulo 3 Enfermedades Bacterianas (María Soledad Morales-Covarrubias) 117
3.1 Vibriosis sistémica 120
3.2 Erosión bacteriana del caparazón 122
3.3 Síndrome de Zoea II 124
ix
3.4 Enfermedad de luminiscencia 126

3.5 (NHP-B) Necrosis del hepatopáncreas bacteriana 126
3.6 )HJ[LYPHZÄSHTLU[VZHZ3L\JV[OYP_T\JVY 130
3.7 Spiroplasma penaei (Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner) 131
Capítulo 4 Enfermedades por Parásitos (Jorge Cuéllar-Anjel) 135
4.1 Gregarinas 137
4.2 Microsporidios 142
4.3 Haplosporidios 147
4.4 Epicomensales 148
4.5 Metazoarios 154
Capítulo 5 Enfermedades causadas por hongos (Carlos R. Pantoja y Donald Lightner) 159
5.1 Micosis 161
5.2 Fusariosis 164
Capítulo 6 Inmunología del Camarón (Margherita Anna Barracco, Luciane María 169
Perazzolo y Rafael Diego Rosa)
6.1 Sistema Inmune de los Crustáceos 172
6.2 Inmunoestimulantes 202
6.3 Parametros hemato-inmunológicos como indicadores de salud 204
6.4 Conclusiones y Perspectivas 209
Capítulo 7 Buenas Prácticas De Manejo En La Camaronicultura (Agnés Saborío Coze 225
y María José Almanza)
7.1 Código de Conducta para una camaronicultura responsable 229
7.2 Objetivos de un Código de conducta 229
7.3 Buenas Prácticas de Manejo 230
7.4 Características de las Buenas Prácticas de Manejo 230
7.5 Buenas Prácticas de Manejo en Laboratorios de larvas 231
7.6 Buenas Prácticas de Manejo en granjas camaroneras 231
7.7 Buenas Prácticas de Manejo en plantas procesadoras 241
Glosario 243
x
RESEÑAS DE LOS EDITORES
VIELKA MORALES Q.
Coordinadora Red Vannamei-CYTED
vielkamorales2003@yahoo.com
Licenciada en Biología. Experiencia de 14 años en el tema de larvicultura, maduración,
aVVWSHUJ[VU`Ä[VWSHUJ[VULUSHIVYH[VYPVKLJHTHYVULZ9LZWVUZHISLKLSKPZL|V`JVUZ[Y\JJP}U
KLSH,Z[HJP}UKL4HYPJ\S[\YHKLS7HJxÄJV7\LY[V=HJHTVU[LLU7HUHTm+LZKL JVVYKPUHKVYH
técnica de la Organización del Sector Pesquero y Acuícola de Centroamérica. Consultora
para FAO y PRADEPESCA-UE. Cuenta con 19 publicaciones (11 en temas de camarones). Ha
participado en otras redes del CYTED relacionada a camarones y moluscos.
JORGE CUÉLLAR-ANJEL
Director del Departamento de Patología e Investigación
Camaronera de Coclé S.A. (CAMACO)
Aguadulce, Coclé, República de Panamá
jocuan@usa.net
Médico Veterinario, Máster en Microbiología. Experiencia de 18 años en las áreas de cultivo
de camarón marino Litopenaeus vannamei; diseño y montaje de laboratorios de patología de
camarones (microbiología, histopatología y biología molecular); docencia universitaria en
pregrados y postgrados así como investigación aplicada en Producción, Patología, Inmunología
y Nutrición de camarones penaeidos; manejo sanitario de cultivos de camarón (larvicultura,
engorde y maduración) mediante clínica y pruebas de campo y de laboratorio (montajes en fresco,
microbiología, histopatología y biología molecular); conferencista en Congresos Internacionales;
miembro del Grupo Ad hoc de la OIE en crustáceos para las Américas. Ha tenido desempeño
laboral en Ecuador, Colombia y Panamá.
RESEÑA DE LOS AUTORES
MARÍA SOLEDAD MORALES COVARRUBIAS

Centro de Investigaciones en Alimentación y Desarrollo, A.C.
Unidad Mazatlán en Acuicultura y Manejo Ambiental
México,
marisol@ciad.mx
Maestría y Doctorado en Patología de crustáceos, Licenciatura en Biología Pesquera
Investigadora en el área de acuicultura y manejo ambiental del CIAD. Sus principales trabajos
KL PU]LZ[PNHJP}U LZ[mU LUMVJHKVZ H OPZ[VWH[VSVNxH ]PYVSVNxH ` ÄZPVSVNxH KL JY\Z[mJLVZ" PTWHY[L
cursos en sanidad acuícola y colabora en un programa de transferencia tecnológica, capacitación
y consultoría en histopatología de crustáceos, con diferentes países de América Latina.
JORGE CUÉLLAR-ANJEL
Aguadulce, Coclé, República de Panamá
jocuan@usa.net
La reseña de este autor ha sido citada previamente en “Reseña de los Editores”
xi
AGNÉS SABORIO COZE

Universidad Centroamericana (UCA)
Centro de Investigación de Ecosistemas Acuáticos
Managua, Nicaragua.
cideauca@gmail.com
4HLZ[YxHLU(J\PJ\S[\YH3PJLUJPH[\YHLU,JVSVNxH`9LJ\YZVZ5H[\YHSLZ*LY[PÄJHKVYHKL
la Global Alliance Aquaculture para plantas de proceso, granjas de acuicultura y laboratorios.
*\S[P]VZTHYPUVZ`KLHN\HK\SJL5\[YPJP}UKLWLJLZJHSPKHKKLHN\H7SHUPÄJHJP}U`KLZHYYVSSV
KLmYLHZJVZ[LYHZ0U]LZ[PNHJP}UKL[LUZPVULZHTIPLU[HSLZLUJ\LUJHZOPKYVNYmÄJHZ0U]LZ[PNHKVYH
en temas relacionados a la zonas costeras. Elaboración y gestión de proyectos acuícolas.
Asistencia Técnica, capacitación y extensión a comunidades costeras. Docente universitaria.
Consultora. Relaciones de trabajo con cooperantes de USA, JICA, UE, Universidades y Centros
de Investigación como Universidad de Rhode Island, Universidad de Florida, Universidad de
/H^HP<UP]LYZPKHKKL7\LY[V9PJVLU[YLV[YHZ6YNHUPaHJPVULZZPUÄULZKLS\JYV0U[LYUHJPVUHSLZ
como ACRA, GVC, OIKOS entre otras, las Naciones Unidas (FAO) y el Banco de Desarrollo
Interamericano. Coordinadora de Redes Internacionales. Directora de Acuicultura. Directora de
Centro de Investigación.
MARÍA JOSÉ ALMANZA ABUD

Centro de Investigación de Ecosistemas Acuáticos
Universidad Centroamericana (UCA)
Managua, Nicaragua
almanzaabud@gmail.com
Máster en Ciencias Ambientales, Licenciada en Ecología y Recursos Naturales, curso de
7VZ[NYHKVLU:PZ[LTHKL0UMVYTHJP}U.LVNYmÄJHHWSPJHKHHSVZ9LJ\YZVZ5H[\YHSLZ*VVYKPUHKVY
[tJUPJVKLS7YV`LJ[V:<**,::ÄUHUJPHKVWVY<:(0+H[YH]tZKLS*LU[YVKL9LJ\YZVZ*VZ[LYVZ
KL SH <UP]LYZPKHK 9OVKL 0ZSHUK ` *LU[YV KL 9LJ\YZVZ *VZ[LYVZ ` (J\HJ\S[\YH KLS 7HJxÄJV KL
la Universidad Hawai Hilo. Responsable del área de Físico-química de agua del Laboratorio
*0+,(*VVYKPUHKVYKLSmYLHKL:PZ[LTHKL0UMVYTHJP}U.LVNYmÄJH*VVYKPUHKVYKLSmYLHKL
divulgación y Coordinador de Investigaciones del CIDEA.
CARLOS PANTOJA
Departamento de Ciencias Veterinarias y Microbiología
Universidad de Arizona
Tucson, Estados Unidos
cpantoja@u.arizona.edu
Ingeniero Bioquímico en Explotación de Recursos Acuáticos (Tec de Monterrey, Campus
Guaymas, México). Maestría en Acuacultura (Tec de Monterrey, Campus Guaymas, México).
Doctorado en Patobiología (The University of Arizona). Actualmente es profesor investigador
asociado en el laboratorio de patología acuícola de la Universidad de Arizona. Principales
áreas de trabajo son patología morfológica, caracterización de nuevas enfermedades y agentes
infecciosos de camarones peneidos, desarrollo de métodos de detección de agentes infecciosos y
diagnóstico de enfermedades. Provee servicios de consultoría a la industria camaronícola en el
área de patología y da entrenamiento técnico en el área de diagnóstico de enfermedades a través
de talleres en la Universidad de Arizona o en el extranjero.
xii
DONALD V. LIGHTNER
Departamento de Ciencias Veterinarias y Microbiología
Universidad de Arizona
Tucson, Estados Unidos
dvl@u.arizona.edu
PhD en Patología y Biología Pesquera, Maestría en Biología Pesquera y su Licenciatura en
Biología Pesquera. Su experiencia está dirigida a la patología y enfermedades de los cultivos
de crustáceos y peces, enfermedades de invertebrados, marinos y de agua dulce, enfermedades
infecciosas, virología, histología, microscopio electrónico, desarrollo de métodos de diagnósticos,
nutrición de animales acuáticos y toxicología acuática. Provee servicios de consultoría a la industria
camaronicola en el área de patología y da entrenamiento técnico en el área de diagnóstico de
enfermedades a través de talleres en la Universidad de Arizona o en el extranjero.
MARGHERITA ANNA BARRACCO

Universidad Federal de Santa Catarina (UFSC),
Departamento de Biología Celular, Embriología y Genética (BEG),
Laboratorio de Inmunología Aplicada à la Acuicultura (LIAA),
Florianópolis, SC, Brasil
barracco@mbox1.ufsc.br
Doctorado en Inmunologia de Invertebrados y Licenciatura en Ciencias Biológicas. Profesora
Titular de Biología Celular, con participación en los programas de Postgrado en Acuicultura y
Biotecnología. Investigadora en el área de inmunología de crustáceos y moluscos de interés para
la acuicultura, con implicaciones en la sanidad y en el monitoreo ambiental. Sus principales
trabajos de investigación están enfocados en el estudio de la respuesta inmunológica a infecciones,
el desarrollo de parámetros hemato-inmunológicos para el monitoreo de condiciones de salud y
el efecto de sustancias inmunoestimulantes en invertebrados acuáticos, con énfasis en camarones
y bivalvos marinos.
LUCIANE MARÍA PERAZZOLO

Laboratorio de Inmunología Aplicada à la Acuicultura (LIAA),
luciane@ccb.ufsc.br
Maestría en Inmulogía de Crustáceos y Doctorado en Vitelogénesis de Peces. Profesora
Asociada de Biología Celular, con participación en el programa de Postgrado en Acuicultura.
Investigadora en el área de inmunologia de crustáceos de interés para la acuicultura, con
implicaciones en la sanidad. Sus principales trabajos de investigación están enfocados en el
estudio de la respuesta inmunológica a las infecciones, caracterización bioquímica y molecular de
proteínas inmunes efectoras y/o reguladoras, el desarrollo de parámetros hemato-inmunológicos
para el monitoreo de las condiciones de salud y el efecto de sustancias inmunoestimulantes en
camarones.
xiii
RAFAEL DIEGO ROSA

Laboratorio de Inmunología Aplicada a la Acuicultura (LIAA),
rddr@gmail.com
Maestría en Biotecnología aplicada a la acuicultura y Licenciatura en Ciencias Biológicas.
Sus principales trabajos de investigación están enfocados en la inmunología de crustáceos y
moluscos bivalvos, en especial en los péptidos antimicrobianos producidos por estos animales.
ALITIENE MOURA LEMOS PEREIRA

Embrapa Meio-Norte,
Parnaíba, PI, Brasil,
alitiene@cpamn.embrapa.br
Tecnóloga en Acuicultura, con Maestría y Doctorado en Acuicultura. Investigadora de
la Empresa Brasileña de Investigación Agropecuaria (Embrapa). Coordinadora del Núcleo de
Investigación en Pesca y Acuicultura da Embrapa Meio-Norte. Responsable por el Laboratorio
de Patología de Organismos Acuáticos (LAPOAq). Participa de La Red de Investigación en
Camaronicultura del Nordeste (RECARCINE), grupo enfermedades. Responsable por proyectos en
patología, diagnóstico y monitoreo sanitario de camarones cultivados.
EMIKO SHINOZAKI MENDES

Universidade Fed. Rural de Pernambuco,
Recife, PE, Brasil
esmendes@dmv.ufrpe.br
Médica Veterinaria, con Maestría en Ciencia y Tecnología de Alimentos, Doctorado en
enfermedades tropicales. Profesor Asociado del Departamento de Medicina Veterinária, y en
los programas de pós-grado en Veterinária y de los Recursos Pesqueros y Acuicultura, ambos
de la Universidad Federal Rural de Pernambuco. Responsable por el Laboratorio de la Salud
de los Animales Acuáticos (LASAq) y Coordinadora actual de la Red de la Investigación en
Camaronicultura del Nordeste (RECARCINE), grupo enfermedades, actuando principalmente en
el área de la microbiología.
TEREZA CRISTINA VASCONCELOS GESTEIRA

Universidade Fed. do Ceará,
LABOMAR, CE, Brasil
cgesteira@labomar.ufc.br
Bióloga con maestría en Zoología por la Universidad Federal de Rio de Janeiro y PhD
en Biología por la Universidad de New Brunswick – Canadá. Trabaja en el área de histología
y en histopatología de camarones peneídos. Realiza investigaciones en el área de patologías
de crustáceos marinos. Es responsable por la cátedra de Patología de Organismos Marinos y
Estuarinos y directora de postgrado a nivel de maestría en el Curso de Ciencias Marinas Tropicales.
Es miembro activo de la World Aquaculture Society (WAS) del Consejo Regional de Biología y de
la Asociación Brasileña de Patología de Organismos Acuáticos (ABRAPOA).Participa de la “Red
de Camarones Marinos del Nordeste” – RECARCINE, subred Enfermedades.
xiv
Capítulo 1
Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en

Camarones Marinos de Cultivo
Capítulo 1
Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en Camarones

Marinos de Cultivo
Coclé, Panamá
Introducción
Con base en las principales técnicas utilizadas en la actualidad para determinar
enfermedades en camarones, la siguiente lista presenta los pasos básicos y métodos
que sirven como herramienta para realizar diagnósticos y detectar agentes etiológicos
en estos crustáceos de gran importancia comercial en la economía mundial. Aunque
algunos de estos procedimientos pueden ser realizados por los mismos productores en
SVZSHIVYH[VYPVZKLTHK\YHJP}U`VSHY]PJ\S[\YHVLUSHZÄUJHZJHTHYVULYHZSHTH`VYxH
deben ser hechos por profesionales en sanidad acuícola o por Médicos Veterinarios
especialistas. Se debe recordar siempre que el diagnóstico no consiste en una prueba de
laboratorio como tal, sino en la interpretación que hace el especialista con base en sus
conocimientos y en la información recopilada de las pruebas de campo y de laboratorio.
3HZJP[HZIPISPVNYmÄJHZ\[PSPaHKHZWHYHSHWYLWHYHJP}UKL\UHWHY[LKLLZ[L*HWx[\SVUV
serán mencionadas a lo largo del texto para facilitar la lectura de los diferentes temas. A
JHTIPVZLYmUPUJS\PKHZHSÄUHSKLS*HWx[\SVLUSHZ¸9LMLYLUJPHZIPISPVNYmÄJHZ¹
Pasos para el diagnóstico:

(UHTULZPZPUMVYTHJP}UOPZ[}YPJHKLSJHZVKH[VZYLSHJPVUHKVZJVULSL]LU[V
,_HTLUJSxUPJV
4PJYVZJVWxH HUmSPZPZ JVU TPJYVZJVWPV KL S\a KPYLJ[H JVU[YHZ[L KL MHZL V JHTWV
oscuro, con montajes en fresco de tejidos teñidos o sin coloraciones, barridos o
montajes en fresco de tiras fecales)
)HJ[LYPVSVNxH KL [LQPKVZ KL JHTHYVULZ V KL Z\Z[YH[VZ YLSHJPVUHKVZ JVTV HN\H
sedimento y otros organismos acuáticos)
/PZ[VSVNxHKLLZWLJxTLULZÄQHKVZ
7Y\LIHZ IHZHKHZ LU HU[PJ\LYWVZ WHYH SH KL[LJJP}U KL WH[}NLUVZ \[PSPaHUKV
anticuerpos policlonales (PAbs por sus siglas en inglés) o anticuerpos monoclonales
(MAbs por sus siglas en inglés)
4t[VKVZTVSLJ\SHYLZ
- Sondas de ADN en pruebas de hibridación dot blot directamente con muestras
frescas de tejido o con ADN extraído
:VUKHZ KL (+5 V KL (95 LU WY\LIHZ KL OPIYPKHJP}U in situ con cortes
OPZ[VS}NPJVZKL[LQPKVZÄQHKVZ
7*99;7*9`7*9LU[PLTWVYLHSWHYHWY\LIHZKPYLJ[HZJVUT\LZ[YHZKL[LQPKV
MYLZJVVJVU(+5V(95L_[YHxKV
7HYmTL[YVZPUT\UVS}NPJVZOLTVNYHTHZ`TLKPJP}UKLWLYÄSLZPUT\ULZ
4PJYVZJVWxHLSLJ[Y}UPJHKLIHYYPKVVKL[YHUZTPZP}U
)PVLUZH`VZ JVU WVY[HKVYLZ ZVZWLJOVZVZ V Z\IJSxUPJVZ \[PSPaHUKV OVZWLKLYVZ
altamente susceptibles (estadios del animal o especies) como indicadores de la
presencia del patógeno
1.1 Anamnesis
,U SH TLKPKH KL SV WVZPISL LS [tJUPJV LU ZHUPKHK YLZWVUZHISL KL YLHSPaHY LS
diagnóstico de una enfermedad en una población de camarones, debe incluir una visita
HSHPUZ[HSHJP}UHMLJ[HKHTHK\YHJP}USHY]PJ\S[\YHVÄUJHKLLUNVYKL
Durante esta visita, el técnico debe recopilar la información histórica previa a
SH HWHYPJP}U KLS IYV[L KL SH LUMLYTLKHK ,Z[V W\LKL PUJS\PY JHTIPVZ LU WHYmTL[YVZ
HTIPLU[HSLZ V ÄZPJVX\xTPJVZ [YmUZP[V PU\Z\HS KL WLYZVUHZ V LX\PWVZ WVY SHZ
instalaciones, presencia de animales foráneos al sistema como perros, aves, roedores o
vacas, alteraciones en el régimen y tipo/calidad del alimento suministrado, cambios en
los procedimientos o tipos de fertilizantes, uso de productos químicos o biológicos en
el cultivo afectado, existencia de brotes similares con anterioridad en dicha empresa o
en otras conocidas y, toda aquella información pasada o presente relacionada directa o
indirectamente con la población en cuestión.
Debe llevarse un registro de esta información obtenida en la empresa, para estudios
de correlación con los hallazgos obtenidos en el examen clínico y en las pruebas de
laboratorio complementarias que se harán luego de la visita de campo.
1.2 Examen clínico

Cuando se trate de un brote de una enfermedad, durante la visita a las instalaciones
deben evaluarse las unidades de producción (tanques o estanques) que presenten
problemas. Se deben realizar capturas de camarones in situ y hacer una revisión individual
de animales, para formarse una idea aproximada de la proporción del problema: qué
tanta población está afectada (prevalencia en %), grado de severidad de las afecciones
observadas en los organismos enfermos y qué tipo de enfermedad puede estar causando
el brote.
,S L_HTLU JSxUPJV KLIL PUJS\PY \U YLJVYYPKV THU\HS ` ]PZ\HS T\` J\PKHKVZV KL
los camarones que sean revisados, los cuales no deben ser capturados al azar, sino
seleccionados por presentar alguna manifestación de enfermedad. Con base en los
hallazgos de esta valoración clínica, es factible en algunos casos hacer un diagnóstico
WYLZ\U[P]VLSJ\HSZLKLILJVUÄYTHYJVUWY\LIHZJVTWSLTLU[HYPHZKLSHIVYH[VYPV
,SUTLYVKLHUPTHSLZX\LZLKLIL[VTHYWHYHYLHSPaHY\ULZ[\KPVZVIYLSHL[PVSVNxH
de enfermedades, está afectado por la habilidad de reconocer camarones enfermos
en exámenes generales, la naturaleza del problema presente y por la experiencia del
profesional especialista en sanidad acuícola. Cuando se eligen camarones que presenten
ZPNUVZJSxUPJVZHWVYWVISHJP}UL_HTPUHKVZPUKP]PK\HSTLU[LZLYmUZ\ÄJPLU[LZ
La captura o colección de camarones para realizar un examen que busca determinar
la presencia de enfermedad, debe realizarse procurando el mínimo de estrés durante la
manipulación de los animales.
2
Jorge Cuéllar-Anjel Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en Camarones Marinos de Cultivo
Si el examen clínico debe ser realizado en un lugar diferente al de la captura y los

camarones deben ser transportados hacia otra parte, la movilización debe hacerse en
recipientes con agua del mismo estanque, limpia (sin lodo ni trozos de vegetales), con
adecuada aireación y teniendo una densidad baja (para evitar el estrés). Si los camarones
van a permanecer un período de tiempo en el recipiente antes de ser examinados, deben
tener buena aireación y, en lo posible, se debe bajar la temperatura a 25-27ºC mediante
la adición de bolsas con hielo (selladas).
,U LZ[\KPVZ KL JHTHYVULZ WYLZ\TPISLTLU[L LUMLYTVZ ZL KLILU ZLSLJJPVUHY
animales moribundos, descoloridos, con comportamiento anormal o que presenten
otras anormalidades macroscópicas con las cuales se sospeche de una enfermedad. Las
principales observaciones que se deben realizar en camarones enfermos durante una
valoración clínica, son las siguientes:
*VSVYKLSHUPTHS
;HTH|VKLSJ\LYWVJVTWHYHKVJVULSYLZ[VKLSHWVISHJP}U¸LUHUPZTV¹
,_WHUZP}UKLJYVTH[}MVYVZ
+LMVYTPKHKLZLUYVZ[YVHIKVTLUVHWtUKPJLZ
-SL_P}UKLSTZJ\SVHIKVTPUHSJHSHTIYL
*VSVYKLSHZIYHUX\PHZHTHYPSSHZTHYY}UVULNYHZ
*VSVYKLSVZHWtUKPJLZWLYLP}WVKVZWSL}WVKVZ`\Y}WVKVZ
*VSVYKLSHZHU[LUHZ
,KLTHWYLZLUJPHHUVYTHSKLSxX\PKVLUHWtUKPJLZ\V[YHZWHY[LZKLSJ\LYWV
;YHUZWHYLUJPHKLSVZTZJ\SVZKLSHIKVTLU`KLSJLMHSV[}YH_
9LWSLJP}UPU[LZ[PUHSWVYJLU[HQLKLSPU[LZ[PUVX\LZLLUJ\LU[YHSSLUV
;L_[\YHKLSL_VLZX\LSL[VK\YVVISHUKV
;VUVKLSTZJ\SVHIKVTPUHSÄYTLVÅmJPKV
7YLZLUJPHKLTVJVZVIYLSHJ\[xJ\SHYLZIHSVZVVmZWLYVHS[HJ[V
4HUJOHZSHJLYHJPVULZOLYPKHZaVUHZVZJ\YHZ\VWHJHZHZ[PSSHZJSH]HKHZ
*VSVYKLSLZ}MHNV`LZ[}THNVHUHYHUQHKVZ\NPLYLJHUPIHSPZTVVTVY[HSPKHK
,UJ\HU[VHTHUPMLZ[HJPVULZKLLUMLYTLKHKLUJVUKPJPVULZUH[\YHSLZLUSVZ[HUX\LZ
o estanques, las siguientes son observaciones frecuentes en camarones enfermos:
5HKVLYYm[PJV
3L[HYNPH`KLIPSPKHK
7tYKPKHKLSYLÅLQVKLO\PKHWLYTP[LUZLYJHW[\YHKVZZPULQLYJLYYLZPZ[LUJPH
=\SULYHIPSPKHKHWYLKHKVYLZH]LZ
5HKVZ\WLYÄJPHS¸IHYILV¹
:\ZJLW[PIPSPKHKHSHOPWV_PH
+PZTPU\JP}ULUSHHSPTLU[HJP}U
Cuando se realicen muestreos aleatorios intencionales para estimar la prevalencia

de una enfermedad en una población, los camarones deben ser tomados al azar (no
LZJVNPKVZ ,S [HTH|V KL SH T\LZ[YH WHYH LZ[\KPVZ KL LUMLYTLKHKLZ LU JHTHYVULZ
ZLYm YL]PZHKV LU KL[HSSL TmZ HKLSHU[L *HWx[\SV ¸,UMLYTLKHKLZ ]PYHSLZ¹ WVY *HYSVZ
Pantoja.
3
MÉTODO DE EXAMEN CLÍNICO
-PN\YH*HW[\YHKLJHTHYVULZLU\ULZ[HUX\L
de cultivo mediante el uso de una atarraya, para
ser sometidos a un examen clínico.
-PN\YH 4\LZ[YH KL JHTHYVULZ P. vannamei

sanos, enfermos y muertos observados en un
recipiente de fondo blanco, después de su
captura en un estanque de cultivo. Se observan
algunos camarones muertos sin apéndices
(pereiópodos o pleópodos), debido a que han
sido canibalizados por otros camarones.
-PN\YH *HTHYVULZ P. vannamei que

están siendo observados luego de haber sido
capturados en un estanque de cultivo, durante
\U WYVJLKPTPLU[V KL L_HTLU JSxUPJV ,U LS
caso de estos 5 camarones, no se observan
manifestaciones clínicas de enfermedad.
4
1.3 Microscopía Directa (Análisis en fresco)

,Z[H [tJUPJH LZ[m IHZHKH LU SH VIZLY]HJP}U IHQV LS TPJYVZJVWPV KL [LQPKVZ V
WHY[LZKLJHTHYVULZHMLJ[HKVZJVULSÄUKLLZ[HISLJLYLUSHTLKPKHKLSVWVZPISL\U
KPHNU}Z[PJVWYLZ\U[P]V3HZWHY[LZTmZJVTUTLU[LL_HTPUHKHZIHQVLSTPJYVZJVWPV
ZVU! OLWH[VWmUJYLHZ IYHUX\PHZ JVU[LUPKV PU[LZ[PUHS OLJLZ TZJ\SV LZX\LSt[PJV `
contenido gástrico.
Para una evaluación sanitaria con microscopía directa, deben examinarse las
muestras lo más pronto posible después del muestreo y después de la preparación del
montaje en un portaobjetos. Se deben utilizar organismos vivos siempre que sea posible,
o usar muertos frescos que han sido mantenidos en frío (refrigerados o enhielados), o
LZWLJxTLULZÄQHKVZLUMVYTHSPUH[HTWVUHKHJ\HUKVUVZLHWVZPISL[YHIHQHYJVU
camarones vivos. Si se puede contar con un laboratorio de campo adecuado, debe usarse
para procesar y examinar las muestras lo más cerca del sitio de muestreo.
Una aplicación importante del método de microscopía, es el examen del contenido
NmZ[YPJVLUJHTHYVULZ7HYHLSSVKLILUZLYZHJYPÄJHKVZHSTLUVZHUPTHSLZJHW[\YHKVZ
al azar en una población determinada (estanque o tanque). Se extrae cuidadosamente el
estómago luego de hacer una disección del mismo utilizando tijeras y pinzas pequeñas.
Se realiza una incisión por la línea media con las tijeras y se extrae el equivalente a una
gota de contenido gástrico. Se ubica sobre una lámina portaobjetos y se añade una gota
de solución salina. Se coloca luego una lámina cubreobjetos y se hace presión con la
WPUaHJ\PKHKVZHTLU[LJVULSÄUKLZLWHYHYSVZJVTWVULU[LZNmZ[YPJVZ
Se observa luego la muestra bajo el microscopio utilizando los objetivos de 4X
` ? YLNPZ[YHUKV SH WYVWVYJP}U LZ[PTHKH KL HSPTLU[V HY[PÄJPHS WLSSL[Z TPJYVHSNHZ
zooplancton, sedimento y otros componentes que se observen. Se promedian los
porcentajes estimados en los 10 camarones para cada una de estas observaciones y se
VI[PLULUSVZ]HSVYLZWHYHKPJOHWVISHJP}U,Z[LTt[VKVWLYTP[LJVUVJLYMHJ[VYLZX\LLZ[tU
afectando el crecimiento, así como realizar correctivos en la dieta de los animales.
Los detalles relacionados con la técnica de montajes en fresco, son estudiados más
HKLSHU[LLULZ[LTPZTV*HWx[\SVWVY4HYxH:VSLKHK4VYHSLZ4VU[HQLZLU-YLZJV
5
MÉTODO DE MICROSCOPÍA
(Montajes en fresco)
-PN\YH *HTHYVULZ P. vannamei bajo

observación durante un examen clínico. Nótese
la presencia de una zona oscura en la parte
media del cefalotórax y superior de las branquias
ÅLJOHZ3HVWHJPKHKNLULYHSPaHKHKLSTZJ\SV
abdominal puede deberse al tiempo que han
estado fuera del agua (estrés por hipoxia). No
se observan manifestaciones adicionales de
enfermedad.
-PN\YH *HTHY}U Q\]LUPS P. vannamei en el

cual se está levantando la cutícula posterior
del cefalotórax, para extraer muestras del
hepatopáncreas, las branquias y heces del
intestino medio, a partir de las cuales se va a
preparar un montaje en fresco.
-PN\YH7YLWHYHJP}UKL\UTVU[HQLLUMYLZJV
de un camarón P. vannamei en donde ya se
han colocado bajo el cubreobjetos muestras de
hepatopáncreas (izquierda) y branquias (centro).
Las heces están siendo extraídas del intestino
medio con la ayuda del borde de unas tijeras.
6
MÉTODOS DE MICROSCOPÍA
(Montajes en fresco)
-PN\YH 4\LZ[YH KL OLWH[VWmUJYLHZ KL \U

camarón subadulto P. vannamei preparada
mediante un montaje en fresco. Se observa
gran cantidad de vacuolas lipídicas (reservas de
grasa) de colores amarillo y gris y con tamaños
]HYPHKVZ [VKHZ UVYTHSLZ ,U LS JLU[YV OH` \U
proceso de melanización (color marrón) de un
[I\SVKLSOLWH[VWmUJYLHZLSJ\HSLZ[mYVKLHKV
WVY ]HYPHZ JHWHZ KL OLTVJP[VZ ¸OHSV¹ ISHUJV
HSYLKLKVY KLS [I\SV TLSHUPaHKV ` WYLZLU[H
una forma alargada siendo más ancho hacia la
PaX\PLYKH:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH 4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KL \U Q\]LUPS

P. vannamei preparada mediante un montaje
en fresco. Se observan 2 lamelas branquiales
bifurcadas en su extremo (superior), las cuales
presentan melanización de origen tóxico. Sin
[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH 4VU[HQLLUMYLZJVWYLWHYHKVHWHY[PYKL
una muestra de heces de un camarón subadulto
P. vannamei. Se observan dos trofozoitos de
gregarina Nematopsis sp., uno de ellos con el
L_[YLTV WVZ[LYPVY IPM\YJHKV ,Z[VZ WYV[VaVHYPVZ
LZ[mU MVYTHKVZ WVY JtS\SHZ HYYPIH ` WVY
células (centro), respectivamente. Se puede
diferenciar la célula anterior (protomerito) y
la célula posterior (deutomerito). Sin tinción.
(TWSPÄJHJP}U?
7
MÉTODO DE MICROSCOPÍA DIRECTA
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV WYLWHYHKV H

partir de heces de una postlarva (pl-10) de P.
vannamei, en la que se observan trofozoitos de
la gregarina Paraophioidina sp. (probablemente
P. scolecoides). Cada trofozoito está compuesto
WVY\UHUPJHJtS\SHJVULSUJSLV]PZPISL,Z[L
parásito tiene la particularidad de formar grupos
en los cuales varios organismos se adhieren a
\UV :PU [PUJP}U (TWSPÄJHJP}U! ? -V[V!
*\tSSHY(UQLSL[HS
1.4 Montajes en fresco (María Soledad Morales-Covarrubias)
Introducción
,S KPHNU}Z[PJV PTWSPJH \U LU[LUKPTPLU[V KL SH JH\ZH ` ZP LZ WVZPISL \U
JVUVJPTPLU[VKLSVZMHJ[VYLZJVU[YPI\`LU[LZZPNUPÄJH[P]VZX\LPUÅ\`HULUSHHWHYPJP}U
de la enfermedad.
Con el diagnóstico aumenta la probabilidad de un control efectivo cuando se
determina la causa exacta y se relaciona con sus factores contribuyentes efectivos. Sin
embargo, debemos aceptar que el conocimiento de la salud y la enfermedad varía en
diferentes animales acuáticos, incluidos los camarones y que en las granjas camaroneras
y laboratorios aparecen nuevas enfermedades. Por tanto, en una situación particular, la
precisión esperada y la calidad de un diagnóstico pueden ser directamente afectadas por
el conocimiento disponible respecto a enfermedades de camarones, por el entrenamiento
y experiencia de la persona encargada de realizar el diagnóstico, así como por las
prácticas de manejo en los sistemas de cultivo.
Uno de los objetivos principales en el diagnóstico de una enfermedad de un animal
LUWYVK\JJP}ULZSHKL[LYTPUHJP}UKLSHJH\ZHL[PVSVNxH3HPKLU[PÄJHJP}UKLSVZHNLU[LZ
etiológicos de la enfermedad se realiza (o debería realizarse) mediante la aplicación de
Tt[VKVZJPLU[xÄJVZKLPU]LZ[PNHJP}U3HVIZLY]HJP}UKLT\LZ[YHZKL}YNHUVZ`[LQPKVZ
de camarones (para buscar bacterias, hongos, protozoarios, metazoarios e inclusiones
de rickettsias y virus) a través de microscopía de luz e histopatología (respuesta del
OVZWLKLYVWH[VSVNxHZVUTt[VKVZJVTUTLU[LLTWSLHKVZWHYHLZ[HISLJLYSVZHNLU[LZ
etiológicos, los cuales conllevan a determinar la causa de enfermedades en camarones.
Los agentes patógenos se encuentran en el ambiente en forma natural y el medio
acuático no es la excepción. Muchos de ellos son oportunistas; es decir que mientras
los camarones se encuentren sanos y las condiciones de los parámetros de cultivo no
ZLHS[LYLUSVZWH[}NLUVZUVH[HJHU,Z[LLZ\UKH[VT\`PTWVY[HU[LW\LZLSOLJOVKL
[LULYWH[}NLUVZWYLZLU[LZLU\UHNYHUQHVSHIVYH[VYPVUVZPNUPÄJHWYLJPZHTLU[LX\LSVZ
8
organismos se encuentren enfermos. La gravedad dependerá del nivel de incidencia, de

la prevalencia, tipo de patógeno, de su virulencia, de su patogenicidad, de la especie
cultivada, de la genética de la misma (ciclo cerrado o silvestres) y el nivel de estrés de los
camarones al momento de estar expuestos al patógeno.
,SLZ[YtZLZKL[LYTPUHKVWVYJHSPKHKKLSHN\H[PWVKLHSPTLU[HJP}U]HYPHJP}UKYmZ[PJH
LUSVZWHYmTL[YVZJVTVV_xNLUVKPZ\LS[V[LTWLYH[\YHZHSPUPKHKW/L[JHZxJVTVWVY
SHZWYmJ[PJHZKLTHULQVWYPUJPWHSTLU[L,SLZJLUHYPVHU[LYPVYZLJVTWSPJHJVULS[YHZSHKV
KLVYNHUPZTVZ]P]VZX\LZLYLHSPaHKLTHULYHMYLJ\LU[LLU[YLaVUHZ`HULU[YLWHxZLZ
,Z[VOHWYVWPJPHKVSHPU[YVK\JJP}U`WYVWHNHJP}UKLHNLU[LZWH[}NLUVZL_}[PJVZHS\NHYLZ
donde no existían y que en algunos casos se diseminan a las poblaciones silvestres.
Análisis en fresco
,SHUmSPZPZLUMYLZJVLZSH[tJUPJHX\LZL\[PSPaHWHYHTVUP[VYLHYLSLZ[HKVKLZHS\KKL
los organismos y realizar diagnósticos presuntivos en laboratorio y campo. Consiste en la
disección del camarón en todos sus estadios, para observar las alteraciones y patógenos
que presenten sus órganos y tejidos. La capacitación para este tipo de análisis consta de
un corto entrenamiento básico que profesionales (biólogos, ingenieros en acuicultura,
médicos veterinarios etc.) pueden recibir en una granja o laboratorio.
Para realizar el diagnóstico del estado de salud de una población se requiere de la
selección y toma adecuada de la muestra, la cual es elegida de acuerdo al estado de salud
de los organismos o a la sospecha de alguna enfermedad. La intensidad del muestreo
UTLYVKLT\LZ[YLVZLULS[PLTWVOHZ[HSHJVZLJOHKLWLUKLYmKLSHULJLZPKHKKLSH
información, de la historia de la granja, del origen de los organismos y de la densidad de
organismos sembrados en el cultivo. Por lo tanto para una buena selección se tiene que
tomar en cuenta lo siguiente:
Muestreo aleatorio. Cuando solamente se quiere determinar el estado de salud o para
buscar la prevalencia de patógenos, se toman los organismos y estanques al azar, lo cual
KLILYLHSPaHYZLKLJ\H[YVmYLHZKPMLYLU[LZKLSLZ[HUX\L-PN\YH
,S[HTH|VTxUPTVKLT\LZ[YHVZ\IT\LZ[YHKLILNHYHU[PaHY\U KLJVUÄHUaH
que de existir una infección, ésta se incluirá en la muestra y para la prevalencia su
T\LZ[YLVKLWLUKLYmKLSHWYL]HSLUJPHLZ[PTHKHKLSWH[}NLUV`KLSUP]LSKLJVUÄHUaH
LSLNPKV ;HISH 3VZ JHTHYVULZ ZLSLJJPVUHKVZ ZL KLWVZP[HU LU JVU[LULKVYLZ JVU
aireación, procurando crearles el menor estrés posible y se trasladan de inmediato al
laboratorio para su posterior análisis.
Muestreo no aleatorio4\LZ[YHX\LJVU[PLULZVSHTLU[LVYNHUPZTVZLUMLYTVZ,Z[L[PWVKL
muestreo se realiza cuando se tiene la sospecha de la presencia en el estanque, de alguna
enfermedad o síndrome. Se seleccionan por lo menos 10 organismos que presenten
señales clínicas tales como: decoloración, melanización y necrosis en la cutícula, así
como anorexia (falta de apetito), letargia (reducción de la actividad normal), coloración
rojiza de los pleópodos y telson o cualquier otra alteración que se observe en ellos. Los
organismos con estas características generalmente se encuentran en la compuerta de
ZHSPKHKLSVZLZ[HUX\LZ-PN\YH
Las muestras deben procesarse inmediatamente, de acuerdo al procedimiento o
procedimientos que se hayan elegido para la detección del agente causal de la enfermedad.
Los organismos deben ser enviados vivos a los laboratorios de diagnóstico.
9
-PN\YH ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

donde se observan las cuatro áreas diferentes
para la toma de organismos en muestreo al
azar.
-PN\YH ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

donde se observa la compuerta de salida para la
toma de organismos en muestreo no aleatorio.
Tabla 1. Selección del tamaño de muestra y cálculo del porcentaje de prevalencia de un patógeno
LU\UHWVISHJP}UKL[LYTPUHKH;VTHKHKL3PNO[ULY `TVKPÄJHKHKL(TVZ
;HTH|VKL ;HTH|VKLSHT\LZ[YHULJLZHYPHWHYHVI[LULYLSWVYJLU[HQLKLWYL]HSLUJPH
la población 2% 5% 10% 20% 40% 50%
50 50 20 10 7 5 2
100 75 45 11 7
250 110 50 25 10 7
500 55 10 7
1,000 140 55 27 10
1,500 140 55 27 10
2,000 145 27 10
4,000 145 27 10
10,000 145 27 10
>/= 10,000 150 10
7YL]HSLUJPH$5TLYVKLPUKP]PK\VZKL\UHLZWLJPLKLOVZWLKLYVPUMLJ[HKHJVU\UHLZWLJPLWHY[PJ\SHYKLWHYmZP[VUTLYVKL
OVZWLKLYVZL_HTPUHKVZ4HYNVSPZL[HS
10
Para la realización del análisis en fresco, se requiere contar con espacio limpio en
donde se tenga el siguiente material:
4PJYVZJVWPVJVTW\LZ[VJVUVIQL[P]VZKL`?
Portaobjetos
Cubreobjetos
)PZ[\Yx
Navajas de disección
Pinzas de disección
;PQLYHZÄUHZKLKPZLJJP}U
;HISHKLKPZLJJP}U
Cajas de petri
Pizetas
Guantes
(N\HKLTHYLZ[tYPSVÄS[YHKH
9LZPUH
1LYPUNHZKLZLJOHISLZKL]HYPHZTLKPKHZT3T3`T3
/LTH[V_PSPUH
,VZPUH@
:VS\JP}UKL+H]PKZVU(-((SJVOVS-VYTHSKLOxKVÍJPKVHJt[PJV
:VS\JP}UKL+H]PKZVUTVKPÄJHKH(-((SJVOVS-VYTHSKLOxKVÍJPKVJSVYOxKYPJV
,[HUVSHIZVS\[V
,[HUVSHS
Xileno
Contenedores para muestras
/VQHKLYLWVY[L
Manuales
Desarrollo de la técnica:
Los organismos se miden y pesan para obtener el peso y tamaño promedio.
:LHUHSPaH[HU[VSHZ\WLYÄJPLKLSVYNHUPZTVWHYHKL[LJ[HYKLMVYTHJPVULZLULSYVZ[YV
y en el sexto segmento abdominal, como cutícula delgada (o suave), epicomensales,
decoloración, coloración rojiza, melanización, ampollas y necrosis de cutícula
-PN\YH"WSL}WVKVZWLYLP}WVKVZ`HU[LUHZ
:L ZLSLJJPVUH \UH WLX\L|H WVYJP}U KL JHKH [LQPKV \ }YNHUV -PN\YH 3HZ
porciones se colocan individualmente en portaobjetos limpios (no mezclar porciones),
se les adiciona unas gotas de agua de mar estéril y se pone el cubreobjetos; debe
procurarse que en la muestra no se formen burbujas que puedan interferir (para ello
hay que realizar una leve presión sobre el cubreobjetos con la pinza de disección).
Las muestras que se tomarán son:

Branquias: JVU SHZ [PQLYHZ ÄUHZ ZL LSPTPUH LS L_VLZX\LSL[V X\L J\IYL SHZ IYHUX\PHZ
Se toma una pequeña porción y se coloca en el portaobjetos para buscar: cambios
LU SH JVSVYHJP}U KL SVZ ÄSHTLU[VZ IYHUX\PHSLZ JVTV TLSHUPaHJP}U ULJYVZPZ mYLHZ
ISHUX\LJPUHZIPLUKLÄUPKHZWYLZLUJPHKLWYV[VaVHYPVZZoothamniumZW-PN\YH
Epistylis sp, Acineta, Ascophris, Bodo ZW IHJ[LYPHZ ÄSHTLU[VZHZ Leucothrix mucor y
Flexibacter sp), detritus del fondo de los estanques, restos de microalgas, hongos,
bacterias, melanizaciones y deformaciones. Para detectar cuerpos de inclusión viral en
SHZIYHUX\PHZWVYPTWYVU[HZLZULJLZHYPVÄQHYSHZLUZVS\JP}UKL+H]PKZVUTVKPÄJHKH
(-( (SJVOVS-VYTHSKLOxKVÍJPKV JSVYOxKYPJV ZP ]HU H ZLY WYVJLZHKHZ KL THULYH
11
PUTLKPH[H"ZPLZ[LUVLZLSJHZVW\LKLUÄQHYZLLUSHZVS\JP}UKL+H]PKZVU(-((SJVOVS
-VYTHSKLOxKVÍJPKVHJt[PJVX\LZL\[PSPaHWHYHÄQHYVYNHUPZTVZWHYHOPZ[VSVNxH
Hepatopáncreas: se elimina todo el exoesqueleto del cefalotórax para descubrir el
OLWH[VWmUJYLHZ -PN\YH ` LS LZ[}THNV :L VIZLY]H SH JVSVYHJP}U LS [HTH|V
KLS OLWH[VWmUJYLHZ WHYH KLJPKPY ZP OH` H[YVÄH YLK\JJP}U KL [HTH|V V OPWLY[YVÄH
(aumento de tamaño) del órgano. Con unas pinzas, se retira la membrana que cubre
-PN\YH*HTHY}UJVUTLSHUPaHJP}UT\S[PMVJHS
-PN\YH7LX\L|HWVYJP}UKLOLWH[VWmUJYLHZ
lista para ser analizada.
-PN\YH 4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KVUKL

ZL HWYLJPHU SHZ MVYTHZ IPLU KLÄUPKHZ KL
Zoothamnium sp.
12
el hepatopáncreas y con un bisturí se parte por la mitad para observar la coloración

KLS Å\PKV [L_[\YH TLSHUPaHJP}U ` ULJYVZPZ [\I\SHY :L [VTH \UH WLX\L|H T\LZ[YH `
se coloca en un portaobjetos para buscar: Baculovirus penaei, Monodon baculovirus,
gregarinas (trofozoitos y sicigias), bacterias, deformación tubular, nódulos hemocíticos,
TLSHUPaHJP}UÙLJYVZPZKLSVZ[I\SVZ-PN\YH
;HTIPtU KLIL VIZLY]HYZL SH JHU[PKHK KL SxWPKVZ WYLZLU[LZ KLZWYLUKPTPLU[V KL
JtS\SHZKLSLWP[LSPVKLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZ`HJ\T\SHJP}UKLU[YVKL]HJ\VSHZ
JP[VWSHZTm[PJHZ KL SVZ OLWH[VJP[VZ KL \UH Z\Z[HUJPH KL JVSVY ]LYKL VZJ\YV ¸IVSP[HZ
ULNYHZ¹7HYHSHYLHSPaHJP}UKLPTWYVU[HZLOPZ[VSVNxHLZULJLZHYPVÄQHYSVZ}YNHUVZ`V
[LQPKVZKLSVYNHUPZTVZLSLJJPVUHKVLULSÄQHKVYHKLJ\HKVWHYHLSKPHNU}Z[PJVLSLNPKV
Intestino: el abdomen, se separa del cefalotórax, del telson y de los urópodos para
facilitar la extracción del intestino. Por la parte posterior se localiza el intestino (que
W\LKLVUVJVU[LULYOPSVMLJHS"JVUH`\KHKL\UHWPUaHÄUHZLL_[YHLJVUJ\PKHKV`ZL
coloca en el portaobjetos, procurando extenderlo. Luego se vierten unas gotas de agua
KLTHY`ZLWYLZPVUHSPNLYHTLU[LHSKLWVZP[HYLSJ\IYLVIQL[VZ-PN\YH(SVIZLY]HY
SHT\LZ[YHLULSTPJYVZJVWPVZLI\ZJHYmU!NYLNHYPUHZJVUZ\ZKPMLYLU[LZLZ[HKPVZ-PN\YH
KPZ[YPI\JP}U`WVYJLU[HQLKLHKOLYLUJPHLULSPU[LZ[PUVPUÅHTHJP}UULTm[VKVZ
cuerpos de oclusión de Baculovirus penaei y Monodon baculovirus.
Músculo y gónadas: ZL [VTH \UH WLX\L|H T\LZ[YH KL TZJ\SV ` KL SHZ N}UHKHZ
(especialmente, aquel tejido que muestre opacidad de tipo lechoso). Se coloca en un
WVY[HVIQL[VZ`ZLWYLZPVUHWHYHMHJPSP[HYSHIZX\LKHKLTPJYVZWVYPKPVZ-PN\YHZP
estos órganos y tejidos fueron parasitados se deben observar masas de esporas de tamaño
y forma uniformes.
Las muestras ya preparadas se analizan en el microscopio, iniciando con el objetivo
KLTLUVYH\TLU[V`ÄUHSPaHUKVJVULSKLTH`VY+LIPKVHZ\YmWPKHKLZJVTWVZPJP}USH
primera muestra que se analiza es la del hepatopáncreas; después se estudia la muestra
KLIYHUX\PHZWVZ[LYPVYTLU[LLSPU[LZ[PUV`WVYS[PTVSHT\LZ[YHKLTZJ\SV`N}UHKHZ
,USHOVQHKLYLWVY[L;HISHZLHUV[H[VKVSVX\LZLVIZLY]HJVUJHKHVIQL[P]V3\LNV
ZL JHSJ\SH LS WVYJLU[HQL KL WYL]HSLUJPH ` ZL KL[LYTPUH LS NYHKV KL ZL]LYPKHK ;HISHZ
`X\LWYLZLU[LUSVZVYNHUPZTVZKLSHT\LZ[YHHUHSPaHKH:LÄUHSPaHJVULS
KPHNU}Z[PJV`LSYLWVY[LÄUHS
-PN\YH 6YNHUPZTV JVU OLWH[VWmU-

creas expuesto para tomar pequeña porción
para su análisis.
13
-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL OLWH[VWmUJYLHZ JVU

TLSHUPaHJP}UÙLJYVZPZKLSHZJtS\SHZ`KLSVZ[I\SVZ
-PN\YH4\LZ[YHLUMYLZJVKLPU[LZ[PUV
-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL PU[LZ[PUV TLKPV KVUKL

ZLHWYLJPHUSHZZPJPNPHZKLNYLNHYPUHZKL`KP]PZPVULZ
adheridas al epitelio y en el lumen del intestino.
-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL TZJ\SV KVUKL ZL

observan las cápsulas de Ameson nelsoni.
14
Tabla 2. Formato de reporte para el análisis en fresco.
No ________________________ -LJOHFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
Procedecia. ____________________________________________________________________
,ZWLJPL________________________________________________________________________
,Z[HUX\L5V_______________ ;HTH|VKLSHT\LZ[YH ______________________________
No. de muertos._____________ No. de examinados. ________________________________
,Z[HKVKL]PKH______________ Peso promedio. __________ ;HTH|VWYVTLKPV ________
*(9(*;,9Ð:;0*(:
*(9(*;,9Ð:;0*(:,?;,95(: 6):,9=(*065,: 6):,9=(*065,:
05;,95(:
Actividad de los camarones /,7(;67Í5*9,(:
Contenido del intestino ([YVÄH
Presencia de heces en forma de

coloración
cadena o discontinua
Presencia de epibiontes, bacte- 7YLZLUJPHKLSVZ]PY\Z!)7

rias y hongos en el camarón `4)=
Deformidades en el rostrum,
antenas abdomen, telson, +LMVYTHJP}UKLSVZ[I\SVZ
urópodos y pleópodos
Apéndices rotos *VSVYKLSÅ\PKV
Presencia de gregarinas en
Melanización (color café claro)
todos sus estadíos
Coloración anormal ;I\SVZTLSHUPaHKVZ
Presencia de masa de bac-

Características de la cutícula
terias y cantidad de lípidos
)9(58<0(: 05;,:;056
Presencia de gregarinas en
Coloración
todos sus estadíos.
Masas melanizadas de
Presencia de epibiontes
hemocitos
Nódulos de bacterias en las

*\LYWVZKLVJS\ZP}UKL)7
lámelas branquiales
Micosis (hifas, conidios) MÚSCULO
Cuerpos de inclusión de WSSV ;L_[\YH
Materia orgánica Color
Presencia de melanización y
Microsporidios
necrosis
Síndrome del
encalambramiento
15
Tabla 3. Guía general para dar un valor numérico cualitativo de grado de severidad
a la infección, infestación y síndrome (Lightner, 1996).
GRADO DE SEVERIDAD SIGNOS CLÍNICOS
No presentan signos de infección por el agente patógeno, parásito
0 o epicomensal. No presentan lesiones características de sín-
dromes.
7YLZLUJPHT\ÌHQHKLSWH[}NLUVWHYmZP[VVLWPJVTLUZHS,U
HX\LSSVZKVUKLZL[PLUL\UUTLYVLZ[mUKHYWLYTP[PKVtZ[LZL
1
encuentra justo arriba del límite normal. Se observan muy pocas
lesiones características del síndrome.
Se observa la presencia baja y moderada del patógeno, parásito o
epicomensal. Se observan lesiones ligeras o moderadas, car-
2
acterísticas del síndrome. Incremento en la mortalidad si no se
aplica tratamiento (cuando existe tratamiento).
Se observa la presencia moderada del patógeno, parásito o epico-
mensal. Se observan lesiones moderadas a severas, características

del síndrome. Potencialmente letal si no se aplica tratamiento
(cuando existe tratamiento).
Se observa gran cantidad del patógeno, parásito o epicomensal.
4 Se observan severas lesiones características del síndrome. Muy
letal con altas mortalidades.
Tabla 4. Guía para dar un valor numérico cualitativo de grado de severidad a la

deformación tubular en hepatopáncreas con análisis en fresco (Morales-Covarrubias,
2004).
No presentan signos de deformación tubular (0). No presentan
0
lesiones características de síndromes.
Presencia muy baja de deformación tubular (1-5/campo/organ-
1
ismo). Se observan muy poco desprendimiento celular.
:LVIZLY]HSHWYLZLUJPHTVKLYHKHKLKLMVYTHJP}U[\I\SHY
2 campo/organismo). Presencia de hemocitos y formación de nódu-
los hemocíticos. Se observa mortalidad si no se aplica tratamiento.
Se observa la presencia alta de deformación tubular (11-20/
campo/organismo). Se observan lesiones moderadas a severas,
JVTVTLSHUPaHJP}UKLZWYLUKPTPLU[VJLS\SHYH[YVÄH[\I\SHY`
formación de nódulos hemocíticos. Potencialmente letal si no se
aplica tratamiento.
:LVIZLY]HNYHUJHU[PKHKKL[I\SVZKLMVYTLZTHZKLJHTWV
organismo). Se observan severas lesiones como melanización,
4 ULJYVZPZH[YVÄH[\I\SHY[I\SVZ]HJxVZMVYTHJP}UKLU}K\SVZ
hemolíticos y presencia de granulomas. Muy letal con altas mor-
talidades.
16
;HISH.\xHWHYHKHY\U]HSVYU\TtYPJVJ\HSP[H[P]VKLNYHKVKLZL]LYPKHKHSH
infestación por gregarinas utilizando análisis en fresco.
No presentan signos de infección por el parásito (0). No presen-
0
tan lesiones causadas por el parasitismo.
Presencia muy baja del parásito (1-15/intestino/organismo). Se
1 observan muy pocas lesiones causadas por el parasitismo como
PUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH
:LVIZLY]HSHWYLZLUJPHTVKLYHKHKLSWHYmZP[VPU[LZ[PUVVY-
ganismo). Se observa un incremento en las lesiones causadas por
2
LSWHYHZP[PZTVJVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`MVYTHJP}UKLU}K\-
los hemocítico Se observa mortalidad si no se aplica tratamiento.
Se observa la presencia alta del parásito (51-100/intestino/organ-
ismo). Se observan lesiones moderadas a severas causadas por
LSWHYHZP[PZTVJVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`mYLHZT\S[PMVJHSLZ
mecanizadas y formación de nódulos hemocíticos. Potencial-
mente letal si no se aplica tratamiento.
Se observa gran cantidad del parásito (mas de 100/intestino/organ-
ismo). Se observan severas lesiones causadas por el parasitismo
4
JVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJHTLSHUPaHJP}UT\S[PMVJHSÙLJYVZPZ
Muy letal con altas mortalidades.
Tabla 6. Guía para dar un valor numérico cualitativo de grado de severidad a la

infestación por epicomensales en lamelas branquiales.
No presentan signos de infección por protozoario (0). No presen-
0
tan lesiones causadas por epicomensales.
Presencia muy baja de protozoarios (1-5/lámela/organismo). Se
1 observan muy pocas lesiones causadas por los epicomensales,
JVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH
:LVIZLY]HSHWYLZLUJPHTVKLYHKHKLWYV[VaVHYPVZSmTLSH
organismo). Se observa un incremento en las lesiones causadas
2 WVYSVZLWPJVTLUZHSLZJVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`MVYTHJP}U
de n’odulos hemocíticos. Se observa mortalidad si no se toman las
medidas de corrección.
Se observa la presencia alta de protozoarios (10-20/lámela/organ-
ismo). Se observan lesiones moderadas a severas causadas por los
LWPJVTLUZHSLZJVTVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`mYLHZT\S[PMVJHSLZ
mecanizadas y formación de nódulos hemocíticos. Potencial-
mente letal si no se toman medidas de corrección
Se observa gran cantidad del parásito (mas de 20). Se observan
ZL]LYHZSLZPVULZJH\ZHKHZWVYSVZLWPJVTLUZHSLZJVTVPUÄS-
4
tración hemocítica, melanización multifocal y necrosis. Muy letal
con altas mortalidades.
17
)HJ[LYPVSVNxH
Objetivo.,SVIQL[P]VKLSHIHJ[LYPVSVNxHLUJHTHYVULZLZJ\HU[PÄJHYSHJHU[PKHK`LS
tipo de las bacterias presentes en la hemolinfa, otros tejidos o larvas y postlarvas, así
como en agua para / de cultivo.
Descripción. La bacteriología es un conjunto de métodos que se utiliza como apoyo en
el diagnóstico de enfermedades en camarones, cuando se sospecha que la causa de la
enfermedad está relacionada con presencia de bacterias patógenas en el agua de cultivo
o dentro del organismo de los animales. Consiste en la siembra de muestras en diferentes
medios de cultivo, para determinar si hay crecimiento o no de bacterias potencialmente
patógenas.
Metodología.+LZW\tZKLKLÄUPYX\tWVISHJPVULZHMLJ[HKHZZL]HUHL_HTPUHYZLKLIL
KL[LYTPUHYLS[PWVKLT\LZ[YLVJVUIHZLLULSVIQL[P]VKLSLZ[\KPV,S[HTH|VKLT\LZ[YH
dependerá de si la captura es aleatoria o, de si se escogen sólo animales enfermos para
SHL]HS\HJP}U]LYLS*HWx[\SV¸,UMLYTLKHKLZ]PYHSLZ¹WHYHTmZKL[HSSLZZVIYL[tJUPJHZ
de muestreo). Los camarones que se van a someter a pruebas de bacteriología, deben
estar siempre vivos; no debe realizarse ninguna prueba bacteriológica con camarones
muertos, debido a que los resultados estarán sesgados por los cambios autolíticos (post-
mortem), con los cuales se alteran las poblaciones bacterianas presentes en los tejidos,
así como su crecimiento.
Antes de iniciar cualquier procedimiento bacteriológico, se deben tener previamente
LZ[LYPSPaHKVZ[VKVZLZ[VZLSLTLU[VZ,STH[LYPHSKL]PKYPVZLLU]\LS]LLUWHWLSRYHM[`ZL
LZ[LYPSPaHWVYSH[tJUPJHKLJHSVYZLJVTLKPHU[L\UOVYUVH\UH[LTWLYH[\YHKLV*
K\YHU[L\USHWZVKLKVZOVYHZ,SHN\HKLZ[PSHKH`SVZTLKPVZSxX\PKVZKLJ\S[P]VJVTV
LSHN\HWLW[VUHKHKLILUZLYLZ[LYPSPaHKVZWVY]HWVYOTLKVTLKPHU[L\UH\[VJSH]LH
15 libras de presión (121°C) durante quince minutos. Las asas de platino se esterilizan
KPYLJ[HTLU[LWVYJHSVYZLJVTLKPHU[LSHSSHTHKLSTLJOLYV,STVTLU[VLULSJ\HSLS
HZHZLLUJ\LU[YHLZ[tYPSZ\JLKLJ\HUKVtZ[HZL[VYUHKL\UJVSVYYVQVPUJHUKLZJLU[L,S
JVSHKVYJVUVQVKLTHSSHÄUVZLKLILKLZPUMLJ[HYKLQmUKVSVPUTLYZVLU\UHZVS\JP}UKL
hipoclorito de sodio concentrado por 5 minutos. Posteriormente se lava con agua estéril
hasta que desaparezca el olor producido por el hipoclorito.
La toma de muestra para análisis bacteriológico tanto de agua de transporte de
nauplios como de los mismos nauplios, se debe realizar, si es posible, en el momento
de recibir los animales y directamente en las bolsas o cajas de transporte. La toma de
muestra de agua en tanques de larvicultura, se debe realizar al menos en 2 puntos: la
entrada del tanque y en el centro del mismo.
,ULSJHZVKLSHY]HZVWVZ[SHY]HZZLKLIL[VTHY\UHJHU[PKHKJVUVJPKHVLZ[PTHKH
SVTmZJVUÄHISLWVZPISLKLHUPTHSLZJVULSÄUKLLTP[PYSVZYLZ\S[HKVZLUM\UJP}UKL
\UPKHKLZ MVYTHKVYHZ KL JVSVUPH <-* WVY HUPTHS V WVYNYHTVKL SHY]HZ¨WVZ[SHY]HZ
3H T\LZ[YH KLIL ZLY SH]HKH JVU HN\H KL THY LZ[tYPS \[PSPaHUKV \UH THSSH ÄUH V \U
colador pequeño de cocina, previamente desinfectado con yodo, formalina o etanol
70%. Las muestras deben ser luego maceradas en un recipiente esterilizado y agregando
una cantidad conocida (en mL) de agua de mar estéril o solución salina estéril para la
dilución del macerado.
,U LS JHZV KL JHTHYVULZ Q\]LUPSLZ Z\IHK\S[VZ V YLWYVK\J[VYLZ ZL YLJVTPLUKH
desinfectar el área de punción (seno cardíaco –dorsal– o seno hemolinfático –ventral–)
con trozos de algodón impregnado con etanol 70%. Con una aguja de insulina (1 mL)
nueva y estéril que tenga aguja hipodérmica (muy delgada), se extraen al menos 100 μL
18
KLOLTVSPUMH,ZPTWVY[HU[LX\LZPSHZWVZPIPSPKHKLZKLSSHIVYH[VYPVSVWLYTP[LUZL\[PSPJL
HSNUHU[PJVHN\SHU[LLQ!JP[YH[VKLZVKPVLUYLSHJP}U!J\`V]VS\TLUKLU[YV
de la jeringa se debe considerar antes de emitir los resultados de los conteos bacterianos
LU<-*
;HU[VLULSJHZVKLTHJLYHKVKLSHY]HZWVZ[SHY]HZOLTVSPUMHKLJHTHYVULZTH`VYLZ
(anticoagulada o no) o agua de cuerpos de agua en estudio, se deben sembrar 100
3LU\UTLKPVZ}SPKVWHYHLSHPZSHTPLU[VKLIHJ[LYPHZJ\S[P]VWYPTHYPV,Z[HZPLTIYH
W\LKLOHJLYZLLUHNHY;*):[PVZ\SMH[VJP[YH[VIPSPZZHSZHJHYVZHLSJ\HSLZ\UTLKPV
selectivo principalmente para bacterias marinas de la familia Vibrionaceae (género
Vibrio), aunque también crecen especies bacterianas de los géneros Pseudomonas,
Plesiomonas, Aeromonas, Flavobacterium y enterobacterias, entre otras. Para cultivos
WYPTHYPVZL_PZ[LUTLKPVZUVZLSLJ[P]VZLUSVZJ\HSLZJYLJLU¸IHJ[LYPHZ[V[HSLZ¹SHTH`VY
WHY[L KL SHZ IHJ[LYPHZ WYLZLU[LZ LU HN\H V LU SVZ JHTHYVULZ [HSLZ JVTV;:( HNHY
tripticasa soya) y Agar Marino.
Una vez se inoculan los 100 μL de muestra sobre el agar elegido y en condiciones
HZtW[PJHZ HTIPLU[L LZ[tYPS JVU TLJOLYVZ `V LU \UH JmTHYH KL Å\QV SHTPUHY ZL
extiende circularmente mediante el uso de un asa de Drigalski (varilla de vidrio tipo
¸Z[PJRKLOVJRL`¹+LLZ[HTHULYHZLVI[PLUL\UHKPZ[YPI\JP}UOVTVNtULHKLSPU}J\SV
Seguidamente se invierte la caja de Petri y se incuba de esta manera a una temperatura
KLo*WVYOVYHZ7HYHKL[LYTPUHYSHTVYMVSVNxHKLSHZIHJ[LYPHZX\LOHUJYLJPKV
se realiza un extendido de una colonia representativa sobre una lámina portaobjetos,
habiéndola diluido antes en solución salina estéril hasta obtener un grado de 0.5 en la
LZJHSHKL4J-HYSHUK3\LNVZLKLQHZLJHY`ZLJVSVYLHJVU[PUJP}UKL.YHT3HZIHJ[LYPHZ
del género Vibrio se observarán como bacilos Gram negativos bipolares.
,UJHZVKLX\LOH`HJYLJPTPLU[VKLIHJ[LYPHZZLKLILUJVU[HYSHZJVSVUPHZWHYHSV
cual existen métodos de observación directa (a trasluz) o utilizando un equipo especial
WHYHJVU[LVKLJVSVUPHZ3VZ]HSVYLZZLKHULU<-*"LULSJHZVKLSHY]HZVWVZ[SHY]HZ
ZLYm<-*NVWVYJHKH¸?¹UTLYVKLHUPTHSLZ,ULSJHZVKLOLTVSPUMHVKLHN\HLS
YLZ\S[HKVZLKHLU<-*T3
Si las bacterias aisladas sugieren ser la causa de una enfermedad en los camarones
(bacteriosis), se realizan pruebas de sensibilidad a antibióticos (antibiogramas), para
establecer qué productos antibacterianos comerciales son capaces de eliminar dichas
bacterias aisladas. Una vez determinado el antibiótico más efectivo, se puede realizar
una prueba para medir la concentración mínima inhibitoria (MIC) de dicho antibiótico,
JHWHaKLTH[HYSHTH`VYWHY[LKLSHZIHJ[LYPHZ,SYLZ\S[HKVKLS40*ZLYm\[PSPaHKVJVTV
referencia para la medicación de la población afectada de camarones.
19
MÉTODO DE BACTERIOLOGÍA
-PN\YH *HIPUH KL Å\QV SHTPUHY

utilizada durante la siembra de mues-
tras de camarones, agua o sedimento
en medios de cultivo, para evitar la
contaminación con bacterias presentes
LULSHTIPLU[L,UZ\WHY[LZ\WLYPVYSH
JHIPUH WVZLL \U ZPZ[LTH X\L ÄS[YH LS
HPYLX\LPUNYLZHHSmYLHKL[YHIHQV,Z-
tos equipos están dotados con entradas
de agua, gas y sistemas de vacío, así
como luz blanca y luz ultravioleta.
-PN\YH (\[VJSH]L OVYPaVU[HS

utilizado para esterilizar elementos,
materiales y reactivos que se utilizan
LU IHJ[LYPVSVNxH -\UJPVUH JVU HS[H
presión producida por vapor de agua,
lo que eleva la temperatura a 121ºC, a
la cual se exponen los materiales por
15 minutos.
20
MÉTODO DE BACTERIOLOGÍA
-PN\YH:PLTIYHPUVJ\SHJP}UKLOLTVSPUMH
anticoagulada de un camarón P. vannamei en
HNHY ;*): :L LZ[m \[PSPaHUKV \U TLJOLYV KL
alcohol cerca del medio de cultivo, para procurar
tener un ambiente estéril alrededor de la zona
KLZPLTIYH,SPU}J\SVKL3HWSPJHKVJVU
una micropipeta graduada volumétricamente,
será esparcido por todo el medio utilizando una
IHYYHTL[mSPJHLZWLJPHSWHYH[HSÄU
-PN\YH 7SH[V 7L[YP JVU HNHY ;*): LU

el cual se observa crecimiento de bacterias
Sucrosa positiva (colonias amarillas). La
muestra pertenece a hemolinfa de un camarón
P. vannamei y fue incubada durante 24 horas a
¢*,SHTHYPSSVKLSTLKPVÙV]LYKLX\LLZ
LSVYPNPUHSKLSHNHY;*):ZLKLILHSJHTIPVKL
W/WYVK\JPKVWVYLS\ZVKLSH:\JYVZHWVYWHY[L
de las bacterias predominantes.
-PN\YH *VU[HKVY KL JVSVUPHZ JVU WHU[HSSH

KPNP[HS \[PSPaHKV WHYH SH J\HU[PÄJHJP}U KL SHZ
colonias en los platos Petri donde se presentan
crecimientos bacterianos. Cada colonia procede
de una bacteria, la cual constituye una unidad
MVYTHKVYHKLJVSVUPH<-*
21
1.6 Histología
Objetivo 3H OPZ[VSVNxH LZ SH YHTH KLS ZHILY JPLU[xÄJV X\L ZL VJ\WH KLS LZ[\KPV KL
SVZ YHZNVZ TVYMVS}NPJVZ KL SVZ [LQPKVZ WVY TLKPV KL PUZ[Y\TLU[VZ HTWSPÄJHU[LZ 3H
OPZ[VWH[VSVNxHLZLU[VUJLZSHJPLUJPHX\LLZ[\KPHSHZTVKPÄJHJPVULZWH[VS}NPJHZKLSHZ
JtS\SHZ`[LQPKVZ,UJHTHYVULZLZ\UHOLYYHTPLU[HKLKPHNU}Z[PJVX\LWLYTP[LPKLU[PÄJHY
cambios a nivel celular en cortes de tejidos que han sido sometidos a procesos físicos
`[PUJPVULZY\[PUHYPHZVLZWLJPHSLZ,Z[H[tJUPJHWLYTP[LKL[LJ[HYMHJ[VYLZKLTVY[HSPKHK
bajo crecimiento, alteraciones de comportamiento y otros aspectos durante el cultivo
LU SHIVYH[VYPVZ KL SHY]PJ\S[\YH ÄUJHZ KL LUNVYKL L PUZ[HSHJPVULZ KL THK\YHJP}U KL
reproductores.
Descripción3HOPZ[VWH[VSVNxHWLYTP[LPKLU[PÄJHYLUSHTH`VYxHKLSVZJHZVZSHL[PVSVNxH
de la enfermedad de la población de camarones bajo estudio; se logra generalmente
hacer el diagnóstico de todas las enfermedades virales reportadas en camarones (por
LQLTWSVSHZJH\ZHKHZWVY0//5=;:=>::=/7=@/=)7045=`7]5=ULJYVZPZ
OLWH[VWHUJYLm[PJH5/7IHJ[LYPVZPZJY}UPJHZNYLNHYPUHZWYV[VaVHYPVZLWPJVTLUZHSLZ
nemátodos, enteritis hemocítica y necrosis muscular idiopática, entre otras enfermedades.
Para esto, se requiere que las láminas histológicas sean perfectamente preparadas y
examinadas bajo el microscopio por el ojo de un patólogo entrenado.
La autolisis es un proceso post-mortem que se presenta en los crustáceos
extremadamente rápido y que consiste en la ruptura celular, salida de enzimas y
componentes celulares, pérdida de la arquitectura de los tejidos y destrucción de los
}YNHUVZ7VYLZ[HYHa}USVZJHTHYVULZKLILUTVYPYWVYLMLJ[VKLSHPU`LJJP}UKLSÄQHKVY
y por la inmersión en el mismo, el cual debe ofrecer una rápida penetración en los
[LQPKVZ,SOLWH[VWmUJYLHZLZLS}YNHUVTmZZ\ZJLW[PISLHSHH\[VSPZPZ+\YHU[LSHÄQHJP}U
la solución debe penetrar el órgano rápidamente o los cambios post-mortem conducirán
a la pérdida de estructuras tisulares, eliminando zonas de tejido importantes para el
diagnóstico.
Si existe interés en estudiar problemas de morfología externa en camarones como
es el caso de deformidades en post-larvas o presencia de epibiontes (epicomensales)
adheridos a las branquias, también se obtienen buenos resultados si los animales son
ÄQHKVZ]P]VZWVYPUTLYZP}ULU\UHZVS\JP}UKLMVYTHSPUHHS
Metodología,SÄQHKVYKL+H]PKZVU/\THZVU LZLSTmZ\[PSPaHKV`Z\NLYPKV
para los procedimientos de rutina, cuando se van a preparar muestras de camarones
WHYHHUmSPZPZOPZ[VWH[VS}NPJV(KLTmZKLVMYLJLYI\LUUP]LSKLKL[HSSLLULSUJSLVKL
SHZ JtS\SHZ LS mJPKV HJt[PJV KLS ÄQHKVY KLZJHSJPÄJH SH J\[xJ\SH L]P[mUKVZL HZx WHZVZ
HKPJPVUHSLZ KL KLZJHSJPÄJHJP}U KLS L_VLZX\LSL[V K\YHU[L LS WYVJLZV OPZ[VS}NPJV 3H
WYLWHYHJP}UKLSÄQHKVYKL+H]PKZVUKLILYLHSPaHYZLJVUIHZLLUSHZPN\PLU[LM}YT\SH!
7HYHSP[YVKLÄQHKVYKL+H]PKZVU!
,[HUVS ! T3
-VYTHSKLOxKV ! T3
ÍJPKVHJt[PJVNSHJPHS! T3
(N\HJVYYPLU[L! T3
22
Para la realización de un estudio histológico en camarones, se requiere de un

WYVJLZV ZPZ[LTm[PJV X\L PUJS\`L ÄQHJP}U KLZOPKYH[HJP}U PUJS\ZP}U LU WHYHÄUH JVY[L
KLZLNTLU[VZ\S[YHKLSNHKVZTPJYHZKLLZWLZVY`[PUJP}U*HKHL[HWHKLtZ[HZ[PLUL
Z\ZWYVWPVZWHZVZ`[PLTWVZJ\`HÄUHSPKHKLZWYLZLY]HYLS[LQPKVSVTmZPU[HJ[VWVZPISL`
obtener láminas de óptima calidad, las cuales permitan nitidez óptica en la organización
celular de los tejidos, cuando sean estudiados bajo el microscopio.
Fijación. Corresponde a la preservación de los tejidos en las mismas condiciones
estructurales y morfológicas del momento de la muerte del camarón, lo cual como ya se
TLUJPVU}KLILZLYHJH\ZHKLSHPU`LJJP}UKLSÄQHKVY+H]PKZVU3VZJHTHYVULZKLILU
ZLYÄQHKVZ]P]VZVTVYPI\UKVZU\UJHT\LY[VZ3HÄQHJP}UWYL[LUKLKLZUH[\YHSPaHYSVZ
JVTWVULU[LZWYV[LPJVZKLSHZJtS\SHZ+\YHU[LSHÄQHJP}UZLKLILPU`LJ[HYHI\UKHU[L
ÄQHKVYKL+H]PKZVULULSOLWH[VWmUJYLHZYLZ[VKLSJLMHSV[}YH_`LULSTZJ\SV3\LNV
LSJHTHY}UZLKLILZ\TLYNPYLULSTPZTVÄQHKVYLUYLSHJP}U!]LJLZLS]VS\TLU
KLSÄQHKVYYLZWLJ[VHSKLSHT\LZ[YH,ULSJHZVKLWSZZLKLILUZ\TLYNPYKPYLJ[HTLU[LLU
LSÄQHKVY*HTHYVULZJVUTmZKLNZLKLILUZVTL[LYH\UJVY[LSH[LYHS`SVUNP[\KPUHS
KLSHJ\[xJ\SHWHYHMHJPSP[HYLSPUNYLZVKLSÄQHKVY,S[PLTWV}W[PTVKLÄQHJP}UKLWLUKL
KLS[HTH|VKLSJHTHY}UYLX\PYPtUKVZLOVYHZWHYHWVZ[SHY]HZ`Q\]LUPSLZOVYHZ
WHYHWYLHK\S[VZÒVYHZWHYHYLWYVK\J[VYLZ3\LNVKLLZ[VZ[PLTWVZLSÄQHKVYKLIL
ser sustituido completamente por etanol 70%, el cual deberá reemplazarse a los 15 días
ZPSVZJHTHYVULZHUUVOHUZPKVWYVJLZHKVZ
+LZOPKYH[HJP}ULPUJS\ZP}ULUWHYHÄUHConsiste en eliminar la mayor parte del agua
[PZ\SHY ` YLLTWSHaHYH JVU WHYHÄUH SxX\PKH :L YLHSPaH JVU \U LX\PWV H\[VTm[PJV `
WYVNYHTHISLSSHTHKV¸WYVJLZHKVYKL[LQPKVZ¹+\YHU[LLSWYVJLZVSVZ[LQPKVZWHZHUWVY
12 recipientes estando 1 hora en cada uno, los cuales contienen etanol 70% (2), etanol
L[HUVS L[HUVSHJSHYHU[L?PSVSV¸/LTV+L¹`ÄUHSTLU[L
WHYHÄUHSxX\PKHH[LTWLYH[\YHJVU[YVSHKH
Bloqueo.;LYTPUHKHSHPUJS\ZP}ULUWHYHÄUHSVZ[LQPKVZZVU\IPJHKVZLUTVSKLZTL[mSPJVZ
VWSmZ[PJVZWHYHMVYTHY\UISVX\LLSJ\HSHSLUMYPHYZLZLZVSPKPÄJHJVU[LUPLUKVLS[LQPKV
LUZ\PU[LYPVY,USHHJ[\HSPKHKL_PZ[LU¸\UPKHKLZKLISVX\LV¹X\LJVUZPZ[LULULX\PWVZ
X\LTHULQHUZPT\S[mULHTLU[LZ\WLYÄJPLZJVU]HYPHZ[LTWLYH[\YHZKPMLYLU[LZSHZJ\HSLZ
WLYTP[LU[LULYWHYHÄUHSxX\PKHZ\WLYÄJPLZKL[YHIHQVJHSPLU[LZ`WSHUJOHZJVULZJHYJOH
OPLSV W\S]LYPaHKV WHYH LS LUMYPHTPLU[V ÄUHS KL SH WHYHÄUH HS [LYTPUHY KL OHJLYZL LS
bloque. Los moldes plásticos disponibles para bloqueo, permiten además servir como
base para el montaje de los tejidos en la unidad de corte (micrótomo).
Corte.,Z[HLZSHWHY[LKLSWYVJLZVOPZ[VS}NPJVLUSHJ\HSZL\[PSPaH\ULX\PWVHS[HTLU[L
LZWLJPHSPaHKVSSHTHKV¸TPJY}[VTV¹UVTIYLKHKVKLIPKVHX\LWLYTP[LYLHSPaHYJVY[LZ
de tejido con un espesor de 1 a 15 micras. Luego de ajustar el grosor deseado en este
equipo, se realizan los cortes mediante giros de una manivela y cada vez que se le da
\UH]\LS[HLSISVX\LKLWHYHÄUHH]HUaHSHJHU[PKHKKLTPJYHZWYVNYHTHKHOHJPH\UH
J\JOPSSHJVU\UÄSV`JHSPKHKLZWLJPHSWHYHOPZ[V[LJUPH
Recuperación del corte. 3HZ [PYHZ KL WHYHÄUH X\L JVU[PLULU LS [LQPKV JVY[HKV ZVU
W\LZ[HZZVIYL\ULX\PWVSSHTHKV¸IH|VKLYLJ\WLYHJP}UKL[LQPKVZ¹LSJ\HSJVU[PLUL
agua moderadamente caliente con temperatura controlada (40-50ºC aprox.), la cual
puede contener una pequeña concentración de gelatina neutra. Las tiras se expanden
al entrar en contacto con el agua caliente y así se elige la que presente una estructura
más completa del tejido en cuestión. Separada de los segmentos no deseados mediante
el uso de un pincel delgado, la porción seleccionada es recuperada con una lámina
23
portaobjetos, en la cual quedará adherida de manera permanente y sobre la cual se hará

SH[PUJP}UÄUHS
Tinción.,UJHTHYVULZLSTt[VKVKL[PUJP}UTmZMYLJ\LU[LLZLSKL/LTH[V_PSPUHKL
4H`LY)LUUL[[`-SV_PUH,VZPUH/ ,,Z[H[PUJP}UPU]VS\JYHSHZZPN\PLU[LZZVS\JPVULZ`
YLHJ[P]VZ!/LTV+LL[HUVSHN\HKLZ[PSHKHOLTH[V_PSPUHHN\HJVYYPLU[L-SV_PUH,VZPUH
y medio de montaje. Una vez teñidas las láminas histológicas, se sellan utilizando una
gota de medio de montaje sobre el tejido y un cubreobjetos para proteger la muestra
permanentemente. Los tiempos para cada paso pueden ser consultados en Lightner,

Los colorantes (o tinciones) son sustancias químicas complejas, a menudo de
JVTWVY[HTPLU[V ]HYPHISL 7\LKLU ZLY KL \ZV NLULYHS WHYH [L|PY [HU[V UJSLV JVTV
JP[VWSHZTHVTmZLZWLJxÄJVZYLZWLJ[VHHSNUJVTWVULU[LWHY[PJ\SHY:VUZHSLZUL\[YHZ
JVUYHKPJHSLZ[HU[VmJPKVZJVTVImZPJVZ,SJVSVYHU[LLZImZPJVJ\HUKVSHWYVWPLKHKKL
[PUJP}ULZ[mLULSYHKPJHSImZPJV`SHZLZ[Y\J[\YHZX\L[P|LZLKLUVTPUHU)HZ}ÄSHZ3HZ
LZ[Y\J[\YHZIHZ}ÄSHZZVUX\xTPJHTLU[LmJPKHZ"[HSLZLSJHZVKLSVZmJPKVZU\JSLPJVZKLS
UJSLV (+5 ` SVZ JVTWVULU[LZ mJPKVZ KLS JP[VWSHZTH (95 ,S JVSVYHU[L LZ mJPKV
cuando la propiedad de tinción está en el radical ácido de la sal neutra; tal es el caso
del citoplasma y en este caso las estructuras teñidas con colorante ácido son llamadas
(JPK}ÄSHZ
3H[PUJP}U/ ,THYJH`KLÄULIPLULSUJSLVLSJP[VWSHZTH`SHTLTIYHUHJLS\SHY
WVYHÄUPKHKKLLSLJ[YVULZYLZ\S[HUKVLUSHJVSVYHJP}UHa\SVZJ\YVKLSUJSLV`SHWHYLK
de las membranas por efecto de la hematoxilina y, el citoplasma de color rosado por
efecto de la eosina. Los tejidos se tiñen para aumentar el contraste natural y hacer más
evidentes los diversos componentes celulares, tisulares y material extrínseco. Además de
]LYSHJtS\SHPUKP]PK\HSTLU[LSH[PUJP}U/ ,WLYTP[LVIZLY]HYLUJVUQ\U[VSHZJtS\SHZKL
los órganos o tejidos, ofreciendo una buena diferenciación.
,_PZ[LUV[YHZ[PUJPVULZLZWLJPHSLZX\LYLZHS[HUJPLY[HZWHY[LZKLSVZ[LQPKVZ\VYNHULSVZ
celulares, como el ácido periódico de Shiff (PAS) que resalta de rojo magenta el citoplasma
KL SHZ JtS\SHZ X\L JVU[PLULU JHYIVOPKYH[VZ TZJ\SV 7HYH [L|PY OVUNVZ KL ULNYV ZL
utiliza la tinción de Groccott ya que contienen sales de plata. Aunque las tinciones para
hongos suelen tener sales de plata, también se utilizan para detectar bacterias como
espiroquetas (Levaditi) y bacilos ácido-alcohol resistentes (Zihel-Neelsen). Otras tinciones
WHYH JHTHYVULZ PUJS\`LU SH KL .YHT IHJ[LYPHZ )YVÛ )YLUU YPJRL[[ZPHZ :[LPULY
:[LPULYLZWPYVX\L[HZ`YPJRL[[ZPHZ.PLTZHIHJ[LYPHZ>YPNO[YPJRL[[ZPHZ7PURLY[VU
(rickettsias), Kinyoun (bacterias ácido-alcohol resistentes), McManus´PAS (glicógeno y
OVUNVZ-L\SNLU(+5`;YPJYVTVKL4HZZVUJVU[YHZ[LZLZWLJPHSLZ
Montaje.,SL_JLZVKLJVSVYHU[LKLZW\tZKLSH[PUJP}UZLLSPTPUHJVUHN\HVHSJVOVS`
se deshidrata el corte con alcoholes a concentraciones crecientes, pasando después de
alcohol absoluto a una solución de agente aclarante. Posteriormente, se coloca una gota
de bálsamo de Canadá (medio de montaje) y se cubre con el cubreobjetos dejándose
ZLJHY,SJVY[LVI[LUPKVNLULYHSTLU[LKLUVTmZKLTPJYHZKLLZWLZVYLZ[HYmSPZ[VWHYH
ser observado a través de un microscopio óptico.
Lectura e interpretación. Una adecuada interpretación de un corte observado al
microscopio óptico, depende de factores como el plano del corte, la tinción utilizada y
SHPU[LYWYL[HJP}UM\UJPVUHS9LZWLJ[VHSWSHUVLZM\UKHTLU[HSYLJVUZ[Y\PYSHLZ[Y\J[\YH
tridimensional de células, tejidos y órganos a partir de cortes bidimensionales. La
tinción es también fundamental ya que debe ser elegida correctamente con base en
SHZ LZ[Y\J[\YHZ TPJYVZJ}WPJHZ X\L X\LYLTVZ LZ[\KPHY ,U J\HU[V H SH PU[LYWYL[HJP}U
24
funcional, es importante establecer las correlaciones entre estructura y función de lo

observado, tratando de transformar mentalmente las condiciones estáticas del corte en
SHZKPUmTPJHZKLSH]PKH,ZM\UKHTLU[HSWHYH\UHJVYYLJ[HPU[LYWYL[HJP}UKLOHSSHaNVZ
histopatológicos, que la observación sea hecha por un ojo entrenado en patología y, en
WHY[PJ\SHYLUSVZ[LQPKVZLZWLJxÄJVZKLSHLZWLJPLX\LZL]HHLZ[\KPHY5VLZZ\ÄJPLU[L
tener láminas preparadas con gran acierto y que ofrecen excelente calidad óptica bajo el
microscopio, si quien las examina no tienen habilidad para diferenciar tejidos sanos de
órganos o tejidos con lesiones.
Durante la preparación de los cortes histológicos, pueden presentarse alteraciones
KLUVTPUHKHZ ¸HY[LMHJ[VZ¹ SVZ J\HSLZ KLILU ZLY YLJVUVJPKVZ ` KPMLYLUJPHKVZ KL mYLHZ
conservadas de tejidos. Generalmente, se deben a errores en el empleo de sustancias
en la preparación del tejido, defectos en la cuchilla que se traducen en muescas en la
preparación, contaminación de los colorantes o, errores de montaje como pliegues.
MÉTODO DE HISTOLOGÍA
-PN\YH -PQHJP}U KL \U JHTHY}U Q\]LUPS P.

vannamei. La solución que se está inyectando
HSHUPTHSHU]P]VLZ+H]PKZVU(-(5}[LZL
el cambio de color del hepatopáncreas que pasó
de amarillo (normal) a anaranjado, por efecto
KLS ÄQHKVY S\LNV KL OHILY ZPKV PU`LJ[HKV :L
observa el uso indispensable de guantes para la
THUPW\SHJP}UKLLZ[HZVS\JP}UÄQHKVYH
-PN\YH *HIPUH WHYH L_[YHJJP}U KL NHZLZ

utilizada para la manipulación de muestras que
OHUZPKVÄQHKHZWHYHWYVJLZHTPLU[VOPZ[VS}NPJV
Se observa un vidrio de seguridad en el frente,
a través del cual se pueden ver las muestras
que se manipulan y el cual protege la cara de
ZHSWPJHK\YHZ KL YLHJ[P]VZ PYYP[HU[LZ ;HTIPtU
cuenta con fuente de agua para lavado de
elementos o partes del cuerpo en donde haya
JHxKVHSNUYLHJ[P]VOPZ[VS}NPJV
25
-PN\YH 7YVJLZHKVY KL [LQPKVZ WHYH OPZ[VSVNxH

,Z[L LX\PWV J\LU[H JVU ]HZVZ KL 3 JHKH \UV
donde se hace la deshidratación de los tejidos y se
PUJVYWVYHWHYHÄUHSxX\PKHH[LTWLYH[\YHJVU[YVSHKH
(2 vasos con termostatos, de color blanco ubicados a
SHKLYLJOH*\HUKVLZ[HZLLUMYxHKH[L_[\YHÄYTLHS
tejido y permite realizar cortes con el micrótomo sin
que se deformen por el paso de la cuchilla.
-PN\YH *LU[YHS KL ISVX\LV ,Z[H \UPKHK WVZLL

Z\WLYÄJPLZ ` JVTWHY[PTLU[VZ JVU [LTWLYH[\YHZ
JVU[YVSHKHZLSLJ[Y}UPJHTLU[L;;`;`WLYTP[L
WYLWHYHY SVZ ISVX\LZ KL WHYHÄUH JVU SVZ [LQPKVZ
PUJS\PKVZ+\YHU[LLZ[LWYVJLZVLS[LQPKVLUWHYHÄUH
es ubicado en un cassette plástico y cubierto con
WHYHÄUHSxX\PKHVI[LUPKHH[YH]tZKL\UKPZWVZP[P]V
LZWLJPHS7WHYHMVYTHY\UISVX\L,Z[LZLZVSPKPÄJH
S\LNVKLLZ[HYWVY\UVZTPU\[VZZVIYL\UHZ\WLYÄJPL
JVULZJHYJOHX\LWVZLLLSTPZTVLX\PWV,
-PN\YH*VY[LKL[LQPKVZLULSTPJY}[VTV:LVIZLY]H\U
cassette (blanco) con un corte de cefalotórax (anaranjado)
siendo montado en la base móvil de un micrótomo, antes
KLX\LZLHUJVY[HKHZSHZZLJJPVULZHTPJYHZKLNYVZVY
26
-PN\YH )H|V KL YLJ\WLYHJP}U KL [LQPKVZ

LU LS J\HS SHZ [PYHZ KL WHYHÄUH JVU [LQPKV X\L
se han obtenido con el micrótomo, son puestas
LU ÅV[HJP}U LU HN\H JHSPLU[L 3H WHYHÄUH ZL
expande con el calor y se elige el mejor corte,
capturándolo con una lámina portaobjetos y
ubicándolo sobre esta en la posición en la cual
]HHX\LKHYKLMVYTHKLÄUP[P]H
-PN\YH)H[LYxHKL[PUJP}UJVUOLTH[V_PSPUH
y eosina, en la cual se agregan los colorantes
a los tejidos para obtener el contraste entre las
diferentes células y entre las distintas partes de
JHKH \UH ,U SH MV[V ZL VIZLY]HU SVZ YLHJ[P]VZ
utilizados para la tinción de rutina, donde se
puede apreciar la canasta con láminas siendo
inmersa en eosina.
-PN\YH 3mTPUH WVY[HVIQL[VZ JVU JVY[LZ

histológicos de un camarón juvenil P. vannamei,
SVZJ\HSLZOHUZPKV[L|PKVZJVU/ ,:LVIZLY]H
un corte longitudinal de cefalotórax (C), uno
transversal de abdomen (A) y uno longitudinal
KLIYHUX\PHZ)
27
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKL\UZLNTLU[VKLS
corazón de un camarón subadulto P. vannamei.
Se observa la válvula aórtica de un animal sano
ÅLJOHZLULSS\NHYKVUKLSHOLTVSPUMHPUNYLZH
HSHHY[LYPHHVY[H(/ ,(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKLOLWH[VWmUJYLHZ
de un camarón subadulto P. vannamei. Se
VIZLY]HU [I\SVZ UVYTHSLZ JVTW\LZ[VZ WVY
diferentes tipos de células y con un lumen
en el centro. No hay evidencia de lesiones
que sugieran presencia de una enfermedad
KLNLULYH[P]H/ ,(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKLOLWH[VWmUJYLHZ
de un camarón juvenil P. vannamei, con
PUÅHTHJP}U H JH\ZH KL SH LUMLYTLKHK 5/7
Los principales hallazgos histopatológicos son
HNYLNHJP}U OLTVJx[PJH ZL]LYH PUÅHTHJP}U
TLSHUPaHJP}U KL ]HYPVZ [I\SVZ JP[VSPZPZ `
pérdida de la arquitectura de la zona afectada.
/ ,(TWSPÄJHJP}U?
28
1.7 Pruebas con anticuerpos

Objetivo. 3H WY\LIH KL ,30:( enzyme linked immunosorbant assay) es una prueba
rápida de laboratorio, en la cual un anticuerpo conocido se une a un antígeno (viral o
IHJ[LYPHUVWYLZLU[LLU\UHT\LZ[YHKLJHTHY}UJVULSÄUKLKL[LJ[HYSHWYLZLUJPHV
UVKLKPJOVHNLU[LWH[}NLUVLUSHT\LZ[YH,Z[HWY\LIHX\L\[PSPaHHU[PJ\LYWVZWHYHLS
KPHNU}Z[PJVKLLUMLYTLKHKLZLUJHTHYVULZZLSSHTHLULZWH|VS¸PUT\UVHUmSPZPZSPNHKV
HLUaPTHZ¹V[HTIPtU¸LUaPTVPUT\UVHUmSPZPZKLHKZVYJP}U¹,0(
Descripción.3H[tJUPJHKL,30:(\[PSPaHHU[PJ\LYWVZLZWLJxÄJVZWHYHSHPKLU[PÄJHJP}U
KLHU[xNLUVZ[HTIPtULZWLJxÄJVZSVZJ\HSLZZVUJVTWVULU[LZLZ[Y\J[\YHSLZ\Z\HSTLU[L
WYV[LxUHZKLHNLU[LZWH[}NLUVZVWYV[LxUHZUPJHZWYVK\JPKHZVPUK\JPKHZWVYLSSVZ
,Z[H WY\LIH WYV]LL \UH LZ[YH[LNPH KL KPHNU}Z[PJV SH J\HS LZ WV[LUJPHSTLU[L T\`
rápida (en algunos casos sólo tarda 1 hora), de buena sensibilidad y adaptable a un gran
UTLYVKLT\LZ[YHZLU\UWLX\L|VLZWHJPV[HU[VLUSHIVYH[VYPVJVTVLUJVUKPJPVULZ
KLJHTWV3HWY\LIHKL,30:(W\LKLZLYYLHSPaHKHJVUIHZLLUHU[PJ\LYWVZWVSPJSVUHSLZ
o monoclonales.
Metodología. 3H WY\LIH KL ,30:( JVTIPUH SH LZWLJPÄJPKHK KL HU[PJ\LYWVZ JVU SH
sensibilidad de pruebas enzimáticas simples, usando anticuerpos o antígenos acoplados
H\UHLUaPTHMmJPSTLU[LKL[LJ[HISL3H,30:(W\LKLWYVWVYJPVUHY\UZPZ[LTH[PSWHYHSH
TLKPJP}UKLSHJVUJLU[YHJP}UKL\UHU[xNLUVVKL\UHU[PJ\LYWV/H`KVZ]HYPHJPVULZ
WYPUJPWHSLZLULZ[LTt[VKV!SH,30:(W\LKL\ZHYZLWHYHKL[LJ[HYSHWYLZLUJPHKLHU[xNLUVZ
que son reconocidos por un anticuerpo o para detectar anticuerpos que reconocen un
antígeno.
<UH WY\LIH KL ,30:( LZ \U WYVJLKPTPLU[V X\L PU]VS\JYH JPUJV WHZVZ NLULYHSLZ!
1) cobertura de los pozos de la microplaca con el antígeno; 2) bloqueo de todos los
ZP[PVZUVJ\IPLY[VZWVYLSHU[xNLUVWHYHL]P[HYYLZ\S[HKVZMHSZVZWVZP[P]VZ"HKPJP}UKL
anticuerpos a los pozos de la microplaca; 4) adición de anticuerpos conjugados con una
enzima; 5) reacción de un substrato con la enzima para producir un producto coloreado,
PUKPJHUKVHZx\UHYLHJJP}UWVZP[P]H/H`T\JOVZ[PWVZKPMLYLU[LZKL,30:(<UVKLSVZ
[PWVZTmZJVT\ULZLZSH,30:(¸sandwich¹3HZPN\PLU[LLZSHTL[VKVSVNxHNLULYHSWHYH
YLHSPaHY \UH WY\LIH KL ,30:((SN\UVZ WHZVZ YLHJ[P]VZ ` JHU[PKHKLZ WVKYmU JHTIPHY
ZLNUZLYLX\PLYHWHYHJHKHWYV[VJVSVHZVJPHKVJVU\UHU[xNLUVLUWHY[PJ\SHY
<UH TPJYVWSHJH WHYH ,30:( ZL KLIL J\IYPY JVU LS HU[xNLUV HWYVWPHKV SSLUHUKV
los pozos con 100 μL del antígeno diluido. Se incuba toda la noche a 4ºC y se lava el
antígeno no adherido en la microplaca mediante golpes suaves. Luego se llenan los
pozos con agua destilada y se vacían de nuevo con un golpe suave; se repite esto 2 veces
TmZ\[PSPaHUKV7):;YP[}U
:LKLILISVX\LHYSH\UP}UUVLZWLJxÄJHHNYLNHUKV3KL):(7):`ZL
PUJ\IHS\LNVWVYTPU\[VZH[LTWLYH[\YHHTIPLU[L:LSH]HSHTPJYVWSHJHJVTVZL
mencionó anteriormente y se agregan 100 μL de las muestras diluidas en los respectivos
WVaVZ KL SH TPJYVWSHJH /H` X\L HZLN\YHYZL KL PUJS\PY ZPLTWYL JVU[YVSLZ WVZP[P]V
y negativo y, si es necesario, una curva estándar. Se incuba por 1 hora a temperatura
ambiente y se repite luego el paso del lavado.
Luego se prepara la dilución apropiada del segundo paso del anticuerpo conjugado
con fosfatasa alcalina o con peroxidasa de rábano (los anticuerpos deben ser titulados
para buscar obtener una dilución óptima).
Se deben agregar luego 100 μL del anticuerpo del segundo paso a los pozos y se
PUJ\IHWVYOVYH/H`X\LYLWL[PYU\L]HTLU[LLSWHZVKLSSH]HKV:LWYLWHYHSHZVS\JP}U
29
del substrato y se agregan 100 μL a los pozos, incubando luego a temperatura ambiente
WVYTPU\[VZ-PUHSTLU[LZLHNYLNHSHZVS\JP}UKLWHYHKHLUJHU[PKHKZ\ÄJPLU[L`ZL
SLLUSHZTPJYVWSHJHZLU\USLJ[VYKL,30:(
MÉTODO DE PRUEBAS CON ANTICUERPOS Y PARÁMETROS

INMUNOLÓGICOS
(ESPECTROFOTOMETRÍA)
-PN\YH 7YVJLKPTPLU[V KL ,30:( LU

TPJYVWSHJHKL WVa\LSVZ:LÄQHUHU[PJ\LYWVZ
y se agrega el antígeno complementario.
,Z[H \UP}U ZL KL[LJ[H HNYLNHUKV \U ZLN\UKV
anticuerpo contra el mismo antígeno, marcado
JVU \UH LUaPTH ,Z[H LU JVU[HJ[V JVU \U
substrato, produce color cuya intensidad es
proporcional a la cantidad de antígeno presente
LUSHT\LZ[YH-V[V!*\S[LR:3<
-PN\YH 4PJYVWSHJHZ KL ,30:( JVU

WVa\LSVZ \[PSPaHKHZ WHYH WY\LIHZ JVU
anticuerpos y en mediciones de parámetros
inmunológicos de camarones. Son montadas en
\USLJ[VYKL,30:(WHYHKL[LJ[HYWVYJVSVYPTL[YxH
la cantidad existente de un antígeno de interés.
-V[V!*\S[LR:3<
-PN\YH 3LJ[VYKLTPJYVWSHJHZKL,30:(JVU
WVa\LSVZ *VSVYxTL[YV X\L WLYTP[L OHJLY
SLJ[\YHZKLW\U[VÄUHSM\UJPVUHUKVKLTHULYH
independiente o conectado a un computador
WHYHYLNPZ[YV`HUmSPZPZKLKH[VZ;PLULJHWHJPKHK
para almacenar 100 ensayos y 20 microplacas
KLKH[VZ-V[V!*\S[LR:3<
30
4t[VKVZTVSLJ\SHYLZ
La hibridación es una de las principales metodologías que se utiliza actualmente en los
SHIVYH[VYPVZ KL IPVSVNxH TVSLJ\SHY <UHZ KL LZ[HZ [tJUPJHZ ZL OHU KPZL|HKV WHYH PKLU[PÄJHY
ZLJ\LUJPHZLZWLJxÄJHZLUSVZmJPKVZU\JSLPJVZ
3HOPIYPKHJP}UZLYLÄLYLHSHWHYLHTPLU[VLZWLJxÄJVX\LVJ\YYLLU[YLJHKLUHZKLmJPKVZ
nucleicos con secuencias complementarias, proceso que es análogo a la reacción antígeno-
anticuerpo, pero con la diferencia de que en la hibridación en lugar de anticuerpos se emplean
ZVUKHZNLUt[PJHZiZ[HZZVUMYHNTLU[VZJVY[VZKL(+5V(95ZPU[L[PaHKVZin vitro y que se
THYJHUJVUZ\Z[HUJPHZYHKPHJ[P]HZÅ\VYLZJLU[LZVKLV[YV[PWVHÄUKLOHJLYWVZPISLZ\WVZ[LYPVY
KL[LJJP}U`KLLZ[HTHULYHSHPKLU[PÄJHJP}UKLSHZLJ\LUJPHKL(+5V(95KLPU[LYtZ
,UJHTHYVULZSHZWYPUJPWHSLZ[tJUPJHZKLIPVSVNxHTVSLJ\SHY\[PSPaHKHZJVTVHWV`VWHYH
la detección de agentes patógenos en muestras de animales afectados, son: dot blot, hibridación
in situ 7*9 9;7*9 ` 7*9 LU [PLTWV YLHS YLHS[PTL 7*9 LZ[H S[PTH WYPUJPWHSTLU[L
en investigación más que en diagnóstico. De éstas, las que presentan mayor sensibilidad y
LZWLJPÄJPKHKZVUSHZYLSHJPVUHKHZJVU7*9
Dot blot
Objetivo. Detección de patógenos (ej.: virus) en una muestra de tejido de camarón, mediante
el reconocimiento de la presencia de su ADN a través de un proceso de lisis (ruptura) celular,
extracción del ADN, hibridación y revelado.
,UJHTHYVULZL_PZ[LUZVUKHZWHYHKL[LJ[HY]PY\ZJVTV>::=V0//5=`WHYHKL[LJ[HY
IHJ[LYPHZPU[YHJLS\SHYLZJVTVSHHSMH7YV[LVIHJ[LYPHJH\ZHU[LKLSH5/7
Descripción.,Sdot blot es una técnica de hibridación en la cual el ADN se ubica directamente
sobre una membrana de nylon o de nitrocelulosa. Su nombre se debe a que sobre la membrana
KVUKL ZL \IPJHU SHZ T\LZ[YHZ KLS(+5 L_[YHxKV ZL MVYTHU JxYJ\SVZ V W\U[VZ ,Z[H [tJUPJH
involucra sondas genéticas en su procedimiento, las cuales son pequeños fragmentos de ADN
(oligonucleótidos), que son complementarios de regiones que nos interesan en el ADN que
se está buscando en una muestra (ej.: virus). De esta manera, si en una muestra problema se
produce la hibridación entre la sonda y el ADN viral, se puede concluir que el virus en cuestión
se encuentra presente.
Las sondas genéticas para camarones son marcadas utilizando moléculas como la biotina
o la digoxigenina, las cuales son luego detectadas mediante enzimas como la fosfatasa alcalina,
produciendo una reacción colorimétrica y de esta manera detectable por el ojo humano. Las
ZVUKHZNLUt[PJHZZVULZWLJxÄJHZWHYH\UUPJV[PWVKLTPJYVVYNHUPZTV
,USHHJ[\HSPKHKLZMHJ[PISLJVUZLN\PYZVUKHZNLUt[PJHZLURP[ZJVTLYJPHSLZ,Z[L[PWVKL
WY\LIHLZT\`[PSJ\HUKVZLX\PLYLLZ[\KPHY\UNYHUUTLYVKLT\LZ[YHZWLYV[PLULSHSPTP[HU[L
KLUVVMYLJLYT\`HS[HZLUZPIPSPKHKHKLTmZKLX\LZ\YL]LSHKVÄUHSLZWVYJVSVYPTL[YxH
Metodología.,SWYVJLKPTPLU[VKLdot blot en camarones, inicia con una muestra de hemolinfa
o de otro tipo de tejido de un animal sospechoso de una enfermedad (ej.: virus WSSV). Cabe
YLJVYKHYX\LZLKLIL\[PSPaHY\UHZVUKHLZWLJxÄJHWHYHLS[PWVWHY[PJ\SHYKLTPJYVVYNHUPZTV
que se va a buscar.
La muestra es macerada mecánicamente con un tampón (buffer) de lisis, con lo cual
se busca romper las células y permitir la salida de las moléculas de ADN hacia la solución
del macerado. Luego, una cantidad de macerado (inferior a una gota) es puesta sobre una
TLTIYHUHKLU`SVUVKLUP[YVJLS\SVZH,S(+5LZS\LNVKLZUH[\YHKVLZKLJPYZLZLWHYHUSHZ
31
cadenas de la doble hebra y luego se coloca la sonda previamente calentada. Dicha sonda ha
ZPKVTVKPÄJHKHOHIPtUKVZLSL\UPKV\UHTVStJ\SHKLKPNV_PNLUPUH
Se incuban las muestras con la sonda y si esta encuentra regiones del ADN viral que
ZLHUJVTWSLTLU[HYPHZN\HYKHUKVLSJVUJLW[VKLJVTWSLTLU[HYPLKHKKLSVZU\JSL}[PKVZ(;
y C-G), se produce anillado o hibridación (unión entre la sonda y el ADN viral), que es una
molécula estable de ADN híbrida de doble cadena.
Luego de incubar, se realiza un lavado y se agregan anticuerpos anti-digoxigenina, que
han sido previamente marcados con la enzima fosfatasa alcalina. Si la sonda está presente
LUSHZT\LZ[YHZZLMVYTHYm\UJVTWSLQV¸HU[xNLUVHU[PJ\LYWV¹JVUSHKPNV_PNLUPUH:LOHJL
\US[PTVSH]HKV`ZLHNYLNH\UHZVS\JP}UYL]LSHKVYH)*075);SHJ\HSYLHJJPVUHJVUSH
fosfatasa alcalina y produce una reacción colorimétrica. La intensidad del color morado que se
produce, es proporcional a la cantidad de microorganismos presentes en la muestra (partículas
virales de WSSV en el caso de este ejemplo).
Hibridación in situ (HIS)

Objetivo. ,Z[LTt[VKVWLYTP[LKL[LJ[HYLS(+5V(95WYVISLTHLULSPU[LYPVYKLSHZJtS\SHZ
WLYTLHIPSPamUKVSHZKL[HSMVYTHX\LZLWLYTP[HSHLU[YHKHKL\UHZVUKH,U[YLSHZWYPUJPWHSLZ
HWSPJHJPVULZKLSH/0:LZ[mSHKL[LJJP}UKL(95V(+5KLVYPNLU]PYHSV(+5KLVYPNLU
IHJ[LYPHUVLU[LQPKVZKLJHTHYVULZÄQHKVZ`WYVJLZHKVZTLKPHU[LPUJS\ZP}ULUWHYHÄUH7VY
SV[HU[V[HTIPtULZ[PSWHYHYLHSPaHYLZ[\KPVZYL[YVZWLJ[P]VZLUTH[LYPHSKLHYJOP]VÄQHKVL
PUJS\PKVLUWHYHÄUH]HYPVZH|VZH[YmZ
Los patógenos o enfermedades en camarones que pueden ser detectados en la actualidad
TLKPHU[L/0:ZVU0//5=;:=@/=>::=`5/7
Descripción. ,Z \U Tt[VKV OPZ[VX\xTPJV X\L LTWSLH SH IPVSVNxH TVSLJ\SHY KL SH TPZTH
manera que la inmunohistoquímica utiliza los métodos de la inmunología. Al igual que en el
caso de la hibridación dot blotSHLZWLJPÄJPKHKKLSH/0:ZLIHZHLUSH\UP}UYLJxWYVJHKL\UH
ZVUKH ZLJ\LUJPH KL VSPNVU\JSL}[PKVZ JVU \U MYHNTLU[V JVTWSLTLU[HYPV KL(95 V(+5
dentro de una muestra de tejido.
A diferencia que el dot blotSH/0:\[PSPaHJVTVTH[YPa\UJVY[LOPZ[VS}NPJVKL\UJHTHY}U
WYL]PHTLU[LÄQHKV`WYVJLZHKVTLKPHU[LPUJS\ZP}ULUWHYHÄUHLSJ\HSOHZPKVHKOLYPKVHS
igual que en la histología) sobre una lámina portaobjetos, pero en este caso la lámina debe
[LULY\UHJHYNHWVZP[P]H,U]LaKLYLHSPaHYLSWYVJLZVKL[PUJP}UJVTVLUOPZ[VSVNxHZLYLHSPaH
la aplicación de la sonda y los demás componentes para la detección genómica de un agente
WH[}NLUVLZWLJxÄJV
Metodología.,SWYVJLKPTPLU[VKLOPIYPKHJP}Uin situ en camarones, se inicia a partir de un
ISVX\LKLWHYHÄUHJVU\UHT\LZ[YHKLJHTHY}UPN\HSHSX\LLZ\[PSPaHKVWHYHOPZ[VSVNxHKL
Y\[PUH,SISVX\LLZ\IPJHKVLU\UTPJY}[VTV`ZLJVY[H\UHZLJJP}UUVTH`VYHTPJYHZ
KL LZWLZVY SH J\HS KLIL ZLY YLJ\WLYHKH WVY ÅV[HJP}U LU \UH SmTPUH WVY[HVIQL[VZ JHYNHKH
positivamente.
3H SmTPUH JVU SH T\LZ[YH LU WHYHÄUH KLIL ZLY JHSLU[HKH WHYH LSPTPUHY SH WHYHÄUH `
WVZ[LYPVYTLU[L YLOPKYH[HKH \[PSPaHUKV _PSVS V HSNU Z\IZ[P[\[V L[HUVS LU JVUJLU[YHJPVULZ
KLZJLUKLU[LZ `HN\HKLZ[PSHKHÌ\MMLY;5,
3HSmTPUHZLPUJ\IHS\LNVJVUWYV[LPUHZH2LU\UHJmTHYHOTLKHZLZ\TLYQLS\LNVLU
formaldehído y se lava con un buffer. Se aplica entonces la solución de hibridación y se incuba
LUJmTHYHOTLKH:PLS(+5V(95KLSWH[}NLUVX\LZLLZ[mI\ZJHUKVZLLUJ\LU[YHWYLZLU[L
en la muestra, en este momento se realiza el anillado o hibridación que como ya se explicó en
32
la técnica de dot blot, es una unión entre la sonda y fragmentos del genoma viral o bacteriano,
que forma así una molécula estable.
7HYHSVZ]PY\Z0//5=/7=`;:=SHZVUKHZLKPS\`LLUSHZVS\JP}UKLOPIYPKHJP}U`LZ
W\LZ[HKPYLJ[HTLU[LZVIYLSHT\LZ[YH,ULSJHZVKL)74=)>::=`5/7ZLYLX\PLYLKL\U
calentamiento previo de la muestra para desnaturalizar el ADN baculoviral de doble cadena
KZ+5(3HT\LZ[YHZLKLILPUJ\IHYLUJmTHYHOTLKH[VKHSHUVJOL"WHYHLSJHZVKL0//5=
`/7=H¢*WHYH)74=)>::=5/7`;:=H¢*
Posteriormente las muestras deben ser sometidas a varios lavados con buffers distintos
y luego se aplican los anticuerpos anti-digoxigenina conjugados con fosfatasa alcalina. Se
incuban y posteriormente se hacen nuevos lavados con soluciones buffer.
Se aplica la solución de desarrollo y se frena luego la reacción cuando sea ya necesario
de acuerdo con criterios colorimétricos, lavando con soluciones buffer y después con agua
KLZ[PSHKH3HZT\LZ[YHZZLZVTL[LUS\LNVH[PUJP}UJVULSJVSVYHU[L¸Bismark Brown Y¹`ZL
KLZOPKYH[HU WVZ[LYPVYTLU[L \[PSPaHUKV L[HUVSLZ HZJLUKLU[LZ ` ` _PSVS V HSNU
substituto).
Sin dejar secar la muestra en este momento (y en ninguno de los procesos anteriores),
se pone una gota de medio de montaje sobre el tejido y se cubre con una laminilla o lámina
cubreobjetos. Se deja secar y se observa luego en un microscopio de campo oscuro, para
detectar depósitos intracelulares de precipitado negro o azul oscuro y/o alguna citopatología
LZWLJxÄJHX\LOH`HZPKVTHYJHKHWVYSHZVUKH
3HPU[LYWYL[HJP}UKLSVZYLZ\S[HKVZ]HYxHLUJHKHT\LZ[YHZLNULSWH[}NLUVX\LZLLZ[m
I\ZJHUKV ` WVY JVUZPN\PLU[L SHZ JtS\SHZ KL SVZ [LQPKVZ ¸ISHUJV¹ X\L ZL LZWLYH OH`HU ZPKV
infectados por el agente viral o bacteriano.
,ULSJHZVKLS]PY\Z;:=KLILJVUZPKLYHYZLX\L\UHTHUPW\SHJP}UPUJVYYLJ[HHU[LZKLSH
WY\LIHW\LKLHYYVQHYYLZ\S[HKVZMHSZVZULNH[P]VZ(KPJPVUHSTLU[LSHZT\LZ[YHZWHYH;:=KLILU
ZLYTHULQHKHZLUHTIPLU[LZ`JVUYLHJ[P]VZSPIYLZKL95(ZHZ"LSWLYZVUHSKLILZLYLU[YLUHKV
LULSTHULQVKLT\LZ[YHZJVUWH[}NLUVZJ\`VNLUVTHLZ(95`LULZ[L[PWVKLHTIPLU[LZ
SPIYLZKL95(ZHZ
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Objetivo.3HYLHJJP}ULUJHKLUHKLSHWVSPTLYHZH7*9WVYZ\ZZPNSHZLUPUNStZpolymerase
chain reactionLZ\UTt[VKVLUaPTm[PJVKLHTWSPÄJHJP}UKLZLJ\LUJPHZLZWLJxÄJHZKL(+5
que permite la síntesis in vitro de un fragmento de ADN de forma tal que, en cada ciclo del
WYVJLZV ZL K\WSPJH LS UTLYV KL TVStJ\SHZ +L LZ[H THULYH ZL \[PSPaH WHYH SH KL[LJJP}U
NLU}TPJH KL JPLY[VZ TPJYVVYNHUPZTVZ WH[}NLUVZ JVTV ]PY\Z (+5 `(95 ` IHJ[LYPHZ LU
muestras de camarones o de organismos relacionados.
3H7*9LZ\[PSPaHKHLUJHTHYVULZWHYHSHKL[LJJP}UKLSVZ]PY\Z>::=0//5=)74)=
:4=@/=NY\WV045=;:=`7]5=
Descripción.,SWYPUJPWPVKLSH7*9JVUZPZ[LLUKL[LYTPUHYSHZLJ\LUJPHKLPU[LYtZ`ZLSLJJPVUHY
WLX\L|VZZLNTLU[VZKLU\JSL}[PKVZSSHTHKVZPUPJPHKVYLZVJLIHKVYLZ¸primers¹LU0UNStZ
complementarios con la secuencia de nucleótidos de los extremos opuestos de las cadenas que
ÅHUX\LHUHKPJOHZLJ\LUJPHHWHY[PYKLSVZJ\HSLZZLPUPJPHSHLSVUNHJP}UVZxU[LZPZKLU\L]HZ
JHKLUHZLULSL_[YLTV»KLJHKHPUPJPHKVY
3H7*9ZLYLHSPaHLUMVYTHKLJPJSVZ*HKHJPJSVK\WSPJHSHJHU[PKHKKL(+5WVYSVX\L
permite obtener hasta un millón de copias de un solo fragmento en pocas horas. Los elementos
necesarios para llevarla a cabo se comercializan en forma de kits.
33
,U LZ[H [tJUPJH ZL JVUZPKLYHU PTWVY[HU[LZ SVZ ZPN\PLU[LZ WHYmTL[YVZ! \U Z\TPUPZ[YV
HI\UKHU[LKLPUPJPHKVYLZ`KLKLZV_PU\JSL}[PKVZ[YPMVZMH[HKVZK5;7Z"\UHM\LU[LYLUV]HKH
de ADN polimerasa (enzima encargada de la síntesis de las cadenas complementarias) y los
JPJSVZWLYP}KPJVZKLJHTIPVZKL[LTWLYH[\YH,Z[VZS[PTVZJVUZPZ[LULU!KLZUH[\YHSPaHJP}UKLS
(+5H¢*HSPULHTPLU[VKLSVZPUPJPHKVYLZJVUSHZZLJ\LUJPHZKLPU[LYtZLU[YL`¢*`
ZxU[LZPZKLS(+5H¢*,Z[HZ[LTWLYH[\YHZW\LKLU]HYPHYKLHJ\LYKVJVUSHZJVUKPJPVULZKL
la reacción.
,SWVKLYKLSHHTWSPÄJHJP}UJVU7*9LZ[HUHS[VX\LSVZTmZWLX\L|VZJVU[HTPUHU[LZ
pueden dar resultados falsos positivos, por lo que el material y las soluciones a emplear deben
ser muy cuidadosamente manipulados y almacenados.
Metodología. La reacción en cadena de la polimerasa imita el fenómeno de replicación del
(+5X\LVJ\YYLKLMVYTHUH[\YHSLUSHZJtS\SHZ]P]HZ,S(+5LZKLKVISLJHKLUHLZKLJPY
cada cadena de ADN está apareada con otra complementaria). Durante la replicación, las dos
cadenas se separan y una enzima especializada llamada polimerasa, hace una copia de cada
una de las cadenas, utilizando la original como plantilla o modelo. Normalmente este proceso
de copia tiene lugar cuando la célula se divide y da lugar a la formación de un par de cadenas
hijas.
3HWVSPTLYHZHULJLZP[HV[YVZ[YLZPUNYLKPLU[LZWHYHJVWPHY(+5,SWYPTLYVLZ\UHYLZLY]H
de los cuatro bloques básicos que constituyen la molécula de ADN, llamados nucleótidos o
IHZLZ,SZLN\UKVLZ\UHÄIYHJVY[HKL(+5JVWPHKVX\LZLSSHTHJLIHKVYVSPNVU\JSLV[xKPJV
V WYPTLY LS J\HS LZ[m MVYTHKV WVY ]HYPVZ U\JSL}[PKVZ X\L PUPJPHU SH YLWSPJHJP}U ,S [LYJLYV
es el cofactor MgCl2ZPULSJ\HSSHLUaPTHUVW\LKLM\UJPVUHY3H7*9\[PSPaHLZ[VZTPZTVZ
ingredientes para copiar ADN en un microtubo de ensayo.
La reacción tiene lugar en tres fases. Durante la primera o desnaturalización, la plantilla
V MYHNTLU[V VYPNPUHS KL (+5 ZL JHSPLU[H OHZ[H \UH [LTWLYH[\YH KL H ¢* K\YHU[L
ZLN\UKVZ"LZ[VWYV]VJHSHZLWHYHJP}UKLSHZKVZJHKLUHZ,USHZLN\UKHMHZLSSHTHKHHUPSSHQL
la temperatura de la mezcla se baja hasta 55ºC durante 20 segundos para que los cebadores
VSPNVU\JSLV[xKPJVZZLLUSHJLUJVULS(+5LZJPUKPKV,USH[LYJLYHMHZLVKLWVSPTLYPaHJP}U
la temperatura de la mezcla se eleva hasta 75°C para que la polimerasa copie rápidamente la
molécula de ADN.
,Z[HZ[YLZMHZLZ[PLULUS\NHYLULSTPZTV[\IVKLYLHJJP}U`JVUZ[P[\`LU\UJPJSVJVTWSL[V
KL7*9X\LZLYLHSPaHLUTLUVZKLKVZTPU\[VZ;L}YPJHTLU[LLSJPJSVKL7*9ZLW\LKLYLWL[PY
sin límite, pero la polimerasa, los nucleótidos y los cebadores, deben renovarse al cabo de unos
JPJSVZ,Z[VZJPJSVZX\LK\YHUTLUVZKL[YLZOVYHZIHZ[HUWHYHWYVK\JPYTPSSVULZKL
copias de ADN.
*\HUKVSHT\LZ[YHJVU[PLUL\UHNLU[LWH[}NLUVJ\`VNLUVTHLZ(95ZLKLIL\[PSPaHY
HU[LZ KL SH 7*9 \U WHZV HKPJPVUHS *VUZPZ[L LU HKPJPVUHY H SH T\LZ[YH (95 L_[YHxKV \UH
LUaPTH SSHTHKH [YHUZJYPW[HZH YL]LYZH SH J\HS [YHUZJYPIL LS 95( LU (+5 JVTWSLTLU[HYPV
(cDNA), molécula que es un ADN de doble cadena y, por consiguiente, susceptible de ser
HTWSPÄJHKHTLKPHU[L\UHYLHJJP}UUVYTHSKL7*9,Z[LWYVJLZVLUaPTm[PJVX\LZLYLX\PLYL
WHYHSVZ]PY\Z(95OHOLJOVX\LSH7*9X\LSV\[PSPaHZLSSHTL¸7*9JVU[YHUZJYPW[HZHYL]LYZH¹
9;7*9
La polimerasa utilizada actualmente es termoestable, no se inactiva por las elevadas
[LTWLYH[\YHZ KL SH WYPTLYH YLHJJP}U ` LZ SSHTHKH;HX KLIPKV H X\L WYV]PLUL KL Thermus
aquaticus\UHIHJ[LYPH[LYT}ÄSH+LIPKVHX\LSHWVSPTLYHZH;HXUVYLZ\S[HKLZ[Y\PKHWVYSHZ
LSL]HKHZ[LTWLYH[\YHZHSHZX\L[YHUZJ\YYLSH7*9IHZ[HJVUH|HKPYSH\UH]LaHSWYPUJPWPVKLSH
YLHJJP}U3HWVSPTLYHZH;HXZLMHIYPJHHOVYHJVUIHJ[LYPHZTVKPÄJHKHZNLUt[PJHTLU[L
34
,S\ZVKLSH7*9L_PNLT\JOVJ\PKHKV3VTmZPTWVY[HU[LLZL]P[HYSHJVU[HTPUHJP}UKLSH
TLaJSHYLHJ[P]H,Z[HUZLUZPISLX\LWLYTP[LT\S[PWSPJHYHJJPKLU[HSTLU[LJHU[PKHKLZTxUPTHZ
de ADN contaminante. Se utilizan procedimientos especiales para evitar la contaminación.
PCR en tiempo real (real time PCR, Q-PCR)

Objetivo. 3HWY\LIHKL7*9LU[PLTWVYLHSZL\[PSPaHWHYHKL[LYTPUHYSHJHU[PKHKKL(+5LU
[PLTWVYLHSK\YHU[LLSWYVJLZVKLHTWSPÄJHJP}U\ZHUKVZVUKHZTHYJHKHZÅ\VYLZJLU[LZ
Descripción.,UIPVSVNxHTVSLJ\SHYSHYLHJJP}ULUJHKLUHKLSHWVSPTLYHZHLU[PLTWVYLHS
[HTIPtULZSSHTHKHSHYLHJJP}ULUJHKLUHLU[PLTWVYLHSJ\HU[P[H[P]HKLSHWVSPTLYHZH89;
7*9VYLHJJP}ULUJHKLUHJPUt[PJHKLSHWVSPTLYHZH
3H7*9LU[PLTWVYLHSLZ\UH[tJUPJHKLSHIVYH[VYPVX\LWLYTP[LJ\HU[PÄJHY`HTWSPÄJHY
ZPT\S[mULHTLU[L\UHWHY[LLZWLJxÄJHKL\UHTVStJ\SHKHKHKL(+5V(95:L\[PSPaHWHYH
KL[LYTPUHYZP\UHZLJ\LUJPHLZWLJxÄJHLZ[mVUVWYLZLU[LLU\UHT\LZ[YH"ZPLZ[mWYLZLU[LSH
[tJUPJHWLYTP[LJVUVJLYLSUTLYVKLJVWPHZLUSHT\LZ[YH,ZSH]LYZP}ULU[PLTWVYLHSKLSH
YLHJJP}ULUJHKLUHJ\HU[P[H[P]HKLSHWVSPTLYHZH87*9HZxJVTV\UHTVKPÄJHJP}UKLSH
tradicional reacción en cadena de la polimerasa.
Para llevar a cabo la detección en tiempo real de un genoma de interés, existen varios
métodos pero casi todos basados en la utilización de otro fragmento de ADN (sonda)
JVTWSLTLU[HYPVH\UHWHY[LPU[LYUHKLS(+5X\LX\LYLTVZHTWSPÄJHY,Z[HZVUKHSSL]HHKOLYPKH
\UHTVStJ\SHÅ\VYLZJLU[L`V[YHTVStJ\SHX\LPUOPILLZ[HÅ\VYLZJLUJPH¸X\LUJOLY¹KL[HS
forma que sólo cuando la sonda es desplazada de su sitio por acción de la ADN polimerasa,
SH TVStJ\SH Å\VYLZJLU[L ZL SPILYH KL SH HJJP}U KLS ¸quencher¹ ` LTP[L Å\VYLZJLUJPH HS ZLY
PS\TPUHKHJVU\USmZLY3HJ\HU[PÄJHJP}UKLSHÅ\VYLZJLUJPHLTP[PKHK\YHU[LJHKHJPJSVKLSH
7*9ZLYmWYVWVYJPVUHSHSHJHU[PKHKKL(+5X\LZLLZ[mHTWSPÄJHUKV,UNLULYHSWHYHX\LZLH
válida esta técnica, requiere realizar en paralelo una curva patrón en las mismas condiciones,
WHYHJVUVJLYSHJHU[PKHK[V[HSKL(+5X\LZLLZ[mHTWSPÄJHUKV
3HZKPMLYLU[LZMVYTHZKLKL[LJJP}UKLSH7*9LU[PLTWVYLHSJVTV;HX4HUV¸4VSLJ\SHY
)LHJVU¹ZLOHU]\LS[VOLYYHTPLU[HZWVW\SHYLZWHYHSHKL[LJJP}UKLHNLU[LZPUMLJJPVZVZ,Z[HZ
U\L]HZWY\LIHZ[PLULU]HYPHZ]LU[HQHZZVIYLSHZ7*9JSmZPJHZ\UWHZVVHUPKHKHZWHZVZ:}SVLZ
utilizado un par de iniciadores (primers), los cuales proporcionan con frecuencia una sensibilidad
ZPTPSHYVPN\HSHSHKL7*9HUPKHKHWLYVJVU\UT\JOVTLUVYYPLZNVKLJVU[HTPUHJP}U3H
Å\VYLZJLUJPHX\LPUKPJHSHWYLZLUJPHKLSWYVK\J[VHTWSPÄJHKVLZTLKPKHLULSTPZTV[\IVKL
YLHJJP}UWVYSVX\LUVLZULJLZHYPHSHTHUPW\SHJP}UWVZ[7*9KLSVZWYVK\J[VZHTWSPÄJHKVZ
3HSLJ[\YHKLSHÅ\VYLZJLUJPHLZH\[VTH[PaHKHWVYSVX\LZLL]P[HUYLZ\S[HKVZZ\IQL[P]VZ,Z[VZ
procedimientos consumen una cantidad de tiempo considerablemente menor comparados
JVUSH7*9[YHKPJPVUHS`HX\LUVLZULJLZHYPVKL[LJ[HYLSMYHNTLU[VHTWSPÄJHKVTLKPHU[L
electroforesis en geles de agarosa, seguidos por la tinción con bromuro de etidio y, de nuevo,
LSYPLZNVKLJVU[HTPUHJP}ULZYLK\JPKV,S\ZVKL\UMVYTH[VKLIHUKLQHJVU WVa\LSVZZPU
ULJLZPKHKKLOHJLY\UH7*9HUPKHKHWLYTP[LX\LLSWYVJLKPTPLU[VZLHH\[VTH[PaHKV
Metodología. 3VZ LX\PWVZ YLX\LYPKVZ WHYH YLHSPaHY \UH 7*9 LU [PLTWV YLHS ZVU KL MVYTH
JVTIPUHKH\U[LYTVJPJSHKVY\UÅ\VY}TL[YV`\UTVUP[VY,S[LYTVJPJSHKVYLMLJ[HSH7*9
LU T\LZ[YHZ X\L JVU[PLULU Å\VYVJYVTV Å\VYLZJLU[L WYVWVYJPVUHS H SH JHU[PKHK KL +5(
cantidad que dobla de ciclo en ciclo. Un rayo láser excitador es transmitido a la muestra por
\UHÄIYH}W[PJH3HLTPZP}UÅ\VYLZJLU[LPUK\JPKHLZLU]PHKHHSÅ\VY}TL[YVX\LSHHUHSPaHH
KPMLYLU[LZSVUNP[\KLZKLVUKH(TLU\KVSHTPZTHÄIYH[YHUZTP[LLSYH`VL_JP[HKVY`YLJPIL
SHÅ\VYLZJLUJPH,STVUP[VYPUKPJHKLZW\tZKLJHKHJPJSVSHÅ\VYLZJLUJPHSLxKHKLU[YVKLSH
longitud de onda elegida para la muestra.
35
A partir de este momento, la señal dobla de ciclo en ciclo. Se observará aparecer en el

JVTW\[HKVY \UH J\Y]H JYLJPLU[L `H X\L SH Å\VYLZJLUJPH KL JHKH [\IV LZ TLKPKH LU JHKH
JPJSV,SUTLYVKLJPJSVZHWHY[PYKLSJ\HSSHJ\Y]HJVTPLUaHHJYLJLYLZWYVWVYJPVUHSHSH
concentración inicial de ADN.
PRUEBAS MOLECULARES - DOT BLOT
-PN\YH 9LZ\S[HKVZ KL \UH WY\LIH KL KV[ ISV[ WHYH
WSSV sobre una membrana de nitrocelulosa. Cada cuadro
pequeño (1 cm2) corresponde a un camarón. La intensidad
de la mancha morada en cada cuadro, es proporcional a
la cantidad de ADN viral presente en las células analizadas
KL JHKH JHTHY}U ,U LZ[H TLTIYHUH ZL W\LKLU VIZLY]HY
muestras con severidad baja (círculo amarillo), media (círculo
Ha\S ` HS[H JxYJ\SV YVQV ,U SH WHY[L PUMLYPVY JLU[YV ZL
VIZLY]HUSVZYLZ\S[HKVZKLSJVU[YVSJVUJ\HKYVZZPLUKVKL
PaX\PLYKHHKLYLJOH¸ULNH[P]V¹H\ZLUJPHKLJVSVYWVZP[P]V
SL]L\UH¸¹JVSVYTVYHKV[LU\L`WVZP[P]VTmZM\LY[LKVZ
¸¹`JVSVYTVYHKVTmZPU[LUZV
PRUEBAS MOLECULARES - HIBRIDACIÓN IN SITU
-PN\YH*VY[LKL[LQPKVKLLWP[LSPVJ\[PJ\SHY
de estómago de un camarón juvenil P. vannamei
infectado con el virus WSSV. La sonda reaccionó
fuertemente con el ADN viral presente en los
cuerpos de inclusión intranucleares, mediante
la prueba de hibridación in situ utilizando una
sonda de ADN marcada con digoxigenina. La
coloración obtenida es producto de la reacción
LU[YL SH ZVUKH THYJHKH ` )PZTHYR )YVÛ
(TWSPÄJHJP}U! ? TVKPÄJHKH KL 3PNO[ULY

36
PRUEBAS MOLECULARES – PCR
-PN\YH7YVJLKPTPLU[VKLL_[YHJJP}UKL(+5TLKPHU[LSH -PN\YH*mTHYHKL[YHIHQVWHYH7*9+LU[YVKLLSSHJPYJ\SH
utilización de un kit comercial con base en soluciones de lisis HPYL\S[YHÄS[YHKV`ZL\[PSPaHWHYHSHWYLWHYHJP}UKLSVZYLHJ[P]VZ
celular. Nótese el uso de puntas de micropipeta protegidas con X\L ZL \[PSPaHYmU LU SHZ WY\LIHZ KL HTWSPÄJHJP}U 7*9 3VZ
\U ÄS[YV ISHUJV LU Z\ IHZL WHYH L]P[HY SH JVU[HTPUHJP}U KL elementos que se utilizan dentro de la cámara, no deben salir
la micropipeta y el paso de ADN viral de una muestra a otra KLSHTPZTH`KLILULZ[HYTHYJHKVZZLNUZLHU\[PSPaHKVZLU
(contaminación cruzada). diferentes tipos de muestras o para diferentes tipos de agentes
patógenos.
-PN\YH *mTHYH KL LSLJ[YVMVYLZPZ PaX\PLYKH ` M\LU[L

de poder (derecha), que permiten la migración del ADN
HTWSPÄJHKVLU\UNLSKLHNHYVZH`TLKPHU[L\UÅ\QVLStJ[YPJV
continuo. Después de este proceso, las muestras migradas
en el gel, están listas para ser observadas en un visor de luz
\S[YH]PVSL[H¸[YHUZPS\TPUHKVY\]¹
-PN\YH ;LYTVJPJSHKVY ¸HWHYH[V KL 7*9¹ JVU WVaVZ

WHYHPN\HSUTLYVKL[\IVZKLT3,ULZ[LLX\PWVZLYLHSPaH
WYVWPHTLU[LSH7*9KLU[YVKLSVZ[\IVZX\LJVU[LUNHULS(+5
KL SH T\LZ[YH ` SVZ YLHJ[P]VZ KL HTWSPÄJHJP}U :\ M\UJP}U LZ
realizar mediante un comando computarizado programable,
muchos ciclos a diferentes temperaturas y con diferentes
tiempos.
37
PRUEBAS MOLECULARES – PCR
-PN\YH ;YHUZPS\TPUHKVY KL S\a \S[YH]PVSL[H \[PSPaHKV -PN\YH .LS KL HNHYVZH JVU WYVK\J[VZ KL HTWSPÄJHJP}U
para revelar la presencia de bandas de ADN, producto de la KL (+5 VI[LUPKVZ TLKPHU[L 7*9 ]PZ[VZ H [YH]tZ KL \U
HTWSPÄJHJP}U WVY 7*9 ` X\L TPNYHYVU LU \UH JmTHYH KL transiluminador de luz ultravioleta. La columna de la izquierda
LSLJ[YVMVYLZPZ 3H [HWH X\L ZL VIZLY]H JVSVY WYW\YH WVZLL posee un marcador de peso molecular; las columnas siguientes
\U ÄS[YV X\L WYV[LNL HS VWLYHYPV KL SH S\a \] 5}[LZL LS \ZV H WVZLLU T\LZ[YHZ X\L M\LYVU HTWSPÄJHKHZ 3HZ IHUKHZ
de guantes por parte del operario, mientras manipula el gel de blancas que se observan en éstas, corresponden a resultados
agarosa para ser puesto sobre el transiluminador. WVZP[P]VZLUSHIZX\LKHKL\UHNLU[LWH[}NLUVKL\UHT\LZ[YH
TLKPHU[L7*9
PRUEBAS MOLECULARES – PCR EN TIEMPO REAL
-PN\YH =PZ[H WHUVYmTPJH KL SVZ LX\PWVZ \[PSPaHKVZ WHYH

YLHSPaHY SH WY\LIH KL 7*9 LU [PLTWV YLHS ( SH PaX\PLYKH ZL
LUJ\LU[YHLST}K\SV[tYTPJVVLX\PWVKL7*9LU[PLTWVYLHS
(termociclador); a su derecha una fuente de poder, luego una
CPU para el procesamiento de los datos suministrados por
el termociclador y a la derecha el módulo de visualización
(monitor) para la observación de los resultados que se van
obteniendo en cada ciclo y en tiempo real.
-PN\YH ;LYTVJPJSHKVY\[PSPaHKVWHYHSHWY\LIHKL7*9LU
tiempo real. Se observa un panel de control con comandos
(botones) verdes y azules para la programación del equipo,
así como una pequeña pantalla para visualizar la información
correspondiente a la programación y al avance de los ciclos de
HTWSPÄJHJP}U`J\HU[PÄJHJP}U
-PN\YH=PZ\HSPaHJP}UKL\UHNYmÄJHJVUKH[VZKLWYVK\J[VZ
HTWSPÄJHKVZ K\YHU[L \UH WY\LIH KL 7*9 LU [PLTWV YLHS
Cada línea de color corresponde a una muestra analizada y al
control utilizado. La columna de la derecha indica la cantidad
aproximada de copias de ADN que se encuentra en cada
muestra.
38
1.9 Parámetros inmunológicos

,Z[L[LTHZLYm[YH[HKVJVUTH`VYWYVM\UKPKHKLULSW\U[V¸¹WHYHTL[YVZOLTH[V
PUT\UVS}NPJVZ JVTV PUKPJHKVYLZ KL ZHS\K KLS *HWx[\SV ¸0UT\UVSVNxH¹ 7VY LZ[H
razón, sólo se hará en éste capítulo una mención general de las principales técnicas
inmunológicas, como herramientas para el diagnóstico de enfermedades en camarones.
La medición de algunos parámetros inmunológicos en los camarones, permite
evaluar y determinar en un momento dado, las condiciones sanitarias de un grupo
KLHUPTHSLZVKL\UHWVISHJP}ULU\UZPZ[LTHJVTLYJPHSKLJ\S[P]V,Z[VZWHYmTL[YVZ
están relacionados con la capacidad de respuesta inmune de los organismos, frente a
la invasión de agentes bioagresores (virus, bacterias y hongos), o elementos inertes que
entran en contacto con los animales.
Los principales parámetros inmunes de los camarones que se pueden medir en la
hemolinfa, son los siguientes:
Hemograma: los hemocitos constituyen la barrera celular del sistema inmune, que
KLÄLUKL HS JHTHY}U KL HNYLZVYLZ X\L PUNYLZHU HS VYNHUPZTV WHYH JH\ZHY PUMLJJP}U
JLS\SHY ` WVZ[LYPVYTLU[L LUMLYTLKHK ,S OLTVNYHTH JVUZPZ[L LU YLHSPaHY \U JVU[LV
total o diferencial de los hemocitos en la hemolinfa, para establecer una relación entre
los valores obtenidos y las condiciones de salud de los camarones examinados (o de
sus poblaciones de origen). Para realizar un hemograma, se extrae hemolinfa con un
HU[PJVHN\SHU[LWYV[LJ[VYKLOLTVJP[VZWVYLQLTWSVZVS\JP}UKL(SZL]LY(:V¸:::¹
JVU[LUPLUKV\UHJVUJLU[YHJP}UKL5H*SHWYVWPHKHWHYHHUPTHSLZTHYPUVZKLH
T45H*SVZPTWSLTLU[L\UHZVS\JP}UKLJP[YH[VKLZVKPVVKL,+;(`ZLTVU[HZVIYL
\UHJmTHYHKL5L\IH\LYWHYHYLHSPaHYLSJVU[LV,S]HSVYÄUHSKLILPUJS\PYSVZJmSJ\SVZ
correspondientes a la dilución con el anticoagulante y la profundidad y área de la
cámara utilizada. Los resultados se dan en hemocitos (totales, granulares, semigranulares
o hialinos) por cada mm de hemolinfa. Los valores promedio de hemocitos totales/
mm más frecuentes en camarones preadultos sanos, se encuentran entre 25.000 y
*VTVZLTLUJPVUHYmTmZHKLSHU[LKLILU[LULYZLLUJ\LU[HSHZJVUKPJPVULZ
propias del camarón (muda, sexo y edad) y del medio de cultivo (temperatura, salinidad
y oxígeno disuelto, entre otras), ya que éstas afectan los valores obtenidos en los conteos
de hemocitos.
Concentración de proteínas plasmáticas: este parámetro es utilizado para evaluar el
LZ[HKVZHUP[HYPVKLSVZJHTHYVULZ:PULTIHYNVLU[YLLS`LS KLSHZWYV[LxUHZ
plasmáticas totales está compuesto por hemocianina (pigmento extracelular que
transporta el oxígeno a los tejidos del camarón). Por esta razón, cambios importantes
en la concentración de la hemocianina, afectan directamente los valores obtenidos para
proteínas plasmáticas. Adicionalmente, la concentración de las proteínas plasmáticas
W\LKL ]LYZL PUÅ\LUJPHKH WVY JVUKPJPVULZ KL [PWV PUMLJJPVZV HTIPLU[HS V ÄZPVS}NPJV
Cuando el camarón está infectado, puede haber una lisis celular y destrucción de
sus tejidos afectados, lo que genera un aumento en la concentración proteica de la
OLTVSPUMH;VKVSVHU[LYPVYZ\NPLYLX\LKLILUYLHSPaHYZLLZ[\KPVZTmZWYVM\UKVZWHYH
poder utilizar este parámetro inmunológico como un verdadero criterio para conocer el
estado sanitario de los camarones. Para determinar las proteínas plasmáticas totales en
una muestra de hemolinfa de camarón, se pueden utilizar métodos de rutina como el de
3V^Y`)P\YL[V)YHKMVYK
De manera general, el nivel de proteínas plasmáticas totales en camarones, se
determina a partir de muestras de suero. Luego de extraer la hemolinfa, se deja coagular
a 4ºC por al menos 12 horas y luego se centrifuga para recuperar el suero. Se agrega un
39
volumen de suero a una microplaca y se hace reaccionar con el reactivo del método
utilizado. De esta manera se obtiene la formación de un complejo coloreado el cual
LZTLKPKVJVU\USLJ[VYKLTPJYVWSHJHZ\[PSPaHUKV\UÄS[YVJVU\UHSVUNP[\KKLVUKH
KL[LYTPUHKH WHYH JHKH Tt[VKV LQ! UT WHYH )P\YL[ -PUHSTLU[L ZL L_[YHWVSH SH
concentración de proteínas totales en el plasma de la muestra, a partir de una curva de
calibración con una solución stockKL):(LZ[mUKHYTNT3
Capacidad de hemoaglutinación: con este método es posible determinar las condiciones
sanitarias de los camarones, mediante la medición de la capacidad de las proteínas
KL YLJVUVJPTPLU[V KL WH[YVULZ 797Z LZWLJPHSTLU[L SHZ KL YLJVUVJPTPLU[V KL
lipopolisacáridos), presentes de manera natural en la hemolinfa. Sus funciones incluyen
reconocer y aglutinar cuerpos invasores. Por comodidad, se usan en los ensayos eritrocitos
de diferentes mamíferos, por ser células extrañas al camarón y, sobretodo, por ser células
JVUJVSVYHJP}UUH[\YHSMHJPSP[HUKVHZxSHVIZLY]HJP}UHZPTWSL]PZ[HKLSHYLHJJP}U,S
estudio de estas proteínas y sus mecanismos de reconocimiento, comienza a ser una
herramienta muy potente para las estrategias de selección de animales genéticamente
resistentes a enfermedades. La actividad hemoaglutinante de la hemolinfa, podría
constituirse en un indicador de salud y de adaptación del camarón, ya que por ejemplo
existe una relación directa entre los títulos de hemoaglutinación y la calidad reproductiva
de los machos (índice de espermatogénesis). Igualmente, la sensibilidad de la actividad
hemoaglutinante ante el estrés, demuestra que los títulos de hemoaglutinación pueden
ser usados tanto como indicadores sanitarios, como de adaptación de los animales a sus
condiciones de vida. La prueba de hemoaglutinación se realiza utilizando eritrocitos
humanos o de otros mamíferos (principalmente de roedores que son particularmente
YLJVUVJPKVZWVYSHZHNS\[PUPUHZKLJHTHY}ULUTPJYVWSHJHZKL WVa\LSVZJVUMVUKV
LUMVYTHKL¸<¹`LUWYLZLUJPHKLZ\LYV:LKL[LYTPUHHZx]PZ\HSTLU[LSHWYLZLUJPHKL
aglutinación y el título aglutinante. Cuanto mayor es el título, mayor será la cantidad de
797LUSHOLTVSPUMHKLSJHTHY}U
Actividad de la fenoloxidasa: la enzima fenoloxidasa (PO por sus siglas en Inglés), se
LUJ\LU[YH JVUÄUHKH LU LS PU[LYPVY KL SVZ OLTVJP[VZ KLS JHTHY}U ` Q\LNH \U WHWLS
crucial en la cascada inmunológica que se activa cuando es reconocida una substancia
como cuerpo extraño (antígeno). La PO se encuentra en forma de enzima inactiva
aPT}NLUVSSHTHKHWYVMLUVSV_PKHZHWYV76,UJVUKPJPVULZKLPUMLJJP}ULZ[HLUaPTH
inactiva es exocitada de los hemocitos hacia el plasma del camarón y es convertida en
76TLKPHU[LLSLMLJ[VKLSH,UaPTH(J[P]HKVYHKLSHWYV76(,WYV76SHJ\HSLZ\UH
serin-proteasa. Las reacciones que culminan con la transformación de proPO en PO y
con la subsecuente melanización, son consideradas como un componente que integra
SVZTLJHUPZTVZKLYLJVUVJPTPLU[V`KLKLMLUZHKLSVZJY\Z[mJLVZ,UWY\LIHZOLJOHZ
in vitro, se ha observado que el paso de proPO a PO se produce incubando la muestra
JVU;YPWZPUHZLYPUWYV[LHZHJVTLYJPHS3HHJ[P]PKHK[V[HSKLSH76ZLTPKL\[PSPaHUKV
L-DOPA como sustrato. La determinación de la actividad de la PO, permite tener una idea
de la capacidad de respuesta inmune de un camarón, frente a la presencia de agentes
patógenos en el organismo. Para su medición, se parte de la reacción en la que se utiliza
suero de los camarones o un lisado de sus hemocitos, que son la fuente de la enzima PO
`ZLPUJ\IHJVUSH3+67(`[YPWZPUHHJ[P]HKVYKLWYV76,UWYLZLUJPHKLV_xNLUVZL
MVYTH\UJVTW\LZ[VJVSVYPKVYVQVJVYHSX\LWYLZLU[HZ\Tm_PTHHIZVYIHUJPHH
nm y puede ser detectada espectrofotométricamente con un lector de microplacas.
Actividad antibacteriana de los hemocitos por la producción de intermediarios reactivos
de oxígeno (fagocitosis): en condiciones normales, las células fagocíticas de los
camarones se encuentran en estado inactivo. La presencia de partículas extrañas sobre
40
SHZ\WLYÄJPLKLLZ[HZJtS\SHZJHTIPHKLPUTLKPH[VZ\ZP[\HJP}UWHZHUKVH\UPUJYLTLU[V
en la actividad metabólica; esta se llama choque respiratorio o metabolismo oxidativo. La
transición celular de un estado inactivo a uno activo, involucra cambios característicos
JVTV PUJYLTLU[V LU LS JVUZ\TV KL V_xNLUV WVY SH LUaPTH 5(+7/ V_PKHZH X\L ZL
LUJ\LU[YHLUSHZ\WLYÄJPLJLS\SHY`[HTIPtULUSHZTLTIYHUHZKL]HJ\VSHZPU[YHJLS\SHYLZ
SPZVZVTHZ,ULZ[LWYVJLZVX\LZLPUPJPHJVUSHHJ[P]HJP}UKLSH5(+7/V_PKHZHVJ\YYL
la producción de muchos reactivos intermediarios de oxígeno altamente tóxicos como el
HUP}UZ\WLY}_PKVWLY}_PKVKLOPKY}NLUV`V_xNLUVZPUNSL[L¸singlet oxygen¹
,Z[VZ WYVK\J[VZ YLZ\S[HU[LZ KLS JOVX\L YLZWPYH[VYPV LZ[mU YLSHJPVUHKVZ JVU SH
actividad antimicrobiana en el camarón y con la destrucción de los agentes infectantes.
La producción del anión superóxido puede ser medida a partir de una muestra de
hemolinfa, mediante la estimulación de los hemocitos y la capacidad de este anión para
reducir el nitro blue tetrazolium5);,Z[HYLHJJP}UWYVK\JL\UKLW}ZP[VKLJVSVYHa\S
X\LZLW\LKLJ\HU[PÄJHY\[PSPaHUKV\USLJ[VYKLTPJYVWSHJHZJVU\UÄS[YVX\L[LUNH\UH
SVUNP[\KKLVUKHKLUT
Actividad antibacteriana del plasma: existen en la hemolinfa del camarón diferentes
WtW[PKVZJVULMLJ[VZHU[PTPJYVIPHUVZ,U[YLTH`VYZLHSHJVUJLU[YHJP}U`[PWVKPZ[PU[V
de éstos en un camarón cuando se presenta el ataque de bioagresores, mayores serán
las posibilidades de defensa y, por ende, de supervivencia. La prueba de la actividad
antibacteriana del plasma permite medir la inhibición del crecimiento bacteriano, por
la acción de péptidos que poseen propiedades microbicidas y que están presentes en la
hemolinfa de los camarones.
Con base en lo anterior, medir la actividad antibacteriana del plasma/suero de
camarones, permite estimar la capacidad de respuesta frente a una eventual infección
por bacterias. Para realizar la evaluación, se deben tener cultivos de cepas bacterianas
Gram positivas y negativas en pozos de una microplaca y se hacen diluciones seriadas
del plasma/suero de camarones frente a estas bacterias. Se analiza la inhibición del
crecimiento bacteriano causada por el plasma diluido seriadamente y se calcula luego el
título de inhibición. La medición se hace por medio de un método turbidimétrico, cuyo
principio está basado en la determinación espectrofotómetrica de la turbidez causada
por las suspensiones bacterianas; si la turbidez de la muestra de bacterias disminuye
en presencia de plasma, sugiere destrucción bacteriana por presencia de los péptidos
HU[PIHJ[LYPHUVZ3HJ\HU[PÄJHJP}UZLYLHSPaHTLKPHU[LJVTWHYHJP}ULZWLJ[YVMV[VTt[YPJH
del cultivo control (sin plasma/suero) y del cultivo con la muestra de plasma/suero,
utilizando un lector de microplacas.
*\HU[PÄJHJP}U KL SH Ơ2Macroglobulina plasmática: en invertebrados, se ha sugerido
X\LLZ[HLUaPTHYLN\SHSHHJ[P]HJP}UKLSZPZ[LTHKLSHWYV76PUOPIPLUKVHSH,UaPTH
(J[P]HKVYH KL SH WYV76 ,(WYV76 YHa}U WVY SH J\HS ZL SL JVUZPKLYH TLKPHKVY KLS
sistema inmune. Los inhibidores de las proteasas no sólo participan en las acciones
de protección contra microorganismos patógenos, sino que también juegan un papel
PTWVY[HU[LLUV[YVZWYVJLZVZKLKLMLUZHJVTVSHJVHN\SHJP}U3HJ\HU[PÄJHJP}UKLSH
Ơ2Macroglobulina plasmática, se realiza basándose en que reacciona con las proteasas
sin bloquearles el sitio activo, siendo así protegidas las proteasas e impidiendo el acceso
KL Z\IZ[YH[VZ WYV[LxUHZ NYHUKLZ :PU LTIHYNV WtW[PKVZ WLX\L|VZ JVTV )(75(
Zx W\LKLU ZLY KLNYHKHKVZ WVY SHZ WYV[LHZHZ X\L OHU ZPKV H[YHWHKHZ ,Z[H KLNYHKHJP}U
produce un compuesto de color amarillo, el cual puede medirse con un lector de
TPJYVWSHJHZ\ZHUKV\UÄS[YVJVU\UHSVUNP[\KKLVUKHKLUT
41
*\HU[PÄJHJP}UKL).)7LUOLTVSPUMH!la presencia de compuestos microbianos en el

sistema inmune puede activar directamente las funciones celulares de defensa tales como
fagocitosis, melanización, encapsulación y coagulación; las proteínas reconocedoras
WYLZLU[LZLULSWSHZTHHTWSxHULZLLZ[xT\SV3HW\YPÄJHJP}UKLSVZJVTWVULU[LZKLS
sistema proPO de crustáceos, ha permitido demostrar la presencia de dos proteínas
directamente relacionadas con la comunicación celular entre hemocitos. Una de ellas
LZSHWYV[LxUHKL\UP}UHS.S\JHUV).)7KLSPUNStZß-1,3-Glucan Binding Protein)
WYLZLU[LLULSWSHZTH3H).)7LZ\UH797[HSJVTVSHZHNS\[PUPUHZJHWHaKLYLJVUVJLY
JVTWVULU[LZ KL SH WHYLK KL SVZ OVUNVZ 3H ).)7 M\L PKLU[PÄJHKH LU LS WSHZTH KLS
camarón Penaeus californiensisWVY=HYNHZ(SIVYLZL[HS ,Z[HWYV[LxUHYLHJJPVUH
JVUSVZNS\JHUVZ`LSJVTWSLQVNS\JHUV).)7PUK\JLHSHKLNYHU\SHJP}U`HJ[P]HJP}U
del sistema proPO. La otra molécula es la proteína de unión a los lipopolisacáridos de la
WHYLKKLIHJ[LYPHZ.YHTULNH[P]HZ3)7KLSPUNStZLipopolysaccharide Binding Protein),
SHJ\HSLZ\UH797X\LYLJVUVJL37:
3HWYV[LxUH3)7OHZPKVKLZJYP[HJVTVHNS\[PUPUH`ZLOHWYVIHKVZ\JHWHJPKHKWHYH
aglutinar bacterias. Una vez reacciona con el LPS o con bacterias, la proteína se une a los
OLTVJP[VZ`LZ[PT\SHSHMHNVJP[VJPZ3H).)7`SH3)7LZ[PT\SHUSHZM\UJPVULZJLS\SHYLZ
solamente después de reaccionar con los ß-glucanos y con los LPS, respectivamente.
3HJ\HU[PÄJHJP}UKLLZ[HZ797ZWSHZTm[PJHZKLSJHTHY}UZLYLHSPaHJVULSTt[VKVKL
SHPUOPIPJP}UKL,30:(LSJ\HSWLYTP[LLSPTPUHYSHZYLHJJPVULZPULZWLJxÄJHZVIZLY]HKHZ
entre los inmuno-reactantes y la hemolinfa.
3VZHU[PJ\LYWVZJVTLYJPHSLZJVU[YH).)7WYVK\JPKVZYLHJJPVUHULU]LY[LIYHKVZ
KLTHULYHLZWLJxÄJHJVUZ\ZYLZWLJ[P]VZHU[xNLUVZ*VUIHZLLULZ[VSHWY\LIHWHYH
su detección consiste en inmovilizar antígeno (dichas proteínas) en una microplaca de
poliestireno, agregando luego los anticuerpos e incubando para que éstos reaccionen.
+LZW\tZ ZL \ZH \U Z\Z[YH[V YL]LSHKVY WHYH KL[LJ[HY ` J\HU[PÄJHY SHZ 797Z :P ZL OH
presentado unión antígeno-anticuerpo, la aplicación del sustrato en presencia del
anticuerpo producirá una reacción colorimétrica medible mediante espectrofotometría,
\[PSPaHUKV \U SLJ[VY KL TPJYVWSHJHZ JVU \UH SVUNP[\K KL VUKH HWYVWPHKH ZLNU LS
método.
Concentración de hemocianina en la hemolinfa: la hemocianina es una proteína
presente en la hemolinfa de los camarones, responsable del transporte de por lo menos
LS KLS V_xNLUV OHJPH SVZ }YNHUVZ ` [LQPKVZ ,Z[H WYV[LxUH [HTIPtU WHY[PJPWH LU
las actividades inmunológicas del camarón, ya que los hemocitos pueden convertir
porciones de la hemocianina en una enzima similar a la fenoloxidasa. Adicionalmente,
WVZLL OVTVSVNxH JVU ]HYPHZ WYV[LxUHZ KLS ZPZ[LTH PUT\UL ,Z WVZPISL X\L LZ[xT\SVZ
antigénicos desencadenen reacciones donde la hemocianina genera varias moléculas
inmunorreactivas. La medición de esta proteína a partir de muestras de hemolinfa,
WLYTP[LLZ[PTHYSHZJVUKPJPVULZÄZPVS}NPJHZKLSJHTHY}U`LUWHY[LKLZ\JHWHJPKHK
KLYLZW\LZ[HPUT\UL3HJ\HU[PÄJHJP}UKLSHOLTVJPHUPUHZLW\LKLYLHSPaHYH[YH]tZKL
métodos de espectrofotometría, utilizando un lector de microplacas.
Concentración de óxido nítrico sintasa: \UH U\L]H WY\LIH YLWVY[HKH LU WVY
/LYUmUKLaL[HSOHJLYLMLYLUJPHHSHTLKPJP}UKL}_PKVUx[YPJVZPU[HZH56:JVTV
criterio para medir la actividad de los hemocitos dentro de las acciones de defensa de un
JHTHY}U,S}_PKVUx[YPJV56LZLSWYVK\J[VKLSHV_PKHJP}UKLSHTPUVmJPKV3HYNPUPUH
H 3JP[Y\SPUH TLKPHKV WVY SH 56: ,Z[L NHZ [YHUZTPZVY KL ZL|HSLZ WYVK\JPKV WVY \UH
JtS\SHWLUL[YHH[YH]tZKLSHTLTIYHUHJLS\SHY`YLN\SHSHM\UJP}UKLV[YHZJtS\SHZ,S56
es altamente inestable transformándose rápidamente en nitritos (NO2) y nitratos (NO,S
NO es extremadamente tóxico y por lo tanto altamente microbicida. Su producción por
42
SVZOLTVJP[VZSLV[VYNH\UWHWLSKLNYHUPTWVY[HUJPHLULSJVU[YVSKLPUMLJJPVULZ,S56
puede ser analizado por quimioluminescencia, aunque debe ser liberado de la muestra
`SHYLJ\WLYHJP}UUVZPLTWYLLZHKLJ\HKH<UTt[VKVWHYHKL[LJ[HY`J\HU[PÄJHY56
se basa en la transformación del NO a NO2 y NO. Para medir la concentración total de
nitratos y nitritos (NOx), se pueden usar dos métodos: la reducción química con cadmio
o la reducción enzimática utilizando nitrato reductasa.
Otra forma de detectar la presencia de NOS en muestras biológicas, es utilizando
anticuerpos contra la proteína. Para ello se utilizan anticuerpos de conejo anti-iNOS
(NOS inducible presente en los hemocitos), los cuales reconocen la NOS de camarón,
W\KPtUKVZLHZxZLY\[PSPaHKVZWHYHPTWSLTLU[HY\UTt[VKVPUKPYLJ[VKL,30:(:LOHU
probado diferentes diluciones de anti-NOS y combinaciones de conjugado anti-conejo,
habiendo sido las mejores 1:1000 y 1:40000, respectivamente.
Consideraciones generales sobre parámetros inmunológicos

La interpretación de resultados obtenidos con todas las pruebas mencionadas
HU[LYPVYTLU[LKLILOHJLYZLJVUZPKLYHUKVMHJ[VYLZX\LPU[LYÄLYLUKPYLJ[HTLU[LZVIYL
JHKH\UVKLSVZWHYmTL[YVZPUT\ULZ,USVZJHTHYVULZLZ[mUWYPUJPWHSTLU[LSHLKHK
sexo, estado de muda, estrés (ambiental, nutricional o séptico) y condiciones sanitarias
(presencia o ausencia de enfermedad); en el agua de cultivo está principalmente la
[LTWLYH[\YH ZHSPUPKHK W/ V_xNLUV KPZ\LS[V ` WYLZLUJPH KL Z\IZ[HUJPHZ [}_PJHZ KL
origen químico o biológico).
PARÁMETROS INMUNOLÓGICOS – HEMOGRAMA
-PN\YH ,SLTLU[VZ WHYH LS TVU[HQL KL

hemolinfa cuando se hace conteo de hemocitos.
De izquierda a derecha se observa una caja con
puntas de micropipeta (20-200 μL), micropipeta
con volumen graduable (20-200 μL), microtubos
de 1.5 mL con tapa y contador de células.
-PN\YH7\UJP}UKL\UP. vannamei para la

extracción de hemolinfa del seno hemolinfático
ventral, ubicado en la unión entre el cefalotórax
y el abdomen, ventralmente. Nótese el uso de
una jeringa desechable de 1 mL (tipo insulina),
la cual contiene una solución anticoagulante.
43
PARÁMETROS INMUNOLÓGICOS – HEMOGRAMA
-PN\YH 4VU[HQL KL 3 KL OLTVSPUMH

anticoagulada en una cámara de Neubauer
(hematocitómetro). Debido a que esta cámara
posee dos campos de conteo, se pueden montar
muestras de 2 animales diferentes al mismo
tiempo.
-PN\YH 6IZLY]HJP}U KL OLTVSPUMH

anticoagulada en cámara de Neubauer,
utilizando un microscopio de contraste de fases
y el objetivo de 40X.
-PN\YH/LTVJP[VZKL\UJHTHY}UWYLHK\S[V
P. vannamei observados en cámara de Neubauer,
utilizando microscopio de contraste de fases y
objetivo de 40X. Se pueden observar encerradas
LU J\HKYVZ HTHYPSSVZ JtS\SHZ JHYHJ[LYxZ[PJHZ
de los tipos diferentes de hemocitos que hay
reportados: granulares (G), semigranulares (S) y
OPHSPUVZ/:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
44
1.10 Microscopía electrónica de transmisión

Objetivo.3HTPJYVZJVWxHLSLJ[Y}UPJHKL[YHUZTPZP}U;,4LUJHTHYVULZ[PLULLSWYVW}ZP[V
KLHJJLKLYHSLZPVULZTPJYVZJ}WPJHZLU[LQPKVZHMLJ[HKVZJVULSÄUKLKL[LJ[HYSHWYLZLUJPH
VH\ZLUJPHKLHNLU[LZPUMLJJPVZVZT\`WLX\L|VZ:\\ZVLZ[mPUKPJHKVLUSHIZX\LKHKL
agentes patógenos o lesiones dentro de las células de tejidos afectados.
Descripción. 3H;,4LZ\UHOLYYHTPLU[HWVKLYVZHLULSKPHNU}Z[PJVKL]PY\ZLZWLJxÄJVZ
rickettsias, bacterias intracelulares y otros muy pequeños microorganismos que están
HZVJPHKVZ`X\LJH\ZHUSLZPVULZWHY[PJ\SHYLZLUSHZJtS\SHZ,USHZWYLWHYHJPVULZWHYH;,4
el patólogo examina las estructuras internas de las células y los organelos celulares, en
I\ZJHKLHUVYTHSPKHKLZ<UHÄQHJP}UVHSTHJLUHTPLU[VPUHKLJ\HKVKLT\LZ[YHZWHYH
;,4W\LKLVJHZPVUHYNYHUKLZHY[LMHJ[VZVJHTIPVZLUSHZJtS\SHZLZ[\KPHKHZJVUSVJ\HSZL
HMLJ[HSHJHSPKHKKLSHIZX\LKH`SHVI[LUJP}UKLYLZ\S[HKVZJVUJS\`LU[LZ7VYLZ[HYHa}U
SHWYLWHYHJP}UZLJJPVUHTPLU[V[PUJP}ULPU[LYWYL[HJP}UKLTH[LYPHSTLKPHU[L;,4LZ\UH
actividad altamente especializada y debe ser realizada por personal bien entrenado.
Metodología.+\YHU[LLSWYVJLZVKLWYLWHYHJP}UKLSÄQHKVYHZxJVTVK\YHU[LSVZL]LU[VZKL
ÄQHJP}UKLT\LZ[YHZ`Z\THUPW\SHJP}UZPLTWYLKLILU\ZHYZLN\HU[LZ`NHMHZWYV[LJ[VYHZ
7HYHWYLWHYHY\UHZVS\JP}UÄQHKVYHKL[YHIHQVHWYV_PTHKHTLU[LHSZL\[PSPaHUT3KL
NS\[HYHSKLOxKVNYHKVTPJYVZJVWxHLSLJ[Y}UPJH,4SVZJ\HSLZZLH|HKLUHT3KL
I\MMLYMVZMH[V4,Z[HZVS\JP}UZLKLILHSTHJLUHYH¢*`ZLKLIL\[PSPaHYKLU[YVKLSVZ
ZPN\PLU[LZ KxHZWVZ[LYPVYLZHSHWYLWHYHJP}U3\LNVKLLZ[L[PLTWVSHZVS\JP}UÄQHKVYHX\L
UVZLOH\[PSPaHKVHUZLKLILKLZJHY[HY:LKLILUHNYLNHYZHS`Z\JYVZHHSHZVS\JP}UWHYH
HQ\Z[HYSHHSHVZTVSHYPKHKZPTPSHYHSHKLSVZJHTHYVULZHTTVSRN
Las soluciones de glutaraldehído comercial generalmente vienen en concentraciones
de 25%, 50% y 70%. La de 25% es grado histológico y por eso es la más utilizada para
;,4LUJHTHYVULZJVUZPN\PtUKVZLLUIV[LSSHZmTIHYKLT33HZJVUJLU[YHJPVULZ
50% y 70% se consiguen en ampollas de 5 mL.
3HZPN\PLU[L[HISHHKHW[HKHKL3PNO[ULY Z\NPLYLSHZJHU[PKHKLZKLNS\[HYHSKLOxKV`
I\MMLYH\[PSPaHYWHY[PLUKVKLSHZJVUJLU[YHJPVULZJVTLYJPHSLZKPZWVUPISLZKLNS\[HYHSKLOxKV
`ZLNUSHJVUJLU[YHJP}UÄUHSKLSHZVS\JP}UÄQHKVYHX\LZLX\PLYHWYLWHYHY!
Glutaraldehído (J[P]PKHKÄQHKVYHLU
Actividad por Volumen stock (mL) / Buffer requerido (mL)
stock
ampolla
% activo
1% 4% 6%
25% n/a
50% 2.5 g/5 mL 5 / 245 5 / 57.5 5 / 42
70% NT3
Al igual que en muestras que se preparan para diagnóstico histopatológico, la

preservación de los tejidos debe hacerse de manera rápida y a temperatura baja, para
L]P[HYJHTIPVZLUSHZT\LZ[YHZHJH\ZHKLSHKLNYHKHJP}U,ULSJHZVKLSHY]HZVWVZ[SHY]HZ
tZ[HZKLILUZLYÄQHKHZTLKPHU[LPUTLYZP}UKPYLJ[HLUSHZVS\JP}UÄQHKVYHKLNS\[HYHSKLOxKV
HSL_JLKPLUKV\UHYLSHJP}UKLÄQHKVY[LQPKVKL!3HZT\LZ[YHZKLILUWLYTHULJLY
ÄQHKHZHSTLUVZWVYOVYHZHU[LZKLZLYWYVJLZHKHZWHYH;,4
,UQ\]LUPSLZ`JHTHYVULZPUMLYPVYLZHNZLKLILPU`LJ[HYÄQHKVYLUKPMLYLU[LZWHY[LZ
J\IYPLUKVLSOLWH[VWmUJYLHZYLNP}UKLSLZ[}THNVYLNP}UKLSPU[LZ[PUVTLKPV`TZJ\SV
abdominal. Con tijeras de disección y por debajo de la cutícula (sin atravesar tejido blando),
se debe hacer un corte longitudinal por la línea media a los dos lados, para asegurar una
HKLJ\HKHWLUL[YHJP}UKLSÄQHKVY
45
3VZ[LQPKVZKLJHTHY}UZLKLILUWYLZLY]HYTLKPHU[LSHPU`LJJP}UKLZVS\JP}UÄQHKVYH
KLNS\[HYHSKLOxKVHSLUanimales vivos, la cual se debe tener a una temperatura de 4ºC.
5VZLKLILUÄQHYJHTHYVULZT\LY[VZ`SVZJHTHYVULZ]P]VZKLILUTVYPYWVYLSLMLJ[VKLS
ÄQHKVYLULSTVTLU[VKLZ\PU`LJJP}U
,U JHTHYVULZ KL TmZ KL N ZL KLILU L_[YHLY SVZ }YNHUVZ V [LQPKVZ KL PU[LYtZ
debiéndolos cortar rápidamente con una cuchilla y manteniéndolos inmersos en la solución
ÄQHKVYHKLNS\[HYHSKLOxKVMYxH3VZJVY[LZKLILUZLYLU[YVaVZKLWVJVZTPSxTL[YVZKL
LZWLZVYTm_PTV_TT3VZJHTHYVULZVZ\ZWHY[LZWHYH;,4KLILUZLYÄQHKVZZPU
L_JLKLY \U ]VS\TLU KL [LQPKV TH`VY H JT 3VZ [YVaVZ KLILU ZLY S\LNV [YHUZMLYPKVZ
H MYHZJVZ YV[\SHKVZ ` X\L JVU[LUNHU ZVS\JP}U ÄQHKVYH MYxH I\ZJHUKV \UH YLSHJP}U KL
ÄQHKVY[LQPKVKL!,Z[VZ[YVaVZÄQHKVZKLILUTHU[LULYZLWVYHOVYHZHU[LZKLZLY
WYVJLZHKVZWHYH;,43\LNVZLKLILLSPTPUHYSHZVS\JP}UÄQHKVYHKLNS\[HYHSKLOxKV
`KLILZLYYLLTWSHaHKHWVYI\MMLYMVZMH[V4,Z[HU\L]HÄQHJP}UKL[LQPKVZZLKLIL
mantener a 4ºC.
Los procedimientos posteriores pueden realizarse siguiendo los protocolos estándar para
;,43HZT\LZ[YHZKL[LQPKVKLJHTHY}UW\LKLUZLYN\HYKHKHZWVY]HYPHZZLTHUHZLU\UH
ZVS\JP}UKLNS\[HYHSKLOxKVJVUI\MMLYMVZMH[VH[LTWLYH[\YHKLYLMYPNLYHKVY:LKLILU
WYLWHYHYU\L]HZZVS\JPVULZKLÄQHKVY`KLI\MMLYMVZMH[VJHKH[YLZTLZLZ:PZLYLX\PLYL
THU[LULYT\LZ[YHZKLJHTHYVULZÄQHKHZWVY[PLTWVPUKLÄUPKVZLW\LKLUWYLZLY]HYH¢*
en soluciones de glutaraldehído de 0.5% a 1%.
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE TRANSMISIÓN (TEM)
-PN\YH 4PJYVMV[VNYHMxH KL \U JVY[L KL [LQPKV KL

7LUHL\ZTVUVKVUPUMLJ[HKVJVULS]PY\Z@/=:LVIZLY]HU
PUJS\ZPVULZJP[VWSmZTPJHZKL]PY\Z@/=LU]\LS[VZKLTHULYH
VYNHUPaHKH;HTIPtUZLVIZLY]HUH\UX\LTLUVZMmJPSTLU[L
PUJS\ZPVULZ ]PYHSLZ T\` KLSNHKHZ WHYLJPKHZ H ÄIYHZ JVU
forma de bastón, de nucleocápsides sin envoltura del virus
@/= JLYJH KL SH TLTIYHUH(TWSPHJP}U! e? -V[V!
3PNO[ULY *VY[LZxHKL;>-SLNLS)HUNRVR;HPSHUKPH
-PN\YH4PJYVZJVWPV,SLJ[Y}UPJVKL;YHUZTPZP}U7/0307:*4NVILYUHKVWVY\UTPJYVWYVJLZHKVY7LYTP[LVIZLY]HJPVULZ
KL?OHZ[H?JVUJHWHJPKHKKLYLZVS\JP}UKLUTLU[YLSxULHZÙTLU[YLW\U[VZ;YHIHQHJVUKPZ[PU[VZ]VS[HQLZ
KL HJLSLYHJP}U! ` R=;PLUL VWJPVULZ KL VIZLY]HJP}U LU JHTWV JSHYV JHTWV VZJ\YV ` KPMYHJJP}U KL
LSLJ[YVULZ7VZLLZPZ[LTHMV[VNYmÄJVH\[VTm[PJVHKHW[HKVWHYHWLSxJ\SHWSHUHVWLSxJ\SHKLTT3HZWYPUJPWHSLZHWSPJHJPVULZZVU!
VYNHUPaHJP}UKLJtS\SHZ`[LQPKVZLZ[\KPVKLVYNHULSVZJLS\SHYLZLZ[\KPVKLLZWLJPHSPaHJP}UJLS\SHY!JPSPVZÅHQLSVZZPUHWZPZ\UPVULZ
GAP, morfología de virus, estudios de micropartículas y nanopartículas y, estructura interna de láminas delgadas.
46
)PVLUZH`VZ
Objetivo. Determinar si el agente causal de una enfermedad es de origen infeccioso
(virus, bacterias, hongos, etc.), tóxico (toxinas químicas o biológicas) o, descartando lo
HU[LYPVY KL VYPNLU HTIPLU[HS V WVY THULQV;HTIPtU ZL \[PSPaHU SVZ IPVLUZH`VZ WHYH
evaluar la patogenicidad de una cepa viral o bacteriana inyectada o suministrada vía oral
a camarones libres de dichos agentes patógenos.
Descripción. Los bioensayos son estudios realizados con seres vivos, camarones en este
caso, durante los cuales se busca reproducir una enfermedad detectada en camarones
KL\UHWVISHJP}UKL[LYTPUHKH\[PSPaHUKVJVTVVYNHUPZTVZ¸ISHUJV¹JHTHYVULZZHUVZ
`Z\ZJLW[PISLZHKPJOHLUMLYTLKHKiZ[VZW\LKLUZLY¸SPIYLZKLWH[}NLUVZLZWLJxÄJVZ¹
:7- WVY Z\ ZPNSH LU PUNStZ V ZPTWSLTLU[L SPIYLZ KL SH LUMLYTLKHK X\L ZL WYL[LUKL
reproducir.
La susceptibilidad de los camarones que se utilizan en los bioensayos, hacen
referencia a la especie y talla de los animales. La manera de buscar su eventual infección
es utilizando batido (macerado) de camarones enfermos y los cuales presentaban
THUPMLZ[HJPVULZ KL SH LUMLYTLKHK ZHJYPÄJHKVZ LU MHZL HN\KH 3H HWHYPJP}U KL
la enfermedad en los camarones susceptibles utilizados en un bioensayo, deberá
corresponder al tiempo estimado de aparición de los signos clínicos en los camarones
que se enferman en condiciones naturales.
Metodología. Los bioensayos son pruebas de desafío, en las cuales se utiliza tejido
infectante para realizar de manera experimental, una infección per os (vía oral) en
JHTHYVULZ Z\ZJLW[PISLZ ,S TH[LYPHS PUMLJ[HU[L KLIL WYV]LUPY KL JHTHYVULZ ]P]VZ
(enfermos avanzados o moribundos), que hayan presentado los mismos signos clínicos de
la enfermedad en cuestión y procedentes de una misma población (edad y talla similar).
La capacidad infectante de este batido de tejido de camarones enfermos, depende de la
carga viral o bacteriana que tenga (cantidad de microorganismos por gramo de aquellos
que causan la enfermedad) y de la cantidad de tejido que se suministre a los camarones
¸ISHUJV¹ :P L_PZ[LU WY\LIHZ TVSLJ\SHYLZ KPZWVUPISLZ WHYH LS HNLU[L L[PVS}NPJV KLS
LZ[\KPVZLW\LKLLZ[HISLJLYKLTHULYHZLTPJ\HU[P[H[P]H7*9JVUKPS\JPVULZZLYPHKHZ
KLS(+5L_[YHxKVVJ\HU[P[H[P]H7*9LU[PLTWVYLHSSHJHYNHKLSWH[}NLUVWYLZLU[LLU
cada gramo de tejido infectante.
Los camarones que van a ser infectados experimentalmente per os, deben estar
libres de la enfermedad que se pretende reproducir. Para ello, deben proceder de una
WVISHJP}USPIYLKLWH[}NLUVZJVUVJPKVZ:7-ZPLZWVZPISL`X\LUVOH`HUWYLZLU[HKV
o estén presentando signos clínicos de ninguna enfermedad (completamente sanos). Si
existen herramientas moleculares de diagnóstico para la enfermedad en cuestión, se
debe someter a prueba un grupo de camarones procedentes de la población de donde
ZL \[PSPaHYmU SVZ HUPTHSLZ ¸ISHUJV¹ WHYH LS LZ[\KPV iZ[VZ KLILU ZLY ULNH[P]VZ ¸UV
KL[LJ[HKV¹HSWH[}NLUVKLSJ\HSLZVIQL[VLSIPVLUZH`V
Cuando el objetivo del bioensayo incluye trabajar con un patógeno desconocido y
para el cual no existen en el momento pruebas de diagnóstico moleculares, los camarones
¸ISHUJV¹KLILUZLY:7-WHYHX\LSVZYLZ\S[HKVZKLSHWY\LIHZLHUJVUJS\`LU[LZ
Los bioensayos deben realizarse en instalaciones cerradas, con condiciones
controladas y con parámetros físico-químicos estables. Los principales factores que
deben mantenerse bajo control durante un bioensayo, son los siguientes:
*HSPKHK KLS HN\H! ÄS[YHKH YLJHTIPV JVUZ[HU[L V MYLJ\LU[L JVUKPJPVULZ
bacteriológicas apropiadas
47
;LTWLYH[\YH!KLSHN\H`KLSHPYLKLSHZHSHKLIPVLUZH`VZ
3\TPUVZPKHK
6_xNLUVKPZ\LS[V
:HSPUPKHK
4L[HIVSP[VZWV[LUJPHSTLU[L[}_PJVZ!UP[YP[VZUP[YH[VZHTVUPV`M}ZMVYV
4H[LYPHVYNmUPJH!ZLKPTLU[HKH`JVTVWHY[xJ\SHZLUZ\ZWLUZP}U
<UPKHKLZ L_WLYPTLU[HSLZ <,! HJ\HYPVZ [PUHZ V [HUX\LZ [HTH|V MVYTH
transparencia)
+LUZPKHKL_WLYPTLU[HS!JHTHYVULZWVY3ZPUL_JLKLYN3KLIPVTHZH
4H[LYPHSKLSHZ<,!WSmZ[PJV]PKYPVHJYxSPJVÄIYHKL]PKYPVJVUJYL[VL[J
=VS\TLUKLSHZ<,!JHWHJPKHKKLVWLYHJP}U
-\LU[L KLS HN\H KL YLJHTIPV! YLZLY]VYPV KL [PLYYH [HUX\L ZPU V JVU ÄS[YHJP}U
recirculación, etc.
(U[LZ KL YLHSPaHY \U IPVLUZH`V KLIL [LULYZL \U WSHU KL [YHIHQV IPLU KLÄUPKV
con el protocolo de operación claramente comprendido por la o las personas que
WHY[PJPWHYmULUSHWY\LIH`KLÄUPLUKVSVZTVTLU[VZWHYHJHKHMHZLKLSLZ[\KPV[HSLZ
JVTVMLJOHKLPUPJPVMLJOHKLPUMLJJP}UWY\LIHZJVUÄYTH[VYPHZKLKPHNU}Z[PJVWHYHSH
LUMLYTLKHKLULZ[\KPVJYP[LYPVZKLKLJPZP}UWHYHLZ[HISLJLYSHZJVUJS\ZPVULZÄUHSLZ`
fecha (o condiciones particulares) para dar por terminada la prueba (ej.: luego de 2 días
en los que se haya estabilizado la mortalidad).
3HZJHU[PKHKLZKLJHTHYVULZKLJHKH<,KLILUZLYJVUVJPKHZLSKxHKLSHPUMLJJP}U
experimental, ya que este valor será el 100% de la población de partida. Con base en
LZ[VZKH[VZZLWVKYmLZ[HISLJLYHSÄUHSPaHYSHWY\LIHSHZ\WLY]P]LUJPHLUWVYJLU[HQL
Los datos de mortalidad diaria deben ser observados con rigurosidad y registrados en un
MVYTH[VKPZL|HKVWHYH[HSÄUiZ[VZWLYTP[PYmUJVUVJLYSH[HZHKLTVY[HSPKHKKPHYPH`LS
momento de mayor mortalidad de la prueba, entre otra información de interés.
48
BIOENSAYOS
-PN\YH=PZ[HKL\UHZHSHKLIPVLUZH`VZLUSHJ\HSZL
\[PSPaHU [HUX\LZ KL ]PKYPV JVU JHWHJPKHK WHYH 3 ,U
las partes superior e inferior de los tanques, se observa
la tubería de aire a través de la cual se conectan las
mangueras de aireación para cada uno. Los tanques de
arriba están con agua y tienen mangueras de aireación
y piedras difusoras en sus extremos (dentro de cada
tanque).
-PN\YH 9L]PZP}UKLWHYmTL[YVZMxZPJVX\xTPJVZLU\U
tanque de vidrio durante la realización de un bioensayo.
Se observa dentro del tanque el electrodo del equipo,
con el cual se obtienen datos de temperatura, salinidad
y oxígeno disuelto.
-PN\YH (SPTLU[HJP}U KVZPÄJHKH KL JHTHYVULZ 7

vannamei durante la realización de un bioensayo. Nótese
la presencia de una cubierta de malla que está siendo
levantada para la alimentación y la cual evita pérdida de
camarones por saltos hacia el exterior del tanque o hacia
otros tanques vecinos.
49
Recomendación general
,Z KL NYHU PTWVY[HUJPH OHJLY \UH LSPTPUHJP}U HKLJ\HKH KL [VKVZ SVZ WYVK\J[VZ
de desecho procedentes de pruebas de diagnóstico, así como de camarones que han
ZPKV \[PSPaHKVZ WHYH L_[YHJJP}U KL T\LZ[YHZ V WHYH IPVLUZH`VZ ,Z[V WHYH L]P[HY SH
contaminación de entornos acuáticos comerciales o silvestres y del propio ambiente.
Apéndice
Métodos para la detección de los principales agentes virales en camarones penaeidos
TVKPÄJHKVKL3PNO[ULY`7HU[VQH,U!<:+(<*(
IHH-
Método WSSV BP MBV BMN SMV YHV* TSV IMNV PvNV
NV
+PYLJ[H)-
- - - -
347/+-
/PZ[VWH-

tología
)PVLUZH`VZ - -
;,4:,4
,30:(*65
- - - - - - -
PAb / MAb
Sondas ADN /

+)/0:/
7*99;7*9 -

.Y\WV@/=3HPUMVYTHJP}UZVIYLSVZ]PY\Z045=`7]5=M\LZ\TPUPZ[YHKHWVYLS+Y*HYSVZ7HU[VQHKLSH<UP]LYZPKHKKL(YPaVUH
<:(
+LÄUPJPVULZKLHWSPJHJP}UKLSVZTt[VKVZWHYHJHKH]PY\Z
- = método desconocido o cuya aplicación no está publicada
$ Tt[VKVJ\`HHWSPJHJP}ULZJVUVJPKHVLZ[mW\ISPJHKHWLYVUVMYLJ\LU[LTLU[L
practicada o difícilmente disponible
$ Tt[VKV J\`H HWSPJHJP}U WYV]LL Z\ÄJPLU[L L_HJ[P[\K KL KPHNU}Z[PJV
o sensibilidad en la detección de patógenos para la mayoría de las
aplicaciones
$ Tt[VKV X\L WYV]LL \U HS[V NYHKV KL ZLUZPIPSPKHK LU SH KL[LJJP}U KL
patógenos
Abreviaturas para los métodos

)- $ TPJYVZJVWxH KL S\a KL JHTWV IYPSSHU[L WHYH LS HUmSPZPZ KL PTWYVU[HZ KL
[LQPKVZTVU[HQLZOTLKVZVTVU[HQLZLU[LYVZ[L|PKVZ
LM = microscopía de luz
7/ $ TPJYVZJVWxHJVUJVU[YHZ[LKLMHZLZ
+- $ TPJYVZJVWxHKLJHTWVVZJ\YV
50
,4 $ TPJYVZJVWxH LSLJ[Y}UPJH KL ZLJJPVULZ V KL ]PY\Z W\YPÄJHKVZ V

ZLTPW\YPÄJHKVZ
,30:( $ WY\LIHKLLUaPTHZTHYJHKHZPUT\UVHIZVYILU[LZ
PAb = anticuerpos policlonales
MAb = anticuerpos monoclonales
+)/ $ OPIYPKHJP}UTHUJOHW\U[VKV[ISV[
0:/ $ OPIYPKHJP}UPUZP[\
Métodos para vigilancia y diagnóstico de patógenos virales en camarones penaeidos

TVKPÄJHKVKL3PNO[ULY`7HU[VQH,U!<:+(<*(
Agente Vigilancia Diagnóstico
9;7*9ZVUKHZKL(+5()
;:= 9;7*9
histopatología
7*9ZVUKHZKL(+5()
WSSV 7*9()
histopatología, bioensayos
9;7*9ZVUKHZKL(+5()
@/= 9;7*9
histopatología, bioensayos
)45 /PZ[VWH[VSVNxH Microscopía directa, histopatología
7*9TPJYVZJVWxHKPYLJ[H 7*9TPJYVZJVWxHKPYLJ[H
)74)=
histopatología histopatología
0//5= 7*9ZVUKHZKL(5+ 7*9ZVUKHZKL(+5OPZ[VWH[VSVNxH
Sondas de ADN, histopatología,
SMV Sondas de ADN
bioensayos
9;7*9ZVUKHZKL(+5
IMNV 9;7*9ZVUKHZKL(+5
histopatología
9;7*9ZVUKHZKL(+5
PvNV 9;7*9ZVUKHZKL(+5
histopatología
3HPUMVYTHJP}UZVIYLSVZ]PY\Z045=`7]5=M\LZ\TPUPZ[YHKHWVYLS+Y*HYSVZ7HU[VQHKLSH<UP]LYZPKHKKL(YPaVUH<:(
51
9LMLYLUJPHZIPISPVNYHÄJHZ
(SW\JOL6ZVYUV 1 4 7LYL`YH 3=maX\La *(N\UKPZ * 9VZHZ ` , *LU[LUV 2005. Análisis
proteómico de la subunidad IsI1 de la lectina del camarón blanco del Golfo de México
Litopenaeus setiferus9L]PZ[HLSLJ[Y}UPJHKL=L[LYPUHYPH¶9,+=,;=VS=05V
)HYYHJJV 4( ) +\]PJ HUK 2 :KLYOpSS ;OL IL[HNS\JHUIPUKPUN WYV[LPU MYVT [OL
JYH`ÄZOPacifastacus leniusculusÔLUYLHJ[LK^P[OHIL[HNS\JHUPUK\JLZZWYLHKPUNHUK
KLNYHU\SH[PVUVMJYH`ÄZONYHU\SHYJLSSZ*LSSHUK;PZZ\L9LZLHYJO!
)LSS;(`+=3PNO[ULY (/HUKIVVRVM5VYTHS:OYPTW/PZ[VSVN`:WLJPHS7\ISPJH[PVU5V
>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3(W
)YVJR1(`234HPU (N\PKL[V[OLJVTTVUWYVISLTZHUKKPZLHZLZVMJ\S[\YLKPenaeus
vannamei;OL6JLHUPJ0UZ[P[\[L/VUVS\S\/0WW
*OLU1*HUK:@*OLUN *OHUNLZVMV_ÒLTVJ`HUPUHUKWYV[LPUSL]LSZPU[OLOLTVS`TWO
of Penaeus japonicus L_WVZLK[VHTIPLU[UP[YP[L(X\H[PJ;V_PJVSVN`!
Clifford H.C. and H. L. Cook. 2002. Disease Management in Shrimp Culture Ponds (Parts 1, 2 and
(X\HJ\S[\YL4HNHaPUL
*\tSSHY(UQLS 1 0KLU[PÄJHJP}U KL SHZ WYPUJPWHSLZ LUMLYTLKHKLZ ` KL[LYTPUHJP}U KL Z\
WYL]HSLUJPH LU JHTHYVULZ WLUHLPKVZ J\S[P]HKVZ LU *VSVTIPH;LZPZ KL 4HLZ[YxH 7VU[PÄJPH
<UP]LYZPKHK1H]LYPHUH:HU[HMtKL)VNV[m+*
*\tSSHY(UQLS 1 3- (YHUN\YLU 1( )YVJR ` 9- )HKVY 4HU\HS WHYH LS KPHNU}Z[PJV KL
las principales enfermedades en camarones penaeidos cultivados en Colombia: técnicas de
campo y de laboratorio para el procesamiento de muestras y el diagnóstico de enfermedades.
*,50(*<(*VSVTIPH
*\tSSHY(UQLS1;tJUPJHZWHYHLSKPHNU}Z[PJVKLLUMLYTLKHKLZLUJHTHYVULZ3PIYVKLYLZTLULZ
KLS[V*VUNYLZV7HUHTL|VKL4LKPJPUH=L[LYPUHYPH3VZ:HU[VZ9LWISPJHKL7HUHTm
+LJRLY/49`HU,1HLUPJRLHUK5;LY^PSSPNLY2001. SDS-induced Phenoloxidase Activity of
/LTVJ`HUPUZMYVTLimulus polyphemus, Eurypelma californicum, and Cancer magister.;OL
1V\YUHSVM)PVSVNPJHS*OLTPZ[Y`=VS!
+LZ[V\TPL\_ + + :H\SUPLY 1 .HYUPLY * 1V\MMYL` 7 )\SL[ HUK , )HJOLYL 2001. Antifungal
peptides are generated from the C terminus of shrimp hemocyanin in response to microbial
JOHSSLUNL;OL1V\YUHSVM)PVSVNPJHS*OLTPZ[Y`.
European Union SI&DC INCO-DC Project. /HUKIVVRVM[OL:OYPTW0TT\UVSVN`;YHPUPUN
*V\YZL*0(+(*4HYPUL)PV[LJOUVSVN`3HIVYH[VY`/LYTVZPSSV:VU4t_PJV"4H`[O
June 1st.
/HZZVU2>1/HZZVU/(\ILY[949LKTHUHUK+=3PNO[ULY (UL^95(MYPLUKS`
Ä_H[P]LMVY[OLWYLZLY]H[PVUVMWLUHLPKZOYPTWZHTWSLZMVY]PYVSVNPJHSKL[LJ[PVU\ZPUNJ+5(
NLUVTPJWYVILZ1V\YUHSVM=PYVSVNPJHS4L[OVKZ
/LUUPN 6 ; 0[HTP 4 4HLKH 4 2VUKV @ 5H[Z\RHYP HUK @ ;HRHOHZOP (UHS`ZPZ VM
OLTVS`TWO PTT\UVWHYHTL[LYZ PU R\Y\TH ZOYPTW PUMLJ[LK ^P[O WLUHLPK YVKZOHWLK +5(
]PY\Z-PZO7H[OVSVN`!
/LYUmUKLa3}WLa14(7VYJOHZ*VYULQV+,*VYVUHKV4VSPUH(:mUJOLa7Ha`;.VSSHZ
Galván. 0TWSLTLU[HJP}UKL4t[VKVZ`+L[LJJP}UKL(J[P]PKHKKLÔ_PKV5x[YPJV:PU[HZH
56:LU/LTVJP[VZKL*HTHYVULZPUVJ\SHKVZJVU3PWVWVSPZHJmYPKV37:)VSL[xU5VKL
7965(3:(7YVNYHTH5HJPVUHSKL:HUPKHK(J\xJVSH`SH9LKKL+PHNU}Z[PJV(|V =VS
0=WmN
/\THZVU.3 (UPTHS;PZZ\L;LJOUPX\LZ[O,KP[PVU>/-YLLTHUHUK*VTWHU`:HU
-YHUJPZJV
1PYH]HUPJOWHPZHS 7" 3LL )3" :KLYOpSS 2 *LSSTLKPH[LK PTT\UP[` PU HY[OYVWVKZ!
OLTH[VWVPLZPZJVHN\SH[PVUTLSHUPaH[PVUHUKVWZVUPaH[PVU0TT\UVIPVSVN`!
2SLPU 1 ;OL :JPLUJL VM :LSM5VUZLSM +PZJYPTPUH[PVU >PSL`0U[LYZJPLUJL 7\ISPJH[PVU WW

3L 4V\SSHJ 3 4 3L .YV\TLSSLJ + (UZX\LY : -YVPZZHYK 7 3L]` HUK (X\HJVW
/LTH[VSVNPJHSHUKWOLUVSV_PKHZLHJ[P]P[`JOHUNLZPU[OLZOYPTWPenaeus stylirostris in relation
^P[O[OLTV\S[J`JSL!WYV[LJ[PVUHNHPUZ[]PIYPVZPZ-PZO:OLSSÄZO0TT\UVS¶
52
3PNO[ULY+= (OHUKIVVRVMWH[OVSVN`HUKKPHNUVZ[PJWYVJLK\YLZMVYKPZLHZLZVMJ\S[\YLK
WLUHLPKZOYPTW>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
4HNNPVUP+:,9(UKYLH[[H,4/LYTLZJHUK4()HYYHJJV,]HS\H[PVUVMZVTLOLTH[V
immunological parameters in female shrimp Litopenaeus vannamei submitted to unilateral
L`LZ[HSRHISH[PVUPUHZZVJPH[PVU^P[OHKPL[Z\WWSLTLU[LK^P[OZ\WLYKVZLZVMHZJVYIPJHJPKHZ
a form of immunostimulation. Aquaculture, 241: 501-515.
7HZJ\HS*..H_PVSHHUK*9VZHZ)SVVKTL[HIVSP[LZHUKOLTVJ`HUPUVM[OLÔP[LZOYPTW
Litopenaeus vannamei![OLLMMLJ[VMJ\S[\YLJVUKP[PVUZHUKHJVTWHYPZVU^P[OV[OLYJY\Z[HJLHU
ZWLJPLZ4HYPULIPVSVN`!
7LYHaaVSV 34 9 .HYNPVUP 7 6NSPHYP HUK 4( )HYYHJJV ,]HS\H[PVU VM ZVTL OLTH[V
immunological parameters in the shrimp Farfantepenaeus paulensis submitted to environmental
HUKWO`ZPVSVNPJHSZ[YLZZ(X\HJ\S[\YL!
9VJO\+HUK14-PUL (U[PNLUPJZ[Y\J[\YLVM[OLOLTVJ`HUPUPUZP_ZWLJPLZVMKLJHWVK
*Y\Z[HJLH*VTWHYH[P]LHUK)PVJOLTPZ[Y`7O`ZPVSVN` !
9VKYxN\La;@)VYYLSS39HTVZ<)tJX\LY`.,ZWPUVZH2001. Actividad hemoaglutinante
de la hemolinfa del camarón blanco Litopenaeus schmitti9L]PZ[HKL0U]LZ[PNHJPVULZ4HYPUHZ
!
9VZHZ * . *\aVU . .H_PVSH 3 (YLUH 7 3LTHPYL * :V`La ( =HU >VYTOV\K[ 2000.
0UÅ\LUJLVMKPL[HY`JHYIVO`KYH[LVU[OLTL[HIVSPZTVMQ\]LUPSLLitopenaeus stylirostris. Journal
VM,_WLYPTLU[HS4HYPUL)PVSVN`HUK,JVSVN` !
:mUJOLa ( * 7HZJ\HS ( :mUJOLa - =HYNHZ(SIVYLZ . 3L 4V\SSHJ HUK * 9VZHZ 2001.
/LTVS`TWOTL[HIVSPJ]HYPHISLZHUKPTT\ULYLZWVUZLPULitopenaeus setiferus adult males:
[OLLMMLJ[VMHJJSPTH[PVU(X\HJ\S[\YL !
:KLYOpSS2HUK3*LYLUP\Z *Y\Z[HJLHUPTT\UP[`(UU\9L]-PZO+PZ¶
:KLYOpSS 2 HUK 3 /pSS 3PWVWVS`ZHJJOHYPKLPUK\JLK HJ[P]H[PVU VM WYVWOLUVSV_PKHZL
HJ[P]H[PUNZ`Z[LTPUJYH`ÄZOOHLTVJ`[LS`ZH[L)PVJOPT)PVWO`Z(J[H ¶
:KLYOpSS 2 HUK=1 :TP[O :LWHYH[PVU VM [OL OHLTVJ`[L WVW\SH[PVU VM Carcinus maenas
HUKV[OLYTHYPULKLJHWVKZHUKWYVWOLUVSV_PKHZLKPZ[YPI\[PVU+L]*VTW0TT\UVS ¶

:KLYOpSS23*LYLUP\ZHUK4>1VOHUZZVU ;OLWYVWOLUVSV_PKHZLHJ[P]H[PUNZ`Z[LTPU
PU]LY[LIYH[LZ0U!:KLYOpSS20^HUHNH:=HZ[H.9,KZ5L^+PYLJ[PVUZPU0U]LY[LIYH[L
0TT\UVSVN`:6:7\ISPJH[PVUZ-HPY/H]LU51WW ¶
:YP[\U`HS\JRZHUH 2 HUK 2 :KLYOpSS ;OL WYV76 HUK JSV[[PUN Z`Z[LT PU JY\Z[HJLHUZ
(X\HJ\S[\YL ¶
:YP[\U`HS\JRZHUH 2 7 :P[OPZHYU ) >P[OH`HJO\TUHYUR\S HUK;> -SLNLS (J[P]H[PVU VM
prophenoloxidase, agglutinin and antibacterial activity in haemolymph of the black tiger
WYHÛPenaeus monodonI`PTT\UVZ[PT\SHU[Z-PZO:OLSSÄZO0TT\UVS ¶
:\IHZOPUNOL97:,4J.SHKKLY``)1/PSS-(6+6*<4,5;6;i*50*6+,3(7,:*(
!¸=PNPSHUJPHàVUHJP}UWHYHLUMLYTLKHKLZKLHUPTHSLZHJ\m[PJVZ¹
5HNHP;;6ZHRPHUK:02H^HIH[H-\UJ[PVUHS*VU]LYZPVUVM/LTVJ`HUPU[V7OLUVSV_PKHZL
I`/VYZLZOVL*YHI(U[PTPJYVIPHS7LW[PKLZ;OL1V\YUHSVM)PVSVNPJHS*OLTPZ[Y`=VS !
¶
USDA – UCA. 4t[VKVZWHYHTLQVYHYSHJHTHYVUPJ\S[\YHLU*LU[YVHTtYPJH,KP[VYPHS0TWYLU[H
UCA. Managua, Nicaragua.
=HYNHZ(SIVYLZ -" 1PTtULa=LNH -" :KLYOpSS 2 ( WSHZTH WYV[LPU PZVSH[LK MYVT IYVÛ
shrimp (Penaeus californiensis /VSTLZ ÔPJO LUOHUJLZ [OL HJ[P]H[PVU VM WYVWOLUVSV_PKHZL
Z`Z[LTI`NS\JHU+L]LSVWTLU[HSHUK*VTWHYH[P]L0TT\UVSVN`!
=HYNHZ(SIVYLZ-`.@LWPa7SHZJLUJPH)L[H.S\JHU)PUKPUN7YV[LPU).)7HUKP[Z9VSLPU
:OYPTW0TT\UL9LZWVUZL(X\HJ\S[\YL !
=VNHU*3HUK(-9V^SL`,MMLJ[ZVMZOLSSKPZLHZLZÙKYVTLVU[OLOHLTVJ`[LZHUKO\TVYHS
defences of the edible crab, Cancer pagurus(X\HJ\S[\YL!
53
World Organisation for Aniamal Health (OIE). 4HU\HS VM +PHNUVZ[PJ ;LZ[Z MVY (X\H[PJ
(UPTHSZ-PM[OLKP[PVU60,7HYPZ-YHUJL W
Montajes en Fresco:
3PNO[ULY += ( OHUKIVVR VM ZOYPTW WH[OVSVN` HUK KPHNUVZ[PJ WYVJLK\YLZ MVY KPZLHZLZ VM
J\S[\YLKWLUHLPKZOYPTW>VYSKHX\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3(
4VYHSLZ*V]HYY\IPHZ 4 : ,UMLYTLKHKLZ KLS JHTHY}U +L[LJJP}U TLKPHU[L HUmSPZPZ LU
MYLZJVLOPZ[VWH[VSVNxH,KP[VYPHS;YPSSHZ:(KL*=(]9xV*O\Y\I\ZJV*VS7LKYV4HYxH
(UH`H4t_PJV+-7YPTLYHLKPJP}U0:)5!
4VYHSLZ*V]HYY\IPHZ 4 : LU WYLUZH ,UMLYTLKHKLZ KLS JHTHY}U +L[LJJP}U TLKPHU[L
HUmSPZPZLUMYLZJVLOPZ[VWH[VSVNxH,KP[VYPHS;YPSSHZ:(KL*=(]9xV*O\Y\I\ZJV*VS
7LKYV4HYxH(UH`H4t_PJV+-:LN\UKHLKPJP}U
54
C. R. Pantoja y D.V. Lightner Enfermedades Virales
55
Capítulo 2
Enfermedades Virales
Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner

Expertos en Patología Acuática
México / USA
Introducción
En poco menos de 40 años, la camaronicultura mundial se ha desarrollado desde
sus inicios a nivel experimental hasta volverse una industria con ingresos de billones de
dólares, proveyendo de empleo, directa e indirectamente, a cientos de miles de personas.
Desde 1970 hasta 1990, la industria dependía completamente de la captura de
postlarvas silvestres o de postlarvas producidas a partir de reproductores capturados en
el océano. La mayoría de las veces, estos animales eran capturados cerca de la región en
donde serían cultivados. Los sistemas de cultivo eran relativamente simples, se usaban tasas
muy altas de recambio de agua y las medidas de bioseguridad eran mínimas o no existentes.
En esa época se sabía de muy poco de las enfermedades del camarón y todavía menos
sobre los mecanismos de defensa -humoral y celular- especialmente contra agentes virales.
Había muy pocos especialistas en enfermedades de camarón y la capacidad de diagnóstico
era muy pequeña en la mayoría de las regiones. El uso de antibióticos y agentes químicos
era práctica común, tanto en los laboratorios de producción de postlarvas como en las
granjas. No fue sino hasta 1987, cuando el aumento explosivo de la industria camaronícola
M\LHJVTWH|HKVKLWHUKLTPHZ]PYHSLZX\LYmWPKHTLU[LZLW\ZVKLTHUPÄLZ[VX\LSHZ
enfermedades ocasionadas por virus eran una de las mayores amenazas para la industria.
También rápidamente se puso en evidencia que la dispersión de esas enfermedades fue el
resultado del traslado sin control tanto de postlarvas como de reproductores.
La industria camaronícola del presente ha sido transformada por la necesidad de un
mejor control de las enfermedades. Como resultado de los cambios rápidos que comenzaron
a principios de los 90’s, la dependencia de la industria sobre el suministro de postlarvas
silvestres, o de postlarvas derivadas de reproductores silvestres, ha disminuido notablemente.
Desde hace algunos pocos años hasta la fecha, poblaciones domesticadas de Penaeus
vannamei (también llamado Litopenaeus vannamei) han reemplazado a P. monodon como
la principal especie cultivada y se encuentran ya en progreso varios programas para la
domesticación de otras especies. Se han descrito ya muchas enfermedades importantes y
aunque se han desarrollado métodos para su diagnóstico, existen todavía algunos problemas
relativos a su implementación y estandarización. Las medidas de bioseguridad aplicadas a
los sistemas intensivos de cultivo se vuelven más comunes cada día. El uso de probióticos
se ha vuelto también común tanto en los laboratorios de producción de postlarvas como
LUNYHUQHZ`ZLPU]LZ[PNHU`HTLKPKHZZVÄZ[PJHKHZKLJVU[YVSIPVS}NPJV*VTVYLZ\S[HKV
de esto, el uso de antibióticos ha disminuido y se ha vuelto más responsable. Estudios de
biología molecular están ayudando a lograr un mejor entendimiento de la relación entre
el camarón y los agentes patógenos que lo atacan. El resultado de todos estos avances ha
sido un incremento continuo de la producción mundial de camarón cultivado.
En el futuro, se espera que la industria camaronícola mundial tenga acceso fácil a una
variedad de especies domesticadas de camarón, genéticamente mejoradas y libres de los
patógenos más importantes. Métodos para el diagnóstico de estas enfermedades, tanto
en el laboratorio como en el campo, estarán disponibles en el mercado en forma de kits
y se mejorarán los mecanismos para su estandarización. De la misma manera se espera
una mejora en los métodos de bioseguridad, los cuales serán aplicados en todos los tipos
de sistemas de cultivo, aunque aquellos con mayor control (sistemas intensivos y super-
intensivos) serán más competitivos que los sistemas más tradicionales y extensivos. En
NLULYHSSHLÄJPLUJPHLUSHWYVK\JJP}U`LSKLZHYYVSSVKLTt[VKVZPU[LUZP]VZKLJ\S[P]VZL
verán facilitados a través del mejor entendimiento del camarón, sus patógenos, la ecología
microbiana y el uso de agentes antibacterianos y antivirales ambientalmente seguros.
2.1 Principales enfermedades y métodos de diagnóstico

Las enfermedades que afectan a los camarones de cultivo incluyen síndromes con
etiologías infecciosas y no infecciosas (Tabla 1 y Tabla 2). Dentro de las enfermedades
infecciosas están aquellas ocasionadas por virus, bacterias, (incluyendo ricketsias), hongos,
protozoarios y parásitos metazoarios y entre las no infecciosas están las de impactos
ambientales, desbalances nutricionales, agentes tóxicos y desórdenes genéticos.
7YVJLKPTPLU[VZKLKPHNU}Z[PJVWHYHSHKL[LJJP}UKLHNLU[LZWH[}NLUVZLZWLJxÄJVZ
En el caso del camarón, se cuenta con herramientas o procedimientos de diagnóstico
de dos tipos.
Métodos clásicos. Dependiendo del tipo de enfermedad, estos métodos pueden ser lo
Z\ÄJPLU[LTLU[LLZWLJxÄJVZ`VZLUZP[P]VZWHYHHSJHUaHY\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]V
/PZ[VYPHSKLSJHZV
(WHYPLUJPHL_[LYUH`ZPNUVZJSxUPJVZ
,_mTLUKPYLJ[VHSTPJYVZJVWPV
4PJYVIPVSVNxHHPZSHTPLU[V`J\S[P]V
/PZ[VSVNxH`WY\LIHZOPZ[VX\xTPJHZ
4PJYVZJVWxHLSLJ[Y}UPJH
Métodos moleculares. *\HUKVSVZTt[VKVZJSmZPJVZUVZVUSVZ\ÄJPLU[LTLU[LLZWLJxÄJVZ
y/o sensitivos, es necesario complementarlos con uno o más de los siguientes métodos
moleculares.
7Y\LIHZZLYVS}NPJHZJVUHU[PJ\LYWVZTVUVJSVUHSLZVWVSPJSVUHSLZ
V (U[PJ\LYWVZÅ\VYLZJLU[LZ(-
o ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay).
:VUKHZNLUt[PJHZJVUHNLU[LSVJHSPaHKVYYHKPVHJ[P]VVUVYHKPVHJ[P]V
o Hibridaciones tipo “dot blot” (en membrana de nylon).
o Hibridaciones tipo in situ (en cortes histológicos).
(TWSPÄJHJP}U KL mJPKVZ U\JSLPJVZ (+5 V (95 WVY TLKPV KL SH YLHJJP}U LU
JHKLUHKLSHWVSPTLYHZH7*9WVYZ\ZZPNSHZLUPUNSLZ
58
Tabla 1. Enfermedades de mayor importancia en la camaronicultura del

0UKV7HJPÄJV`,Z[LHZPm[PJV
Enfermedades de origen
Enfermedades de origen viral Otras enfermedades
bacteriano/fúngico
WSSV (White spot syndrome virus Vibriosis Epicomensales
disease) - sistémica/entérica - Leucothrix mucor
- vibriosis larvaria - Protozoarios
YHV (Yellow head virus disease) peritrichidos
BMN (Baculoviral midgut gland 9PJRL[[ZPH
necrosis virus disease) Gregarinidos
MBV (Monodon baculovirus

disease)
IHHNV (Infectious hypodermal
and hematopoietic necrosis virus
disease)
HPV (Hepatopancreatic parvovirus Microsporidios
disease)
IMNV (Infectious myonecrosis virus Micosis larvaria Desbalances nutricionales
disease)
-\ZHYPVZPZ Síndromes tóxicos
Síndromes ambientales
Tabla 2. Enfermedades de mayor importancia en la camaronicultura de las Américas.
Enfermedades de origen
Enfermedades de origen viral Otras enfermedades
bacteriano/fúngico
WSSV (White spot syndrome virus Vibriosis Epicomensales
disease) - sistémica/entérica. - Leucothrix mucor
- vibriosis larvaria - Protozoarios
TSV (Taura syndrome virus disease) peritrichidos
BP (Baculovirus penaei disease) NHP (Necrotizing he-
patopancreatitis disease) Gregarinidos
YHV (Yellow head virus disease)
IHHNV (Infectious hypodermal Espiroplasmosis
and hematopoietic necrosis virus
disease)
HPV (Hepatopancreatic parvovirus Microsporidios
disease)
IMNV (Infectious myonecrosis virus Micosis larvaria Desbalances nutricionales
disease)
PvNV (Penaeus vannamei nodavi- -\ZHYPVZPZ Síndromes tóxicos
rus disease)
Síndromes ambientales
Síndrome de Zoea II
59
Muestreo
Muestreo aleatorio
Cuando se requiera muestrear al azar a una población para determinar el estado de
salud o la prevalencia de algún patógeno, el número de camarones que será necesario
colectar va a depender de la prevalencia estimada de dicho patógeno y del nivel
LZ[HKxZ[PJVKLJVUÄHUaHKLZLHKV,ULZ[LHZWLJ[VSH;HISHLZ\ZHKHJVUMYLJ\LUJPH
como una guía para determinar el tamaño muestral.
Muestreo no aleatorio
En situaciones en las que los camarones presentan claramente signos externos de
la enfermedad, el cálculo de la prevalencia es más fácil y la información provista en
SH;HISH W\LKL ZLY \ZHKH WHYH ]LYPÄJHY LS [HTH|V T\LZ[YHS ` LS UP]LS LZ[HKxZ[PJV KL
JVUÄKLUJPH
Seleccione por lo menos 10 camarones que muestren signos característicos de la
enfermedad de la que se sospecha o bien alguna otra anormalidad.
Para asegurar un diagnóstico acertado, las muestras deben de ser procesadas de
inmediato, o a la brevedad posible, de acuerdo al procedimiento o procedimientos que
hayan sido seleccionados. Los especímenes deberán ser preservados con las soluciones
ÄQHKVYHZHKLJ\HKHZVIPLULTWHJHKHZLUOPLSVVJVUNLSHKVZKLU[YVKL\UJVU[LULKVY
estéril (por ejemplo, bolsas de plástico).
Tabla 3. Tamaño muestral basado en una estimación de la prevalencia del patógeno en una
WVISHJP}UKLJHTHY}UTVKPÄJHKVHWHY[PYKL(TVZ
Tamaño de la Tamaño muestral requerido a una prevalencia estimada de:

población 2% 5% 10% 20% 30% 40% 50%
50 50 20 10 7 5 2
100 75 45 11 9 7 6
250 110 50 25 10 9 8 7
500 55 26 10 9 8 7
1,000 140 55 27 10 9 9 8
1,500 140 55 27 10 9 9 8
2,000 145 60 27 10 9 9 8
4,000 145 60 27 10 9 9 8
10,000 145 60 27 10 9 9 8
>/=100,000 150 60 10 9 9 8
Preparación de las muestras.

Al momento de tomar las muestras, también es necesario recabar cierta información
y entregarla al laboratorio que examinará los especímenes. Esto, con el objeto de
facilitar un diagnóstico acertado así como también para documentar apropiadamente la
LWPaVV[PVSVNxHKLSHLUMLYTLKHKSHKPZ[YPI\JP}UNLVNYmÄJH`SHZLZWLJPLZKLJHTHY}U
afectadas. La información recabada debe incluir por lo menos lo siguiente:
60
Historial del caso. Una explicación breve del porqué se está enviando las
muestras. Esto deberá incluir una descripción de las anormalidades observadas
tales como mortandades, crecimiento lento, comportamiento anormal de nado o
de alimentación, lesiones externas, cambios de coloración en el exoesqueleto, etc.
Si no hay problemas aparentes y las muestras se están colectando para hacer una
evaluación de rutina, esto también se debería de mencionar.
Especie. Especie (o especies) de camarón
Estadío de vida, en el caso de muestras de larvas.
Origen de cada grupo de muestras.,Z[VZLYLÄLYLHSWHxZKLVYPNLUUVTIYLKLSH
granja o laboratorio, número de tanque o estanque, etc.
FechaLUX\LSHT\LZ[YHM\LJVSLJ[HKH`ÄQHKH
Fijación. 4t[VKV KL ÄQHJP}U V LS UVTIYL KL SH ZVS\JP}U ÄQHKVYH WVY LQLTWSV
Davidson, alcohol etílico al 90-95%, glutaraldehído, formalina al 10%, congelado,
etc.).
7YLWHYHJP}UKLT\LZ[YHZWHYHHUmSPZPZOPZ[VS}NPJV
Las muestras destinadas para análisis histológico deberán ser de camarones vivos.
3VZ JHTHYVULZ `H T\LY[VZ ZVU PUZLY]PISLZ 3VZ JHTHYVULZ KLILYmU KL ZLY ÄQHKVZ WVY
medio de inyección y/o inmersión cuando aun se encuentren vivos.
Tabla 4. Esquema generalizado para la asignación de un valor numérico cualitativo a los

grados de severidad de infecciones, infestaciones y síndromes.
Grado de
Observaciones clínicas o histológicas
severidad
No se observan signos de infección por el agente patógeno, parásito o epicomensal.
0
No se observan lesiones características del síndrome.
El patógeno, parásito o epicomensal se encuentra presente pero en números o
cantidades que apenas sobrepasan los límites mínimos de detección.
Se observan lesiones características del síndrome pero la manifestación de la
1
¸LUMLYTLKHK¹LZPUZPNUPÄJHU[L
3HWYVNUVZPZLZKLLMLJ[VPUZPNUPÄJHU[LL_JLW[VLUJHZVZ[LTWYHUVZKLPUMLJJP}U
por un patógeno altamente virulento.
El patógeno, parásito o epicomensal se encuentra en cantidades pequeñas o
moderadas.
Se observan lesiones ligeras o moderadas, características del síndrome.
2
La prognosis es de posibles pérdidas en la producción o incrementos ligeros en
la mortandad si no se aplica ningún tratamiento (en el caso de que la enfermedad
sea tratable).
Se observan cantidades moderadas del patógeno, parásito o epicomensal.
Se observan lesiones moderadas a severas, características del síndrome.

La prognosis es de un efecto potencialmente letal si no se aplica ningún
tratamiento (en el caso de que la enfermedad sea tratable).
Se observan grandes cantidades del patógeno, parásito o epicomensal.
4
Se observan lesiones severas, características del síndrome. Prognosis letal.
61
4\LZ[YHZ KL SHY]HZ V WVZ[SHY]HZ [LTWYHUHZ -PQHY WVY PUTLYZP}U LU \U ]VS\TLU
KL ZVS\JP}U ÄQHKVYH HWYV_PTHKHTLU[L ]LJLZ SH KLS ]VS\TLU KL SH T\LZ[YH
(proporción de 10:1). En cuanto el tamaño del animal lo permita, el cefalotórax de
las postlarvas deberá ser pinchado con aguja de jeringa de insulina para facilitar la
WLUL[YHJP}UKLSÄQHKVY7VZ[LYPVYTLU[LÄQHYWVYPUTLYZP}UWVY\USHWZVKLH
horas.
Grados de severidad
Una forma de documentar de manera semicuantitativa las observaciones que servirán
para alcanzar un diagnóstico, es a través de la asignación de grados de severidad. Dicha
asignación puede referirse a una lesión en particular o al proceso infeccioso en general.
La Tabla 4 ilustra el criterio que se utiliza para la asignación de los grados de severidad.
El valor numérico asignado también es útil para determinar tendencias y para la toma de
decisiones de manejo tales como: cuándo aplicar un tratamiento, cuándo cosechar, etc.
2.2 Virus de la necrosis hipodérmica y hematopoiética infecciosa

0UMLJ[PV\ZO`WVKLYTPJHUKOLTH[VWPL[PJULJYVZPZ]PY\Z0//5=
Nombre de la enfermedad
Necrosis hipodérmica y hematopoiética infecciosa (enfermedad IHHN); síndrome
de la deformidad y enanismo (“runt deformity syndromL¹V9+:=PY\ZKLSHULJYVZPZ
hipodérmica y hematopoiética infecciosa (IHHNV).
Agente
IHHNV es un pequeño parvovirus (diámetro promedio de 22 nm) constituido por
una cadena sencilla de ADN.
Métodos preferidos actualmente para la detección del patógeno

/PIYPKHJP}Uin situ con sondas marcadas con DIG (BS4.5, BA402) u otras sondas
igualmente adecuadas aplicadas a:
4\LZ[YHZOPZ[VS}NPJHZÄQHKHZLUZVS\JP}UKL+H]PKZVU(-(VLUMVYTHSPUHHS
10%.
4\LZ[YHZOPZ[VS}NPJHZ[VTHKHZKLZW\tZKLHKxHZKLWV[LUJPHTPLU[VKL
la enfermedad.
- Biopsias de apéndices tomados de camarones subadultos o reproductores.
/PIYPKHJP}U LU MVYTH[V KL ¸Dot blot” con sondas marcadas con DIG (BS4.5,
BA402), u otras sondas igualmente adecuadas
/PZ[VSVNxHKLY\[PUHJVU[PUJP}U/ ,LULZWLJxTLULZX\LT\LZ[YLUZPNUVZKLSH
enfermedad de IHHN.
(WSPJHKVHT\LZ[YHZOPZ[VS}NPJHZÄQHKHZLUZVS\JP}UKL+H]PKZVU(-(
(WSPJHKVHT\LZ[YHZOPZ[VS}NPJHZ[VTHKHZKLZW\tZKLKxHZKLKLZHYYVSSV
de la enfermedad.
7*9 \ZHUKV OLTVSPUMH \ OVTVNLUPaHKVZ KL [LQPKV [VTHKVZ KL JHTHYVULZ
sospechosos u otro tipo de muestras.
62
9HUNVNLVNYmÄJVKLKPZ[YPI\JP}U`LZWLJPLZHMLJ[HKHZ
9HUNVNLVNYmÄJV
(TWSPHTLU[LKPZ[YPI\PKVLUPUZ[HSHJPVULZKLJ\S[P]VKL(TtYPJH`(ZPHPUJS\`LUKV!
- América: sureste de los Estados Unidos, México, América Central, Ecuador,
Perú, Brasil y numerosas islas del Caribe.
7HJxÄJV*LU[YHS!/H^HP.\HT;HOP[x`5\L]H*HSLKVUPH
(ZPHL0UKV7HJxÄJV!:PUNHW\Y-PSPWPUHZ;HPSHUKPH4HSHZPHL0UKVULZPH
:L WYLZ\TL X\L 0//5 LZ LUKtTPJV LU JHTHYVULZ WLULPKVZ ZPS]LZ[YLZ KLS 0UKV
7HJxÄJV"OHZPKVKL[LJ[HKV[HTIPtULUJHTHYVULZZPS]LZ[YLZKLS,J\HKVYSHJVZ[H
occidental de Panamá y la costa occidental de México.
:L OH KLTVZ[YHKV SH L_PZ[LUJPH KL KPMLYLUJPHZ H UP]LS KL NLUVTH LU[YL JLWHZ KL
0//5=KLKPZ[PU[HZYLNPVULZNLVNYmÄJHZ;HUN2-1L[HS(ZPTPZTVZLOH
reportado la existencia de la integración de una porción del genoma de IHHNV al
NLUVTHKL\UHWVISHJP}UZPS]LZ[YLKL7LUHL\ZTVUVKVULUÍMYPJH;HUN2-1
Lightner 2006). En el caso del IHHNV integrado al genoma del camarón, la porción
integrada no es infecciosa.
Especies afectadas
:L OHU VIZLY]HKV PUMLJJPVULZ UH[\YHSLZ LU! Penaeus stylirostris, P. vannamei, P.
occidentalis, P. californiensis, P. monodon, P. semisulcatus y P. japonicus.
+LIPKVHX\LV[YHZLZWLJPLZKLJHTHYVULZWLULPKVZP. setiferus, P. duorarum, y P.
aztecus) han podido ser infectadas en condiciones de laboratorio, es probable que
también ocurran infecciones naturales en otras especies.
,ZWLJPLZ[HSLZJVTVP. indicus y P. merguiensis parecen ser refractarias a IHHNV.
(WHYLU[LTLU[LSVZTPLTIYVZZVIYL]P]PLU[LZKLWVISHJPVULZX\LOHUZPKVPUMLJ[HKHZ
por IHHNV pueden volverse portadores del virus de por vida y transmitirlo
a su progenie y a otras poblaciones por medio de transmisión de tipo vertical y
horizontal.
Signos clínicos de importancia diagnóstica
P. stylirostris
IHHN es una enfermedad de tipo agudo que puede ocasionar altas mortandades
en juveniles de esta especie. Larvas y postlarvas infectadas verticalmente no se
T\LZ[YHULUMLYTHZZPUVOHZ[HHSJHUaHYHWYV_PTHKHTLU[LLSLZ[HKxVKL73V\UWVJV
después. Una vez alcanzada esta edad, es posible observar signos externos, los cuales
son seguidos por mortandades masivas. En animales infectados horizontalmente, el
período de incubación y la severidad de la infección dependen, hasta cierto punto, del
tamaño/edad, siendo los juveniles pequeños los más severamente afectados. Los adultos
raramente presentan signos de la enfermedad o mortandades.
3VZZPNUVZL_[LYUVZKLSHLUMLYTLKHKUVZVULZWLJxÄJVZKL0//5WLYVLUSHL[HWH
aguda de la infección, los juveniles de P. stylirostris muestran una marcada reducción
en el consumo de alimento, lo cual es seguido por cambios en el comportamiento y la
apariencia. Durante la fase aguda, se ha observado que los camarones de esta especie
UHKHUSLU[HTLU[LOHJPHSHZ\WLYÄJPLLUKVUKLZLX\LKHUJVTWSL[HTLU[LX\PL[VZZL
voltean con el vientre hacia arriba y luego se hunden lentamente hasta el fondo del
63
tanque. Se ha visto que los camarones que muestran esta conducta pueden hacerlo
por horas hasta que se vuelven demasiado débiles para continuar o hasta que son
canibalizados por sus congéneres más sanos. En este estadío de la infección, P. stylirostris
puede llegar a presentar una coloración blanquecina con manchas de color crema, lo
J\HSSLKHHSJHTHY}U\UHHWHYPLUJPHTV[LHKH,Z[LWH[Y}UTV[LHKVUVLZKLÄUP[P]V`
tiende a desaparecer un poco más adelante. También se ha observado frecuentemente
que en P. stylirostris y en P. monodon infectados por IHHNV, se tiende a adquirir una
coloración azulosa bastante distintiva y una opacidad de la musculatura abdominal.
Si la enfermedad progresa hasta alcanzar una fase crónica, P. stylirostris también
puede sufrir de lo que se conoce como síndrome de las deformaciones y el enanismo.
P. vannamei
En esta especie, IHHN es típicamente una enfermedad de tipo crónico. El síndrome
de las deformidades y el enanismo (“Runt Deformity Syndrome¹V9+:X\LHMLJ[HH
LZ[H LZWLJPL OH ZPKV SPNHKV H 0//5= ;xWPJHTLU[L SVZ Q\]LUPSLZ HMLJ[HKVZ WVY 9+:
exhiben rostros doblados o deformes, antenas arrugadas, caparazón áspero o rugoso,
`V[YHZKLMVYTPKHKLZ3HZWVISHJPVULZKLQ\]LUPSLZJVU9+:L_OPILU[xWPJHTLU[L\UH
distribución de tallas relativamente amplia con una proporción de tallas pequeñas
LUHUVZ T\JOV TH`VY KL SV UVYTHS ,S JVLÄJPLU[L KL ]HYPHJP}U *=$3H KLZ]PHJP}U
estándar dividida entre el promedio de diferentes grupos de tallas dentro de una población
KHKHKL\UHWVISHJP}UJVU9+:LZ[xWPJHTLU[LTH`VYKL`W\LKLPUJS\ZVSSLNHYHS
50%, mientras que en poblaciones de juveniles de P. vannamei libres de IHHNV (y por
SV[HU[VZPU9+:SVZ*=ZZVUKLLU[YL`
Procedimientos de diagnóstico en casos de enfermedad
Diagnóstico presuntivo
7YLZLUJPHKLZPNUVZJSxUPJVZ
/PZ[VYPHSKLSHZPUZ[HSHJPVULZKLJ\S[P]VKLSHZLZWLJPLZJ\S[P]HKHZVKLSHYLNP}U
que indique la posibilidad de infección por IHHNV.
4t[VKVZWHYHSHKL[LJJP}U`LSKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VKLS]PY\Z
( [YH]tZ KL SVZ ZPN\PLU[LZ Tt[VKVZ LZ WVZPISL HSJHUaHY \U KPHNU}Z[PJV KLÄUP[P]V
tanto a nivel individual como a nivel de poblaciones:
- Histopatología directa.
- Potenciamiento seguido por histopatología o pruebas de hibridación in situ.
- Bioensayos utilizando P. stylirostris SPIYL KL WH[}NLUVZ LZWLJxÄJVZ ¸:WLJPÄJ
Pathogen Free¹:7-JVTVSHLZWLJPLPUKPJHKVYH
- Pruebas con sondas genéticas, u otras sondas adecuadas en los siguientes
formatos:
o Hibridación en “Dot-Blot”.
o Hibridación “in situ” (histología).
,S 7*9 [HTIPtU W\LKL ZLY \[PSPaHKV WHYH SH KL[LJJP}U KLS ]PY\Z LU T\LZ[YHZ KL
hemolinfa o de tejidos tomadas de camarones sospechosos.
64
Método de histopatología directa para la detección de IHHNV

Se basa en la demostración histológica de cuerpos de inclusión intranucleares tipo
Cowdry A (CAIs), bastante prominentes, eosinofílicos (en preparaciones de especímenes
ÄQHKVZJVUZVS\JPVULZX\LJVU[LUNHUmJPKVHJt[PJV[HSLZJVTVSHZVS\JP}UKL+H]PKZVU
(-(`SHZVS\JP}UKL)V\PU`X\LOHUZPKV[L|PKHZJVU/ ,SVZJ\HSLZHZ\]LaLZ[mU
YVKLHKVZ KL \U HUPSSV KL JYVTH[PUH KLU[YV KL UJSLVZ OPWLY[YVÄHKVZ LU JtS\SHZ KL
tejidos de origen ectodérmico (branquias, epidermis, epitelio hipodermal de la parte
anterior y posterior del tracto digestivo, cordón nervioso ventral y ganglios asociados)
y mesodérmico (órganos hematopoiéticos, glándula antenal, gónadas, órgano linfoide,
tejido conectivo y músculo estriado).
*\HUKV ZVU [L|PKVZ JVU LS Tt[VKV KL -L\SNLU LZ[VZ J\LYWVZ KL PUJS\ZP}U ZVU
de coloración variable dependiendo del estado de virogénesis y de la cantidad de
ADN presente. Por lo tanto, los CAIs en desarrollo pueden ser negativos utilizando la
[PUJP}U KL -L\SNLU TPLU[YHZ X\L HX\LSSVZ X\L OHU HSJHUaHKV SH THK\YLa TVZ[YHYmU
una reacción positiva. Durante los estadíos larvales de mysis o de postlarva temprana,
es posible encontrar CAIs dentro de las células del epitelio del intestino. Es posible
encontrar cuerpos de inclusión CAIs dentro de las células epiteliales de los túbulos del
hepatopáncreas, pero esto ocurre muy raramente y es por lo general acompañado de
infecciones severas en otros de los tejidos ya mencionados.
7Y\LIHZKLOPIYPKHJP}UJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZWHYH0//5=
o Hibridación tipo “Dot blot” usando sondas genéticas no radioactivas

marcadas con DIG
En el procedimiento tipo “Dot-blot” para el diagnóstico de IHHNV, las muestras de
tejido homogenizado son inmovilizadas por adsorción en una membrana de nitrocelulosa
o nylon y luego hibridadas con sondas genéticas de ADN (por ejemplo la sonda BS4.5 u
V[YHZLZWLJxÄJHZWHYH0//5=THYJHKHZJVU+0.KPNV_`NLUPUK<;7+LZW\tZKL
la hibridación y de la reacción de revelado, las muestras de tejido positivas se observan
marcadas por la presencia de un precipitado de color azul-negro o púrpura, el cual varía
en intensidad dependiendo de la concentración del virus en la muestra.
La presencia de manchas de color rosado o salmón, son debido a la reacción no
LZWLJxÄJHKLSHZVUKHJVUJVTWVULU[LZKLZJVUVJPKVZLULS[LQPKVKLSJHTHY}U7HYH
evitar confusión en la interpretación de los resultados de esta prueba, se deberán incluir
ZPLTWYL SVZ JVU[YVSLZ HWYVWPHKVZ;HSLZ W\LKLU ZLY! [LQPKV KL JHTHY}U :7- ZWLJPÄJ
pathogen free) como control negativo, tejido de camarón IHHNV positivo (control
positivo) y un grupo de muestras cuya condición IHHNV sea desconocida, así como un
control negativo y uno positivo sujetos a una prueba de hibridación sin sonda, únicamente
expuestos al anticuerpo y al substrato de revelado.
o Hibridación in situ
La prueba de hibridación in situ para la detección de IHHNV (en cualquier fase de
SHPUMLJJP}UW\LKLHWSPJHYZLZPUUPUNUWYVISLTHHLZWLJxTLULZKLJHTHY}UÄQHKVZLU
MVYTHSPUHVZVS\JP}UKL+H]PKZVU(-(ÌH|HKVZLUWHYHÄUH7VYTLKPVKLLZ[HWY\LIH
es posible observar la formación de un precipitado azul-negro o púrpura en cualquier
lugar del cuerpo del camarón en donde el ADN del virus IHHN (y presumiblemente
T(95ZLLUJ\LU[YLWYLZLU[L
65
En una prueba típica de hibridación in situ, las células con CAIs muestran una
intensa reacción nuclear a la sonda, especialmente en la cromatina marginada o en la
Z\WLYÄJPLPU[LYUHKLSHTLTIYHUHU\JSLHY4LKPHU[LLZ[HWY\LIHZLOHKLTVZ[YHKVJVU
frecuencia, que los núcleos picnóticos y núcleos de células aparentemente normales
también pueden contener ácidos nucleicos de IHHNV.
Muchas células positivas para IHHNV también muestran densas acumulaciones
citoplasmáticas del virus. De la misma manera, se puede observar con frecuencia
una reacción positiva a la sonda asociada a los fragmentos de células necróticas en el
debris extracelular y en el contenido de los fagolisosomas de los fagocitos del corazón,
branquias y otros tejidos.
Comúnmente, la porción no celular de la cutícula del camarón (infectado o no
WVY0//5=[VTH\UHJVSVYHJP}UHa\SKLIPKVHSHYLHJJP}UUVLZWLJxÄJHKLSHZVUKH
Esta coloración azul es debida a la presencia de la quitina, un polímero complejo
de n-acetilglucosamina, el cual se adhiere (tal vez electrostáticamente) al ADN de la
sonda.
7YVJLKPTPLU[VZUVSL[HSLZWHYHLSHUmSPZPZKLYLWYVK\J[VYLZ
Animales reproductores de las especies P. vannamei, P. stylirostris y P. monodon,
pueden ser examinados individualmente para determinar la presencia de IHHNV por
medio de una biopsia no letal.
Muestra
La muestra consiste de un apéndice, como el segundo o tercer pleópodo, un proceso
branquial, o uno de los maxilípedos. Después de obtener el apéndice, este debe ser
preservado ya sea por congelación, en solución de Davidson o en alcohol etílico al 95%
`ÄUHSTLU[LWYVJLZHKVKLHJ\LYKVHSTt[VKVKLKPHNU}Z[PJVKLWYLMLYLUJPH
Las muestras de hemolinfa deben de ser procesadas ya sea inmediatamente
V WYLZLY]HKHZ WVY JVUNLSHJP}U V ÄQHJP}U LU HSJVOVS HS ` Z\IZLJ\LU[LTLU[L
procesadas.
Pruebas de diagnóstico
+VZKLSHZWY\LIHZTmZHWYVWPHKHZWHYHL_HTPUHYLZ[L[PWVKLIPVWZPHZZVU7*9L
hibridación in situJVUSHZVUKHNLUt[PJH):LZWLJxÄJHWHYH0//5=\V[YHZZVUKHZ
para IHHNV). Aunque menos sensitiva, la hibridación en formato “Dot blot” también
puede utilizarse para analizar este tipo de muestras.
Histología de rutina
El diagnóstico de esta enfermedad está basado en la presencia de inclusiones
intranucleares (CAI). El corte histológico del apéndice es hecho en el plano longitudinal
medio para de esta manera poder proveer una panorámica tan amplia como sea posible
KLSVZ[LQPKVZWYLZLU[LZLWPKLYTPZZ\IJ\[PZ`ÄIYHZULY]PVZHZ,SJVY[LYLZ\S[HU[LLZ
examinado para determinar la presencia de inclusiones intranucleares tipo CAI (las cuales
HWHYLJLU JVTV J\LYWVZ LSVUNHKVZ LU SHZ JtS\SHZ KL SHZ ÄIYHZ ULY]PVZHZ 4LKPHU[L
esta técnica es posible detectar muchos de los animales infectados en una población
dada, sin embargo, se desconoce la sensibilidad del procedimiento y por lo tanto no es
YLJVTLUKHISLWHYHJLY[PÄJHYSHJVUKPJP}U:7-KL\UHWVISHJP}U
66
ENFERMEDADES DE ORIGEN VIRAL

IHHNV
-PN\YHP. stylirostris durante la fase aguda de

la enfermedad causada por IHHNV. Nótese el
patrón anormal de coloración en los segmentos
abdominales impartiéndole al camarón una
apariencia bandeada o moteada. Tanto el
camarón en la esquina superior izquierda
(solamente se observan los pleópodos) como
el de la esquina inferior derecha (solamente
se observa la cabeza), se encontraban
extremadamente letárgicos (postrados de lado) y
posiblemente moribundos.
-PN\YH :L T\LZ[YHU ]HYPVZ LQLTWSVZ KL

rostro deformados en P. vannamei con IHHNV
en fase crónica (síndrome de las deformaciones
y el enanismo). El rostro puede llegar a mostrar
desviaciones prácticamente en cualquier
dirección.
-PN\YH ,QLTWSVZ HKPJPVUHSLZ KL

deformaciones corporales en P. vannamei a
consecuencia de la enfermedad causada por
IHHNV (síndrome de las deformaciones y el
enanismo). Nótese la deformación del sexto
ZLNTLU[V HIKVTPUHS LU KL SVZ JHTHYVULZ
que se muestran.
67

IHHNV
-PN\YH -V[VTPJYVNYHMxH H IHQV H\TLU[V

de un corte histológico de un juvenil de P.
stylirostris en la etapa aguda de la enfermedad
causada por IHHNV (G4=grado severo). Corte
hecho a través del epitelio cuticular y el tejido
conectivo subcuticular, en la parte dorsal del
cuerpo, justo posterior al corazón. Se pueden
observar numerosas células necróticas con
núcleos picnóticos o con cuerpos de inclusión
intranucleares eosinofílicos (inclusiones de
*V^KY` [PWV ( V *(0 3HZ ÅLJOHZ ZL|HSHU
HSN\UVZ LQLTWSVZ ;PUJP}U" / , KL 4H`LY
)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U?
-PN\YH -V[VTPJYVNYHMxH KL \UH SHTLSH

branquial mostrando tres células adyacentes con
cuerpos de inclusión intranuclear de IHHNV
[PWV *(0 KLU[YV KL SVZ UJSLVZ OPWLY[YVÄHKVZ
]HYPVZ LQLTWSVZ THYJHKVZ WVY SHZ ÅLJOHZ
;PUJP}U!/ ,KL4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U
?
68

IHHNV
-PN\YH 9LZ\S[HKVZ KL \UH WY\LIH KL

hibridación en formato de punto-mancha (“Dot-
blot”) para IHHNV. Se utilizó una sonda de ADN,
THYJHKHJVU+0.LZWLJxÄJHWHYHSHKL[LJJP}U
de IHHNV. Las muestras de hemolinfa positivas
presentan la deposición de un precipitado de
color azul o púrpura, mientras que las muestras
negativas no muestran precipitado alguno.
-PN\YH 9LZ\S[HKVZ KL \UH WY\LIH KL

hibridación in situ para IHHNV. Se utilizó una
ZVUKH KL (+5 THYJHKH JVU +0. LZWLJxÄJH
para la detección de IHHNV. Corte medio-sagital
de un juvenil de P. vannameiJVUZxUKYVTL9+:
9+:$ ¸Runt deformity syndrome” o Síndrome
de las deformaciones y el enanismo). Se puede
observar una reacción positiva de la sonda
en varios CAIs y restos celulares así como
también en la hemolinfa. Tinción: Bismarck
Brown y sonda genética marcada con DIG.
4HNUPÄJHJP}U?
69
2.3 Virus del Síndrome de la Mancha Blanca (White spot syndrome virus,
>::=
En la literatura (principalmente la referencia de los primeros reportes de esta
enfermedad) se hace mención a por lo menos tres “virus” dentro del complejo del
síndrome de la mancha blanca (WSSV). Hoy en día se sabe que todos son en realidad
el mismo agente. Estos son:
HHNBV $ ¸/`WVKLYTHS OLTH[VWVPL[PJ ULJYVZPZ IHJ\SV]PY\Z¹ IHJ\SV]PY\Z KL

la necrosis hematopoiética e hipodérmica); SEED= “Shrimp Explosive Epidermic
Disease” (enfermedad explosiva de la epidermis del camarón); “China virus disease”
(enfermedad del virus de la China).
RV-PJ = “Rod-shaped nuclear virus of Penaeus japonicus” (virus intranuclear
cilíndrico de Penaeus japonicus).
SEMBV = “Systemic ectodermal and mesodermal baculovirus” (baculovirus
sistémico del ectodermo y del mesodermo); enfermedad roja; enfermedad de las
manchas blancas.
WSBV = “White spot baculovirus” (baculovirus de la mancha blanca); síndrome de
la mancha blanca; enfermedad de la mancha blanca.
Hoy en día también se sabe que no se trata realmente de un baculovirus sino de un
virus completamente diferente, con características propias y para el cual se ha propuesto
la creación de una nueva familia que llevará el nombre de familia Nimaviridae.
WSSV es un virus de doble cadena de ADN; presenta forma elíptica a cilíndrica,
TLTIYHUH [YPSHTPUHY ` SVZ ]PYPVULZ [PLULU \U [HTH|V KL _ UT ,U
preparaciones teñidas negativamente, es posible observar la presencia de un apéndice o
“cola”. El genoma tiene un tamaño aproximado de 290 kbp, lo cual lo hace uno de los
virus más complejos que infectan al camarón.
Métodos preferidos actualmente para el diagnóstico de WSSV:
4t[VKVZOPZ[VS}NPJVZKLY\[PUHJVU[PUJP}UKLOLTH[V_PSPUHLVZPUH/ ,
Método rápido de campo para la tinción de improntas.
Hibridación in situJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZ
Hibridación en formato “dot blot¹JVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZ
Aplicación de anticuerpos monoclonales (MAbs) para la detección de WSSV en
MVYTH[VKL,30:(KLÅ\QVSH[LYHS*VUVJPKVLULSTLYJHKVJVTV¸:OYPTWSL®”.
7*9JVUWHYLZKLPUPJPHKVYLZLZWLJxÄJVZWHYHSHKL[LJJP}UKL>::=WVYLQLTWSV
método reconocido por la OIE-Organización Mundial de Sanidad Animal- y kits
comerciales).
9HUNVNLVNYmÄJV
El virus del síndrome de la mancha blanca ha sido reportado en las regiones
NLVNYmÄJHZTLUJPVUHKHZTmZHIHQV:PULTIHYNVKLIPKVHX\LSHPUK\Z[YPHKLWLUKL
mucho del transporte regional e internacional de camarón vivo, es muy posible que
70
la distribución de éste y otros virus sea mayor que lo indicado y probablemente en

expansión.
*OPUH1HW}U2VYLH;HPSHUKPH0UKVULZPH;HP^HU=PL[UHT4HSHZPH0UKPH`;L_HZ
(U.S.).
+LZW\tZ KL Z\ HWHYPJP}U LU LU LS UVYVLZ[L KL(ZPH LZ[L ]PY\Z ZL OH
dispersado rápidamente a través de la mayoría de las regiones cultivadoras de camarón
LU(ZPH`LS0UKV7HJxÄJV
,UUV]PLTIYLKL VJ\YYP}LSWYPTLYJHZVJVUÄYTHKVKL>::=LULSOLTPZMLYPV
occidental. En este caso, se trataba de camarones cultivados (P. setiferus) en una granja
del sur del estado de Texas. En la vecindad de la granja afectada se encontraba una planta
procesadora de camarón, la cual se sospecha pudo haber sido el foco de la infección, ya
que era uno de los mayores importadores y reprocesadores de camarón proveniente de
zonas afectadas por WSSV en Asia.
4mZHKLSHU[LHÄUHSLZKLSH|V VJ\YYP}LSWYPTLYJHZVJVUÄYTHKVKL>::=
en América Central. Hoy en día, la enfermedad se ha dispersado a México, Nicaragua,
/VUK\YHZ*VZ[H9PJH7HUHTm,J\HKVY7LY*VSVTIPH`)YHZPS
Especies afectadas
Infecciones naturales. Se han observado infecciones naturales en las siguientes especies:
Penaeus monodon, P. japonicus, P. chinensis (=orientalis), P. indicus, P. merguiensis, P.
setiferus, P. stylirostris y P. vannamei.
Infecciones experimentales. En estudios de laboratorio, una cepa de virus originaria
de Tailandia resultó altamente patogénica para las siguientes especies: P. vannamei, P.
stylirostris, P. aztecus, P. duorarum y P. setiferus.
5VZLOHVIZLY]HKVYLZPZ[LUJPHZPNUPÄJH[P]HLUUPUN\UHKLSHZLZWLJPLZKLJHTHYVULZ
peneidos.
Sígnos clínicos de importancia diagnóstica

:LOHYLWVY[HKVX\LK\YHU[LSHMHZLHN\KHKLSHLUMLYTLKHKSVZJHTHYVULZ[PLUKLU
a mostrar una reducción en el consumo de alimento, se vuelven letárgicos, la
cutícula se desprende fácilmente y presenta manchas blancas (de ahí el nombre
dado a la enfermedad) de aproximadamente 0.5 a 2.0 mm de diámetro, las cuales
son más conspicuas en la parte interna del caparazón. Es posible que las manchas
blancas representen depósitos anormales de sales de calcio en el epitelio cuticular.
,U T\JOVZ JHZVZ JVTV Z\JLKL JVU SVZ WLULPKVZ HTLYPJHUVZ SVZ JHTHYVULZ
moribundos presentan una coloración rosada a rojiza (de ahí el nombre de la
“enfermedad roja”) debido a la expansión de cromatóforos del epitelio cuticular. En
estos casos, la presencia de manchas blancas es limitada o ausente.
Las poblaciones de camarón que presentan estos signos clínicos tienden a exhibir
HS[HZ[HZHZKLTVY[HUKHKHJ\T\SHKHHSJHUaHUKVOHZ[HLSKLHKxHZKLZW\tZ
de que se observan los primeros signos.
Factores ambientales
:LOHYLWVY[HKVSHPUÅ\LUJPHTHYJHKHKLSH[LTWLYH[\YHKLSHN\HLUSHTHUPMLZ[HJP}U
KL SH LUMLYTLKHK =PKHS 64 L[ HS " .YHUQH *) L[ HS *HTHYVULZ
71
infectados con WSSV pueden permanecer asintomáticos a temperaturas arriba de 27ºC,

pero la enfermedad de hace evidente si la temperatura del agua disminuye.
La presencia de signos clínicos tal y como se describió anteriormente.
/PZ[VYPHS KL SHZ PUZ[HSHJPVULZ KL J\S[P]V KL SH LZWLJPL J\S[P]HKH V KL SH YLNP}U
que indique la posibilidad de que haya una infección por WSSV (por ejemplo, la
importación previa de camarones peneidos, ya sea PLs, reproductores, etc., desde
una región en donde recientemente haya habido un brote de WSSV).
+LTVZ[YHJP}UKLUJSLVZOPWLY[YVÄHKVZ`]HJ\VSPaHKVZ]PZPISLZLUWYLWHYHJPVULZV
improntas de tejido epitelial y tejido conectivo del estómago y/o de las branquias, en
camarones que presenten signos clínicos de la enfermedad tal y como se describió
anteriormente.
4t[VKVZWHYHSHKL[LJJP}U`LSKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]V
7HYHSSLNHYH\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VKL>::=ZLW\LKLU\[PSPaHYJ\HSX\PLYHKLSVZ
siguientes métodos:
Métodos histológicos de rutina

,SKPHNU}Z[PJVOPZ[VS}NPJVKL>::=LZ[mIHZHKVLUSHKLTVZ[YHJP}UKLPUJS\ZPVULZ
PU[YHU\JSLHYLZ WYVTPULU[LZ KL JVSVY LVZPU}ÄSV H IHZ}ÄSV WmSPKV JVU [PUJP}U KL
/ ,-L\SNLUWVZP[P]HZSHZJ\HSLZZLLUJ\LU[YHUKLU[YVKLUJSLVZOPWLY[YVÄHKVZ
comúnmente en las células epiteliales y el tejido conectivo y con menos frecuencia
en el epitelio de la glándula antenal, en las células parenquimales del órgano
SPUMVPKLLULS[LQPKVOLTH[VWVPt[PJV`LUSVZMHNVJP[VZÄQVZSVJHSPaHKVZKLU[YVKLS
corazón.
+\YHU[LSHMHZL[LTWYHUHKLKLZHYYVSSVKLSHLUMLYTLKHKSVZJ\LYWVZKLPUJS\ZP}U
de WSSV son eosinofílicos, centro-nucleares, rodeados de un halo claro y un anillo
de cromatina, lo cual los hace muy parecidos a los cuerpos de inclusión de IHHNV.
En este punto es difícil distinguir entre ambos, a menos que se utilize hibridación in
situJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZ
:PULTIHYNVK\YHU[LSHL[HWHTmZH]HUaHKHKLSHPUMLJJP}UKL>::=SVZ[LQPKVZ
infectados presentan cuerpos de inclusión más grandes y más desarrollados, no
muestran un halo y son de un color basofílico pálido, lo cual los hace fácilmente
distinguibles de los cuerpos de inclusión de IHHNV. Usualmente los núcleos de las
células infectadas por WSSV presentan una sola inclusión, pero ocasionalmente se
pueden llegar a observar inclusiones múltiples.
4t[VKVYmWPKVKLJHTWVWHYHSH[PUJP}UKLWYLWHYHJPVULZLUOTLKV
Este método esta basado en la visualización de cuerpos de inclusión intranucleares
KL>::=HWHY[PYKL[LQPKVZWYL]PHTLU[LÄQHKVZLUZVS\JP}UKL+H]PKZVU3HZWPLaHZ
KL [LQPKV ÄQHKV ZVU YLOPKYH[HKHZ [L|PKHZ JVU OLTH[V_PSPUHLVZPUH KL 4H`LY)LUUL[ `
examinadas con un microscopio compuesto.
,Z[L WYV[VJVSV M\L KPZL|HKV VYPNPUHSTLU[L LU *OPUH ` S\LNV TVKPÄJHKV LU SH
Universidad de Arizona para la detección rápida de WSSV. Con este método, el biólogo
72
encargado de cualquier laboratorio de producción de postlarvas o granja, puede

LMLJ[\HY\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VZPWYL]PHTLU[LZLOHMHTPSPHYPaHKVJVUSHHWHYPLUJPH
microscópica de las lesiones causadas por WSSV (como se observan por medio de
OPZ[VSVNxHJVU[PUJP}U/ ,
En el libro titulado “A handbook of pathology and diagnostic procedures for the
major diseases of penaeid shrimp” (Lightner 1996) es posible encontrar referencias
MV[VNYmÄJHZV[YVZTt[VKVZKLKPHNU}Z[PJV`\UHKLZJYPWJP}UKLSVZZPNUVZJSxUPJVZ`KL
las lesiones causadas por WSSV a nivel histológico.
Materiales y equipo:
A continuación se proporciona una lista del material necesario:
- Microscopio compuesto
- Pipetas Pasteur o gotero
;PQLYHZÙH]HQHÄUHVIPZ[\Yx
7PUaHZKLW\U[HÄUH
- Portaobjetos y cubreojetos de vidrio
:VS\JP}UÄQHKVYHKL+H]PKZVU
7HWLSÄS[YVVIVSZHZKL[t]HJPHZWHYHLU]VS]LYSHZWPLaHZKL[LQPKV
- Seis contenedores pequeños (25-100 ml de capacidad) o cajas de Petri
- Etanol al 50 y 70%
- Hematoxilina (de Mayer/Bennett)
- Eosina “Y” al 2% (solución acuosa)
- Agua corriente
- Agua destilada
Selección de la muestra:
Para llevar a cabo esta prueba, se deben utilizar únicamente animales moribundos
o que muestren signos agudos de la infección (por ejemplo, letárgicos, coloración café
oscura o rojiza, altas tasas de mortandad, etc.). Al menos en el caso Penaeus vannamei
o P. stylirostris no es común observar las manchas blancas que característicamente se
observan en otras especies tales como P. monodon.
Fijación:
Este protocolo ha sido diseñado para su uso con camarones o partes de camarón
X\LOHUZPKVWYL]PHTLU[LÄQHKVZJVUZVS\JP}UKL+H]PKZVU(-(OVYHZ`S\LNV
transferidos a alcohol etílico al 70%.
Procedimiento:
- Tome la muestra y fíjela con la solución de Davidson siguiendo el método usual.
- Prepare seis contenedores con las siguientes soluciones:
a) etanol 70% d) hematoxilina
b) etanol 50% e) agua corriente
c) agua destilada f) eosina “Y” al 2%
(Para prevenir evaporación mantenga los contenedores cubiertos).
73
+LZW\tZKL\UWLYxVKVTxUPTVKLÄQHJP}UKLOVYHZWHYHWVZ[SHY]HZ`Q\]LUPSLZ
pequeños (o piezas de tejido) y de 24 horas para juveniles grandes y adultos, remueva
el estómago y ambas cubiertas de las branquias (la capa de cutícula que recubre a la
cámara branquial). Envuelva los tejidos en papel poroso o colóquelos dentro de una
bolsa de té vacía para evitar perderlos durante los lavados.
- Sumerja el paquete de tejidos en el alcohol al 70% por un período de 1 hora y
media. Haga un cambio de alcohol fresco al 70% y deje los tejidos en el mismo por
otra hora y media. Nota: no deje que los paquetes se sequen durante ninguna de las
fases de este procedimiento.
,ZJ\YYHIPLULSWHX\L[LHSZHJHYSVKLSHJVOVSHS`[YHUZÄtYHSVHUOTLKVHS
alcohol al 50%, en donde deberá permanecer por 15 minutos.
,ZJ\YYHLSWHX\L[L`[YHUZÄtYHSVHSJVU[LULKVYJVUHN\HKLZ[PSHKHWVY\UWLYxVKV
KLTPU\[VZ9LLTWSHJLLSHN\H]LJLZK\YHU[LLZ[LSHWZVKL[PLTWV,ZJ\YYHLS
L_JLZVKLHN\HKLSWHX\L[L`[YHUZÄtYHSVHSHOLTH[V_PSPUHWVY\UWLYxVKVKL
minutos.
- Escurra la hematoxilina y sumerja el paquete en agua corriente por un período de
TPU\[VZ9LLTWSHJLLSHN\H]LJLZK\YHU[LLZ[LSHWZVKL[PLTWV
- Escurra el exceso de agua y coloque el paquete en la solución de eosina al 2% por
un período de 1-2 minutos.
- Enjuague el paquete brevemente con agua destilada.
- Coloque la muestra sobre una gota de agua destilada en un portaobjetos limpio.
Examine por separado los tejidos de un solo animal.
*VUSHH`\KHKL\UHZWPUaHZKLW\U[HÄUHKLZWYLUKHKLSHJ\[xJ\SHKLSLZ[}THNV
(o de la cubierta de las branquias) la capa de epitelio y colóquela en el portaobjetos.
9LZ\S[H\UWVJVTHZKPMxJPSKLZWYLUKLYSHJHWHKLLWP[LSPVKLSLZ[}THNVWLYVtZ[LLZ
uno de los mejores órganos para la detección de los cuerpos de inclusión de WSSV.
Usando una navaja de rasurar, es posible cortar el estómago en piezas pequeñas (en
J\HKYVZKLTTSHZJ\HSLZZVUJVSVJHKHZLULSWVY[HVIQL[VZ`JVUWPUaHZÄUHZ
se les puede desprender la capa de epitelio.
- Una vez que se han obtenido los fragmentos de tejido epitelial, se agrega un poco
de agua si es necesario y se le coloca encima un cubreobjetos.
- Examine los tejidos con la ayuda de un microscopio compuesto (con aumentos de
?V?3VZVYNHUPZTVZPUMLJ[HKVZWVY>::=WYLZLU[HUJ\LYWVZKLPUJS\ZP}U
bastante prominentes, de tinción variable (de eosinifílico a basofílico), los cuales
ZVU HWYV_PTHKHTLU[L ]LJLZ TmZ NYHUKLZ X\L LS [HTH|V UVYTHS KLS UJSLV
y generalmente muy numerosos. Los cuerpos de inclusión tempranos tienen un
parecido muy grande con los cuerpos de inclusión tipo Cowdry A, que aparecen
a consecuencia de la infección por IHHNV. Los cuerpos de inclusión de WSSV
más tardíos o maduros, tienden a aparecer más basofílicos (generalmente de color
morado) y de forma variable (de circular a irregular).
Diagnóstico de WSSV usando sondas genéticas

,U ]HYPVZ WHxZLZ [HSLZ JVTV *OPUH 1HW}U;HPSHUKPH`SVZ,Z[HKVZ<UPKVZZLOHU
desarrollado sondas genéticas para la detección de WSSV.
3VZ KL[HSSLZ KL SVZ WYVJLKPTPLU[VZ WHYH LS \ZV KL LZ[HZ ZVUKHZ LZ[mU KPZWVUPISLZ
a través de las compañías o grupos distribuidores de las sondas o de los estuches
(“kits”) completos para efectuar las pruebas.
74
3HZJtS\SHZKLSVZ[LQPKVZPUMLJ[HKVZWVY>::=ZL[P|LUPU[LUZHTLU[LLUSVZS\NHYLZ
en donde la sonda se ha hibridado con el material genético del virus.
,S ]PY\Z >::= LZ ¸YLJVUVJPKV¹ UPJHTLU[L WVY SH ZVUKH LZWLJxÄJH WHYH >::=
Ninguna de las otras sondas (por ejemplo para IHHNV, BP, HPV, etc.) reacciona con
WSSV.
Detección de WSSV por medio de la reacción de anticuerpos monoclonales

9LJPLU[LTLU[LZLOHUKLZHYYVSSHKV]HYPVZTt[VKVZWHYHSHKL[LJJP}U`KPHNU}Z[PJV
de WSSV utilizando anticuerpos monoclonales (B. Poulos et al., 2001; Y. Takahashi et
HS,Z[VZHU[PJ\LYWVZYLHJJPVUHUJVU\UHKLSHZWYV[LxUHZLZ[Y\J[\YHSLZKLS]PY\Z
` W\LKLU ZLY HWSPJHKVZ H T\LZ[YHZ KL LZWLJxTLULZ ÄQHKVZ LU ZVS\JP}U KL +H]PKZVU
7V\SVZL[HSVLUTLTIYHUHZH[YH]tZKLÅ\QVSH[LYHS@;HRHOHZOPL[HS
Para el uso de los anticuerpos de acuerdo al método desarrollado por Poulos et al., 2001,
UV LZ ULJLZHYPV PTWYLNUHY SVZ LZWLJxTLULZ LU WHYHÄUH H\UX\L LS Tt[VKV [HTIPtU
M\UJPVUHLUJVY[LZOPZ[VS}NPJVZLUWHYHÄUH,ULSJHZVKLS¸:OYPTWSL¹KLZHYYVSSHKVWVY
@;HRHOHZOPL[HSZLYLX\PLYLKL[LQPKVMYLZJVVJVUNLSHKVWLYVUVZLW\LKL\ZHY
[LQPKVÄQHKV
3HÄYTH¸+PHN?V[PJZ¹W\ZVLULSTLYJHKV\ULZ[\JOLV¸RP[¹X\LOHJL\ZVKLLZ[VZ
anticuerpos mediante una técnica conocida como “Immunosquash”. De manera breve,
la técnica del “Immunosquash” consistía de los siguientes pasos:
-PQHJP}UKLSHZT\LZ[YHZLUZVS\JP}UKL+H]PKZVUWVYOVYHZKLWLUKPLUKVKLS
tamaño del camarón. Transferencia de las muestras a alcohol etílico al 70%.
+LZTLU\aHTPLU[V KLS [LQPKV NLULYHSTLU[L IYHUX\PHZ V LZ[}THNV LU WLX\L|VZ
bloques de 2-4 mm.
9LOPKYH[HJP}UKLS[LQPKV
/VTVNLUPaHJP}USPNLYHKLS[LQPKV
;YH[HTPLU[VKLISVX\LV
9LHJJP}UJVULSHU[PJ\LYWVJVU[YH>::=HU[PJ\LYWVWYPTHYPV
3H]HKVZWHYHLSPTPUHYLSL_JLZVKLHU[PJ\LYWVWYPTHYPV
9LHJJP}UJVU\UHU[PJ\LYWVZLJ\UKHYPV
3H]HKVWHYHLSPTPUHYLSL_JLZVKLHU[PJ\LYWVZLJ\UKHYPV
9LHJJP}UKLKL[LJJP}U
,_HTLUHSTPJYVZJVWPV
Todas las reacciones se llevaban a cabo dentro de un tubo de plástico de
microcentrífuga. La reacción para la visualización de los anticuerpos es la misma que
se usa en el método de hibridación in situ; por lo tanto, en aquellas células en donde
ocurría una reacción positiva se observaría la presencia de un precipitado azul oscuro
o negro.
La sensibilidad de la técnica del “Immunosquash” es por lo menos igual a la de la
hibridación in situ. El “Immunosquash” presentaba las siguientes ventajas cuando se le
compara con la hibridación in situ:
5VZLYLX\PLYLPTWYLNUHYLS[LQPKVLUWHYHÄUH
5V ZL YLX\PLYL LX\PWV JVTWSLQV V LZWLJPHSPaHKV WHYH LS WYVJLZHTPLU[V KL SHZ
muestras.
75
,S[PLTWVWHYHSHVI[LUJP}UKLYLZ\S[HKVZLZKL[HUZ}SV\UHZOVYHZZPZLWHY[LKL
T\LZ[YHZ`HÄQHKHZ
Por otro lado, la sensibilidad del método del “Shrimple” es por lo menos similar a la
KLS7*9KL\UWHZVUVHUPKHKV

WSSV
-PN\YH *\H[YV Q\]LUPSLZ P. monodon

mostrando signos de infección por WSSV. El
camarón de la parte superior y el de la derecha
casi no muestran manchas blancas, pero se
puede distinguir una coloración rosada a
café-rojiza causada por la expansión de los
cromatóforos subcuticulares. Es posible que
esta coloración rojiza sea más aparente durante
la etapa aguda de la enfermedad. El camarón
de la izquierda y el de la parte inferior muestran
las manchas blancas que característicamente
aparecen en esta especie al pasar la etapa aguda
de la infección.
-PN\YH *HWHYHa}U KL \U Q\]LUPS KL P.

monodon con la enfermedad de la mancha
blanca (WSSV). Las manchas blancas son
depósitos calcáreos localizados en la porción
PU[LYUHKLSL_VLZX\LSL[V-V[VNYHMxHJVY[LZxH7
:HPIHIH:2)9*VSSLNL(THSHW\YHT0UKPH
76

WSSV
-PN\YH *HWHYHa}U KL \U Q\]LUPS KL P.

vannamei con la enfermedad de la mancha blanca
(WSSV). Se ha observado que en el caso de las
especies de camarones peneidos americanos,
la presencia de manchas blancas no es una
característica muy común durante las epizootias
de WSSV. Sin embargo, se pueden llegar a
presentar, como se observa en el espécimen que
ZLT\LZ[YHLULZ[HÄN\YH
-PN\YH 4PJYVMV[VNYHMxH KL \U JVY[L

histológico a través del estómago de un juvenil
P. chinensis infectado con WSSV. Se observa una
abundancia de cuerpos de inclusión intranuclear
prominentes, ubicados en el epitelio cuticular y el
tejido conectivo sub-cuticular (algunos ejemplos
ZVU ZL|HSHKVZ WVY SHZ ÅLJOHZ 3HZ JtS\SHZ
muestran cuerpos de inclusión intranuclear en
diferentes fases de la infección. En esta fotografía
se pueden observar cuerpos de inclusión en la
fase temprana de la infección, los cuales están
localizados en la parte central del núcleo, son
eosinofílicos y rodeados de un halo claro creado
WVY\UHY[LMHJ[VKLÄQHJP}UX\LSVZZLWHYHKLSHZ
membranas nucleares y la cromatina marginada
(lo cual los hace muy similares a los cuerpos de
PUJS\ZP}U KL 0//5= ;PUJP}U! / , KL 4H`LY
)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U ?
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV H [YH]tZ KLS

estómago de un juvenil P. stylirostris infectado
experimentalmente con WSSV. Se puede
observar una abundancia (grado G4) de cuerpos
de inclusión intranucleares característicos de
>::=HSN\UVZLQLTWSVZZL|HSHKVZJVUÅLJOHZ
;PUJP}U! / , KL 4H`LY)LUUL[[ 4HNUPÄJHJP}U
?
77

WSSV

estómago de un juvenil P. vannamei infectado
experimentalmente con WSSV. Se puede observar
una abundancia (grado G4) de cuerpos de
inclusión intranucleares característicos de WSSV
;PUJP}U! / , KL 4H`LY)LUUL[[ 4HNUPÄJHJP}U
?

estómago de un juvenil P. vannamei, el cual ha
sido sometido a una prueba de hibridación in
situ con una sonda de ADN, marcada con DIG,
LZWLJxÄJH WHYH SH KL[LJJP}U KL LZ[L ]PY\Z 3H
sonda ha reaccionado intensamente con cuerpos
de inclusión intranucleares (los cuales contienen
WSSV) en varios tejidos del camarón incluyendo
el epitelio cuticular del estómago. Tinción
Bismarck Brown y sonda genética marcada con
+0.4HNUPÄJHJP}U ?
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV H [YH]tZ KL SH

glándula antenal de un juvenil P. vannamei, el
cual ha sido sometido a una prueba de hibridación
in situ con una sonda de ADN, marcada con DIG,
LZWLJxÄJH WHYH SH KL[LJJP}U KL LZ[L ]PY\Z :L
muestra una reacción bastante intensa a la sonda
dentro de los núcleos de las células infectadas
en el epitelio de la glándula antenal. Tinción
Bismarck Brown y sonda genética marcada con
+0.4HNUPÄJHJP}U?
78

WSSV
-PN\YH ,Z[H TPJYVMV[VNYHMxH PS\Z[YH LS

YLZ\S[HKVÄUHSKLZW\tZKLSH[PUJP}UJVU/ ,KL
Mayer-Bennett. El tejido que se muestra es epitelio
cuticular de la cubierta de la cámara branquial.
Se pueden observar claramente los cuerpos de
inclusión intranuclear característicos de WSSV.
-PN\YH,QLTWSVKLSVZYLZ\S[HKVZVI[LUPKVZHS
usar anticuerpos monoclonales para la detección
de WSSV por medio del método de “Immuno-
squash”. Esta fotomicrografía muestra una porción
de una lamela branquial y la deposición de un
precipitado azul oscuro dentro de los núcleos
de las células infectadas por WSSV, en donde los
anticuerpos han reconocido las partículas virales.
Tinción: Bismarck Brown.
=PY\ZKLS:xUKYVTLKL;H\YH;H\YHZÙKYVTL]PY\Z;:=
Virus del Síndrome de Taura (TSV); Síndrome de Taura (TS); enfermedad de Taura;
enfermedad de la cola roja.
Agente
Debido a que presenta las siguientes características, el virus del síndrome de Taura
;:=OHZPKVJSHZPÄJHKV[LU[H[P]HTLU[LJVTV\UTPLTIYVKLSH-HTPSPH7PJVYUH]PYPKHL!
[PLUL\UHTVYMVSVNxHPJVZHOtKYPJHSHZWHY[xJ\SHZ[PLULU\UKPmTL[YVWYVTLKPVKL
UHU}TL[YVZ[PLULU\UHKLUZPKHKKLNT3LS[PWVKLYLWSPJHJP}ULZJP[VWSmZTPJV
SVZZP[PVZKLYLWSPJHJP}UZVU-L\SNLUULNH[P]VZJVU[PLUL(95KL\UHZVSHJHKLUHJVU
una longitud de aproximadamente 9 kb y la cápside está compuesta de tres proteínas
LZ[Y\J[\YHSLZWYPUJPWHSLZ `R+H`KVZZLJ\UKHYPHZ`R+H
79
Métodos preferidos actualmente para la detección y el diagnóstico

/PZ[VSVNxHKLY\[PUHJVU[PUJP}UKL/ ,
/PIYPKHJP}Uin situJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZWHYH;:=
)PVLUZH`VZLUJVTIPUHJP}UJVUOPZ[VSVNxH\[PSPaHUKVJHTHYVULZQ\]LUPSLZ:7-P.
vannamei como indicadores de la presencia de TSV.
+L[LJJP}UKLS]PY\ZWVYTLKPVKL9;7*9
9HUNVNLVNYmÄJV
;:=ZLLUJ\LU[YHKPZ[YPI\PKVLUWHxZLZKL*LU[YV`:\KHTtYPJH9LJPLU[LTLU[L
fue detectado en Taiwan en granjas donde se habían introducido postlarvas de
P. vannamei.
,SZxUKYVTLKL;H\YHM\LYLJVUVJPKVWVYWYPTLYHH]LaJVTV\UHLUMLYTLKHK
única en granjas camaroneras en la cercanía de la boca del río Taura en
Guayaquil, Ecuador, en junio de 1992
:PU LTIHYNV H [YH]tZ KL \U HUmSPZPZ YL[YVZWLJ[P]V KL T\LZ[YHZ KL JHTHY}U
tomadas en la región de Taura en Ecuador en septiembre de 1991, se demostró
que la enfermedad ya estaba presente en esta región antes de 1992. De la
misma manera, algunos granjeros de la región sospechan que la enfermedad
ya estaba presente a mediados de 1990, cuando se observaron pérdidas
inexplicables durante la fase de crianza de P. vannamei forzando a varios
granjeros a abandonar el uso de estanques de crianza y adoptando en su lugar
la práctica de “siembra directa” de postlarvas a densidades relativamente bajas
en los estanques de engorda.
(UmSPZPZYL[YVZWLJ[P]VZKLT\LZ[YHZKLP. vannamei tomadas en Colombia en
febrero de 1990 también han revelado la presencia de lesiones similares a las
observadas en casos de síndrome de Taura (Laramore 1995).
(WHY[PYKL LSZxUKYVTLKL;H\YHZLOHKPZWLYZHKVHT\JOHZKLSHZYLNPVULZ
del continente americano, en donde ha sido observado tanto en camarones
silvestres como cultivados. Casos documentados de síndrome de Taura se han
originado en:
9LNPVULZKLJ\S[P]VHSVSHYNVKLSHZaVUHZJHTHYVULYHZKL,J\HKVY
al presente).
3HYLNP}UKL;\TILZ7LY HSWYLZLU[L
*VZ[HZKLS7HJxÄJV`*HYPILKL*VSVTIPH HSWYLZLU[L
,S.VSMVKL-VUZLJHLUSHYLNP}UKL/VUK\YHZ`LU,S:HS]HKVY HS
presente).
.\H[LTHSH
5VYLZ[LKLS)YHZPS
5PJHYHN\H
,Z[HKVZKL:VUVYH:PUHSVH*OPHWHZ`.\LYYLYVLU4t_PJV
;L_HZ /H^HP ` -SVYPKH LU SVZ ,Z[HKVZ <UPKVZ KL
Norteamérica.
80
;:= OH ZPKV KVJ\TLU[HKV LU WVZ[SHY]HZ ` HK\S[VZ ZPS]LZ[YLZ KL P. vannamei
capturados cerca de la costa de Ecuador, El Salvador, y el estado mexicano de
Chiapas, cerca de la frontera con Guatemala.
,Z WVZPISL X\L SH KPZ[YPI\JP}U NLVNYmÄJH KLS ZxUKYVTL KL ;H\YH JVU[PUL
expandiéndose debido a que la industria depende en gran parte de las poblaciones
silvestres de nauplios, postlarvas y reproductores, los cuales son transportados a
KPMLYLU[LZYLNPVULZNLVNYmÄJHZLPUJS\ZVWHxZLZ
Especies afectadas
,SYHUNVKLLZWLJPLZHMLJ[HKHZUVZLJVUVJLJVTWSL[HTLU[L
:L OHU KVJ\TLU[HKV PUMLJJPVULZ LU WVISHJPVULZ ZPS]LZ[YLZ KL P. vannamei, P.
stylirostris y P. setiferus.
:L OH SVNYHKV PUMLJ[HY L_WLYPTLU[HSTLU[L WVZ[SHY]HZ ` Q\]LUPSLZ KL P. setiferus,
postlarvas de P. aztecus y juveniles de P. chinensis.
,U LS LZ[HKxV KL WVZ[SHY]H KL e73 LU HKLSHU[L ` KL Q\]LUPS KL P. vannamei,
TSV causa infecciones serias y altas mortandades en poblaciones de camarón
cultivado.
,U JVU[YHZ[L H\UX\L;:= W\LKL PUMLJ[HY Q\]LUPSLZ KL P. stylirostris, esta especie
parece ser menos susceptible a la infección.
3VZ LZ[HKxVZ KL WVZ[SHY]H ` KL Q\]LUPS KL P. aztecus y P. duorarum parecen ser
resistentes a esta enfermedad.

Signos del síndrome de Taura
,S ZxUKYVTL KL;H\YH LZ T\` JVUVJPKV JVTV \UH LUMLYTLKHK X\L ZL WYLZLU[H
durante la fase de crianza de P. vannamei, lo cual ocurre de los 14 a los 40 días
después de la siembra de las postlarvas en los estanques. Por lo tanto, los camarones
afectados tienden a ser típicamente juveniles de aproximadamente 0.05 g a menos
de 5 g. Los camarones más grandes también pueden ser afectados, especialmente
si nunca han sido expuestos al virus.
3HLUMLYTLKHKL_OPIL\UHMHZLHN\KH`V[YHKLYLJ\WLYHJP}UJY}UPJHSHZJ\HSLZ
pueden distinguirse a simple vista.
Fase Peraguda/aguda: en los camarones moribundos, durante la fase peraguda de la
enfermedad, los signos observables a simple vista incluyen expansión de los cromatóforos
rojos, lo cual le imparte al camarón una coloración general que va de rosada a rojiza y
a los urópodos una coloración roja (de ahí el nombre de la enfermedad de la cola roja).
Los animales en la fase peraguda tienden a morir durante la ecdisis (proceso de muda).
En estos animales, cuando se examina con más detenimiento el epitelio cuticular, por
ejemplo de un apéndice (en la punta de los urópodos o de los pleópodos, por ejemplo),
es posible observar evidencia de necrosis multifocal del epitelio.
Los camarones que muestran estos signos peragudos, generalmente también tienen
la cutícula suave, el intestino vacío y se encuentran en el estadío “D” del ciclo de muda
(ecdisis)
81
Los animales con infección peraguda severa mueren típicamente durante la ecdisis,
lo cual sugiere que el proceso de muda es una parte importante de la patogénesis del
síndrome de Taura.
Fase crónica/recuperación: en los estanques, cantidades bajas o moderadas de camarón
tienden a presentar lesiones multifocales melanizadas del tipo de la enfermedad de la
concha.
Los camarones en esta fase de la enfermedad pueden o no presentar su cutícula
blanda y expansión de los cromatóforos rojos. Es posible observar a tales camarones
comportándose y alimentándose normalmente.
Estos camarones son sobrevivientes de la etapa peraguda o aguda de la enfermedad,
los cuales al haber mudado exitosamente muestran las lesiones melanizadas en vías de
recuperación.
Aunque una epizootia de síndrome de Taura puede resultar en mortandades
acumuladas que van del 80% al 90% de la población en un estanque, los sobrevivientes
típicamente muestran supervivencias de 60% o más al tiempo de la cosecha.

3HWYLZLUJPHKLZPNUVZJSxUPJVZ[HS`JVTVZLKLZJYPIP}HU[LYPVYTLU[L
<UOPZ[VYPHS`HZLHKLSHZPUZ[HSHJPVULZKLJ\S[P]VKLSHLZWLJPLJ\S[P]HKHVKLSH
región, que indique la posibilidad de infección por TSV (por ejemplo la importación
de P. vannamei originario de Ecuador o de otras regiones en donde se sabe que
existe TSV).
7YLWHYHJPVULZ OTLKHZ KL HWtUKPJLZ \Y}WVKVZ LZJHSHZ HU[LUHSLZ WSL}WVKVZ
etc.) que muestren necrosis multifocal del epitelio cuticular en animales juveniles
durante la fase peraguda/aguda de la enfermedad.
4t[VKVZWHYHSHKL[LJJP}U`LSKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VKLS]PY\Z
7HYHSSLNHYH\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VKL;:=[HU[VLUJHTHYVULZPUKP]PK\HSLZJVTV
en poblaciones enteras, se pueden utilizar cualquiera de los siguientes métodos:
Métodos histológicos de rutina

,S KPHNU}Z[PJV OPZ[VS}NPJV KL SH LUMLYTLKHK JVU [PUJP}U / , K\YHU[L SH MHZL
aguda/peraguda, se basa en la demostración de áreas de necrosis multifocal en el
epitelio cuticular del caparazón, apéndices, branquias, esófago, estómago e intestino
posterior.
:}SV T\` YHYHTLU[L LS LWP[LSPV KL SVZ [I\SVZ KL SH NSmUK\SH HU[LUHS ZL ]L
afectado.
*VU MYLJ\LUJPH LS [LQPKV JVULJ[P]V Z\IJ\[PJ\SHY ` SHZ ÄIYHZ HK`HJLU[LZ KL
músculo estriado también se ven afectadas.
3HZ SLZPVULZ J\[PJ\SHYLZ T\S[PMVJHSLZ ZVU T\` JVUZWPJ\HZ ` JVUZPZ[LU LU SV
siguiente:
,SJP[VWSHZTHKLSHZJtS\SHZHMLJ[HKHZT\LZ[YH\UPUJYLTLU[VLUSHLVZPUVÄSPH
82
3HWPJUVZPZU\JSLHY`JHYPVYYL_PZZVU\UHJHYHJ[LYxZ[PJHJVTULUSHZSLZPVULZ
de síndrome de Taura.
,UVJHZPVULZLZWVZPISLVIZLY]HYSHWYLZLUJPHKLPUJS\ZPVULZJP[VWSmZTPJHZ`
frecuentemente una abundancia extrema de cuerpos esféricos (de 1 a 20 μm
de diámetro) que van de eosinofílicos a basofílico pálido.
3VZUJSLVZWPJU}[PJVZ`JHYPVYYtJ[PJVZKHU\UHYLHJJP}UWVZP[P]HJVUSH[PUJP}U
KL-L\SNLUWHYH(+5SVJ\HSSVZKPZ[PUN\LKLSHZPUJS\ZPVULZJP[VWSmZTPJHZ
LVZPU}ÄSHZIHZ}ÄSHZWmSPKHZX\LUVJVU[PLULU(+5
3HH\ZLUJPHKLPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJHVKLV[YV[PWVKLYLZW\LZ[HPUÅHTH[VYPH
distingue la fase peraguda de la fase de recuperación o crónica de la
enfermedad.
3H WYLZLUJPH KL UJSLVZ WPJU}[PJVZ ` JHYPVYYtJ[PJVZ HZx JVTV KL SHZ PUJS\ZPVULZ
citoplásmicas generalmente esféricas, le dan a las lesiones de la fase aguda/peraguda
una apariencia “aperdigonada” o “apimentada”, lo cual es considerada como una
característica patognomónica de la enfermedad.
+\YHU[LSHMHZLKLYLJ\WLYHJP}UVJY}UPJHKLSHLUMLYTLKHKSHZSLZPVULZJ\[PJ\SHYLZ
asemejan aquellas ocasionadas por infección bacteriana de la concha (“shell
disease”).
,Z[HZSLZPVULZW\LKLUSSLNHYHWYLZLU[HYLYVZP}UKLSHJ\[xJ\SHJVSVUPaHJP}U
IHJ[LYPHUH Z\WLYÄJPHS L PU]HZP}U KL SH J\[xJ\SH WVY WYLZ\U[HZ LZWLJPLZ KL
Vibrio.
<UH THYJHKH PUÄS[YHJP}U OLTVJx[PJH SH J\HS W\LKL V UV LZ[HY TLSHUPaHKH
se encuentra con frecuencia en posición basal con respecto a las lesiones
cuticulares melanizadas.
+\YHU[LSHMHZLKLYLJ\WLYHJP}UVJY}UPJHKLSHLUMLYTLKHKLZJVTUVIZLY]HYSH
presencia de estructuras dentro del órgano linfoide conocidas como “esferoides”.
Se ha observado que en camarones durante esta fase crónica (los cuales pueden
carecer de las lesiones cuticulares diagnósticas), estos esferoides muestran una
reacción positiva a la sonda genética, sugiriendo una relación estrecha con el
proceso de la enfermedad.
Diagnóstico de TSV usando sondas genéticas

Se han desarrollado sondas genéticas de ADN complementario (cADN) las cuales
proveen excelente sensibilidad diagnóstica en casos de infección por TSV.
3HZVUKHNLUt[PJHUVYHKPVHJ[P]H`THYJHKHJVU+0.W\LKLZLY\ZHKHLULUZH`VZ
de hibridación in situ.
3HWY\LIHKLOPIYPKHJP}Uin situW\LKLZLYHWSPJHKHHT\LZ[YHZKL[LQPKVÄQHKHZKL
acuerdo al procedimiento explicado en la sección sobre toma y preparación de
muestras.
*\HUKV ZVU Z\QL[HZ H SH WY\LIH KL OPIYPKHJP}U in situ con las sondas cADN, las
lesiones de TSV muestran una reacción positiva bastante prominente en la forma de
un precipitado que va de azul a negro y el cual está localizado en el citoplasma de
las células afectadas.
3VZMYHNTLU[VZU\JSLHYLZWPJU}[PJVZ`JHYPVYYtJ[PJVZX\LJVU[YPI\`LUHSHHWHYPLUJPH
“aperdigonada” o “apimentada” de las lesiones patognomónicas, no reaccionan
con la sonda genética.
83
Hibridación en formato “Dot blot”

,S LUZH`V KL OPIYPKHJP}U LU MVYTH[V KL ¸dot blot” ha sido aplicado solamente a
nivel experimental para el diagnóstico con sondas no radioactivas marcadas con
+0.`\ZHUKVT\LZ[YHZKLOLTVSPUMH`]PY\ZZLTPW\YPÄJHKV
7YVISLTHZ YLSHJPVUHKVZ JVU SH LZ[HIPSPKHK KLS(95 KL \UH ZVSH JHKLUH LS J\HS
constituye el genoma de TSV) durante la prueba de “dot blot”, han limitado el
desarrollo y la aplicación de este tipo de estuches de campo basados en el uso de
sondas cADN marcadas con DIG para la detección de este agente.

TSV
-PN\YH-PN\YHLZX\LTm[PJHTVZ[YHUKV
el progreso hipotético de la enfermedad
de TSV en P. vannamei. Inmediatamente
después de la infección inicial, sobreviene
una viremia que dispersa las partículas
virales a través del hemoceloma del
camarón. Durante los estadíos de muda
previos a la ecdisis, las células altamente
activas del epitelio cuticular proveen
un blanco ideal para el virus y, una vez
infectadas, TSV comienza a replicarse a
expensas de las funciones normales de estas
células (por ejemplo, la secreción de la
cutícula, y la transferencia de calcio entre la
cutícula nueva y la que será reemplazada).
La etapa peraguda de la infección se
THUPÄLZ[HJVUTH`VYPU[LUZPKHKK\YHU[LSVZ
estadíos críticos de la ecdisis y, debido a la
interrupción resultante, muchos camarones
mueren durante esta etapa. Los camarones
que sobreviven a la muda entran en la etapa
crónica o de recuperación y generalmente
exhiben lesiones melanizadas de la cutícula
en aquellos lugares en donde las lesiones de
TSV se encuentran en vías de recuperación.
Los camarones afectados de esta manera
pueden sufrir otro episodio peragudo de la
infección durante la siguiente muda o bien
puede que lleguen a mudar normalmente
y recuperarse. Durante esta etapa de
recuperación los camarones pueden ser
portadores del virus pero se ignora por
cuanto tiempo.
84

TSV
-PN\YH +VZ LQLTWSHYLZ KL JHTHY}U

cultivado P. vannamei colectados en Ecuador.
Ambos especímenes se encontraron moribundos
y con signos de la fase peraguda del síndrome de
Taura. Durante la etapa peraguda los camarones
se encuentran generalmente letárgicos, tienen
una cutícula blanda y los urópodos pueden
llegar a tomar una coloración rojiza.
-PN\YH-V[VNYHMxHHTH`VYH\TLU[VKLSVZ
urópodos de uno de los camarones mostrados
LUSH-PN\YH<ZHUKV\UHS\WHV\UHJmTHYH
MV[VNYmÄJH JVU SLU[L KL HJLYJHTPLU[V LZ
posible observar la irregularidad de los bordes
del epitelio cuticular de los urópodos (señalado
WVYSHÅLJOH,Z[HZPYYLN\SHYPKHKLZLULSLWP[LSPV
son la manifestación de la necrosis causada en
LZ[L [LQPKV WVY LS ]PY\Z KL;:= 4HNUPÄJHJP}U
HWYV_PTHKHTLU[L?
-PN\YH 1\]LUPS KL P. vannamei capturado

en un estanque de cultivo en Ecuador. Este
ejemplar se encuentra en la etapa crónica, o
de recuperación, de TSV. Se pueden observar
múltiples focos de melanización que señalan
los sitios de la cutícula en donde el epitelio
necrosado por la infección de TSV se encuentra
en vías de recuperación.
85

TSV

estómago de un juvenil P. vannamei en la etapa
peraguda de infección por TSV. Se muestran
mYLHZ ULJY}[PJHZ WYVTPULU[LZ SH ÅLJOH NY\LZH
señala un ejemplo) en el epitelio cuticular, el
cual normalmente secreta la parte acelular de
la cutícula. Adyacente a las lesiones necróticas
focales es posible observar células epiteliales
HWHYLU[LTLU[L UVYTHSLZ SH ÅLJOH KLSNHKH
ZL|HSH HSN\UVZ LQLTWSVZ ;PUJP}U! / , KL
4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U?
-PN\YH 4PJYVMV[VNYHMxH KL HS[V H\TLU[V

mostrando una lesión clásica de TSV. Este tipo
de lesiones consiste de necrosis del epitelio
cuticular y del tejido conectivo sub-cuticular,
con células mostrando núcleos picnóticos o
cariorrécticos, así como también una marcada
LVZPUVÄSPH L PUJS\ZPVULZ JP[VWSHZTm[PJHZ
con propiedades variables de tinción. Las
inclusiones citoplasmáticas y los núcleos
picnóticos y cariorrécticos le imparten a la lesión
su apariencia característica (patodiagnóstica)
“aperdigonada” (“buckshot-riddled”) o
“apimientada” (“peppered¹ ;PUJP}U! / , KL
4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U ?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVH[YH]tZKL\UVKL
los apéndices de una postlarva de P. vannamei
en la fase peraguda de infección por TSV. Este
ejemplar ha sido sometido a una prueba de
hibridación in situ con una sonda genética de
J(+5 THYJHKH JVU +0. LZWLJxÄJH WHYH SH
detección de TSV. La sonda ha reaccionado
intensamente con células infectadas en donde
es posible observar un precipitado azul oscuro
o negro dentro del citoplasma de células del
epitelio cuticular y del tejido conectivo sub-
cuticular. La sonda no ha reaccionado con los
núcleos picnóticos o cariorrécticos, lo cual es de
esperarse ya que TSV es un virus citoplásmico.
Los restos de los núcleos contribuyen a dar la
apariencia apimientada típica de las lesiones de
TSV. Tinción: Bismarck Brown y sonda genética
THYJHKHJVU+0.4HNUPÄJHJP}U ?
86

TSV
-PN\YH *VY[L TLKPVZHNP[HS H [YH]tZ KLS
órgano linfoide (OL) de un juvenil P. vannamei
infectado experimentalmente con TSV. Al
TVTLU[V KL SH ÄQHJP}U LS LZWtJPTLU ZL
encontraba en la fase crónica o de recuperación
de la enfermedad. A pesar de que las lesiones
patognomónicas de TSV del tipo que se observan
en el epitelio cuticular nunca ocurren en el OL,
la infección por TSV sí induce lesiones de otro
tipo en este órgano. Entremezclado con los
cordones de tejido normal del OL, los cuales se
caracterizan por su arquitectura de varias capas
de células arregladas concéntricamente alrededor
de un conducto central para la hemolinfa (se
ZL|HSH \U LQLTWSV JVU \UH ÅLJOH KLSNHKH ZL
encuentran acumulaciones desorganizadas de
células del OL, las cuales forman estructuras a
las que se les ha llamado “esferoides” del OL
(EOL). Los EOL carecen de un conducto central y
consisten de células que muestran cariomegalia,
vacuolas citoplasmáticas bastante prominentes e
inclusiones citoplasmáticas de tamaño y forma
PYYLN\SHYSHÅLJOHNY\LZHT\LZ[YH\ULQLTWSVKL
\U LZMLYVPKL;PUJP}U! / , KL 4H`LY)LUUL[[
4HNUPÄJHJP}U?
-PN\YH 7YLWHYHJP}U LU OTLKV X\L

muestra la porción de un urópodo de una
postlarva de P. vannamei en la etapa peraguda
de la infección por TSV. Este espécimen se
encontraba en el estadío D4 del ciclo de muda
(según la separación que se puede observar
LU[YLSHJ\[xJ\SH¸]PLQH¹`SH¸U\L]H¹3HÅLJOH
de la izquierda señala un área necrótica en el
epitelio cuticular (área desorganizada y con
una abundancia de pequeñas esferas refráctiles,
las cuales son en realidad núcleos picnóticos
` JHYPVYYtJ[PJVZ TPLU[YHZ X\L SH ÅLJOH LU SH
esquina superior derecha señala una porción
de epitelio cuticular aparentemente normal. Se
pueden observar también algunos cromatóforos
rojos en el tejido conectivo sub-cuticular del
urópodo. Tinción: Preparación en húmedo sin
[L|PY4HNUPÄJHJP}U?
=PY\Z KLS ZxUKYVTL KL SH JHILaH HTHYPSSH @LSSV^ OLHK ZÙKYVTL
]PY\Z@/=
Enfermedad de la cabeza amarilla, enfermedad (YH) o enfermedad de la cabeza
amarilla de P. monodon.
Agente Etiológico
Virus de la cabeza amarilla (YHV).
87
Inicialmente algunos investigadores tailandeses reportaron que YHV era un

baculovirus citoplásmico Tipo B (virus de la granulosis) o un virus similar a un baculovirus
y le asignaron el nombre de baculovirus de la cabeza amarilla o YHB. Sin embargo,
al llevar a cabo una caracterización detallada se encontró que se trataba de un virus
completamente nuevo, para el cual hubo necesidad de crear una nueva familia, conocida
JVULSUVTIYLKL9VUP]PYPKHL
Agente
@/=UVLZ\UIHJ\SV]PY\Z`HX\LUVJVU[PLULJK(+5JHKLUHKVISLKL(+5ZPUV
JZ(95JHKLUHZLUJPSSHKL(95
,S]PY\ZKLSHJHILaHHTHYPSSHLZ\U]PY\ZKL(95KLJHKLUHZLUJPSSHZZ(95[PLUL
forma cilíndrica, presenta una envoltura y es de replicación citoplásmica.
3VZ ]PYPVULZ [PLULU MVYTH JPSxUKYPJH ` ]HYxHU LU [HTH|V LU \U YHUNV KL
nm a 200 nm de longitud por 40 nm a 50 nm de ancho. Las estructuras que
posiblemente sean las nucleocápsides (y/o formas aberrantes de nucleocápsides)
miden aproximadamente 15 nm de diámetro con longitudes variables de hasta
aproximadamente 800 nm de largo.
Métodos preferidos actualmente para el diagnóstico

/PZ[VYPHS`ZPNUVZJSxUPJVZKL@/=
4t[VKVZOPZ[VS}NPJVZKLY\[PUHJVU[PUJP}U/ ,
;PUJP}UKLOLTVJP[VZJVULSTt[VKVKLY\[PUHKL>YPNO[.PLTZH
+L[LJJP}UKLS]PY\ZWVYTLKPVKL9;7*9
/PIYPKHJP}Uin situJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZWHYHSHKL[LJJP}UKL@/=
9HUNVNLVNYmÄJV
Aparentemente YH es una enfermedad ampliamente distribuida en poblaciones de
P. monodon.
Aunque hasta hace relativamente poco la enfermedad de la cabeza amarilla fue
reconocida y descrita por primera vez en camarones de Tailandia, es probable que
YHV haya sido el mismo síndrome que ha venido afectando a la industria del cultivo
de P. monodon por casi una década. Es posible que YHV haya sido responsable del
hundimiento de la industria de Taiwán en 1986-1987 y de epizootias más pequeñas, pero
ZLYPHZLUYLNPVULZKL0UKVULZPH4HSHZPH*OPUH`-PSPWPUHZX\LJ\S[P]HUP. monodon.
Hace relativamente poco, se reportó la presencia de YHV en el continente americano
3VL[HS "ZPULTIHYNVLSOHSSHaNVU\UJHW\KVZLYJVUÄYTHKV`LZWYVIHISLX\L
se haya tratado más bien de un diagnóstico erróneo.
Especies afectadas
@/+LZ\UHLUMLYTLKHKPTWVY[HU[LLUZPZ[LTHZPU[LUZP]VZKLJ\S[P]VKLP. monodon
en el sureste de Asia e India.
88
([YH]tZKLIPVZLUZH`VZJVUP. monodon como especie indicadora, se encontró que

camarones de agua salobre de las especies Palaemon styliferus y Acetes sp. (presentes
LUSVZLZ[HUX\LZKLJHTHY}UZVUWVY[HKVYLZKL@/=-SLNLSL[HS
(\UX\L YLZPZ[LU[LZ H SH LUMLYTLKHK J\HUKV ZL LUJ\LU[YHU LU SVZ LZ[HUX\LZ
se ha observado que P. merguiensis y Metapenaeus ensis pueden ser infectados
L_WLYPTLU[HSTLU[LK\YHU[LWY\LIHZKLKLZHMxV-SLNLSL[HS
:LOHKLTVZ[YHKVL_WLYPTLU[HSTLU[LX\L@/=W\LKLPUMLJ[HY`JH\ZHYPUMLJJPVULZ
serias en los estadíos juveniles de los camarones peneidos americanos de las
especies P. vannamei, P. stylirostris, P. setiferus, P. aztecus y P. duorarum. En estos
mismos estudios, se observó que los estadios de postlarva de las mismas especies
eran relativamente resistentes.

Existen ciertos signos clínicos característicos que pueden ser observados en P.
monodon cuando ha sido infectado por YHD. Durante varios días, los juveniles y los
subadultos (especialmente durante los 50-70 días de cultivo) en estanques intensivos de
cultivo, muestran un incremento anormal y abrupto en el consumo de alimento.
Posteriormente, los animales dejan de alimentarse completamente y dentro de un
plazo de un día es posible observar algunos camarones moribundos nadando lentamente
JLYJHKLSHZ\WLYÄJPLLUSHZVYPSSHZKLSVZLZ[HUX\LZ,Z[VZJHTHYVULZTVYPI\UKVZW\LKLU
llegar a exhibir una coloración amarillenta del cefalotórax. El número de camarones
mostrando signos similares incrementa dramáticamente en el segundo día y para el
tercero, después de haber cesado de alimentarse, comienza una mortandad masiva la
cual típicamente resulta en la pérdida total del estanque.
Los camarones moribundos pueden llegar a presentar con frecuencia uno o más de
los siguientes signos: palidez corporal generalizada en combinación con una coloración
amarillenta del cefalotórax; branquias blanquecinas o de color amarillo pálido a café;
hepatopáncreas de color amarillo pálido.
Se ha reportado que en una ocasión en que incidentalmente se encontraron
postlarvas de P. merguiensis en el mismo estanque en que se hallaba una población de
P. monodon infectado por YHV, las postlarvas de P. merguensis no presentaban ningún
signo de la enfermedad.
Historial y signos clínicos
7YLZLUJPHKLSVZZPNUVZJSxUPJVZKLZJYP[VZWYL]PHTLU[L
<UOPZ[VYPHSX\LPUKPX\LSHWVZPISLWYLZLUJPHKL@/=LUSHZPUZ[HSHJPVULZKLJ\S[P]V
en la región o en las especies de camarón usadas para el cultivo.
+PHNU}Z[PJVKLÄUP[P]V
,S KPHNU}Z[PJV KLÄUP[P]V ZL IHZH LU LS OPZ[VYPHS SH WYLZLUJPH KL ZPNUVZ JSxUPJVZ
KLZJYP[VZHU[LYPVYTLU[L`SHJVUÄYTHJP}UWVYTLKPVKLOPZ[VWH[VSVNxH
89
Histopatología
La histopatología se caracteriza por una necrosis generalizada, de multifocal a
difusa, con presencia prominente de picnosis y cariorrexis. En los tejidos afectados es
posible observar inclusiones citoplasmáticas perinucleares basofílicas, generalmente
esféricas. Entre los tipos de células o tejidos afectados se incluyen los hemocitos, órgano
linfoide, tejido hematopoyético, células pilar y epiteliales de las lamelas branquiales,
tejido conectivo esponjoso del subcutis, músculo, intestino, glándula antenal, gónadas,
cordón y ganglios nerviosos, entre otros.
,U[YLSVZJHTIPVZJLS\SHYLZ[LTWYHUVZVJHZPVUHKVZWVY@/=ZLPUJS\`LSHOPWLY[YVÄH
nuclear, disminución y marginación de la cromatina y desplazamiento lateral del
nucleolo.
7\LKLSSLNHYHVJ\YYPY\UHYLZW\LZ[HPUÅHTH[VYPHLUMVYTHKLPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH
agrupamiento y encapsulación, pero es más bien difusa y no muy conspicua, a menos de
que al mismo tiempo se presente una infección bacteriana secundaria.
Existe un tipo único de célula que se presenta con frecuencia en camarones
infectados con YHV y que puede servir como ayuda para el diagnóstico histológico de
esta enfermedad. Este tipo de célula se presenta en cantidades muy variables, pero no
es del todo rara. Generalmente se le puede observar en los espacios hemales existentes
en varios tejidos tales como branquias, glándula antenal, hepatopáncreas, corazón etc.;
este tipo de célula es generalmente esférica, presenta citoplasma de apariencia uniforme,
pálidamente basofílico y con un núcleo esférico y central. Es probable que estas células
sean en realidad hemocitos inmaduros liberados prematuramente por los órganos
hematopoyéticos en respuesta a la hemocitopenia causada por la infección de YHV.
Es importante tener en cuenta que infecciones severas de WSSV pueden llegar a
ocasionar una necrosis del órgano linfoide casi idéntica a la ocasionada por YHV (Pantoja
y Lightner, 2001). Esta similitud puede ocasionar confusión y resultar en un diagnóstico
erróneo de YHV. Sin embargo, en el caso de WSSV dicha necrosis del órgano linfoide
es acompañada por la presencia de los cuerpos intranucleares característicos de WSSV.
De cualquier manera, si hay razón para sospechar la presencia de YHV en muestras de
camarón procedentes de regiones afectadas por WSSV, se debe de recurrir a pruebas de
hibridación in situJVUSHZVUKHWHYH@/=`VKL9;7*9WHYHKL[LYTPUHYLSLZ[H[\ZYLHS
de YHV en los animales en cuestión.
90

YHV
-PN\YH 3VZ [YLZ LZWLJxTLULZ KL P.

monodon, del grupo de la izquierda muestran
los signos externos de la enfermedad causada
por YHV. Nótese la coloración amarillenta o
café-amarillenta del cefalotórax en general,
lo cual le dio el nombre a la enfermedad
MV[VNYHMxHJVY[LZxHKLS+Y;>-SLNLS)HUNRVR
Tailandia).
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV H [YH]tZ KL SHZ

branquias de un juvenil P. monodon infectado
por YHV. Se puede observar una necrosis
generalizada y difusa en las células de las
lamelas branquiales, dentro de las cuales es
aparente la presencia de núcleos picnóticos y
cariorrécticos (algunos ejemplos son señalados
WVYSHZÅLJOHZ+LU[YVKLSHZJtS\SHZZL|HSHKHZ
también es posible observar un citoplasma
bastante basofílico y la presencia de inclusiones
citoplasmáticas basofílicas perinucleares.
Dichas células son posiblemente hemocitos que
han sido liberados prematuramente en respuesta
a la hemocitopenia inducida por la infección
JVU @/= ;PUJP}U! / , KL 4H`LY)LUUL[[
4HNUPÄJHJP}U?
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV H [YH]tZ KLS }YNHUV

linfoide (OL) de un juvenil P. monodon en la fase
aguda de infección por YHV. Se puede observar una
necrosis generalizada y difusa de las células del OL.
Las células afectadas muestran núcleos picnóticos y
JHYPVYYtJ[PJVZ3HZÅLJOHZZL|HSHUHSN\UHZJtS\SHZJVU
cuerpos de inclusión citoplasmáticos perinucleares,
los cuales varían en coloración de basofílico pálido
a oscuro. Esta marcada necrosis durante la fase
aguda de la infección por YHV la distingue de TSV
que causa lesiones similares en otros tejidos pero
UV LU LS 63 9LJPLU[LTLU[L ZL OH JVTWYVIHKV
que infecciones severas por WSSV pueden causar
también este tipo de necrosis en el OL, sin embargo,
en el caso de WSSV se pueden observar los cuerpos
de inclusión intranucleares en combinación con la
necrosis severa del órgano. La necrosis severa del
OL no debe tomarse por si sola como evidencia
concluyente de infección por YHV. Para poder
JVUÄYTHYLSKPHNU}Z[PJVKL@/=LZULJLZHYPVSSL]HY
a cabo pruebas adicionales (como por ejemplo,
OPIYPKHJP}U PU ZP[\ JVU ZVUKHZ LZWLJxÄJHZ WHYH SH
KL[LJJP}U KL @/= V 9;7*9 ;PUJP}U! / , KL
4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U?
91

YHV
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV H [YH]tZ KL SHZ

branquias de un juvenil P. duorarum infectado
experimentalmente con YHV. Se puede observar
una necrosis severa (grado G4), de multifocal
a difusa, caracterizada por la presencia de
JtS\SHZJVU\UPUJYLTLU[VLUSHLVZPUVÄSPHKLS
JP[VWSHZTH ` UJSLVZ WPJU}[PJVZ;PUJP}U! / ,
KL4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVH[YH]tZKLS}YNHUVSPUMVPKL
de un camarón P. monodon infectado por YHV. El
especimen fue sujeto a una prueba de hibridación in situ
JVU \UH ZVUKH NLUt[PJH THYJHKH JVU +0. LZWLJxÄJH
para la detección del virus de la cabeza amarilla
(YHV). Se puede observar una intensa reacción positiva
(deposición de un precipitado azul oscuro o negro) a la
sonda dentro del citoplasma de las células parenquimales
de un esferoide en el órgano linfoide. Aparentemente
las estructuras conocidas como “esferoides” del órgano
SPUMVPKL,63ZVU\UHYLZW\LZ[HUVLZWLJxÄJHKLSZPZ[LTH
inmunológico del camarón contra una variedad de
agentes patógenos. Además de YHV, se han observado
EOLs durante la fase crónica o de recuperación de TSV
y también durante algunas enfermedades bacterianas.
Los EOL no deben tomarse como una característica
KPHNU}Z[PJH KLÄUP[P]H KL UPUN\UH LUMLYTLKHK 3H
presencia de EOL debe ser interpretada dentro del
contexto del histórico de las muestras y la sospecha de
\UHKL[LYTPUHKHLUMLYTLKHK]PYHSKLILZLYJVUÄYTHKH
por medio de otros métodos; por ejemplo, hibridación
in situ con la sonda genética apropiada. Tinción:
Bismarck Brown y sonda genética marcada con DIG.
4HNUPÄJHJP}U?
2.6 Virus de la mionecrosis infecciosa (Infectious myonecrosis virus,

045=
Mionecrosis infecciosa; Necrosis infecciosa del músculo.
Agente Etiológico
Virus de la mionecrosis infecciosa.
Agente
045=LZ\U]PY\Z[LU[H[P]HTLU[LJSHZPÄJHKVJVTV\U[V[P]PY\Z-HTPSPH;V[P]PYPKHL
Los viriones son de forma icosaédrica, con un diámetro de aproximadamente 40 nm y
92
\UHKLUZPKHKKLLUNYHKPLU[LZKLJSVY\YVKLJLZPV,SNLUVTHJVUZPZ[LKL\UH
ZVSHTVStJ\SHKL(95KLKVISLJHKLUHKZ95(,SNLUVTHJVUZPZ[LKLWHYLZKL
bases.
9HUNVNLVNYmÄJV`KLLZWLJPLZHMLJ[HKHZ
IMNV infecta camarones peneidos. Infecciones naturales han sido observadas
únicamente en Penaeus vannamei. Infecciones experimentales han sido logradas con P.
stylirostris y P. monodon. IMNV es una enfermedad que se descubrió por primera vez
LUSHJVZ[HKLS5VYKLZ[LKL)YHZPS7VZ[LYPVYTLU[LZLKPZLTPU}HSZ\YLZ[LKL(ZPH1H]H
Indonesia) en donde se piensa fue introducido a través de la importación de camarones
P. vannamei infectados.
La transmisión de la enfermedad puede ocurrir horizontalmente a través del agua y
canibalismo. Se piensa que la transmisión vertical es bastante probable, pero no ha sido
demostrada experimentalmente.
La enfermedad de IMN no es la misma que la conocida como “enfermedad de la
cola blanca”. Ambas enfermedades resultan en la necrosis del músculo esquelético y
aparentemente los signos son muy similares. Sin embargo, la enfermedad de la cola
blanca es causada por un virus completamente diferente a IMNV.
Los estadíos de vida del camarón afectados por IMNV incluyen postlarvas, juveniles
y adultos.
Tejidos/órganos afectados
Típicamente se incluyen el músculo esquelético (y el cardiaco con menor frecuencia),
tejido conectivo, hemocitos y las células parenquimales del órgano linfoide.
Lesiones observadas a nivel macroscópico

Los camarones infectados presentan áreas necróticas en el músculo estriado
(esquelético) del abdomen (cola). Estas áreas necróticas son multifocales en sus inicios y
posteriormente se vuelven más difusas, incrementando en tamaño hasta que se expandan
abarcando casi la totalidad de la cola. En estadios avanzados de la enfermedad, las
zonas necróticas adquieren una coloración rojiza-anaranjada. Los camarones continúan
alimentándose a pesar de estar infectados severamente. Si estos camarones son
estresados (por ejemplo, al ser capturados con una atarraya, o debido a cambios drásticos
en la salinidad, temperatura, etc.) se pueden volver moribundos y la mortandad puede
sobrevenir rápidamente y continuar por varios días.
Si se hace una disección en fresco para exponer el órgano linfoide, se puede
VIZLY]HYX\LHTIVZS}I\SVZZLLUJ\LU[YHUOPWLY[YVÄHKVZHKX\PYPLUKV\U[HTH|V
veces mayor de lo normal.
Lesiones observadas a nivel microscópico

Preparaciones de músculo en fresco ya sea teñidas o sin teñir, muestran la presencia
KLHUVYTHSPKHKLZWVYLQLTWSVH\ZLUJPHKLLZ[YPHJPVULZÄIYHZKLMVYTLZVMYHNTLU[HKHZ
L[J7YLWHYHJPVULZKLS}YNHUVSPUMVPKLLUMYLZJVW\LKLUWVULYKLTHUPÄLZ[VSHWYLZLUJPH
de masas esféricas (esferoides), entre los túbulos normales.
93
Procedimientos de diagnóstico
Diagnóstico presuntivo. Basado en historial del caso y signos clínicos descritos
anteriormente.
+PHNU}Z[PJVJVUÄYTH[VYPVBasado en uno o más de los siguientes métodos:
Histopatología. Utilizando técnicas de rutina con tinciones de hematoxilina-eosina
/ , ZL W\LKL VIZLY]HY X\L LU SVZ JHTHYVULZ PUMLJ[HKVZ ZL WYLZLU[H \UH ULJYVZPZ
KL[PWVJVHN\SH[P]VLUSHZÄIYHZT\ZJ\SHYLZLZ[YPHKHZHJVTWH|HKHMYLJ\LU[LTLU[LWVY
edema. En algunos casos, es posible observar una combinación de lesiones “nuevas”
o agudas y “viejas” o crónicas. El progreso de las lesiones parece ir de los niveles más
agudos en donde predomina la necrosis coagulativa, hasta los estadios más crónicos
LU KVUKL ZL VIZLY]H WYPTLYV PUÄS[YHJP}U OLTVJx[PJH ` WVZ[LYPVYTLU[L \UH TH[YPa
Z\LS[HKLÄIYVJP[VZ`ÄIYHZKL[LQPKVJVULJ[P]VTLaJSHKHZJVUÄIYHZT\ZJ\SHYLZYLJPtU
YLNLULYHKHZ ,S HUmSPZPZ OPZ[VS}NPJV [HTIPtU W\LKL WVULY KL THUPÄLZ[V SH OPWLY[YVÄH
del órgano linfoide ocasionada por la acumulación de esferoides. Esta lesión se presenta
de manera muy consistente en camarones durante las fases agudas y crónicas de la
enfermedad. Con frecuencia, estos esferoides se pueden observar también en otras partes
del cuerpo del camarón, incluyendo el corazón, branquias, glándula antenal, cordón
ventral nervioso, tejido conectivo, etc. El análisis histológico también puede poner de
THUPÄLZ[V SH WYLZLUJPH KL J\LYWVZ KL PUJS\ZP}U PU[YHJP[VWSmZTPJVZ LU SHZ JtS\SHZ KLS
músculo esquelético, órgano linfoide y/o tejido conectivo.
RT-PCR. Utilizando los métodos descritos por Poulos et al. 2006, o bien alguno de los
“kits” disponibles en el mercado (por ejemplo, IQ2000). Debido a la gran similitud
entre las lesiones producidas por IMNV y por PvNV, es aconsejable combinar el análisis
OPZ[VS}NPJV JVU LS 9;7*9 V JVU WY\LIHZ KL OPIYPKHJP}U in situ y sondas genéticas
LZWLJxÄJHZWHYHWVKLYVI[LULY\UKPHNU}Z[PJVJVUÄYTH[VYPVJVUÄHISL
94

IMNV
-PN\YH :PNUVZ JSxUPJVZ KL SH LUMLYTLKHK

causada por IMNV. Camarones Penaeus
vannamei tomados de un estanque de cultivo.
La necrosis del músculo es evidente en forma de
áreas opacas de color blanquecino.

causada por IMNV. En estadíos más avanzados,
el músculo necrosado puede adquirir una
coloración anaranjada/rojiza, como se puede
observar en el especimen superior.
-PN\YH 5LJYVZPZ KL [PWV JVHN\SH[P]V

HJVTWH|HKH KL PUÅHTHJP}U OLTVJx[PJH `
ÄIYVZPZ *VTV YLMLYLUJPH ZL W\LKL VIZLY]HY
una porción de músculo esquelético normal
en la esquina superior derecha. Tinción:
/LTH[V_PSPUHLVZPUHÅV_PUH KL 4H`LY)LUUL[[
Barra= 50 μm.
95

IMNV
-PN\YH 3HZ ÅLJOHZ T\LZ[YHU HSN\UVZ

ejemplos de cuerpos de inclusión
PU[YHJP[VWSmZTPJVZ KL [PWV IHZ}ÄSV KLU[YV
de un grupo de células del músculo. Tinción:
/LTH[V_PSPUHLVZPUHÅV_PUH KL 4H`LY)LUUL[[
Barra= 20 μm.
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL TZJ\SV

esquelético sometido a una prueba de hibridación
in situJVU\UHZVUKHNLUt[PJHLZWLJxÄJHWHYHSH
detección de IMNV. El precipitado de color azul
oscuro indica los lugares en donde la sonda ha
reaccionado con el virus. Tinción de contraste:
Café de Bismarck. Barra= 50 μm.
4PVULJYVZPZ PUMLJJPVZH ]PYHS 045= ` Z\Z PTWSPJHJPVULZ LU SVZ

cultivos de camarones brasileños
Alitiene Moura Lemos Pereira¹, Emiko Shinozaki Mendes², Tereza Cristina Vasconcelos
Gesteira³
ê,TIYHWH4LPV5VY[L)9RT*77HYUHxIH70)YHZPSHSP[PLUL'JWHTULTIYHWHIY
õ<UP]LYZPKHKL-LK9\YHSKL7LYUHTI\JV(]+VT4HUVLSKL4LKLPYVZZU9LJPML7,)YHZPSLZTLUKLZ'KT]
ufrpe.br
³ <UP]LYZPKHKL-LKKV*LHYm3()64(9(]KH(IVSPsqV-VY[HSLaH*,)YHZPSJNLZ[LPYH'SHIVTHY\MJIY
96
Introducción
El cultivo de camarón brasileño concentró sus esfuerzos en el desarrollo de un
sistema de producción con la especie Litopenaeus vannameiUH[P]HKLSVJtHUV7HJxÄJV
luego de problemas de baja productividad y adaptación al medio ambiente con especies
nativas y exóticas en los años 90. Esta especie ampliamente estudiada, demostraba un
buen desempeño zootécnico, rusticidad y adaptabilidad, además de que ya se conocía
su tecnología de producción y formulación para alimento balanceado, con base en
sus requerimientos nutricionales. El factor decisivo para la escogencia de esta especie,
fue el incremento exponencial de producción obtenido en Brasil, permitiéndose así la
importación de larvas y reproductores de otros países y resultando en aumento de divisas
WHYHLSZLJ[VYWYVK\J[P]V-PN\YH
A pesar de las mejoras económicas y del crecimiento de la producción (70% al año),
pasando de 2.880 toneladas en 1996 a 25.000 toneladas en 2000, el sistema de cultivo
utilizado con esta nueva especie presentó fallas, debido a problemas de adaptación,
H\ZLUJPHKL[tJUPJHZHKLJ\HKHZKLJ\S[P]V`H\TLU[VKLSHPU[LUZPÄJHJP}UKLSZPZ[LTH
de producción, lo cual no fue acompañado de un aumento importante del área cultivada
(MAPA, 2001).
Figura 2.37. Producción y productividad del camarón Litopenaeus vannamei

cultivado en Brasil. Fuente: Asociación Brasileña de Criadores de Camarón –
ABCC.
El sistema intensivo de cultivo de camarón, fue empleado en muchos casos con

instalaciones inadecuadas, sin el monitoreo y conocimiento técnico necesarios.
La inexistencia de medidas de bioseguridad permitió el libre transito de larvas y
reproductores entre los diversos estados, sin el mínimo control sanitario para el transporte
de camarones.
Considerando que las enfermedades infecciosas ocurren con frecuencia en los
J\S[P]VZKL[VKVLST\UKVÙ\L]HZLWPaVV[PHZKLVYPNLU]PYHSZVUPKLU[PÄJHKHZHJHKH
año, ya habían sido registradas enfermedades causadas por virus, bacterias y protozoarias
LU SHZ ÄUJHZ JHTHYVULYHZ IYHZPSL|HZ ZPU YLWVY[LZ KL WtYKPKHZ PTWVY[HU[LZ .LZ[LPYH
2006).
97
Surgimiento de la Mionecrosis Infecciosa Viral

El primer reporte de Mionecrosis Infecciosa viral (IMNV) en Brasil, se dio en
septiembre de 2002 en una camaronera del Estado del Piauí, con registros de mortalidad
diaria principalmente a partir de 7 g, en animales que presentaron como principal signo
clínico opacidad en el músculo abdominal (Nunes et al., 2004).
Existen dudas sobre una posible ocurrencia previa de esta enfermedad, debido
H X\L ZPNUVZ ZLTLQHU[LZ OHIxHU ZPKV YLWVY[HKVZ OHJL H|VZ ` KPMLYLU[LZ H\[VYLZ `H
relacionaban la necrosis muscular con factores climáticos o con situaciones de extremo
estrés tales como lluvias intensas, elevaciones bruscas de temperatura y salinidad,
reducción del nivel de oxígeno, alta densidad de población y la presencia de polución
química en el agua (Lakshmi et al.,1978; Sindermann y Lightner, 1988).
Esas enfermedades, en aquel momento llamadas Necrosis Muscular Idiopática,
fueron diagnosticadas en Penaeus aztecusLU,<(LU 9PNKVU )H_[LY `
en México en 1978, y relaciona con cambios de temperatura y salinidad, mostrando
ZPTPSP[\KJVUSHLUMLYTLKHKVIZLY]HKHLUSVZ,<(3HRZOTPL[HS -\L[HTIPtU
reportada en la especie nativa Farfantepenaeus subtilis en la zona costera del estado de
Piauí en los años 80 (Lightner, 2004).
Ninguno de los reportes anteriores presentaba una mortalidad de 70% y la
ocurrencia de estos brotes fue considerada como una “enfermedad de manejo”, la
cual sería solucionada con una mejora de las condiciones ambientales y la corrección
de las eventuales fallas técnicas realizadas por los técnicos de campo. Así como otras
LUMLYTLKHKLZ LZ[H [HTIPtU WHYLJxH ZLY T\S[PMHJ[VYPHS ;OY\ZÄLSK OHIPLUKV \U
agente principal en el caso del virus de la mionecrosis infecciosa.
-\LYVU LTP[PKHZ HSN\UHZ OPW}[LZPZ ZVIYL SH JH\ZH KL LZ[H TPVULJYVZPZ JVTV WVY
ejemplo la ocurrencia de la enfermedad del algodón causada por un microsporidio
y que provoca pérdida de la transparencia del músculo abdominal; el síndrome del
encalambramiento (CMS) o, desequilibrio mineral en el alimento. Debido a la falta de
precisión para determinar la causa de la enfermedad, esta pasó a ser llamada Necrosis
Muscular Idiopática (NMI); es decir, de causa desconocida.
,USVZWYPTLYVZTLZLZKL`K\YHU[LLSPU]PLYUVSVZLZ[HKVZKLS*LHYm`7PH\x
se vieron afectados por precipitaciones elevadas, con caídas bruscas de la salinidad (de
WW[HWW[[LTWLYH[\YHZLSL]HKHZ`LSL]HKHHÅVYHJP}UKLJPHUVIHJ[LYPHZLUSVZ
estanques. Estas condiciones ambientales agravaron la aparición de los signos clínicos
observados anteriormente en camarones cultivados en Piauí y se hicieron los primeros
registros de camarones enfermos en camaroneras del estado de Ceará.
Se hicieron cambios en la metodología de cultivo y en los tratamientos para la
mionecrosis, tales como incremento del recambio diario de agua (>20%), aplicación de
JHSLUSVZLZ[HUX\LZHRNOH`YLK\JJP}UKLSHKLUZPKHKKLJ\S[P]V:PULTIYHNV
a pesar de la utilización de esas medidas y la elevación de la salinidad por disminución
de las lluvias, no se logró eliminar la mionecrosis del país. Según la Asociación Brasileña
de Criadores de Camarón – ABCC, las pérdidas debido a IMNV fueron estimadas en 20
millones de dólares sólo durante 2004.
Diseminación de la enfermedad
Varios profesionales y productores del Nordeste de Brasil, registraron las
alteraciones más comunes en los ambientes de cultivos y su relación con la evolución
de la enfermedad. Sin embargo, como se trataba de una nueva enfermedad, fue difícil
su caracterización. A pesar de lo anterior, el intercambio de información entre el sector
98
JPLU[xÄJV`WYVK\J[P]VKLSWHxZM\LTxUPTV`SHTH`VYxHKLSVZWYVK\J[VYLZUVZHIxHSV
que estaba ocurriendo. Para agravar la situación, la ausencia de barreras sanitarias en
la actividad acuícola del país, permitió la rápida diseminación de la enfermedad entre
SHZJHTHYVULYHZKLSH9LNP}U5VYKLZ[LKL)YHZPST\JOVHU[LZKLX\LZLJVUVJPLYHSH
verdadera dimensión del problema.
Con la diseminación de la enfermedad en ambientes adversos, el rango de los
brotes se fue ampliando llegando a afectar sistemas de producción con las siguientes
condiciones:
-HZLZKLWYLJYxHJVUKLUZPKHKLZKLHWSZSP[YV
-HZLKLLUNVYKLJVUJHTHYVULZKLNWYVTLKPV
,UKLUZPKHKLZKLHJHTHYVULZT2
*HTHYVULZ WYVJLKLU[LZ KL KPMLYLU[LZ SHIVYH[VYPVZ KL WYVK\JJP}U KL WVZ[
larvas
*\S[P]VZX\L\[PSPaHU]HYPHKHZTHYJHZKLHSPTLU[VZJVTLYJPHSLZ
,UJ\S[P]VZJVUSH]HYPHISLZMxZPJHZ`X\xTPJHZHJLW[HISLZWHYHSHLZWLJPL
3HZ\WLY]P]LUJPHWYVTLKPVVI[LUPKHM\LKLHJVU\U-*(%!
Algunos productores cultivaron L. vannamei en agua dulce durante el período de
gran incidencia de mionecrosis y no reportaron problemas con la enfermedad. Pero el
virus puede presentarse también en animales cultivados en agua dulce y afectar todos
los estadios de desarrollo.
Etiología
)PVLUZH`VZYLHSPaHKVZLUSHIVYH[VYPVWVY.YHML[HSL_WVUPLUKVPUKP]PK\VZ
presumiblemente saludables a tejidos de camarones con signos clínicos de
mionecrosis, mostraron que el mayor vector de transmisión de esa patología, fue
la ingestión directa de los tejidos contaminados, caracterizando por tanto, su
transmisión horizontal.
+LZW\tZ KL SH JVUÄYTHJP}U KL SH UH[\YHSLaH PUMLJJPVZH H [YH]tZ KL KLZHMxVZ WVY
PU`LJJPVULZ ` WYLWHYHJP}U KL [LQPKVZ JVU[HTPUHKVZ LU PUKP]PK\VZ :7- LS HNLU[L
JH\ZHU[LKL045M\LPKLU[PÄJHKVJVTV\U]PY\ZWLY[LULJPLU[LHSHMHTPSPH;V[P]PYPKHL
3PNO[ULY`7HU[VQH3HW\YPÄJHJP}U`JHYHJ[LYPaHJP}UKLS]PY\ZKLUVTPUHKV
virus de la mionecrosis infecciosa, fueron efectuadas por Poulos et al. (2006). La
partícula viral tiene forma icosahédrica y mide 40 nm de diámetro. Su genoma está
MVYTHKVWVY\UHTVStJ\SHKL(95KLKVISLJHKLUHKZ95(KLIW
,Z[HLUMLYTLKHKJVUVJPKHJVTV045=5LJYVZPZ0UMLJJPVZH4\ZJ\SHYV4PVULJYVZPZ
Infecciosa Viral), tuvo su primer registro en los estados del Nordeste de Brasil y más
recientemente en L. vannamei cultivado en Indonesia (Senapin et al., 2007). La
KL[LJJP}UM\LOLJOH\[PSPaHUKV\URP[JVTLYJPHSKL9;7*9`HUmSPZPZZ\IZLJ\LU[LZ
revelaron que la muestra del IMNV de Indonesia tenía 99,6% de similitud con
la secuencia del ácido nucleico del IMNV brasileño registrado en GeneBank.
:LNUHSN\UVZH\[VYLZ`JVTVPUMVYTHJP}UL_[YHVÄJPHSO\IVLU[YHKHPYYLN\SHYKL
YLWYVK\J[VYLZWYV]LUPLU[LZKLS)YHZPSLUSH0ZSHKL1H]H
(KLTmZKLSKPHNU}Z[PJVKLSHLUMLYTLKHKLU[VKHZSHZMHZLZKLJ\S[P]VWVZ[SHY]H
juvenil y adulto) de la especie L. vannamei, también se han mostrado susceptibles al
virus IMNV camarones de las especies L. stylirostris y Penaeus monodon, presentando
signos clínicos y alteraciones en los tejidos característicos de la enfermedad (Tang et
al., 2005).
99
Métodos de diagnóstico
El diagnóstico puede ser presuntivo con base en la sintomatología observada
macroscópicamente, siendo el foco principal la pérdida de transparencia del músculo
abdominal. También se puede detectar la enfermedad a través de estudios histopatológicos,
cuando son investigadas posibles alteraciones en los órganos internos y tejidos. La
hibridación in situ fue desarrollada y optimizada como una herramienta de diagnóstico
WVY;HUNL[HS6[YVTt[VKVTVSLJ\SHYWHYHSHKL[LJJP}UKLS]PY\ZLZSH9;7*9
(UKYHKLL[HSTVZ[YHYVUX\LLS9;7*9\ZHKVJVUZVUKHZ;HX4HUYLZ\S[HZLY\U
método de diagnóstico de alta sensibilidad.
Signos clínicos
En el inicio del brote de la IMN, los camarones presentaban opacidad focal o
multifocal del músculo del abdomen y en casos de mayor severidad, se tornaban rojizos,
principalmente en el último segmento. Los individuos quedaban aletargados, presentaban
baja conversión alimenticia, abdomen encalambrado (en algunos casos), expansión de
los cromatóforos, reducción de la tasa de crecimiento y tiempo elevado de coagulación
KLSHOLTVSPUMH-PN\YHHÌ
De acuerdo con lo reportado por Gesteira (2006), los grados de infección pueden
cambiar y presentar cuadros clínicos diversos:
+LSL]LHTVKLYHKV¶IHQHTVY[HSPKHK`TLUVZKLKLSVZJHTHYVULZJ\S[P]HKVZ
presentan signos clínicos.
(N\KHLSL]HKHTVY[HSPKHKTmZKLKLSHWVISHJP}UJ\S[P]HKHWYLZLU[HZPNUVZ
clínicos con nivel de severidad de medio a alto.
*Y}UPJH¶TVY[HSPKHKIHQHWLYVWLYZPZ[LU[L`ZPNUVZJSxUPJVZWLYJLW[PISLZLUTLUVZ
de 5% de los individuos. En ese estado se pueden presentar signos agudos, cuando se
presentan fallas de manejo o cualquier otro evento que produzca en los camarones
una condición de inmunosupresión.
Aparentemente, la mionecrosis es una enfermedad que surge como consecuencia de
fallas de manejo, o en sistemas sobrecargados de materia orgánica. Todos los eventos han
tenido en común el desequilibrio de condiciones de cultivo, denominadas “detonantes”
por muchos autores, las cuales desencadenan la enfermedad e incluyen el exceso de
lluvias, presencia elevada de plancton, infestación elevada de parásitos como gregarinas
o, acción de bacterias oportunistas como los vibrios.
*VTVJVUZLJ\LUJPHKLSHLUMLYTLKHKSHZÄUJHZJHTHYVULYHZOHUHKVW[HKVI\LUHZ
prácticas de manejo que incluyen bajar las densidades de siembra y buen tratamiento de
suelo entre los ciclos de cultivo, entre otras. Con éstas, se obtienen buenos resultados de
WYVK\JJP}UÄUHSHWLZHYX\LZLKL[LJ[LUSLZPVULZZ\NLZ[P]HZKLTPVULJYVZPZK\YHU[LLS
HUmSPZPZWYLZ\U[P]VVJVUÄYTH[VYPVK\YHU[LLSJPJSV3HWYLZLUJPHKLW\[YLMHJJP}ULULS
S[PTVZLNTLU[VHIKVTPUHSX\LZLVIZLY]}HSWYPUJPWPVKLSVZIYV[LZLU)YHZPS
prácticamente no se observan en la actualidad.
Histopatología:
Los exámenes histopatológicos muestran diferentes alteraciones en órganos y tejidos
afectados por el IMNV, dependiendo del grado de severidad de la enfermedad. El aumento
en la talla del órgano linfoide es común y también es frecuente observar esferoides en
LZ[L }YNHUV S`TWOVPK VYNHU ZWOLYVPKZ 36: -PN\YH 7\LKLU ZLY LUJVU[YHKVZ
los ectópicos en tejido conjuntivo, músculo del corazón y próximos a los túbulos de
SH NSmUK\SH HU[LUHS -PN\YH H ` I 3HZ SLZPVULZ KLS [LQPKV T\ZJ\SHY KLWLUKLU
100
del grado de severidad de la infección, pudiéndose presentar en la fase inicial una

PUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH3HMHZLHN\KHZLJHYHJ[LYPaHWVYZLY\UHULJYVZPZKLJVHN\SHJP}U
JVU WYLZLUJPH KL LKLTH ` \U LSL]HKV KH|V LU SHZ ÄIYHZ T\ZJ\SHYLZ T\JOHZ ]LJLZ
substituidas por tejido conjuntivo. En esta fase, se observan cuerpos de inclusión típicos
de enfermedades virales, detectados en células musculares, tejido conectivo y hemocitos
-PN\YHHÌ3HULJYVZPZKLSPJ\LMHJJP}U-PN\YHJVUPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH
LUTZJ\SVHMLJ[HKVPUÅHTHJP}U`ÄIYVZPZVJ\YYLLUJHTHYVULZLUMHZLJY}UPJHKLSH
enfermedad, cuando los LOS ectópicos son más comúnmente visualizados (Lightner y
Pantoja, 2004; Lightner et al., 2004; Gesteira, 2006).
-PN\YH *HTHY}U WVY[HKVY KL 045=

presentando opacidad del músculo abdominal
Autor: Pereira, A.
-PN\YH *HTHYVULZ TVZ[YHUKV KPMLYLU[LZ

grados de lesión muscular . Autor: Pereira, A.
-PN\YH ¶ ÔYNHUV SPUMVPKL TVZ[YHUKV SH

WYLZLUJPH KL LZMLYVPKL ZL[H / , (\[VY!
Gesteira, T.C.V.
101
-PN\YH¶H-V[VKLTPJYVNYHMxHZTVZ[YHUKVSHWYLZLUJPHKL36:LJ[}WPJVZLUSHYLNP}UJHYKPHJHZL[HZ"IKL[HSSLTH`VY/
,(\[VY!7LYLPYH(4
-PN\YH¶H4PVULJYVZPZHJVTWH|HKHKLPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`ÄIYVZPZ"ISLZPVULZJVHN\SH[P]HZT\ZJ\SHYLZYLZ\S[HU[LZKL
SHHJJP}UKLS]PY\ZKLSHTPVULJYVZPZ/ ,(\[VY!.LZ[LPYH;*=
-PN\YH5LJYVZPZKLSPJ\LMHJJP}UYLZ\S[HU[LKLSHHJJP}UKLS
]PY\ZKLSHTPVULJYVZPZPUMLJJPVZH/ ,(\[VY!7LYLPYH(4
102
Diagnóstico diferencial
La necrosis muscular en el abdomen de los camarones, es una lesión que puede
ocurrir como consecuencia de estrés, bajas de oxígeno, alta densidad de siembra,
JHTIPVIY\ZJVKL[LTWLYH[\YHVZHSPUPKHK3HRZOTPL[HS "9PNKVT )H_[LY
y también puede ser resultante de la acción de un agente infeccioso, como el caso de la
IMNV. Lesiones similares se observan en la enfermedad de la cola blanca causada por
un Nodavirus.
A pesar de la importancia de la histopatología como herramienta de diagnóstico
JVUÄYTH[VYPVLS\ZVKLZVUKHZNLVU}TPJHZJVTVOPIYPKHJP}Uin situV7*9NHYHU[PaHU
\UH TH`VY ZLUZPIPSPKHK ` LZWLJPÄJPKHK LU LS KPHNU}Z[PJV <U LQLTWSV LZ SH ULJYVZPZ
muscular detectada en camarones de la especie L. vannamei procedentes de Belice.
Según Tang et al, (2007), los individuos presentaban la misma opacidad muscular en
el abdomen, con características histopatológicas similares a aquellas observadas en
portadores de IMNV. Después del examen utilizando las técnicas de hibridación in situ
`9;7*9SVZYLZ\S[HKVZM\LYVUULNH[P]VZWHYH045=Z\NPYPLUKVX\LSHLUMLYTLKHKLYH
JH\ZHKHWYVIHISLTLU[LWVYV[YV]PY\Z95(3VZH\[VYLZLUJVU[YHYVU KLZPTPSP[\K
de este virus de Belice con el nodavirus del Macrobrachium rosenbergii, adoptando este
nuevo virus la denominación de PvNV (Penaeus vannamei nodavirus).
Además de agentes virales, las bacterias también pueden causar opacidad muscular
que se asemeja a la observada en IMNV (Lightner, 1996), como por ejemplo los vibrios
y las pseudomonas. La diferencia puede ser vista a través de histopatología (ausencia de
J\LYWVZKLPUJS\ZP}UVTLKPHU[LWY\LIHZTVSLJ\SHYLZJVTV9;7*9
Tratamientos
Considerando las características del sistema inmune de los camarones, no existe
\U [YH[HTPLU[V LZWLJxÄJV WHYH SH 045= *VTV J\HSX\PLY LUMLYTLKHK SHZ TLKPKHZ
WYL]LU[P]HZZVUSHZTmZLJVU}TPJHZ`LÄJHJLZ<UI\LUTHULQVKLSVZJ\S[P]VZKLIL
incluir la adopción de normas de bioseguridad para evitar la entrada y establecimiento de
nuevos patógenos y permitir una mejor supervivencia en la presencia de enfermedades.
*VUZPKLYHJPVULZÄUHSLZ
(J[\HSTLU[LLUT\JOHZÄUJHZJHTHYVULYHZHSN\UHZKLSHZWYmJ[PJHZKLTHULQVKL
cultivos fueron cambiadas principalmente por reducción de la densidad de siembra (10
a 40 camarones/m2), tratamientos del suelo entre los cultivos, preparación y fertilización
de los estanques y vaciado sanitario entre los ciclos de cultivo.
En algunos laboratorios productores de pls, fueron implementados programas de
TLQVYHTPLU[V NLUt[PJV PUJS\ZP]L JVU PTWVY[HJP}U KL YLWYVK\J[VYLZ :7- ` :79 X\L
podrían proporcionar pls de buena calidad y con menores posibilidades de enfermedad
por IMNV. En otros laboratorios, a pesar de no tener implementada esas prácticas, han
sido cuidadosos con la bioseguridad y por ello, en cultivos que son bien manejados, no
se detecta una incidencia elevada de IMN. En la actualidad, a pesar de que en Brasil
se pueden observar lesiones sugestivas de mionecrosis durante análisis presuntivos o
JVUÄYTH[VYPVZLUJHTHYVULZSHZ\WLY]P]LUJPHWYVTLKPVLZKL
103
7LUHL\Z]HUUHTLPUVKH]PY\Z7]5=
Nombre de la enfermedad: Enfermedad de la cola blanca.
Nombre del agente: Penaeus vannamei nodavirus.
Agente
7]5=LZ\U]PY\Z[LU[H[P]HTLU[LHZPNUHKVHSH-HTPSPH5VKH]PYPKHL3VZ]PYPVULZZVU
de forma icosaédrica, con un diámetro de aproximadamente 22 nm. El genoma consiste
KLKVZTVStJ\SHZKL(95KLJHKLUHZLUJPSSHZZ95(
9HUNVNLVNYmÄJV`LZWLJPLZHMLJ[HKHZ
Infecciones naturales han sido observadas únicamente en Penaeus vannamei.
Infecciones experimentales han sido logradas con P. monodon. PvNV fue descubierto
por primera vez en Belice y aunque se sospecha que pueda estar presente en otros países
de Centro y Sudamérica, hasta la fecha no se sabe de brotes en otros países los cuales
OH`HUZPKVKLIPKHTLU[LJVUÄYTHKVZ
La transmisión de la enfermedad puede ocurrir horizontalmente a través de
canibalismo y posiblemente a través del agua. Existe la posibilidad de transmisión
vertical, pero no ha sido demostrada experimentalmente.
Hasta el momento, los estadios de vida del camarón que se sabe son afectados por
PvNV, incluyen juveniles y sub-adultos. Se ignora el efecto de la enfermedad en adultos
reproductores y estadios larvales.

Típicamente se incluyen el músculo esquelético, tejido conectivo, hemocitos y las
células parenquimales del órgano linfoide.

Al igual que con IMNV, los camarones infectados presentan áreas necróticas en el
músculo estriado (esquelético) del abdomen (cola). En sus inicios, las áreas necrosadas
son relativamente pequeñas y multifocales, posteriormente aumentando su tamaño hasta
coalescer abarcando casi la totalidad de la cola. Aunque no muy frecuentemente, en
estadíos avanzados de la enfermedad, las zonas necrosadas pueden volverse rojizas. Los
camarones continúan alimentándose a pesar de estar infectados severamente. Si estos
camarones son estresados (por ejemplo, al ser capturados con una atarraya, o debido
a cambios drásticos en la salinidad, temperatura, etc.), pueden pasar a la condición
de moribundos y la mortandad puede sobrevenir rápidamente continuando por varios
días.
Si se hace una disección en fresco para exponer el órgano linfoide, es posible
VIZLY]HYOPWLY[YVÄHLUHTIVZS}I\SVZHKX\PYPLUKV\U[HTH|V]LJLZTH`VYKLSV
normal.
Lesiones observadas a nivel microscópico

Preparaciones de músculo en fresco ya sea teñidas o sin teñir, muestran la presencia
KLHUVYTHSPKHKLZWVYLQLTWSVH\ZLUJPHKLLZ[YPHJPVULZÄIYHZKLMVYTLZVMYHNTLU[HKHZ
L[J7YLWHYHJPVULZKLS}YNHUVSPUMVPKLLUMYLZJVW\LKLUWVULYKLTHUPÄLZ[VSHWYLZLUJPH
de masas esféricas (esferoides), entre los túbulos normales.
104

PvNV

causada por PvNV. Camarones Penaeus
vannamei mostrando focos de necrosis en el
músculo esquelético, causada por Penaeus
vannamei nodavirus, PvNV (ejemplos marcados
JVUÅLJOHZ
-PN\YH 3LZPVULZ VIZLY]HKHZ H UP]LS

histológico. A) Necrosis del músculo esquelético,
HJVTWH|HKH KL PUÄS[YHJP}U OLTVJx[PJH )
Cuerpos de inclusión intracitoplásmicos, de tipo
basofílico, en células del músculo esquelético.
C) Cuerpos de inclusión intracitoplásmicos, de
tipo basofílico, en células del órgano linfoide.
;PUJP}U!/LTH[V_PSPUHLVZPUHÅV_PUHKL4H`LY
Bennett. Barras= 25 μm.
anteriormente.
Histopatología. Utilizando técnicas de rutina con tinciones de hematoxilina-eosina
/ ,ZLW\LKLVIZLY]HYX\LLUSVZJHTHYVULZPUMLJ[HKVZZLWYLZLU[H\UHULJYVZPZ
KL[PWVJVHN\SH[P]VLUSHZÄIYHZT\ZJ\SHYLZLZ[YPHKHZHJVTWH|HKHMYLJ\LU[LTLU[L
por edema. En algunos casos, es posible observar una combinación de lesiones
“nuevas” o agudas y “viejas” o crónicas. El progreso de las lesiones parece ir de los
niveles más agudos en donde predomina la necrosis coagulativa, hasta los estadios
TmZJY}UPJVZLUKVUKLZLVIZLY]HWYPTLYVPUÄS[YHJP}UOLTVJx[PJH`WVZ[LYPVYTLU[L
\UH TH[YPa Z\LS[H KL ÄIYVJP[VZ ` ÄIYHZ KL [LQPKV JVULJ[P]V TLaJSHKHZ JVU ÄIYHZ
105
musculares recién regeneradas. El análisis histológico también puede poner de

THUPÄLZ[V SH OPWLY[YVÄH KLS }YNHUV SPUMVPKL VJHZPVUHKH WVY SH HJ\T\SHJP}U KL
esferoides. Esta lesión se presenta de manera muy consistente en camarones
durante las fases agudas y crónicas de la enfermedad. Es posible también observar
J\LYWVZIHZ}ÄSVZPU[YHJP[VWSmZTPJVZKLU[YVKLSHZJtS\SHZKLSTZJ\SVLZX\LSt[PJV
el órgano linfoide y el tejido conectivo.
RT-PCR. Utilizando los métodos descritos por Poulos et al. 2006, o bien alguno de los
“kits” disponibles en el mercado (por ejemplo, IQ2000). Debido a la gran similitud
entre las lesiones producidas por IMNV y por PvNV, es aconsejable combinar el
HUmSPZPZOPZ[VS}NPJVJVULS9;7*9VJVUZVUKHZNLUt[PJHZLZWLJxÄJHZWVYTLKPVKL
hibridación in situWHYHWVKLYVI[LULY\UKPHNU}Z[PJVJVUÄYTH[VYPVJVUÄHISL
9LMLYLUJPHIPISPVNYmÄJHZ
General
Adams, J.R., and J.R. Bonami (eds.). ([SHZVM0U]LY[LIYH[L=PY\ZLZ*9*7YLZZ)VJH9H[VU-3
Amos, K.H. 7YVJLK\YLZMVY[OL+L[LJ[PVUHUK0KLU[PÄJH[PVUVM*LY[HPU-PZO7H[OVNLUZYK-PZO
/LHS[O:LJ[PVU(TLYPJHU-PZOLYPLZ:VJPL[`*VY]HSSPZ69)LSS;(HUK+=3PNO[ULY (U
outline of penaeid shrimp culture methods including infectious disease problems and priority drug
[YLH[TLU[Z=L[LYPUHY`HUK/\THU;V_PJVSVN` !
Bell, T.A., and D.V. Lightner. 1988. A Handbook of Normal Penaeid Shrimp Histology. Special Publication
VM;OL>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3(
Brock, J.A., and D.V. Lightner. 1990. Diseases of Crustacea. Diseases Caused by Microorganisms. pp.
0U!62PUULLK+PZLHZLZVM4HYPUL(UPTHSZ=VS000)PVSVNPZJOL(UZ[HS[/LSNVSHUK
Hamburg, Germany.
Brock, J.A., and K. Main. 1994. A Guide to the Common Problems and Diseases of Cultured Penaeus
vannamei. Published by the Oceanic Institute, Makapuu Point, P.O. Box 25280, Honolulu, HI.
241 p.
Lightner, D.V., and R.M. Redman. 1991. Hosts, geographic range and diagnostic procedures for the
WLUHLPK]PY\ZKPZLHZLZVMJVUJLYU[VZOYPTWJ\S[\YPZ[ZPU[OL(TLYPJHZWW 0U!7+L3VHJO
>1+V\NOLY[`HUK4(+H]PKZVULKZ-YVU[PLYZVM:OYPTW9LZLHYJO,SZL]PLY(TZ[LYKHT
Lightner, D.V. +PZLHZLZVMWLUHLPKZOYPTW0U!174J=L`LK*9*/HUKIVVRVM4HYPJ\S[\YL!
*Y\Z[HJLHU(X\HJ\S[\YL*9*7YLZZ)VJH9H[VU-3
Wyban, J.A., J.S. Swingle, J.N. Sweeney, and G.D. Pruder. 1992. Development and commercial
WLYMVYTHUJL VM OPNO OLHS[O ZOYPTW \ZPUN ZWLJPÄJ WH[OVNLU MYLL :7- IYVVKZ[VJR Penaeus
vannameiWW0U!1>ÌHULK7YVJLLKPUNZVM[OL:WLJPHS:LZZPVUVU:OYPTW-HYTPUN
>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3(
Lightner, D.V. 1996. A handbook of shrimp pathology and diagnostic procedures for diseases of cultured
WLUHLPKZOYPTW>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\ZPHUH<:(
IHHNV
Bell, T.A. and D.V. Lightner. 1984. IHHN virus: Infectivity and pathogenicity studies in Penaeus stylirostris
and Penaeus vannamei(X\HJ\S[\YL!
Bell, T.A., D.V. Lightner, and J.A. Brock. 1990. A biopsy procedure for the non-destructive determination
of IHHN virus infection in Penaeus vannamei. J. Aquatic Animal Health!
Kalagayan, G., D. Godin, R. Kanna, G. Hagino, J. Sweeney, J. Wyban, and J. Brock. 1991. IHHN virus as
an etiological factor in runt-deformity syndrome of juvenile Penaeus vannamei cultured in Hawaii.
J. World Aquacult. Soc.!
Lightner, D.V. +PZLHZLZ VM *\S[\YLK 7LUHLPK :OYPTW WW 0U! 17 4J=L` LK *9*
/HUKIVVRVM4HYPJ\S[\YL=VS*Y\Z[HJLHU(X\HJ\S[\YL*9*7YLZZ)VJH9H[VU-3
106
Lightner, D.V., Redman, R.M., and Bell, T.A. 0UMLJ[PV\ZO`WVKLYTHSHUKOLTH[VWVPL[PJULJYVZPZH

newly recognized virus disease of penaeid shrimp. J. Invertebr. Pathol. 42: 62-70.
Mari, J., J.R. Bonami, and D.V. Lightner. 7HY[PHSJSVUPUNVM[OLNLUVTLVMPUMLJ[PV\ZO`WVKLYTHS
and hematopoietic necrosis virus, an unusual parvovirus pathogenic for penaeid shrimps; diagnosis
VM[OLKPZLHZL\ZPUNHZWLJPÄJWYVILJ. General Virology !
Tang K.F.J., Poulos B.T., Wang J., Redman R.M., Shih H.H., Lightner D.V. .LVNYHWOPJ]HYPH[PVUZ
among infectious hypodermal and hematopietic necrosis virus (IHHNV) isolates and characteristics
of their infection. Dis. Aquat. Org.
Tang K.F.J. and Lightner D.V. 2006. Infectious hypodermal and hematopietic virus (IHHNV)-related
sequences in the genome of the black tiger prawn Penaeus monodon from Africa and Australia.
Virus Res., 118, 185-191.
WSSV
Azad I.S., Shekhar M.S., Mishra S.S., Santiago T.C. & Rao L.H. +L[LJ[PVUVM>:=ZWLJPÄJP[`[V
different tissues of tiger shrimp (Penaeus monodon), from the east coast of India, by polymerase
chain reaction and histopathology. J. Aquaculture Tropics, 17, 75-184.
Cai S., Huang J., Wang C., Song X., Sun X., Yu J., Zhang Y. & Yang C. (1995). Epidemiological studies on
[OLL_WSVZP]LLWPKLTPJKPZLHZLVMWYHÛPU J. Fish. China, 19, 112-117.
Chakraborty A., Otta S.K., Joseph B., Kumar S., Hossain M.S., Karunasagar I., Venugopal M.N. &
Karunasagar I. (2002). Prevalence of white spot syndrome virus in wild crustaceans along the
coast of India. Current Science (Bangalore)
Chang C.F., Su M.S., Chen H.Y. & Liao I.C. +PL[HY` IL[HNS\JHU LMMLJ[P]LS` PTWYV]LZ
immunity and survival of Penaeus monodon challenged with white spot syndrome virus. Fish
:OLSSÄZO0TT\UVS
Chang P.S, Chen L.J. & Wang Y.C (1998). The effect of ultraviolet irradiation, heat, pH, ozone, salinity
and chemical disinfectants on the infectivity of white spot syndrome baculovirus. Aquaculture,
166 (1-2), 1-17.
Chang P.S., Lo C.F., Wang Y.C. & Kou G.H. 0KLU[PÄJH[PVUVMÔP[LZWV[ZÙKYVTLHZZVJPH[LK
baculovirus (WSBV) target organs in the shrimp Penaeus monodon by in-situ hybridization. Dis.
Aquat. Org.
Chang Y.S., Lo C.F., Peng S.E., Liu K.F., Wang C.H. & Kou G.H. (2002). White spot syndrome virus
>::=7*9WVZP[P]L(Y[LTPHJ`Z[Z`PLSK7*9ULNH[P]LUH\WSPP[OH[MHPS[V[YHUZTP[>::=ÔLUMLK
to shrimp postlarvae. Dis. Aquat. Org., 49 (1), 1-10.
Chang Y.S., Peng S.E., Wang H.C., Hsu H.C., Ho C.H., Wang C.H., Wang S.Ya., Lo C.F. & Kou G.H (2001).
:LX\LUJPUNHUK(TWSPÄLK9LZ[YPJ[PVU-YHNTLU[3LUN[O7VS`TVYWOPZT(UHS`ZPZVM9PIVU\JSLV[PKL
9LK\J[HZL3HYNL:\I\UP[.LULVM[OL>OP[L:WV[:ÙKYVTL=PY\ZPU)S\L*YHICallinectes sapidus)
from American Coastal Waters. Mar. Biotechnol
Chen L.L., Lo C.F., Chiu Y.L., Chang C.F. & Kou G.H. (2000). Natural and experimental infection of
white spot syndrome virus (WSSV) in benthic larvae of mud crab Scylla serrata. Dis. Aquat. Org.,
40, 157-161.
Chotigeat W., Tongsupa S., Supamataya K. & Phongdara A. (2004). Effect of fucoidan on disease
resistance of black tiger shrimp. Aquaculture
Chou H.Y., Huang C.Y., Lo C.F. & Kou G.H. (1998). Studies on transmission of white spot syndrome
associated baculovirus (WSBV) in Penaeus monodon and P. japonicus via waterborne contact and
oral ingestion. Aquaculture
Claydon K., Cullen B. & Owens L. 60,ÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z7*9NP]LZMHSZLWVZP[P]LYLZ\S[Z
in Cherax quadricarinatus. Dis Aquat Org
Corbel V., Zuprizal, Shi Z., Huang C., Sumartono, Arcier J.M. & Bonami J.R. (2001). Experimental
infection of European crustaceans with white spot syndrome virus (WSSV). J. Fish Dis., 24 (7),

Corsin F., Thakur P.C., Padiyar P.A., Madhusudhan M., Turnbull J.F., Mohan C.V., Hao N.V. & Morgan
K.L. 9LSH[PVUZOPWIL[^LLUÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\ZHUKPUKPJH[VYZVMX\HSP[`PUPenaeus
monodonWVZ[SHY]HLPU2HYUH[HRH0UKPHDis. Aquat. Org., 54 (2), 97-104.
107
Dupuy J.W., Bonami J.R. & Roch P. (2004). A synthetic antibacterial peptide from Mytilus galloprovincialis
reduces mortality due to white spot syndrome virus in palaemonid shrimp. J. Fish Dis., 27 (1),
57-64.
Durand S.V., Tang K.F.J. & Lightner D.V. -YVaLU JVTTVKP[` ZOYPTW! WV[LU[PHS H]LU\L MVY
introduction of white spot syndrome virus and yellow head virus. J. Aquat. Anim. Health, 12,

Flegel T.W. (1997). Special topic review: Major viral diseases of the black tiger prawn (Penaeus monodon)
in Thailand. World J. Microbiol. Biotech
Global Aquaculture Alliance. H :OYPTW ÔP[L ZWV[ ]PY\Z JVUÄYTLK PU *LU[YHS(TLYPJH GAA
Newsletter, vol. 2 issue 2.
Global Aquaculture Alliance. (1999b). Shrimp white spot disease in Latin America - an update. GAA
Newsletter,]VSPZZ\L
Granja C.B., Aranguren L.F., Vidal O.M., Aragon L. & Salazar M. +VLZO`WLY[OLYTPHPUJYLHZL
apoptosis in white spot syndrome virus (WSSV)-infected Litopenaeus vannamei? Dis. Aquat. Org.,

Guan Y., Yu Z. & Li C. ;OL LMMLJ[Z VM [LTWLYH[\YL VU ÔP[L ZWV[ ZÙKYVTL PUMLJ[PVUZ PU
Marsupenaeus japonicus. J. Invertebr. Pathol
Hameed A.S. Sahul, Charles M.X. & Anilkumar M. (2000). Tolerance of Macrobrachium rosenbergii to
white spot syndrome virus. Aquaculture
Hossain M.S, Chakraborty A., Joseph B., Otta S.K., Karunasagar I. & Karunasagar I. (2001). Detection
of new hosts for white spot syndrome virus of shrimp using nested polymerase chain reaction.
Aquaculture, 198, 1-11.
Hossain M.D. Shahadat, Otta S.K., Chakraborty A., Kumar H.S., Karunasagar I. & Karunasagar I. (2004).
Detection of WSSV in cultured shrimps, captured brooders, shrimp postlarvae and water samples
PU)HUNSHKLZOI`7*9\ZPUNKPMMLYLU[WYPTLYZAquaculture
Hsu H.C., Lo C.F., Lin S.C., Liu K.F., Peng S.E., Chang Y.S., Chen L.L., Liu W.J. & Kou G.H. (1999). Studies
VULMMLJ[P]L7*9ZJYLLUPUNZ[YH[LNPLZMVYÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z>::=KL[LJ[PVUPUPenaeus
monodon brooders. Dis. Aquat. Org.,
Huang C.H., Zhang L.R., Zhang J.H., Xiao L.C., Wu Q,J., Chen D.H. & Li J. K.K. 7\YPÄJH[PVUHUK
JOHYHJ[LYPaH[PVUVM>OP[L:WV[:ÙKYVTL=PY\Z>::=WYVK\JLKPUHUHS[LYUH[LOVZ[!*YH`ÄZO
Cambarus clarkia Virus Res., 76 (2), 115-125.
Jiravanichpaisal P., Bangyeekhun E., Soderhall K. & Soderhall I. (2001). Experimental infection of
ÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\ZPUMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. Dis. Aquat. Org., 47 (2),
151-157.
Jiravanichpaisal P., Soderhall K. & Soderhall I. (2004). Effect of water temperature on the immune
YLZWVUZLHUKPUMLJ[P]P[`WH[[LYUVMÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z>::=PUMYLZO^H[LYJYH`ÄZOFish
:OLSSÄZO0TT\UVS
Jory D.E. & Dixon H.M. (1999). Shrimp whitespot in the western hemisphere. Aquaculture Magazine,

Kasornchandra J., Boonyaratpalin S. & Itami T. (1998). Detection of white-spot syndrome in cultured
penaeid shrimp in Asia: Microscopic observation and polymerase chain reaction. Aquaculture,

Kim C.K., Kim P.K., Sohn S.G., Sim D.S., Park M.A., Heo M.S., Lee T.H., Lee J.D., Jun H.K. & Jang
K.L. +L]LSVWTLU[ VM H WVS`TLYHZL JOHPU YLHJ[PVU 7*9 WYVJLK\YL MVY [OL KL[LJ[PVU VM
baculovirus associated with white spot syndrome (WSBV) in penaeid shrimp. J. Fish Dis., 21,
11-17.
Kima D.K., Jangb I.K., Seob H.C., Shinc S.O., Yangc S.Y. & Kima J.W. (2004). Shrimp protected from
WSSV disease by treatment with egg yolk antibodies (IgY) against a truncated fusion protein derived
from WSSV. Aquaculture
Kimura T., Yamano K., Nakano H., Momoyama K., Hiraoka M. & Inouye K. (1996). Detection of penaeid
YVKZOHWLK+5(]PY\Z79+=I`7*9 Fish Pathol. .
Li Q., Zhang J., Chen Y. & Yang F. >OP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z>::=PUMLJ[P]P[`MVY Artemia at
different developmental stages. Dis. Aquat. Org
108
Lightner D.V. (1996). A handbook of pathology and diagnostic procedures for diseases of penaeid
ZOYPTW>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Liu W., Wang Y.T., Tian D.S., Yin Z.C. & Kwang J. (2002). Detection of white spot syndrome virus (WSSV)
VMZOYPTWI`TLHUZVMTVUVJSVUHSHU[PIVKPLZ4(IZZWLJPÄJ[VHULU]LSVWLWYV[LPUR+H
Dis. Aquat. Org., 49 (1), 11-18.
Lo C.F. & Kou G.H. (1998). Virus-associated white spot syndrome of shrimp in Taiwan: a review. Fish
Pathol.
Lo C.F., Ho C.H., Chen C.H., Liu K.F., Chiu Y.L., Yeh P.Y., Peng S.E., Hsu H.C., Liu H.C., Chang C.F.,
Su M.S., Wang C.H. & Kou G.H. (1997). Detection and tissue tropism of white spot syndrome
baculovirus (WSBV) in captured brooders of Penaeus monodon with a special emphasis on
reproductive organs. Dis. Aquat. Org.
Lo C.F., Leu J.H., Ho C.H., Chen C.H., Peng S.E., Chen Y.T., Chou C.M., Yeh P.Y., Huang C.J., Chou H.Y.,
Wang C.H. & Kou G.H. (1996a). Detection of baculovirus associated with white spot syndrome
(WSBV) in penaeid shrimps using polymerase chain reaction. Dis. Aquat. Org
Lo C.F., Ho C.H., Peng S.E., Chen C.H., Hsu H.C., Chiu Y.L., Chang C.F., Liu K.F., Su M.S., Wang C.H.
& Kou G.H. (1996b). White spot syndrome baculovirus (WSBV) detected in cultured and captured
shrimp, crabs and other arthropods. Dis. Aquat. Org., 27, 215-225.
Maeda M., Itami T., Furumoto A., Hennig O., Imamura T., Kondo M., Hirono I., Takashi A. & Takahashi
Y. H+L[LJ[PVUVMWLUHLPKYVKZOHWLK+5(]PY\Z79+=PU^PSKJH\NO[ZOYPTWHUKV[OLY
crustaceans. Fish Pathol.
Maeda M., Itami T., Mizuki E., Tanaka R., Yoshizu Y., Doi K., Yasunaga-Aoki C., Takahashi Y. & Kawarabata
T. 9LKZ^HTWJYH^ÄZOProcambarus clarkii): An alternative experimental host in the study
of white spot syndrome virus. Acta Virol.,
Maeda M., Kasornchandra J., Itami T., Suzuki N., Hennig O., Kondo M., Albaladejo J.D. & Takahashi Y.
(1998b). Effect of various treatments on white spot syndrome virus (WSSV) from Penaeus japonicus
1HWHUHUKP. monodon (Thailand). Fish Pathol
Mohan C.V., Shankar K.M., Kulkarni S. & Sudha P.M. (1998). Histopathology of cultured shrimp showing
gross signs of yellow head syndrome and white spot syndrome during 1994 Indian epizootics. Dis.
Aquat. Org.
Momoyama K., Hiraoka M., Inouye K., Kimura T. & Nakano H. (1995). Diagnostic techniques of the
rod-shaped nuclear virus infection in the kuruma shrimp, Penaeus japonicus. Fish Pathol

Momoyama K., Hiraoka M., Nakano H. & Sameshima M. (1998). Cryopreservation of penaeid rod-
ZOHWLK+5(]PY\Z79+=HUKP[ZZ\Y]P]HSPUZLH^H[LYH[KPMMLYLU[[LTWLYH[\YLZFish Pathol.,
(2), 95-96.
Momoyama K., Hiraoka M., Nakano H., Koube H., Inouye K. & Oseko N. (1994). Mass mortalities
of cultured kuruma shrimp, Penaeus japonicus PU 1HWHU PU ! /PZ[VWH[OVSVNPJHS Z[\K` Fish
Pathol., 29, 141-148.
Mushiake K., Shimizu K., Satoh J., Mori K., Arimoto M., Ohsumi S. & Imaizumi K. (1999). Control of
WLUHLPKHJ\[L]PYLTPH7(=PU7LUHL\ZQHWVUPJ\Z!:LSLJ[PVUVMLNNZIHZLKVU[OL7*9KL[LJ[PVU
VM[OLJH\ZH[P]L]PY\Z79+=MYVTYLJLW[HJ\S\TZLTPUPZVMZWHÛLKIYVVKZ[VJRFish Pathol.

Nakano H., Hiraoka M., Sameshima M., Kimura T. & Momoyama K. (1998). Inactivation of penaeid rod-
ZOHWLK+5(]PY\Z79+=[OLJH\ZH[P]LHNLU[VMWLUHLPKHJ\[L]PYHLTPH7(=I`JOLTPJHSHUK
physical treatments. Fish Pathol
Nakano H., Koube H., Umezawa S., Momoyama K., Hiraoka M., Inouye K. & Oseko N. (1994). Mass
mortalities of cultured kuruma shrimp, Penaeus japonicus PU 1HWHU PU ! ,WPaVV[PVSVNPJHS
survey and infection trails. Fish Pathol.
Namikoshi A., Wu J.L., Yamashita T., Nishizawa T., Nishioka T., Arimoto M. & Muroga K. (2004).
Vaccination trials with Penaeus japonicus to induce resistance to white spot syndrome virus.
Aquaculture
Nunan L.M. & Lightner D.V. +L]LSVWTLU[VMHUVUYHKPVHJ[P]LNLULWYVILI`7*9MVYKL[LJ[PVU
of white spot syndrome virus (WSSV). J. Virol. Methods,
109
Nunan L.M., Poulos B.T. & Lightner D.V. (1998). The detection of white spot syndrome virus (WSSV) and
yellow head virus (YHV) in imported commodity shrimp. Aquaculture
Peng S.E., Lo C.F., Lin S.C., Chen L.L., Chang Y.S., Liu K.F., Su M.S. & Kou G.H. (2001). Performance
of WSSVinfected and WSSV-negative Penaeus monodon postlarvae in culture ponds. Dis. Aquat.
Org., 46, 165-172.
Poulos B.T., Pantoja C.R., Bradley-Dunlop D., Aguilar J. & Lightner D.V. (2001). Development and
application of monoclonal antibodies for the detection of white spot syndrome virus of penaeid
shrimp. Dis. Aquat. Org.
Rodríguez J., Bayot B., Amano Y., Panchana F., de Blas I., Alday V. & Calderon J. >OP[LZWV[
syndrome virus infection in cultured Penaeus vannamei (Boone) in Ecuador with emphasis on
histopathology and ultrastructure. J. Fish Dis.
Sahul Hameed A.S., Balasubramanian G., Musthaq S.S. & Yoganandhan K. ,_WLYPTLU[HS
infection of twenty species of Indian marine crabs with white spot syndrome virus (WSSV). Dis.
Aquat. Org., 57, 157-161.
Sahul Hameed A.S., Xavier Charles M. & Anilkumar M. (2000). Tolerance of Macrobrachium rosenbergii
to white spot syndrome virus. Aquaculture
Takahashi Y., Itami T., Kondom M., Maeda M., Fujii R., Tomonaga S., Supamattaya K. & Boonyaratpalin
S. ,SLJ[YVUTPJYVZJVWPJL]PKLUJLVMIHJPSSPMVYT]PY\ZPUMLJ[PVUPU2\Y\THZOYPTW (Penaeus
japonicus). Fish Pathol., 29, 121-125.
Takahashi Y., Itami T., Maeda M., Suzuki N., Kasornchandra J., Supamattaya K., Khongpradit R.,
Boonyaratpalin S., Kondo M., Kawai K., Kusuda R., Hirono I. & Aoki T. (1996). Polymerase chain
YLHJ[PVU 7*9 HTWSPÄJH[PVU VM IHJPSSPMVYT ]PY\Z 9=71 +5( PU Penaeus japonicus Bate and
systemic ectodermal and mesodermal baculovirus (SEMBV) DNA in Penaeus monodon-HIYPJP\Z
J. Fish Dis.
Tsai M.F., Kou G.H., Liu H.C., Liu K.F., Chang C.F., Peng S.E., Hsu H.C., Wang C.H. & Lo C.F. (1999).
Long-term presence of white spot syndrome virus (WSSV) in a cultivated shrimp population without
disease outbreaks. Dis. Aquat. Org.
Vaseeharan B., Jayakumar R. & Ramasamy P. 7*9IHZLKKL[LJ[PVUVMÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z
in cultured and captured crustaceans in India. Lett. Appl. Microbiol.
Venegas C.A., Nonaka L., Mushiake K., Shimizu K., Nishizawa T. & Muroga K. (1999). Pathogenicity of
WLUHLPKYVKZOHWLK+5(]PY\Z79+=[VR\Y\THWYHÛPUKPMMLYLU[KL]LSVWTLU[HSZ[HNLZ Fish
Pathol.
Vidal O.M., Granja C.B., Aranguren F., Brock J.A. & Salazar M. (2001). A profound effect of hyperthermia
on survival of Litopenaeus vannamei juveniles infected with White Spot Syndrome Virus. J. World
Aquaculture Soc.,
Vijayan K.K., Stalin Raj V., Balasubramanian C.P., Alavandi S.V., Thillai Sekhar V. & Santiago T.C.
(2005). Polychaete worms - a vector for white spot syndrome virus (WSSV). Dis. Aquat. Org
107-111.
Vlak J.M., Bonami J.R., Flegel T.W., Kou G.H., Lightner D.V., Lo C.F., Loh P.C. & Walker P.J. (2004).
International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV)
Wang Q., Poulos B.T. & Lightner D.V. (2000). Protein analysis of geographic isolates of shrimp white spot
syndrome virus. Arch. Virol.
Wang Y.T., Liu W., Seah J.N., Lam C.S., Xiang J.H., Korzh V. & Kwang J. (2002). White spot syndrome
]PY\Z>::=PUMLJ[ZZWLJPÄJOLTVJ`[LZVM[OLZOYPTWPenaeus merguiensis. Dis. Aquat. Org., 52

Wang Y.C., Lo C.F., Chang P.S. & Kou G.H. (1998). Experimental infection of white spot baculovirus in
some cultured and wild decapods in Taiwan. Aquaculture,.
Withyachumnarnkul B. 9LZ\S[ZMYVTISHJR[PNLYZOYPTW Penaeus monodon culture ponds stocked
^P[OWVZ[SHY]HL7*9WVZP[P]LVYULNH[P]LMVYÔP[LZWV[ZÙKYVTL]PY\Z>::=Dis. Aquat. Org.,

Witteveldt J., Vlak J.M. & van Hulten Marielle C.W. (2004). Protection of Penaeus monodon against white
spot syndrome virus using a WSSV subunit vaccine. -PZO:OLSSÄZO0TT\UVS 16(5), 571-579.
Wongteerasupaya C., Vickers J.E., Sriurairatana S., Nash G.L., Akarajamorn A., Boonsaeng V., Panyim
S., Tassanakajon A., Withyachumnarnkul B. & Flegel T.W. (1995). A non-occluded, systemic
110
baculovirus that occurs in cells of ectodermal and mesodermal origin and causes high mortality in
the black tiger prawn Penaeus monodon. Dis. Aquat. Org., 21, 69-77.
Yan D.C., Dong S.L., Huang J., Yu X.M., Feng M.Y. & Liu X.Y. (2004). White spot syndrome virus (WSSV)
KL[LJ[LKI`7*9PUYV[PMLYZHUKYV[PMLYYLZ[PUNLNNZMYVTZOYPTWWVUKZLKPTLU[ZDis. Aquat. Org.,

Yoganandhan K., Thirupathi S. & Hameed A.S. Sahul)PVJOLTPJHSWO`ZPVSVNPJHSHUKOLTH[VSVNPJHS
changes in white spot syndrome virus-infected shrimp, Penaeus indicus. Aquaculture, 221 (1-4),
1-11.
Zhan W.B., Wang Y.H., Fryer J.L., Yu K.K., Fukuda H. & Meng Q.X. (1998). White Spot syndrome virus
infection of cultured shrimp in China. J. Aquat. Anim. Health, 10 (4), 405-410.
TSV
Aguirre Guzmán G. & Ascencio Valle F. (2000). Infectious disease in shrimp species with aquaculture
potential. Recent Res. Dev. Microbiol.,
Audelo del Valle J., Clement-Mellado O., Magana-Hernandez A., Flisser A., Montiel-Aguirre F. &
Briseno-Garcia B. 0UMLJ[PVU VM J\S[\YLK O\THU HUK TVURL` JLSS SPULZ ^P[O L_[YHJ[ VM
penaeid shrimp infected with Taura syndrome virus. Emerg. Infect. Dis., 9, 265-266.
Bonami J.R., Hasson K.W., Mari J., Poulos B.T. & Lightner D.V. (1997). Taura syndrome of marine
penaeid shrimp: characterization of the viral agent. J. Gen. Virol.
Bondad-Reantaso M.G., McGladdery S.E., East I. & Subasinghe R.P. (eds) (2001). Asia Diagnostic Guide
[V(X\H[PJ(UPTHS+PZLHZLZ-(6-PZOLYPLZ;LJOUPJHS7HWLY:\WWSLTLU[9VTL-(6WW
Brock, J.A. (1997). Special topic review: Taura syndrome, a disease important to shrimp farms in the
Americas. World J. Microbiol & Technol.
Brock J.A., Gose R., Lightner D.V. & Hasson K.W. (1995). An overview on Taura syndrome, an important
disease of farmed Penaeus vannamei. In: Swimming through Troubled Water, Proceedings of the
:WLJPHS:LZZPVUVU:OYPTW-HYTPUN(X\HJ\S[\YLº )YV^K`*3 /VWRPUZ1:LKZ:HU+PLNV
*HSPMVYUPH-LIY\HY` >VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Brock J.A., Gose R.B., Lightner D.V. & Hasson K.W. 9LJLU[KL]LSVWTLU[ZHUKHUV]LY]PL^VM
;H\YH:ÙKYVTLVMMHYTLKZOYPTWPU[OL(TLYPJHZ0U!+PZLHZLZPU(ZPHU(X\HJ\S[\YL000-SLNLS
;> 4HJ9HL 0/ LKZ -PZO /LHS[O :LJ[PVU(ZPHU -PZOLYPLZ :VJPL[` 4HUPSH [OL 7OPSPWWPULZ

Chang Y.S., Peng S.E., Yu H.T., Liu F.C., Wang C.H., Lo, C.F. & Kou G.H. (2004). Genetic and phenotypic
variations of isolates of shrimp Taura syndrome virus found in Penaeus monodon and Metapenaeus
LUZPZPU;HP^HU1.LU=PYVS
Clifford H.C. (1998). Management of ponds stocked with blue shrimp Litopenaeus stylirostris. In:
7YVJLLKPUNZ VM [OL -PYZ[ 3H[PU (TLYPJHU :OYPTW -HYTPUN *VUNYLZZ +, 1VY` LK 7HUHTH *P[`
Panama, 1-11.
Dhar A.K., Roux M.M. & Klimpel K.R. (2002). Quantitative assay for measuring the Taura syndrome virus
HUK`LSSVÔLHK]PY\ZSVHKPUZOYPTWI`YLHS[PTL9;7*9\ZPUN:@)9.YLLU*OLTPZ[Y` J. Virol.
Methods, 104, 69-82.
Dixon H. & Dorado J. (1997). Managing Taura syndrome in Belize: a case study. Aquaculture Magazine,
4H`1\UL
Erickson H.S., Poulos B.T., Tang K.F.J., Bradley-Dunlop D. & Lightner D.V. (2005). Taura Syndrome Virus
from Belize represents a unique variant. Dis. Aquat. Org., 64, 91-98.
Erickson H.S., Zarain-Herzberg M. & Lightner D.V. (2002). Detection of Taura syndrome virus (TSV)
strain differences using selected diagnostic methods: diagnostic implications in penaeid shrimp.
Dis. Aquat. Org., 52, 1-10.
Fauquet C.M., Mayo M.A., Maniloff J., Desselberger U. & Ball L.A. =PY\Z;H_VUVT`*SHZZPÄJH[PVU
HUK 5VTLUJSH[\YL VM =PY\ZLZ ,PNO[O 9LWVY[ VM [OL 0U[LYUH[PVUHS *VTTP[[LL VU ;H_VUVT` VM
Viruses. Elsevier Academic Press, 1259 pp.
Fegan D.F. & Clifford H.C. III. (2001). Health management for viral diseases in shrimp farms. In: The
New Wave, Proceedings of the Special Session on Sustainable Shrimp Culture. Aquaculture 2001,
)YV^K` *3 1VY` +, LKZ;OL >VYSK (X\HJ\S[\YL :VJPL[` )H[VU 9V\NL 3V\PZPHUH <:(
168-198.
111
Garza J.R., Hasson K.W., Poulos B.T., Redman R.M., White B.L. & Lightner D.V. (1997). Demonstration
of infectious taura syndrome virus in the feces of sea gulls collected during an epizootic in Texas.
J. Aquat. Anim. Health, 9, 156-159.
Hasson K.W., Hasson J., Aubert H., Redman R.M. & Lightner D.V. (UL^95(MYPLUKS`Ä_H[P]L
for the preservation of penaeid shrimp samples for virological detection using cDNA genomic
probes. J. Virol. Methods,
Hasson K.W., Lightner D.V., Mohney L.L., Redman R.M., Poulos B.T., Mari J. & Bonami J.R. (1999). The
geographic distribution of Taura Syndrome Virus (TSV) in the Americas: determination by histology
and in situ OÌYPKPaH[PVU\ZPUN;:=ZWLJPÄJJ+5(WYVILZAquaculture,
Hasson K.W., Lightner D.V., Mohney L.L., Redman R.M., Poulos B.T. & White B.L. (1999). Taura
ZÙKYVTL]PY\Z;:=SLZPVUKL]LSVWTLU[HUK[OLKPZLHZLJ`JSLPU[OL7HJPÄJÔP[LZOYPTW Penaeus
vannamei. Dis. Aquat. Org.
Hasson K.W., Lightner D.V., Poulos B.T., Redman R.M., White B.L., Brock J.A. & Bonami J.R. (1995).
Taura Syndrome in Penaeus vannamei: Demonstration of a viral etiology. Dis. Aquat. Org.,
115-126.
Intriago P., Jimenez R., Machuca M., Barniol R., Krauss E. & Salvador X. (1997). Experiments on
toxicosis as the cause of Taura Syndrome in Penaeus vannamei (Crustacea: Decapoda) in Ecuador.
0U!+PZLHZLZPU(ZPHU(X\HJ\S[\YL000-SLNLS;> 4HJ9HL0/LKZ-PZO/LHS[O:LJ[PVU(ZPHU
-PZOLYPLZ:VJPL[`4HUPSH[OL7OPSPWWPULZ
Jimenez R. :PUKYVTLKL;H\YH9LZ\TLU0U!(J\HJ\S[\YHKLS,J\HKVY*HTHYH5HJPVUHSKL
Acuacultura, Guayaquil, Ecuador, 1-16.
Jimenez R., Barniol R., De Barniol L. & Machuca M. (2000). Periodic occurrence of epithelial viral
necrosis outbreaks in Penaeus vannamei in Ecuador. Dis. Aquat. Org., 42, 91-99.
Laramore C.R. (1997). Shrimp culture in Honduras following the Taura syndrome virus. In: Proceeding
VM [OL [O :`TWVZP\T VU (X\HJ\S[\YL PU *LU[YHS (TLYPJH! -VJ\ZPUN VU :OYPTW HUK ;PSHWPH
;LN\JPNHSWH/VUK\YHZ>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJ)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Lightner D.V. (1995). Taura syndrome: an economically important viral disease impacting the shrimp
farming industries of the Americas including the United States. Proceedings of the 99th Annual
4LL[PUN<:(UPTHS/LHS[O(ZZVJPH[PVU9LUV5L]HKH<:(
Lightner D.V. (ed.) (1996). A Handbook of Shrimp Pathology and Diagnostic Procedures for Diseases of
*\S[\YLK7LUHLPK:OYPTW>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(WW
Lightner D.V. (1996). Epizootiology, distribution and the impact on international trade of two penaeid
shrimp viruses in the Americas. 9L]ZJP[LJO6MÄJLPU[,WPa 15, 579-601.
Lightner D.V. (1999). The penaeid shrimp viruses TSV, IHHNV, WSSV, and YHV: current status in the
Americas, available diagnostic methods and management strategies. J. Appl. Aquaculture, 9,
27-52.
Lightner, D.V. )PVZLJ\YP[`PUZOYPTWMHYTPUN!WH[OVNLUL_JS\ZPVU[OYV\NO\ZLVM:7-Z[VJRHUK
routine surveillance. J. World Aquaculture Soc.,
Lightner D.V. & Redman R.M. (1998). Strategies for the control of viral diseases of shrimp in the Americas.
Fish Pathol.,
Lightner D.V. & Redman R.M. (1998). Shrimp diseases and current diagnostic methods. Aquaculture,
164, 201-220.
Lightner D.V., Redman R.M., Hasson K.W. & Pantoja C.R. (1995). Taura syndrome in Penaeus vannamei
(Crustacea: Decapoda): gross signs, histopathology and ultrastructure. Dis. Aquat. Org., 21,

Lotz J.M. +PZLHZLJVU[YVSHUKWH[OVNLUZ[H[\ZHZZ\YHUJLPUHU:7-IHZLKZOYPTWHX\HJ\S[\YL
PUK\Z[Y`^P[OWHY[PJ\SHYYLMLYLUJL[V[OL<UP[LK:[H[LZ0U!+PZLHZLZPU(ZPHU(X\HJ\S[\YL000-SLNLS
;> 4HJ9HL0/LKZ-PZO/LHS[O:LJ[PVU(ZPHU-PZOLYPLZ:VJPL[`4HUPSH;OL7OPSPWWPULZ

Lotz J.M. (1997). Effect of host size on virulence of Taura virus to the marine shrimp Penaeus vannamei
(Crustacea: Penaeidae). Dis. Aquat. Org.,
Lotz J.M., Anton, L.S. & Soto M.A. (2005). Effect of chronic Taura syndrome virus infection on salinity
tolerance of Litopenaeus vannamei. Dis. Aquat. Org., 65, 75-78.
112
Lotz J.M., Browdy C.L., Carr W.H., Frelier P.F. & Lightner D.V. <:4:-7Z\NNLZ[LKWYVJLK\YLZHUK
N\PKLSPULZMVYHZZ\YPUN[OLZWLJPÄJWH[OVNLUZ[H[\ZVMZOYPTWIYVVKZ[VJRHUKZLLK0U!:^PTTPUN
[OYV\NO;YV\ISLK>H[LY7YVJLLKPUNZVM[OL:WLJPHS:LZZPVUVU:OYPTW-HYTPUN(X\HJ\S[\YLº
)YV^K`*3 /VWRPUZ1:LKZ:HU+PLNV*HSPMVYUPH-LIY\HY` >VYSK(X\HJ\S[\YL
:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Lotz J.M., Flowers A.M. & Breland V. ( TVKLS VM;H\YH ZÙKYVTL ]PY\Z ;:= LWPKLTPJZ PU
Litopenaeus vannamei. J. Invertebr. Pathol.,
Lu Y. & Sun P. (2005). Viral resistance in shrimp that express an antisense Taura syndrome virus coat
protein gene. Antiviral Res., 67, 141-146.
Luo P., Hu C.Q., Ren C.H. & Sun Z.F. (2004). Taura syndrome virus and mammalian cell lines. Emerg.
Infect. Dis., 10, 2260-2261.
Mari J., Bonami J.R. & Lightner D.V. (1998). Taura syndrome of Penaeid shrimp: cloning of viral genome
MYHNTLU[ZHUKKL]LSVWTLU[VMZWLJPÄJNLULWYVILZDis. Aquat. Org.,
Mari J., Poulos B.T., Lightner D.V. & Bonami J.R. (2002). Shrimp Taura syndrome virus: genomic
characterization and similarity with members of the genus Cricket paralysis-like viruses. J. Gen.
Virol.,
Moss S.M., Arce S., Argue B.J., Otoshi C.A., Calderon F.R.O. & Tacon A.G.J. (2001). In: The New Wave,
Proceedings of the Special Session on Sustainable Shrimp Culture. Aquaculture 2001, Browdy C.L.
1VY`+,LKZ;OL>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Nielsen L., Sang-oum W., Cheevadhanarak S. & Flegel T.W. (2005). Taura syndrome virus (TSV) in
Thailand and its relationship to TSV in China and the Americas. Dis Aquat. Org,
Nunan L.M., Poulos B.T. & Lightner D.V. 9L]LYZL[YHUZJYPW[PVUWVS`TLYHZLJOHPUYLHJ[PVU9;
7*9\ZLKMVY[OLKL[LJ[PVUVM;H\YH:ÙKYVTL=PY\Z;:=PUL_WLYPTLU[HSS`PUMLJ[LKZOYPTWDis.
Aquat. Org.
Nunan L.M., Tang-Nelson K. & Lightner D.V. 9LHS[PTL 9;7*9 KL[LYTPUH[PVU VM ]PYHS JVW`
number in Penaeus vannamei experimentally infected with Taura Syndrome Virus (TSV).
Overstreet R.M., Lightner D.V., Hasson K.W., Mcilwain S. & Lotz J. (1997). Susceptibility to TSV of some
penaeid shrimp native to the Gulf of Mexico and southeast Atlantic Ocean. J. Invertebr. Pathol.,
69, 165-176.
Pantoja C.R., Navarro S.A., Naranjo J., Lightner D.V. & Gerba C.P. (2004). Nonsusceptibility of primate
cells to Taura syndrome virus. Emerg. Infect. Dis., 10, 2106-2112.
Poulos B.T., Kibler R., Bradley-Dunlop D., Mohney L.L. & Lightner D.V. (1999). Production and use of
antibodies for the detection of the Taura syndrome virus in penaeid shrimp. Dis. Aquat. Org.,
99-106.
Pruder G.D., Brown C.L., Sweeney J.N. & Carr W.H. (1995). High health shrimp systems: seed supply
- theory and practice. In: Swimming through Troubled Water, Proceedings of the Special Session
VU:OYPTW-HYTPUN(X\HJ\S[\YLº )YV^K`*3 /VWRPUZ1:LKZ:HU+PLNV*HSPMVYUPH
-LIY\HY` >VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
Robalino J., Browdy C.L., Prior S., Metz A., Parnell P., Gross P. & Warr G. (2004). Induction of antiviral
PTT\UP[Ì`KV\ISLZ[YHUKLK95(PUHTHYPULPU]LY[LIYH[L J. Virol. 78, 10442-10448.
Robles-Sikisaka R., Garcia D.K., Klimpel K.R. & Dhar A.K. 5\JSLV[PKLZLX\LUJLVM»LUKVM[OL
genome of Taura syndrome virus of shrimp suggests that it is related to insect picornaviruses. Arch.
Virol., 146, 941-952.
Rosenberry B. >VYSK:OYPTW-HYTPUN5\TILY7\ISPZOLKI`:OYPTW5L^Z0U[LYUH[PVUHS
San Diego, California, USA, 276 pp.
Srisuvan T., Tang K.F.J. & Lightner D.V. (2006). Experimental infection of Penaeus monodon with Taura
syndrome virus (TSV). Dis. Aquat. Org., In press
Tang K.F.J. & Lightner D.V. (2005). Phylogenetic analysis of Taura syndrome virus isolates collected
IL[^LLU HUKHUK]PY\SLUJLJVTWHYPZVUIL[^LLU[^VPZVSH[LZYLWYLZLU[PUNKPMMLYLU[
genetic variants. Virus Research, 112, 69-76.
Tang K.F.J., Wang J. & Lightner D.V. 8\HU[P[H[PVUVM;H\YH:ÙKYVTL=PY\ZI`YLHS[PTL9;7*9
with a TaqMan assay. J. Virol. Methods, 115, 109-114.
113
Tu C., Huang H.T., Chuang S.H., Hsu J.P., Kuo S.T., Li N.J., Hus T.L., Li M.C. & Lin S.Y. (1999). Taura
ZÙKYVTL PU 7HJPÄJ ÔP[L ZOYPTW 7LUHL\Z ]HUUHTLP J\S[\YLK PU;HP^HU Dis. Aquat. Org.,
159-161.
Vanpatten K.A., Nunan L.M. & Lightner D.V. (2004). Seabirds as potential vectors of penaeid shrimp
viruses and the development of a surrogate laboratory model utilizing domestic chickens.
Aquaculture,
>OP[L )3 :JOVÄLSK 71 7V\SVZ ); 3PNO[ULY += (2002). A laboratory challenge method for
LZ[PTH[PUN;H\YH :ÙKYVTL ]PY\Z YLZPZ[HUJL PU ZLSLJ[LK SPULZ VM 7HJPÄJ >OP[L :OYPTW 7LUHL\Z
vannamei. J. World Aquacult. Soc.,
Wyban J.A. :LSLJ[P]L IYLLKPUN VM ZWLJPÄJ WH[OVNLUMYLL :7- ZOYPTW MVY OPNO OLHS[O HUK
PUJYLHZLKNYV^[O0U!+PZLHZLZVM*\S[\YLK7LUHLPK:OYPTWPU(ZPHHUK[OL<UP[LK:[H[LZ-\SRZ>
4HPU23LKZ;OL6JLHUPJ0UZ[P[\[L/VUVS\S\/H^HPP<:(
Wyban J., White B. & Lightner D.V. ;:=*OHSSLUNLZ(K]HUJL:LSLJ[P]L)YLLKPUNPU7HJPÄJ>OP[L
Shrimp. Global Aquaculture Advocate, 7, 40-41.
Yu C.I. & Song Y.L. 6\[IYLHRZ VM;H\YH ZÙKYVTL PU WHJPÄJ ÔP[L ZOYPTWPenaeus vannamei
cultured in Taiwan. Fish Pathol.,
Zarin-Herzberg M. & Ascencio F. (2001). Taura syndrome in Mexico: follow-up study in shrimp farms of
Sinaloa. Aquaculture,
@/=
Boonyaratpalin, S., K. Supamattaya, J. Kasornchandra, S. Direkbusaracom, U. Aekpanithanpong, and
C. Chantanachooklin. 5VUVJJS\KLKIHJ\SVSPRL]PY\Z[OLJH\ZH[P]LHNLU[VM@LSSV^/LHK
Disease in the black tiger shrimp (Penaeus monodon). Gyobo Kenkyu !
Loh P.C., E. Cesar, B. Jr. Nadala, L.M. Tapay and Y. Lu. 9LJLU[KL]LSVWTLU[ZPUPTT\UVSVNPJHSS`
IHZLKHUKJLSSJ\S[\YLWYV[VJVSZMVY[OLZWLJPÄJKL[LJ[PVUVMZOYPTW]PYHSWH[OVNLUZ0U!(K]HUJLZPU
:OYPTW)PV[LJOUVSVN`-SLNLS;>LK5H[PVUHS*LU[LYMVY.LUL[PJ,UNPULLYPUNHUK)PV[LJOUVSVN`
Bangkok, Thailand, 225-259.
Lu, Y., L.M. Tapay, P.C. Loh, J.A. Brock, and R.B. Gose. 1995. Distribution of yellow-head virus in selected
tissues and organs of penaeid shrimp Penaeus vannamei. Dis. Aquat. Org.!
Wongteerasupaya, C., S. Sriurairatana, J.E. Vickers, A. Akrajamorn, V. Boonsaeng, S. Panyim, A.
Tassanakajon, B. Withyachumnarnjul, and T.W. Flegel. 1995. Yellow-head virus of Penaeus
monodonPZHU95(]PY\ZDis. Aquat. Org. 22: 45-50.
Boonyaratpalin, S., K. Supamattaya, J. Kasornchandra, S. Direkbusaracom, U. Aekpanithanpong, and
C. Chantanachooklin. 5VUVJJS\KLKIHJ\SVSPRL]PY\Z[OLJH\ZH[P]LHNLU[VM@LSSV^/LHK
Disease in the black tiger shrimp (Penaeus monodon). Gyobo Kenkyu!
Loh P.C., E. Cesar, B. Jr. Nadala, L.M. Tapay and Y. Lu. 9LJLU[KL]LSVWTLU[ZPUPTT\UVSVNPJHSS`
IHZLKHUKJLSSJ\S[\YLWYV[VJVSZMVY[OLZWLJPÄJKL[LJ[PVUVMZOYPTW]PYHSWH[OVNLUZ0U!(K]HUJLZPU
:OYPTW)PV[LJOUVSVN`-SLNLS;>LK5H[PVUHS*LU[LYMVY.LUL[PJ,UNPULLYPUNHUK)PV[LJOUVSVN`
Bangkok, Thailand, 225-259.
Lu, Y., L.M. Tapay, P.C. Loh, J.A. Brock, and R.B. Gose. 1995. Distribution of yellow-head virus in selected
tissues and organs of penaeid shrimp Penaeus vannamei. Dis. Aquat. Org.!
Wongteerasupaya, C., S. Sriurairatana, J.E. Vickers, A. Akrajamorn, V. Boonsaeng, S. Panyim, A.
Tassanakajon, B.Withyachumnarnjul, and T.W. Flegel. 1995. Yellow-head virus of Penaeus
monodonPZHU95(]PY\ZDis. Aquat. Org. 22: 45-50.
IMNV
Tang, F.J.K., Pantoja, C.R., Poulos B.T., Redman R.M. & Lightner D.V. (2005). In situ hybridization
demonstrates that Litopenaeus vannamei, L. stylirostris and Penaeus monodon are susceptible top
experimental infection with infectious myonecrosis virus (IMNV). Dis. Aquat. Org!
Poulos B.T., Tang K.F.J., Pantoja C.R., Bonami J.R., Lightner D.V. 7\YPÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVU
of myonecrosis virus of penaeid shrimp. J. Inv. Path. 87:987-996.
Poulos B.T. & Lightner D.V. (2006). Detection of infectious myonecrosis virus (IMNV) of penaeid shrimp
I`YL]LYZL[YHUZJYPW[HZLWVS`TLYHZLJOHPUYLHJ[PVU9;7*9Dis. Aquat. Org.!
114
Andrade Th.P.D., Srisuvan T., Tang K.F.J. & Lightner D.V. 9LHS[PTL YL]LYZL [YHUZJYPW[PVU
WVS`TLYHZLJOHPUYLHJ[PVUHZZH`\ZPUN;HX4HUWYVILMVYKL[LJ[PVUHUKX\HU[PÄJH[PVUVM0UMLJ[PV\Z
myonecrosis virus (IMNV). Aquaculture 264(9-15).
Senapin S., Phewsaiya K., Briggs M. & Flegel T.W. (2007). Outbreaks of infectious myonecrosis virus
045= PU 0UKVULZPH JVUÄYTLK I` NLUVTL ZLX\LUJPUN HUK \ZL VM HS[LYUH[P]L 9;7*9 TL[OVK
Aquaculture
Pinheiro A.C.A.S., Lima A.P.S., Souza M.E., Neto E.C.L., Adrião M., Goncalves V.S.P. & Coimbra M.R.M.
(2007) Epidemiological status of Taura syndrome and Infectious myonecrosis viruses in Penaeus
vannamei reared in Pernambuco (Brazil). Aquaculture 262(17-22).
045=9LM(SP[PLULL[HSS
Andrade, T. P. D., Srisuvan, T.; Tang, K.F.J.; Lightner, D. V. 9LHS[PTLYL]LYZL[YHUZJYPW[PVUJOHPU
YLHJ[PVU \ZPUN ;HX4HU WYVIL MVY KL[LJ[PVU HUK X\HU[PÄJH[PVU VM Infectious myonecrosis virus
(IMNV). Aquaculture v.264. p.9-15.
Gesteira, T. C. V. ,UMLYTPKHKLZPUMLJJPVZHZYLNPZ[YHKHZUHJHYJPUPJ\S[\YHIYHZPSLPYHW0U!
:HUPKHKLKL6YNHUPZTVZ(X\m[PJVZ:03=(:6<A((;VYN4HYPUNm!()9(76(
Graf, C.; Gervais, N.; Fernandes, M. P. C.; Ayala, J. C. ;YHUZTPZZqV KH ZxUKYVTL KH ULJYVZL
idiopática muscular (NIM) em Litopenaeus vannamei.9L]PZ[HKH()**U]W
Lakshmi, G.J.; Venkataramiah, A.; Howse, H. D. 1978. Effect of salinity and temperature changes on
spontaneous muscle necrosis in Penaeus aztecus0]LZ(X\HJ\S[\YL]W
Lightner, D. V.; Pantoja, C. R., ; Poulos, B. T.; Tang, K. F. J.; Redman, R. M. Andreas, T.; Bonami, J. R.
2004. Infectious myonecrosis (IMN): a new virus disease of Litopenaeus vannamei. In: Aquaculture
)VVRVM(IZ[YHJ[ZW)H[VU9V\NL3(!>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`
Lightner, D. V. ; Pantoja, C. R.; Poulos, B. T.; Tang, K. F. J.;Redman, R. M..; Andrade, T. P. D.; Bonami, J. R.
0UMLJ[PV\ZT`VULJYVZPZ5L^KPZLHZLPU7HJPÄJÔP[LZOYPTW.SVIHS(X\HJ\S[\YL(K]VJH[L
v.7. p.85.
Lightner, D. V. 1996. A handbook of pathology and diagnostic procedures for diseases of penaeid shrimp.
)H[VU9V\NL3V\PZPHUH!>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`*+
4PUPZ[tYPVKH(NYPJ\S[\YH7LJ\mYPHL(IHZ[LJPTLU[V"*VUZLSOV5HJPVUHSKL+LZLU]VS]PTLU[V*PLU[xÄJV
e Tecnológico; Associação Brasileira de Criadores de Camar. 2001. Plataforma Tecnológica do
*HTHYqV4HYPUOV*\S[P]HKV)YHZxSSPHW
Nunes, A. J. P.; Martins, P.C. C.; Gesteira, T. C. V. *HYJPUPJ\S[\YHHTLHsHKH7YVK\[VYLZZVMYLTJVT
TVY[HSPKHKLKLJVYYLU[LZKV]xY\ZKHTPVULJYVZLPUMLJJPVZH045=7HUVYHTHKH(XPJ\S[\YH
W
Poulos, B. T.; Tang, K. F. J.; Pantoja, C. R.; Bonami, J. R.; Lightner, D. V. 7\YPÄJH[PVU HUK
JOHYHJ[LYPaH[PVUVMPUMLJ[PV\ZT`VULJYVZPZ]PY\ZVMWLUHLPKZOYPTW1V\YUHSVM.LULYHS=PYVSVN`
v. 87. p. 987-996.
Rigdon, R.H.; Baxter, K. N. 1970. Spontaneous necrosis in muscles of brown shrimp, Penaeus aztecus
0]LZ;YHUZ(TLY-PZO:VJ] W
Senapin, S.; Phewsaiya, K.; Griggs, M.; Flegel, T. W. 2007. Oubreaks of infectious myonecrosis virus
045=PU0UKVULZPHJVUÄYTLKI`NLUVTLZLX\LUJPUNHUK\ZLVMHUHS[LYUH[P]L9;7*9KL[LJ[PVU
TL[OVK(X\HJ\S[\YL]W
Tang, K. F. J.; Pantoja, C. R.; Lightner, D. V. 2005. Infectious myonecrosis virus infection in Litopenaeus
vannamei, Litopenaeus stylirostris, and Penaeus mondon. Aquaculture America 2005. WAS
4LL[PUN(IZ[YHJ[7)H[VU9V\NL3(!>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`
Tang, K. F. J.; Pantoja, C. R.; Redman, R. M.; Lightner, D. V. 2007. Development in situ hybridization
HU9;7*9HZZH`MVY[OLKL[LJ[PVUVMHUVKH]PY\Z7]5=[OH[JH\ZLZT\ZJSLULJYVZPZPUPenaeus
vannamei. Dis. Aquat. Org]W
;OY\ZÄLSK4,WPKLTPVSVNPH]L[LYPUmYPH:qV7H\SV!9VJHW
PvNV
Tang K.F.J., Pantoja C.R. Redman R.M. & Lightner D.V. (2007). Development of in situ hybridization
HUK9;7*9HZZH`MVY[OLKL[LJ[PVUVMHUVKH]PY\Z7]5=[OH[JH\ZLZT\ZJSLULJYVZPZPUPenaeus
vannamei. Dis Aquat. Org.!
115
116
Capítulo 3
Enfermedades Bacterianas
Capítulo 3
Enfermedades Bacterianas
María Soledad Morales-Covarrubias

Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C
Unidad Mazatlán, Sinaloa, México.
Introducción
La creciente demanda en el consumo del camarón, la drástica declinación de
sus reservas naturales y la sobrepesca del mismo, trajo consigo el surgimiento de la
camaronicultura. La industria del cultivo de camarón en América Latina, ha surgido
como una de las fuentes de mayor generación de divisas en la región. Sin embargo,
las enfermedades principalmente de origen viral y bacteriano, han ocasionado pérdidas
de los cultivos, empleos e ingresos por caídas de las exportaciones. Especialmente
desde la aparición de la enfermedad de la mancha blanca; la producción ha disminuido
ZPNUPÄJH[P]HTLU[LLUT\JOVZWHxZLZ`SVZWYVK\J[VYLZKLJHTHY}ULZ[mULUJVU[YHUKV
ZLYPHZKPÄJ\S[HKLZWHYHJVU[PU\HYLSULNVJPV
Los patógenos se encuentran en el medio ambiente acuático generalmente en
forma natural, muchos de ellos son oportunistas, es decir que mientras los camarones
se encuentren en buenas condiciones, los patógenos no atacan, de tal manera que su
WYLZLUJPH UV ULJLZHYPHTLU[L ZPNUPÄJH X\L SVZ VYNHUPZTVZ ZL LUJ\LU[YLU LUMLYTVZ
Sin embargo, factores como los genéticos, contaminación del medio ambiente e
PU[LUZPÄJHJP}UKLSVZTt[VKVZKLWYVK\JJP}ULZ[YLZHUHSVZJHTHYVULZYLK\JPLUKVV
perturbando el funcionamiento normal del organismo, haciéndolos altamente sensibles
a las enfermedades y reduciendo las oportunidades de supervivencia.
El estrés en los organismos provoca cambios en todos sus sistemas, produciendo
respuestas adversas en el metabolismo, regulación inmunológica, regulación hormonal y
osmorregulación, haciendo al organismo más susceptible al ataque de cualquier agente
patógeno, afectando la capacidad de supervivencia, reproducción y crecimiento.
Actualmente, en organismos cultivados por los diferentes métodos de acuacultura,
se observan camarones con características externas de organismos sanos, durante y
KLZW\tZKL\UWLYPVKVKLLZ[YtZWLYVLZ[VUVZPNUPÄJHX\LLSVYNHUPZTVLZ[LZHUV`H
que después de un cierto tiempo se puede manifestar la replicación alta de un patógeno
produciendo una enfermedad donde se observen porcentajes altos de mortalidad, o
en otras ocasiones los organismos son portadores asintomáticos de diferentes agentes
WH[}NLUVZÙVTHUPÄLZ[HUJHYHJ[LYxZ[PJHZL_[LYUHZKLHUPTHSLZLUMLYTVZTPLU[YHZSHZ
condiciones de cultivo sean las óptimas para su desarrollo, pero si estas condiciones
se tornan desfavorables, el sistema de defensa que los tenía protegidos, se suprime y la
multiplicación del patógeno se desarrolla de tal manera que sobrepasa los mecanismo
de defensa, causando en muchas ocasiones mortalidad al hospedero.
En un estanque de cultivo existen factores como son: temperatura, salinidad,
V_xNLUVW/U\[YPLU[LZVYNmUPJVZLPUVYNmUPJVZSVZJ\HSLZPUÅ\`LULUSHZJVT\UPKHKLZ
IHJ[LYPHUHZWYLZLU[LZLUSVZLZ[HUX\LZ`HX\LtZ[HZZVUZ\ZJLW[PISLZHSHZÅ\J[\HJPVULZ
que ellos tienen en el desarrollo del cultivo, dando como resultado en muchas ocasiones
un aumento en el número o haciendo que proliferen patógenos nocivos dando como
resultado mortalidades en los organismos cultivados.
Para que las poblaciones bacterianas se mantengan estables en un sistema de cultivo,
es necesario mantener los parámetros óptimos, así como también es indispensable la
HWSPJHJP}UJVYYLJ[HKLSHHSPTLU[HJP}U`LSTHU[LUPTPLU[VKLSÅVYLJPTPLU[VKLHSNHZWHYH
una buena calidad del agua y de los fondos de los estanques y mantener un equilibrio en
la población microbiana.
Las bacterias en un estanque son necesarias para mantener el suelo y el agua en
óptimas condiciones, ya que algunas de ellas se encargan de la degradación de los
detritos y otras del reciclamiento de nutrientes; por tal motivo, la bacterias no solamente
son sinónimo de enfermedad cuando se encuentran presentes en los estanques.
Actualmente, el movimiento de organismos vivos que se realiza de manera frecuente
en diversos países para mejorar la producción de algunas especies, ha propiciado la
introducción y propagación de patógenos exóticos en lugares donde no existían,
diseminándose en algunos casos a las poblaciones silvestres; es por esto que es de vital
importancia conocer qué enfermedades son las de mayor presencia en la región donde se
desarrolla la camaronicultura y qué patógenos las ocasionan para poder dar seguimiento
a los organismos que serán cultivados por sus diversos métodos en acuicultura, así como
también para la aplicación de las medidas de bioseguridad ya que éstas requieren de
capacitación del personal, trabajo en equipo, organización y registro de la medidas
aplicadas.
Las enfermedades de origen bacteriano son unas de las principales en camarones
de cultivo en el continente americano, siendo las bacterias Gram negativas las que
predominan en el ambiente marino y usualmente constituyen la mayoría de las bacterias
X\LUVYTHSTLU[LZLWYLZLU[HULUSHTPJYVÅVYHHZVJPHKHHSVZJHTHYVULZZPS]LZ[YLZ`KL
cultivo. En el presente capítulo se hace una revisión de las enfermedades bacterianas
presentes en los laboratorios de producción de larvas comercial y en los cultivos de
engorda de camarón de América Latina.
Enfermedades producidas por bacterias

Las bacterias principalmente las del género Vibrio, son consideradas como
patógenos oportunistas, localizadas principalmente en el tracto digestivo, branquias y
cutícula de camarones penaeidos y ocasionalmente en hemolinfa, ya que en presencia
de otros factores estresantes, pueden desencadenar el desarrollo de infecciones en
los organismos tales como vibriosis, hepatopáncreas edematoso y necrótico con un
alto grado de vacuolización en las células B en larvicultura y engorda. Este tipo de
bacterias causa infecciones letales al interactuar con factores nutricionales, bióticos,
abióticos, genéticos e inmunológicos. Las especies causantes de altas mortalidades en
las granjas camaronícolas son: Vibrio parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. harveyi,
y Photobacterium daunselae y las especies que tienen cepas patógenas reportadas en
los laboratorios causantes de mortalidades en larvas y postlarvas son: V. harveyi, V.
splendidus y Vibrio sp. Aunque también son reportadas pero de manera ocasional en
laboratorios y granjas de camarón7OV[VIHJ[LYP\TKHTZLSH=Å\]PHSPZy Vibrio sp.
3.1 Vibriosis sistémica

La Vibriosis sistémica en algunas regiones de América Latina también se le conoce
como el “Síndrome de la Gaviota”; esto, debido a la presencia de gaviotas en los estanques
120
María Soledad Morales-Covarrubias Enfermedades Bacterianas
de engorda. Esta enfermedad se encuentra ampliamente distribuida en las instalaciones

de cultivo alrededor del mundo. La vibriosis afecta a todas las especies de camarón usadas
en acuicultura ya que estas pueden ser susceptibles a la infección cuando se encuentran
en condiciones de estrés. Esta enfermedad se considera una infección generalizada, ya
que involucra a la cutícula, hepatopáncreas, órgano linfoide, glándula antenal, corazón,
hemolinfa y músculo. Los agentes causales son =PIYPVWHYHOHLTVS`[PJ\Z=]\SUPÄJ\Z
V. alginolyticus, Photobacterium daunselae, V. campbellii, V. sp y V. harveyi.
Signos Clínicos
Se observan mortalidades altas (hasta un 90%), en postlarvas y juveniles tempranos.
3VZJHTHYVULZTVYPI\UKVZZVULUJVU[YHKVZLUSHZ\WLYÄJPLÙHKHUKVLUSHZVYPSSHZKL
los estanques, con presencia de aves alimentándose de ellos. Cuando la enfermedad se
encuentra en fase inicial se observan algunos organismos con opacidad muscular y tracto
digestivo vacío y en la fase grave es posible observar organismos con expansión de los
JYVTH[}MVYVZOLWH[VWmUJYLHZPUÅHTHKV`LUHSN\UVZJHTHYVULZS\TPUPZJLUJPH
Diagnóstico y Control
Para el diagnóstico de esta enfermedad se utilizan diferentes análisis como son:
el análisis bacteriológico, el cual consiste en tomar organismos con expansión de los
JYVTH[}MVYVZ PU[LZ[PUV ]HJxV ` WYLZLUJPH KL VWHJPKHK T\ZJ\SHY WHYH J\HU[PÄJHY SHZ
Unidades Formadoras de Colonias (UFC) en hepatopáncreas (UFC/g) y en hemolinfa
(UFC/mL), ya que estos poseen una carga bacteriana regular (tabla 1), por lo que es
posible diferenciar cuando se encuentran alterados.
Tabla 1. Interpretación de resultados de crecimiento bacteriano en agar TCBS en

camarones juveniles y adultos (Gómez-Gil 2006).
Hemolinfa Hepatopáncreas
Tipos de UFC (UFC/mL) (UFC/g)
>103 <103 <105 <105
Verdes Lum. 100 % muy grave grave grave grave
Verdes >50% grave serio Serio serio
Verdes < 50% Serio serio-normal Serio serio-normal
Amarillas Serio normal Normal normal
7VYHUmSPZPZLUMYLZJVZLVIZLY]HH[YVÄHKLSOLWH[VWmUJYLHZTH`VYKLZWYLUKPTPLU[V
JLS\SHY JtS\SHZ JVU UJSLVZ OPWLY[YVÄHKVZ JVSVYHJP}U WmSPKH KLZHWHYLJL LS JVSVY
UHYHUQH [L_[\YH ISHUKH ` LKLTH[VZH Å\PKV ISHUX\LJPUV HS YLHSPaHY SH KPZLJJP}U
TLSHUPaHJP}UH[YVÄH[\I\SHYÙLJYVZPZKLSHZJtS\SHZ`KLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZ
así como también es posible observar gran cantidad de masas de bacterias y de
nódulos hemocíticos en el hepatopáncreas (Figura 3.1). Por histopatología con tinción
de hematoxilina-eosina, se observan en algunas secciones del hepatopáncreas con
OPWLY[YVÄH[\I\SHYKLZWYLUKPTPLU[VJLS\SHYH[YVÄHKLTVKLYHKHHZL]LYHKLSVZ[I\SVZ
KLSOLWH[VWmUJYLHZPUÄS[YHJP}UKLOLTVJP[VZ`MVYTHJP}UKLU}K\SVZOLTVJx[PJVZJVU
presencia de colonias de bacterias (Figura 3.2). También con esta tinción es posible
observar colonias de bacterias en el estómago, en el esófago, en los apéndices y las
branquias.
Para su tratamiento es necesario el empleo de antibióticos, con la previa realización
de antibiogramas para su selección.
121
Figura 3.1. Muestra de hepatopáncreas en

fresco de Litopenaeus vannamei, con nódulo
hemocítico.
Figura 3.2. Corte histológico de hepatopáncreas

de Litopenaeus vannamei; con nódulo
hemocítico y presencia de colonias bacterianas
en el centro. Tinción de hematoxilina-eosina.
3.2 Erosión bacteriana del caparazón

Esta enfermedad se presenta en juveniles y adultos de todas las especies de camarones
WLUHLPKVZ :L THUPÄLZ[H LU MVYTH KL THUJOHZ JHMtZ V ULNYHZ LU LS L_VLZX\LSL[V
siendo las heridas las que permite la entrada de bacterias quitinolíticas como Vibrio sp.
y de bacterias oportunistas (Aeromonas sp., Spirillum sp. y Flavobacterium sp.), estas
THUJOHZZLWYVK\JLUWVYSHHJ\T\SHJP}UKLTLSHUPUHX\LLZLSWYVK\J[VÄUHSKLSH
YLZW\LZ[HPUÅHTH[VYPHLUJY\Z[mJLVZ*\HUKVSHZSLZPVULZUVHSJHUaHUHHMLJ[HYHSHZ
membranas internas y al músculo, por lo general éstas desaparecen con la muda. Esta
afección se considera una infección secundaria, ya que para manifestarse se necesita
que el organismo presente heridas en el caparazón. Las erosiones bacterianas también
son causadas por infección de las heridas en la cutícula de los camarones, éstas se
dan regularmente cuando se tienen organismos en altas densidades o por condiciones
ambientales extremas o toxicidad química. Esta enfermedad debe ser controlada ya que
puede convertirse en una infección grave denominada “astillas negras”, la cual penetra
al músculo dañándolo severamente o, llegar hasta una vibriosis sistémica atacando todos
los órganos y tejidos del camarón, principalmente al hepatopáncreas confundiéndose
en muchas ocasiones con necrosis del hepatopáncreas bacteriano de origen intracelular
(NHP-B).
122
Signos clínicos
Se observan en la cutícula manchas de color rojo, cafés o negras en áreas que han
sido erosionadas por acción de bacterias quitinolíticas. Cuando la infección progresa se
W\LKLVIZLY]HYLSTZJ\SVTLSHUPaHKV`JVUZLJJPVULZKLULJYVZPZ`H[YVÄHT\ZJ\SHY
Diagnóstico y control
Al revisar externamente a los organismos, o al realizar el análisis en fresco de
muestras de cutícula y músculo, se observan claramente las manchas, rojas, cafés, negras
y secciones de músculo con erosiones melanizadas (Figura 3.3)
En organismos con esta enfermedad por histopatología con tinción de hematoxilina-
eosina, se observa en algunas secciones de la cutícula y músculo, melanización y necrosis
JVUPUÄS[YHJP}UKLOLTVJP[VZ-PN\YHH[YVÄHKLSVZWHX\L[LZT\ZJ\SHYLZ`WYLZLUJPH
de nódulos hemocíticos con masas de bacterias.
Como método de control, se utiliza la disminución de la biomasa en los estanques
mediante cosechas parciales e incremento en los recambios diarios de agua. Es importante
que entre cada ciclo de cultivo después del secado, se realicen remociones del exceso de
detritos. Al ser una enfermedad de tipo bacteriana, es necesario el empleo de antibióticos.
Su uso es causa de mucha controversia y abuso en la industria. Las reglas publicadas por
numerosos autores para la utilización de antibióticos son las siguientes:
1. Es necesario mejorar el ambiente de los estanques de cultivo donde se desarrollan
los organismos.
2. Sólo se debe usar antibióticos cuando sea muy necesario y únicamente para las
infecciones de origen bacteriano.
3. Usar los antibióticos adecuados, que sean sensibles a las bacterias que están
causando la enfermedad. La sensibilidad se realiza mediante análisis de laboratorio,
nunca se debe medicar un estanque sin antes revisarlo.
<ZHYZHSLZKLHU[PIP}[PJVZMYLZJV
5. Realizar el tratamiento con la dosis adecuada.
6. Finalizar los tratamientos por lo menos 15-30 días antes de la cosecha para permitir
la eliminación de residuos de antibióticos en el músculo del camarón.
Figura 3.3. Muestra de camarón peneido con manchas negras en la cutícula causadas por bacterias quitinolíticas
123
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL TZJ\SV KL

Litopenaeus vannamei; con nódulo hemocítico,
presencia de colonias bacterianas en el centro y
H[YVÄH KL SVZ WHX\L[LZ T\ZJ\SHYLZ;PUJP}U KL
hematoxilina-eosina
3.3 Síndrome de Zoea II

El síndrome de Zoea II ha sido reportado como una enfermedad que causa
altas mortalidades en el estadio de Zoea II de camarones blancos y azules. Ataca el
hepatopáncreas, intestino medio y posterior. En 1993 se reportó por primera vez en
cultivos larvarios de Litopenaeus vannamei de Ecuador, México y Estados Unidos; pero fue
hasta 1995 cuando se manifestó en todos los laboratorios de América Latina. Se reportó
que en Ecuador el agente causal de esta enfermedad es Vibrio harveyi, mientras que
otros autores reportan la posible presencia de bacterias intracelulares. Esta enfermedad
también se le conoce como el Síndrome de las bolitas blancas por el desprendimiento de
las células de los túbulos del hepatopáncreas.
Signos clínicos
:L WYLZLU[HU HS[HZ TVY[HSPKHKLZ KLZW\tZ KL OVYHZ KL OHILY [YHUZJ\YYPKV SH
metamorfosis de Zoea I a Zoea II, las sintomatologías más importantes son la anorexia
(falta de apetito), rápida evacuación del contenido intestinal, letargo (disminución de
la actividad normal) con nado errático y la permanencia en el fondo del tanque de los
organismos infectados.
El diagnóstico se realiza mediante la elaboración de placas en fresco de Zoeas II.,
KVUKLZLVIZLY]HH[YVÄHKLSOLWH[VWmUJYLHZJVUKLZWYLUKPTPLU[VJLS\SHYVOLWH[VJP[VZ
OPWLY[YVÄHKVZ`YLKVUKVZ¸SSHTHKVZIVSP[HZISHUJHZ¹-PN\YHPUÅHTHJP}U`WYLZLU-
cia de células del hepatopáncreas viajando a través del intestino. Se piensa que las boli-
tas blancas son una reacción a la presencia de toxinas bacterianas (Vibrio spp). También
se han observado en el hepatopáncreas de zoeas y postlarvas tempranas “bolitas negras”,
las cuales han sido asociadas a infecciones bacterianas, estas bolitas poseen una sus-
[HUJPHVZJ\YHX\LOHZPKVPKLU[PÄJHKHJVTVJSVYVÄSH"WYVIHISLTLU[LHWHYLJLUWVYSHZ
toxinas producidas por las bacterias asociadas con el tracto digestivo, las cuales causan
desórdenes metabólicos y una mala digestión de las algas ingeridas. Hasta la fecha, se
desconoce el origen de las bolitas negras en el cultivo larvario.
En organismos con la enfermedad de bolitas blancas, se diagnóstica por histopa-
tología con tinción de hematoxilina-eosina, y se busca la presencia de células “bolitas
blancas” viajando por el lumen del túbulo del hepatopáncreas (Figura 3.6) y del intestino
124
KL SH AVLH 00 OLWH[VJP[VZ OPWLY[YVÄHKVZ ` LU HSN\UVZ JHZVZ PUÄS[YHJP}U OLTVJx[PJH `
formación de nódulos. Para el diagnóstico de las bolitas negras se observan depósitos de
color café dentro de las células del hepatopáncreas (Figura 3.7).
Para el control del síndrome de zoea II es necesario el empleo de antibióticos, con la
previa realización de antibiogramas para su selección y en muchos laboratorios cuando
se presenta Zoea II, desechan todos los organismos que lo presenten y desinfectan los
tanques de cultivo larvario.
Figura 3.5. Muestra de Zoea II; donde se

observan células del hepatopáncreas viajando
por el intestino.
Figura 3.6. Corte histológico de hepatopáncreas;

donde se observan células en el lumen del túbulo
(Bolitas blancas). Tinción de hematoxilina-
eosina
Figura 3.7. Corte histológico de Zoea II; donde

se observan bolitas negras en los túbulos y
en el lumen del hepatopáncreas. Tinción de
hematoxilina-eosina.
125
3.4 Enfermedad de luminiscencia

La enfermedad de luminiscencia, causada por bacterias luminiscentes ha sido
YLZWVUZHISLKLHS[HZTVY[HSPKHKLZLUSVZSHIVYH[VYPVZKLSHY]PJ\S[\YHKLT\JOVZ
países de América Latina. La bacteria más predominante que se ha aislado en esta
enfermedad es Vibrio harveyi.
Signos clínicos
Los organismos infectados con esta bacteria se observan con luminiscencia, letargo
(disminución de la actividad normal), nado errático, permanencia en el fondo del tanque
y mortalidades masivas.
El diagnóstico se realiza mediante la elaboración de placas en fresco de larvas, donde
se observa en la fase inicial colonización masiva de las bacterias en los apéndices, tracto
digestivo y región oral. Pero conforme avanza la enfermedad y entra en la fase grave,
se observa colonización en el intestino medio y posterior y en hepatopáncreas hasta
llegar a colonizar todos los órganos y tejidos del organismo, hasta tener una septicemia
generalizada con mortalidades altas.
Por análisis de bacteriología es necesario aislar la bacteria principalmente de
organismos moribundos que muestren una gran colonización de bacterias. El aislamiento
se realiza en agar TCBS sembrando el macerado de los organismos previamente
desinfectados. Al obtener los resultados en las placas, se observa gran cantidad de
colonias luminiscentes de color verde (Tabla 1).
En organismos con la enfermedad de luminiscencia, se diagnostica por histopatología
con tinción de hematoxilina-eosina y se busca la presencia de colonias de bacterias,
PUÄS[YHJP}U KL OLTVJP[VZ U}K\SVZ OLTVJx[PJVZ TLSHUPaHJP}U ULJYVZPZ LU HWtUKPJLZ
-PN\YH [YHJ[V KPNLZ[P]V PU[LZ[PUV ` OLWH[VWmUJYLHZ 7HYH LS JVU[YVS KL LZ[H
enfermedad de luminiscencia, es necesario aplicar tratamiento mediante el empleo de
antibióticos, con la previa realización de antibiogramas y en algunos casos se desechan
todos los organismos y se desinfectan los tanques de larvicultura.
3.5 (NHP-B) Necrosis del hepatopáncreas bacteriana

La necrosis del hepatopáncreas de origen bacteriano (NHP-B), es una severa
enfermedad provocada por bacterias intracelulares del tipo de las rickettsias. La
bacteria tipo rickettsia más predominante y patógena en esta enfermedad es un pequeño
cocobacilo Gram-negativo con un diámetro en promedio de 0.36 μm, la cual infecta y se
multiplica en el citoplasma de las células epiteliales de los túbulos del hepatopáncreas.
,Z[HZIHJ[LYPHZZLYLWYVK\JLUWVYÄZP}UIPUHYPHLUSHJtS\SHOVZWLKLYH
NHP-B, es una enfermedad que fue reportada por primera vez por Johnson (1990)
como hepatopáncreas granulomatoso (por la formación de granulomas) causando
altas mortalidades en las granjas de la parte central y sur de Texas, posteriormente fue
reportado en Perú, Costa Rica, Panamá, Brasil, Venezuela, Ecuador y México provocando
mortalidades entre el 20% y 95% en los sistemas de cultivo de Litopenaeus vannamei
(camarón blanco) y Litopenaeus stylirostris (camarón azul).
NHP-B, se asocia con factores medioambientales como temperatura y salinidad
elevadas durante períodos prolongados ya que se tienen reportes que esta enfermedad
se hace presente cuando se tienen temperaturas de 29ºC a 35ºC, así como de salinidades
LU[YLHWW[LUSVZZPZ[LTHZKLJ\S[P]V5/7)LZ\UHLUMLYTLKHKX\LYmWPKHTLU[L
126
causa mortalidades en los camarones si no es detectada a tiempo, ya que ataca a uno de los
principales órganos del camarón (hepatopáncreas). En México, NHP-B, se ha detectado a
[YH]tZKL[YHIHQVZKLPU]LZ[PNHJP}UYLHSPaHKVZLUZPZ[LTHZKLJ\S[P]VKLZKL WLYVZ\
más alta prevalencia fue observada por primera vez en 1999, continuando hasta el 2007.
En estos años, se ha observado que esta enfermedad ocurre en los meses de abril, mayo,
julio, agosto, pero su alta prevalencia es observada en los meses de septiembre y octubre
causando altas mortalidades en los camarones cultivados. Esta enfermedad también ha
sido observada con una alta prevalencia en hembras ablacionadas y baja prevalencia en
hembras no ablacionadas pero que tienen temperatura y salinidad constante.
Signos clínicos
Durante la fase inicial de la enfermedad, no aparecen signos clínicos de organismo
enfermo.
Durante la fase aguda, la primera señal que se reporta para esta enfermedad, es
reducción en el consumo de alimento en postlarvas tardías, juveniles y adultos hasta
dejar de comer por completo. Posteriormente se observa la aparición de camarones
TVYPI\UKVZUHKHUKVJLYJHKLSHZ\WLYÄJPL`LUSHZVYPSSHZKLSVZLZ[HUX\LZ3VZJHTHYVULZ
moribundos muestran palidez generalizada del cuerpo, con un color café claro, branquias
KLJVSVYHTHYPSSVWmSPKVHJHMtÒLWH[VWmUJYLHZH[YVÄHKVJVUJVSVYHJP}UJHMtJSHYVH
oscuro, provocando que sea fácil de confundir con enfermedades virales; en esta fase se
observan las más altas mortalidades.
También en esta fase en muchas ocasiones no es posible observar camarones en
las orillas de los estanques, ya que éstos permanecen en el fondo o en el área de salida
de agua del estanque, por lo que es indispensable realizar muestreos de estas dos áreas
para detectar organismos moribundos o muertos. En la fase crónica, se observa el
OLWH[VWmUJYLHZ H[YVÄHKV KL JVSVY VZJ\YV ` \UH KPZTPU\JP}U KL SHZ TVY[HSPKHKLZ LU
camarones de cultivo.
Para realizar el análisis en fresco de deformación tubular, los organismos muestreados
KLILUKLLZ[HYLUMHZLKLPU[LYT\KH,USHMHZLPUPJPHSKL5/7)UVZLVIZLY]HH[YVÄH
del hepatopáncreas, pero presentan deformación tubular (Figura 3.9, grado 1) donde se
VIZLY]HH[YVÄH`LZ[YHUN\SHTPLU[VKLSVZ[I\SVZJVUKLZWYLUKPTPLU[V-PN\YH NYHKV
";HISH00LOPWLY[YVÄHJLS\SHYÙ\JSLHY,ULZ[VZVYNHUPZTVZLZWVZPISLVIZLY]HYT\`
pocas reservas de lípidos y masas de bacterias.
Fase aguda: ZL VIZLY]H H[YVÄH KLS OLWH[VWmUJYLHZ TH`VY KLZWYLUKPTPLU[V JLS\SHY
JtS\SHZ JVU UJSLVZ OPWLY[YVÄHKVZ JVSVYHJP}U WmSPKH KLZHWHYLJL LS JVSVY UHYHUQH
[L_[\YHISHUKH`LKLTH[VZHÅ\PKVISHUX\LJPUVHSYLHSPaHYSHKPZLJJP}UTLSHUPaHJP}U
H[YVÄH[\I\SHYÙLJYVZPZKLSHZJtS\SHZ`KLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZHZxJVTV
también es posible observar nódulos hemocíticos en el hepatopáncreas (Figura 3.9,
grado 3).
También se observa en fase aguda, formación multifocal de granulomas dentro
del hepatopáncreas; afectando a uno o más túbulos, las células epiteliales dentro de los
NYHU\SVTHZLUHSN\UVZJHZVZLZ[mUOPWLY[YVÄHKHZJVU[LUPLUKVLULSJP[VWSHZTHJVSVUPHZ
KLIHJ[LYPHZJVSVYHJP}UIHZVMxSPJH3HZJtS\SHZKLSVZ[I\SVZJLYJHUVZHSVZH[YVÄHKVZ`
JVUWYLZLUJPHKLNYHU\SVTHZWYLZLU[HUH[YVÄHUJSLVZWPJU}[PJVZT\`WVJHZ]HJ\VSHZ
de lípidos (células R) y vacuolas secretoras (células B). También es posible observar que
LSLWP[LSPVJVS\TUHYKLLZ[VZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZZL]LHHMLJ[HKVW\LZSHH[YVÄH
de las células lo convierte en epitelio cuboidal.
127
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL HWtUKPJL KL

JHTHY}U" KVUKL ZL VIZLY]H PUÄS[YHJP}U KL
hemocitos, nódulos hemocíticos, melanización
y necrosis. Tinción de hematoxilina-eosina.
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL HWtUKPJL KL JHTHY}U" KVUKL ZL VIZLY]H PUÄS[YHJP}U KL OLTVJP[VZ U}K\SVZ OLTVJx[PJVZ
melanización y necrosis. Tinción de hematoxilina-eosina).
Figura 3.10. Análisis en fresco de muestra

de hepatopáncreas; donde se observa:
estrangulamiento de los túbulos, desprendimiento
JLS\SHY H[YVÄH KL SVZ [I\SVZ TLSHUPaHJP}U
H[YVÄH[\I\SHYÙLJYVZPZKLSHZJtS\SHZ`KLSVZ
túbulos del hepatopáncreas, así como también
es posible observar nódulos hemocíticos.
Fase crónica: ZL VIZLY]H \UH TLUVY TLSHUPaHJP}U H[YVÄH [\I\SHY ` \U H\TLU[V KL
SH ULJYVZPZ KL SHZ JtS\SHZ ` KL SVZ [I\SVZ KLS OLWH[VWmUJYLHZ -PN\YH NYHKV
así como también es posible observar una mayor cantidad de nódulos hemocíticos en
LZ[L}YNHUV,SLWP[LSPVKLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZZLHWYLJPHT\`H[YVÄHKV"LU
algunas secciones se observa la formación de nódulos melanizados.
En organismos en fase inicial, utilizando examen histopatológico con tinción de
OLTH[V_PSPUHLVZPUH ZL VIZLY]H H[YVÄH TVKLYHKH KL SVZ [I\SVZ KLS OLWH[VWmUJYLHZ
OPWLY[YVÄHJLS\SHY`KLZWYLUKPTPLU[VJLS\SHY-PN\YH
128
Fase aguda:JVUH[YVÄHZL]LYHKLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZ"MVYTHJP}UT\S[PMVJHS
de granulomas dentro del hepatopáncreas; afectando a uno o más túbulos (Figura 11);
SHZJtS\SHZLWP[LSPHSLZKLU[YVKLSVZNYHU\SVTHZLUHSN\UVZJHZVZLZ[mUOPWLY[YVÄHKHZ
conteniendo en el citoplasma colonias de bacterias (Figura 12) (coloración basofílica).
3HZ JtS\SHZ KL SVZ [I\SVZ JLYJHUVZ H SVZ H[YVÄHKVZ ` JVU WYLZLUJPH KL NYHU\SVTHZ
WYLZLU[HUH[YVÄHJVUUJSLVZWPJU}[PJVZT\`WVJHZ]HJ\VSHZKLSxWPKVZJtS\SHZ9`
vacuolas secretoras (células B). Tambien es posible observar que el epitelio columnar
KL LZ[VZ [I\SVZ KLS OLWH[VWmUJYLHZ ZL ]L HMLJ[HKV W\LZ SH H[YVÄH KL SHZ JtS\SHZ SV
convierte en epitelio cuboidal.
Fase crónica:LSLWP[LSPVKLSVZ[I\SVZKLSOLWH[VWmUJYLHZZLHWYLJPHT\`H[YVÄHKV"LU
algunas secciones se observan la formación de nódulos hemocíticos melanizados.
Para el control de esta enfermedad de origen bacteriano intracelular, el método
de tratamiento más usado es el empleo de antibióticos para inhibir el crecimiento
bacteriano.
Figura 3.11. Corte histológico del hepatopáncreas

de camarón; donde se observa desprendimiento
JLS\SHY L PUÄS[YHJP}U OLTVSx[PJH LU LS [LQPKV
conectivo intertubular. Tinción de hematoxilina-
eosina.
Figura 3.12. Corte histológico del hepatopáncreas

de camarón; donde se observan bacterias
intracelulares. Tinción de hematoxilina-eosina).
129
Tabla 2. Guía para dar un valor numérico cualitativo del grado de severidad a la deformación
tubular en hepatopáncreas con análisis en fresco (Tomada de Morales-Covarrubias 2004).
Grado de severidad Signos clínicos

0 No presentan signos de deformación tubular (0). No presentan lesiones.
Presencia muy baja de deformación tubular (1-5/campo /organismo). Se
1
observa poca cantidad de vacuolas de lípidos.
Presencia moderada de deformación tubular (6-10/campo /organismo).
2 Presencia de hemocitos y formación de nódulos hemolíticos. Se obser-
va muy poca cantidad de vacuolas de lípidos.
Presencia alta de deformación tubular (11-20/campo /organismo). Pre-
sencia alta de hemocitos y formación de nódulos hemocíticos. No se
3
observan vacuolas de lípidos. En algunas células se observan colonias
de bacterias en el citoplasma.
Presencia muy alta de deformación tubular (11-20/campo /organismo).
Presencia alta de hemocitos y gran cantidad de nódulos hemocíticos. Pre-

sencia de túbulos melanizados y necróticos. No se observan vacuolas de lí-
pidos. En algunas células se observan colonias de bacterias en el citoplasma.
)HJ[LYPHZÄSHTLU[VZHZLeucothrix mucor)

Son organismos Gram-negativos. Estrictamente aeróbicos, constituidos por largos
ÄSHTLU[VZ UV YHTPÄJHKVZ JVTW\LZ[VZ KL WLX\L|HZ JtS\SHZ V]VPKLZ V JPSxUKYPJHZ
fuertemente adheridas a substratos vivos o inertes. Esta bacteria de longitud variable y
dos micrómetros de diámetro, no penetra en la cutícula del crustáceo. Estos organismos
ZL ÄQHU WYPUJPWHSTLU[L LU SH J\[xJ\SH IYHUX\PHZ WSL}WVKVZ ` WLYLP}WVKVZ KL SHY]HZ
Q\]LUPSLZ`HK\S[VZ,Z[VZVYNHUPZTVZLUNYHUKLZJHU[PKHKLZSSLNHUHNLULYHYKPÄJ\S[HKLZ
en la respiración, alimentación, locomoción, muda, reproducción y provocan la muerte
de larvas, postlarvas, juveniles y adultos.
3HZ IHJ[LYPHZ ÄSHTLU[VZHZ JH\ZHU HS[HZ TVY[HSPKHKLZ WYPUJPWHSTLU[L LU SHY]HZ `
WVZ[SHY]HZ`HX\LLZ[HZZLLUYLKHULUSVZÄSHTLU[VZOHJPLUKVKPMxJPSZ\TV]PTPLU[V
Signos clínicos
En estados medios y avanzados, las branquias se observan de color café claro a
oscuro, en estado avanzado impiden el intercambio gaseoso provocando con esto
SH T\LY[L KLS [LQPKV ULJYVZPZ T\S[PMVJHS PU[LZ[PUV PUÅHTHKV LU HSN\UVZ JHZVZ SVZ
organismos dejan de comer y se observa el intestino vacío con infección bacteriana.
7HYHKL[LJ[HYSHWYLZLUJPHKLIHJ[LYPHZÄSHTLU[VZHZWVYHUmSPZPZLUMYLZJVZL[VTHU
muestras de branquias, cutícula, región oral y pleópodos. Se observan al microscopio
JVTW\LZ[VJVUVIQL[P]VZKL?`?SVZÄSHTLU[VZKLKP]LYZVZ[HTH|VZKL L. mucor
(Figura 3.13), con presencia de melanización y necrosis en algunos casos.
Por histopatología con tinción de hematoxilina-eosina, en branquias, cutícula
` HWtUKPJLZ ZL VIZLY]HU SHZ MVYTHZ IPLU KLÄUPKHZ KL L. mucor, con presencia de
TLSHUPaHJP}U ` ULJYVZPZ ,U HSN\UVZ VYNHUPZTVZ JVU PU[LZ[PUV PUÅHTHKV ZL VIZLY]H
NYHUPUÄS[YHJP}UKLOLTVJP[VZ-PN\YH7HYHLSJVU[YVSZLYLX\PLYLTHU[LULY\UH
I\LUHJHSPKHKKLHN\HKLJ\S[P]VJVUL_JLSLU[LWYVK\JJP}UKLÄ[VWSHUJ[VUWHYHX\L
dichas poblaciones compitan por los nutrientes disponibles con L. mucor.
130
Figura 3.13. Análisis en fresco de muestra de

IYHUX\PHZ"KVUKLZLVIZLY]HUSVZÄSHTLU[VZKL
diversos tamaños de L. mucor.
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KLS PU[LZ[PUV

KL JHTHY}U" KVUKL ZL VIZLY]H PUÄS[YHJP}U
hemolítica severa. Tinción de hematoxilina-
eosina).
3.7 Spiroplasma penaei. (Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner)

Espiroplasmosis.
Agente Etiológico
Spiroplasma penaei.
Agente
Las bacterias incluidas dentro del género Spiroplasma (Clase Mollicutes) se
caracterizan por carecer de una pared celular y por tener una morfología helicoidal.
3VZ LZWPYVWSHZTHZ ZVU T}[PSLZ H WLZHY KL JHYLJLY KL ÅHNLSVZ /PZ[}YPJHTLU[L
los espiroplasmas han sido asociados a enfermedades de plantas y de artrópodos,
principalmente insectos y garrapatas, pero más recientemente se han encontrado a
miembros de este género infectando a algunas especies de cangrejos de agua dulce
(Eriocheir sinensi) y los camarones alvinocáridos de las chimeneas hidrotermales en el
fondo del océano (Rimicaris exoculata) en donde parece no causar enfermedad alguna
ZPUVTmZIPLUWHYLJLZLYWHY[LKLSHTPJYVÅVYHUVYTHSSpiroplasma penaei es el primer
espiroplasma patogénico que ha sido aislado a partir de un crustáceo marino.
131
ESPIROPLASMOSIS
Spiroplasma penaei
Figura 3.15. MicroFotografía electrónica de

barrido mostrando la forma helicoidal de
Spiroplasma penaei. Barra=1μm.
Figura 3.16. Lesiones observadas a nivel

histológico. En la parte central de la Fotografía
se muestran ejemplos de la formación de
nódulos hemocíticos y de la fagocitosis de
JtS\SHZ ULJY}[PJHZ LU[YL ÄIYHZ T\ZJ\SHYLZ KLS
JVYHa}U ;PUJP}U! /LTH[V_PSPUHLVZPUHÅV_PUH
de Mayer-Bennett. Barra=10 μm.
Figura 3.17 Ejemplo del uso de la sonda genética

LZWLJxÄJH WHYH SH KL[LJJP}U KL S. penaei. La
presencia de un precipitado de color azul oscuro
a negro indica los lugares en donde la sonda ha
reconocido la presencia de la bacteria entre los
túbulos del órgano linfoide. Tinción de contraste:
*HMtKL)PZTHYJR(TWSPÄJHJP}U?
132
Infecciones naturales han sido reportadas únicamente en Penaeus vannamei.
Spiroplasma penaei fue descubierto por primera vez en una granja camaronícola de
Colombia, en la costa del Caribe, en condiciones de baja salinidad.
La transmisión de la enfermedad puede ocurrir horizontalmente a través de
canibalismo y posiblemente a través del agua. Existe la posibilidad de transmisión
vertical, pero no ha sido demostrada experimentalmente.
Hasta el momento, los estadíos de vida del camarón que se sabe son afectados
por S. penaei incluyen juveniles y sub-adultos. Se ignora el efecto de la enfermedad en
adultos reproductores, y estadíos larvales.
Típicamente se incluyen el cordón ventral nervioso, músculo esquelético, corazón,
NSmUK\SHHU[LUHS}YNHUVSPUMVPKL[LQPKVJVULJ[P]VÄIYVZVKLU[YVKLSOLWH[VWmUJYLHZ
[LQPKV JVULJ[P]V LZWVUQVZV WLYPNmZ[YPJV ÄSHTLU[VZ IYHUX\PHSLZ ` Z\IJ\[PZ LU LS
caparazón y apéndices corporales.

Los camarones infectados no presentan lesiones distintivas que sean aparentes a
simple vista. Los cromatóforos pueden encontrarse expandidos en algunos casos. Se
ha reportado también la condición llamada “síndrome de los camarones parados”
LUSHJ\HSSVZJHTHYVULZT\LY[VZ[PLUKLUHÅV[HYLUSHZ\WLYÄJPLJVTVZPLZ[\]PLYHU
balanceándose en la punta de la cola y mirando hacia el cielo.
anteriormente.
+PHNU}Z[PJVJVUÄYTH[VYPV Basado en uno o más de los siguientes métodos:
Histopatología. Las lesiones causadas por este espiroplasma son las características de una
enfermedad bacteriana de tipo sistémico. Utilizando técnicas de rutina con tinciones
de hematoxilina-eosina (H&E), los camarones moribundos presentan reacciones
PUÅHTH[VYPHZ ZPZ[tTPJHZ T\S[PMVJHSLZ TVKLYHKHZ H ZL]LYHZ LU MVYTH KL JVUNLZ[P}U
hemocítica, coagulación de hemocitos, formación de nódulos hemocíticos, fagocitosis
HSN\UHZ]LJLZHJVTWH|HKHKLTLSHUPaHJP}U`ÄIYVZPZ3VZ}YNHUVZHMLJ[HKVZPUJS\`LU
(en orden de severidad): cordón ventral nervioso, músculo esquelético, corazón,
NSmUK\SHHU[LUHS}YNHUVSPUMVPKL[LQPKVJVULJ[P]VÄIYVZVKLU[YVKLSOLWH[VWmUJYLHZ
[LQPKVJVULJ[P]VLZWVUQVZVWLYPNmZ[YPJVÄSHTLU[VZIYHUX\PHSLZ`Z\IJ\[PZ,SKLZHYYVSSV
de las lesiones parece ser como sigue: (1) Presencia de células necróticas con núcleos
picnóticos; (2) Migración y congregación de células fagocíticas en el área necrosada;
(3) Fagocitosis de las células necrosadas y restos celulares y formación de nódulos
OLTVSx[PJVZ"4LSHUPaHJP}UKLU}K\SVZOLTVSx[PJVZ"0UÅHTHJP}UÄIYVJx[PJH
PCR. Utilizando los métodos descritos por Nunan et al+LIPKVHSHNYHUZPTPSP[\K
entre las lesiones producidas por S. penaei y otras enfermedades bacterianas tales
como vibriosis sistémica, es aconsejable combinar el análisis histológico con PCR, o
con pruebas de hibridación in situ WHYH WVKLY VI[LULY \U KPHNU}Z[PJV JVUÄYTH[VYPV
JVUÄHISL
133
9LMLYLUJPHZIPISPVNYmÄJHZ
Bell, T. A., Lightner, D.V. (OHUKIVVRVMUVYTHSZOYPTWOPZ[VSVN`:WLJPHSW\ISPJH[PVU5V
World Aquaculture Society, Baton Rouge, FL.
De la Lanza Espino G, De Lara., y García, C.J.L. 1991. La acuicultura en palabras. AGT EDITOR,
:(7YVNYLZV4t_PJV+-7YPTLYH,KPJP}U0:)5!
Frelier, P. F., Loy., J. K., Lawrence, A. L., Bray, W. A., and Brumbaugh, G. W. :[H[\Z
of necrotizing hepatopancreatitis in Texas farmed shrimp, Penaeus vannamei. USMSFP 10th.
(UUP]LYZHY`YL]PL^.*93:WLJPHS7\ISPJH[PVU!
Frelier, P. F., Loy, J. K., and Kruppenbach, B. 1993. Transmission of Necrotizing Hepatopancreatitis
in Penaeus vannamei1V\YUHSVM0U]LY[LIYH[L7H[OVSVN`!
Frelier, P. F., Sis, R. F., Bell, T., and Lewis, A. 1992. Microscopic and ultrastructural studies of
ULJYV[PaPUNOLWH[VWHUJYLH[P[PZPU7HJPÄJÔP[LZOYPTW(Penaeus vannamei) cultured in Texas.
Veterinary Pathology 29:269-277.
García-Bada-Mena, G. 2001. Vademecum veterinario IPE. Imprelibros S.A. Colombia. Tercera
LKPJP}U0:)5! .
Gómez-Gil, B., Tron-Mayén, L., Roque, A., Turnbull, J. F., Inglis,V., Guerra-Flores, A .L. :WLJPLZ
of vibrio isolated from hepatopancreas, haemolymph and digestive tract of a population of
healthy juvenile penaeus vannamei Aquaculture, 163:1-9.
Gómez-Gil, B. 2006. Manual de bacteriología.
Johnson, S. K. 1990. Handbook of Shrimp Diseases Sea Grant Publ. No. TAMU-SG 90-601, Texas A&M Univ.
Lightner, D.V. 1996. A handbook of shrimp pathology and diagnostic procedures for diseases of
cultured penaeid shrimp. World aquaculture Society, Baton Rouge, LA.
Lightner, D.V. 1993. Diseases of cultured penaeid shrimp, In: CRC Handbook of Mariculture. Vol 1.
*9*7YLZZ)VJH9H[VU
Lightner, D.V., R. M. Redman, and J. R. Bonami. 1992. Morphological evidence for asingle bacterial
etiology in Texas necrotizing hepatopancreatitis in Penaeus vannamei (Crustacean:Decapoda).
Disease Aquatic organisms 13:235-239.
Loy , J. K., P. F. Frelier, P. Varner, and J. W. Templeton. 1996a. Detection of the etiologic agent
of necrotizing hepatopancreatitis in cultured Penaeus vannamei from Texas and Peru by
polymerase chain reaction. Disease Aquatic organisms 25:117-122.
Morales-Covarrubias, M. S. ,UMLYTLKHKLZ KLS JHTHY}U +L[LJJP}U TLKPHU[L HUmSPZPZ LU
MYLZJVLOPZ[VWH[VSVNxH,KP[VYPHS;YPSSHZ:(KL*=(]9xV*O\Y\I\ZJV*VS7LKYV4HYxH
(UH`H4t_PJV+-7YPTLYHLKPJP}U0:)5!
Morales-Covarrubias, M. S. (en prensa 2007). Enfermedades del camarón. Detección mediante
HUmSPZPZLUMYLZJVLOPZ[VWH[VSVNxH,KP[VYPHS;YPSSHZ:(KL*=(]9xV*O\Y\I\ZJV*VS
Pedro María Anaya, México, D.F. Segunda edición.
Morales-Covarrubias, M.S., A.G. Osuna-Duarte, A. Garcia-Gasca, D.V. Lightner and J.C. Mota-
Urbina. 2006. Prevalence of necrotizing hepatopancreatitis in female broodstock of Penaeus vannamei
^P[O\UPSH[LYHSL`LZ[HSRHISH[PVUHUKOVYTVULPUQLJ[PVU1V\YUHSVM(X\H[PJ(UPTHS/LHS[O!
Nunan, L. M., B. Noble, Le Groumellec, M., and Lightner, D. V. 2003a. Experimental infection of
Penaeus vannamei by a rickettsia-like bacterium (RLB) originating from Penaeus monodon.
+PZLHZL(X\H[PJVYNHUPZTZ!
Nunan, L. M., B. Poulos, B., Redman, R., Le Groumellec, M., and Lightner, D. V. 2003b. Molecular
detection methods developed for a systemic rickettsia-like bacterium (RLB) in Penaeus monodon
(Decapoda:Crustacean) Disease Aquatic organisms 53:15-23
SPIROPLASMA
Nunan L.M., Pantoja C.R, Salazar M., Aranguren F., Lightner D.V. *OHYHJ[LYPaH[PVU HUK
molecular methods for detection of a novel spiroplasma oathogenic to Penaeus vannamei. Dis.
(X\H[6YN!
Nunan L.M., Lightner D.V., Oduori M.A., Gasparich G.E. 2005. Spiroplasma penaei sp. nov.,
associated with mortalities in Penaeus vannamei 7HJPÄJ ÔP[L ZOYPTW 0U[S 1 :`Z[ ,]VS
Microb. 55:2317-2322.
134
Capítulo 4
Enfermedades por Parásitos
Coclé, Panamá
Introducción
Un parásito puede ser considerado como todo organismo vegetal o animal que vive
a costa de otro de distinta especie, alimentándose de las sustancias que este consume o
elabora y pudiéndole o no perjudicar, aunque sin llegar necesariamente a producirle la
T\LY[L3VZWHYmZP[VZZLJSHZPÄJHULULUKVWHYmZP[VZ`LJ[VWHYmZP[VZZLNUZPOHIP[HULU
LSPU[LYPVYVLULSL_[LYPVYKLZ\ZOVZWLKLYVZ
La afección de un animal por parásitos, es llamada parasitosis. Los principales
parásitos de camarones son gregarinas, epicomensales (protozoarios, algas y bacterias
ÄSHTLU[VZHZTPJYVZWVYPKPVZOHWSVZWVYPKPVZ`TL[HaVHYPVZULTH[VKVZV[YLTm[VKVZ
3VZWYV[VaVHYPVZZVUSVZX\LTmZJVTUTLU[LHMLJ[HUHSVZJHTHYVULZW\KPLUKVZLY
observados en branquias, apéndices, exoesqueleto y tracto digestivo (intestino medio y
L]LU[\HSTLU[L OLWH[VWmUJYLHZ 3HZ JP[HZ IPISPVNYmÄJHZ \[PSPaHKHZ WHYH SH WYLWHYHJP}U
de una parte de este Capítulo, no serán mencionadas a lo largo del texto para facilitar
SHSLJ[\YHKLSVZKPMLYLU[LZ[LTHZ(JHTIPVZLYmUPUJS\PKHZHSÄUHSKLS*HWx[\SVLUSHZ
¸9LMLYLUJPHZIPISPVNYmÄJHZ¹
4.1 Gregarinas
Las gregarinas (Protozoa, Apicomplexa) son parásitos protozoarios de diversos
[PWVZ HTWSPHTLU[L KPZ[YPI\PKVZ LU SH UH[\YHSLaH ` JVT\ULZ LU T\JOVZ NY\WVZ KL
invertebrados, especialmente artrópodos, anélidos y moluscos. En éstos, las gregarinas
W\LKLUHWHYLJLYxU[LYVPU[YHJLS\SHYTLU[L`H\UX\LSHZJtS\SHZOVZWLKLYVPUKP]PK\HSLZ
ZVUKLZ[Y\PKHZWVYLSLZ[HKPVPU[YHJLS\SHYT\JOHZLZWLJPLZUVZVUJVUZPKLYHKHZJVTVKL
HS[HWH[VNLUPJPKHK:PULTIHYNVJHKHLZWLJPLKLNYLNHYPUHZ\LSLZLYLZWLJxÄJHKL\UH
UPJHLZWLJPLKLOVZWLKLYV
Las gregarinas pueden ser encontradas tanto en camarones silvestres, como en
ZPZ[LTHZ KL J\S[P]V ;VKVZ SVZ JHTHYVULZ WLUHLPKVZ ZVU OVZWLKLYVZ JVUVJPKVZ V
potenciales de las gregarinas. Por lo menos dos géneros, Nematopsis y Cephalolobus, cada
uno con diversas especies, aparecen de manera frecuente en los camarones penaeidos
JVU\UHKPZ[YPI\JP}UNLVNYmÄJHT\UKPHS<U[LYJLYNtULYVSSHTHKVParaophioidinaZLOH
observado esporádicamente en postlarvas de P. vannamei bajo condiciones de cultivo.
+LIPKV H X\L ZL JVUZPKLYH X\L L_PZ[LU TS[PWSLZ LZWLJPLZ KL NYLNHYPUHZ JVU
KPZ[YPI\JP}U NLVNYmÄJH HU ZPU KLÄUPY LU [VKV LS T\UKV LZ YLJVTLUKHISL YLHSPaHY
monitoreos sanitarios cuando van a ser movilizados camarones procedentes de regiones
aisladas, ya que éstas pueden poseer poblaciones nativas de estos parásitos.
Agente etiológico y hospederos más comunes

Las gregarinas que se presentan con más frecuencia en camarones P. vannamei
de cultivo, son del género Nematopsis sp. Pueden trasmitirse al camarón mediante
la ingestión de poliquetos como la Polydora cyrrhosa o a través de la ingestión de
TH[LYPHMLJHSKLLZ[LZLN\UKVOVZWLKLYVKLSWYV[VaVHYPV6[YVZOVZWLKLYVZZVUHSN\UVZ
moluscos bivalvos, que al igual que los poliquetos, ingieren las zigosporas que son las
formas infestantes del protozoario.
6[YVZ KVZ NtULYVZ X\L [HTIPtU ZL OHU VIZLY]HKV LU JHTHYVULZ WLUHLPKVZ KL
cultivo son Paraophioidina y Cephalolobus, aunque con menor frecuencia. Las siguientes
son algunas de las características de los 3 géneros mencionados:
Nematopsis: el trofozoito está compuesto de 2 células: un protomerito largo provisto
de un collar muscular, unido a un deuteromerito más largo y más angosto. La forma del
[YVMVaVP[VZLHZLTLQHHSKL\UJOHTWP|}U,SWHZVKLLZWVYVaVP[VH[YVMVaVP[VSVYLHSPaH
en el intestino medio.
Paraophioidina: en estado adulto se presenta como una sola célula alargada con un solo
UJSLVLUaVUHTLKPH,UZ\WHY[LHU[LYPVYWYLZLU[HLZ[Y\J[\YHZKLÄQHJP}UTLKPHU[LSHZ
J\HSLZZLHKOPLYLHSOVZWLKLYVVHV[YHZNYLNHYPUHZJVUNtULYLZ(SPN\HSX\LLSNtULYV
anterior, el paso de esporozoito a trofozoito lo realiza en el intestino medio.
Cephalolobus: ZLJHYHJ[LYPaHWVY[LULY\ULUNSVIHTPLU[VLUSHWVYJP}UHU[LYPVYOHJPLUKV
ZLTLQHUaH JVU \UH MHSZH ¸JHILaH¹ ,S JPJSV KL ]PKH ` SHZ JHYHJ[LYxZ[PJHZ TVYMVS}NPJHZ
generales excepto la dilatación cefaloide, son similares a las descritas para Nematopsis
sp. A diferencia de los géneros anteriores, el paso de esporozoito a trofozoito lo lleva a
cabo en la zona posterior del estómago.
Ciclo de vida
,USVZJHTHYVULZSHPUNLZ[P}UKL\UOVZWLKLYVPU[LYTLKPHYPVX\LJVU[LUNHLZWVYHZ
KLNYLNHYPUH[YHLJVTVJVUZLJ\LUJPHSHPUMLZ[HJP}U3HZLZWVYHZPUNLYPKHZ¸NLYTPUHU¹
WHYHSSLNHYHZLYLZWVYVaVP[VZSVZJ\HSLZZLHKOPLYLUHSHJHWHKLX\P[PUHKLSHZWHYLKLZ`
HSVZWSPLN\LZ[LYTPUHSLZKLSÄS[YVNmZ[YPJV;HTIPtUW\LKLUPU]HKPYV\UPYZLHSPU[LZ[PUV
medio o a las células epiteliales del ciego anterior, con su proceso especializado de
LWPTLYP[VZ<UH]LaHKOLYPKVZZLKLZHYYVSSHUH[YVMVaVP[VZX\LZLJHYHJ[LYPaHUWVYZ\
LWPTLYP[VLZWLJPHSPaHKV`JVUZPZ[LULUSHMVYTHPUPJPHSKLSWYV[VTLYP[VJVU\UUJSLV
diferenciado y localizado centralmente. De cada uno pueden generarse al menos tres
trofontes.
Los trofontes se separan de su unión al estómago o intestino medio, para convertirse
en esporadio y pasar al intestino posterior, alojándose en sus pliegues. De cada
célula individual de esporadio, se desarrolla un gametocisto. Algunas de estas células
darán paso a la fase sexual de la reproducción del parásito, formando microgametos
NHTL[VZTHZJ\SPUVZ`THJYVNHTL[VZNHTL[VZMLTLUPUVZ*\HUKVOH`Y\W[\YHKLSVZ
gametocistos, los gametos se entrecruzan y fusionan para formar cigotos, los cuales son
liberados al medio externo.
Las zigosporas son consumidas por bivalvos y poliquetos. En el interior de estos
ZLN\UKVZ OVZWLKLYVZ VJ\YYL SH LZWVYVNVUPH LU SHZ JtS\SHZ KLS LWP[LSPV PU[LZ[PUHS
7VZ[LYPVYTLU[LLSJHTHY}UPUNPLYLSVZWVSPX\L[VZVZ\ZOLJLZ`ZLPUMLZ[H+LU[YVKLS
tracto gastrointestinal del camarón, se liberan los esporozoitos, ocupando el estómago
WVZ[LYPVYVLSPU[LZ[PUVTLKPVHKOPYPtUKVZLHSHJ\[xJ\SHVWLUL[YHUKVSHZTLTIYHUHZKL
138
Jorge Cuéllar-Anjel Enfermedades por Parásitos
SHZJtS\SHZKLSOVZWLKLYV3VZLZWVYVaVP[VZZVUKLZHYYVSSHKVZH[YVMVaVP[VZLULSPU[LZ[PUV
medio, posterior o en el propio estómago.
Mecanismos de transmisión
+LIPKVHSHULJLZPKHKKL]HYPVZOVZWLKLYVZKLU[YVKLSJPJSVKL]PKHKLSHZNYLNHYPUHZ
se cree que la transmisión de un camarón a otro no es frecuente. Algunos ensayos de
[YHUZTPZP}ULUHJ\HYPVZOHUTVZ[YHKVX\LLSPTPUHUKVLSZLN\UKVOVZWLKLYV\UH]La
están infestados los camarones, desaparecen los protozoarios del tracto intestinal en
pocos días.
(\UX\L SVZ TVS\ZJVZ IP]HS]VZ OHU ZPKV PTWSPJHKVZ [YHKPJPVUHSTLU[L JVTV
OVZWLKLYVZ PU[LYTLKPHYPVZ KL SHZ NYLNHYPUHZ WHYH JHTHYVULZ WLUHLPKVZ LS WVSPX\L[V
Polydora cirrhosaHUtSPKVT\`JVTUX\L]P]LLULSMVUKVKLSVZLZ[HUX\LZKLJ\S[P]V
KL JHTHY}U M\L LUJVU[YHKV JVTV \U PTWVY[HU[L OVZWLKLYV PU[LYTLKPHYPV WHYH LS
Nematopsis ZW ZLNU LZ[\KPVZ YLHSPaHKVZ LU ,J\HKVY LU LZ[HUX\LZ KL J\S[P]V KL P.
vannamei.
Signos clínicos
Los camarones con infestaciones muy altas (más de 100 trofozoitos por cm de
intestino medio), pueden mostrar una coloración amarillenta del intestino. En los casos
en los que la infestación es severa e involucra a una gran parte de la población de
cultivo, se puede presentar bajo crecimiento de los camarones y aumento en el factor de
conversión alimenticia.
Los camarones con niveles bajos o moderados de infestación por gregarinas, pueden
no presentar signos clínicos y tener una apariencia general equivalente a camarones
aparentemente sanos.
Diagnóstico
Montaje en fresco: pueden ser observados esporozoitos, trofozoitos o gametocistos
LUOLJLZKLJHTHYVULZL_[YHxKHZKLSPU[LZ[PUVTLKPV`L_HTPUHKHZIHQVLSTPJYVZJVWPV
utilizando objetivos de 10X y 20X. No se requieren tinciones para la diferenciación
del parásito. Su apariencia será pálida cuando esté inmaduro y tiende a color marrón
oscuro entre más cercano esté de ser adulto. En algunos casos se observan gregarinas
JVU Z\ L_[YLTV KPZ[HS IPM\YJHKV LU MVYTH KL ¸@¹ *HKH ¸ZLNTLU[V¹ JtS\SH X\L
JVUMVYTHLSVYNHUPZTV[PLULZ\UJSLV]PZPISL`KLMmJPSKPMLYLUJPHJP}UJ\HUKVZL\ZH
el ajuste micrométrico de foco en el microscopio. Cuando están vivas, se les observa un
TV]PTPLU[VSLU[VKLH]HUJLSPULHS`LUHSN\UVZJHZVZZLKVISHZIP[HTLU[LLUMVYTHKL
¸3¹]VS]PLUKVS\LNVHZ\MVYTHUVYTHS
Histopatología: se observan parásitos en el intestino medio y con frecuencia en la luz
KLSJPLNVHU[LYPVYHZxJVTVLUSVZJVUK\J[VZWYPTHYPVZKLSOLWH[VWmUJYLHZ"LZ[}THNV
HU[LYPVY`WVYJP}UPUPJPHSKLS[YHJ[VKPNLZ[P]VHU[LYPVY3HZSLZPVULZZPNUPÄJH[P]HZHWHYLJLU
típicamente en infestaciones severas y consisten en taponamiento mecánico del lumen
PU[LZ[PUHSYLK\JJP}UKLSNYVZVYKLSHT\JVZHKLSPU[LZ[PUVTLKPVOPWLYWSHZPHKLSLWP[LSPV
PU[LZ[PUHSMVYTHUKVWSPLN\LZ[PWV¸]LSSVZ¹`WLYMVYHJPVULZKLSHT\JVZHPU[LZ[PUHSiZ[HZ
pueden proporcionar una ruta de entrada a Vibrio spp. u otras especies de bacterias
extracelulares, que son agentes oportunistas potencialmente causantes de bacteremia y
enfermedad.
139
Medidas de control
3VZ H\TLU[VZ LU SH PU[LUZPÄJHJP}U KL SVZ ZPZ[LTHZ KL WYVK\JJP}U OHU ]LUPKV
HJVTWH|HKVZ WVY H\TLU[VZ LU SH PUJPKLUJPH KL NYLNHYPUHZ LU SHZ L_WSV[HJPVULZ
KL J\S[P]V KL JHTHY}U *VU LS ÄU KL THU[LULY SVZ UP]LSLZ KL NYLNHYPUHZ WVY KLIHQV
de los grados considerados como de riesgo para el crecimiento (y eventualmente
Z\WLY]P]LUJPH T\JOVZ WYVK\J[VYLZ YLHSPaHU TVUP[VYLVZ WLYP}KPJVZ WHYH NYLNHYPUHZ `
OHUJVTLUaHKVHPUJVYWVYHYHU[PJVJJPKPHSLZ]L[LYPUHYPVZLUSVZHSPTLU[VZIHSHUJLHKVZ
con las dosis recomendadas para avicultura y ganadería bovina, teniendo buenos
resultados determinables en los muestreos de rutina. Otras técnicas de control incluyen
SHLSPTPUHJP}UKLSVYNHUPZTVOVZWLKLYVPolydora sp. y moluscos bivalvos), mediante
SHHKPJP}UKLJHSLUUP]LSLZHKLJ\HKVZHSMVUKVKLSLZ[HUX\LS\LNVKLSHJVZLJOHWHYH
KLZ[Y\PY LZ[VZ ]LJ[VYLZ WV[LUJPHSLZ KLS WYV[VaVHYPV 9LJPLU[LTLU[L ZL OHU SHUaHKV
productos al mercado con base en compuestos naturales (no químicos) dirigidos
LZWLJxÄJHTLU[LJVU[YHNYLNHYPUHZ`J\`HLMLJ[P]PKHKH\UZLLZ[mL]HS\HUKVLUZPZ[LTHZ
comerciales de producción de camarón.
GREGARINAS
Figura 4.1 Microfotografía del epitelio intestinal de un camarón

P. vannamei mostrando dos trozoitos de gregarina Nematopsis
ZW KL KPMLYLU[LZ [HTH|VZ HKOLYPKVZ H SHZ JtS\SHZ LWP[LSPHSLZ
KLU[YVKLSS\TLUKLSPU[LZ[PUVTLKPV;PUJP}U!/ ,KL4H`LY
)LUUL[[(TWSPÄJHJP}U!?
Figura 4.2 Ciclo de vida de las gregarinas: A. El camarón ingiere las esporas con detritus orgánicos del fondo. B. Los esporozoitos
LTLYNLUKLSPU[LZ[PUVKLSJHTHY}U*3VZLZWVYVaVP[VZZLHKOPLYLUHSHWHYLKPU[LZ[PUHS`JYLJLULU[YVMVaVP[VZ"HSN\UVZ[YVMVaVP[VZ
UVZLHKOPLYLUHSHZWHYLKLZZPUVLU[YLZxMVYTHUKVLZ[Y\J[\YHZPU\Z\HSLZ+,Z[HZMVYTHZPU\Z\HSLZZLKLZHYYVSSHU`ZLHKOPLYLUH
SHWHY[LÄUHSKLSPU[LZ[PUVYLJ[VWHYHMVYTHYNHTL[VJPZ[VZ-3HZNPTUVZWVYHZZVULUNVSMHKHZWVYJtS\SHZKLSHZ\WLYÄJPLKLS[LQPKV
ISHUKVKLSHZHSTLQHZ.+LU[YVKLSHZHSTLQHZZLKLZHYYVSSHUOHZ[HMVYTHYLZWVYHZ/3HZLZWVYHZJVULZWVYVaVP[VZLUZ\PU[LYPVY
ZVUS\LNVSPILYHKHZWVYSHHSTLQHHKOLYPKHZHTHZHZKLTVJV(KHW[HKVKL1VOUZVU
140
GREGARINAS
Figura 4.3 Montaje en fresco de gregarinas

Nematopsis sp. en el intestino medio de un P.
vannamei. Los organismos presentes son formas
tempranas de trofozoitos de 2 células. Sin
[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U!?
Figura 4.4 Montaje en fresco de gregarinas

Nematopsis sp. en el intestino medio de un P.
vannamei. Los organismos presentes son formas
THK\YHZ KL [YVMVaVP[VZ KL ` JtS\SHZ :PU
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KL [YVMVaVP[VZ KL

gregarinas Paraophioidina sp. en el intestino
medio de una postlarva de P. vannamei. Sin
141
4.2 Microsporidios
Microsporidiosis, enfermedad del camarón algodonoso, enfermedad del camarón
SLJOVZVVLUMLYTLKHKKLS5VZLTHLU[YLV[YHZ
Etiología
La microsporidiosis es una enfermedad parasitaria producida en camarones penaeidos
WVY WYV[VaVHYPVZ PU[YHJLS\SHYLZ TPV[Y}WPJVZ KLS WO`S\T WYV[PZ[H 4PJYVZWVYH 6YKLU
Microsporidia), pertenecientes a los géneros Agmasoma (anteriormente Thelohania),
Ameson (anteriormente Nosema) y Pleistophora (anteriormente Plistophora).
Especies afectadas
Probablemente todas las especies de camarones penaeidos puedan ser infestadas por
\UHVTmZLZWLJPLZKLTPJYVZWVYPKPVZ3VZ[LQPKVZHMLJ[HKVZLZ[mU[xWPJHTLU[LPUÅHTHKVZ
3HZ JtS\SHZ X\L ZVU WHYHZP[HKHZ WYLZLU[HU OPWLY[YVÄH [HU[V KLS JP[VWSHZTH JVTV KLS
UJSLV`WVZLLULZWVYHZKLSWYV[VaVHYPVX\LW\LKLU]LYZLLZMtYPJHZVJPSxUKYPJHZ
Estos parásitos protozoarios intracelulares afectan a artrópodos, peces y también al
OVTIYL7VZLLUYLWYVK\JJP}UZL_\HSWVYLZWVYVNHTPHLULSOVZWLKLYV`HZL_\HSWVY
ÄZP}UTS[PWSLLZX\PaVNHTPH
La enfermedad del camarón algodonoso en P. vannamei, se presenta cuando el
TZJ\SVLZ[YPHKVLZPU]HKPKVWVYLSWYV[VaVHYPVAmeson sp. Los procesos de reproducción
asexual culminan con la producción de gran cantidad de esporas que se localizan dentro
de las células en tejido muscular del camarón.
Ciclo de vida y vías de transmisión

,S WHYmZP[V [PLUL \U JPJSV KL ]PKH PUKPYLJ[V X\L PU]VS\JYH KVZ OVZWLKLYVZ! SVZ
JHTHYVULZOVZWLKLYVZPU[LYTLKPHYPVZ`SVZWLJLZOVZWLKLYVZKLÄUP[P]VZ,ULSTLKPV
natural, los peces adquieren los microsporidios cuando se alimentan de camarones
X\L[PLULULZWVYHZKLSWHYmZP[VJVSVUPaHUKVHZxZ\Z[LQPKVZ3HZLZWVYHZJVU[PUHUZ\
desarrollo en el intestino de los peces y eventualmente el estadio infectante es liberado
HS TLKPV UH[\YHS LU SHZ OLJLZ KLS WLa 3VZ JHTHYVULZ WYVIHISLTLU[L PUNPLYLU LZ[HZ
formas infectantes del parásito en el momento en que se están alimentando con detritos
VYNmUPJVZKLSMVUKV,SWHYmZP[VZLSVJHSPaHLU[VUJLZLUSHZJtS\SHZKLSTZJ\SVLZ[YPHKV
\V[YVZ[LQPKVZ`ZLKP]PKLKLTHULYHLÄJPLU[LWYVK\JPLUKVLZWVYHZX\LKLZWSHaHYmU
las células musculares.
Especies de microsporidios como las que pertenecen al género AmesonOHUZPKV
detectadas en reproductores silvestres de P. vannamei. En condiciones de cultivo en
LZ[HUX\LZLZT\`YHYV]LYIYV[LZKLTPJYVZWVYPKPVZPZ`HUTLUVZMYLJ\LU[LZZVULU
tanques de levantamiento o mantenimiento de reproductores. Sin embargo, se tienen
reportes de un brote de la enfermedad que se dio en camarones cultivados en tanques,
SVZJ\HSLZM\LYVUW\LZ[VZLUJVU[HJ[VJVUHN\HVZLKPTLU[VKLWLJLZX\LOHIxHUZPKV
alimentados con camarones silvestres.
142
CICLO DE VIDA DE LOS MICROSPORIDIOS
-PN\YH (KHW[HKH ` TVKPÄJHKH KLZW\tZ KL 1VOUZVU WVY LS +Y 2LUUL[O> /HZZVU 7HY[LZ KL SH ÄN\YH M\LYVU [VTHKHZ
KPYLJ[HTLU[LKL*HUUPUN`3VT "7LYRPUZ `7\[a`4J3H\NOSPU
,SL_HTLUJSxUPJVWLYTP[LKL[LJ[HYWYLZLUJPHKLTHUJOHZISHUJHZLUJLMHSV[}YH_
N}UHKHZ[YHJ[VKPNLZ[P]V`VTZJ\SVLZX\LSt[PJVLUHIKVTLUVJLMHSV[}YH_SHZJ\HSLZ
W\LKLU Z\NLYPY PUMLZ[HJP}U JVU LS WYV[VaVHYPV ,Z[VZ OHSSHaNVZ [HTIPtU W\LKLU LZ[HY
HJVTWH|HKVZWVYVWHJPKHK\VZJ\YLJPTPLU[VNLULYHSPaHKVKLSJHTHY}U
,STVU[HQLLUMYLZJVHWHY[PYKL[LQPKVT\ZJ\SHYHMLJ[HKVZPU[L|PYVJVSVYLHKVJVUSH
técnica de Giemsa, permite observar las esporas del parásito bajo el microscopio (400X).
:VUJHYHJ[LYxZ[PJHZSHZTHZHZKLLZWVYHZYLMYPUNLU[LZX\LKLHJ\LYKVJVUZ\[HTH|V`
forma, indican el tipo de organismo que se encuentra presente en los tejidos afectados.
,S HUmSPZPZ OPZ[VS}NPJV YLHSPaHUKV [PUJPVULZ JVU / , .PLTZH V mJPKVHSJVOVS
resistente (“acid fast¹WLYTP[L]PZ\HSPaHYSHZLZWVYHZKLSVZTPJYVZWVYPKPVZJSHYHTLU[L
dispuestas en colonias dentro de los tejidos afectados.
3HZZPN\PLU[LZZVUSHZJHYHJ[LYxZ[PJHZKLSHZLZWVYHZKLJHKHLZWLJPLZLNUSVZU\L]VZ
esquemas taxonómicos y mediante el uso de microscopía electrónica de transmisión
(TEM):
Ameson: esporas de 1.2 x 2 μm y son producidas individualmente a partir de
esporontes
Pleistophora: esporas de 2.1 x 2.6 μm presentes de 16 a más de 40 en cada esporonte
Agmasoma penaei: LZWVYHZKL_VKL_TJVUWVYLZWVYVU[L
Agmasoma duorara:LZWVYHZKL_JVUWVYLZWVYVU[L
143
Para la detección de especies de microsporidios del género Agmasoma en tejidos

HMLJ[HKVZKLJHTHYVULZWLUHLPKVZOHZPKVKLZHYYVSSHKH\UHZVUKHNLUt[PJHTHYJHKH
JVU+PNV_PNLUPUHHZxJVTVWYPTLYZWHYHWY\LIHZKL7*9,Z[VZS[PTVZZLOHUVI[LUPKV
HWHY[PYKL\UHZLJ\LUJPHJVUZLY]HKHKL\UHWLX\L|HZ\I\UPKHKYPIVZVTHSKL95(
perteneciente a otra microsporidia, de la cual se posee un mayor conocimiento.

Los signos evidentes de microsporidiosis, incluyen como principal característica
VWHJPKHK KPM\ZH ` SLJOVZH KL SH T\ZJ\SH[\YH HIKVTPUHS JVU HWHYPLUJPH KL JHTHY}U
JVJPKV3VZJHTHYVULZZL]LYHTLU[LHMLJ[HKVZZVULUHSN\UVZJHZVZTmZWLX\L|VZX\L
Z\ZJVTWH|LYVZKLLZ[HUX\L`WYLZLU[HUHKLTmZ\UHJVSVYHJP}U[xWPJHHa\SVZH`VZJ\YH
También se puede presentar letargia y debilidad. En fase temprana de la enfermedad, se
observa opacidad multifocal de la musculatura.
De las cuatro especies mencionadas anteriormente, tres infestan y terminan
YLLTWSHaHUKV LS TZJ\SV LZ[YPHKV KL SVZ JHTHYVULZ HMLJ[HKVZ JH\ZHUKV SH [xWPJH
coloración opaca y blanquecina.
La especie Agmasoma penaei HMLJ[H N}UHKHZ JVYHa}U ]HZVZ OLTVSPUMm[PJVZ
IYHUX\PHZ OLWH[VWmUJYLHZ L PU[LZ[PUV TLKPV WYVK\JPLUKV VWHJPKHK ISHUX\LJPUH `
HNYHUKHTPLU[V KL SHZ N}UHKHZ ` JVU MYLJ\LUJPH aVUHZ KL PUÅHTHJP}U ISHUX\LJPUHZ
parecidas a tumores tanto en las branquias, como en tejido subcuticular y apéndices.
En los casos en los que los camarones están severamente afectados por la enfermedad,
la cutícula se torna de color azulada y oscura debido a la expansión de los melanóforos
cuticulares.
La importancia de esta enfermedad en sistemas comerciales de producción de
JHTHYVULZ YHKPJH LU X\L HS HMLJ[HYZL SH T\ZJ\SH[\YH HIKVTPUHS ZL PUOHIPSP[H SH
comercialización de los individuos con lesiones severas. De esta manera, se reducen
las posibilidades de obtener una utilidad económica en el cultivo, en proporción
KPYLJ[HJVUSHWYL]HSLUJPH`SHZL]LYPKHKKLSIYV[LLULSTVTLU[VKLSHJVZLJOH6[YV
aspecto importante en la producción relacionado con la microsporidiosis, es que los
reproductores infestados pueden llegar a ser estériles en los casos en los que las gónadas
OHUZPKVHMLJ[HKHZ
Mecanismos de control
5VZLJVUVJLU[YH[HTPLU[VZLZWLJxÄJVZWHYHLSJVU[YVSKLSHTPJYVZWVYPKPVZPZLU
sistemas de producción. Por esta razón, solamente se puede tratar de evitar el contacto
LU[YLSVZJHTHYVULZL_W\LZ[VZHYPLZNVKLPUMLZ[HJP}UOVZWLKLYVZPU[LYTLKPHYPVZSVZ
WLJLZYLX\LYPKVZJVTVOVZWLKLYVZKLÄUP[P]VZWHYHJLYYHYLSJPJSV`LSWHYmZP[VLUZx
7VYSVHU[LYPVYZLOHJLL]PKLU[LSHPTWVY[HUJPHKLYLHSPaHYWSHULZKLL_JS\ZP}UKL
predadores de camarones (peces), tanto de los estanques de cultivo, como de los canales
de suministro de agua (reservorios).
3VZ JHTHYVULZ HMLJ[HKVZ WVY LS WHYmZP[V KLILU ZLY KLZJHY[HKVZ ZP LZ WVZPISL
K\YHU[LLSTVTLU[VKLSHJVZLJOH+LPN\HSTHULYHKLILUL_[YLTHYZLJ\PKHKVZWHYH
evitar la diseminación de reproductores de P. vannamei infestados con alguna de las
LZWLJPLZKLTPJYVZWVYPKPVZLUYLNPVULZNLVNYmÄJHZLUKVUKLLSWHYmZP[VUVZLLUJ\LU[YL
VUVOH`HZPKVYLWVY[HKV
144
MICROSPORIDIOS
Figura 4.6 Camarón P. vannamei normal (abajo) y camarón

infestado con Ameson (arriba) el cual presenta la enfermedad
del camarón algodonoso. Nótese la apariencia blanquecina
KLS TZJ\SV LZ[YPHKV KLS JHTHY}U HMLJ[HKV ÅLJOHZ HZx
como su coloración oscura y su pigmentación azulosa
tenue.
-PN\YH *HTHY}U P. vannamei infestado con Ameson

(arriba) el cual presenta la enfermedad del camarón
HSNVKVUVZV5}[LZLSHHWHYPLUJPHISHUX\LJPUHKLSTZJ\SV
LZ[YPHKVLULSWYPTLYZLNTLU[VHIKVTPUHSÅLJOHNY\LZH`
LULSJLMHSV[}YH_ÅLJOHZKLSNHKHZHZxJVTVSHWPNTLU[HJP}U
azulosa.
-PN\YH:LJJPVULZKLHIKVTLUKL\UJHTHY}UP. vannamei
infestado con Ameson (arriba) y con la enfermedad del
camarón algodonoso. Nótese la apariencia blanquecina del
TZJ\SVLZ[YPHKVLUSVZKVZZLNTLU[VZKLSTPZTVJHTHY}U
3H HWHYPLUJPH HSNVKVUVZH V SLJOVZH KLS TZJ\SV LZ[YPHKV
en camarones afectados, sugiere de manera presuntiva una
infección por un microsporodio miotrópico.
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KL TZJ\SV LZ[YPHKV KL \U

camarón Penaeus duorarum infestado con Agmasoma. Cada
LZWVYVU[LJVUÄN\YHKVLUMVYTHKL]LZxJ\SHJVU[PLULVJOV
LZWVYHZÅLJOHZ(TWSPÄJHJP}U?-V[V!1HU3HUKZILYN
` @HZ\ 2PY`\ -SVYPKH -PZO HUK >PSKSPML *VUZLY]H[PVU
Commission, USA.
145
MICROSPORIDIOS
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KL TZJ\SV

estriado de un camarón Penaeus vannamei
infesado con Ameson. Se observa un esporonte
JVU[LUPLUKV T\JOHZ WLX\L|HZ LZWVYHZ :PU
[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH *VY[L ZHNP[HS LU IHQH HTWSPÄJHJP}U

KL TZJ\SV HIKVTPUHS KL \U JHTHY}U P.
vannamei infestado con Ameson 3HZ ÄIYHZ
KL TZJ\SV LZ[YPHKV KLS JLU[YV KLS JVY[L OHU
sido completamente reemplazadas por masas
IHZVMxSPJHZ KL LZWVYHZ KLS WHYmZP[V ÅLJOHZ
/ ,(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKL[LQPKVJHYKxHJV
de P. vannamei infestado con Ameson. La
PUMLZ[HJP}U KLS WHYmZP[V OH WYVK\JPKV \UH
YLZW\LZ[H PUÅHTH[VYPH JPYJ\UKHUKV LS mYLH
afectada, la cual está caracterizada por
HNYLNHJP}U KL OLTVJP[VZ ÅLJOHZ KLSNHKHZ HS
rededor de la masa de esporas de microsporidios
ÅLJOHHUJOH/ ,(TWSPÄJHJP}U?
146
4.3 Haplosporidios
/HWSVZWVYPKPVZPZOLWH[VWHUJYLm[PJHPUMLJJP}UWVYOHWSVZWVYPKPVZOHWSVZWVYPKPVZPZ
Agente
Se cree que las afecciones en camarones penaeidos son producidas por varios
WVZPISLZOHWSVZWVYPKPVZ(SN\UVZKLLZ[VZWHYmZP[VZYLWVY[HKVZLUJ\S[P]VZKLJHTHY}ULU
(ZPH`4t_PJVUVOHUZPKVSVZ\ÄJPLU[LTLU[LLZ[\KPHKVZ`[HTWVJVOHUZPKVKLTVZ[YHKHZ
LZWVYHZKLSWHYmZP[VJVTVWHYHWVKLYZLY\IPJHKVZ[H_VU}TPJHTLU[LKLU[YVKLSWO`S\T
/HWSVZWVYLH7HYHLSSVZLYLX\LYPYmULZ[\KPVZHWHY[PYKL;,4JVULSÄUKL\[PSPaHYSHZ
JHYHJ[LYxZ[PJHZKLZ\\S[YHLZ[Y\J[\YHLU\UHJVYYLJ[HJSHZPÄJHJP}U
:PULTIHYNVYLJPLU[LTLU[LOHZPKVWYVW\LZ[VPainhealth Medical References) que
SVZOHWSVZWVYPKPVZZLHUJSHZPÄJHKVZLULSVYKLUZWVYVaVHJVTVWYV[VaVHYPVZKLSWO`S\T
Ascetospora, clase Stellatosporea, con reproducción asexual mediante esquisogonias y
X\LWYVK\JLULZWVYHZWLYVUVÅHNLSVZW\KPLUKV[LULYZL\K}WVKVZ
+PZ[YPI\JP}UNLVNYmÄJH`YHUNVKLSHLUMLYTLKHK
3VZOHWSVZWVYPKPVZOHUZPKVVIZLY]HKVZLUJHTHYVULZP. vannamei silvestres y
KLJ\S[P]V[HU[VLU*\IHJVTVLU5PJHYHN\H;HTIPtUZLOHULUJVU[YHKVLUP. stylirostris
en México, en P. monodon en Indonesia y en Filipinas. Fue reportado un caso presuntivo
KLOHWSVZWVYPKPVZPZLUP. monodonLULSUVY[LKL(\Z[YHSPHWLYVZPUJVUÄYTHY
,SYLWVY[LKLOHWSVZWVYPKPVZPZLUP. stylirostris en México, corresponde a camarones
que se encontraban en fase terminal con microsporidiosis, causada esta por una especie
del género Ameson.
+LIPKV H X\L LU SVZ JHTHYVULZ HMLJ[HKVZ SVZ WHYmZP[VZ OHU ZPKV VIZLY]HKVZ LU
JtS\SHZKLSVZ[I\SVZKLS/7ZLWYLZ\TLX\LSH]xHKLPUMLJJP}ULZWVYPUNLZ[P}UH\UX\L
HUUVZL[PLULJSHYVJ\HSLZLSTLJHUPZTVKL[YHUZTPZP}UKLLZ[VZWYV[VaVHYPVZLUSVZ
camarones.
(UmSPZPZOPZ[VS}NPJVWHYHKLTVZ[YHYSHWYLZLUJPHPU[YHJLS\SHYKLSWYV[VaVHYPVLUSHZ
JtS\SHZLWP[LSPHSLZKLSVZ[I\SVZKLS/7,UPUMLZ[HJPVULZ[xWPJHZLSWYV[VaVHYPVZLHWYLJPH
HWPJHSTLU[LVSH[LYHSTLU[LHSUJSLVJVTVZPM\LYH\UWSHZTVKPVT\S[PU\JSLHKVX\L
puede fragmentarse en estadios mononucleados. Estas células mononucleadas pueden
ZLYLUJVU[YHKHZLULSS\TLUKLSVZ[I\SVZKLS/7WYLZ\TPISLTLU[LKLZW\tZKLOHILY
sido liberadas por células necróticas. Los plasmodios pueden ser observados en cortes
OPZ[VS}NPJVZ[L|PKVZJVUOLTH[V_PSPUH`LVZPUHVJVU>VSIHJO»Z.PLTZH
,USVZJHZVZKLPUMLZ[HJPVULZT\`ZL]LYHZSVZ[I\SVZKLS/7JVUHS[HWYLZLUJPH
KL OHWSVZWVYPKPVZ ZL VIZLY]HU YVKLHKVZ WVY THZHZ KL OLTVJP[VZ SVZ J\HSLZ LZ[mU
LUJHWZ\SHUKV`TLSHUPaHUKVHJ[P]HTLU[LSHZWVYJPVULZHMLJ[HKHZKLSVZ[I\SVZ
(SYLHSPaHYLZ[\KPVZTLKPHU[L;,4HWHY[PYKLJtS\SHZLWP[LSPHSLZKL[I\SVZHMLJ[HKVZ
KLS/7ZLVIZLY]HSHWYLZLUJPHKLOHWSVZWVYVZVTHZKLU[YVKLSWHYmZP[VJ\`V[HTH|V
HWYV_PTHKVLZKL UT_UT
Signos clínicos
5VOHUZPKVYLWVY[HKVZZPNUVZKLLUMLYTLKHKLUJHTHYVULZWLUHLPKVZHMLJ[HKVZ
WVYLSWHYmZP[VX\LW\LKHUZLYHZVJPHKVZJVUWYLZLUJPHKLOHWSVZWVYPKPVZLUZ\Z[LQPKVZ
Sin embargo, los camarones afectados podrían presentar bajo crecimiento.
147
Estrategias de control
3VZJHTHYVULZPUMLZ[HKVZJVUOHWSVZWVYPKPVZKLILUZLYYLTV]PKVZKLSZPZ[LTHKL
producción y eliminados adecuadamente para destruir el parásito. Las instalaciones de
cultivo deben ser desinfectadas de manera cuidadosa y los camarones (en cualquier
LZ[HKPV PUMLZ[HKVZ V ZVZWLJOVZVZ UV KLILU ZLY TV]PSPaHKVZ UP LU[YL ÄUJHZ UP LU[YL
YLNPVULZNLVNYmÄJHZ
4.4 Epicomensales
Los camarones penaeidos cultivados en sistemas de producción semiintensivos,
intensivos o sobreintensivos, con altas densidades de siembra en los estanques o aguas
de baja calidad, frecuentemente desarrollan formas de enfermedad causadas por
TPJYVVYNHUPZTVZX\LZLHKOPLYLUHSHZIYHUX\PHZVHSHZ\WLYÄJPLKLSHUPTHS3HTH`VYxH
de éstos, viven en estado libre en el agua y no son patógenos verdaderos. Debido a
X\L \[PSPaHU HS JHTHY}U JVTV \U Z\IZ[YH[V WHYH HKOLYPYZL ZVU SSHTHKVZ VYNHUPZTVZ
epicomensales o epibiontes. En la mayor parte de los casos, estos organismos no causan
KH|VZKPYLJ[VZHSJHTHY}UH\UX\LZxWYVK\JLUWYVISLTHZPUKPYLJ[HTLU[LHSHKOLYPYZL
HSHZIYHUX\PHZJVTWP[PLUKVWVYLSV_xNLUVKPZ\LS[VVHSHZZ\WLYÄJPLZJ\[PJ\SHYLZKL
apéndices y otras partes del cuerpo.
,UMLYTLKHKKLSHZIYHUX\PHZLUMLYTLKHKKLIYHUX\PHZÄSHTLU[VZHZLUMLYTLKHK
bacteriana de las branquias, branquias sucias, branquias negras, branquias cafés o,
IYHUX\PHZJVUHKOLYLUJPHZKLWYV[VaVHYPVZ
Agentes causantes de enfermedad

3HLUMLYTLKHKWVYHKOLYLUJPHKLLWPJVTLUZHSLZLUJHTHYVULZZLWYLZLU[HJ\HUKV
se afectan las funciones respiratorias, alimenticias o locomotoras de los animales, a
JH\ZHKLJVSVUPaHJP}UL_JLZP]HKLSHJ\[xJ\SHWYPUJPWHSTLU[LWVYIHJ[LYPHZÄSHTLU[VZHZ
IHJ[LYPHZ JVU MVYTH KL IHZ[}U IHJPSVZ WYV[VaVHYPVZ KPH[VTLHZ ` HSNHZ ÄSHTLU[VZHZ
]LYKLHa\SLZ3VZZPN\PLU[LZZVUSVZHNLU[LZTmZJVT\ULZLUJHTHYVULZ!
Organismos tipo Leucothrix (Leucothrix SPRLVYNHUPZTZ336! Leucothrix mucor,
Leucothrix spp. y Thiothrix sp.
)HJ[LYPHZ X\L MVYTHU T\` WLX\L|VZ ÄSHTLU[VZ ¸ZTHSS SP[[SL ÄSHTLU[Z¹:3-!
Vibrio sp., Flavobacterium sp., Cytophaga sp. y Flexibacter sp. Existen posiblemente
V[YHZIHJ[LYPHZHUUVPKLU[PÄJHKHZ
Protozoarios
Perítricos ciliados con colonias: Zoothamnium sp., Epistylis sp. y Vorticella sp.
Apostoma ciliados: Ascophrys spp. y otros
Loricados ciliados: Lagenophrys spp. y Cothurnia spp.
Suctorianos: Acineta spp., Ephelota spp. y otros
-SHNLSHKVZ!ÅHNLSHKVZ[PWVBodo y Chrysidella sp.
Algas
+PH[VTLHZ¸WLUUHSLZ¹! Nitzschia spp., Amphiprora spp. y Navicula spp.
(SNHZ]LYKLZ! EnteromorphaZWW`V[YHZHSNHZ]LYKLZÄSHTLU[VZHZ
(SNHZÄSHTLU[VZHZ]LYKLHa\SLZ! Spirulina subsala, Lyngbya spp. y Schizothrix spp.
(NLU[LZHIP}[PJVZ!ZHSLZKLOPLYYV
148
Diagnóstico
Las enfermedades por organismos epicomensales, son diagnosticadas mediante
la observación de preparaciones en fresco de los microorganismos, tanto en larvas y
postlarvas, como en secciones de branquias y apéndices orales de camarones juveniles
o adultos afectados.
En sistemas intensivos y sobreintensivos, debe ser una práctica frecuente el monitoreo
de camarones y su examen bajo un microscopio, para determinar la prevalencia y
ZL]LYPKHKKLSHLUMLYTLKHK+LLZ[HTHULYHZLWYVWVYJPVUHPUMVYTHJP}UZPNUPÄJH[P]H
ZVIYLSHZJVUKPJPVULZZHUP[HYPHZKLSHZIYHUX\PHZJVUIHZLLUSHHKOLYLUJPHKLLWPIPVU[LZ
en los camarones. Las decisiones para implementar sistemas de control en los casos de
enfermedades por organismos epicomensales, están basadas en los datos obtenidos a
partir de estos monitoreos.
Los camarones para los análisis de rutina, UVKLILUZLYZLSLJJPVUHKVZHSLH[VYPHTLU[L
de una población bajo estudio. El mejor procedimiento es seleccionar individuos que
LZ[tU KLJHxKVZ JVU SHZ IYHUX\PHZ THUJOHKHZ V X\L [LUNHU SH T\ZJ\SH[\YH VWHJH
ZVZWLJOVZVZKLOPWV_PH`HX\LLSWYVW}ZP[VWYPUJPWHSKLLZ[LL_HTLULZKLJPKPYZPZL
ULJLZP[HHSNU[PWVKL[YH[HTPLU[V`X\tJSHZLKLX\xTPJVVTHULQVKLILZLY\[PSPaHKV
para salvar la población.
Normalmente, de cinco a diez camarones de un tanque o estanque, deben ser
seleccionados y sometidos a un examen microscópico.
<[PSPaHUKV JVY[LZ OPZ[VS}NPJVZ LU WHYHÄUH [L|PKVZ JVU / , W\LKLU KL[LJ[HYZL `
\Z\HSTLU[LPKLU[PÄJHYZLVYNHUPZTVZLWPJVTLUZHSLZKLSJ\LYWVIYHUX\PHZ`HWtUKPJLZ
Además, el grado de severidad de la infestación por organismos epicomensales, es con
frecuencia fácilmente determinado, especialmente por cortes que proporcionan un
panorama de las branquias.
9HUNVNLVNYmÄJV`LZWLJPLZHMLJ[HKHZ
La presencia de epicomensales puede ser observada en cualquier región del mundo
donde se cultiven camarones penaeidos.
;VKHZSHZLZWLJPLZKLJHTHYVULZZVUWV[LUJPHSTLU[LZ\ZJLW[PISLZHHKOLYLUJPHZKL
LWPJVTLUZHSLZ[HU[VLUZPZ[LTHZL_[LUZP]VZJVTVZLTPPU[LUZP]VZLPU[LUZP]VZ;HTIPtU
pueden ser observados en otras especies de decápodos bentónicos que sirven como
OVZWLKLYVZV]LJ[VYLZ+LPN\HSTHULYHLUMLYTLKHKWVYLWPIPVU[LZW\LKLWYLZLU[HYZL
en todos los estadios del ciclo de vida de los camarones.
(WLZHYKLZ\HTWSPHKPZ[YPI\JP}UNLVNYmÄJHW\LKLUWYLZLU[HYZLJLWHZVLZWLJPLZ
UPJHZ`X\LZVUWYVWPHZKLKL[LYTPUHKHZYLNPVULZiZ[HZW\LKLUZPNUPÄJHY\UWLSPNYV
para instalaciones de cultivo de otros lugares donde no existan, en caso de que se realice
una importación con camarones infestados. En este sentido, deben tomarse medidas
preventivas para excluir parásitos epicomensales potencialmente exóticos.
Efecto en los camarones afectados

,Z[VZ WHYmZP[VZ ZL WYLZLU[HU NLULYHSTLU[L ZVIYL SH Z\WLYÄJPL KL SH J\[xJ\SH LU
las branquias principalmente. No se consideran como patógenos verdaderos para los
JHTHYVULZ`HX\LZ}SVSVZ\[PSPaHUJVTVZ\Z[YH[VWHYHHKOLYPYZLHSL_VLZX\LSL[VKVUKL
viven y se alimentan de los nutrientes del medio acuático. Por esta razón, se les conoce
JVTVLWPJVTLUZHSLZVLWPIPVU[LZ:PULTIHYNVW\LKLUJH\ZHYKH|VHSVZJHTHYVULZ
cuando colonizando en grandes cantidades, se ubican en las lamelas branquiales e
PU[LYÄLYLUJVULSPU[LYJHTIPVNHZLVZVSPILYHJP}UKL*62 y captación de O2).
149
Los organismos epicomensales pueden llegar a matar al camarón, por el impedimento

X\LJH\ZHUHSÅ\QVUVYTHSKLHN\HH[YH]tZKLSHZIYHUX\PHZKPÄJ\S[HUKVLUJHZVZL_[YLTVZ
LSPU[LYJHTIPVNHZLVZVLUSHZSHTLSHZIYHUX\PHSLZOPWV_PH0N\HSTLU[LW\LKLUPU[LYMLYPY
JVUSVZWYVJLZVZKLT\KHHWYLOLUZP}UKLSHSPTLU[V`TV]PTPLU[VZImZPJVZKLSVZHUPTHSLZ
severamente afectados, cuando colonizan de manera grave los apéndices motrices, natatorios
o alimentarios. De igual forma, algunos organismos epicomensales producen exotoxinas,
X\LWVKYxHUJH\ZHYHSNUNYHKVKLSLZP}ULUSVZ[LQPKVZJVSVUPaHKVZ`HK`HJLU[LZ
Con frecuencia, las infestaciones involucran poblaciones mixtas de organismos,
existiendo una especie dominante. A este respecto, las bacterias cortas y largas con forma
de bastón, son las de mayor prevalencia en los laboratorios de larvicultura de camarón. A
Z\]LaSHZIHJ[LYPHZÄSHTLU[VZHZ`SVZWYV[VaVHYPVZWLYx[YPJVZZVUNLULYHSTLU[LSHZJH\ZHZ
principales de enfermedad en juveniles y adultos de P. vannamei.
En síntesis, la enfermedad causada por epicomensales en camarones puede producir
bajo crecimiento, disminución en el consumo de alimento, comportamiento de nado
anormal, intolerancia al ejercicio (y al estrés), intolerancia a condiciones de bajo oxígeno
disuelto y cambios en la coloración de las branquias.
Signos clínicos
Las lamelas de las branquias son el lugar más frecuente para la infestación en juveniles
y camarones mayores. Por esta razón, el examen visual de camarones afectados mostrará
cambio de coloración de las branquias, constituyéndose así en un examen valioso para la
detección de enfermedad por epicomensales.
La presencia de coloración amarilla, café o negra en las branquias, está relacionada
con colonización de epicomensales y puede ser debido a material detrítico o lodo
H[YHWHKVWVYSVZTPJYVVYNHUPZTVZX\LLZ[mUHKOLYPKVZHSHZSHTLSHZ
Si se observa coloración verde o verdosa de las branquias, puede deberse a
colonización de las lamelas branquiales por una o varias especies de algas.
(SN\UVZ JHTHYVULZ W\LKLU [VTHY \UH HWHYPLUJPH KL ¸WLS\JOL¹ HSNVKVUVZVZ V
JVTVZPLZ[\]PLYHUJVSVUPaHKVZWVYOVUNVZSVJ\HSJVYYLZWVUKLLUYLHSPKHKH\UHM\LY[L
JVSVUPaHJP}UWVYVYNHUPZTVZLWPJVTLUZHSLZZVIYLSHZ\WLYÄJPLKLSHUPTHS
En infestaciones de larvas o postlarvas, con frecuencia se ven involucrados los
apéndices natatorios, ojos y algunas partes de la boca. Como se mencionó anteriormente,
SVZHUPTHSLZHMLJ[HKVZW\LKLUTVZ[YHYKPÄJ\S[HKLZWHYHTV]LYZL`HSPTLU[HYZL
<UHPU]HZP}UKLZKLTVKLYHKHOHZ[HHS[HW\LKLPUOPIPYSHYLZWPYHJP}UKLSHUPTHS3VZ
camarones pueden aparecer exteriormente normales pero mueren rápidamente durante
o inmediatamente después del ejercicio, manipulación (muestreos o transferencias) o
exposiciones a condiciones de oxígeno bajo en el agua.
Cuando los camarones se encuentran severamente afectados por epicomensales,
W\LKLUTVYPYK\YHU[LSHT\KHLUJVU[YmUKVZLS\LNVLULSMVUKVJVUHWHYPLUJPH¸SPTWPH¹KLS
exoesqueleto, pero con la cutícula suave. Teniendo las branquias fuertemente colonizadas
por epibiontes, las condiciones de oxígeno disuelto bajo durante las madrugadas, pueden
WV[LUJPHSPaHYLSHTIPLU[LOPW}_PJVKLSJHTHY}UX\LKLWVYZxZLLZ[mWYLZLU[HUKVWVYSH
enfermedad en las branquias.
;HU[VSVZOHSSHaNVZTLKPHU[LTVU[HQLZLUMYLZJVJVTVH[YH]tZKLHUmSPZPZOPZ[VS}NPJVZ
deben ser registrados para establecer la prevalencia y severidad del problema. Los grados
de severidad pueden ser estimados en la escala de 0 a 4 de acuerdo con la siguiente tabla
WYVW\LZ[HWVY3PNO[ULY !
150
;HISH.YHKVZKLZL]LYPKHKWVYWYLZLUJPHKLWH[}NLUVZVSLZPVULZLUJHTHYVULZ
(KHW[HKVKL3PNO[ULY
:L]LYPKHK /HSSHaNVZJSxUPJVZ
(\ZLUJPHKLZPNUVZKLPUMLZ[HJP}UWVYWH[}NLUVZWHYmZP[VZVLWPJVTLU
0 sales
(\ZLUJPHKLSLZPVULZJHYHJ[LYxZ[PJHZKL\UZxUKYVTL
7YLZLUJPHKLWHYmZP[VZVLWPJVTLUZHSLZHWLUHZWVYLUJPTHKLSSxTP[LKL
Trazas
detección
7YLZLUJPHKLWH[}NLUVZWHYmZP[VZVLWPJVTLUZHSLZLUJHU[PKHKPUZPN
UPÄJHU[L
7YLZLUJPHKLSLZPVULZJHYHJ[LYxZ[PJHZKL\UZxUKYVTLWLYVLUMLYTLKHK
1
UVZPNUPÄJHU[L
7YVU}Z[PJVKLLMLJ[VPUZPNUPÄJHU[LL_JLW[VLUPUMLJJPVULZWVYWH[}NL
nos muy virulentos
7YLZLUJPHIHQHHTVKLYHKHKLWH[}NLUVZWHYmZP[VZVLWPJVTLUZHSLZ
3LZPVULZJHYHJ[LYxZ[PJHZKL\UZxUKYVTLLUNYHKVSL]LHTVKLYHKV
2
7YVU}Z[PJVKLWVZPISLZWtYKPKHZKLWYVK\JJP}U`WVZPISLH\TLU[VKL
mortalidad si no se aplica tratamiento o cambios de manejo
*HU[PKHKTVKLYHKHKLWH[}NLUVZWHYmZP[VZVLWPJVTLUZHSLZ
3LZPVULZJHYHJ[LYxZ[PJHZKL\UZxUKYVTLLUNYHKVTVKLYHKVHZL]LYV
3
7YVU}Z[PJVWV[LUJPHSTLU[LSL[HSZPUVZLHWSPJHU[YH[HTPLU[VZZPSVZOH`
o cambios de manejo
.YHUJHU[PKHKKLWH[}NLUVZWHYmZP[VZVLWPJVTLUZHSLZ
4
3LZPVULZZL]LYHZJHYHJ[LYxZ[PJHZKL\UZxUKYVTL
Vías de transmisión
;VKVZ SVZ HNLU[LZ LWPJVTLUZHSLZ ZVU OHIP[HU[LZ UVYTHSLZ KLS TLKPV HJ\m[PJV
THYPUV ,Z[VZ VYNHUPZTVZ ZVU WHY[L KL SH ÅVYH UH[\YHS HZVJPHKH JVU SH J\[xJ\SH KL
SVZ JY\Z[mJLVZ THYPUVZ ` KL LZ[H THULYH PUMLZ[HJPVULZ TLUVYLZ JH\ZHU WLX\L|H V
ninguna pérdida de las funciones o signos de enfermedad. Cuando las condiciones
TLKPVHTIPLU[HSLZZVUJVU]LUPLU[LZW\LKLKLZLUJHKLUHYZLSHHKOLYLUJPHKLVYNHUPZTVZ
LWPJVTLUZHSLZSVZJ\HSLZNLULYHYmULUMLYTLKHKWVYHKOLYLUJPHZLUSVZJHTHYVULZKL
J\S[P]V,SOHJPUHTPLU[VLUSVZLZ[HUX\LZ`LSHWVY[LKLU\[YPLU[LZTLKPHU[LLSHSPTLU[V
Z\TPUPZ[YHKV JVU[YPI\`LU H SHZ JVUKPJPVULZ L\[Y}ÄJHZ LU SVZ J\S[P]VZ KL JHTHY}U SV
que favorece la proliferación de epicomensales.
La prevención de enfermedades causadas por organismos epicomensales, requiere
de condiciones ambientales óptimas de cultivo, que permitan el sano crecimiento
KL SVZ JHTHYVULZ :PU LTIHYNV UV L_PZ[LU SPULHTPLU[VZ LZWLJxÄJVZ KPZWVUPISLZ
concernientes a los niveles de requerimientos nutricionales mínimos, manipulación
precisa del medioambiente y factores de manejo que alteren los niveles de infestación.
Por esta razón, los cambios en las condiciones que predisponen la presencia de estas
LUMLYTLKHKLZKLILUZLYTHULQHKVZOHZ[HLSTVTLU[VKLTHULYHPU[\P[P]HH\UX\LJVU
fundamentos técnicos.
Los factores básicos que pueden ser alterados, incluyen el aumento en el recambio
de agua, mejoramiento de la circulación del cuerpo de agua, disminución en la densidad
de cultivo o reducción de la biomasa (raleo), uso de alimentos balanceados y fertilizar el
terreno adecuadamente, teniendo en cuenta la proporción P:N para evitar la acumulación
de materia orgánica y proliferación de protozoarios.
151
Si el control no puede mantenerse a través del manejo del agua y del alimento o del
ZHULHTPLU[VKLS[HUX\LVLZ[HUX\LZLOHYLWVY[HKVLMLJ[P]PKHKLULS\ZVKL5LVTPJPUH
YLHSPaHUKVIH|VZK\YHU[LSHUVJOLHWWTLU[HUX\LZKLSHY]PJ\S[\YH7HYHLSJHZV
KLQ\]LUPSLZ`HK\S[VZZLOH\[PSPaHKVZ\SMH[VKLJVIYL*\[YPULWS\Z!WWT*\
IH|VZKLOVYHZ`-VYTHSPUHWWTIH|VZKLOVYH
EPICOMENSALES
Figura 4.13 Montaje en fresco de branquias de P. vannamei

con una colonia de Epistylis ZW ÅLJOH ,Z JHYHJ[LYxZ[PJH
en este protozoario la ausencia de mionema. Sin tinción.
(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKL\UHSHTLSHIYHUX\PHSKLP.
vannamei con una colonia de Epistylis sp. sobre la cutícula
del extremo de la lamela. Debido a que esta colonia carece
KL TPVULTH ZL Z\NPLYL X\L ZL [YH[H KL ,WPZ[`SPZ ZW / ,
(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KLS L_[YLTV KL \UH SHTLSH
branquial de P. vannamei con una colonia de Zoothamnium
ZW (KOLYPKH H Z\ L_[YLTV ,Z UV[HISL SH L_PZ[LUJPH KL
TPVULTH LU LS [HSSV KL LZ[L WHYmZP[V ÅLJOH :PU [PUJP}U
(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL IYHUX\PH KL P. vannamei

infestado con Zoothamnium sp. Es característica la presencia
KLTPVULTHLULSJLU[YVKLS[HSSVKLSWYV[VaVHYPVÅLJOHLS
J\HSLZ\UHÄIYHYL[YmJ[PSX\LKHTV]PTPLU[VHSVYNHUPZTV
/ , (TWSPÄJHJP}U ? *VY[LZxH KLS +Y 2LU /HZZVU `
Dra. Barbara Lewis.
152
EPICOMENSALES
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KLS Z\J[VYPHUV Acineta sp.

sobre lamelas branquiales de P. vannamei. El organismo tiene
HWHYPLUJPHZPTPSHYHJVWHKL]PUV`WVZLL\UUJSLVJLU[YHS
LZMtYPJV`VISVUNV:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-V[V!*\tSSHY(UQLSL[HS H
-PN\YH*VY[LOPZ[VS}NPJVKLIYHUX\PHZKL7]HUUHTLP
con presencia de Acineta sp. Es característica la forma
KL JVWH KL ]PUV ` [LU[mJ\SVZ HWPJHSLZ ÅLJOH / ,
(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH 4VU[HQLLUMYLZJVKLIYHUX\PHZKLP. vannamei,

JVU JVSVUPaHJP}U TVKLYHKH WVY IHJ[LYPHZ ÄSHTLU[VZHZ
Leucothrix mucor ÅLJOHZ:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-V[V!*\tSSHY(UQLSL[HS H
Figura 4.20 Montaje en fresco de branquias de P. vannamei

con colonización moderada por microalgas (diatomeas)
NitzschiaZWÅLJOH:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
153
-PN\YH(KOLYLUJPHZZL]LYHZKLSHSNH]LYKLÄSHTLU[VZH
Enteromorpha sp. sobre la cutícula del cefalotórax de un
reproductor P. vannamei, mantenido en un tanque externo de
concreto. A pesar de la colonización externa, las branquias
UV WYLZLU[HIHU HKOLYLUJPHZ ` [HTWVJV ZL VIZLY]HYVU
SLZPVULZOPZ[VS}NPJHZLU}YNHUVZV[LQPKVZKLLZ[LHUPTHS
4.5 Metazoarios
Agente causal
Larvas de parásitos metazoarios como nemátodos o tremátodos, las cuales de
manera ocasional infestan tejidos de camarones penaeidos.
Especies afectadas y estadios susceptibles
3VZTL[HaVHYPVZW\LKLUZLYLUJVU[YHKVZLU[LQPKVZKLJHTHYVULZZ\IHK\S[VZOHZ[H
reproductores, potencialmente en la mayoría de las especies de penaeidos.
Ciclo de vida
En el medio natural, los camarones P. vannamei ZPY]LU JVTV OVZWLKLYVZ
PU[LYTLKPHYPVZWHYHT\JOVZWHYmZP[VZTL[HaVHYPVZPUJS\`LUKVULTm[VKVZ`[YLTm[VKVZ
En el tejido del camarón, se desarrolla un estadio intermediario de la larva como parte del
JPJSVKL]PKHKLSVYNHUPZTVYLX\PYPLUKVKLV[YVOVZWLKLYVWHYHJVTWSL[HYZ\JPJSV,Z[L
OVZWLKLYVÄUHSNLULYHSTLU[LUVLZ[mWYLZLU[LLUSVZLZ[HUX\LZKLJ\S[P]VKLJHTHY}U
y, por lo tanto, no es frecuente observar larvas de metazoarios en camarones de cultivo,
siendo más fácil encontrarlos en tejidos de reproductores silvestres.
Signos clínicos
(\UX\L UV ZL OHU YLWVY[HKV ZPNUVZ JSxUPJVZ VJHZPVUHKVZ WVY LZ[VZ WHYmZP[VZ LZ
WVZPISLOHSSHYT\JOVZKLLSSVZLU\UZVSVJHTHY}U`[HS]LaHMLJ[HUSH[HZHKLZ\WLY]P]LUJPH
en poblaciones de camarones de cultivo. De igual manera, podrían disminuir la tasa
reproductiva en reproductores que están severamente afectados por estos parásitos.
Diagnóstico
,STt[VKVTmZJVTU`YmWPKVWHYHKPHNUVZ[PJHYSHWYLZLUJPHKLTL[HaVHYPVZLU
JHTHYVULZLZTLKPHU[LTVU[HQLZLUMYLZJVKL[LQPKVZZVZWLJOVZVZVIZLY]HUKVS\LNVKL
SPILYHYSVZKLZ\JmWZ\SHSVZVYNHUPZTVZT\`HJ[P]VZLUOLWH[VWmUJYLHZ`LUJVU[LUPKV
intestinal.
En los parásitos se puede observar un tubo digestivo notorio, mediante movimientos
con el ajuste micrométrico del microscopio y se nota un extremo anterior (curvo y romo)
y uno posterior (agudo).
4LKPHU[L OPZ[VWH[VSVNxH ZL W\LKLU VIZLY]HY JVY[LZ SVUNP[\KPUHSLZ ZHNP[HSLZ `V
transversales del parásito, enquistados generalmente en tejido perigástrico, aunque
[HTIPtUZLVIZLY]HUSVZVYNHUPZTVZVWHY[LKLLSSVZLU/7`JVU[LUPKVPU[LZ[PUHS
154
Las medidas sanitarias más indicadas para el manejo de instalaciones en las que
exista un riesgo importante de padecer infestaciones por metazoarios, deben estar
centradas en evitar la introducción de reproductores silvestres, si éstos se encuentran
altamente infestados con larvas de parásitos.
En casos de infestaciones severas en estanques de producción en los cuales los
metazoarios estén causando problemas, además de excluir reproductores silvestres,
KLIL KL[LYTPUHYZL J\mSLZ ZVU SVZ OVZWLKLYVZ KLÄUP[P]VZ ` LSPTPUHYSVZ KLS ZPZ[LTH KL
producción para cortar el ciclo del parásito.
METAZOARIOS
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KL OLWH[VWmUJYLHZ KL P.

vannamei, quedando expuesto por ruptura completa de los
[I\SVZ\UN\ZHUVYLKVUKVULTm[VKV,U\UL_[YLTVZL
W\LKLVIZLY]HYSHN}UHKHKLSWHYmZP[VÅLJOHNY\LZH`LULS
centro a lo largo del organismo se encuentra el tubo digestivo
ÅLJOHKLSNHKH:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U?
-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV KL OLJLZ KL P. vannamei,

con presencia de un parásito tubular con extremos romos y
ZLNTLU[VZLUZ\PU[LYPVYÅLJOH:PU[PUJP}U(TWSPÄJHJP}U
100X.
-PN\YH *VY[L OPZ[VS}NPJV KL [LQPKV WLYPNmZ[YPJV KL P.

vannamei JVU \U X\PZ[L KL \U ULTm[VKV ÅLJOHZ LU
la región próxima al estómago. No se observa respuesta
PUÅHTH[VYPH HSYLKLKVY KLS [LQPKV KLS WHYmZP[V / ,
(TWSPÄJHJP}U?-V[V*\tSSHY(UQLSL[HS H
155
)HYYLYH4-(U[LJLKLU[LZZHUP[HYPVZKL:HTHZ[HJ\ZZWPUPMYVUZLU*OPSL`V[YVZWHYHZ[mJPKVZ
LU LS T\UKV 4VUVNYHMxHZ ,SLJ[Y}UPJHZ KL 7H[VSVNxH =L[LYPUHYPH ! -HJ\S[HK KL
*PLUJPHZ =L[LYPUHYPHZ ` 7LJ\HYPHZ <UP]LYZPKHK KL *OPSL 0::5 O[[W!^^^
WH[VSVNPH]L[LYPUHYPHJS4VUVNYHÄHZ4,7(=,;O[TS)HYYLYH
)H[PJHKVZ4*3 +PZLHZLZVM7YHÛZPU[OL7OPSPWWPULZ:,(-+,*(ZPHU(X\HJ\S[\YL!
)H[PJHKVZ4*3,9*Y\a3HJPLYKH4*+LSH*Y\a9*+\YLTKLa-LYUHUKLa98.\HJ\[HU
*9 3H]PSSH7P[VNV ` .+ 3PV7V +PZLHZLZ VM 7LUHLPK :OYPTW PU [OL 7OPSPWWPULZ
(X\HJ\S[\YL ,_[LUZPVU 4HU\HS 5V (X\HJ\S[\YL +LWHY[TLU[ :V\[OLHZ[(ZPHU -PZOLYPLZ
+L]LSVWTLU[*LU[LY:,(-+,*;PNIH\HU0SVPSV7OPSPWWPULZW
)YVJR1(`234HPU (N\PKL[V[OLJVTTVUWYVISLTZHUKKPZLHZLZVMJ\S[\YLKPenaeus
vannamei.;OL6JLHUPJ0UZ[P[\[L/VUVS\S\/0WW
*SPMMVYK/*HUK/3*VVR+PZLHZL4HUHNLTLU[PU:OYPTW*\S[\YL7VUKZ7HY[ZHUK
3). Aquaculture Magazine.
*HUUPUN ,< HUK 1 3VT ,KP[VYZ ;OL TPJYVZWVYPKPH VM ]LY[LIYH[LZ (JHKLTPJ 7YLZZ
Orlando, FL.
*V\JO1( +PZLHZLZWHYHZP[LZHUK[V_PJYLZWVUZLZVMJVTTLYJPHSWLUHLPKZOYPTWVM[OL.\SM
VM4t_PJVHUK:V\[O([SHU[PJ*VHZ[ZVM5VY[O(TLYPJH-PZOLY`)\SSL[PU!
*V\JO1( +PZLHZLZJH\ZLKI`WYV[VaVHWW 0U!(17YV]LUaHUV1YLK;OL)PVSVN`
of Crustacea, Vol. 6. Academic Press, N.Y.
*\tSSHY(UQLS 1 0KLU[PÄJHJP}U KL SHZ WYPUJPWHSLZ LUMLYTLKHKLZ ` KL[LYTPUHJP}U KL Z\
WYL]HSLUJPH LU JHTHYVULZ WLUHLPKVZ J\S[P]HKVZ LU *VSVTIPH;LZPZ KL 4HLZ[YxH 7VU[PÄJPH
<UP]LYZPKHK1H]LYPHUH:HU[HMtKL)VNV[m+*
*\tSSHY(UQLS 1 3- (YHUN\YLU 1( )YVJR 9- )HKVY L 0 )LYUPLY H 4HU\HS WHYH LS
diagnóstico de las principales enfermedades en camarones penaeidos cultivados en Colombia:
técnicas de campo y de laboratorio para el procesamiento de muestras y el diagnóstico de
enfermedades. CENIACUA, Colombia.
*\tSSHY(UQLS11()YVJR3-(YHUN\YLU9-)HKVY-5L^THYR`1(:\mYLa I(Z\Y]L`
VM [OL WH[OVNLUZ HUK KPZLHZLZ PU WLUHLPK ZOYPTW MHYTLK PU *VSVTIPH )VVR VM HIZ[YHJ[Z
*VUNYLZVKLSH>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`¸(X\HJ\S[\YLº ¹3HZ=LNHZ<:(W
*\tSSHY(UQLS1=7HJOLJV1+PLa,+L3L}UA=LNH`/:HSHaHY2000. Principales Enfermedades
de Camarones Penaeidos Cultivados en Panamá. Memorias del 4° Congreso latinoamericano
KLHJ\PJ\S[\YH`L_OPIPJP}U7HUHTm
*\tSSHY(UQLS12002. Técnicas para el Diagnóstico de Enfermedades en Camarones. Memorias del
*VUNYLZV7HUHTL|VKL4LKPJPUH=L[LYPUHYPH3VZ:HU[VZ7HUHTm
+`RV]H03VT1HUK-HQLY, (ULÔHWSVZWVYLHUPUMLJ[PUN[OLOLWH[VWHUJYLHZPU[OL
WLUHLPKZOYPTWPenaeus vannamei.1-PZO+PZ!
-LPNLUIH\T+3 7HYHZP[LZVM[OLJVTTLYJPHSZOYPTWPenaeus vannamei Boone and Penaeus
brasiliensis 3H[YLPSSL)\SSL[PU4HYPUL:JPLUJL!
1VOUZVU:2 /HUKIVVRVMZOYPTWKPZLHZLZ:LH.YHU[7\IS5V;(4<:.;L_HZ
( 4<UP]LYZP[`*VSSLNL:[H[PVU;?W
1VOUZVU:2 /HUKIVVRVM:OYPTW+PZLHZLZ":LH.YHU[7\IS5V;(4<:. ;L_HZ
( 4<UP]LYZP[`;?W
2Y\ZL+5 7HYHZP[LZPM[OLJVTTLYJPHSZOYPTWZ7LUHL\ZHa[LJ\Z0]LZ7K\VYHY\T)\YRLUYVHK
and P. setiferus (Linnaeus).;\SHUL:[\KAVVS!
156
3PNO[ULY+=)LSS;(9LKTHU944VOUL`335H[P]PKHK149\R`HUP(HUK7VLYUVTV
( (YL]PL^VMZVTLTHQVYKPZLHZLZVMLJVUVTPJZPNUPÄJHUJLPUWLUHLPKWYHÛZZOYPTW
VM[OL(TLYPJHZHUK0UKV7HJPÄJ0U!4:OHYPMM9:\IHZPUNOLHUK19(Y[O\YLKZ7YVJLLKPUN
Z[:`TWVZP\TVU+PZLHZLZPU(ZPHU(X\HJ\S[\YL-PZO/LHS[O:LJ[PVU(ZPHU-PZOLYPLZ:VJPL[`
4HUPSSH7OPSPWWPULZW
3PNO[ULY+= (OHUKIVVRVMWH[OVSVN`HUKKPHNUVZ[PJWYVJLK\YLZMVYKPZLHZLZVMJ\S[\YLK
WLUHLPKZOYPTW>VYSK(X\HJ\S[\YL:VJPL[`)H[VU9V\NL3V\PZPHUH<:(
3PNO[ULY+= +PZLHZLZVMWLUHLPKZOYPTW0U!4J=L`17LK*9*/HUKIVVRVM4HYPJ\S[\YL!
*Y\Z[HJLHU(X\HJ\S[\YLUKLKP[PVU*9*7YLZZ)VJH9H[VU-3WW
3PV7V .+ *9 3H]PSSH HUK ,9 *Y\a3HJPLYKH /LHS[O 4HUHNLTLU[ PU (X\HJ\S[\YL
:,(-+,*(X\HJ\S[\YL+LWHY[TLU[:V\[OLHZ[(ZPHU-PZOLYPLZ+L]LSVWTLU[*LU[LY;PNIH\HU
0SVPSV7OPSPWWPULZWW
7LYRPUZ-6 ;OLHWPJVTWSL_HTPJYVZWVYPKPHOHWSVZWVYPKPHWHYHT`_LHT`_VZWVYPKPHHUK
HJ[PUVZWVYPKPH7HNLZPU->/HYYPZVUHUK1**VYSPZZLKZ4PJYVZJVWPJHUH[VT`VM
PU]LY[LIYH[LZ7YV[VaVH=VS>PSL`3PZZ5L^@VYR5@
7\[a 9, HUK 11( 4J3H\NOSPU )PVSVN` VM UVZLTH[PKHL TPJYVZWVYPKPH MYVT MYLZO^H[LY
HUKL\YÒHSPULÄZOLZ7HNLPU:-:UPLaRVLK(Z`TWVZP\TVUKPZLHZLZVMÄZOLZHUK
ZOLSSÄZOLZ:WLJPHSW\ISPJH[PVU5V(TLYPJHU-PZOLYPLZ:VJPL[`>HZOPUN[VU+*
:WHYRZ (2 :ÙVWZPZ VM 0U]LY[LIYH[L 7H[OVSVN`! ,_JS\ZP]L VM 0UZLJ[Z ,SZL]PLY :JPLUJL
7\ISPZOLYZ(TZ[LYKHTWW
<:+(¶<*(4t[VKVZWHYHTLQVYHYSHJHTHYVUPJ\S[\YHLU*LU[YVHTtYPJH,KP[VYPHS0TWYLU[H
UCA. Managua, Nicaragua.
157
158
Capítulo 5
Enfermedades causadas por hongos

Capítulo 5
Enfermedades causadas por hongos
Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner

Expertos en Patología Acuática
México / USA
Introducción
Prácticamente todos los estadíos de vida del camarón son susceptibles a enfermedades
causadas por hongos. Independientemente de la especie de camarón de que se trate,
los estadios larvarios son susceptibles a este tipo de infecciones y por lo tanto, es común
ÙLJLZHYPVLS\ZVKL[YH[HTPLU[VZWYVÄSmJ[PJVZWHYHWVKLYJVU[YVSHYSLZ:LKLZJVUVJL
si las especies de hongos que afectan los estadíos larvarios del camarón son todas de
distribución mundial, pero la mycosis larvaria es un problema que se presenta tanto
en el hemisferio oriental como el occidental. Por otro lado, los estadios de vida más
avanzados (postlarva, juvenil, adulto) también son susceptibles a enfermedades causadas
por hongos, siendo Fusarium solani la especie más común. F. solani es un patógeno
oportunista y como tal se establece con mayor facilidad en camarones que se encuentran
ya debilitados por otra(s) enfermedad(es), o que se encuentran estresados por condiciones
ambientales extremas, o por haber sido expuestos a agentes químicos irritantes, o que
han sufrido heridas por trauma físico (por ejemplo, heridas causadas por el rostrum de
otros camarones). Una vez iniciada la infección por F. solani, las heridas causadas en el
camarón facilitan el ataque de otros patógenos oportunistas, tales como Vibrio spp.
5.1 Micosis
Micosis larvaria.
Nombre del agente: Lagenidium spp., Sirolpidium spp.
Agente
La mayoría de los casos de micosis larvaria son debidos a hongos phycomycetos
Lagenidium spp. (L. callinectes es la especie mas común) y Sirolpidium spp. Otras
especies, tales como Phytium spp., Leptolegnia marina y Haliphthoros milfordensis, se
pueden llegar a presentar ocasionalmente causando enfermedades.
La micosis larvaria en general es aparentemente cosmopolita, presentándose en
todos aquellos lugares en donde haya actividad camaronícola. Sin embargo, no se sabe
ZPLZWLJxÄJHTLU[LLagenidium spp. y Sirolpidium spp. son cosmopolitas o no. Todas las

especies de camarones peneidos son susceptibles a la micosis larvaria.
:PNUVZJSxUPJVZKLPTWVY[HUJPHKPHNU}Z[PJH
Los signos clínicos incluyen:
Mortandades súbitas durante los estadíos larvarios o durante los estadíos de
postlarvas temprana.
Las infecciones ocasionadas por Lagenidium spp. ocurren más comúnmente en los
estadíos de huevo, nauplio, protozoea y mysis.
Las infecciones debidas a Sirolpidium spp. ocurren con mayor frecuencia en los
estadíos de mysis y postlarvas tempranas.
Las infecciones producidas por estas dos especies de hongos en las larvas y
postlarvas resultan en micosis progresivas, pueden ir acompañadas de una ligera
YLZW\LZ[H PUÅHTH[VYPH V UV PUÅHTHJP}U KLS [VKV 3HZ PUMLJJPVULZ ZVU NLULYHSTLU[L
letales y pueden ir acompañadas de vibriosis durante los estadíos terminales.
Típicamente el micelio invade completamente el cuerpo del camarón reemplazando
todos los órganos y tejidos.
3LZPVULZVIZLY]HKHZHUP]LSTHJYVZJ}WPJV
No hay lesiones distintivas, pero en los estadíos avanzados de la enfermedad, las larvas
dejan de alimentarse, se aletargan y adquieren una coloración opaca blanquecina.
anteriormente.
+PHNU}Z[PJVJVUÄYTH[VYPV Basado en uno o más de los siguientes métodos:
Preparaciones en fresco. Las larvas son examinadas en fresco utilizando un
microscopio de luz con objetivo de por lo menos 20X. Las larvas infectadas muestran
SHWYLZLUJPHKL\UTPJLSPVL_[LUZP]VZPUZLW[HZ`HS[HTLU[LYHTPÄJHKVPU]HKPLUKV
el cuerpo y los apéndices de la larva. Las hifas reemplazan prácticamente todos los
tejidos y órganos de las larvas o postlarvas y son de una coloración pálida verde-
amarillenta y contienen numerosas inclusiones pequeñas que refractan la luz. Un
tipo de hifa especializada forma tubos de descarga, los cuales pueden o no presentar
una vesícula terminal en su parte distal y se les puede observar empujando hacia
afuera a través de la cutícula. En el caso de Sirolpidium spp., las zoosporas mótiles
pueden ser observadas al ser liberadas a través de los tubos de descarga (los cuales
son mas cortos que los de Lagenidium spp. y no protruyen a través de la cutícula). En
el caso de Lagenidium spp., las zoosporas se desarrollan dentro de la vesícula apical
prominente en el ápice de un túbulo de descarga relativamente largo.
Análisis histológico. El diagnóstico histológico se basa en la demostración de las hifas
y los tubos de descarga que protruyen conspicuamente (en el caso de Lagenidium
spp.) o no (en el caso de Sirolpidium spp.) a través de la cutícula.
162
Carlos R. Pantoja y Donald V. Lightner Enfermedades causadas por hongos.
Información adicional
+LIPKVHSHPTWSLTLU[HJP}UKLTLKPKHZWYVÄSmJ[PJHZHSHZJ\HSLZZVUZVTL[PKVZ
tanto los huevecillos como los nauplios, la frecuencia de casos de micosis larvaria ha
tenido una tendencia a disminuir en la camaronicultura moderna. Probablemente, entre
estas medidas, las más efectivas han sido la colecta de nauplios basada en la respuesta
MV[V[mJ[PJH WVZP[P]H ` LS \ZV KL [YH[HTPLU[VZ JVU [YLÅHU K\YHU[L SHZ WYPTLYHZ MHZLZ KLS
cultivo larvario.
MICOSIS LARVARIA
Figura 5.1. Preparación en fresco mostrando una

larva de Penaeus setiferus en estadio avanzado
de infestación con Lagenidium callinectes. Las
ÅLJOHZPUKPJHUSVZ[I\SVZKLKLZJHYNHX\LZHSLU
a través de la cutícula. Cuando los nutrientes
se han agotado y el cuerpo de la larva ha sido
consumido completamente, el hongo inicia la
LZWVYVNtULZPZ4HNUPÄJHJP}U?
Figura 5.2. Preparación en fresco de una

larva mysis de Penaeus vannamei infectada
severamente con Sirolpidium sp. Se muestra una
porción del ojo compuesto el cual, al igual que
el resto del cuerpo (no mostrado), se encuentra
JVTWSL[HTLU[L PU]HKPKV WVY LS TPJLSPV ÅLJOH
gruesa). El tubo de descarga corto, característico
de Sirolpidium sp., es evidente saliendo a través
KL SH J\[xJ\SH ÅLJOH KLSNHKH 4HNUPÄJHJP}U!
300X.
163
5.2 Fusariosis
Fusariosis, enfermedad de las branquias negras (en Penaeus japonicus).
Nombre del agente: Fusarium spp.
Agente
Hongo imperfecto Fusarium solani y posiblemente otras especies del mismo género,
incluyendo F. moniliforme. Los hongos phycomycetos Atkinsiella dubia y Haliphthoros
spp. raramente causan enfermedades en camarones peneidos, pero se les ha encontrado
asociados a lesiones en las branquias o en la cutícula, las cuales son muy similares a las
causadas por Fusarium.
Fusarium spp. es de distribución cosmopolita. Se le encuentra comúnmente en
plantas terrestres, suelo, y ambientes de agua dulce y salobre.
Todas las especies de camarones peneidos son susceptibles a la fusariosis. En la
mayoría de las especies, los estadíos de sub-adulto y adulto son los afectados con mayor
severidad y frecuencia.
Algunas especies de camarones peneidos son bastante susceptibles a esta
enfermedad, aun en los estadíos de juvenil, principalmente cuando son sometidos a
condiciones de cultivo en sistemas intensivos y superintensivos. Ejemplos de especies
altamente susceptibles son P. japonicus y P. californiensis. Ejemplos de especies
moderadamente susceptibles son P. stylirostris y P. vannamei. Ejemplos de especies
relativamente resistentes son P. monodon y P. merguiensis.
:PNUVZJSxUPJVZKLPTWVY[HUJPHKPHNU}Z[PJH
Los signos clínicos incluyen:
3LZPVULZJVU\UHYLZW\LZ[HPUÅHTH[VYPHT\`PU[LUZHTLSHUPaHJP}U3HZSLZPVULZ
melanizadas tienden a ser bastante extensas, comúnmente con un borde rojizo y
necrótico y pueden localizarse con frecuencia en los apéndices, tales como escamas de
SHZ HU[LUHZ ÅHNLSVZ HU[LUHSLZ WLKUJ\SVZ VJ\SHYLZ WLYLP}WVKVZ \Y}WVKVZ ` [LSZVU
No es raro que lesiones en la cutícula debido a raspaduras, pérdidas de apéndices y
punciones con la espina rostral, se infecten posteriormente con Fusarium.
Cualquier parte externa del cuerpo, incluyendo branquias y cámara branquial.
Fusarium tiene tendencia a infectar la base coxal de los pereiópodos para posteriormente
invadir el tejido branquial adyacente causando melanización intensa. De la misma
manera, tiene tendencia a invadir las porciones basales de la cabeza y los apéndices de
la cola, desde donde se dispersa a zonas adyacentes.
164
3LZPVULZVIZLY]HKHZHUP]LSTHJYVZJ}WPJV
Necrosis cuticular y melanización intensa muy dispersa.
anteriormente.
==> Preparaciones en fresco. Examen en fresco de raspados de lesiones melanizadas.
,SHUmSPZPZTPJYVZJ}WPJVHTHNUPÄJHJPVULZKL?V?YL]LSHSHWYLZLUJPHKL
las hifas del hongo. Estas preparaciones son también útiles en la demostración de
las macroconidias, las cuales tienen una forma de canoa. La demostración de las
THJYVJVUPKPHZWYVWVYJPVUH\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]V
==> Análisis histológico. El análisis con tinciones de H&E revela la presencia de lesiones
granulomatosas bastante prominentes, acompañadas de una multitud de nódulos
hemocíticos con centros melanizados. Tinciones especiales (por ejemplo, PAS y
tinciones de plata basadas en la técnica de PAS) demuestran claramente la presencia
de las hifas y de las macroconidias, las cuales se tiñen de color rosa o rojo (PAS) o
negro (tinciones de plata basadas en la técnica de PAS).
Información adicional
Fusarium solani es un patógeno oportunista que ataca camarones debilitados por
otras enfermedades, por exposición a agentes químicos irritantes o a ciertos metales
pesados, o por amontonamiento a densidades altas.
El principal mecanismo para el establecimiento de la infección es la presencia de
lesiones (pequeñas o grandes) en la cutícula. La infección puede comenzar en varias
WHY[LZKLSJ\LYWVHSTPZTV[PLTWV`W\LKLUSSLNHYHJ\IYPYOHZ[H\UKLSHZ\WLYÄJPL
corporal.
Una vez hecha su aparición, la enfermedad progresa con un porcentaje de
recuperación de solo un 30% aproximadamente. Las lesiones producidas por Fusarium
también sirven como puerta de entrada para otros patógenos oportunistas, tales como
Vibrio spp.
165
ENFERMEDADES CAUSADAS POR HONGOS

FUSARIOSIS
Figura 5.3. Lesiones melanizadas (negras) dentro de la

cámara branquial de un camarón Penaeus sp. causadas por
infestación con Fusarium solani.
Figura 5.4. Preparación en fresco, sin teñir, de un raspado

obtenido de una lesión causada por F. solani. Las hifas
del hongo son bastante evidentes dentro de la masa de
[LQPKV ULJYVZHKV PUÅHTHKV ` TLSHUPaHKV 4HNUPÄJHJP}U!
1,000X.
Figura 5.5. Fotografía a bajo aumento de un corte histológico

a través de una lesión causada por F. solani. Se muestra una
porción de la pared corporal y el músculo subyacente. Masas
KLOLTVJP[VZOHUPUÄS[YHKVSHaVUH`LUJHWZ\SHKVSHZOPMHZKL
Fusarium. Algunas de las hifas encapsuladas, principalmente
cerca de la pared corporal han sido melanizadas (ejemplos
ZL|HSHKVZJVUÅLJOHZ;PUJP}U!/LTH[V_PSPUHLVZPUHÅV_PUH
KL4H`LY)LUUL[[4HNUPÄJHJP}U!?
Figura 5.6 Fotografía de gran aumento de un corte histológico

a través de una lamela branquial de un camarón juvenil
Penaeus stylirostris, la cual ha sido infectada por F. solani.
3HZOPMHZ`SHZJVUPKPHZLQLTWSVZZL|HSHKVZJVUÅLJOHZZVU
bastante evidentes. Tinción: PAS de McManus y verde claro.
4HNUPÄJHJP}U?
166
Alderman, D.J., and J.L. Polglase. 1985. Fusarium tabacinum (Beyma) Gams. as a gill parasite in the
JYH`ÄZOAustropotamobius pallipes Lereboullet. J. Fish Diseases 8: 249-252.
Bian, B.Z., and S. Egusa. 1981. Histopathology of black gill disease caused by Fusarium solani
(Martius) infection in the Kuruma prawn, Penaeus japonicus Bate. J. Fish Diseases 4: 195-201.
Bland, C.E., D.G. Ruch, B.R. Salser, and D.V. Lightner. *OLTPJHSJVU[YVSVMLagenidium, a
fungal pathogen of marine crustacea. Proc. World Mariculture Society!
Brock, J.A., and D.V. Lightner. 1990. Diseases of Crustacea. Diseases Caused by Microorganisms.
pp. 245-349. In: O. Kinne (ed.), Diseases of Marine Animals, Vol. III. Biologische Anstalt
Helgoland, Hamburg, Germany.
Brock, J.A., and K. Main. 1994. A Guide to the Common Problems and Diseases of Cultured Penaeus
vannamei. Published by the Oceanic Institute, Makapuu Point, P.O. Box 25280, Honolulu, HI.
241 p.
Egusa, S., and T. Ueda. (Fusarium sp. associated with black gill disease of the Kuruma Prawn,
Penaeus japonicus Bate.)\SSL[PU1HWHULZL:VJPL[`:JPLU[PÄJ-PZOLYPLZ38: 1253-1260.
Hatai, K., K. Nakajima, and S. Egusa. ,MMLJ[VMZVTLM\UNPJPKLZVUISHJRNPSSKPZLHZLVM2\Y\TH
prawn, Penaeus japonicus, caused by Fusarium sp. (In Japanese). Fish Pathology (Gyobo
Kenkyu) 8: 156-160.
Johnson, S. K. Fusarium sp. in laboratory-held pink shrimp. Texas A&M University, Texas
Agricultural Extension Service, Fish Disease Diagnostic Laboratory, Publication No. FDDL-#1.
Johnson, S.K., 1990. Handbook of Shrimp Diseases, Sea Grant Publ. No. TAMU-SG-90-601, Texas
A&M Univ. 25 p.
Lightner, D.V. :VTLWV[LU[PHSS`ZLYPV\ZKPZLHZLWYVISLTZPU[OLJ\S[\YLVMWLUHLPKZOYPTW
in North America. Proc. U.S.-Japan Natural Resources Program, Symposium on Aquaculture
+PZLHZLZ;VR`VWW
Lightner, D.V., D. Moore, and D.A. Danald. (T`JV[PJKPZLHZLVMJ\S[\YLKWLUHLPKZOYPTW
caused by the fungus Fusarium solani. pp. 135-158. In: D.H. Lewis and J.K. Leong (eds.),
Proceedings of the Second Biennial Crustacean Health Workshop. Texas A&M Univ. publication
U\TILY;(4<:.
Lightner, D.V. 1981. Fungal diseases of marine crustacea. pp. 451-484. In: E.W. Davidson (ed.),
Pathogenesis of Invertebrate Microbial Diseases. Allanheld, Osmun Publishers, Totowa, NJ.
Lightner, D.V. 1983. Diseases of cultured penaeid shrimp. pp. 289-320. In: J.P. McVey (ed.),
Handbook of Mariculture. Volume 1. Crustacean Aquaculture. CRC Press, Boca Raton, FL.
Lightner, D.V. 1988. Diseases of penaeid shrimp. pp. 8-133. In: C.J. Sindermann and D.V. Lightner
(eds.), Disease Diagnosis and Control in North American Marine Aquaculture. Second Edition.
,SZL]PLY:JPLU[PÄJ7\ISPZOPUN*V(TZ[LYKHT
Lightner, D.V. 1993. Diseases of cultured penaeid shrimp. pp. 393-486. In: J.P. McVey (ed.),
Handbook of Mariculture. Volume 1. Crustacean Aquaculture. Second Edition. CRC Press,
Boca Raton, FL.
Lightner, D.V., and C.T. Fontaine. (UL^M\UN\ZKPZLHZLVM[OLÔP[LZOYPTWPenaeus setiferus.
J. Invertebrate Pathology 22: 94-99.
Lightner, D.V., and C.T. Fontaine. (T`JVZPZVM[OL(TLYPJHUSVIZ[LYHomarus americanus,
caused by Fusarium sp. J. Invertebrate Pathology 25: 239-245.
167
Lightner, D.V., R.M. Redman, D.A. Danald, R.R. Williams, and L.A. Perez. 1984. Major diseases
encountered in controlled environment culture of penaeid shrimp at Puerto Peñasco, Sonora,
Mexico. In: C.J. Sindermann (ed.), Proceedings of the Ninth and Tenth U.S.-Japan Meetings on
Aquaculture. NOAA Technical Report NMFS 16:25-33. U.S.-Japan Meeting on Aquaculture,
Symposium on Crustacean Culture, Kyoto.
Lightner, D.V. 1985. A review of the diseases of cultured penaeid shrimps and prawns with emphasis
VUYLJLU[KPZJV]LYPLZHUKKL]LSVWTLU[ZWW 0U!@;HRP1/7YPTH]LYH1(3SVIYLYH
(eds.), Proceedings of the First International Conference on the Culture of Penaeid Prawns/
Shrimps. Published by the Aquaculture Department, Southeast Asian Fisheries Development
Center, Iloilo, Philippines.
Lio-Po, G.D., M.E.G. Sanvictores, M.C.L. Baticados, and C.R. Lavilla. 1982. “In vitro” effect of
fungicides on hyphal growth and sporogenesis of Lagenidium spp. isolated from Penaeus
monodon larvae and Scylla serrata eggs. J. Fish Diseases !
Lio-Po, G., and E. Sanvictores. 1985. The tolerance of Penaeus monodon eggs and larvae to fungicides
against Lagenidium sp. and HaliphthorosZWW0U!@;HRP1/7YPTH]LYHHUK1(3SVIYLYH
(eds.), Proceedings First International Conference on the Culture of Penaeid Prawns/Shrimps.
Aquaculture Dept., SEAFDEC, Iloilo, Philippines.
Solangi, M.A., and D.V. Lightner. *LSS\SHY PUÅHTTH[VY` YLZWVUZL VM Penaeus aztecus and
Penaeus setiferus to the pathogenic fungus, Fusarium sp. isolated from the California brown
shrimp, Penaeus californiensis. J. Invertebrate Pathology!
168
Capítulo 6
Inmunología del Camarón

Capítulo 6
Inmunología del Camarón
Margherita Anna Barracco, Luciane María Perazzolo

y Rafael Diego Rosa
Laboratorio de Inmunología Aplicada a la Acuicultura (LIAA),
Introducción
Los crustáceos pertenecen a un antiguo y exitoso grupo zoológico, constituido por
más de 40 mil especies, muchas de las cuales son muy apreciadas para consumo humano,
como son los camarones, langostas, langostas de agua dulce, cangrejos y jaibas.
El cultivo de crustáceos, principalmente de camarones (camaronicultura), sobresale
en este contexto como una importante alternativa para la producción rápida y en gran
escala de alimento para consumo humano, contribuyendo además con la protección de
las poblaciones naturales de una excesiva extracción. Actualmente, cerca del 30% de los
camarones consumidos en el mundo son provenientes del cultivo y las especies marinas
más cultivadas son los penaeidos Litopenaeus vannamei (40,66%), Penaeus monodon
(37,41%) y Fenneropenaeus chinensis (10,97%) (FAO, 2007). La camaronicultura es
responsable hoy día de millones de empleos emergentes en países tropicales, siendo los
principales productores mundiales China y Tailandia en Asia y Ecuador, México y Brasil
en América Latina.
El principal factor limitante para el éxito de la camaronicultura mundial, consiste
actualmente en el control de las infecciones, principalmente las de origen viral. Las
altas densidades poblacionales usualmente utilizadas en los cultivos, propician la rápida
propagación de los agentes infecciosos, resultando generalmente en mortalidades masivas
y ocasionando, como consecuencia, perjuicios económicos incalculables. Actualmente,
SHWYVÄSH_PZ`LSJVU[YVSKLSHZLUMLYTLKHKLZLUSVZJ\S[P]VZZLJPYJ\UZJYPILUImZPJHTLU[L
a la práctica adecuada del manejo y la disminución de las condiciones de estrés, una
vez que los factores que determinan el estado de salud de los camarones, todavía son
muy poco conocidos. En este contexto, el estudio del sistema inmunológico de los
crustáceos sobresale como una estrategia reciente y promisoria, pues permite conocer
las bases de la susceptibilidad y de la resistencia de estos animales a los microorganismos
patógenos y parásitos, además de proporcionar aportes valiosos para el establecimiento
de parámetros de salud e inmuno marcadores para la selección genética de animales
más resistentes a las infecciones.
6.1 Sistema Inmune de los Crustáceos

Los invertebrados marinos están en constante contacto, en su ambiente natural,
con una gran diversidad de microorganismos, incluyendo múltiples virus, que pueden
constituir una seria amenaza a su sobrevivencia. No obstante, el evidente éxito de este
grupo zoológico a lo largo de más de 500 millones de años de su historia evolutiva,
JVUÄYTH SH WYLZLUJPH KL \U ZPZ[LTH PUT\UVS}NPJV LÄJPLU[L ` JHWHa KL WYV[LNLYSVZ
contra la invasión de los agentes causantes de enfermedades.
La primera línea de defensa de estos animales es proporcionada por la presencia
de un caparazón externo rígido o exoesqueleto, que funciona como una barrera físico-
química protectora. Además de ello, todo el tracto digestivo de estos animales, que es
la principal vía de entrada de los microorganismos, también está revestido por una capa
quitinosa y aún ofrece un ambiente ácido y lleno de enzimas, capaz de inactivar y digerir
la mayoría de los microorganismos que no son parte de su microbiota natural. Cuando
LZ[HZIHYYLYHZZVU[YHZWHZHKHZUVZPLUKVZ\ÄJPLU[LWHYHPTWLKPYSHWLUL[YHJP}UKLSVZ
patógenos, se desencadenan en el hospedero una serie de reacciones inmunológicas
complejas con el objetivo de neutralizar y eliminar los agentes invasores.
A ejemplo de otros invertebrados, los crustáceos disponen solamente de un sistema
inmune innato, diferente de los vertebrados que además de esto, tienen también un sistema
PUT\ULHKHW[H[P]V,SZPZ[LTHPUT\ULPUUH[VKLSVZJY\Z[mJLVZÄSVNLUt[PJHTLU[LTmZ
antiguo, es encontrado en todos los organismos multicelulares, incluyendo invertebrados
y plantas, mientras que el sistema inmune adaptativo sólo se encuentra en los vertebrados.
,Z[LS[PTVZLJHYHJ[LYPaHWVYSHWYLZLUJPHKL\UHPUÄUPKHKKLYLJLW[VYLZ`HU[PJ\LYWVZ
HS[HTLU[L LZWLJxÄJVZ ` WVY SH PUK\JJP}U KL JtS\SHZ KL TLTVYPH X\L NHYHU[PaHU \UH
YLZW\LZ[HKLKLMLUZHHS[HTLU[LLÄJPLU[L`LZWLJxÄJHWHYHSVZTmZKP]LYZVZWH[}NLUVZ
Esta respuesta transcurre de la presencia de una línea celular linfocítica, presente
ZVSHTLU[LLUSVZ]LY[LIYHKVZKVUKLZLHWV`HU[VKVZSVZTLJHUPZTVZKLLZWLJPÄJPKHK`
de memoria inmunológica. De esta forma, su ausencia en los invertebrados inviabiliza
cualquier tentativa de desarrollo de vacunas, en su concepto clásico de la palabra,
disminuyendo así de manera sustancial, la posibilidad de la prevención y control de
infecciones en los crustáceos.
El sistema circulatorio de los crustáceos es de tipo abierto o semi-abierto, por donde
[YHUZP[H \U [LQPKV Å\PKV KLUVTPUHKV OLTVSPUMH JVYYLZWVUKPLU[L H SH ZHUNYL KL SVZ
vertebrados (Figura 6.1). En la hemolinfa son transportados continuamente nutrientes,
excretas, oxígeno, hormonas y otras moléculas importantes para los diferentes órganos
KLLZVZHUPTHSLZ+LIPKVHZ\Å\PKLa`WVYSHJHWHJPKHKKLSSLNHYKPYLJ[HTLU[LH[VKVZ
los tejidos de los crustáceos, la hemolinfa contiene además todos los componentes del
sistema inmunológico.
La hemolinfa está compuesta por una fracción celular, representada por las células
circulantes o hemocitos y por una fracción líquida constituida por el plasma que contiene
diferentes factores humorales. Las respuestas inmuno celulares y humorales actúan de
forma integrada en los crustáceos, protegiéndolos contra la invasión de microorganismos
y parásitos, garantizando así su integridad corporal y homeostática.
Los principales sistemas de defensa actualmente reconocidos en los crustáceos
son: (1) coagulación de la hemolinfa; (2) melanización mediada por el sistema Pro-fenol
oxidasa (proPO); (3) reconocimiento y aglutinación celular mediados por las lectinas;
(4) sistemas antibacterianos, antifúngicos y antivirales mediados por los péptidos
antimicrobianos, RNA de interferencia y por proteínas de reconocimiento patrón; (5)
172
Margherita Anna Barracco et al. Inmunología del Camarón
producción de formas reactivas de oxígeno y nitrógeno y (6) sistema fagocítico y de

encapsulamiento (revisión de Iwanaga e Lee, 2005).
Células Inmuno competentes o Hemocitos

Las respuestas inmuno celulares de los crustáceos están básicamente relacionadas
con las células de la hemolinfa o hemocitos e incluyen la fagocitosis de microorganismos
y la formación de cápsulas y nódulos en torno a los invasores y a los mecanismos
citotóxicos y/o degradativos intracelulares, utilizados para degradar y eliminar a los
patógenos. Muchas de estas moléculas microbicidas se encuentran almacenadas dentro
de las vesículas o de los gránulos de ciertas poblaciones de hemocitos, mientras que
otras son constitutivamente liberadas a la hemolinfa, actuando en diferentes cascadas
inmunológicas. Además de actuar en las respuestas de defensa, los hemocitos también
participan en la reparación de heridas, esclerotización de la cutícula y se cree que también
están relacionados con el metabolismo y transporte de carbohidratos (Jiravanichpaisal et
al., 2006).
La comprensión de las reacciones inmuno celulares de los crustáceos depende de
THULYHJY\JPHSKLSHPKLU[PÄJHJP}U`SHJHYHJ[LYPaHJP}UKLZ\ZJtS\SHZPUT\UVJVTWL[LU[LZ
(WLZHYKLUVOHILY\UHOVTVNLULPKHKLUSHJSHZPÄJHJP}UKLSVZOLTVJP[VZ[YLZ[PWVZ
de células son usualmente reconocidos y descritos en los crustáceos (Figuras 6.2A-F):
hemocitos hialinos (HHs), hemocitos semi-granulares o con gránulos pequeños (HGPs) y
hemocitos granulares o con gránulos grandes (HGGs) (Bauchau, 1981; Hose et al., 1990;
Johansson et al3HMHS[HKL\UPMVYTPKHKLUSHPKLU[PÄJHJP}UKLSVZOLTVJP[VZZL
debe principalmente al hecho de que esas células son muy frágiles y reactivas, alterando
YmWPKHTLU[L Z\Z JHYHJ[LYxZ[PJHZ TVYMVÄZPVS}NPJHZ in vitro, lo que torna su estudio más
difícil, que en el caso de los leucocitos de los vertebrados.
La activación de los hemocitos de los crustáceos resulta generalmente en su
extendimiento y degranulación, ocurriendo la liberación de una gran variedad de efectores
inmunológicos para el plasma. En los últimos años han ocurrido grandes progresos en
el estudio de estas células, debido al desarrollo de varias soluciones anticoagulantes
LZWLJxÄJHZ`TLKPVZKLJ\S[P]VJHWHJLZKLLZ[HIPSPaHYHKLJ\HKHTLU[LSVZOLTVJP[VZin
vitro. Además, la separación de las diferentes poblaciones de hemocitos por gradientes
de Percoll, la producción de anticuerpos monoclonales, la clonación y caracterización
KLNLULZX\LJVKPÄJHULMLJ[VYLZPUT\UVS}NPJVZLUSVZKPMLYLU[LZ[PWVZKLJtS\SHZ]PLULU
contribuyendo para tener una mejor comprensión del funcionamiento de las diferentes
poblaciones hemocíticas.
De una manera general, los HHs de los crustáceos son usualmente descritos como
los menores hemocitos, con una alta relación núcleo-citoplasma y conteniendo pocos o
ningún gránulo (Figuras 6.2A,D). De acuerdo con algunos autores, los HHs pertenecen a
una línea celular distinta de los hemocitos granulares y están esencialmente relacionados
con los mecanismos de coagulación (Hose et al., 1990). Otros autores consideran que
los HHs son las principales células fagocitarias (Johansson et al., 2000) y que ese tipo
celular es una forma intermedia de la línea de hemocitos granulares (van de Braak et al.,
2002a).
173
Figura 6.1: Sistema circulatorio abierto/semi-abierto

de camarón y órganos asociados. C: corazón; HP:
hepatopáncreas; OHA: órgano hematopoyético
antenal; OHD: órgano hematopoyético dorsal;
OHV: órgano hematopoyético ventral; OL: órgano
linfoide; VD: vaso dorsal (adaptado de Bachère et
al., 2004).
Figura 6.2: Tipos de hemocitos (A-F) y reacciones

celulares de defensa en crustáceos (G-J). A,
D: hemocitos hialinos (HHs) de camarones
observados al microscopio de contraste de fase
y eletrónico de transmisión, respectivamente;
B, E: hemocitos con gránulos pequeños (HGPs);
C, F: hemocitos con gránulos grandes (HGGs).
G: fagocitosis de una levadura por un hemocito
de Litopenaeus vannamei; H: encapsulamiento
in vitro de nemátodo Panagrellus redivirus por
hemocitos de Macrobrachium rosenbergii; I:
encapsulamiento in vitro de hifas del hongo
Ganoderma sp. por hemocitos de Farfantepenaeus
paulensis, con fuerte reacción de melanización;
J: nódulo hemocítico en el hepatopáncreas de L.
vannamei con agregados bacterianos en el centro
(reproducido de Covarrubias, 2004).
Por otra parte, los hemocitos granulares (HGPs y HGGs) son descritos como células
de citoplasma más abundante y ricos en gránulos de diversos tamaños y contenidos
(Figuras 6.2B, C, E, F). Algunos autores señalan los HGPs como formas intermedias, que
luego de su maduración se transforman en HGGs (Bauchau, 1981; Hose et al., 1990;
Söderhäll y Cerenius, 1992; Gargioni y Barracco, 1998). En cuanto a la función de los
hemocitos granulares, esta parece estar relacionada principalmente con la fagocitosis de
microorganismos, en la formación de cápsulas y nódulos y también con la producción
de moléculas tóxicas y microbicidas (Hose et al., 1990; Gargioni y Barracco, 1998; van
de Braak et al., 2002b).
174
En cangrejos y langostinos se sugiere que los HGPs actúan en los procesos de

encapsulación, los HGGs en el almacenamiento de moléculas inmuno efectoras y los
HHs en la fagocitosis de microorganismos (Johansson et al., 2000).
Reacciones inmuno celulares: fagocitosis y formación de cápsulas y nódulos

Luego de la invasión por microorganismos, los hemocitos migran a los sitios de
PUMLJJP}U NLULYHUKV \UH YLZW\LZ[H PUÅHTH[VYPH JSmZPJH ,U LZ[VZ ZP[PVZ KL PUMLJJP}U
ocurre entonces la fagocitosis de los microorganismos y/o la formación de agregados
celulares densos en torno de las partículas invasoras, pudiendo culminar con la liberación
de diferentes moléculas inmuno efectoras, capaces de neutralizar y degradar los agentes
patógenos.
En el proceso de fagocitosis, el agente extraño es envuelto e interiorizado dentro de
un fagosoma, que luego se funde con las vesículas/gránulos presentes en el citoplasma
(Figura 6.2G). Una vez unidas las dos estructuras, una variedad de compuestos
degradativos y antimicrobianos son liberados en las vacuolas fagocíticas, llevando a
la neutralización/degradación de las partículas endocitadas (Martin et al., 1996). La
fagocitosis de microorganismos fue bien demostrada en diferentes especies de crustáceos
(Hose et al., 1990; Martín et al., 1996; Gargioni y Barracco, 1998; Muñoz et al., 2002).
(\UX\L[VKH]xHL_PZ[HUJVU[YV]LYZPHZLUSHSP[LYH[\YHLUSVX\LZLYLÄLYLHSVZ[PWVZKL
hemocitos relacionados con los procesos de fagocitosis en los crustáceos, se sabe que
ese mecanismo, extremadamente importante, constituye la primera línea de defensa
celular contra la invasión de microorganismos.
Cuando la cavidad corporal de los crustáceos es invadida por una cantidad masiva
de microorganismos o por partículas/patógenos de gran tamaño, cuya fagocitosis no
es posible, se desencadena entonces la formación de nódulos y cápsulas celulares,
respectivamente. La formación de cápsulas se caracteriza por la agregación de varias
capas de hemocitos alrededor del patógeno de gran tamaño, como hifas de hongos,
nemátodos y determinadas formas de protozoarios, promoviendo que sea atrapado en
los tejidos del hospedero, para su posterior destrucción (Figuras 6.2H,I). La formación
de nódulos, por otro lado, ocurre alrededor de una gran cantidad de microorganismos
invasores, que también son capturados dentro de agregaciones celulares (Figura 6.2J),
semejantes a las cápsulas. Esta reacción evita su diseminación y la producción de una
septicemia.
En las regiones más centrales de los nódulos, es común observar la fagocitosis
de microorganismos por los hemocitos que están en contacto más próximo de los
microorganismos (Bauchau, 1981; Hose et al., 1990; Söderhäll y Cerenius, 1992).
Ambas reacciones, la de encapsulamiento y la formación de nódulos, no solamente
llevan a la captura de los patógenos, sino también limitan las respuestas inmunológicas
solamente a la región invadida. Esta respuesta inmune localizada durante las reacciones
inmunológicas, ayuda a proteger los tejidos del hospedero de los daños causados por
SHZTVStJ\SHZ[}_PJHZ`KLNYHKH[P]HZWYVK\JPKHZK\YHU[LLSWYVJLZVPUÅHTH[VYPV,USHZ
regiones más centrales de esas agregaciones de hemocitos, ocurre también la presencia
de una pigmentación oscura o melanización, como resultado de la liberación de los
compuestos inmuno efectores presentes en las células hemocíticas (Figura 6.2I) que
serán discutidos más adelante (Cerenius y Söderhäll, 2004).
El número de hemocitos libres en la hemolinfa puede disminuir drásticamente durante
\UHPUMLJJP}UJVTVYLZ\S[HKVKLZ\PUÄS[YHJP}ULUSVZ[LQPKVZPUMLJ[HKVZ`Z\\[PSPaHJP}U
en la formación de los nódulos y cápsulas. De este modo, nuevos hemocitos requieren
175
ser producidos y liberados en la circulación a partir de los tejidos hematopoyéticos

(Johansson et al., 2000; van de Braak et al., 2002a; Söderhäll et al., 2003; Jiravanichpaisal
et al., 2006). Esos tejidos son generalmente constituidos por lóbulos densos, situados en
la región dorsal y dorso-lateral del estomago y del intestino anterior (región epigástrica),
así como en la base de los maxilípedos en el caso de los camarones penaeidos (van de
Braak et al., 2002a) (Figura 6.1). Los tejidos hematopoyéticos presentan una alta tasa de
proliferación celular y son los responsables por la diferenciación y la maduración de los
hemocitos que serán liberados en la hemolinfa (van de Braak et al., 2002a; Söderhäll et
al., 2003).
3HPKLU[PÄJHJP}UKL\UVVTmZWYVNLUP[VYLZJLS\SHYLZHZxJVTVSHKPMLYLUJPHJP}UKL
las líneas hemocíticas producidas, es todavía controvertido (van de Braak et al., 2002a;
Söderhäll et al., 2003; Bachère et al., 2004; Jiravanichpaisal et al., 2006). A pesar de que
los tejidos hematopoyéticos son los principales responsables por la producción de los
hemocitos, hay algunas evidencias reportadas de división de esas células en la hemolinfa
de camarones penaeidos, como en Marsupenaeus japonicus (Sequeira et al., 1996) y
Farfantepenaeus paulensis (Gargioni y Barracco, 1998), aunque la frecuencia de división
es muy baja.
Otro órgano bastante irrigado e importante en las reacciones celulares es el órgano
linfoide (Figura 6.1). Este órgano, ausente en muchas especies de crustáceos decápodos,
se localiza en la parte anterior del hepatopáncreas de los camarones y parece participar en
los procesos de eliminación y depuración de agentes patógenos, ocurriendo en muchos
casos la formación de cuerpos esferoidales durante las infecciones. No esta claro si
el proceso de la fagocitosis ocurre principalmente en ese órgano o si los hemocitos
conteniendo los microorganismos ya fagocitados migran a dicho lugar, para realizar la
depuración (van de Braak et al., 2002b).
Mecanismos líticos y degradativos

Enzimas lisosomales y especies intermediarias reactivas al oxígeno (ROIs) y de nitrógeno
(RNIs)
Como se ha mencionado anteriormente, luego de la fagocitosis de los
microorganismos, estos son capturados en las vacuolas fagocíticas intracelulares que
se unen con los gránulos lisosomales. Estos se caracterizan por su pH ácido y por la
presencia de una amplia variedad de enzimas hidrolíticas, capaces de matar y degradar
a la gran mayoría de los microbios invasores (Figura 6.3). Debido a la fagocitosis, puede
ocurrir la liberación del contenido enzimático de los lisosomas hacia el plasma, a partir
de la degranulación de los hemocitos granulares. Entre las enzimas liberadas se destaca
la lisozima, capaz de romper polisacáridos complejos o peptidoglicanos (PGs) de las
paredes bacterianas, reacción que será mejor discutida más adelante, en la próxima
sección.
Además de la destrucción de los microorganismos invasores por las enzimas
lisosomales, se observa, durante las reacciones inmuno celulares, en especial en la
fagocitosis, la producción y liberación de moléculas altamente tóxicas, que auxilian en
la muerte y degradación del agente invasor. En ese momento, ocurre un importante
aumento en el consumo de oxígeno a nivel intracelular, llamado choque respiratorio,
que resulta en la producción de una variedad de radicales intermediarios altamente
reactivos, tanto de oxígeno (en inglés ROIs) como de nitrógeno (en inglés RNIs) (ver
revisiones de Anderson, 1996; Roch, 1999 y Bogdan et al., 2000). Los ROIs son radicales
de Oxígeno que poseen electrones libres o no pareados en su órbita más externa, lo
176
X\LSLZJVUÄLYL\UHLSL]HKHJHWHJPKHKKLYLHJJPVUHYJVUSHZLZ[Y\J[\YHZ`JVTW\LZ[VZ
próximos, tales como las membranas celulares, proteínas y ácidos nucleicos (ADN).
Siendo así, funcionan como agentes microbicidas potentes, destruyendo o inhibiendo el
crecimiento de los microorganismos invasores (Anderson, 1996; Bogdan et al., 2000).
La producción de esos radicales está ligada a la activación de un complejo enzimático
KLUVTPUHKV 5(+7/ V_PKHZH SVJHSPaHKV LU SH TLTIYHUH JLS\SHY ` LU SH Z\WLYÄJPL
de los gránulos lisosomales (Figura 6.4). Este complejo es activado por componentes
microbianos, tales como los lipopolisacáridos (LPS), lipoproteínas de bacterias y
ȕ-glucanos de hongos (Bogdan et al., 2000). La activación de la NADPH resulta en
la reducción del oxígeno molecular al anión superóxido (O2-), que puede disputarse,
espontáneamente o a través de la enzima intracelular superóxido dismutasa (SOD), en
peróxido de hidrogeno (H2O2). El H2O2 es un compuesto igualmente tóxico y, si no es
destruido por la catalasa del peroxisoma, puede difundirse y llegar al medio extracelular
(Warner, 1994). El O2- puede también ser convertido en otros componentes citotóxicos,
como en el radical hidroxilo (-OH) y en aniones hidroxilo (OH-) por la reacción de
Haber-Weiss o, luego de la dismutación en H2O2, en ácido hipocloroso (HOCl), oxígeno
singlet (1O2) y en cloraminas por la acción de la mieloperoxidasa (MOP) (Bogdan et al.,
2000) (Figura 6.4).
Además de las ROIs, ocurre también la producción intracelular de especies reactivas
de nitrógeno (RNIs), como el óxido nítrico (NO) y el peroxinitrito (ONOO-), compuestos
altamente citotóxicos y microbicidas (Kröncke et al., 1997). El peroxinitrito es resultante
de la reacción entre el NO con el anión superóxido (Anderson, 1996; Murphy et al.,
1998) (Figura 6.4).
Es importante resaltar que la producción de estas moléculas altamente tóxicas,
importantes en la destrucción de los patógenos invasores, puede también provocar graves
daños a los tejidos del hospedero. Para evitar esta autoagresión, el hospedero cuenta
básicamente con tres mecanismos de protección o defensa antioxidantes. Los primeros
dos mecanismos son endógenos e incluyen la presencia de enzimas intracelulares,
como las enzimas antioxidantes SOD, catalasa y la glutationa peroxidasa, capaces
de degradar/neutralizar a las ROIs y, también las enzimas de reparación que pueden
restablecer los daños provocados por las ROIs en el DNA, membranas y proteínas del
hospedero (Warner, 1994). El tercer mecanismo comprende la acción de compuestos
antioxidantes de origen exógeno, como el ácido ascórbico (vitamina C), la glutationa
y el Į-tocoferol (vitamina E), que pueden interactuar directamente con los radicales
libres neutralizándolos o interactuando directamente con los radicales libres (Warner,
1994). Es conveniente resaltar que los antioxidantes de origen exógeno, asumen especial
importancia en los cultivos de camarones, una vez que pueden ser adicionados a las
dietas en dosis apropiadas.
La producción in vitro de ROIs por los hemocitos inmuno estimulados por
componentes microbianos, ya fue descrita en el cangrejo Carcinus maenas (Bell y
Smith, 1993), en Macrobrachium rosenbergii (Sierra et al., 2005) y en varias especies de
penaeidos, como en P. monodon (Song e Hsieh, 1994; Sung et al., 1996), L. vannamei
(Muñoz et al., 2000) y en las especies nativas brasileñas, F. paulensis y L. schmitti (Guertler,
2007).
3HJ\HU[PÄJHJP}Uin vitro de la producción del anión superóxido por los fagocitos
es usualmente realizada a través del método de reducción del NBT (del inglés, nitro-
blue-tetrazolium), o por la técnica de la quimioluminiscencia. Esta evaluación permite
determinar el grado de estrés oxidativo de los animales, como consecuencia de diferentes
177
Figura 6.3: Mecanismos degradativos y microbicidas

asociados a los hemocitos de crustáceos durante
el proceso de fagocitosis. ROI: especies reactivas
de oxígeno; RNI: especies reactivas de nitrógeno;
AMPs: péptidos antimicrobianos.
Figura 6.4: Producción de especies reactivas

de oxígeno (ROIs) y nitrógeno (RNIs) por los
hemocitos de crustáceos durante el proceso de
fagocitosis y otras reacciones celulares. CAT:
catalasa; iNOS: óxido nítrico sintasa inducible;
SOD: superóxido dismutasa. Las especies reactivas
tóxico-microbicidas están representadas en rojo.
Figura 6.5: Respuestas inmunológicas inducidas

en los hemocitos, después del reconocimiento
de patógenos, vía PRPs plasmáticas o celulares
y subsecuente activación (1) desgranulación,
con liberación de diferentes inmunoefectores e
inmunoreguladores; (2) inducción y/o represión de
genes inmunológicos; (3) activación de respuestas
celulares como fagocitosis y formación de nódulos
y cápsulas.
factores de estrés como infecciones, destacándose como un valioso inmuno parámetro

para la determinación del estado inmunológico de los camarones (Song y Hsieh, 1994;
Muñoz et al., 2000; Campa-Córdova et al., 2002 a, b; Chang et al., 2003; Guertler,
2007).
La producción del anión superóxido también viene siendo muy utilizada en los
camarones para evaluar el efecto de substancias consideradas inmunoestimulantes,
como los ȕ-glucanos de hongos y los polisacáridos sulfatados de algas, que pueden ser
adicionados a la dieta o en el agua a través de baños de inmersión (Campa-Córdova et
al., 2002 a, b; Chang et al., 2003).
178
Por otro lado, la producción de RNIs tiene origen en la enzima óxido nítrico sintasa
(del inglés, NOS), presente en el citoplasma de varios tejidos animales, incluyendo las
células del sistema inmunológico. En estas últimas, la NOS es inducida por situaciones
de estrés (iNOS, del inglés inducible nitric oxide synthase) y produce NO y en seguida
el peroxinitrito (ONOO-), ambos compuestos altamente tóxicos (Figura 6.4). En los otros
tejidos, la NOS es expresada de forma constitutiva.
En los vertebrados, están bien documentadas las actividades antivirales,
antibacterianas y antiparasitarias de las RNIs, que igual que las ROIs causan daños al
DNA, a varias enzimas y a las membranas de los patógenos, directa o indirectamente
(ver revisión de Kröncke et al., 1997; Chakravortty y Hensel, 2003). Lamentablemente,
existen todavía muy pocas referencias sobre la participación del NO y sus derivados en
las respuestas de defensa de los crustáceos. Entre éstos, se destacan los trabajos de Jiang
et al. (2006) que mostraron una actividad de la NOS en los hemocitos de los camarones
F. chinensis y M. japonicus y el de Yeh et al. (2006), en el cangrejo rojo Procambarus
clarkii. La actividad de la NOS en estos animales es particularmente estimulada por
LPS bacterianos, sugiriendo que en los crustáceos, las RNIs deben actuar como agentes
microbicidas.
Es importante resaltar que la utilización de la producción de RNIs como inmuno
parámetros para evaluar el estado inmunológico de los camarones de cultivo, es una
herramienta muy poco utilizada, a pesar de su potencial promisorio. Se espera que en
un futuro próximo, se de un mayor progreso en las técnicas de detección de RNIs en
los camarones, para permitir su utilización como un parámetro inmunológico y/o como
indicador de inmuno estimulación.
Proteínas y péptidos antimicrobianos (AMPs)

Las proteínas y péptidos antimicrobianos o AMPs (del inglés, antimicrobial proteins/
peptides) son componentes esenciales del sistema inmune innato, pudiendo presentar una
actividad microbicida rápida y potente contra un amplio espectro de microorganismos.
En los crustáceos, que no cuentan con un sistema inmune adaptativo como el de los
vertebrados, la presencia de AMPs en la hemolinfa asume una gran importancia para
el control y prevención de infecciones por microorganismos. Esas moléculas están
ampliamente distribuidas entre los diferentes reinos de los seres vivos, siendo encontradas
desde bacterias hasta en mamíferos, incluyendo protozoarios, invertebrados y plantas.
3VZ(47ZM\LYVUPUPJPHSTLU[LPKLU[PÄJHKVZWVY:[LPULYet al. (1981) en la hemolinfa
de la mariposa Hyalophora cecropia y desde entonces, más de mil diferentes péptidos
han sido aislados y caracterizados (Bulet et al., 2004). Son moléculas relativamente
pequeñas, con menos de 150-200 residuos de aminoácidos. La gran mayoría de los
(47ZZLKLZ[HJHUWVYZ\ZJHYHJ[LYxZ[PJHZHUÄWm[PJHZWYLZLU[HUKV\UHYLNP}UHS[HTLU[L
catiónica y una región hidrofóbica, lo que facilita su interacción e inserción en los
fosfolípidos aniónicos presentes en la cara externa de las membranas de muchos
microorganismos (Bulet et al., 2004).
De acuerdo con su composición amino acídica y su estructura tridimensional, los
(47ZZVUJSHZPÄJHKVZLUJ\H[YVNYHUKLZJSHZLZ!WtW[PKVZĮOtSPJLSPULHYHUÄWm[PJVZ
(2) péptidos cíclicos o cíclicos con extremidades abiertas con uno o más puentes de
cisteína, (3) péptidos ricos en un tipo particular de aminoácido y (4) péptidos generados
a partir de la hidrólisis de una proteína precursora (Bulet et al., 2004). El sitio de síntesis
de estas moléculas, es variable entre los diferentes organismos. En muchas especies
de insectos, los AMPs son sintetizados en los cuerpos grasos en el momento de una
179
infección y segregados a la hemolinfa donde actúan de forma sistémica (Hoffmann et al.,

1996). En contrapartida, en otros invertebrados como en limúlidos, arañas, moluscos y
camarones, los AMPs son sintetizados constitutivamente en los hemocitos y almacenados
en sus gránulos (Bachère et al., 2004).
Los diferentes AMPs, caracterizados hasta el momento, tienen una actividad
inhibitoria rápida y potente contra un amplio espectro de microorganismos, incluyendo
IHJ[LYPHZ OVUNVZ ÄSHTLU[VZVZ SL]HK\YHZ ` LU HSN\UVZ JHZVZ [HTIPtU JVU[YH ]PY\Z `
protozoarios (Bachère et al., 2004; Reddy et al., 2004).
,S TLJHUPZTV KL HJJP}U KL SVZ (47: ZL THUPÄLZ[H NLULYHSTLU[L H UP]LS KL SH
membrana del microorganismo, provocando su desestabilización. Presentan en general
una actividad detergente, a través de la interacción electrostática con los fosfolípidos
aniónicos de la membrana, llevando a un desequilibrio de sus funciones. También
pueden insertarse en la bicapa lipídica, formando grandes porosSVX\LSSL]HH\UÅ\QV
descontrolado de solutos y extravasación del contenido citoplasmático, resultando en la
muerte del microorganismo. Otras clases de AMPs pueden ser interiorizadas e interferir
con diferentes vías metabólicas esenciales al ciclo de vida de los microorganismos (Bulet
et al., 2004; Toke, 2005). Es importante señalar que la inducción de mecanismos de
resistencia contra esas moléculas por parte de los microorganismos, es muy rara, dado
que los componentes afectados (membranas) son esenciales para la sobrevivencia de
esos microorganismos. Por esta razón, es prácticamente inviable pensar en que ocurran
mutaciones en las estructuras de sus membranas, para escapar de los efectos dañinos
de los AMPs.
:VSHTLU[L H TLKPHKVZ KL SH KtJHKH KL SVZ H|VZ M\LYVU PKLU[PÄJHKVZ SVZ
primeros péptidos con actividad microbicida en los crustáceos. El primer AMP aislado
y parcialmente caracterizado de un crustáceo fue un péptido catiónico de 6,5 kDa en
el cangrejo C. maenas. Este péptido, rico en residuos de prolina, presentó un amplio
espectro de actividad, incluyendo bacterias Gram-positivas y Gram-negativas (Schnapp
et al ,Z[VZTPZTVZH\[VYLZPKLU[PÄJHYVU[HTIPtUV[YV(47KLR+HJVU
actividad restringida a bacterias Gram-positivas marinas, que más tarde fue caracterizado
como una molécula hidrofóbica rica en residuos de cisteína y denominado crustina/
carcinina (Relf et al., 1999; Bartlett et al., 2002; Brockton et al., 2007).
En camarones penaeidos, tres familias de AMPs fueron descritas y caracterizadas
a partir de los hemocitos: peneidinas (Destoumieux et al., 1997), crustinas (Gross et al.,
2001; Bartlett et al., 2002) y factores anti-lipopolisacáridos (ALFs) (Gross et al., 2001;
Supungul et al., 2002) (Tabla 1).
Las peneidinas son péptidos antimicrobianos de 5 a 8 kDa, inicialmente aislados
y caracterizados a partir de la hemolinfa del camarón L. vannamei. Son moléculas
altamente catiónicas, compuestas por una región N-terminal rica en residuos de prolina
y una región C-terminal conteniendo seis residuos de cisteína unidos por tres puentes
disulfídicos (Destoumieux et al., 1997). Las peneidinas están subdivididas en varios
subgrupos (peneidinas 2 a 5), siendo que cada una contiene varias isoformas distintas
(Gueguen et al., 2006). Algunas isoformas tienen un motivo molecular de unión a la
quitina en su región C-terminal, que también es encontrado en algunas lectinas de
plantas y en varios péptidos antifúngicos (Destoumieux et al., 2000). Esa familia de
AMP es expresada de forma constitutiva en los hemocitos y presenta una actividad
WV[LU[L JVU[YH IHJ[LYPHZ .YHTWVZP[P]HZ ` OVUNVZ ÄSHTLU[VZVZ +LZ[V\TPL\_ et al.,
1999; 2000). De forma interesante, la presencia de peneidinas parece estar restringida a
JHTHYVULZWLUHLPKVZ=HYPVZZ\INY\WVZLPZVMVYTHZKLWLULPKPUHZM\LYVUPKLU[PÄJHKVZ
180
Tabla 1: Familias de péptidos antimicrobianos (AMPs) constitutivamente expresados en los

hemocitos de camarones penaeidos.
Actividad
AMP Estructura Referencias
Antimicrobiana
Gross et al., 2001

bacterias Gram+ y Supungul et al., 2002
ALF Gram- Supungul et al., 2004
OVUNVZÄSHTLU[VZVZ Somboonwiwat et al.,
2005
Gross et al., 2001

bacterias Gram+ y Bartlett et al., 2002
Crustina nd
Gram- Zhang et al., 2007
Amparyup et al., 2007a
Destoumieux et al., 1997

bacterias Gram+
Peneidina Destoumieux et al., 1999
OVUNVZÄSHTLU[VZVZ
Gueguen et al., 2006
nd = no determinada.
y caracterizados en diferentes especies de penaeidos de diferentes océanos (Gueguen et

al., 2006). La expresión de las peneidinas se inicia en las primeras fases del desarrollo
ontogenético de los camarones (nauplios IV y V) (Muñoz et al., 2003; Jiravanichpaisal
et al., 2007a). Las peneidinas se presentan en grandes cantidades, en comparación con
otras AMPs producidas en los hemocitos de penaeidos (cerca de 36% de los AMPs de P.
monodon y 75% de L. vannamei y L. setiferus), en especial las isoformas del subgrupo 3
(PEN3) (Gross et al., 2001; Supungul et al., 2002).
Las crustinas son AMPs homólogos a los péptidos de 11,5 kDa inicialmente
aislados de los hemocitos granulares del cangrejo C. maenas (Relf et al., 1999), que
posteriormente fueron denominadas carcininas (Brockton et al, 2007). Las crustinas de
camarones penaeidos incluyen varias isoformas y son moléculas compuestas por una
región N-terminal rica en residuos de glicinas y por una porción C-terminal conteniendo
doce residuos conservados de cisteína, donde se encuentra un dominio WAP (del
inglés, whey acidic protein), con posible función de inhibir a las proteasas (Bartlett et
al., 2002). La actividad antimicrobiana de las crustinas abarca esencialmente bacterias
Gram-positivas (Zhang et al., 2007), además, una acción contra vibrios marinos (Gram-
negativos) fue también descrita muy recientemente para algunas isoformas (Amparyup
et al., 2007a).
Esa familia de AMPs (crustinas/carcininas) es constitutivamente expresada en
hemocitos y parece estar distribuida en diferentes grupos de crustáceos, como camarones
penaeidos (Gross et al., 2001; Supungul et al., 2002; Rattanachai et al., 2004a; Zhang et
181
al., 2007; Rosa et al., 2007) y también en cangrejos, langostas y otros camarones (Relf
et al., 1999; Hauton et al., 2006; Christie et al., 2007; Jiravanichpaisal et al., 2007b).
En el crustáceo Pacifastacus leniusculus y en los penaeidos L. setiferus y L. vannamei,
las crustinas representan cerca de 3, 4 y 9% de los AMPs transcritos en sus hemocitos,
respectivamente (Gross et al. 2001; Jiravanichpaisal et al., 2007b). En contraposición, en
el camarón P. monodon estos AMPs pueden alcanzar cerca de 26% de los expresados
(Supungul et al., 2004). La expresión de crustinas, así como de las peneidinas, se inicia
en las fases tempranas del desarrollo de los camarones (nauplios IV) (Jiravanichpaisal et
al., 2007a).
Los factores anti-lipopolisacáridos (ALFs: del inglés, anti-lipopolysaccharide factors)
son moléculas de 10 a 14 kDa, inicialmente aisladas y caracterizadas en los hemocitos
granulares del limúlido Limulus polyphemus (Tanaka et al., 1982). En los camarones
penaeidos, los ALFs fueron primeramente detectados en las especies L. setiferus (Gross
et al., 2001) y P. monodon (Supungul et al., 2002) y mostraron contener dos residuos
conservados de cisteína comprometidos en la formación de una estructura terciaria en
forma de grapa (ß-hairpin) como en los ALFs de limúlidos. Esa estructura concentra una
región altamente hidrofóbica con un dominio de unión a LPS. Los ALFs incluyen varias
isoformas y son moléculas constitutivamente expresadas en los hemocitos (cerca de 26%
de los transcritos de AMPs de P. monodon) con actividad antimicrobiana potente y de
amplio espectro, siendo activas contra bacterias Gram-positivas y negativas y hongos
ÄSHTLU[VZVZJVUSHWYVWPLKHKKL\UPYZLÙL\[YHSPaHY37::VTIVVU^P^H[et al., 2005;
Nagoshi et al., 2006). Todavía no es conocido cuando se da el inicio de la producción de
SVZ(3-ZK\YHU[LLSKLZHYYVSSVVU[VNLUt[PJVKLSVZJHTHYVULZ:LJ\LUJPHZJVKPÄJHKVYHZ
para esos péptidos han sido ampliamente detectadas en los hemocitos de diferentes
especies de penaeidos y de otros crustáceos (Gross et al., 2001; Supungul et al., 2004;
Liu et al., 2005; Liu et al., 2006a; Nagoshi et al., 2006; Towle y Smith, 2006; Imjongjirak
et al., 2007).
Además de estas tres principales familias de AMPs, otros grupos de moléculas
antimicrobianas fueron recientemente caracterizados en crustáceos, la calinectina de
Callinectes sapidus (Khoo et al., 1999), las astacidinas de P. leniusculus (Lee et al., 2003;
Jiravanichpaisal et al., 2007b), la armadilidina de Armadillidium vulgare (Herbinière et
al., 2005) y la cigonadina de Scylla serrata (Wang et al., 2007).
Otras importantes moléculas con potente actividad antimicrobiana son también
encontradas en los hemocitos de crustáceos. Entre estas se destaca la lisozima, enzima
mencionada anteriormente, que representa aproximadamente 4% de las proteínas totales
de los hemocitos del camarón (Sotelo-Mundo et al., 2003). Las lisozimas poseen una
actividad lítica potente contra un amplio espectro de bacterias Gram-positivas y negativas,
incluyendo especies de vibrios marinos, debido al clivaje de los peptidoglucanos de las
paredes bacterianas (Hikima et al., 2003; De La Vega et al., 2006).
En adición a las familias de AMPs constitutivamente producidas en los hemocitos,
otros grupos de moléculas antimicrobianas, como los péptidos originados a partir de la
hidrólisis de proteínas precursoras, también fueron encontrados en camarones. Entre
éstos se destaca el péptido derivado de la porción C-terminal de la proteína plasmática
hemocianina. Este fragmento, de características aniónicas, presenta actividad restringida
H SVZ OVUNVZ ÄSHTLU[VZVZ ` W\LKL M\UJPVUHY JVTV TVStJ\SH PUT\UVZL|HSPaHKVYH
(Destoumieux-Garzón et al., 2001). Péptidos antifúngicos originados a partir de la
hidrólisis de la hemocianina fueron también referenciados en la langosta de agua dulce P.
leniusculus (Lee et al., 2003). En los camarones penaeidos, fue demostrado que péptidos
182
generados a partir del clivaje de proteínas histónicas, presentan actividad antimicrobiana

contra bacterias Gram-positivas (Patat et al., 2004).
Durante infecciones causadas por diferentes tipos de patógenos, ocurre la
modulación de la expresión de diferentes familias de AMPs, así como de otras moléculas
microbicidas importantes como la lisozima (Supungul et al., 2004; de Lorgeril et al.,
2005; Somboonwiwat et al,UJHTHYVULZKLZHÄHKVZJVU37:VJVUIHJ[LYPHZ
Gram-negativas del género Vibrio, VJ\YYL \UH KPZTPU\JP}U ZPNUPÄJH[P]H KL SVZ UP]LSLZ
de expresión de peneidinas y crustinas en las primeras horas luego de la inyección (3 y
6 h). Esta disminución es seguida por el retorno a los niveles basales de esas moléculas
S\LNV KL OVYHZ ` WVY \U H\TLU[V ZPNUPÄJH[P]V LU SVZ UP]LSLZ KL L_WYLZP}U S\LNV
de 72 horas de inyección, sugiriendo interesantemente, una inducción tardía de estas
moléculas durante las infecciones (Destoumieux et al., 2000; Bachère et al., 2004;
Okumura, 2007). Fue demostrado, que en las primeras horas de la infección, cuando el
nivel de expresión de las peneidinas disminuye drásticamente, ocurre simultáneamente
un aumento en sus concentraciones plasmáticas (Destoumieux et al., 2000). Se cree que
este aumento sea proveniente de la liberación de estos AMPs por los hemocitos que se
encuentran próximos a los sitios de infección (Bachère et al., 2004).
Por otro lado, la expresión de ALFs parece mostrar una cinética contraria a las otras
dos familias de AMPs de camarones. En P. monodon, los niveles de expresión de ALFS
H\TLU[HUZPNUPÄJH[P]HTLU[LLUSHZWYPTLYHZOVYHZS\LNVKLSHPUMLJJP}UJVUIHJ[LYPHZ
Gram-negativas (3 y 6 h) y vuelven a sus niveles basales cerca de 48 horas después del
PUPJPVKLSWYVJLZVPUÅHTH[VYPV:\W\UN\Set al., 2004; Somboonwiwat et al., 2006).
La presencia de diferentes familias de AMPs en crustáceos, junto a la ocurrencia
de innumerables isoformas de un mismo subgrupo, probablemente con actividades
antimicrobianas distintas, sugiere una actuación sinérgica de estas diferentes moléculas
inmuno efectoras, que pueden así eliminar un amplio espectro de agentes patógenos
simultáneamente. La modulación de la expresión de las diferentes familias de AMPs
de camarones durante una infección, señala la gran importancia de estas moléculas en
LSJVTIH[LJVU[YHHNLU[LZWH[}NLUVZ+LLZHMVYTHSHJ\HU[PÄJHJP}UKLSHL_WYLZP}U
KL SVZ NLULZ JVKPÄJHU[LZ WHYH LZVZ WtW[PKVZ W\LKL ZLY \UH PTWVY[HU[L OLYYHTPLU[H
para evaluar las condiciones de salud de estos animales en cultivo y, además, un
interesante parámetro para la selección de reproductores que estén consecuentemente
más protegidos contra infecciones. Esos compuestos pueden todavía representar una
nueva generación de agentes terapéuticos, con aplicaciones no sólo en la acuicultura,
sino también en la salud humana y veterinaria, en el sentido de constituir una alternativa
biotecnológica para el problema del creciente número de linajes de microorganismos
resistentes a los antibióticos actualmente utilizados.
Proteínas de Reconocimiento Patrón (PRPs)

El mecanismo de reconocimiento de lo no-propio es ciertamente uno de los
mecanismos centrales en el desencadenamiento de una respuesta inmunológica.
Como se dijo anteriormente, los invertebrados, incluyendo los crustáceos, no producen
TVStJ\SHZKLYLJVUVJPTPLU[VHS[HTLU[LLZWLJxÄJHZJVTVSVZHU[PJ\LYWVZUPJVU[PLULU
SHZ JtS\SHZ HU[xNLUVLZWLJxÄJHZ JVTV SVZ SPUMVJP[VZ KL SVZ ]LY[LIYHKVZ :PU LTIHYNV
LSSVZWVZLLUTVStJ\SHZJHWHJLZKLKPMLYLUJPHYLÄJPLU[LTLU[LSVWYVWPVKLSVUVWYVWPV
y, así, desencadenar mecanismos que resultan en la neutralización y/o destrucción de los
microorganismos y parásitos invasores.
183
Las respuestas de defensa en los crustáceos son desencadenadas a partir del contacto
con el patógeno, a través de sus componentes, o hasta con antígenos ambientales.
Esas reacciones son iniciadas por el reconocimiento del agente invasor por proteínas
de reconocimiento patrón, presentes en el hospedero. El término “proteínas de
reconocimiento patrón” o PRPs (del inglés, pattern-recognition proteins), hace alusión
al hecho de que el sistema inmunológico reconoce primariamente patrones moleculares
WYLZLU[LZ LZWLJxÄJHTLU[L LU SVZ TPJYVVYNHUPZTVZ V 7(47Z KLS PUNStZ pathogen-
associated molecular patterns) (Medzhitov y Janeway, 1997; Janeway y Medzhitov,
2002). Las PRPs son moléculas producidas por el hospedero, secretadas hacia el plasma
VSVJHSPaHKHZLUSHZ\WLYÄJPLKLSHZJtS\SHZWYPUJPWHSTLU[LSHZKLSZPZ[LTHPUT\ULX\L
reconocen y se unen a los PAMPs.
En los invertebrados, los principales PAMPs reconocidos por PRPs son los
SPWVWVSPZHJmYPKVZ 37: KL SH Z\WLYÄJPL KL SHZ IHJ[LYPHZ .YHTULNH[P]HZ ` SVZ
peptidoglucanos (PGs) de la pared de las Gram-positivas, los ȕ-1,3-glucanos de la pared
de hongos y el dsRNA (del inglés, double-stranded RNA) producido durante la replicación
de varios virus (Lee y Söderhäll, 2002). Estos PAMPs, característicos de microorganismos
y ausentes en el hospedero, son esenciales para la supervivencia de los microorganismos,
SVX\LZPNUPÄJHX\LLZ[VZISHUJVZKLSHPUT\UPKHKPUUH[HUVW\LKLUZLYL]VS\[P]HTLU[L
descartados por los microbios, para evadirse del reconocimiento por el hospedero.
Una vez dentro del hospedero, los patrones moleculares del patógeno son
reconocidos y unidos a sus respectivas PRPs y en el caso de los crustáceos, inician la
activación principalmente de los hemocitos, desencadenando una respuesta inmune
celular o la producción/liberación de una serie de moléculas inmuno efectoras/
inmuno reguladoras por degranulación o, aún más, por modular la expresión de genes
PUT\UVS}NPJVZLZWLJxÄJVZ-PN\YH
=HYPHZ797ZM\LYVUPKLU[PÄJHKHZ`JHYHJ[LYPaHKHZLUSHOLTVSPUMHKLSVZJY\Z[mJLVZ
tales como la proteína que se une a los LPS o LBP (del inglés, LPS-binding protein), las
proteínas que se unen a los ȕ-1,3-glucanos o ȕGBP y GBP (del inglés, ȕ-glucan binding
proteins), la proteína que se une a ambos LPS y ȕ-1,3-glucanos o LGBP, la proteína
“mas-like” (del inglés, masquerade-like protein) que reconocen varios microorganismos
`]HYPHZJSHZLZKLSLJ[PUHZ3LL`:KLYOpSS3HZKPMLYLU[LZ797ZPKLU[PÄJHKHZLU
los crustáceos hasta el momento se presentan en la Tabla 2.
Proteínas que se unen a los ȕ-1,3-glucanos: ȕGBP y GBP

Las proteínas que reconocen exclusivamente los ȕ-glucanos tienen la capacidad de
unirse a los componentes de la pared celular de los hongos y fueron caracterizadas en
muchas especies animales, denominándose de manera general como ȕGBP y GBP.
En los crustáceos existen por lo menos dos clases diferentes de proteínas que
reconocen y se unen a los ȕ-glucanos. La primera está representada por una lipoproteína
de alta densidad, la ȕGBP (Hall et al., 1995; Yépiz-Plascencia et al., 1998), sintetizada en
el hepatopáncreas (Cerenius et al., 1994; Romo-Figueroa et al., 2004) y constitutivamente
presente en la hemolinfa de estos animales. La segunda clase está compuesta por
pequeñas proteínas, como la GBP (Sritunyalucksana et al., 2002) y la LGBP (Lee et
al., 2000; Roux et al., 2002; Cheng et al. 2005; Du et al., 2007), sintetizadas por los
hemocitos y/o el hepatopáncreas de los crustáceos.
La ȕGBP ya fue aislada y caracterizada en varios crustáceos, como en las langostas
de agua dulce P. leniusculus (Duvic y Soderhäll, 1990; Cerenius et al., 1994), Astacus
astacus y P. clarkii (Duvic y Soderhäll, 1993), en el cangrejo C. maenas (Thörrnqvist
184
;HISH!0KLU[PÄJHJP}U`JHYHJ[LYPaHJP}UKLSHZWYPUJPWHSLZWYV[LxUHZKLYLJVUVJPTPLU[VWH[Y}U
en crustáceos hasta el momento.
PRPs (PAMPs) Año Status Tamaño Referencias

BGBP (ȕ-glucanos)
P. leniusculus 1990 7\YPÄJHKH 100kDa Duvic y Söderhäll
A. astacus 1993 7\YPÄJHKH 95-105kDa Duvic y Söderhäll
P. clarkii 1993 7\YPÄJHKH 100kDa Duvic y Söderhäll
C. maenas 1994 7\YPÄJHKH 110kDa Thörnqvist et al.
F. californiensis 1996 7\YPÄJHKH 100kDa Vargas-Albores et al.
L. stylirostris 1997 7\YPÄJHKH 100kDa Vargas-Albores et al.
L. vannamei 1997 7\YPÄJHKH 100kDa Vargas-Albores et al.
L. vannamei 1998 7\YPÄJHKH 112kDa Yépiz-Plascencia et al.
F. californiensis 1998 7\YPÄJHKH 112kDa Yépiz-Plascencia et al.
L. vannamei 2002 7\YPÄJHKH 100kDa Jiménez-Vega et al.
P. leniusculus 1994 Clonada 4679pb Cerenius et al.
L. vannamei 2004 Clonada 6379pb Romeo-Figueroa et al.
GBP (ȕ-glucanos)
P. monodon 2002 7\YPÄJHKHJSVUHKH 31 kDa/1314pb Sritunyalucksana et al.
LGBP (LPS e ȕ-glucanos)

P. leniusculus 2000 7\YPÄJHKHJSVUHKH 40 kDa/1650pb Lee et al.
L. stylirostris 2002 Clonada 1352pb Roux et al.
L. vannamei 2005 Clonada 1272pb Cheng et al.
F. chinensis 2007 Clonada 1253pb Du et al.
Lectinas (Azúcares)
Varias especies 7\YPÄJHKHZJSVUHKHZ varias Marques y Barracco (2000)
LBP (LPS)
F. californiensis 1993 7\YPÄJHKH 175kDa Lee et al.
P. leniusculus 1993 7\YPÄJHKH 65-80kDa Kopacék et al.
L. schmitti 2002 7\YPÄJHKH 31+34kDa Cominetti et al.
P. monodon 2006 7\YPÄJHKHJSVUHKH 18kDa/709pb Luo et al.
Mas-like (LPS e ȕ-glucanos)

2000 Clonada 3277pb Huang et al.
P. leniusculus 2001 7\YPÄJHKH 134+129kDa Lee y Söderhäll
P. leniusculus 2007 Clonada 1572pb Amparyup et al.
P. monodon
et al., 1994), y en los camarones Farfantepenaeus californiensis (Vargas-Albores et al.,

1996) y L. vannamei (Yépiz-Plascencia et al., 1998; Jiménez-Vega et al., 2002; Romo-
Figueroa et al., 2004).
Bioquímicamente, las ȕGBPs son glicolipoproteínas monoméricas (95 a 112 kDa),
conteniendo en su estructura oligosacáridos ricos en manosa y un alto porcentaje de lípidos
(aproximadamente 50%), siendo los fosfolípidos la clase lipídica predominante (Ruiz-
Verdugo et al., 1997). Estas proteínas presentan dominios semejantes a las glucanasas
bacterianas, pero sin actividad catalítica, además de contener un motivo de adhesión
celular RGD (arginina-glicina-asparagina) que, probablemente, se une a los hemocitos
a través de una proteína transmembranal semejante a la integrina (Sritunyalucksana y
Söderhäll, 2000).
Lubzens et al. (1997) demostraron que la ȕGBP del cangrejo señal era idéntica a una
lipoproteína de alta densidad (LP1) presente en la hemolinfa de los machos y hembras
del camarón Penaeus semisulcatus y que estaba relacionada con el transporte de lípidos
hacia el ovario, en el caso de las hembras. También fue demostrado en camarones, que
la ȕGBP y la HDL (del inglés, high density lipoprotein) eran de hecho la misma proteína
185
(Yépiz-Plascencia et al., 1998). Así, se considera actualmente, que las ȕGBP de los
crustáceos tienen una doble función: transportar lípidos como una HDL y participar en
el sistema inmune como una PRP.
La interacción de la ȕGBP con los ȕ-1,3-glucanos lleva a la formación de un complejo
que se une a (los) receptor(es) de membrana en los hemocitos (Duvic y Söderhäll, 1990;
1992). Luego de esta unión, ocurre la activación celular, que resulta en el estiramiento y
degranulación parcial de los hemocitos granulares (Barracco et al., 1991). La exocitosis
del material granular promueve la liberación de las moléculas del sistema proPO, entre
otras moléculas, ocurriendo una posterior activación de este sistema por los mismos
ȕ-1,3-glucanos (Cerenius et al., 1994; Vargas-Albores et al., 1996; Perazzolo y Barracco,
1997). Fue también demostrado que la ȕGBP puede actuar como una opsonina,
aumentando la fagocitosis in vitro de levaduras por los hemocitos de los cangrejos señal
(Cerenius et al., 1994).
El complejo ȕGBP-ȕ-1,3-glucanos del cangrejo señal P. leniusculus se puede unir en
SHZ\WLYÄJPLKLSVZOLTVJP[VZNYHU\SHYLZH[YH]tZKLSTV[P]V9.+SVX\LZ\NPLYLX\LLZ[H
unión sea mediada por una proteína semejante a la integrina, presente en la membrana
del hemocito, como se mencionó anteriormente. Efectivamente, una proteína de la
familia de las ȕ-integrinas fue aislada de los hemocitos del cangrejo y es una candidata a
receptor de la ȕGBP (Holmblad et al., 1997).
Entre tanto, un receptor de la membrana para ȕGBP fue aislado de los hemocitos del
cangrejo señal por Duvic y Söderhäll (1992), siendo caracterizado como un heterodímero
proteico de 230 y 90 kDa. La interacción con el hemocito ocurre solamente si la ȕGBP
estuviera integrada a los ȕ-1,3-glucanos. Curiosamente, este receptor es el mismo
que se une a la proteína de adhesión celular peroxinectina (tratada adelante), que es
una superóxido dismutasa (SOD) que contiene CuZn (Johansson et al., 1999a), no
perteneciendo por lo tanto a la familia de las integrinas.
Otra proteína que se une a los ȕ-glucanos, es la GBP, recientemente clonada de los
hemocitos del camarón P. monodon (Sritunyalucksana et al., 2002). Esta proteína (39,5
kDa) es constitutivamente expresada en los hemocitos y se une a los ȕ-1,3-glucanos
presentes en curdlan y zymosan, pero no se une a los LPS bacterianos, demostrando su
LZWLJPÄJPKHKLULSYLJVUVJPTPLU[VKLSVZOVUNVZ
Proteínas que se unen a LPS y ȕ-1,3-glucanos: LGBP

PRPs que se unen a ambos, LPS y ȕNS\JHUVZ3.)7ZM\LYVUPKLU[PÄJHKHZLU
crustáceos e insectos y presentan un importante papel en las respuestas inmunes innatas.
Las LGBPs de los crustáceos son proteínas pequeñas (36-46 kDa) producidas en los
hemocitos (Lee et al., 2000; Cheng et al., 2005; Du et al., 2007) y/o en el hepatopáncreas
de estos animales (Roux et al., 2002; Cheng et al., 2005).
La primera LGBP aislada y caracterizada en los crustáceos, fue en el cangrejo señal
P. leniusculus (Lee et al., 2000). Esta LGBP (36 kDa) está presente en los hemocitos,
pero ausente en el plasma y tiene la propiedad de unirse tanto a los LPS como a los
ȕNS\JHUVZWLYVUVHSVZWLW[PKVNS\JHUVZTVZ[YHUKVZ\LZWLJPÄJPKHKWHYHIHJ[LYPHZ
Gram-negativas y hongos. Una vez unida a sus respectivos PAMPs, la LGBP así como la
ȕGBP, lleva a la activación del sistema proPO del cangrejo. En los camarones penaeidos,
existen tres referencias sobre la clonación del gen de la LGBP: en Litopenaeus stylirostris
(Roux et al., 2002), L. vannamei (Cheng et al., 2005) y F. chinensis (Du et al., 2007), con
masas moleculares deducidas de 40, 46 y 44 kDa, respectivamente (Tabla 2).
186
Análisis de las secuencias aminoacídicas de las LBGPs y GBPs de crustáceos,

revelaron que estas proteínas, a ejemplo de las ȕGBPs, tienen dominios semejantes
a las ȕ-glucanasas bacterianas, a pesar de no tener actividad enzimática y poseen
también el dominio RGD de adhesión celular (Lee et al., 2000; Roux et al., 2002; Cheng
et al., 2005; Du et al., 2007). Se cree que esas proteínas han evolucionado a partir
de proteínas semejantes a las glucanasas bacterianas y que durante la evolución han
perdido su actividad catalítica. Entretanto, la propiedad de unirse al patrón molecular
fue conservado, garantizando así su participación en el sistema inmune de estos animales
(Lee et al., 2000). De forma interesante, recientemente fue demostrado en L. vannamei
que la región de la LGBP, necesaria para la unión con los LPS y los ȕ-1,3-glucanos, es
justamente el sitio ȕ-1,3-glucanasa (Cheng et al. 2005).
Así como las otras PRPs descritas anteriormente, las LGBPs participan también en la
activación del sistema proPO de cangrejo señal (Lee et al., 2000) y del L. stylirostris (Roux
et al., 2002). Sin embargo, la proteína del cangrejo señal debe estar simultáneamente
unida a los dos PAMPs para que ocurra una completa activación del sistema proPO (Lee
et al., 2000).
El análisis de la expresión diferencial de la LGBP de L. stylirostris infectados con el
virus de la mancha blanca (WSSV), demostró que ocurre una súper expresión del gen en
respuesta a la infección viral, sugiriendo que la LGBP sea una proteína inducible de fase
aguda, importante no solamente para las infecciones bacterianas, sino también en las
infecciones virales (Roux et al., 2002).
A pesar de que todas las proteínas, LGBP, GBP y ȕGBP tienen dominios RGD de
adhesión celular y sitios semejantes a las glucanasas bacterianas (Cerenius et al., 1994;
Lee et al., 2000; Sritunyalucksana et al., 2002; Romo-Figueroa et al., 2004), las dos
WYPTLYHZKPÄLYLUKLSHȕGBP por no ser lipoproteínas y por presentar un menor tamaño.
A pesar de esto, todas esas PRPs activan el sistema proPO de los crustáceos luego de
unirse a los ȕ-1,3-glucanos.
Proteínas “mas-like” (del inglés, masquerade-like proteins)

La “mas-like” es una proteína de reconocimiento patrón multifuncional descrita en
insectos y crustáceos. En el cangrejo señal P. leniusculus la “mas-like” se une a las bacterias
Gram-negativas y levaduras y, consecuentemente, a los LPS y ȕ-1,3-glucanos, semejante
a la LGBP. Luego del reconocimiento de lo no-propio, esta PRP promueve la activación
del sistema proPO, la adhesión celular y el aumento de la fagocitosis (Huang et al., 2000;
Lee y Söderhäll, 2001). La “mas-like” de P. leniusculus fue así denominada debido a su
similitud con la masquerade de la Drosophila, presente durante su embriogénesis, en el
desarrollo larval y el estadio de pupa (Murugasu-Qei et al., 1995).
La “mas-like” existe en los hemocitos del cangrejo señal bajo una forma inactiva,
como un heterodímero y presenta homología con serino-proteasas, aunque sin actividad
catalítica. La “mas-like” es exocitada de los hemocitos en su forma inactiva y tras unirse
a microorganismos es clivada por una proteasa desconocida, produciendo así varios
fragmentos peptídicos. Uno de ellos promueve la adhesión celular en el cangrejo
señal (Lee y Söderhäll, 2001). Por otro lado, in vitro la “mas-like” funciona como una
opsonina, estimulando la fagocitosis por los hemocitos del cangrejo señal.
Otra clase de “mas-like”, homóloga a las serino-proteasas, fue más recientemente
PKLU[PÄJHKH[HTIPtULUP. leniusculus (Sricharoen et al., 2005) y en P. monodon (Amparyup
et al., 2007b). Estas proteínas hemocitarias tienen una menor masa molecular (42 y 52
kDa, respectivamente) y presentan homología con los factores de activación de la proPO
187
(del inglés, FAPPs) de insectos, a diferencia de la “mas-like” descrita anteriormente, que

parece ser una PRP.
Además de esas PRPs, existen otras en invertebrados, destacándose las proteínas
que se unen a los peptidoglucanos (del inglés, PGRPs) que fueron bien descritos en
insectos (Kang et al., 1998; Ochiai y Ashida, 1999), pero no han sido todavía encontradas
en los crustáceos. Ya fue demostrado en P. monodon que las PGs pueden inducir la
activación del sistema proPO, lo que sugiere la presencia de una PGRP en camarones
(Sritunyalucksana et al., 1999a).
Aglutininas y lectinas
Las lectinas son proteínas sin actividad catalítica, con capacidad de unirse
LZWLJxÄJHTLU[L H SVZ JHYIVOPKYH[VZ KL SH Z\WLYÄJPL KL KPMLYLU[LZ JtS\SHZ PUJS\`LUKV
microorganismos, causando su aglutinación. Esa propiedad deriva del hecho de que estas
moléculas son por lo menos bivalentes, presentando dos o más sitios de unión. Debido
a esta característica, inicialmente se consideró que las lectinas de los invertebrados eran
análogas funcionales de las inmunoglobulinas de los vertebrados, pero hoy se sabe que
son estructural y funcionalmente distintas (Marques y Barracco, 2000). Debido al hecho
que las lectinas, tanto de vertebrados como de invertebrados, son capaces de reconocer
`\UPYZLHSVZHa\JHYLZLZWLJxÄJVZKLSHZ\WLYÄJPLKLWH[}NLUVZLZ[HZTVStJ\SHZZVU
[HTIPtUKLÄUPKHZJVTV797Z
Además de actuar como PRPs en los invertebrados, las lectinas están también
relacionadas con varios procesos biológicos, debido a su interacción con carbohidratos,
como la adhesión celular, opsonización y formación de nódulos (Lee y Söderhäll, 2002).
Algunas lectinas de invertebrados parecen todavía estar implicadas en la activación del
sistema proPO de insectos (Yu et al., 1999) y tener actividad antibacteriana en tunicados
y limúlidos (Suzuki et al., 1990; Kawabata e Iwanaga, 1999).
La mayoría de las lectinas relacionadas con el sistema inmune pertenece a la
superfamilia de las lectinas del tipo-C, cuya actividad biológica es Ca2+-dependiente
y presentan dos dominios para el reconocimiento de carbohidratos (del inglés, CRD)
(Drickamer y Taylor, 1993).
Las lectinas de crustáceos son mucho menos conocidas e investigadas que las de
otros artrópodos, como insectos y limúlidos. En estos dos últimos grupos zoológicos, ya
ZLKLZJYPIP}SHVJ\YYLUJPHKLSLJ[PUHZTS[PWSLZLUSHOLTVSPUMHLZWLJxÄJHTLU[LWHYH
diferentes tipos de microorganismos. Algunas de esas lectinas presentan un amplio
espectro de reconocimiento, se unen tanto a bacterias Gram-positivas como Gram-
ULNH[P]HZTPLU[YHZX\LV[YHZZVUHS[HTLU[LLZWLJxÄJHZYLJVUVJPLUKVJVUÄN\YHJPVULZ
X\xTPJHZLZWLJxÄJHZKLHaJHYLZKLSHZ\WLYÄJPLKL\UKL[LYTPUHKVTPJYVVYNHUPZTV
(Marques y Barracco, 2000).
En los crustáceos, las lectinas son proteínas plasmáticas constitutivas, sintetizadas
generalmente por el hepatopáncreas (Gross et al., 2001; Luo et al., 2006) y que
reconocen principalmente azúcares N-acetilados, en especial derivados del ácido siálico
y sialoglicoconjugados (Marques y Barracco, 2000).
La ocurrencia de lectinas múltiples fue descrita inicialmente en la hemolinfa de la
langosta Homarus americanus, hace más de 30 años (Hall y Rowlands, 1974) y desde
LU[VUJLZV[YHZ]HYPHZSLJ[PUHZOHUZPKVPKLU[PÄJHKHZ`HPZSHKHZLUKPMLYLU[LZJY\Z[mJLVZ
Sin embargo, la mayoría de esos trabajos están restrictos a caracterizar una única lectina
188
y hay muy pocas referencias de lectinas múltiples en la hemolinfa de otros crustáceos

(Marques y Barracco, 2000).
A pesar de los esfuerzos realizados en el aislamiento y caracterización de lectinas
en diferentes crustáceos, poco ha sido el progreso obtenido en cuanto a su papel
inmunológico. Entre los pocos ejemplos se pueden citar las lectinas de P. monodon
(monodina y PmLec) (Ratanapo y Chulavatnanol, 1992; Luo et al., 2006), de F. californiensis
(Vargas-Albores et al., 1993), de Parapenaeus longirostris (Fragkiadakis y Stratakis, 1995)
y de M. rosenbergii (Vázquez et al., 1997), todas capaces de aglutinar diferentes especies
de bacterias, siendo algunas capaces de aglutinar especies patogénicas del género
Vibrio. Sin embargo, la mayoría de los estudios se dirigen al análisis de la capacidad de
las moléculas en aglutinar diferentes tipos de bacterias, pero poco se conoce sobre su
actuación como opsoninas o en otros aspectos de las respuestas inmunológicas.
Recientemente, una lectina del tipo-C, denominada Fclectin (31.8 kDa), fue
PKLU[PÄJHKH LU SVZ OLTVJP[VZ KLS JHTHY}U F. chinensis (Fclectina) (Liu et al., 2007).
A diferencia de la mayoría de las lectinas, esta es sintetizada en el hepatopáncreas.
Interesantemente, la Fclectina es súper-expresada luego de 3 a 12 h de inoculación
con WSSV o bacterias Gram-negativas respectivamente, lo que sugiere una cinética de
expresión distinta, según el agente infeccioso (Liu et al., 2007).
Un grupo de aglutininas que se une a los LPS bacterianos del tipo LBP fue aislada y
caracterizada en el cangrejo señal P. leniusculus (Kopácek et al., 1993a) y en los camarones
F. californiensis (Vargas-Albores et al., 1993), L. schmitti (Cominetti et al., 2002) y P.
monodon (Luo et al., 2006) (Tabla 2). Todas ellas se unen a los LPS, sugiriendo que tienen
un importante papel en el control de infecciones causadas por bacterias Gram-negativas
como las del género Vibrio, que pueden ser patogénicas para camarones. Es importante
resaltar que las LBPs se diferencian funcionalmente de otras PRPs, como las LGBPs que
también reconocen LPS, porque no solamente actúan en el reconocimiento de PAMPs,
sino también causan la aglutinación de las células portadoras de LPS, fenómeno que no
ocurre con las LGBPs.
La LBP de P. leniusculus es una proteína plasmática formada por varias subunidades
(de 65 a 80 kDa) que aglutina fuertemente varias cepas bacterianas Gram-negativas
(Escherichia coli, Salmonella spp., Serratia marcescens) y eritrocitos que en los
vertebrados exponen el ácido siálico (Kopácek et al., 1993a). La LBP del camarón F.
californiensis es una aglutinina plasmática de mayor tamaño (175 kDa) que reconoce y
aglutina diferentes cepas de Vibrio y también eritrocitos de varios vertebrados (Vargas-
Albores et al 7HYHHTIHZ3)7ZSHHJ[P]PKHKOLTVNS\[PUHU[LLZLZWLJxÄJHTLU[L
inhibida por LPS bacterianos.
4\` YLJPLU[LTLU[L \UH 3)7 M\L W\YPÄJHKH ` JHYHJ[LYPaHKH KL SH OLTVSPUMH KL
P. monodon y su gen clonado (Luo et al,Z[HWYV[LxUHM\LPKLU[PÄJHKHJVTV
una lectina tipo-C (PmLec, 18 kDa), presentando una acentuada actividad aglutinante
contra varias bacterias Gram-negativas (, JVSP 7ZL\KVTVUHZ Å\VYLZJLUZ(LYVTVUHZ
hydrophila y Vibrio alginolyticus), además de una fuerte capacidad de opsonización
durante la fagocitosis de E. coli. Es interesante observar que la PmLec no presenta
actividad antibacteriana, ni capacidad de inducir al sistema proPO (Luo et al., 2006).
Receptores Toll y TLR (del inglés Toll-like receptor)

3HZ WYV[LxUHZ V YLJLW[VYLZ ¸;VSS¹ M\LYVU PUPJPHSTLU[L PKLU[PÄJHKVZ LU SH TVZJH
de la fruta Drosophila melanogaster y revelaron tener una importante función en la
determinación del eje dorso-ventral en el desarrollo embrionario de este insecto (Anderson
189
y Nussleinvolhard, 1984). Además de su importante papel en la embriogénesis, los

receptores “Toll” mostraron estar crucialmente implicados en las respuestas inmunológicas
de D. melanogaster (Lemaitre et al., 1996). Más tarde, proteínas semejantes a los receptores
“Toll” de D. melanogasterM\LYVU[HTIPtUPKLU[PÄJHKVZLU]LY[LIYHKVZ`KLUVTPUHKVZ
TLRs (del inglés, Toll-like receptors). Los TLRs están implicados en el sistema inmune
innato de los vertebrados y actúan de forma esencial en el reconocimiento de PAMPs.
Los receptores Toll y TLRs son glicoproteínas transmembranales caracterizadas por
presentar un dominio extracelular rico en residuos de leucina o LRR (del inglés, leucine-
rich repeat) y por un dominio de señalización citoplasmático homólogo al del receptor
de interleucina 1, denominado de TIR (del inglés, Toll/interleucin-1 receptor domain).
Los TLRs de mamíferos tienen regiones de unión a los PAMPs en su dominio LRR
`S\LNVKLSHHJ[P]HJP}UPUK\JLUHSHL_WYLZP}UKLJP[VJPUHZPUÅHTH[VYPHZPTWVY[HU[LZ
como los interferones (revisar sección 1.7.1) y otras moléculas activas de la respuesta
inmune adaptativa (Akira et al ,U THTxMLYVZ `H M\LYVU PKLU[PÄJHKVZ KVJL
TLRs distintos, todos implicados en el reconocimiento directo de PAMPs, como LPS
;39SPWVWYV[LxUHZ;39KZ95(;39ÅHNLSPUH;39+5(*W.;39 `]HYPVZ
componentes virales (TLR7) (ver revisión de Akira et al., 2006).
En D. melanogasterKPMLYLU[LZYLJLW[VYLZ¸;VSS¹M\LYVU[HTIPtUPKLU[PÄJHKVZJVTV
el dToll, el d18W y los dToll3 a dToll9. Sin embargo, apenas los dToll y dToll5 parecen
estar relacionados con la activación de respuestas inmunológicas (Tauszig et al., 2000).
A diferencia de los TLRs de mamíferos, los dToll y dToll5 no tienen regiones de unión
con los PAMPs en el dominio LRR, indicando que estas proteínas de D. melanogaster no
funcionan directamente como proteínas de reconocimiento patrón o PRPs. Sin embargo,
estos Tolls de D. melanogaster son activados indirectamente por proteínas PRPs como las
PGRPs circulantes en la hemolinfa, que reconocen PGs de bacterias Gram-positivas y
JVTWVULU[LZKLSHZ\WLYÄJPLKLOVUNVZ+LZW\tZKLYLJVUVJLYZ\Z7(47ZSHZ7.97Z
de la hemolinfa inician una cascada proteolítica que culmina con el clivaje de una
proteína circulante denominada Spätzle. Una vez clivada, la Spätzle se une directamente
al receptor “Toll”, que inicia una cascada de transducción de señal, que culmina con la
transcripción del péptido antimicrobiano drosomicina (Lemaitre et al., 1996). Además
de actuar en las respuestas contra bacterias Gram-positivas y hongos, la vía “Toll” de
Drosophila parece ser todavía requerida para inhibir la replicación y propagación del
virus DXV (Drosophila X Virus) (Zambon et al., 2005).
9LZWLJ[VHSVZJHTHYVULZHWLUHZT\`YLJPLU[LTLU[LM\LYVUPKLU[PÄJHKVZYLJLW[VYLZ
del tipo “Toll” en las células de los penaeidos L. vannamei (lToll) (Yang et al., 2007) y
P. monodon (PmToll) (Arts et al., 2007). Esos receptores presentan una alta homología
con los “Tolls” de D. melanogaster (dToll y dToll5), del mosquito Anopheles gambiae
(AeToll), de la abeja Apis mellifera (AmToll) y del limulídeo Tachypleus tridentatus (tToll).
Así como las demás secuencias de “Tolls” y TLRs, los “Tolls” de camarones también
[PLULUKVTPUPVZ399`;09JVUZLY]HKVZ3VZ¸;VSSZ¹KLJHTHYVULZPKLU[PÄJHKVZOHZ[H
el momento, no tienen regiones de unión para los PAMPs en el dominio LRR, como
los TLRs de vertebrados, pareciéndose una vez más a los “Toll” conocidos de otros
artrópodos.
Las proteínas “Toll” de camarones son expresadas constitutivamente en diferentes
tejidos y su expresión no parece ser afectada durante las infecciones virales (Arts et al.,
2007). La similitud de estos receptores de camarones con los “Toll” de insectos, que
inducen la transcripción del AMP drosomicina (dToll y AeToll), lleva a la suposición
de que esas proteínas pueden estar también implicadas en la inmunidad innata de los
camarones penaeidos, inclusive en sus respuestas antivirales como en Drosophila. Nada
190
ZL JVUVJL [VKH]xH ZVIYL SH HJ[P]PKHK M\UJPVUHS KL SVZ YLJPtU PKLU[PÄJHKVZ ¸;VSSZ¹ KL
crustáceos. En un futuro próximo, se espera tener una mejor comprensión de su relación
con en el sistema inmune innato de los camarones y su potencial como inmuno marcador
durante las infecciones.
Cascada Proteolítica: sistema de activación de la pro-fenol oxidasa (proPO)

Como se dijo anteriormente, la formación de nódulos y capsulas hemocíticas en
crustáceos es frecuentemente acompañada por una reacción de melanización en la
región más central. La melanización es también observada durante la cicatrización de
heridas, donde la coagulación de la hemolinfa y la migración de los hemocitos al lugar
de la lesión permiten la formación de un tapón celular hasta que una nueva cutícula sea
reconstituida (Figura 6.6).
La biosíntensis de la melanina en los artrópodos es un proceso complejo que
comprende una serie de reacciones químicas en cascada, denominadas “sistema de
activación de la Pro-fenol oxidasa o sistema proPO. Este sistema está compuesto por
varios zimógenos de proteasas, por la Pro-fenol oxidasa, además de PRPs asociadas (Lee y
Söderhäll, 2002) (Figura 6.6). El sistema proPO es reconocido como una de las principales
respuestas inmunoefectoras de los crustáceos desencadenada por componentes de la
Z\WLYÄJPLKLTPJYVVYNHUPZTVZJVTVSVZ37:KLIHJ[LYPHZ.YHTULNH[P]HZ`SVZȕ-1,3-
glucanos de hongos (Cerenius y Söderhäll, 2004).
Durante las infecciones, estos compuestos se unen a receptores de los hemocitos
granulares directamente o a través de PRPs plasmáticas e inducen una degranulación o
exocitosis regulada, con la liberación de varias moléculas inmuno efectoras, entre las
cuales están las moléculas del sistema proPO. Una vez liberadas, ocurre la activación
de este sistema por los propios componentes de los microorganismos presentes en la
hemocele.
La presencia del sistema proPO y de algunas moléculas asociadas en los gránulos
de los hemocitos granulares (HGPs y HGGs) fue especialmente estudiada en el cangrejo
señal P. leniusculus (Cerenius y Söderhäll, 2004) y también en varios camarones como
P. monodon (Kondo et al., 1992), F. californiensis (Hernández-López et al., 1996), L.
stylirostris (Le Moullac et al., 1997) y F. paulensis (Perazzolo y Barracco, 1997).
Análisis moleculares y bioquímicos de la proPO de crustáceos revelaron que esta
proteína (76-78 kDa) presenta similitud con la hemocianina, una vez que también
presentan sitios de unión para el cobre (Sritunyalucksana y Söderhäll, 2000). Además
de ello, las proPOs de camarones presentan una región tiol-éster (GCGWPRHM),
como las proteínas C3 y C4 del sistema del complemento de los vertebrados y las Į2-
macroglobulinas (Aspán et al., 1995; Sritunyalucksana et al., 1999b; Lai et al., 2005; Liu
et al., 2006b).
La activación de la forma inactiva o proPO hacia la enzima activa o fenol oxidasa
(PO), ocurre por la acción de serino-proteasas denominadas enzimas activadoras de la
proPO (del inglés, proPO-activating-cascade enzymes o PPAEs), iniciando una cascada
WYV[LVSx[PJH J\`V WYVK\J[V ÄUHS LZ SH TLSHUPUH -PN\YH ,U JY\Z[mJLVZ \UH 77(,
SSHTHKHWW(M\LW\YPÄJHKH(ZWmU`:KLYOpSS `WVZ[LYPVYTLU[LJSVUHKH>HUN
et al., 2001) a partir de los hemocitos de P. leniusculus. La ppA es sintetizada y mantenida
como un zimógeno (pro-ppA) en los hemocitos, siendo activada luego de su exocitosis,
como consecuencia de una lesión o infección microbiana. Su activación ocurre por un
clivaje proteolítico, por parte de una proteasa aún desconocida (Cerenius y Söderhäll,
2004).
191
La forma PO es una óxido reductasa que cataliza dos reacciones sucesivas: la

primera, de hidroxilación de un monofenol a Ƞ-difenol (actividad monofenoloxidásica)
y, la segunda, de oxidación del Ƞ-difenol a Ƞ-quinona (actividad difenoloxidásica) (Figura
6.7). La producción de o-quinonas resulta en la síntesis de la melanina a través de una
cascada de reacciones químicas intermedias, siendo la mayoría espontánea, no mediadas
por enzimas (Figura 6.7). La producción de quinonas lleva también a la esclerotización
de la cutícula de los crustáceos, fenómeno esencial en los períodos de muda (Söderhäll
y Cerenius, 1998).
Con relación al papel inmunológico del sistema proPO, se conoce que esta vía
genera transitoriamente moléculas altamente tóxicas, como las quinonas, hemiquinonas
(Figura 6.7) y radicales libres de oxígeno, como las propias ROIs, una vez que ocurre
consumo de oxígeno molecular y que llevan a una destrucción de los patógenos invasores.
El pigmento oscuro e insoluble o melanina parece tener una actividad fungistática
(Cerenius y Söderhäll, 2004) y puede todavía funcionar como “scavenger” de radicales
libres (Nappi y Vass, 1993; Nappi y Ottaviani, 2000), minimizando así los efectos
deletéreos de estas moléculas altamente tóxicas para el organismo del hospedero. Debe
ser resaltado que la melanina, per se, no es la molécula inmunoefectora más importante
durante la activación del sistema proPO, siendo los compuestos citotóxicos intermedios
los más efectivos (Nappi y Vass, 1993). De esta manera, la melanización representa, más
LZWLJxÄJHTLU[LLSÄUHSKL\UWV[LU[LWYVJLZVPUT\UVLMLJ[VY
Cabe resaltar que concomitantemente la liberación de los componentes del
sistema proPO, otras varias moléculas son también exocitadas por los hemocitos
inmunoestimulados (Figura 6.6). Una de ellas es la peroxinectina (76 kDa) que es
una peroxidasa, homóloga a la mieloperoxidasa humana y que actúa en la adhesión
celular manteniendo su actividad peroxidásica. Esta proteína gana su actividad biológica
concomitantemente la activación del sistema proPO en el plasma y promueve el
encapsulamiento de parásitos invasores de gran tamaño, luego de unirse al receptor SOD
de la membrana de los hemocitos, mencionado anteriormente (Johansson, 1999b). Por
otro lado, la peroxinectina induce además una fuerte degranulación de los hemocitos,
llevando a la liberación de más compuestos inmuno efectores y consecuentemente a una
HJLU[\HKHHTWSPÄJHJP}UKLSHYLZW\LZ[HPUT\UVS}NPJHKLSOVZWLKLYV6[YHZTVStJ\SHZZVU
también exocitadas durante la activación hemocítica, como la enzima transglutaminasa
(TGasa) que induce el proceso de coagulación, diferentes inhibidores de proteasas, PRPs
como la “mas-like”, AMPs y otras moléculas inmunoefetoras/inmunoreguladoras (Lee y
Söderhäll, 2002; Cerenius y Söderhäll, 2004; Jiravanichpaisal et al., 2006).
La activación del sistema proPO debe, por consiguiente, ser estrictamente regulada
para evitar una activación no deseada o generalizada en el organismo del crustáceo. Para
eso, los animales poseen inhibidores de proteasas en el plasma y/o hemocitos. Entre
ellos podemos destacar la pacifastina (Liang et al., 1997), los inhibidores de la familia
Kazal (Johansson et al., 1994; Jiménez-Vega y Vargas-Albores, 2005; Somprasong et al.,
2006), la serpina (Liang e Söderhäll, 1995) y la Į2-macroglobulina (Hergenhahn et al.,
1988).
,S PUOPIPKVY TmZ LÄJPLU[L KL SH WW( KLS JHUNYLQV ZL|HS LZ SH WHJPMHZ[PUH \UH
proteína plasmática heterodimérica (155-kDa), formada por una cadena leve con nueve
subunidades (inhibidoras de proteasa) y una cadena pesada conteniendo tres transferinas
(Liang et al., 1997). Esta molécula dio origen a una nueva clase de inhibidores de serino-
WYV[LHZHZ KLUVTPUHKH ¸WHJPMHZ[PUHSPRL¹ X\L M\L YLJPLU[LTLU[L PKLU[PÄJHKH [HTIPtU
regulando el sistema proPO de insectos (Simonet et al., 2002).
192
Figura 6.6: Liberación de diferentes efectores

inmunológicos y moléculas inmunoreguladoras,
después de la activación de los hemocitos por
WH[}NLUVZ ;VKH]xH UV LZ[m JVUÄYTHKV ZP SH
TGase es liberada por hemocitos granulares o
hialinos.
Figura 6.7: Reacción de melanización en crustáceos. A: Herida

TLSHUPaHKH ÅLJOH LU LS JHTHY}U Farfantepenaeus paulensis; B:
Principales pasos de la biosíntesis de melanina desencadenados por
la enzima fenoloxidasa (PO) en presencia de substratos fenólicos
(adaptado de Nappi y Vass, 1993).
Otro importante inhibidor de proteasas en crustáceos es la proteína plasmática Į2-

macroglobulina (Į2M), que es constitutivamente sintetizada por los hemocitos de estos
animales (Gross et al., 2001; Rattanachai et al., 2004b). La Į2M es un inhibidor de
proteasas de amplio espectro (serino, aspartato, cisteína y metalo-proteasas) que inhibe
tanto las proteasas del propio hospedero, como aquellas producidas por el patógeno
durante el proceso infeccioso (Armstrong y Quigley, 1999; Armstrong, 2006). Una
característica fundamental de estos inhibidores es la presencia en la molécula de una
región tiol-éster, como ocurre en las proteínas C3 y C4 del sistema del complemento de
los vertebrados.
193
La Į2M de los crustáceos es una glicoproteína homodimérica (380-400 kDa), siendo

aislada y caracterizada en la langosta H. americanus (Spycher et al., 1987), en el cangrejo
señal P. leniusculus (Hergenhahn, et al., 1988) y en el camarón L. vannamei (Góllas-
Galvan et al3HZLJ\LUJPHJVKPÄJHU[LWHYHSHĮ2M de penaeidos fue determinada
muy recientemente en M. japonicus, P. monodon, L. vannamei, L. schmitti y F. paulensis
(Rattanachai et al., 2004b; Lin et al. 2007; 2008; Rosa et al., 2008).
El papel inmunomodulador de la Į2M en los crustáceos, todavía no está bien
establecido. No obstante, se conoce que la Į2M inhibe parcialmente las serino-proteasas
activadoras del sistema proPO del cangrejo señal (Hergenhahn et al., 1988; Aspán et al.,
1990) y proteasas producidas por el hongo Aphanomyces spp., un patógeno conocido
para los cangrejos (Dieguez-Uribeondo y Cerenius, 1998).
Análisis de la expresión génica de la Į2M de crustáceos a través de la técnica de PCR
en tiempo real, revelaron que su expresión es aumentada en las primeras 48 horas de
infección con virus (Tonganunt et al., 2005) o luego del tratamiento de los animales con
LPS (Vaseeharan et al., 2007) o PGs bacterianos (Lin et al., 2007; 2008). Estos hallazgos
son relevantes, ya que sugieren que la Į2M participa de las respuestas inmunológicas,
siendo tal vez capaz de inhibir proteasas de patógenos y/o regular la activación del
sistema proPO con sus moléculas tóxicas, minimizando así la agresión del patógeno y/o
los daños causados a los tejidos del hospedero.
Sistema de Coagulación
La coagulación de la hemolinfa es un mecanismo inmunológico esencial para la
supervivencia de animales invertebrados con un sistema circulatorio abierto o semi-
abierto como los crustáceos. Ella previene tanto la pérdida de la hemolinfa, como la
diseminación de los patógenos por la cavidad corporal del animal.
En los invertebrados son reconocidos dos diferentes mecanismos de coagulación
(Theopold et al., 2004; Jiravanichpaisal et al., 2006). El primero es una cascada
proteolítica activada por componentes microbianos, como LPS y ȕ-1,3-glucanos,
ocurriendo en limulídeos, como en T. tridentatus (Kawabata et al., 1996) y el segundo
es una reacción de coagulación dependiente de la enzima transglutaminasa (TGasa),
ocurriendo en insectos y crustáceos.
En el caso de la coagulación de los crustáceos, un componente clave en el proceso
KL NLSPÄJHJP}U KLS WSHZTH LZ SH WYV[LxUH KL JVHN\SHJP}U *7 X\L MVYTH JVmN\SVZ
estables por medio de una reacción de unión cruzada entre sus moléculas, mediadas
por la TGasa (Figura 6.6) (Martin et al., 1991; Muta e Iwanaga, 1996). Las TGasas son
enzimas Ca2+-dependientes, usualmente compartimentalizadas dentro de los hemocitos
de los crustáceos (Lorand et al., 1979; Greenberg et al., 1991), capaces de formar uniones
covalentes Ȗ-glutamil-İ-lisina (Figura 6.8) entre ciertas proteínas, como la proteína de
coagulación presente en el plasma (Lorand y Conrad, 1984).
En crustáceos, la CP fue aislada y caracterizada en varias especies, entre ellas la
langosta Panulirus interruptus (Fuller y Doolittle, 1971; Doolittle y Riley, 1990), en los
cangrejos P. leniusculus (Kopácek et al., 1993b) e Ibacus ciliatus (Komatsu y Ando, 1998)
y en los camarones P. monodon y M. japonicus (Yeh et al., 1998), L. vannamei (Montaño-
Pérez, et al., 1999) y F. paulensis (Perazzolo et al., 2005).
Las CPs de los crustáceos son lipoproteínas homodiméricas (200 kDa) (Sritunyalucksana
y Söderhäll, 2000). Secuencias aminoacídicas completas de la CP fueron determinadas
en P. leniusculus (Hall et al., 1999), P. monodon (Yeh et al., 1999) y M. japonicus (Cheng
194
et al., 2008), siendo que el RNAm correspondiente es expresado en el hepatopáncreas

de los camarones y en varios otros tejidos (Yeh et al., 2007; Cheng et al., 2008), con
excepción de los hemocitos y de los músculos de los penaeidos. Interesantemente, el
tejido epidérmico sub-cuticular de M. japonicus demostró ser el principal sitio de la
síntesis de la CP, justamente resaltando la importancia de la coagulación durante la muda
del animal, cuando eso se vuelve potencialmente más expuesto a las lesiones y ataques
microbianos (Cheng et al., 2008).
Excepto por la similitud funcional, las CPs de los crustáceos no tienen ninguna
JHYHJ[LYxZ[PJH TVSLJ\SHY LU JVTU JVU LS ÄIYPU}NLUV KL SVZ THTxMLYVZ V JVU LS
coagulógeno de los limúlidos, lo que sugiere que la CP de los crustáceos representa un
tipo distinto de proteína formadora de coágulos (Hall et al., 1999).
Curiosamente, las CPs pertenecen a la clase de las lipoproteínas de densidad muy
alta (VHDL) (Hall et al., 1995; Yépiz-Plascencia et al., 2002) y están evolutivamente
relacionadas con las vitelogeninas (VTG) (Hall et al., 1999; Yeh et al., 1999). La VTG es la
principal precursora de vitelo en hembras ovíparas y no está relacionada con reacciones
de coagulación. Sin embargo, tanto la CP como la VTG, tienen una región similar en lo
dominio D del factor von Willebrand, implicado en la coagulación de la sangre de los
mamíferos (Sadler, 1991).
Defensas antivirales
Como se mencionó anteriormente, las enfermedades virales constituyen actualmente,
la más seria amenaza para la industria de la camaronicultura a nivel mundial y el principal
riesgo para la sostenibilidad de la actividad.
La principal enfermedad viral que afectó la industria del camarón, ocurrió en
las Américas a inicios de los años 80, causada por el virus de la necrosis infecciosa
hipodérmica y hematopoyética (del inglés IHHNV), que resultó en mortalidades masivas.
Otros brotes graves de enfermedades virales siguieron al IHHNV, destacándose el virus
de la cabeza amarilla (del inglés, YHV) en Asia, el virus del síndrome del Taura (del inglés,
TSV) en las Américas y más recientemente el virus del síndrome de la mancha blanca (del
inglés, WSSVX\LHSJHUa}WYVWVYJPVULZJH[HZ[Y}ÄJHZWYPUJPWHSTLU[LLU(ZPHHPUPJPV
KLSVZH|VZ `LUZLN\PKHLUSHZ(TtYPJHZHSÄUHSKLSVZH|VZ -SLNLS,S
WSSV parece ser uno de los virus más desastrosos de la historia de la camaronicultura,
causando un índice altísimo de mortalidad que ocurre hasta el presente y que ha llevado
a pérdidas económicas incalculables (Flegel, 2007). La contribución más urgente y
esperada en la industria de la camaronicultura es indiscutiblemente el control de las
infecciones virales.
En los vertebrados, las infecciones virales inducen a varias respuestas inmunológicas,
que en última instancia buscan controlar la duplicación y propagación de los virus y los
daños celulares causados por ellos. Entre estas respuestas se destacan, (1) la destrucción
de las células infectadas por las células NKs (del inglés, natural killer) y linfocitos T
citotóxicos (CTLs), (2) la producción de anticuerpos neutralizantes para virus, (3) la
inducción de proteínas del sistema interferón (IFN) que activan la trascripción de diversos
genes que protegen las células de los daños causados por los virus, generando un estado
antiviral y, (4) el silenciamiento de genes virales por la vía del RNA de interferencia
(RNAi).
Los crustáceos tienen apenas un sistema inmune innato, como ya se mencionó
anteriormente y por tanto, están desprovistos de una línea celular linfocítica. Siendo así,
sólo pueden contar eventualmente con los dos últimos mecanismos antivirales descritos,
195
una vez que los dos primeros son relacionados con los linfocitos. La ocurrencia de estos
dos últimos mecanismos en crustáceos se presenta a continuación.
Sistema interferón
Vertebrados
En los vertebrados, los interferones (IFNs), son conocidos principalmente por su
capacidad de interferir en la replicación viral y en inducir un estado antiviral en el
hospedero. En la realidad, los IFNs son más que simples proteínas antivirales y ejercen
un amplio espectro de otras funciones biológicas, siendo la mayoría relacionada con el
sistema inmune. En lo referente a la defensa antiviral, apenas los interferones tipo I, IFN-Į
e IFN-ȕ, son de real importancia (Samuel, 2001). En mamíferos las infecciones virales
inducen a la producción de IFN-Į/ȕ, que a su vez estimulan la expresión de una serie de
genes participantes en las respuestas antivirales. En las infecciones virales, las células
KLSOVZWLKLYVYLJVUVJLU7(47ZLZWLJxÄJVZH[YH]tZKLYLJLW[VYLZJLS\SHYLZLZWLJxÄJVZ
principalmente las proteínas de la familia Toll o TLRs, ya comentadas anteriormente,
que tienen un papel crucial en la inmunidad innata, iniciando la primera línea de
defensa contra los patógenos (Uematsu y Akira, 2006; 2007). Los TLRs de mamíferos son
OVT}SVNVZHSHWYV[LxUH;VSSPUPJPHSTLU[LPKLU[PÄJHKHLUDrosophila y que induce una
respuesta inmunológica contra los hongos (Lemaitre et al., 1996). Entre los diferentes
TLRs de mamíferos, algunos reconocen particularmente PAMPs de virus, siendo TLR3
uno de los mas importantes, por reconocer el dsRNA, producido durante la replicación
de muchos virus de RNA y DNA.
Recientemente, fue descrito que las enzimas citoplasmáticas del tipo RNA-
helicasa RIG-I (del inglés, retinoic acid inducible gene I) y Mda5 (del inglés, melanoma
differentiation-associated gene 5) también son capaces de reconocer dsRNA (Fujita et al.,
2007; Andrejeva et al., 2004).
Luego de la internalización de los virus en la célula, sus ácidos nucleicos son
liberados por el sistema endósomo/fagolisósomo y reconocido por los diferentes
TLRs. Los TLRs activan una compleja cascada de señalización intracelular, induciendo
la transcripción de una variedad de genes, incluyendo los IFN-Į/ȕ (Uematsu y Akira,
2006; 2007). Por su parte, los IFN-Į/ȕ, desencadenan la activación de múltiples vías
PU[YHJLS\SHYLZX\LPU[LYÄLYLUJVUT\JOHZKLSHZL[HWHZKLSJPJSVKL]PKHKLSVZ]PY\Z
SPTP[HUKV SH HTWSPÄJHJP}U ` LS L_[LUKPTPLU[V KL SVZ ]PY\Z H[LU\HUKV HZx LS WYVJLZV
infeccioso (Guidotti y Chisari, 2001). Los IFNs secretados participan en el ciclo de
activación autocrina/paracrina, mediante la activación de la señalización intracelular
JAK/STAT (del inglés, kinase/signal transducer and activator of transcription), que resulta
LUSHPUK\JJP}UKLTS[PWSLZNLULZX\LJVKPÄJHUKP]LYZHZWYV[LxUHZPTWSPJHKHZLUSHZ
respuestas antivirales. Entre ellas se destacan la PKR (del inglés, serine/threonin protein
kinase), la OAS (del inglés, 2´-5´-oligoadenylate synthetase), la RNase L, la ADAR (del
inglés, 95(ZWLJPÄJ HKLUVZPUL KLZHTPUHZL) y la Mx (del inglés, myxovirus-resistance
protein GTPase). Estas proteínas afectan principalmente la multiplicación de los virus
LU SH JtS\SH PUMLJ[HKH NLULYHUKV \U LZ[HKV HU[P]PYHS PULZWLJxÄJV LU SHZ JtS\SHZ KLS
hospedero (Samuel, 2001).
Camarones
Hasta muy recientemente, las proteínas del sistema IFN eran consideradas moléculas
presentes desde los cordados inferiores hasta los mamíferos (Krause y Pestka, 2005),
no encontrándose en los invertebrados, principalmente en el ramo de los protostomios
196
que incluye los crustáceos. Además, en los genomas completos disponibles de varios
invertebrados, como el del nemátodo Caenorhabditis elegans (TCSC, 1998), de la mosca
de la fruta D. melanogaster (Adams et al., 2000), del mosquito de la malaria A. gambiae
(Holt et al., 2002) y de la abeja A. mellifera (THGSC, 2006), no fueron encontradas
secuencias génicas homólogas para IFNs. Sin embargo, recientemente la expresión
de una proteína homologa al IFN-Į de los mamíferos fue reportada por primera vez
en un invertebrado, en los hemocitos del penaeido M. japonicus (He et al., 2005).
Interesantemente, esta proteína denominada IntlP (del inglés, interferon-like protein;
GenBank AY695938) sólo se expresa en camarones supervivientes a la infección por
WSSV y no en camarones sanos.
La determinación de este producto génico en 2005 provocó gran optimismo, una
vez que implicaba en la presencia de un sistema antiviral en crustáceos basado en IFN,
como en los vertebrados. Los autores produjeron IntlP en un sistema recombinante y
mostraron que esta proteína tenía de hecho una actividad antiviral, una vez que confería
protección celular contra los efectos citopáticos causados por el virus del pez SGIV (del
ingles, Singapore grouper iridovirus).
Infelizmente, los resultados obtenidos por He et al. (2005) parecen no corresponder
a la realidad una vez que en los análisis moleculares recientes realizados por nuestro
grupo fue demostrado que el IntlP corresponde de hecho a una cadena ȕ de la porción
F0 de la ATP sintetasa mitocondrial y no a una proteína del sistema interferon. Se trata
por consiguiente de una proteína expresada constitutivamente, independiente o no de
la presencia de infecciones virales y que fue detectada en varios penaeidos (Barracco y
Rosa, in press).
Se debe resaltar, que a pesar de la aparente ausencia de moléculas homólogas a los
0-5ZKLTHTxMLYVZLUWLUHLPKVZSHPUK\JJP}UKL\ULZ[HKVHU[P]PYHSPULZWLJxÄJVM\L
inequívocamente mostrado en los camarones L. vannamei, un poco antes (Robalino et
al., 2004) del reporte de la IntlP por He et al. (2005). Robalino et al. (2004) demostraron
X\L SH PU`LJJP}U KL ZLJ\LUJPHZ PULZWLJxÄJHZ KL KZ95( LU JHTHYVULZ JH\ZHIH \U
H\TLU[VZPNUPÄJH[P]VKLZ\YLZPZ[LUJPHHSHPUMLJJP}UWVYKVZ]PY\ZUVYLSHJPVUHKVZLS
TSV y el WSSV. Estos resultados mostraron, por primera vez en crustáceos, la inducción
KL\ULZ[HKVHU[P]PYHSPULZWLJxÄJVPUKLWLUKPLU[LKLSHZLJ\LUJPHKLKZ95(PU`LJ[HKH
y por tanto muy semejante al estado antiviral producido por los IFNs de mamíferos.
Poco después, Westenberg et al. (2005) demostraron que también pequeños RNAs de
doble cadena de interferencia (siRNA: del inglés, small interference RNA) eran capaces
de inducir una protección antiviral. Estos resultados, aliados a la existencia de receptores
Toll en los hemocitos de camarones L. vannamei (Yang et al., 2007) y P. monodon (Arts
et al., 2007) llevaron a la suposición natural de la existencia de citocinas semejantes
a IFNs en camarones. En contraposición a esta idea, está el hecho de la ausencia de
secuencias génicas con homologías para IFNs en los genomas completos de insectos,
ÄSVNLUt[PJHTLU[LYLSHJPVUHKVZJVUSVZJY\Z[mJLVZ(U[LLZ[VZYLZ\S[HKVZLZYHaVUHISL
suponer que citocinas análogas y no homólogas a los IFNS de vertebrados, deben existir
LUJHTHYVULZ`ZLYxHUSHZYLZWVUZHISLZWVYSHWYVK\JJP}UKLSLZ[HKVHU[P]PYHSPULZWLJxÄJV
relatado por los autores citados.
3H PKLU[PÄJHJP}U KL LZ[HZ JP[VJPUHZ [VKH]xH UV KLZJYP[HZ LU JY\Z[mJLVZ SSL]HYm
ciertamente a una mayor comprensión de los mecanismos antivirales de los camarones
y puede abrir nuevas perspectivas para la estimulación de un estado antiviral general
en camarones de cultivo, buscando un mayor control de las apariciones de infecciones
virales.
197
Sistema RNA de interferencia (RNAi)

Además de inducir al sistema IFN en los vertebrados, el patrón molecular dsRNA viral
es también capaz de desencadenar otras vías múltiples intracelulares que también llevan
a otras respuestas antivirales. Entre ellas, se destaca el mecanismo de silenciamiento
post-transcripcional de genes, conocido por RNA de interferencia o RNAi (Hannon et al.,
2002, Robalino et al., 2007a). En este proceso el dsRNA desencadena la destrucción de
RNAm homólogos a su secuencia. El RNAi representa un mecanismo de defensa natural
contra virus y transposones, presente en los diferentes seres vivos desde plantas hasta
mamíferos (Hannon, 2002).
En animales, este mecanismos fue primeramente descrito en el nemátodo C. elegans.
(Fire et al., 1998). De forma resumida, la activación de estos sistemas se inicia por el
procesamiento de precursores largos de dsRNA en RNAs pequeños de 21-25 pb (siRNAs
y miRNAs) por la enzima Dicer semejante a la RNase III (Hamilton y Baulcombe, 1999).
,Z[VZ WLX\L|VZ 95(Z WYVWVYJPVUHU SHZ ZLJ\LUJPHZ LZWLJxÄJHZ WHYH \U JVTWSLQV KL
silenciamiento multiprotéico inducido por el RNA (RISC), que dirige una degradación
LZWLJxÄJHVSHYLWYLZP}UKLSH[YHK\JJP}UKL95(TJVUYLNPVULZJVTWSLTLU[HYPHZHSH
secuencia de dsRNA desencadenante (Robalino et al., 2007a).
Diferente del sistema IFN, que es inducido inesperadamente por cualquier
secuencia de dsRNA (patrón molecular), la protección antiviral basada en la vía RNAi
LZ KL ZLJ\LUJPH LZWLJxÄJH 0U[LYLZHU[LTLU[L SVZ LUZH`VZ YLHSPaHKVZ LU C. elegans
muestran que el silenciamiento post-transcripcional vía RNAi, puede ser inducido
experimentalmente tanto por inyección de dsRNA, como por suministro vía oral o por
expresión transgénica (Grishok, 2005). De acuerdo con Robalino et al. (2007a), la
capacidad de la célula en detectar e interiorizar dsRNA, como fue demostrado en C.
elegans, se extiende también a otros invertebrados como D. melanogaster (Goto et al.,
2003) y el camarón L. vannamei.
En L. vannamei, Robalino et al. (2005) demostraron en un trabajo elegante e
inequívoco, la ocurrencia de una protección antiviral, prácticamente completa contra
PUMLJJPVULZ WVY >::= ` WVY ;:= TLKPHU[L PU`LJJP}U KL ZLJ\LUJPHZ LZWLJxÄJHZ KL
KZ95(WHYHHTIVZ[PWVZKL]PY\Z+LMVYTHZLTLQHU[LZLJ\LUJPHZLZWLJxÄJHZKLKZ95(
fueron también capaces de suprimir la replicación del virus YHV en células en cultivo de
P. monodon (Tirasophon et al., 2005).
Con base en lo anterior, el mecanismo antiviral mediado por RNAi viene asumiendo
un papel especial en las respuestas antivirales de los crustáceos, una vez que su
LÄJPLUJPH`LZWLJPÄJPKHKM\LYHUJSHYHTLU[LKLTVZ[YHKHZLUWLUHLPKVZPUMLJ[HKVZWVY
diferentes virus. Además, su inducción por dsRNA vía sistémica (Robalino et al., 2005)
y eventualmente por vía oral, implica una atrayente posibilidad de desarrollar terapias
antivirales basadas en dsRNA, de forma compatible con la camaronicultura.
Apoptosis celular: ¿mecanismo antiviral o pro-viral?

La muerte celular programada o apoptosis, es un proceso bien conocido, con
implicaciones variadas en la regulación de la homeostasis de un organismo, actuando
tanto en el desarrollo embrionario, como en el control de los tejidos en general y también
LUSHZYLZW\LZ[HZPUT\UVS}NPJHZJVU[YHSVZ]PY\Z,ZLUZx\UTLJHUPZTVÄSVNLUt[PJHTLU[L
antiguo y bien conservado entre los diferentes grupos de seres vivos.
La inducción de apoptosis se inicia en respuesta a una variedad de estímulos,
incluyendo las infecciones virales y envuelve varias alteraciones morfológicas celulares,
como la condensación de la cromatina, la fragmentación del núcleo, el blebbing de
198
FIgura 6.8: Reacción de coagulación en crustáceos, mediada por la formación

de ligaciones cruzadas entre resíduos de lisina y glutamina de las proteínas de
coagulación, a través de la acción de la TGase y calcio
Figura 6.9: Apoptosis celular. Representación de la apoptosis de una célula, con la formación de cuerpos apoptóticos endocitados
por una célula saludable (A). Núcleos apoptóticos (B) y no-apoptóticos (C) de hemocitos de L. vannamei infectados con el virus de
la mionecrosis infecciosa (IMNV), teñidos con bis-benzimida.
SH TLTIYHUH LS HJOPJHTPLU[V JLS\SHY ` ÄUHSTLU[L SH MYHNTLU[HJP}U KL SH JtS\SH LU
pequeñas vesículas revestidas por la membrana, denominadas cuerpos apoptóticos,
que son en general rápidamente fagocitados por las células vecinas (Figura 6.9). Las
alteraciones bioquímicas subyacentes a estas alteraciones morfológicas, incluyen la
activación de enzimas nucleasas y proteasas, dentro de las cuales se destaca la familia
de las caspasas. Éstas tienen un papel crucial en el proceso apoptótico, pues catalizan
muchos de los diferentes pasos en la muerte celular.
4\JOHZ WYV[LxUHZ ]PYHSLZ HS[LYHU SH ÄZPVSVNxH JLS\SHY ` WYVWVYJPVUHU ZL|HSLZ
celulares que inducen la muerte celular. Debe ser resaltado que la simple inducción
de la apoptosis en estadio precoz de la infección viral, puede limitar la producción de
partículas virales y reducir o eliminar la propagación de la progenie viral para otros
tejidos. Sin embargo, muchos virus consiguen retardar el proceso apoptótico, matando
SHZJtS\SHZHWLUHZLULSÄUHSKLSJPJSVPUMLJJPVZV9V\SZ[VUet al., 1999).
3HHWVW[VZPZJLS\SHYLULZ[HKPVÄUHSKLSJPJSVKLSHYLWSPJHJP}U]PYHSVMYLJLT\JOHZ
ventajas a los virus. Durante este proceso, todo el contenido celular, incluyendo la
199
progenie del virus, es empacado en los cuerpos apoptóticos. Los virus son así indetectables
para el sistema inmune, estando protegidos dentro de los cuerpos apoptóticos. Evitan
KLLZ[HTHULYHSHZYLZW\LZ[HZPUÅHTH[VYPHZ`Z\PUHJ[P]HJP}UWVYHU[PJ\LYWVZ`WYV[LHZHZ
del hospedero. Estos cuerpos apoptóticos, alojando innumerables virus replicados, son
enseguida rápidamente fagocitados por las células vecinas e irónicamente garantizan la
propagación y la infección viral. O sea, la inducción de una apoptosis tardía parece ser
una óptima estrategia de propagación para el virus que evolutivamente no desarrollaron
todavía defensas anti-apoptóticas u otros mecanismos de evasión inmunológica (Roulston
et al., 1999).
En camarones, la inducción de la apoptosis en infecciones virales viene siendo
activamente descrita en estos últimos años. En P. monodon infectados por WSSV
(Sahtout et al., 2001; Wongprasert et al., 2003) o por YHV (Khanobdee et al., 2002)
ocurre un aumento progresivo de la apoptosis hasta niveles muy altos, comprometiendo
así varios tejidos y pareciendo ser la principal causa de la muerte de los camarones.
También en M. japonicus infectados por WSSV, la incidencia de la apoptosis se mostró
muy alta, resultando en elevadas mortalidades de los animales (Wu y Moroga, 2004).
Estas referencias sugieren que en las infecciones virales severas en los camarones, ocurre
la inducción de una apoptosis tardía, llevando una fuerte propagación de la progenie
viral y resultando en la muerte del camarón por exceso de apoptosis en sus tejidos.
4\` YLJPLU[LTLU[L M\LYVU PKLU[PÄJHKHZ ` JSVUHKHZ JHZWHZHZ LU SVZ JHTHYVULZ
Penaeus merguiensis (Phongdara et al., 2006) y P. monodon (Wongprasert et al., 2007)
y en ambos animales estas proteasas son inducidas durante las infecciones de WSSV. La
relación apoptosis-infección viral en camarones será mejor explorada más adelante, en
el ámbito del concepto de acomodación viral.
Concepto de acomodación viral en camarones

Una forma alternativa para enfrentar los brotes virales y el control de infecciones
]PYHSLZLUJHTHYVULZZLYLÄLYLHSJVUJLW[VKLSHHJVTVKHJP}U]PYHSWYVW\LZ[VWVY-SLNLS
en 1998 y recientemente actualizado por el mismo autor (2007). Este concepto propone
que los crustáceos se adaptan a los nuevos virus patógenos que surgen, desarrollando
\UH LZWLJPL KL TLTVYPH LZWLJxÄJH X\L PTWPKL LS TLJHUPZTV KL HWVW[VZPZ PUK\JPKV
por el virus. La propuesta se basa en el hecho que luego de brotes virales graves en
los cultivos de camarones, la severidad del problema regularmente se atenúa de forma
rápida, en términos evolutivos (cerca de 1 a 2 años) a pesar de haber una alta prevalencia
de estos virus en camarones de apariencia saludable. Todo indica que los camarones
supervivientes desarrollan una tolerancia a los virus y se vuelven portadores de infección
persistente, sin ningún efecto negativo aparente o signo de enfermedad. Esta situación
contrasta con el concepto de resistencia viral de los vertebrados, que implica en una
eliminación/depuración del agente causante de la infección por los supervivientes que
se vuelven resistentes a una nueva re-infección. La condición de tolerancia adquirida
por los camarones supervivientes, permanece por toda su vida y es transferida en baja
dosis para toda su progenie que también desarrolla infecciones virales persistentes, sin
todavía desencadenar la enfermedad.
Este concepto encuentra soporte en el hecho de que las infecciones dobles, triples y
múltiples son frecuentemente detectadas en camarones de apariencia saludable. Flegel
(2007) sugiere que las infecciones persistentes actúan como una especie de “memoria”,
que lleva a una disminución LZWLJxÄJH de la severidad de la enfermedad a través de
la reducción de la apoptosis inducida por el virus. Esta hipótesis se basa en el hecho
ya mencionado que los niveles de apoptosis aumentan drásticamente en camarones
200
moribundos durante los brotes virales, pudiendo llegar a valores muy altos (hasta 40% de
muerte celular, Sahtout et al., 2001) y que la muerte del camarón sería una consecuencia
de este exceso de apoptosis.
El concepto de acomodación viral propone que el camarón coexiste con los
virus sin haber efectos negativos, debido a un proceso combinado virus-hospedero,
que comprende la reducción del proceso apoptótico en el hospedero inducido
por el virus. Este concepto fue reforzado, al ser evidenciado que los camarones sin
signos de la enfermedad, pero con infección viral persistente, no presentan apoptosis
en las células infectadas (Wongprasert et al., 2003). Sin embargo, los mecanismos
moleculares subyacentes a la tolerancia a los virus patógenos por el camarón, son
todavía desconocidos y probablemente distintos de la tolerancia inmunológica de los
]LY[LIYHKVZ7VYV[YVSHKVMHS[H[HTIPtUJVUÄYTHYZPLZ[HHWHYLU[Ltolerancia adquirida
es efectivamente provocada por una reducción/supresión de apoptosis, o si es debida a
otros procesos celulares/moleculares de control viral todavía desconocidos.
Otros mecanismos antivirales

Además de las defensas antivirales presentadas, otros mecanismos antivirales
fueron también descritos en crustáceos, siendo algunos mencionados a continuación.
Recientemente, una proteína con propiedad antiviral fue descrita en la hemolinfa de P.
monodon y denominada PmAV (Luo, 2003; 2007). La PmAV mostró una fuerte actividad
contra el virus de peces SGIV ya mencionado anteriormente, siendo su expresión inducida
en respuesta a la infección por el WSSV en P. monodon.
Fue también recientemente referenciado, que el silenciamiento del ALF en el cangrejo
señal P. leniusculus]xH95(PYLZ\S[HLU\UH\TLU[VZPNUPÄJH[P]VKLZ\Z\ZJLW[PIPSPKHK
al WSSV. Estos resultados resaltan el papel de este AMP de amplio espectro también en
las defensas antivirales de crustáceos, todavía de forma desconocida (Liu et al., 2006a).
Por otro lado, Pan et al. (2000) reportaron que extractos de varios tejidos de crustáceos
JHUNYLQVZ`JHTHYVULZWYLZLU[HIHUHJ[P]PKHKHU[P]PYHSZPNUPÄJH[P]HZJVU[YHKPMLYLU[LZ
virus de interés médico. Estas moléculas y su mecanismo de acción no son todavía
conocidos, así como su papel antiviral en los propios crustáceos.
-PUHSTLU[L M\L KLZJYP[V YLJPLU[LTLU[L X\L SH OLTVJPHUPUH W\YPÄJHKH KL SH
hemolinfa de P. monodon tiene actividad antiviral contra virus de peces (Zhang et al.,
2004). Estos resultados, parecen bastante inconsistentes, una vez que la hemocianina
es la molécula más abundante de la hemolinfa de los crustáceos, pudiendo representar
90-95% del total de proteínas hemolinfáticas y a pesar de esta abundancia, las infecciones
virales ocurren en los camarones.
Mecanismos de evasión viral

En vertebrados, luego de la entrada de los virus en el organismo, éstos son generalmente
reconocidos como partículas extrañas e inician una serie de respuestas inmunológicas
que tratan de impedir su entrada en las células, su replicación y su propagación. Luego
de su reconocimiento, ocurre en el hospedero una cascada de respuestas celulares y
humorales que incluyen la activación de células NK y de linfocitos T citotóxicos (CTLs), la
WYVK\JJP}UKLHU[PJ\LYWVZLZWLJxÄJVZUL\[YHSPaHKVYLZSHWYVK\JJP}UKL]HYPHZJP[VJPUHZ
señalizadoras, como los IFNs, que interactúan con los linfocitos y suprimen o expanden
sus funciones inmunológicas.
Los virus pueden utilizar diferentes mecanismos para evadirse de las defensas
inmunológicas del hospedero en el caso de los vertebrados, siendo las principales: (1)
201
la modulación de las funciones del complejo mayor de histocompatibilidad (del inglés,

MHC) que presenta los antígenos virales, (2) la inhibición/modulación de diferentes
quimiocinas y citocinas señalizadoras incluyendo los IFNs, (3) la evasión de los CTLs y
NK, (4) la inhibición de la apoptosis y (5) la interferencia con la vía RNAi (Abbas et al.,
2007).
En los crustáceos, los mecanismos de evasión viral no son todavía conocidos,
aunque deben incluir la inhibición/modulación de varias respuestas inmunológicas como
la activación del sistema proPO, la expresión de citocinas implicadas en la respuesta
antiviral (todavía desconocida), la expresión de moléculas antivirales como la PmAV y
ALF, la expresión de PRPs o otros receptores celulares utilizados en la interiorización del
virus y la interferencia con la vía RNAi.
Entre los mecanismos de evasión viral en los camarones, los más destacados
actualmente son el retardo/supresión del proceso apoptótico en la célula infectada y el
silenciamiento de los productos génicos virales, vía-RNAi, como se explicó anteriormente.
El conocimiento de los mecanismos moleculares subyacentes a estos dos procesos que
se encuentran en estudio actualmente, deberán proporcionar en un futuro próximo,
herramientas útiles para el control de las infecciones virales en los camarones.
6.2 Inmunoestimulantes
El gran interés en compuestos inmunoestimulantes surgió de la necesidad de tratar el
cáncer en los humanos, buscando compuestos capaces de activar las células del sistema
inmunológico (macrófagos, células NK, linfocitos B y T), para aumentar su capacidad
de destruir los tumores. Por otro lado, además de proporcionar una mayor protección
contra los tumores, la activación de las células inmunológicas lleva todavía a una mayor
resistencia a las infecciones por diferentes microorganismos, como virus, bacterias,
hongos y otros parásitos.
Sustancias inmunoestimulantes están siendo obtenidas a partir de varias fuentes
naturales y también por síntesis química con base en la estructura molecular de los
propios productos naturales. Entre estos compuestos, se encuentran muchos derivados
de microorganismos o de algas, destacándose los componentes de la pared celular de
diferentes bacterias, hongos, microalgas y macroalgas. Los principales principios activos
de estos componentes capaces de generar una inmunoestimulación son: fragmentos de
peptidoglucanos (PGs), lipopolisacáridos (LPS), lipopéptidos, polisacáridos sulfatados,
ȕNS\JHUVZ HJPSVSPNVWtW[PKVZ ` WtW[PKVZ IHJ[LYPHUVZ LZWLJxÄJVZ YL]PZP}U KL :VUN `
Huang, 2000).
Con relación a los camarones, muchas sustancias descritas como inmunoestimulantes
han sido utilizadas con el propósito de aumentar la resistencia natural, en vista de la
imposibilidad de vacunar estos animales. Sin embargo, existe una falta casi completa
de información sobre el mecanismo de acción de estos compuestos a nivel del sistema
PUT\ULKLSVZJHTHYVULZHKLTmZKLUVOHILYJVUZLUZVZVIYLZ\YLHSLÄJHJPH`ZVIYL
la reproducibilidad de los resultados.
Está bien establecido que la mejor forma de prevenir las infecciones en los cultivos
de camarones, depende esencialmente de las buenas prácticas de manejo, que incluyen
una buena calidad del agua, adecuada densidad poblacional, buena nutrición y
reducción de los factores ambientales potencialmente estresantes (principalmente las
variaciones bruscas de salinidad, temperaturas y oxígeno). El uso de sustancias capaces
de aumentar la inmunocompetencia de los camarones, en paralelo a un buen manejo
202
del cultivo, apunta ciertamente como una herramienta promisoria en la búsqueda de una
mayor protección inmunológica contra el desarrollo de infecciones.
Existe una real necesidad de maximizar la inmunocompetencia de los camarones
cultivados, minimizando el uso de agentes terapéuticos químicos, como antibióticos, que
contaminan la carne del animal y el ambiente y también inducen el aparecimiento de
microorganismos resistentes.
Muchas sustancias consideradas inmunoestimulantes han sido utilizadas en los
cultivos de camarones, para aumentar su resistencia inmunológica y sería imposible
J\IYPYLULZ[LJHWx[\SVSHPUÄUPKHKKLYLMLYLUJPHZX\LL_PZ[LUHLZ[LYLZWLJ[V,U[YLSVZ
compuestos más utilizados en los cultivos se destacan los ȕ-1,3/1,6-glucanos de hongos
o algas, PGs de bacterias Gram-positivas, LPS de bacterias Gram-negativas, polisacáridos
sulfatados de algas y algunas proteínas virales (Song y Huang, 2000 y Smith et al.,
2003). Entre estos inmunoestimulantes, los ȕ-glucanos son tal vez los más ampliamente
utilizados para camarones y los presumiblemente más inmuno efectivos y compatibles
con la práctica de la camarinocultura (revisión de Smith et al., 2003).
(KLTmZKLLZ[VZJVTW\LZ[VZKLSHZ\WLYÄJPLKLTPJYVVYNHUPZTVZ`KLHSNHZV[YVZ
productos también se muestran aparentemente inmuno efectivos para los camarones,
como los extractos de diferentes hierbas (Citarasu et al., 2006), bacterinas (bacterias,
WYPUJPWHSTLU[L ]PIYPVZ PUHJ[P]HKHZ WVY JHSVY MVYTVS V SPVÄSPaHKHZ WYVIP}[PJVZ `
suplementos nutricionales (astaxantina y ácido ascórbico polifosfatado) (Song y Huang,
2000). Varios de estos compuestos son actualmente vendidos comercialmente, otros están
LUMHZLL_WLYPTLU[HS`V[YVZ[VKH]xHUVJ\LU[HUJVUÄUHUJPHTPLU[VWHYH\UHWYVK\JJP}U
comercial (Smith et al., 2003).
Los inmunoestimulantes son usualmente utilizados en los cultivos de camarones
sobre formas de baño (inmersión de los animales), como suplemento en la dieta o, más
YHYHTLU[L ZVIYL MVYTH KL PU`LJJP}U HWHYLU[LTLU[L TmZ LÄJHa :L [VYUH L]PKLU[L
que entre estos métodos, la adición del inmunoestimulante en la ración, es más viable
para la utilización en las granjas de cultivo. Las otras dos formas de administración
(inyección y baños) son menos viables, pero pueden ser útiles para el tratamiento de
larvas y reproductores, o para experimentos en laboratorio cuyo principal objetivo sea
comprender el mecanismo de acción de estos compuestos.
Se debe resaltar que el efecto inmunoestimulante real de estos productos, es todavía
bastante controvertido y poco fundamentado, dado que varios trabajos relatan resultados
opuestos sobre el efecto de un mismo inmunoestimulante. Los buenos resultados
obtenidos en algunos casos, no son muchas veces reproducibles. Como ejemplo entre
muchos, se puede citar el uso de los ȕNS\JHUVZX\LLUHSN\UVZJHZVZJVUÄLYLULMLJ[VZ
ILUtÄJVZWHYHSVZJHTHYVULZ[YH[HKVZH\TLU[VKLSKLZLTWL|VLPUT\UVLZ[PT\SHJP}U
(Sung et al., 1996) y en otros, no afecta o hasta perjudica a los animales (Schlolz et
al., 1999; Sritunyalucksana et al., 1999a). La comprensión del mecanismo de acción
de estos productos, es por lo tanto de crucial importancia para que su uso pueda ser
efectivamente validado.
Otro punto importante que debe ser considerado, es referente a la administración
de los inmunoestimulantes en la dieta de los camarones. La cuestión es: ¿Cómo explicar
la resistencia de estos compuestos a la digestión por las enzimas del tracto digestivo o
su absorción aparentemente intacta por el epitelio/cutícula del intestino para llegar a
SHOLTVSPUMHHÄUKLHJ[P]HYLSZPZ[LTHPUT\UVS}NPJVKLSJHTHY}U&(S[LYUH[P]HTLU[L
¦L_PZ[LU YLJLW[VYLZ LZWLJxÄJVZ V TVStJ\SHZ ZL|HSPaHKVYHZ WYLZLU[LZ LU LS PU[LZ[PUV
203
J\[xJ\SH JHWHJLZ KL YLJVUVJLY LZWLJxÄJHTLU[L WH[YVULZ TVSLJ\SHYLZ LU LZ[VZ

PUT\UVLZ[PT\SHU[LZ`[YHUZTP[PYSHZL|HSPaHJP}UWHYHSHOLTVSPUMH&
Debe ser claramente observado, que la búsqueda de una activación de las respuestas
inmunológicas en el camarón tratado con inmunoestimulantes, no es deseable como
forma de prevenir infecciones. ¿Cual sería el propósito de activar el sistema inmune del
camarón, induciendo una lisis y/o degranulación de sus hemocitos, con liberación de
[VKVZ\HYZLUHSPUT\UVS}NPJVLU\UTVTLU[VPUVWVY[\UVLUSHH\ZLUJPHKLWH[}NLUVZ&
La presencia de tantas moléculas tóxicas potentes, como las quinonas/hemiquinonas
y los radicales libres (ROIs y RNIs) en la ausencia de un proceso infeccioso, lleva
ciertamente a una sobrecarga energética dispendiosa e inútil para los animales, además
de provocar serios daños a sus propios tejidos. Siendo así, las referencias que reportan
la activación de estos parámetros hemato-inmunológicos en camarones tratados con
diferentes inmunoestimulantes en la ausencia de infecciones, deben ser observadas con
reserva.
Lo que se busca de hecho en el cultivo de camarones, no es un sistema inmunológico
continuamente activado como parece querer ser demostrado en varios relatos, sino
un estado de mayor inmunocompetencia de los animales, que les proporcione mayor
capacidad y rapidez en la respuesta, cuando se presenta una invasión por patógenos.
6[YV W\U[V JY\JPHS ` J\LZ[PVUHISL ZL YLÄLYL HS momento y al tiempo de la
administración de los inmunoestimulantes y al período de protección inmunológica
(“memoria”) otorgado. ¿Qué sería lo más apropiado: administrar los inmunoestimulantes
desde fases más tempranas del desarrollo de camarones y/o inmediatamente antes de un
KLZHMxVVHUS\LNVKLPUPJPHKVLSKLZHMxV&(X\x[HTIPtUT\JOHZW\ISPJHJPVULZYLWVY[HU
resultados contradictorios y poco convincentes (Smith et al., 2003). Algunos trabajos
muestran que la administración de inmunoestimulantes por períodos prolongados, lleva
a un aumento del desempeño de los camarones y a una mayor inmunocompetencia por
un cierto período de días (Sung et al., 1994; Takahashi et al., 2000); entre tanto, otros
YLÄLYLULMLJ[VZJVU[YHYPVZ:JOVSaet al., 1999; Chang et al., 2000).
En nuestra opinión, lo que sería deseable en la inmunoestimulación, es poder
WV[LUJPHSPaHY SHZ KLMLUZHZ UH[\YHSLZ KLS JHTHY}U ZPU JVZ[V ÄZPVS}NPJV PTWVY[HU[L
elevando, por ejemplo, el número de células inmunológicas (hemocitos) y modulando
los niveles de las moléculas inmuno efectoras e inmuno reguladoras, de forma tal que
permita dejar los animales en una condición óptima de inmunocompetencia para
YLHJJPVUHYJVULÄJPLUJPHH\UHL]LU[\HSPU]HZP}UWVYSVZWH[}NLUVZ,ULZ[LZLU[PKV
SHWVZPIPSPKHKHJ[\HSKLJ\HU[PÄJHYJVUWYLJPZP}USVZUP]LSLZKLL_WYLZP}UKLKPMLYLU[LZ
inmunomarcadores por PCR en tiempo real, deberá traer ciertamente una importante
contribución en la evaluación del estado de inmunocompetencia de los animales,
mediante el tratamiento con inmunoestimulantes.
6.3 Parametros hemato-inmunológicos como indicadores de salud

Una práctica común, en la medicina humana y veterinaria, es la utilización de
parámetros hematológicos y bioquímicos para evaluar las condiciones de salud de los
individuos y también para auxiliar en el diagnóstico de diferentes enfermedades. En la
camaronicultura, estas herramientas vienen siendo utilizadas como indicadores de salud,
a pesar de la gran variedad en los valores de referencia de estos parámetros, en una
misma población, sexo y estadio de desarrollo.
Los parámetros hemato-inmunológicos más comúnmente empleados en crustáceos
son: (1) hemogramas (conteo total y diferencial de hemocitos), (2) tiempo de coagulación
204
de la hemolinfa, (3) actividad de la enzima PO, (4) índice de fagocitosis, (5) producción
de ROIs, (6) actividad antimicrobiana, (7) título hemoglutinante del plasma y (8)
concentración de proteínas totales de la hemolinfa. Otros parámetros comienzan a ser
implementados como la actividad de la lisozima hemolinfática, la producción de RNIs y
la actividad del inhibidor de la proteasa Į2M (Tabla 3).
Entre los parámetros citados, las alteraciones más evidentes en los animales
WYPUJPWHSTLU[L JHTHYVULZ PUMLJ[HKVZLZ[YLZHKVZ ZL YLÄLYLU H SH TVK\SHJP}U KLS
número total de hemocitos o THC (del inglés, total hemocyte count) y la disminución de
la capacidad coagulante de la hemolinfa (Lightner, 1996; Lee et al., 1999).
Es bien conocido, en la práctica de los cultivos, el aumento en el tiempo de
JVHN\SHJP}UKLSHOLTVSPUMHLUJY\Z[mJLVZZVIYLLZ[YtZÄZPVS}NPJVVK\YHU[LPUMLJJPVULZ
(Jussila et al., 2001; Song et al., 2003). La técnica clásica para evaluar este parámetro, es
la obtención de la hemolinfa con un capilar de vidrio (Sarathi et al., 2007) siendo muy
simple; si es bien efectuada, puede generar información útil sobre el estado de salud de
los animales. Como se explicó anteriormente, el proceso de coagulación envuelve varios
factores: la proteína de coagulación, la enzima hemocitaria TGase y la concentración
plasmática de Ca2+. No se conoce claramente cual de estos factores es el responsable por
el aumento en el tiempo de coagulación en animales estresados/infectados. Los estudios
;HISH!7YPUJPWHSLZWHYmTL[YVZOLTH[VPUT\UVS}NPJVZ\[PSPaHKVZLUSHL]HS\HJP}UKLS
LZ[HKVKLZHS\KKLJHTHYVULZ`V[YVZJY\Z[mJLVZ
Parámetro
Utilidad Determinación en campo*
hemato-inmunológico
Hemogramas Esencial (muy variables) Sí
Índice fagocítico Buena No
Producción de ROI Esencial No
Produción de RNI Análisis todavía iniciales No
Núcleos apoptóticos Buena (para virus) Sí
Buena (para animales muy
Tiempo de coagulación Sí
estresados/enfermos)
Razonable (para animales
Proteína total del plasma Posible
muy estresados/enfermos)
Actividad de la PO Esencial (muy variable) Posible
Actividad de otras enzimas/
proteínas (SOD, lisozima, Razonable a buena (muy
No
variable)
Į2M, etc.)
Actividad antibacteriana Buena No
Actividad aglutinante del
Razonable (no varía mucho) Posible
plasma
Expresión de proteínas inmu-
Esencial No
nológicas (PCR-tiempo real)
3VZHUmSPZPZ]PHISLZTVZ[YHKVZLULZ[H[HISHW\LKLUZLYYLHSPaHKVZWVYM\UJPVUHYPVZLU[YLUHKVZKLSHZWYVWPHZÄUJHZKLJ\S[P]V
necesitando de infraestructura media (microscopios, espectrofotómetro, reactivos, entre otros). Los análisis que aparecen como no
]PHISLZULJLZP[HUKLSHWV`VKLSHIVYH[VYPVZL_[LYUVZLX\PWVZ`YLHJ[P]VZLZWLJPHSLZJVUWYVMLZPVUHSLZJHSPÄJHKVZ
205
recientes sugieren que hay una interacción de estos factores. Camarones L. vannamei
infectados con TSV tienen una capacidad disminuida de coagulación y presentan una
HJ[P]PKHKZPNUPÄJH[P]HTLU[LYLK\JPKHKL;.HZHLUSVZOLTVJP[VZHKLTmZKL\UHJHxKH
de 16 a 20% en la concentración de calcio plasmático (Song et al., 2003).
El conteo total de hemocitos circulantes (THC), de por sí es uno de los
inmunoparámetros más utilizados para expresar las condiciones de salud de los crustáceos.
La modulación de la THC es utilizada en diferentes especies sobre condiciones de estrés
HTIPLU[HS `V ÄZPVS}NPJV ` K\YHU[L SHZ PUMLJJPVULZ 9VKYxN\La ` 3L 4V\SSHJ
La THC puede aumentar o disminuir sus valores, dependiendo del tipo y tiempo de
exposición a los agentes causantes del estrés. Es común que se observe una disminución
de la THC durante las primeras horas de un proceso infeccioso y un aumento del número
de células en fases mas tardías (Rodríguez y Le Moullac, 2000). Esta disminución inicial
ZLKLILWYVIHISLTLU[LH\UHTPNYHJP}ULPUÄS[YHJP}UKLSVZOLTVJP[VZLUSVZ[LQPKVZ
infectados, mientras que el aumento posterior probablemente sea debido a la liberación
de nuevas células a partir de los órganos hematopoyéticos (van de Braak et al., 2002b).
La mayoría de los autores concuerda que un aumento en el THC debe proporcionar una
mayor protección de los crustáceos contra infecciones, una vez que los hemocitos son los
principales responsables por las diferentes reacciones inmuno-celulares (Jiravanichpaisal
et al., 2006) y son los sitios de expresión de las diferentes moléculas inmunológicas (Gross
et al., 2001). Curiosamente, la alteración en la proporción de los tipos de hemocitos
en crustáceos, no es muy usual durante situaciones de estrés o durante infecciones
(Rodríguez y Le Moullac, 2000; Vogan y Rowley, 2002).
La producción de ROIs por los hemocitos de crustáceos, medida principalmente
por la producción de aniones superóxido (O2-), se ha constituido en uno de los
inmunoparámetros más consistentes para evaluar el estado de inmunocompetencia de
los camarones. La evaluación de la producción intracelular de O2- por los hemocitos
fagocitarios, es usualmente determinada por el método de reducción del NBT, o por
SH [tJUPJH KL SH X\PTPVS\TPUPJLUJPH \[PSPaHUKV JVTWVULU[LZ KL SH Z\WLYÄJPL KL
microorganismos, como LPS y ß-1,3-glucanos (laminarina, zymosan, curdlan) para
estimulación de los hemocitos in vitro. Este inmunoparámetro es también muy utilizado
para evaluar el efecto de sustancias inmunoestimulantes en camarones (Song y Hsieh,
1994; Muñoz et al., 2000; Campa-Córdova et al., 2002 a, b; Hou y Cheng, 2005; Yeh et
al., 2006; Fu et al., 2007).
La primera referencia de producción de ROIs en camarones, fue publicada por
Song y Hsieh (1994) en P. monodon, siendo realizados desde entonces estudios con
otras especies, cuyas metodologías fueron adaptadas. Existen sin embargo diferencias
fundamentales entre los protocolos experimentales utilizados por los diferentes grupos
que estudian los crustáceos, lo que resulta frecuentemente en resultados dispares y poco
comparables. Como ejemplo, se puede citar el trabajo de Muñoz et al. (2000) en L.
vannamei, que indica un porcentaje muy bajo de estimulación de los hemocitos por el
zymosan (30%), luego de 2 horas de incubación, mientras que en nuestro laboratorio
ocurre una alta estimulación hemocitaria (80%) en la misma especie, en apenas 15
minutos de incubación con el mismo inductor (Guertler, 2007).
En camarones P. monodon (Sung et al., 1996) y L. vannamei (Muñoz et al., 2000)
infectados con bacterias del genero Vibrio, se observa un aumento de la producción de
ROIs. Apenas las especies V. alginolyticus y V. anguillarum fueron capaces de estimular
la producción del anión superóxido, mientras que el V. harveyi no causó ninguna
alteración en la producción de este radical (Muñoz et al., 2000), lo que podría explicar
la patogenicidad de esta bacteria para los camarones.
206
Con relación a las infecciones causadas por virus, ocurre una disminución
ZPNUPÄJH[P]H LU SH WYVK\JJP}U KL 960:Z LU L. vannamei infectados con WSSV, así
como la alteración de otros inmunoparámetros como la THC, la actividad fagocítica, la
actividad de la PO y la actividad de la SOD (Chang et al., 2003). De manera semejante,
PUMLJJPVULZJVU;:=[HTIPtUYLZ\S[HULUSHKPZTPU\JP}UZPNUPÄJH[P]HKLSVZ]HSVYLZKL
la THC, la concentración de proteínas totales, de hemocianina, de la proteína de la
coagulación y de iones Ca2+ y Cu2+ en el plasma de L. vannamei (Song et al., 2003).
Además, la producción de ROIs y la actividad de la PO aumentan en los camarones
infectados con TSV (Song et al., 2003). Estos resultados parecen indicar que algunos
WHYmTL[YVZOLTH[VPUT\UVS}NPJVZW\LKLULMLJ[P]HTLU[LYLÅLQHYLSLZ[HKVKLZHS\KKL
los camarones.
La actividad antimicrobiana de la hemolinfa de los crustáceos viene también siendo
utilizada como un potencial inmunoparámetro durante las infecciones y otras situaciones
de estrés (Sritunyalucksana et al., 1999a; Tsvetnenko et al., 2001; Vogan e Rowley,
2002). Como se mencionó anteriormente, la mayoría de los AMPs no es constituida por
moléculas rápidamente inducidas. Éstas, se encuentran almacenadas en los gránulos de
los hemocitos y pueden ser utilizadas intracelularmente o exocitadas mediante estímulos
apropiados. Muchas familias de AMPs, pueden ser inducidas en fases más tardías de
la infección o pueden ser inhibidas en situaciones de estrés. Como ejemplo se puede
citar la inducción tardía de las crustinas y peneidinas, luego de 48 horas de la infección,
como se mencionó anteriormente. Siendo así, la modulación de los niveles de AMPs
puede también representar un importante inmunoparámetro en el monitoreo del estado
de salud de los crustáceos.
En relación a la capacidad aglutinante de la hemolinfa, es conocido el hecho que
las infecciones y otras situaciones de estrés, pueden resultar en la alteración de los títulos
aglutinantes de la hemolinfa de los crustáceos. Como ejemplo, podemos citar, que en P.
monodon infectados por =PIYPV]\SUPÄJ\Z ocurre un aumento de la actividad aglutinante
de su plasma (Ratanapo y Chulavatnatol, 1992). Mientras que en las hembras adultas de
L. vannamei, sometidas al proceso de ablación unilateral para la maduración ovariana,
VJ\YYL\UHYLK\JJP}UZPNUPÄJH[P]HKLS[x[\SVHNS\[PUHU[LKLZ\OLTVSPUMHWYVIHISLTLU[L
en respuesta a esta práctica mutiladora (Maggioni et al., 2004). Es importante resaltar
X\LSVZUP]LSLZKLSHHJ[P]PKHKHNS\[PUHU[LUV]HYxHUZPLTWYLKLMVYTHZPNUPÄJH[P]HLU
respuestas a las infecciones o situaciones de estrés. En F. paulensis, por ejemplo, no hubo
alteración de los títulos aglutinantes en animales mantenidos a bajas salinidades o luego
de la ablación (Perazzolo et al., 2002).
Por otro lado, estudios recientes sobre la expresión de una lectina tipo-C de F.
chinensis (Fclectin) muestran una super-expresión de esas moléculas luego de 3 a 12
horas de infección con WSSV y bacterias Gram-negativas, respectivamente, sugiriendo
que esta lectina sea expresada de manera diferenciada según el agente infeccioso (Liu
et al., 2007).
La concentración de proteínas totales del plasma de crustáceos es también un
parámetro utilizado para evaluar el estado de salud de los camarones. A pesar de este
WHYmTL[YV ZLY HMLJ[HKV WVY MHJ[VYLZ HTIPLU[HSLZ ` ÄZPVS}NPJVZ *OLU ` *OLUN "
Rosas et al., 2000; Sánchez et al., 2001) o durante infecciones y lesiones (Hennig et al.,
1998; Perazzolo et al "=VNHU ` 9V^SL` LS ZPNUPÄJHKV KL LZ[H ]HYPHJP}U
necesita ser todavía mejor comprendido.
Debemos considerar que el pigmento respiratorio hemocianina representa cerca
de 90-95% de las proteínas totales del plasma de crustáceos (Rochude y Fine, 1978) y
SHZÅ\J[\HJPVULZLUZ\JVUJLU[YHJP}UZLYLÅLQHKPYLJ[HTLU[LLULZ[L[PWVKLWHYmTL[YV
207
hematológico. A pesar de la hemocianina estar relacionada con la inmunología de

crustáceos, una vez que su clivaje pueda generar fragmentos con función de PO o de
péptido antimicrobiano, como se mencionó anteriormente, la utilización de los niveles
de esta proteína como inmunoparámetro debe ser todavía mejor investigada.
La modulación de la actividad de la PO constituye uno de los principales
inmunoparámetros utilizados para evaluar el estado de salud de los crustáceos. Sin
embargo, la actividad de esta enzima no siempre es alterada en situaciones de estrés
o infecciones. Algunas referencias muestran la modulación de la actividad de la PO
K\YHU[L\ULZ[YtZHTIPLU[HS`VÄZPVS}NPJV3L4V\SSHJ`/HMMULY"/Z\et al., 2007),
o durante infecciones y lesiones (Vogan y Rowley, 2002; Chang et al., 2003; Song et al.,
2003; Sarathi et al., 2007).
Por otro lado, existen también referencias que muestran que la actividad de la PO
no se altera durante las infecciones, como en el cangrejo Cancer pagurus afectado por
el síndrome del oscurecimiento de la cutícula (Vogan y Rowley, 2002) y en P. monodon
PU`LJ[HKVZJVUJVTWVULU[LZKLSHZ\WLYÄJPLKLIHJ[LYPHZÒVUNVZ:YP[\U`HS\JRZHUHet
al H+LMVYTHZLTLQHU[LSHHJ[P]PKHKKLSH76UVTVZ[Y}KPMLYLUJPHZPNUPÄJH[P]H
cuando camarones F. paulensis fueron sometidos a un estrés osmótico o luego de la
ablación (Perazzolo et al3VTPZTVM\L]LYPÄJHKVLUOLTIYHZKLL. vannamei
sometidas a la ablación (Maggioni et al., 2004).
Recientemente, la utilización de técnicas de biología molecular ha auxiliado de forma
crucial la comprensión de las respuestas inmunológicas desencadenadas en crustáceos
y los mecanismos relacionados con la interacción patógeno-hospedero, todavía poco
JVUVJPKVZ,Z[HZ[tJUPJHZYLSHJPVUHUImZPJHTLU[LSHPKLU[PÄJHJP}U`J\HU[PÄJHJP}UKL
la expresión génica de diferentes moléculas inmunológicas e incluyen en especial: (1) la
técnica de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real, (2) la SSH (del inglés,
suppression subtractive hybridization), (3) la DD-PCR (del inglés, differential display PCR)
y (4) análisis de cDNA por microarrays.
La infección por WSSV, por ejemplo, parece modular la expresión de varios genes
en camarones, incluyendo proteínas antimicrobianas y antivirales, transductores de señal
intracelulares, componentes del sistema RNAi, factores de transcripción, reguladores de
apoptosis, proteasas e inhibidores de proteasas, proteínas de estrés oxidativo y moléculas
de adhesión celular (Leu et al., 2007; Robalino et al., 2007b; Zhao et al., 2007).
En un estudio con L. vannameiZL]LYPÄJ}SHVJ\YYLUJPHKLPUK\JJP}UKLSHL_WYLZP}U
de dos proteínas antibacterianas, la lisozima y el ALF, luego de la infección con WSSV
(Robalino et al., 2007b). Mientras que en P. monodon infectado con el mismo virus,
se constató el aumento de la expresión de una proteína que se une a la quitina, una
WLYP[YVÄUHKLTH[YPa3L\et al. 2007), que parece formar una barrera preventiva contra
la invasión por bacterias, virus y parásitos (Lehane, 1997).
En un trabajo interesante, se analizó recientemente la expresión diferencial de genes
en camarones L. vannamei seleccionados genéticamente, en cuanto a su susceptibilidad
y resistencia a la infección por WSSV (Zhao et al., 2007). Varios genes fueron expresados
diferencialmente en el hepatopáncreas de los camarones resistentes al WSSV. Hubo una
mayor expresión constitutiva de hemocianina, lectinas del tipo C, lisozimas, proteínas
apoptóticas, enzimas oxidativas, proteínas reguladoras de la ecdisis, quitinasas,
lacasas, catepsina L y zinc-proteinasas, en estos animales en relación a los camarones
susceptibles. Es interesante notar que la infección experimental de animales resistentes
con WSSV, aumenta mucho más la expresión de algunos de estos genes, relacionados
208
directa o indirectamente a las respuestas inmunes, como la hemocianina, catepsina,

lacasa, lectinas y lisozimas.
Infecciones bacterianas también parecen modular la expresión génica de algunas
moléculas inmunológicas. Camarones P. monodon infectados con V. harveyi presentaron
un aumento en la expresión de lisozima y ALF y una disminución de la expresión
de serpinas (Somboonwiwat et al., 2006). Mientras que en juveniles de L. vannamei
inyectados con LPS, ocurre una disminución de los niveles de RNAm para varios AMPs
(PEN2, PEN3, PEN4 y crustina), siendo esta disminución dosis-dependiente (Okumura,
2007). Contrariamente, la expresión de la proPO no es alterada (Okumura, 2007).
Factores ambientales estresantes también pueden modular la expresión de ciertos
genes inmunológicos en camarones. La hipertermia parece inhibir la expresión de proPO
y lisozima en juveniles de P. monodon, lo que puede implicar una menor resistencia
a las infecciones en aguas más calientes (De-la-Vega et al., 2007). La expresión de la
lisozima en esta especie, también es inhibida cuando los camarones son sometidos a
estrés osmótico. Por otro lado, la hemocianina es súper-expresada en estos animales con
estrés osmótico y su expresión es disminuida en condiciones de hipertermia e hipoxia
(De La Vega et al., 2007).
En resumen, el establecimiento de parámetros hemato-inmunológicos como
indicadores de salud en crustáceos y los análisis moleculares de la expresión génica de
moléculas inmunológicas, pueden proporcionar en conjunto, informaciones valiosas del
estado de salud de los crustáceos cultivados, así como de los mecanismos relacionados
en la interacción patógeno-hospedero. A pesar de representar todavía un campo nuevo,
esta área merece ser desarrollada y mejor utilizada en la camaronicultura.
En los últimos años ha ocurrido un considerable progreso en el estudio del sistema
inmune de los crustáceos, a pesar de no contarse todavía con un grupo de parámetros
hemato-inmunológicos seleccionados, realmente sensible y de respuesta inequívoca,
capaces de expresar con precisión las condiciones de salud de estos animales. Estudios
de este tipo deberían ser fuertemente estimulados, en especial para crustáceos de interés
económico, que no pueden ser vacunados.
Conviene resaltar, que varios factores limitan una interpretación segura e inequívoca
de los análisis de los parámetros hemato-inmunológicos en crustáceos. Uno de los
WYPUJPWHSLZ MHJ[VYLZ ZL YLÄLYL H SHZ LUVYTLZ KPMLYLUJPHZ LU SVZ ]HSVYLZ ÄZPVS}NPJVZ
considerados “normales” o de referencia para una determinada especie. Estas diferencias
están posiblemente relacionadas al tipo de ambiente en los que los animales se
encuentran, la salinidad, temperatura, estado nutricional, edad y estados de muda (Noga,
2000). Por otro lado, no existe todavía una estandarización de las técnicas utilizadas
para evaluar estos parámetros en crustáceos y esto también lleva a los resultados muchas
]LJLZKPZJYLWHU[LZSVX\LKPÄJ\S[HSVZHUmSPZPZJVTWHYH[P]VZKLU[YVKLSHTPZTHLZWLJPL
o entre especies. Sería de fundamental importancia, buscar una patronización de estas
técnicas entre los diferentes grupos de investigación que estudian a los crustáceos, para
que se obtengan resultados más homogéneos y comparables.
6.4 Conclusiones y Perspectivas

Como se ha mencionado varias veces, el principal factor limitante que amenaza
la sostenibilidad de la camaronicultura a nivel mundial, son las enfermedades y
principalmente las de origen viral. Se ha logrado mucho progreso últimamente, en llegar
a una mejor comprensión de los mecanismos inmunológicos en crustáceos, destacándose
SHPKLU[PÄJHJP}UKL]HYPHZWYV[LxUHZKLYLJVUVJPTPLU[VWH[Y}U797ZSHWYVK\JJP}UKL
209
varias familias de antibióticos naturales (AMPs) y los mecanismos de defensa antiviral,

como la vía RNAi. Falta todavía aclarar muchos otros aspectos importantes, como las
bases moleculares de la señalización celular y de la transducción de la señal, así como
mecanismos ya razonablemente aclarados en algunos artrópodos como Drosophila y
limulídeos, pero prácticamente desconocidos en crustáceos.
Las respuestas inmunológicas contra infecciones bacterianas y hongos, ya son
relativamente bien conocidas en crustáceos, como la activación del sistema proPO,
ZPZ[LTHKLJVHN\SHJP}U`SHWYVK\JJP}UKL960Z7VYV[YVSHKVSHYLJPLU[LPKLU[PÄJHJP}U
de diferentes AMPs de amplio espectro antimicrobiano, esta abriendo nuevas perspectivas
con relación a los programas de selección genética (o transgénesis) de reproductores que
expresan preferencialmente determinados tipos de AMPs, así como en el desarrollo de
nuevos antibióticos para camaronicultura, capaces de evitar la inducción de resistencia
en microorganismos y eliminar el riesgo de contaminación ambiental.
,USVX\LZLYLÄLYLHSHZYLZW\LZ[HZHU[P]PYHSLZSHKL[LJJP}UYLJPLU[LKL\UZPZ[LTH
RNAi y de citocinas semejantes a interferones en camarones, deberá en un futuro
próximo orientar nuevas estrategias de terapia antiviral (basadas en dsDNA, por ejemplo)
`LU\UJVU[YVSTmZLÄJPLU[LKLPUMLJJPVULZ7HYHSLSHTLU[L\UHTH`VYJVTWYLUZP}UKL
los mecanismos de inducción de la apoptosis celular como respuesta a las infecciones
]PYHSLZ WLYTP[PYm ]LYPÄJHY ZP LS JVUJLW[V KL HJVTVKHJP}U ]PYHS YLZ\S[H LMLJ[P]HTLU[L
de la reducción del proceso de apoptosis en animales con infección viral persistente
sin señales de enfermedad, o si este fenómeno se debe a otros mecanismos genéticos/
moleculares todavía no conocidos que podrán ser explorados.
Cabe resaltar, que la ausencia de líneas celulares permanentes de crustáceos, limita
seriamente la realización de muchos análisis experimentales importantes, en especial
los ensayos in vitro de infección y de actividad antiviral. Infelizmente, los esfuerzos
para el desarrollo de estas líneas celulares de crustáceos, no han todavía alcanzado el
éxito esperado. Se espera que en un futuro próximo esta limitación pueda ser superada
` X\L SxULHZ JLS\SHYLZ KL JY\Z[mJLVZ W\LKHU ]LUPY H Z\Z[P[\PY KLÄUP[P]HTLU[L H SHZ KL
peces marinos, actualmente empleadas en ensayos biológicos de crustáceos, siendo
inapropiadas.
La utilización de sustancias inmunoestimulantes para llegar a un estado de
mayor inmunocompetencia en crustáceos de interés económico, sobresale como una
herramienta valiosa, una vez que estos animales no pueden ser vacunados. Sin embargo,
el mecanismo de acción de estos compuestos es todavía pobremente comprendido y
su efecto no es siempre reproducible. Se espera que en un futuro próximo la acción
inmunológica de estos compuestos sea mejor comprendida y que la camaronicultura
W\LKHJVU[HYJVU\UH]HYPLKHKKLZ\Z[HUJPHZPUT\UVLZ[PT\SHU[LZYLHSTLU[LLÄJHJLZ`
desprovistas de efectos colaterales.
Como se ha mencionado, la evaluación del estado de salud de los crustáceos, a
través del examen de su hemolinfa, no suele ofrecer resultados claros y seguros, como
ocurre con el examen de sangre de mamíferos. En estos últimos, existe un patrón preciso
` JVUÄHISL KL UVYTHSPKHK HZVJPHKV JVU SVZ ]HSVYLZ KL YLMLYLUJPH WHYH SVZ KPMLYLU[LZ
parámetros hemato-inmunológicos. Contrariamente, en los crustáceos, los valores de
referencia de los parámetros hemolinfáticos son de un modo general muy variables,
hasta dentro de una misma población, mismo sexo o mismo estadio de desarrollo. Esto
KPÄJ\S[H KL ZVIYLTHULYH LS LZ[HISLJPTPLU[V KL xUKPJLZ KL YLMLYLUJPH V KL \U WH[Y}U
de normalidad en crustáceos, aún en el caso de simples hemogramas, tan utilizados en
mamíferos. Como consecuencia, la comparación de los índices hemato-inmunológicos
210
de los crustáceos saludables e infectados y/o estresados, no presenta muchas veces

ZPNUPÄJHUJPHLZ[HKxZ[PJHSVX\LLZMYLJ\LU[LTLU[LVIZLY]HKVLU]HYPHZW\ISPJHJPVULZ
3HYLJPLU[LWVZPIPSPKHKKLWVKLYJ\HU[PÄJHYSHL_WYLZP}UNtUPJHKLPUT\UVTHYJHKVYLZ
en crustáceos a través de PCR en tiempo real, puede ofrecer, a pesar de su alto costo, un
J\HKYVTmZJSHYV`JVUÄHISLKLSLZ[HKVKLZHS\KKLSVZJHTHYVULZKLPU[LYtZLJVU}TPJV
durante la aparición de brotes infecciosos o situaciones de estrés.
Desde un punto de vista aplicado, el conocimiento del sistema inmune de los
crustáceos puede traer importantes subsidios y abrir nuevas perspectivas para: (1)
desarrollar técnicas de diagnóstico para diferentes patologías; (2) establecer marcadores
inmunológicos que indiquen precozmente la presencia de infecciones o de contaminantes
ambientales; (3) desarrollar compuestos inmuno-estimulantes y (4) auxiliar programas
KLZLSLJJP}UNLUt[PJHKLYLWYVK\J[VYLZH[YH]tZKLSHPKLU[PÄJHJP}UKLHUPTHSLZTmZ
resistentes a las infecciones.
Finalmente, vale resaltar, que no existe actualmente ningún genoma completo
disponible de algún invertebrado marino. Sería verdaderamente interesante que el
camarón L. vannamei pueda ser seleccionado como especie modelo de invertebrado
marino para la secuenciación genómica completa, al ver su importancia económica en
la camaronicultura mundial.
Abbas, A.K.; Lichtman, A.H.; Pillai, S. 2007. Cellular and Molecular Immunology. 6 ed. Saunders.
p. 572.
Adams, M.D.; Celniker, S.E.; Holt, R.A. et al., 2000. The genome sequence of Drosophila
melanogaster. Science, 287: 2185-2189.
Akira, S. 2006. TLR signaling. Current Topics in Microbiology and Immunology, 311: 1-16.
(TWHY`\W7"2VUKV/"/PYVUV0"(VRP;";HZZHUHRHQVU(2007a. Molecular cloning, genomic
organization and recombinant expression of a crustin-like antimicrobial peptide from black
tiger shrimp Penaeus monodon. Molecular Immunology, 45: 1085-1093.
(TWHY`\W 7" 1P[]HYVWHZ 9" 7\SZVVR 5" ;HZZHUHRHQVU ( 2007b. Molecular cloning,
characterization and expression of a masquerade-like serine proteinase homologue from black
tiger shrimp Penaeus monodon-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
(UKLYZVU 2=" 5ZZSLPU=VSOHYK * 1984. Information for the dorsal-ventral pattern of the
Drosophila embryo is stored as maternal mRNA. Nature, 311: 223-227.
Anderson, R.S. 1996. Production of reactive oxygen intermediates by invertebrate hemocytes:
PTT\UVSVNPJHS ZPNUPÄJHUJL 0U! :k+,9/f33 2 0>(5(.( :"=(:;( .9 LKZ 5L^
Directions in Invertebrate Immunology. Fair Haven, SOS Publication. pp. 109-129.
(UKYLQL]H1"*OPSKZ2:"@V\UN+-"*HYSVZ;:":[VJR5".VVKIV\YU:"9HUKHSS9,2004.
The V proteins of paramyxoviruses bind the IFN-inducible RNA helicase, mda-5, and inhibit its
activation of the IFN-beta promoter. Proceedings of the National Academy of Sciences USA,
101: 17264-17269.
Armstrong, P.B. 2006. Proteases and protease inhibitors: a balance of activities in host-pathogen
interaction. 0TT\UVIPVSVN`, 211: 263-281.
(YTZ[YVUN7)"8\PNSL`17 1999. Alpha2-macroglobulin: an evolutionarily conserved arm of the
innate immune system. Developmental and Comparative Immunology, 23: 375-390.
(Y[Z 1(1" *VYULSPZZLU -/1" *PQZV\^ ;" /LYTZLU ;" :H]LSRV\S /-1" :[L[ 914 2007.
Molecular cloning and expression of a Toll receptor in the giant tiger shrimp, Penaeus monodon.
-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
211
Aspán, A., Hall; M., Söderhäll, K. 1990. The effect of endogenous proteinase inhibitors on the
WYVWOLUVSV_PKHZL HJ[P]H[PUN LUa`TL H ZLYPUL WYV[LPUHZL MYVT JYH`ÄZO OHLTVJ`[LZ 0UZLJ[
Biochemistry, 20: 485-492.
Aspán, A.; Huang, T.S.; Cerenius, L.; Söderhäll, K. 1995. cDNA cloning of prophenoloxidase from
[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus and its activation. Proceedings of the National
Academy of Sciences USA, 92: 939-943.
Aspán, A.; Söderhäll, K. 7\YPÄJH[PVUVMWYVWOLUVSV_PKHZLMYVTJYH`ÄZOISVVKJLSSZHUKP[Z
activating by an endogenous serine proteinase. Insect Biochemistry, 21: 363-373.
)HJOuYL,".\LN\LU@".VUaHSLa4"+L3VYNLYPS1".HYUPLY1"9VTLZ[HUK)2004. Insights
into the anti-microbial defense of marine invertebrates: the penaeid shrimps and the oyster
Crassostrea gigas. Immunological Reviews, 198: 149-168.
Barracco, M.A.; Duvic, B.; Söderhäll, K. 1991. The beta-1,3-glucan-binding protein from the
JYH`ÄZOPacifastacus leniusculus, when reacted with a beta-1,3-glucan, induces spreading and
KLNYHU\SH[PVUVMJYH`ÄZONYHU\SHYJLSSZ*LSSHUK;PZZ\L9LZLHYJO!
)HY[SL[[ ;*" *\[OILY[ZVU )1" :OLWHYK ,-" *OHWTHU 9>" .YVZZ 7:" >HYY .> 2002.
Crustins, homologues of an 11.5-kDa antibacterial peptide, from two species of penaeid shrimp,
Litopenaeus vannamei and Litopenaeus setiferus. Marine Biotechnology NY, 4: 278-293.
)H\JOH\(. 1981. Crustaceans. In: RATCLIFFE, N.A.; ROWLEY, A.F. (eds.) Invertebrate Blood
Cells. v. 2. Academic Press Inc. pp. 385-420.
)LSS23":TP[O=11993. in vitro superoxide production by hyaline cells of the shore crab Carcinus
maenas (L.). Developmental and Comparative. Immunology, 17: 211-219.
Bogdan, C.; Röllinghoff, M.; Diefenbach, A. 2000. Reactive oxygen and reactive nitrogen
PU[LYTLKPH[LZPUPUUH[LHUKZWLJPÄJPTT\UP[`*\YYLU[6WPUPVUPU0TT\UVSVN`!
)YVJR[VU="/HTTVUK1(":TP[O=1 2007. Gene characterization, isoforms and recombinant
expression of carcinin, an antibacterial protein from the shore crab, Carcinus maenas. Molecular
Immunology, 44: 943-949.
Bulet P.; Stöcklin, R.; Menin, L. 2004. Anti-microbial peptides: from invertebrates to vertebrates.
Immunological Reviews, 198: 169-184.
*HTWH*}YKV]H (0" /LYUmUKLa:HH]LKYH 5@" (ZJLUJPV - 2002a Superoxide dismutase as
modulator of immune function in American white shrimp ( Litopenaeus vannamei). Comparative
Biochemistry and Physiology, 133: 557-565.
*HTWH*}YKV]H (0" /LYUmUKLa:HH]LKYH 5@" 7OPSPWWPZ 9" (ZJLUJPV - 2002b. Generation
of superoxide anion and SOD activity in haemocytes and muscle of American white shrimp
( Litopenaeus vannamei) as a response to ȕ-glucan and sulphated polysaccharide. Fish and
:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
*LYLUP\Z3"3PHUNA"+\]PJ)"2L`ZLY7"/LSSTHU`<";HWPV7HS]HSS,"0^HUHNH:":KLYOpSS
K. 1994. Structure and biological activity of a ȕ-1,3-D-glucan-binding protein in crustacean
blood. The Journal of Biological Chemistry, 269: 29462-29467.
Cerenius, L.; Söderhäll, K. 2004. The prophenoloxidase-activating system in invertebrates.
Immunological Reviews, 198: 116-126.
*OHUN *-" :\ 4:" *OLU /@" 3PHV 0* 2003. Dietary ȕ-1,3-glucan effectively improves
immunity and survival of Penaeus monodon challenged with white spot syndrome virus. Fish
HUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
*OHRYH]VY[[` +" /LUZLS 4 2003. Inducible nitric oxide synthase and control of intracellular
bacterial pathogens. Microbes and Infection, 5: 621-627.
*OHUN*-"*OLU/@":\4:"3PHV0* 2000. Immunomodulation by dietary ȕ-1,3 glucan in
the brooders of the black tiger shrimp, Penaeus monodon-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
505-514.
*OLU1*"*OLUN:@1995. Changes of oxyhemocyanin and protein-levels in the hemolymph of
Penaeus japonicus exposed to ambient nitrite. Aquatic Toxicology, 33: 215-226.
*OLUN>" 3P\ */";ZHP */" *OLU 1*" 2005. Molecular cloning and characterisation of a
pattern recognition molecule, lipopolysaccharide and ȕ-1,3-glucan binding protein (LGBP)
from the white shrimp Litopenaeus vannamei-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
212
*OLUN >" ;ZHP 0/" /\HUN *1" *OPHUN 7*" *OLUN */" @LO 4: 2008. Cloning and
characterization of hemolymph clottable proteins of kuruma prawn (Marsupenaeus japonicus)
and white shrimp (Litopenaeus vannamei). Developmental and Comparative Immunology, 32:
265-274.
*OYPZ[PL(,"9\ZJ:".VPUL`**":TP[O*4";V^SL+>"+PJRPUZVU7:0KLU[PÄJH[PVU
and characterization of a cDNA encoding a crustin-like, putative antibacterial protein form the
American lobster Homarus americanus. Molecular Immunology, 44: 3333-3337.
*P[HYHZ\;":P]HYHT="0TTHU\LS."9V\[5"4\Y\NHU=0UÅ\LUJLVMZLSLJ[LK0UKPHU
immunostimulant herbs against white spot syndrome virus (WSSV) infection in black tiger
shrimp, Penaeus monodon with reference to haematological, biochemical and immunological
JOHUNLZ-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
*VTPUL[[P49"4HYX\LZ49-"3VYLUaPUP+4"3MNYLU:,"+HMMYL:")HYYHJJV4(2002.
*OHYHJ[LYPaH[PVUHUKWHY[PHSW\YPÄJH[PVUVMHSLJ[PUMYVT[OLOLTVS`TWOVM[OLÔP[LZOYPTW
Litopenaeus schmitti. Developmental and Comparative Immunology, 26: 715-721.
Covarrubias, M.S.M. 2004. Enfermedades del camarón: detección mediante análisis en fresco e
histopatología. Editorial Trillas. pp. 122.
+L3VYNLYPS1":H\SUPLY+"1HULJO4.".\LN\LU@")HJOuYL,0KLU[PÄJH[PVUVMNLULZ
[OH[HYLKPMMLYLU[PHSS`L_WYLZZLKPUOLTVJ`[LZVM[OL7HJPÄJIS\LZOYPTWLitopenaeus stylirostris)
surviving an infection with Vibrio penaeicida. Physiol Genomics, 21: 174-183.
+L 3H=LNH ," .HYJxH.HSHa (" +xHa*PUJV 4," :V[LSV4\UKV 99 2006. White shrimp (
Litopenaeus vannamei) recombinant lysozyme has antibacterial activity against Gram negative
bacteria: Vibrio alginolyticus, Vibrio parahemolyticus and Vibrio cholerae -PZO HUK :OLSSÄZO
+L3H=LNH,")LYUHYK 4" +LNUHU 49" /HSS 2">PSZVU 12007. Differential expression of
immune-related genes and transposable elements in black tiger shrimp (Penaeus monodon)
L_WVZLK [V H YHUNL VM LU]PYVUTLU[HS Z[YLZZVYZ -PZO HUK :OLSSÄZO 0TT\UVSVN` !
1072-1088.
+LZ[V\TPL\_+")\SL[7"3VL^+"=HU+VYZZLSHLY("9VKYPN\La1")HJOuYL,1997. Penaeidins:
A new family of antimicrobial peptides in the shrimp Penaeus vannamei (Decapoda). The
Journal of Biological Chemistry, 272: 28398-28406.
+LZ[V\TPL\_ +" )\SL[ 7" :[Y\I 14" )HJOuYL , 1999. Recombinant expression and range
of activity of penaeidins, antimicrobial peptides from penaeid shrimp. European Journal of
+LZ[V\TPL\_+"4\|Va4"*VZZLH\*"9VKYPN\La1")\SL[7"*VTWZ4")HJOuYL,2000.
Penaeidins, antimicrobial peptides with chiting-binding activity, are produced and stored in
shrimp granulocytes and released after microbial challenge. Journal of Cell Science, 113:
461-469.
+LZ[V\TPL\_.HYa}U +" :H\SUPLY +" .HYUPLY 1" 1V\MMYL` *" )\SL[ 7" )HJOuYL , 2001.
Crustacean immunity. Antifungal peptides are generated from the C terminus of shrimp
hemocyanin in response to microbial challenge. The Journal of Biological Chemistry, 276:
47070-47077.
+PLN\La<YPILVUKV 1" *LYLUP\Z 1 1998. The inhibition of extracellular proteinases from
Aphanomyces ZWW I` [OYLL KPMMLYLU[ WYV[LPUHZL PUOPIP[VYZ MYVT JYH`ÄZO ISVVK 4`JVSVNPJHS
Research, 102: 821-824.
+VVSP[[SL9-"9PSL`4 ;OLHTPUV[LYTPUHSZLX\LUJLVMSVIZ[LYÄIYPUVNLUYL]LHSZJVTTVU
ancestry with vitellogenins. Biochemical and Biophysical Research Communications, 167:
16-19.
+YPJRHTLY 2";H`SVY 4, 1993. Biology of animal lectins. Annual Review of Cell Biology; 9:
237-264.
+\?1"AOHV?-">HUN1?2007. Molecular cloning and characterization of a lipopolysaccharide
and ȕNS\JHU IPUKPUN WYV[LPU MYVT ÅLZO` WYHÛ Fenneropenaeus chinensis). Molecular
Immunology, 44: 1085-1094.
213
Duvic, B.; Söderhäll, K. 1990. 7\YPÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVUVMHIL[HNS\JHUIPUKPUNWYV[LPU

MYVT WSHZTH VM [OL JYH`ÄZO Pacifastacus leniusculus. Journal of Biological Chemistry, 265:
9327-9332.
Duvic, B.; Söderhäll, K. 7\YPÄJH[PVUHUKWHY[PHSJOHYHJ[LYPaH[PVUVMHIL[HNS\JHUIPUKPUN
WYV[LPUTLTIYHULYLJLW[VYMYVTISVVKJLSSZVM[OLJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. European
Journal of Biochemistry, 207: 223-228.
Duvic, B.; Söderhäll, K. 1993. Beta-1,3-glucan-binding proteins from plasma of the fresh-water
JYH`ÄZOLZ Astacus astacus and Procambarus clarkii. Journal of Crustacean Biology, 13:
403-408.
FAO – Fisheries and Aquaculture Department, 2007. Aquaculture Newsletter, 36p.
-PYL("?\:"4VU[NVTLY`42"2VZ[HZ:("+YP]LY:,"4LSSV** 7V[LU[HUKZWLJPÄJ
genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. Nature, 391:
806-811.
-SLNLS;>2007. Update on viral accommodation, a model for host-viral interaction in shrimp and
other arthropods. Developmental and Comparative Immunology, 31: 217-231.
-SLNLS;>" 7HZOHYH^PWHZ; 1998. Active viral accommodation: a new concept for crustacean
response to viral pathogens. In: FLEGEL, T.W. (ed.). Advances in shrimp biotechnology. National
Center for Genetic Engineering and Biotechnology. pp. 245-250.
-YHNRPHKHRPZ .(" :[YH[HRPZ ,2 1995 Characterization of hemolymph lectins in the prawn
Parapenaeus longirostris. Journal of Invertebrate Pathology, 65: 111-117.
-\@>"/V\>@"@LO:;"3P*/"*OLU1*2007. The immunostimulatory effects of hot-water
extract of Gelidium amansii via immersion, injection and dietary administrations on white
shrimp Litopenaeus vannamei and its resistance against Vibrio alginolyticus-PZOHUK:OLSSÄZO
-\QP[H;"6UVN\JOP2"6UVTV[V2"/PYHP9"@VUL`HTH4 2007. Triggering antiviral response
by RIG-I-related RNA helicases. Biochimie, 89: 754-760.
-\SSLY.4+VVSP[[SL9- :[\KPLZVMPU]LY[LIYH[LÄIYPUVNLU!07\YPÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVU
VMÄIYPUVNLUMYVT[OLZWPU`SVIZ[LY)PVJOLTPZ[Y`!
.HYNPVUP9")HYYHJJV4(1998. Hemocytes of the palaemonids Macrobrachium rosenbergii and
M. acanthurus, and of the penaeid Penaeus paulensis. Journal of Morphology, 236: 209-221.
.VSSHZ.HS]mU;":V[LSV4\UKV99"@tWPa7SHZJLUJPH."=HYNHZ9LX\LUH*"=HYNHZ(SIVYLZ
F.7\YPÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVUVMĮ2-macroglobulin from the white shrimp (Penaeus
vannamei) Comparative Biochemistry and Physiology, 134: 431-438.
.V[V(")SHUKPU:"9V`L[1"9LPJOOHY[14"3L]HZOPUH,( 2003. Silencing of Toll pathway
components by direct injection of double-stranded RNA into Drosophila melanogaster adult
ÅPLZ5\JSLPJ(JPKZ9LZLHYJO!
.YLLUILYN**")YPJRIPJOSLY71"9PJL@/1991. Transglutaminases: multifunctional cross-linking
enzymes that stabilized tissues. The FASEB Journal, 5: 3071-3077.
.YPZOVR( 2005. RNAi mechanisms in Caenorhabditis elegans. FEBS Letters, 579: 5932-5939.
.YVZZ7:")HY[SL[[;*")YV^K`*3"*OHWTHU9>">HYY.>2001. Immune gene discovery
I` L_WYLZZLK ZLX\LUJL [HN HUHS`ZPZ VM OLTVJ`[LZ HUK OLWH[VWHUJYLHZ PU [OL 7HJPÄJ>OP[L
Shrimp, Litopenaeus vannamei, and the Atlantic White Shrimp, L. setiferus. Developmental
and Comparative Immunology, 25: 565-577.
.\LN\LU@".HYUPLY1"9VILY[3"3LMYHUJ47"4V\NLUV[0:"+L3VYNLYPS1"1HULJO4".YVZZ
7:">HYY.>"*\[OILY[ZVU)1")HYYHJJV4(")\SL[7"(\TLSHZ("@HUN@")V+"
?PHUN1";HZZHUHRHQVU("7PX\LTHS+")HJOuYL,2006. PenBase, the shrimp antimicrobial
WLW[PKLWLUHLPKPUKH[HIHZL!ZLX\LUJLIHZLKJSHZZPÄJH[PVUHUKYLJVTTLUKLKUVTLUJSH[\YL
Developmental and Comparative Immunology, 30: 283-288.
.\LY[SLY * 2007. Estudo da produção intracelular de ânion superóxido pelos hemócitos dos
camarões marinhos Farfantepenaeus paulensis, Litopenaeus schmitti e L. vannamei. Trabalho
de conclusão de curso. Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis. p. 42.
.\PKV[[P3."*OPZHYP-=2001. Noncytolytic control of viral infections by the innate and adaptive
immune response. Annual Review of Immunology, 19: 65-91.
214
/HSS 13" 9V^SHUKZ +; /L[LYVNLULP[` VM SVIZ[LY HNNS\[PUPUZ 7\YPÄJH[PVU HUK
physiochemical characterization. Biochemistry-US, 13: 821-827.
Hall, M.; Vanheusden, M.C.; Söderhäll, K. 0KLU[PÄJH[PVUVM[OLTHQVYSPWVWYV[LPUZPUJYH`ÄZO
hemolymph as proteins involved in immune recognition and clotting. Biochemical and
Biophysical Research Communications, 216: 939-946.
/HSS4">HUN9"(U[^LYWLU92":V[[Y\W1LUZLU3":KLYOpSS2 ;OLJYH`ÄZOWSHZTH
clotting: a vitellogenin-related protein responsible for clot formation in crustacean blood.
Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 96: 1965-1970.
/HTPS[VU(1")H\SJVTIL+*1999. A species of small antisense RNA in posttranscriptional gene
silencing in plants. Science, 286: 950-952.
/HUUVU.1"2002. RNA interference. Nature, 418: 244-251.
/H\[VU*")YVJR[VU=":TP[O=12006. Cloning of a crustin-like, single whey-acidic-domain,
antibacterial peptide from the haemocytes of the European lobster, Homarus gammarus, and
its response to infection with bacteria. Molecular Immunology, 43: 1490-1496.
/L5"8PU8"?\?+PMMLYLU[PHSWYVÄSLVMNLULZL_WYLZZLKPUOLTVJ`[LZVM>OP[L:WV[:ÙKYVTL
Virus-resistant shrimp (Penaeus japonicus) by combining suppression subtractive hybridization
and differential hybridization. Antiviral Research, 66: 39-45.
/LUUPN 6" 0[HTP ;" 4HLKH 4" 2VUKV 4" 5H[Z\RHYP @" ;HRHOHZOP @ 1998. Analysis of
hemolymph immunoparameters in kuruma shrimp infected with penaeid rod-shaped DNA
virus. Fish Pathology, 33: 389-393.
/LYIPUPuYL1")YHX\HY[=HYUPLY*".Yu]L7":[Y\I14"-YuYL1"+VYZZLSHLY(="4HY[PU.2005.
Armadillidin: a novel glycine-rich antibacterial peptide directed against gram-positive bacteria
in the woodlouse Armadillidium vulgare (Terrestrial Isopod, Crustacean). Developmental and
Comparative Immunology, 29: 489-499.
/LYNLUOHOU/."/HSS4":KLYOpSS2 7\YPÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVUVMHUHSWOH
THJYVNSVI\SPUSPRLWYV[LPUHZLPUOPIP[VYMYVTWSHZTHVM[OLJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus.
The Biochemical Journal, 255: 801-806.
/LYUmUKLa3}WLa1".VSSHZ.HS]mU;"=HYNHZ(SIVYLZ-1996. Activation of the prophenoloxidase
system of the brown shrimp (Penaeus californiensis Holmes). Comparative Biochemistry and
Physiology, 113: 61-66.
/PRPTH:"/PRPTH1"9VQ[PUUHRVYU1"/PYVUV0"(VRP; 2003. Characterization and function of
kuruma shrimp lysozyme possessing lytic activity against Vibrio species. Gene, 316: 187-195.
/VMMTHUU1("9LPJOHY[14"/L[Y\*1996. Innate immunity in higher insects. Current Opinion
in Immunology, 8: 8-13.
/VSTISHK;";OYUX]PZ[76":KLYOpSS2"1VOHUZZVU4> 0KLU[PÄJH[PVUHUKJSVUPUNVM
an integrin ȕZ\I\UP[MYVTOLTVJ`[LZVM[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. The
Journal of Experimental Zoology, 277: 255-261.
/VS[ 9(" :\IYHTHUPHU .4" /HSWLYU ( et al.. 2002. The genome sequence of the malaria
mosquito Anopheles gambiae. Science, 298: 129-149.
/VZL1,"4HY[PU..".LYHYK(: (KLJHWVKOLTVJ`[LJSHZZPÄJH[PVUZJOLTLPU[LNYH[PUN
morphology, cytochemistry, and function. Biological Bulletin, 178: 33-45.
/V\ >@" *OLU 1* 2005. The immunostimulatory effect of hot-water extract of Gracilaria
tenuistipitata on the white shrimp Litopenaeus vannamei and its resistance against Vibrio
alginolyticus. -PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN` !
/Z\ :>" *OLU 1*" 2007. The immune response of white shrimp Penaeus vannamei and its
susceptibility to Vibrio alginolyticus\UKLYZ\SÄKLZ[YLZZ(X\HJ\S[\YL!
/\HUN;">HUN/"3LL:@"1VOHUZZVU4>":KLYOpSSS2"*LYLUP\Z32000. A cell adhesion
WYV[LPU MYVT [OL JYH`ÄZO Pacifastacus leniusculus, a serine proteinase homologue similar to
Drosophila masquerade. The Journal of Biological Chemistry, 275: 9996-10001.
0TQVUNQPYHR *" (TWHY`\W 7" ;HZZHUHRHQVU (" :P[[PWYHULLK : 2007. Antilipopolysaccharide
factor (ALF) of mud crab Scylla paramamosain: molecular cloning, genomic organization and
the antimicrobial activity of its synthetic LPS binding domain. Molecular Immunology, 44:
3195-3203.
215
0^HUHNH :" 3LL )3 2005. Recent advances in the innate immunity of invertebrate animals.
Biochemistry and Molecular Biology, 38: 128-150.
1HUL^H`*("4LKaOP[V]92002 Innate immune recognition. Annual Review of Immunology, 20:
197-216.
1PHUN."@\9"AOV\42006. Studies on nitric oxide synthase activity in haemocytes of shrimps
Fenneropenaeus chinensis and Marsupenaeus japonicus after white spot syndrome virus
infection. Nitric Oxide, 14: 219-227.
1PTtULa=LNH-":V[LSV4\UKV99"(ZJLUJPV-"=HYNHZ(SIVYLZ-2002. ȕ-1,3-D glucan binding
protein (BGBP) from the white shrimp, Penaeus vannamei, is also a heparin binding protein.
1PTtULa=LNH-"=HYNHZ(SIVYLZ- 2005. A four-Kazal domain protein in Litopenaeus vannamei
hemocytes. Developmental and Comparative Immunology, 29: 385-391.
1PYH]HUPJOWHPZHS 7" 3LL )3" :KLYOpSS 2 2006. Cell-mediated immunity in arthropods:
hematopoiesis, coagulation, melanization and opsonization. Immunobiology, 211: 213-236.
1PYH]HUPJOWHPZHS 7" 3LL :@" 2PT@(" (UKYLU ;" :KLYOpSS 0 2007a. Antibacterial peptides
PU OLTVJ`[LZ HUK OLTH[VWVPL[PJ [PZZ\L MYVT MYLZO^H[LY JYH`ÄZO Pacifastacus leniusculus:
characterization and expression pattern. Developmental and Comparative Immunology, 31:
441-455.
1PYH]HUPJOWHPZHS 7" 7\HUNSHYW 5" 7L[RVU :" +VUU\LH :" :KLYOpSS 0" :KLYOpSS 2 2007b.
Expression of immune-related genes in larval stages of the giant tiger shrimp, Penaeus monodon.
1VOHUZZVU 4> 1999b. Cell adhesion molecules in invertebrate immunity. Developmental and
1VOHUZZVU 4>" /VSTISHK ;" ;OYUX]PZ[ 76" *HTTHYH[H 4" 7HYYPULSSV 5" :KLYOpSS
K. 1999a. A cell-surface superoxide dismutase is a binding protein for peroxinectin, a cell-
HKOLZP]LWLYV_PKHZLPUJYH`ÄZO1V\YUHSVM*LSS:JPLUJL!
1VOHUZZVU4>"2L`ZLY7":KLYOpSS2 7\YPÄJH[PVUHUKJ+5(JSVUPUNVMHMV\YKVTHPUZ
2HaHSWYV[LPUHZLPUOPIP[VYMYVTJYH`ÄZOISVVKJLSSZ,\YVWLHU1V\YUHSVM)PVJOLTPZ[Y`!
389-394.
1VOHUZZVU4>"2L`ZLY7":YP[\U`HS\JRZHUH2":KLYOpSS22000. Crustacean haemocytes and
haematopoiesis. Aquaculture, 191: 45-52.
1\ZZPSH1"4JIYPKL:"1HNV1",]HUZ3/2001 Hemolymph clotting time as an indicator of stress
in western rock lobster (Panulirus cygnus George). Aquaculture, 199: 185-193.
2HUN+"3P\."3\UKZ[YVT(".LS\PZ,":[LPULY/1998. A peptidoglycan recognition protein
in innate immunity conserved from insects to humans. Proceedings of the National Academy
of Sciences USA, 95: 10078-10082.
2H^HIH[H :0" 0^HUHNH : 1999. Role of lectins in the innate immunity of horseshoe crab.
2H^HIH[H:0"4\[H;"0^HUHNH:1996. The clotting cascade and defense molecules found in
[OLOLTVS`TWOVM[OLOVYZLZOVLJYHI0U!:k+,9/f332"0>(5(.(:"=(:;(.9LKZ
New Directions in Invertebrate Immunology. SOS Publications, Fair Haven. pp. 255-283.
2OHUVIKLL2":VV^HUUH`HU*"-SLNLS;>"<IVS:">P[O`HJO\TUHYUR\S) 2002. Evidence for
apoptose correlated with mortality in the giant black tiger shrimp Penaeus monodon infected
with yellow head virus. Diseases of Aquatic Organisms, 48:79-90.
2OVV3"9VIPUL[[L+>"5VNH,11999. Callinectin, an antibacterial peptide from blue crab,
Callinectes sapidus, hemocytes. Marine Biotechnology, 1: 44-51.
Komatsu, M.; Ando, S. 1998 A very-high-density lipoprotein with clotting ability from hemolymphof
ZHUKJYH`ÄZOIbacus ciliatus. Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 62: 459-463.
2VUKV4"0[HTP;";HRHOHZOP@1992 The phenoloxidase activity in prawn hemocytes. Gyobyo
Kenkyu, 27: 185-189.
216
2VWmJLR7".Y\IOVMMLY3":KLYOpSS21993a. Isolation and characterization of a hemagglutinin

^P[O HMÄUP[` MVY SPWVWVS`ZHJJOHYPKLZ MYVT WSHZTH VM [OL JYH`ÄZO Pacifastacus leniusculus.
Kopácek, P.; Hall, M.; Söderhäll, K., 1993b. Characterization of a clotting proteins isolated from
WSHZTHVM[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. European Journal of Biochemistry,
213: 591-597.
Krause, C.D.; Pestka, S. 2005. Evolution of the Class 2 cytokines and receptors, and discovery of new
friends and relatives. Pharmacology and Therapeutics, 106: 299-346.
Kröncke, K.D.; Fehse, K.; Kolb-Bachofen, V. 1997. Nitric Oxide: cytotoxicity versus cytoprotection -
OV^Ô`ÔLUHUKÔLYL&5P[YPJ6_PKL!
3HP*@"*OLUN>"2\V*4 2005. Molecular cloning and characterisation of prophenoloxidase
from haemocytes of the white shrimp, Litopenaeus vannamei-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`
18: 417-430.
3L4V\SSHJ."/HMMULY7 2000. Environmental factors affecting immune responses in Crustacea.
Aquaculture, 191: 121-131.
3L 4V\SSHJ ." 3L .YV\TLSSLJ 4" (UZX\LY +" -YVZPZZHYK :" 3L]` 7" (X\HJVW 1997.
Haematological and phenoloxidase activity changes in the shrimp Penaeus stylirostris in
YLSH[PVU^P[O[OLTV\S[J`JSL!WYV[LJ[PVUHNHPUZ[]PIYPVZPZ-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
227-234.
3LL22*@P3PUN3P\7* 1999. Hemostasis of tiger prawn Penaeus monodon affected by Vibrio
harveyi, extracellular products and a toxic cysteine protease. Blood Cells, Molecules, and
Diseases, 25: 180-192.
3LL :@" 3LL )3" :KLYOpSS 2 2003. Processing of an antibacterial peptide from hemocyanin
VM[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. The Journal of Biological Chemistry, 278:
7927-7933.
3LL:@":KLYOpSS22001. Characterization of a pattern recognition protein, a masquerade-like
WYV[LPUPU[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. The Journal of Immunology, 166:
7319-7326.
3LL :@" :KLYOpSS 2 ,HYS` L]LU[Z PU JY\Z[HJLHU PUUH[L PTT\UP[` -PZO HUK :OLSSÄZO
3LL:@">HUN9":KLYOpSS22000. A lipopolysaccharide-and-ȕ-1,3-glucan binding protein from
OLTVJ`[LZ VM [OL MYLZO^H[LY JYH`ÄZO Pacifastacus leniusculus 7\YPÄJH[PVU JOHYHJ[LYPaH[PVU
and cDNA cloning. The Journal of Biological Chemistry, 275: 1337-1343.
3LOHUL 41 1997. Peritrophic matrix structure and function. Annual Review of Entomology, 42:
505-525.
3LTHP[YL )" 5PJVSHZ ," 4PJOH\[ 3" 9LPJOOHY[ 14" /VMMTHUU 1H 1996. The dorsoventral
regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in
Drosophila adults. Cell, 86: 973-983.
3L\1/"*OHIN**">\13"/Z\*>"/PYVUV0"(VRP;"1\HU/-"3V*-"2\V./"/\HUN
/. 2007. Comparative analysis of differentially expressed genes in normal and white spot
syndrome virus infected Penaeus monodon. BMC Genomics, doi:10.1186/1471-2164-8-120.
Liang, Z.; Söderhäll, K. 0ZVSH[PVUVMJ+5(LUJVKPUNHUV]LSZLYWPUVMJYH`ÄZOOLTVJ`[LZ
Comparative Biochemistry and Physiology, 2: 385-391.
3PHUN A" :V[[Y\W1LUZLU 3" :KLYOpSS 2 1997. Pacifastin, a novel 155-kDa heterodimeric
proteinase inhibitor containing a unique transferrin chain. Proceedings of the National
Academy of Sciences USA, 94: 6682-6687.
Lightner, D.V. 1996. Epizootiology, distribution and the impact on international trade of two penaeid
shrimp viruses in the Americas. Review of Science and Technology, 15: 579-601.
3PU@*"=HZLLOHYHU)"2V*-"*OLU1*2008. Molecular cloning and phylogenetic analysis
on Į2-macroglobulin (Į2-M) of white shrimp Litopenaeus vannamei. Developmental and
217
3PU@*"=HZLLOHYHU)"2V*-"*OPV\;;"*OLU1* 2007. Molecular cloning and characterisation

of a proteinase inhibitor, alpha 2-macroglobulin (alpha2-M) from the haemocytes of tiger
shrimp Penaeus monodon. Molecular Immunology, 44: 1065-1074.
3P\*/";ZLUN+@"3HP*@"*OLUN>"2\V*42006b. Molecular cloning and characterisation
of prophenoloxidase cDNA from haemocytes of the giant freshwater prawn, Macrobrachium
rosenbergiiHUKP[Z[YHUZJYPW[PVUPUYLSH[PVU^P[O[OLTV\S[Z[HNL-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`
21: 60-69.
3P\ -" 3P\ @" 3P -" +VUN )" ?PHUN 1 4VSLJ\SHY JSVUPUN HUK L_WYLZZPVU WYVÄSL VM
putative antilipopolysaccharide factor in Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis). Marine
Biotechnology NY, 7: 600-608.
3P\/"1PYH]HUPJOWHPZHS7":KLYOpSS0"*LYLUP\Z3":KLYOpSS22006a. Antilipopolysaccharide
factor interferes with white spot syndrome virus replication in vitroHUKPU]P]VPU[OLJYH`ÄZO
Pacifastacus leniusculus. Journal of Virology, 80: 10365-10371.
3P\@*"3P-/"+VUN)">HUN)"3\HU>"AOHUN?1"AOHUN3:"?PHUN1/2007. Molecular
cloning, characterization and expression analysis of a putativeC-type lectin (Fclectin) gene in
Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis. Molecular Immunology, 44: 598-607.
Lorand, L.; Conrad, S.M. 1984. Transglutaminases. Molecular and Cellular Biochemistry, 58: 9-35.
3VYHUK3":PLMYPUN.,";VUN@:")Y\ULY3VYHUK1".YH`(1 +HUZ`SJHKH]LYPULZWLJPÄJ
staining for transamidating enzymes. Analytical Biochemistry, 93: 453- 458.
3\IaLUZ,"9H]PK;"2OH`H[4"+H\IL5";PL[a(1997. Isolation and characterization of the
high-density lipoproteins from the hemolymph and ovary of the penaeid shrimp Penaeus
semisulcatus de Haan.: apoproteins and lipids. The Journal of Experimental Zoology, 278:
339-348.
Luo, T.; Li, F.; Lei, K.; Xu, X. 2007. Genomic organization, promoter characterization and expression
WYVÄSLZVMHUHU[P]PYHSNLUL7T(=MYVT[OLZOYPTWPenaeus monodon. Molecular Immunology,
44: 1516-1523.
3\V;"@HUN/"3P-"AOHUN?"?\?7\YPÄJH[PVUJOHYHJ[LYPaH[PVUHUKJ+5(JSVUPUNVM
a novel lipopolissacharide-binding lectin from the shrimp Penaeus monodon. Developmental
Luo, T.; Zhang, X.; Shao, Z.; Xu X. 2003. PmAV, a novel gene involved in virus resistance of shrimp
Penaeus monodon. FEBS Letters; 551: 53-57.
Maggioni, D.S.; Andreatta, E.R.; Hermesc, E.M.; Barracco, Ma. 2004. Evaluation of some hemato-
immunological parameters in female shrimp Litopenaeus vannamei submitted to unilateral
eyestalk ablation in association with a diet supplemented with superdoses of ascorbic acid as
a form of immunostimulation. Aquaculture, 241: 501-515.
Marques, M.R.F.; Barracco, M.A. 2000 Lectins, as non-self recognition factors, in crustaceans.
Aquaculture, 191:23-44.
4HY[PU.."/VZL1,"6TVYP:"*OVUN*"/VVKIOV`;"4HJRYLSS51991. Localization and
roles of coagulogen and transglutaminase in hemolymph coagulation in decapod crustaceans.
Comparative Biochemistry and Physiology, 100: 517- 522.
4HY[PU .." /VZL 1," 4PURH ." 9VZLUILYN : 1996. Clearance of bacteria injected into
the hemolymph of the ridgeback prawn, Sicyonia ingentis (Crustacea: Decapoda): Role of
hematopoietic tissue. Journal of Morphology, 227: 227-233.
4LKaOP[V]9"1HUL^H`*(1997. Innate immunity: the virtues of a nonclonal system of recognition.
Cell, 91: 295-298.
4VU[H|V7tYLa2"@tWPa7SHZJLUJPH."/PN\LYH*PHWHYH0"=HYNHZ(SIVYLZ- 7\YPÄJH[PVU
and characterization of the clotting protein from the white shrimp Penaeus vannamei.
Comparative Biochemistry and Physiology, 122: 381- 387.
4\|Va 4" *LKL|V 9" 9VKYxN\La 1"=HU +LY 2UHHW>7>" 4PHSOL ," )HJOuYL , 2000.
Measurement of reactive oxygen intermediate production in haemocytes of the penaeid
shrimp, Penaeus vannamei. Aquaculture 191: 89-107.
218
4\|Va4"=HUKLUI\SJRL-".\LN\LU@")HJOuYL, 2003. Expression of penaeidin antimicrobial

peptides in early larval stages of the shrimp Penaeus vannamei. Developmental and Comparative
4\|Va4"=HUKLUI\SJRL-":H\SUPLY+")HJOuYL,2002. Expression and distribution of penaeidin
antimicrobial peptides are regulated by haemocyte reactions in microbial challenged shrimp.
European Journal of Biochemistry, 269: 2678-2689.
4\YWO`47"7HJRLY4(":JHYSL[[13"4HY[PU:> 7LYV_ÙP[YP[L!()PVSVNPJHSS`:PNUPÄJHU[
Oxidant. General Pharmacology, 31: 179-186.
4\Y\NHZ\8LP )" 9VKYPN\LZ="@HUN ?" *OPH> 1995. Masquerade: a novel secreted serine
protease-like molecule is require for somatic muscle attachment in the Drosophila embryo.
Genes and Development, 9: 139-154.
4\[H;"0^HUHNH: 1996 The role of hemolymph coagulation in innate immunity. Current Opinion
in Immunology, 8: 41-47.
5HNVZOP/"0UHNH^H/"4VYPP2"/HYHKH/"2VOJOP*"5PZOPaH^H;";HUPN\JOP@"<LUVIL
4"/VUKH;"2VUKVO4";HRHOHZOP@":VTH.2006. Cloning and characterization of a
LPS-regulatory gene having an LPS binding domain in kuruma prawn Marsupenaeus japonicus.
Molecular Immunology, 43: 2061-2069.
5HWWP(1"6[[H]PHUP,2000 Cytotoxicity and cytotoxic molecules in invertebrates. Bioassays, 22:
469-480.
5HWWP(1"=HZZ,1993 Melanogenesis and the generation of cytotoxic molecules during insect
cellular immune-reactions. Pigment Cell Research, 6: 117-126.
5VNH ,1 2000. Hemolymph biomarkers of crustacean health. In: FINGERMAN, M.;
NAGABHUSHANAM, R. (eds.). Recent Advances in Marine Biotechnology. Science Publishers.
pp. 125-164.
Ochiai, M.; Ashida, M. 1999. A pattern recognition protein for peptidoglycan: cloning the cDNA
and the gene of the silkworm, Bombyx mori. The Journal of Biological Chemistry, 274:
11854-11858.
Okumura, T. 2007. Effects of lipopolysaccharide on gene expression of antimicrobial peptides
WLUHLPKPUZHUKJY\Z[PUZLYPULWYV[LPUHZLHUKWYVWOLUVSV_PKHZLPUOHLTVJ`[LZVM[OL7HJPÄJ
white shrimp, Litopenaeus vannamLP-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
7HU1"2\YVZR`("?\)"*OVWYH(2"*VWWLUOH]LY+/":PUNO07")HYVU: 2000. Broad
antiviral activity in tissues of crustaceans. Antiviral Research, 48: 39-47.
7H[H[:("*HYULNPL9)"2PUNZI\Y`*".YVZZ7:"*OHWTHU9":JOL`232004. Antimicrobial
HJ[P]P[` VM OPZ[VULZ MYVT OLTVJ`[LZ VM [OL 7HJPÄJ ÔP[L ZOYPTW ,\YVWLHU 1V\YUHS VM
7LYHaaVSV 34" )HYYHJJV 4( 1997. The prophenoloxidase activating system of the shrimp,
Penaeus paulensis and associated factors. Developmental and Comparative Immunology, 21:
385-395.
7LYHaaVSV 34" .HYNPVUP 9" 6NSPHYP 7" )HYYHJJV 4( 2002. Evaluation of some hemato-
immunological parameters in the shrimp Farfantepenaeus paulensis submitted to environmental
and physiological stress. Aquaculture, 214: 19-33.
7LYHaaVSV 34" 3VYLUaPUP +4" +HMMYL :" )HYYHJJV 4( 7\YPÄJH[PVU HUK WHY[PHS
characterization of the plasma clotting protein from the pink shrimp Farfantepenaeus paulensis.
Comparative Biochemistry and Physiology, 142: 302-307.
7OVUNKHYH(">HUUH>"*OV[PNLH[>2006. Molecular cloning and expression of caspase from
white shrimp Penaeus merguiensis. Aquaculture, 252: 114-120.
Ratanapo, S.; Chulavatnatol, M. 1992 Monodin-induced agglutination of Vibrio ]\SUPÄJ\Z, a major
infective bacterium in black tiger prawn (Penaeus monodon). Comparative and Biochemistry
Physiology, 97: 515-20.
9H[[HUHJOHP (" /PYVUV 0" 6OPYH;";HRHOHZOP@" (VRP; 2004a. Cloning of kuruma prawn
Marsupenaeus japonicus crustin-like peptide cDNA and analysis of its expression. Fisheries
Science, 70: 765-771.
219
9H[[HUHJOHP (" /PYVUV 0" 6OPYH ;" ;HRHOHZOP @" (VRP ; 2004b. Molecular cloning and
expression analysis of alpha2-macroglobulin in the kuruma shrimp, Marsupenaeus japonicus.
9LSM 14" *OPZOVST 19" 2LTW .+" :TP[O=1 7\YPÄJH[PVU HUK JOHYHJ[LYPaH[PVU VM H
cysteine-rich 11.5-kDa antibacterial protein from the granular haemocytes of the shore crab,
Carcinus maenas. European Journal of Biochemistry, 264: 350-357.
9LKK` 2=" @LKLY` 9+" (YHUOH * 2004. Antimicrobial peptides: premises and promises.
International Journal of Antimicrobial Agents, 24: 536-547.
9VIHSPUV1"(STLPKH1:"4JRPSSLU+"*VSNSHaPLY1";YLU[/-"*OLU@("7LJR4,")YV^K`
*3"*OHWTHU9>">HYY.>".YVZZ7:2007b. Insights into the immune transcriptome
of the shrimp Litopenaeus vannamei! [PZZ\LZWLJPÄJ L_WYLZZPVU WYVÄSLZ HUK [YHUZJYPW[VTPJ
responses to immune challenge. Physiol Genomics, 29: 44-56.
9VIHSPUV1")HY[SL[[;*"*OHWTHU9>".YVZZ7:")YV^K`*3">HYY.>2007a. Double-
stranded RNA and antiviral immunity in marine shrimp: inducible host mechanisms and
evidence for the evolution of viral counter-responses. Developmental and Comparative
9VIHSPUV1")HY[SL[[;":OLWHYK,"7YPVY:"1HYHTPSSV.":J\YH,"*OHWTHU9>".YVZZ7:"
)YV^K` *3">HYY .> +V\ISLZ[YHUKLK 95( PUK\JLZ ZLX\LUJLZWLJPÄJ HU[P]PYHS
ZPSLUJPUN PU HKKP[PVU [V UVUZWLJPÄJ PTT\UP[` PU H THYPUL ZOYPTW! JVU]LYNLUJL VM 95(
PU[LYMLYLUJL HUK PUUH[L PTT\UP[` PU [OL PU]LY[LIYH[L HU[P]PYHS YLZWVUZL& 1V\YUHS VM=PYVSVN`
79: 13561-13571.
9VIHSPUV1")YV^K`*3"7YPVY:"4L[a("7HYULSS7".YVZZ7">HYY. 2004. Induction of
antiviral immunity by double-stranded RNA in a marine invertebrate. Journal of Virology, 78:
10442-10448.
Roch, P. 1999. Defense mechanisms and disease prevention in farmed marine invertebrate.
9VJO\ +" -PUL 14 1978. Antigenic structure of the hemocyanin in six species of decapod
Crustacea. Comparative and Biochemistry Physiology, 59: 145-150.
9VKYxN\La1"3L4V\SSHJ. 2000. State of the art of immunological tools and health control of
penaeid shrimp. Aquaculture, 191: 109-119.
9VTV-PN\LYVH 4." =HYNHZ9LX\LUH *" :V[LSV4\UKV 99" =HYNHZ(SIVYLZ -" /PN\LYH
*PHWHYH0":KLYOpSS2"@tWPa7SHZJLUJPH.2004. Molecular cloning of a ȕ-glucan pattern-
recognition lipoprotein from the white shrimp Penaeus (Litopenaeus) vannamei: correlations
between the deduced amino acid sequence and the native protein structure. Developmental
Rosa, R.D.; Bandeira, P.T.; Barracco, M.A. 2007a. Molecular cloning of crustins from the hemocytes
of Brazilian penaeid shrimps. FEMS Microbiology Letters, 274: 287-290.
9VZH 9+" 7LYHaaVSV 34" )HYYHJJV 4(. 2008. Comparison of the thioester domain and
adjacent regions of the alpha2-macroglobulin from different South Atlantic crustaceans. Fish
HUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
9VZHZ *" *\aVU ." .H_PVSH ."(YLUH 3" 3LTHPYL 7" :V`La *"=HU>VYTOV\K[( 2000.
0UÅ\LUJLVMKPL[HY`JHYIVO`KYH[LVU[OLTL[HIVSPZTVMQ\]LUPSLLitopenaeus stylirostris. Journal
of Experimental Marine Biology and Ecology, 249: 181-198.
Roulston, A.; Marcellus, R.C.; Branton, P.E. 1999. Viruses and apoptose. Annual Review of
Microbiology, 53: 577-628.
9V\_ 44" 7HPU (" 2SPTWLY 29" +OHY (@ 2002. The lipopolysaccharide and b-1,3-glucan
binding protein gene is upregulated in white spot virus-infected shrimp (Penaeus stylirostris).
Journal of Virology, 76: 7140-7149.
9\Pa=LYK\NV34".HYJxH)H|\LSVZ4"=HYNHZ(SIVYLZ-"/PN\LYH*PHWHYH0@tWPa7SHZJLUJPH
.41997. Amino acids and lipids of the plasma HDL from the white shrimp Penaeus vannamei
Boone. Comparative Biochemistry and Physiology, 118: 91-96.
:HKSLY1,1991. von Willebrand factor. The Journal of Biological Chemistry, 266: 22777-22780.
220
Sahtout, A.H.; Hassan, M.D.; Shariff, M. 2001. DNA fragmentation, an indicator of apoptose, in
cultured black tiger shrimp Penaeus monodon infected with white spot syndrome virus (WSSV).
Diseases of Aquatic Organisms, 44: 155-159.
Samuel, C.E. 2001. Antiviral actions of interferons. Clinical Microbiology Reviews, 14: 778-809.
:mUJOLa (" 7HZJ\HS *" :mUJOLa (" =HYNHZ(SIVYLZ -" 3L 4V\SSHJ ." 9VZHZ * 2001.
Hemolymph metabolic variables and immune response in Litopenaeus setiferus adult males:
the effect of acclimation. Aquaculture, 198: 13-28.
:HYH[OP 4"(OTLK=70"=LURH[LZHU *" )HSHZ\IYHTHUPHU ." 7YHIH]H[O` 1" /HTLLK(::
2007. Comparative study on immune response of Fenneropenaeus indicus to Vibrio alginolyticus
and white spot syndrome virus. Aquaculture, 271: 8-20.
:JOVSa<".HYJPH+PHa."9PJX\L+"*Y\a:\HYLa3L"=HYNHZ(SIVYLZ-"3H[JOMVYK11999.
Enhancement of vibriosis resistance in juvenile Penaeus vannamei by supplementation of diets
with different yeast products. Aquaculture, 176: 271-283.
:JOUHWW +" 2LTW .+" :TP[O=1 7\YPÄJH[PVU HUK JOHYHJ[LYPaH[PVU VM H WYVSPULYPJO
antibacterial peptide, with sequence similarity to bactenecin-7, from the haemocytes of shore
crab, Carcinus maenas. European Journal of Biochemistry, 240: 532-539.
Sequeira, T.; Taveres, D.; Arala-Chaves, M. 1996. Evidences for circulating hemocytes proliferation
in the shrimp Penaeus japonicus. Developmental and Comparative Immunology, 20: 97-104.
:PLYYH*"3HZJ\YHPU9"7LYL`YH(".\L]HYH1"4HY[xULa."(N\UKPZ*"ALU[LUV,"=maX\La
L. 2005. Participation of serum and membrana lectins on the oxidative burst regulation in
Macrobrachium rosenbergii hemocytes. Developmental and Comparative Immunology, 29:
113-121.
:PTVUL[ ." *SHL`Z 0" )YVLJR 1= 2002. Structural and functional properties of a novel serine
protease inhibiting peptide family in arthropods. Comparative Biochemistry and Physiology,
132: 247-255.
:TP[O=1")YVÛ1/"/H\[VU*2003. Immunostimulation in crustaceans: does it really protect
HNHPUZ[PUMLJ[PVU&-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
:KLYOpSS0")HUN`LLRO\U,"4H`V:":KLYOpSS22003. Hemocyte production and maturation
in an invertebrate animal; proliferation and gene expression in hematopoietic stem cells of
Pacifastacus leniusculus. Developmental and Comparative Immunology, 27: 661-672.
Söderhäll, K.; Cerenius, L. 1992. Crustacean Immunity. Annual Review of Fish Disease, 2: 3-23.
Söderhäll, K.; Cerenius, L. 1998 Role of the prophenoloxidase-activating system in invertebrate
immunity. Current Opinion in Immunology, 10: 23-28.
:VTIVVU^P^H[ 2" 4HYJVZ 4" ;HZZHUHRHQVU (" 2SPUI\UNH :" (\TLSHZ (" 9VTLZ[HUK )"
.\LN\LU@" )VaL /" 4V\SPU ." )HJOuYL , 2005. Recombinant expression and anti-
microbial activity of anti-lipopolysaccharide factor (ALF) from the black tiger shrimp Penaeus
monodon. Developmental and Comparative Immunology, 29: 841-851.
:VTIVVU^P^H[2":\W\UN\S7"9PTWOHUP[JOH`HRP[="(VRP;"/PYVUV0";HZZHUHRHQVU(2006.
Differentially Expressed Genes in Hemocytes of Vibrio harveyi-challenged Shrimp Penaeus
monodon. Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 39: 26-36.
:VTWYHZVUN 5" 9PTWOHUP[JOH`HRP[=";HZZHUHRHQVU( ( Ä]LKVTHPU 2HaHS[`WL ZLYPUL
proteinase inhibitor from black tiger shrimp Penaeus monodon and its inhibitory activities.
:VUN@3"/ZPLO@; Immunostimulation of tiger shrimp (Penaeus monodon) hemocytes for
generation of microbicidal substances: analysis of reactive oxygen species. Developmental and
:VUN@3"@\ *0" 3PLU;>" /\HU **" 3PU 45 /HLTVS`TWO WHYHTL[LYZ VM 7HJPÄJ
white shrimp ( Litopenaeus vannameiPUMLJ[LK^P[O;H\YHZÙKYVTL]PY\Z-PZOHUK:OLSSÄZO
:VUN@3"/\HUN**2000. Application of immunostimulants to prevent shrimp deseases. In:
FINGERMAN, M.; NAGABHUSHANAM, R. (eds.). Recent Advances in Marine Biotechnology.
Science Publishers. pp. 173-188.
221
:V[LSV4\UKV 99" 0ZSHZ6Z\UH 4(" +L3H9L=LQH ," /LYUmUKLa3}WLa 1"=HYNHZ(SIVYLZ

-"@tWPa7SHZJLUJPH . 2003. cDNA cloning of the lysozyme of the white shrimp Penaeus
vannamei-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
:W`JOLY:,"(Y`(:"0ZLUTHU+,"7HPU[LY9/1978. A functional, thioester-containing alpha2-
macroglobulin homologue isolated from the hemolymph of the American lobster (Homarus
americanus). The Journal of Biological Chemistry, 262: 14606-14611.
:YPJOHYVLU:"2PT11";\URPQQHU\RPQ:":KLYOpSS02005. Exocytosis and proteomic analysis of
[OL]LZPJSLJVU[LU[VMNYHU\SHYOLTVJ`[LZMYVTHJYH`ÄZO+L]LSVWTLU[HSHUK*VTWHYH[P]L
Immunology, 29: 1017-1031.
:YP[\U`HS\JRZHUH 2" *LYLUP\Z 3" :KLYOpSS 2 1999b. Molecular cloning and characterization
of prophenoloxidase in the black tiger shrimp, Penaeus monodon. Developmental and
:YP[\U`HS\JRZHUH2"3LL:@":KLYOpSS22002. A ȕ-1,3-glucan binding protein from the black
tiger shrimp Penaeus monodon. Developmental and Comparative Immunology, 26: 237-235.
:YP[\U`HS\JRZHUH 2" :P[OPZHYU 7" >P[OH`HJO\TUHYUR\S )" -SLNLS ;> 1999a. Activation of
prophenoloxidase, agglutinin antibacterial activity in hemolymph of the black tiger prawn,
Penaeus monodonI`PTT\UVZ[PT\SHU[Z-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN` !
:YP[\U`HS\JRZHUH2":KLYOpSS22000. The proPO and clotting system in crustaceans. Aquaculture,
191: 53-69.
:[LPULY/"/\S[THYR+",UNZ[YT(")LUUPJO/")VTHU/. :LX\LUJLHUKZWLJPÄJP[`
of two antibacterial proteins involved in insect immunity. Nature, 292: 246-248.
:\W\UN\S 7" 2SPUI\UNH :" 7PJO`HUNR\YH 9" /PYVUV 0" (VRP ;" ;HZZHUHRHQVU ( 2004.
Antimicrobial peptides discovered in the black tiger shrimp Penaeus monodon using the EST
approach. Diseases of Aquatic Organisms, 61: 123-35.
:\W\UN\S 7" 2SPUI\UNH :" 7PJO`HUNR\YH 9" 1P[YHWHRKLL :" /PYVUV 0"(VRP;";HZZHUHRHQVU
A. 0KLU[PÄJH[PVUVMPTT\ULYLSH[LKNLULZPUOLTVJ`[LZVMISHJR[PNLYZOYPTWPenaeus
monodon). Marine Biotechnology, 4: 487-494.
:\UN//"@HUN@3":VUN@31996 .Enhancement of microbicidal activity in the tiger shrimp
Penaeus monodon via immunostimulation. Journal of Crustacean Biology, 16: 278-284.
:\UN//"2V\./":VUN@31994. Vibriosis resistance induced by glucan treatment in tiger
shrimp (Penaeus monodon). Fish Pathology, 29:11-17.
:\a\RP;";HRHNP;"-\Y\RVOYP;"2H^HT\YH2"5HRH\JOP41990. A calcium-dependent galactose-
binding lectin from the tunicate Polyandrocarpa misakiensis. Isolation, characterization, and
amino acid sequence. The Journal of Biological Chemistry, 265: 1274-1281.
;HRHOHZOP@"2VUKV4"0[HTP;"/VUKH;"0UHNH^H/"5PZOPaH^H;":VTH.0"@VRVTPaV
@2000. Enhancement of disease resistance against penaeid acute viraemia and induction of
virus-inactivating in haemolymph of kuruma shrimp, Penaeus japonicus, by administration of
Pantoea agglomerans SPWVWVS`ZHJJOHYPKL37:-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
;HUHRH:"5HRHT\YH;"4VYP[H;"0^HUHNH:1982. Limulus anti-LPS factor: an anticoagulant
which inhibits the endotoxin mediated activation of Limulus coagulation system. Biochemical
and Biophysical Research Communications, 105: 717-723.
;H\ZaPN :" 1V\HUN\` ," /VMMTHUU 1(" 0TSLY 13 2000. Toll-related receptors and the control
of antimicrobial peptide expression in Drosophila. Proceedings of the National Academy of
Sciences USA, 97: 10520-10525.
TCSC (The Caenorhabditis Elegans Sequence Consortium). 1998. Genome sequence of the
nematode C. elegans: a platform for investigating biology. Science, 282: 2012-2018.
;ONZJ;OL/VULÌLL.LUVTL:LX\LUJPUN*VUZVY[P\T2006. Insights into social insects from the
genome of the honeybee Apis mellifera. 5H[\YL, 443: 931-949.
;OLVWVSK<":JOTPK[6":KLYOpSS2"+\ZOH`4:2004. Coagulation in arthropods: defense,
wound closure and healing. Trends in Immunology, 25: 378-388.
;OYYUX]PZ[76"1VOHUZZVU4>":KLYOpSS21994. Opsonic activity of cell adhesion proteins
and b-1,3-glucan-binding proteins from two crustaceans. Developmental and Comparative
222
;PYHZVWOVU>"9VZOVYT@"7HU`PT: 2005. Silencing of yellow head virus replication in penaeid

shrimp cells by dsRNA. Biochemical and Biophysical Research Communications, 334:
102-107.
Toke, O. (U[PTPJYVIPHS WLW[PKLZ! UL^ JHUKPKH[LZ PU [OL ÄNO[ HNHPUZ[ IHJ[LYPHS PUMLJ[PVUZ
Biopolymers, 80: 717-735.
;VUNHU\U[4"7OVUNKHYH("*OV[PNLH[>"-\QP20KLU[PÄJH[PVUHUKJOHYHJ[LYPaH[PVUVM
syntenin binding protein in the black tiger shrimp Penaeus monodon. Journal of Biotechnology,
120: 135-145
;V^SL+>":TP[O*42006. Gene discovery in Carcinus maenas and Homarus americanus via
expressed sequence tags. Integrative and Comparative Biology, 46: 912-918.
Tsvetnenko, E.; Fotedar, S.; Evans, L. 2001 Antibacterial activity in the haemolymph of western rock
lobster, Panulirus cygnus. Marine Freshwater Research, 52: 1407-1412.
Uematsu, S.; Akira S. 2006. Toll-like receptors and innate immunity. Journal of Molecular Medicine,
84: 712-725.
Uematsu, S.; Akira S. 2007. Toll-like receptors and Type I interferons. The Journal of Biological
Chemistry, 282: 15319-15323.
=HU+L)YHHR*);")V[[LYISVT4/("3P\>"=HU+LY2UHHW>7>"9VTIV\[1/>4
2002a. The role of the haematopoietic tissue in haemocyte production and maturation in the
black tiger shrimp (Penaeus monodon-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
=HU+L)YHHR*)")V[[LYISVT4/(";H]LYUL5"=HU4\PZ^PURLS>)"9VTIV\[1/>4"
=HU+LY2UHHW>7> 2002b The roles of haemocytes and the lymphoid organ in the clearance
of injected Vibrio bacteria in Penaeus monodonZOYPTW-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
293-309.
=HYNHZ(SIVYLZ -" .\aTHU 4(" 6JOVH 13 1993. A lipopolysaccharide binding agglutinin
isolated from brown shrimp (Penaeus californiensis Holmes) haemolymph. Comparative
Biochemistry and Physiology, 104: 407-413.
=HYNHZ(SIVYLZ -" 1PTtULa=LNH -" :KLYOpSS 2 1996. A plasma protein isolated from brown
shrimp (Penaeus californiensis Holmes) which enhances the activation of prophenoloxidase
system by ȕ-1,3-glucan. Developmental and Comparative Immunology, 20: 299-306.
=HZLLOHYHU)"3PU@*"2V*-"*OPV\;;"*OLU1* 2007. Molecular cloning and characterisation
of a thioester-containing alpha2-macroglobulin (alpha2-M) from the haemocytes of mud crab
Scylla serrata-PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
=maX\La3"4HSKVUHKV."(N\UKPZ*"7tYLa("*VVWLY,3"ALU[LUV,1997. Participation of
HZPHSPJHJPKZWLJPÄJSLJ[PUMYVT[OLMYLZO^H[LYWYHÛMacrobrachium rosenbergii hemocytes,
in the recognition of non-self cells. Journal of Experimental Zoology, 279: 265-272.
=VNHU*3"9V^SL`(- 2002 Effects of shell disease syndrome on the haemocytes and humoral
defences of the edible crab, Cancer pagurus. Aquaculture, 205: 237-252.
>HUN21"/\HUN>:"@HUN4"*OLU/@")V1"3P:1">HUN.A(THSLZWLJPÄJ
expression gene, encodes a novel anionic antimicrobial peptide, scygonadin, in Scylla serrata.
Molecular Immunology, 44: 1971-1978.
>HUN9"3LL:@"*LYLUP\Z3":KLYOpSS22001. Properties of the prophenoloxidase activating
LUa`TLVM[OLMYLZO^H[LYJYH`ÄZOPacifastacus leniusculus. European Journal of Biochemistry,
268: 895-902.
>HYULY/91994. Superoxide dismutase, aging, and degenerative disease. Free Radical Biology
and Medicine, 3: 249-258.
>LZ[LUILYN4"/LPUO\PZ)"A\PKLTH+"=SHR142005. siRNA injection induces sequence-
independent protection in Penaeus monodon against white spot syndrome virus. Virus
Research, 114: 133-139.
>VUNWYHZLY[ 2" 2OHUVIKLL 2" .S\U\RHYU ::" 4LLYH[HUH 7">P[O`HJO\TUHYUR\S ) 2003.
Time-course and levels of apoptose in various tissues of black tiger shrimp Penaeus monodon
infected with white-spot syndrome virus. Diseases of Aquatic Organisms, 55: 3-10.
223
>VUNWYHZLY[2":HUNZ\YP`H7"7OVUNKHYH(2007. Senapin S. Cloning and characterization of a

caspase gene from black tiger shrimp (Penaeus monodon)-infected with white spot syndrome
virus (WSSV). Journal of Biotechnology, 131: 9-19.
>\13"4\YVNH2. 2004. Apoptose does not play an important role in the resistance of ‘immune’
Penaeus japonicus against white spot syndrome virus. Journal of Fish Diseases, 27: 15-21.
@HUN3:"@PUA?"3PHV1?"/\HUN?+".\V*1">LUN:7"*OHU:4"@\?8"/L1.
2007. A Toll receptor in shrimp. Molecular Immunology, 44: 1999-2008.
@LO4:"*OLU@3";ZHP0/1998 The hemolymph clottable proteins of tiger shrimp, Penaeus
monodon, and related species. Comparative and Biochemistry Physiology, 121: 169-176.
@LO4:"/\HUN*1"3L\1/"3LL@*";ZHP0/1999. Molecular cloning and characterization
of a hemolymph clottable protein from tiger shrimp_Penaeus monodon. European Journal of
@LO:;"3LL*:"*OLU1* 2006. Administration of hot-water extract of brown seaweed Sargassum
duplicatum via immersion and injection enhances the immune resistance of white shrimp
Litopenaeus vannamei. -PZOHUK:OLSSÄZO0TT\UVSVN`!
@LO -*">\ :/" 3HP *@" 3LL *@ 2006. Demonstration of nitric oxide synthase activity in
crustacean hemocytes and anti-microbial activity of hemocyte-derived nitric oxide. Comparative
and Biochemistry Physiology, 144: 11-17.
@LO4:"/\HUN*1"*OLUN1/";ZHP0/;PZZ\LZWLJPÄJL_WYLZZPVUHUKYLN\SH[PVUVM
the haemolymph clottable protein of tiger shrimp (Penaeus monodon -PZO HUK :OLSSÄZO
@tWPa7SHZJLUJPH."1PTtULa=LNH-"9VTV-PN\LYVH4.":V[LSV4\UKV99"=HYNHZ(SIVYLZ
F. 2002. Molecular characterization of the bifunctional VHDL-CP from the hemolymph of white
shrimp Penaeus vannamei, Comparative and Biochemistry Physiology, 132: 585-592.
@tWPa7SHZJLUJPH."=HYNHZ(SIVYLZ-"1PTtULa=LQH-"9\Pa=LYK\NV34"9VTV-PN\LYVH.
1998. Shrimp plasma HDL and ȕ-glucan binding protein (BGBP): comparison of biochemical
characteristics. Comparative and Biochemistry Physiology, 121: 309-314.
@\ ?8" .HU /" 2HUVZ[ 49. 1999. Immulectin, an inducible C-type lectin from an insect,
Manduca sexta, stimulates activation of plasma prophenoloxidase. Insect Biochemistry and
Molecular Biology, 29: 585-597.
AHTIVU9("5HUKHR\THY4"=HROHYPH=5">\372005. The Toll pathway is important for
an antiviral response in Drosophila. Proceedings of the National Academy of Sciences USA,
102: 7257-7262.
AOHUN1"3P-">HUNA"?PHUN1 2007. Cloning and recombinant expression of a crustin-like gene
from Chinese shrimp, Fenneropenaeus chinensis. Journal of Biotechnology, 127: 605-614.
Zhang, X.; Huang, C.; Qin, Q. 2004. Antiviral properties of hemocyanin isolated from shrimp
Penaeus monodon. Antiviral Research, 61: 93-99.
AOHVA@"@PUA?">LUN:7".\HU/1"3P:+"?PUN2"*OHU:4"/L1.7YVÄSPUN
of differentially expressed genes in hepatopancreas of white spot syndrome virus-resistant
shrimp ( Litopenaeus vannameiI`Z\WWYLZZPVUZ\I[YHJ[P]LOÌYPKPaH[PVU-PZOHUK:OLSSÄZO
224
Capítulo 7
Buenas Prácticas de Manejo en la

Camaronicultura
Capítulo 7
Buenas Prácticas de Manejo en la Camaronicultura
Agnés Saborío Coze y María José Almanza

Centro de Investigaciones de Ecosistemas Acuáticos
Universidad Centroamericana
Managua, Nicaragua
Introducción
En el año de 1976 se dio la conferencia técnica de la FAO sobre Acuicultura, la
cual fue celebrada en Kyoto, Japón y en el año 2000 se celebró la conferencia sobre la
Acuicultura en el Tercer Milenio, en Bangkok, Tailandia. Ambas conferencias trataban
KL WLYÄSHY SHZ VWVY[\UPKHKLZ ` M\UJPVULZ KL SH HJ\PJ\S[\YH KLU[YV KL SH ZVJPLKHK `
recomendar estrategias para responder a las expectativas y exigencias de desarrollo
sostenible de la acuicultura en los dos o tres próximos decenios. La Conferencia de Kyoto
examinó las oportunidades ofrecidas por la tecnología y la ciencia y las posibilidades de
establecimiento de redes, desarrollo del capital humano y fortalecimiento institucional
para el desarrollo de la acuicultura.
Además de estos aspectos, la Conferencia de Bangkok examinó el papel que la
acuicultura desempeñará en el contexto general del desarrollo en todos los planos,
desde el local al mundial. La Conferencia de Kyoto adoptó dos estrategias amplias:
aproximar la ciencia a la acuicultura, sector que era hasta entonces casi exclusivamente
tradicional y, ampliar el desarrollo de la acuicultura mediante la cooperación regional.
Estas estrategias se tradujeron en políticas e iniciativas de los gobiernos, con asistencia
inicial de varios organismos multilaterales y bilaterales.
En diciembre de 1997, la FAO realizó la Consulta Técnica sobre Políticas para el
Cultivo Sustentable del Camarón en Bangkok, Tailandia. Esta “Consulta de Bangkok”
llevó a la reunión de delegados de gobierno y observadores de 12 países de Asia y
América, que sumaban cerca de 90% de la producción global del camarón cultivado, a
la que también acudieron los principales países consumidores y observadores de cinco
organizaciones intergubernamentales y de cuatro organizaciones no gubernamentales
(ONGs).
La consulta destacó que el alcance de la sustentabilidad en el cultivo del camarón
depende de políticas de gobierno efectivas y acciones regulatorias, así como de la
cooperación del sector de cultivadores de camarón, utilizando tecnologías apropiadas
en su planeación, desarrollo y operaciones. En este sentido, la Consulta consideró
pertinente que la FAO realizara reuniones de expertos para elaborar las mejores
WYmJ[PJHZLS9LWVY[LKLSH*VUZ\S[H;tJUPJHKL)HUNRVRKLSH-(6ZLYLÄLYLH¸I\LUHZ
prácticas”. El término “Buenas Prácticas de Manejo” (BPM) fue adoptado por la FAO
para esta Consulta de Expertos) para el cultivo del camarón y elementos de interés
legales y otros instrumentos regulatorios para la acuicultura costera.
7VY V[YH WHY[L SH 9LK KL *LU[YVZ KL (J\PJ\S[\YH KL (ZPH7HJxÄJV 5(*( LU
conjunto con el Banco Mundial (WB), la Fundación Mundial para la Naturaleza
(WWF) y la FAO, están implementando un Programa Asociado sobre el Cultivo de
*HTHY}U`LS4LKPV(TIPLU[L3VZVIQL[P]VZJLU[YHSLZKLS*VUZVYJPVZVUPKLU[PÄJHY
mejores prácticas de manejo para el cultivo del camarón bajo diversas condiciones
HTIPLU[HSLZ LJVU}TPJHZ ` ZVJPHSLZ ` WHYH HUHSPaHY LS JVZ[VILULÄJPV WHYH SVZ
camaroneros al adoptar estas prácticas de manera individual y en coordinación con
otros granjeros. Se espera que esta información ayude a los gobiernos y al sector
WYP]HKVHKLZHYYVSSHYLZ[YH[LNPHZKLHWV`V`TLKPKHZKLHZPZ[LUJPHLZWLJxÄJHHÄUKL
auxiliar a los granjeros a sobrellevar los problemas que les impiden la adopción de
mejores prácticas de manejo.
Estas estrategias pueden conducir a la adopción de códigos de prácticas, mejorando
los servicios de extensión, incentivos económicos y otros. El Programa Asociado es
tomado de forma primaria mediante una serie de estudios de caso que cubren las
principales regiones que producen camarón cultivado.
Se han desarrollado lineamientos para el cultivo de camarón y códigos de prácticas,
o están bajo preparación, en varios países (ejemplo, Australia, Belice, Ecuador,
Malasia, Sri Lanka y Tailandia). En el contexto internacional se ha elaborado un código
por parte de una organización industrial, la Alianza Global de la Acuicultura (GAA:
Global Aquaculture Alliance), que intenta brindar las bases para un programa futuro de
eco-etiquetado. Los lineamientos también están en desarrollo para la producción de
camarón producido de manera orgánica.
En Nicaragua, el Código de Buenas Prácticas para una Camaronicultura
9LZWVUZHISL M\L LSHIVYHKV IHQV SH (ZLZVYxH KLS VYNHUPZTV JLY[PÄJHKVY (X\HJ\S[\YL
*LY[PÄJH[PVU*V\UJPSIHQVSVZSPULHTPLU[VZKLSH(SPHUaH.SVIHSKLSH(J\PJ\S[\YH
Un área de preocupación especial es el manejo de las enfermedades del camarón.
A este respecto, la FAO ha brindado asistencia a varios países miembros sobre manejo
sanitario en el cultivo de camarón y ha tomado el liderazgo en conducir revisiones
bajo el Programa Asociado. En cooperación con diversas agencias y organizaciones, la
FAO actualmente lleva a cabo varios programas cuyo objetivo es desarrollar BPM para
el manejo sanitario del camarón en Asia y América.
3H6ÄJPUH3LNHSKLSH-(6[YHIHQHHJ[\HSTLU[LLU\UHLUJ\LZ[HJVTWHYH[P]HKL
las leyes nacionales y regulaciones que rigen el cultivo del camarón. El propósito de
ésta es examinar y comparar las legislaciones nacionales relevantes, particularmente
los requerimientos legales concernientes al impacto ambiental del cultivo de camarón
y las medidas aplicables para el desarrollo de instalaciones en el cultivo de camarón,
los controles operativos continuos, los requerimientos legales que aplican a la clausura
de actividades y aspectos relativos a la vigilancia de la legislación de importancia. Esta
PUMVYTHJP}UZLLZWLYHH`\KLHPKLU[PÄJHYI\LUVZHYYLNSVZSLNHSLZLPUZ[P[\JPVUHSLZ`SVZ
problemas actuales para que los países los adopten.
En seguimiento a las recomendaciones de la Consulta de Bangkok y en apoyo a
las actividades citadas, se realizó una Consulta de Expertos por la FAO y el gobierno de
Australia del 4 al 7 de diciembre del año 2000. Los objetivos fueron:
1. Proporcionar un foro internacional con reconocimiento para la discusión de los
aspectos que están relacionados con la promoción de las prácticas sustentables
para el cultivo de camarón, así como los relacionados con los instrumentos
institucionales y legales.
228
Agnés Saborío Coze y María José Almanza Buenas prácticas de manejo en la camaronicultura
2. Continuar facilitando el proceso de construcción de consenso entre los principales

usuarios a quienes interesa el desarrollo y manejo del cultivo del camarón.
0KLU[PÄJHYKL[LYTPUHY SVZ JHTPUVZ HZx JVTV SVZ ILULÄJPVZ ` SPTP[HJPVULZ
LZWLJxÄJVZWHYHLSKLZHYYVSSVLPTWSLTLU[HJP}UKL)74`)\LUVZ(YYLNSVZ3LNHSLZ
e Institucionales (BALIs) (GLIAs Good Legal and Institutional Arrangements),
llevando a mejoras en las prácticas de manejo para el cultivo de camarón a niveles
de granja e institucionales.
La Consulta de Expertos produjo los siguientes resultados:
<U JVUQ\U[V KL )74 ¸NLUtYPJHZ¹ X\L ZVU HTWSPHTLU[L HWSPJHISLZ LU LS
cultivo de camarón en todo el mundo.
3PULHTPLU[VZ WHYH LS KLZHYYVSSV L PTWSLTLU[HJP}U KL )74 WHYH ZP[\HJP}U
LZWLJxÄJHHUP]LSUHJPVUHSVZ\IUHJPVUHS"LZ[VZSPULHTPLU[VZWVKYxHUYLMLYPYZL
H!PU[LYHSPHSHPKLU[PÄJHJP}UKL[LTHZKLZP[\HJP}ULZWLJxÄJHSHTL[VKVSVNxH
WHYH LS HUmSPZPZ KL JVZ[VILULÄJPV KL SHZ )74 WHY[PJPWHJP}U KL \Z\HYPVZ
etc.
(UmSPZPZKLSVZWYVISLTHZWHYHSHHKVWJP}UKL)74`J}TVZ\WLYHYSVZPUJS\`L
estrategias para apoyar a los granjeros y organizaciones de granjeros en la
aplicación de mejores prácticas de manejo.
<UJVUQ\U[VKL)(30Z¸NLUtYPJV¹X\LLZHWSPJHISLKLTHULYHL_[LUZHLULS
cultivo del camarón en el mundo.
3PULHTPLU[VZWHYHLSKLZHYYVSSV`HWSPJHJP}UKL)(30ZKLWHxZLZWLJxÄJVX\L
tienen en cuenta las condiciones legales e institucionales características de
un país.
(UmSPZPZKLSHZSPTP[HU[LZWHYHSHHKVWJP}UKL)(30Z`J}TVZ\WLYHYSVZPUJS\ZV
las estrategias para apoyar la aplicación de buenos arreglos institucionales y
legales.
7.1 Código de Conducta para una camaronicultura responsable

Un código de conducta debe establecer los principios y normas internacionales,
para la aplicación de prácticas responsables que aseguren la conservación, gestión
` KLZHYYVSSV LÄJHJLZ KL SVZ YLJ\YZVZ HJ\m[PJVZ JVUZPKLYmUKVZL LS LJVZPZ[LTH ` SH
biodiversidad.
El Código de conducta debe reconocer la importancia nutricional, económica,
social, cultural y ambiental de la pesca y, los intereses de todos aquellos que se
relacionan con el sector pesquero. El Código toma en cuenta las características
biológicas de los recursos y su medio ambiente y, los intereses de los consumidores y
otros usuarios.
7.2 Objetivos de un Código de conducta

Los objetivos de un código de conducta se deben basar en:
a. Establecer principios, de conformidad con las normas del derecho internacional
pertinentes, para que la acuicultura y las actividades relacionadas con ella se
lleven a cabo de forma responsable, tomando en cuenta todos los aspectos
biológicos, tecnológicos, económicos, sociales, ambientales y comerciales
pertinentes.
229
b. Establecer principios y criterios para elaborar y aplicar políticas nacionales

encaminadas a la conservación, la ordenación y el desarrollo de la
camaronicultura de forma responsable.
c. Servir como un instrumento de referencia para ayudar a establecer y mejorar
el marco jurídico e institucional necesario para la realización de una
acuicultura responsable.
d. Proporcionar orientaciones que puedan utilizarse, cuando sea oportuno, en
la formulación y aplicación de acuerdos internacionales y otros instrumentos
jurídicos obligatorios y voluntarios.
e. Promover la contribución de la acuicultura a la seguridad alimentaria y a la
calidad de la alimentación otorgando prioridad a las necesidades nutricionales
de las comunidades locales.
f. Promover la protección de los recursos acuáticos vivos y sus ambientes
acuáticos, así como de las áreas costeras.
g. Promover la comercialización de conformidad con las normas internacionales
y evitar el uso de medidas que constituyan obstáculos encubiertos a dicho
comercio.
h. Promover la investigación en el área de la Camaronicultura.
i. Ofrecer normas de conducta para todas las personas involucradas en el sector
acuícola.
7.3 Buenas Prácticas de Manejo

3HZ)74KLILUZLY\UHN\xHKLMmJPSJVTWYLUZP}UZVIYLSHZHJ[P]PKHKLZLZWLJxÄJHZ
a desarrollarse en un laboratorio de larvas, granja camaronera y planta procesadora de
camarón y deben estar orientadas de tal manera que sean fáciles de entender, operar
y ejecutar, siguiéndose las orientaciones generales contenidas dentro del Código de
Conducta.
Las BPM están contenidas dentro del Código de Conducta y deben incluir la
implementación de mecanismos para una mejora continua, la aplicación de las mejores
tecnologías disponibles como una orientación muy general y sencilla, la aplicación y
cumplimiento de las normativas ambientales y la responsabilidad empresarial técnica,
social y ambiental de cada sector de la industria.
7.4 Características de las Buenas Prácticas de Manejo

1. Son códigos voluntarios de práctica.
,SNYHKVKLLZWLJPÄJPKHKLUSHHWSPJHJP}UKLLZ[HZYLJVTLUKHJPVULZLZ[HYm
determinado por el grado de desarrollo técnico alcanzado por la industria.
3. Están orientadas a guiar y no a restringir arbitrariamente a los productores.
9LX\PLYLU \U HS[V NYHKV KL ÅL_PIPSPKHK ` I\LU Q\PJPV WVY WHY[L KL SVZ
técnicos y productores, quienes tienen que reaccionar a constantes cambios
ambientales, económicos y condiciones sociales.
230
7.5 Buenas Prácticas de Manejo en Laboratorios de larvas

Las BPM en laboratorios de larvas (Figuras 7.1 y 7.2) deben estar encaminadas a
WYVK\JPYWVZ[SHY]HZKLHS[HJHSPKHK`SPIYLZKLLUMLYTLKHKLZ"WHYHLSSVZLYLX\PLYLU
mayores niveles de higiene, bioseguridad, control y manejo del proceso. Para reducir
el riesgo de enfermedades y aumentar la viabilidad de las postlarvas de laboratorio se
recomienda:
1. Aislar los reproductores y someterlos a exámenes de laboratorio para asegurar que
estén libres de enfermedades (Mancha blanca y otros).
*LY[PÄJHYSHZWVZ[SHY]HZKLSHIVYH[VYPVWVYWHY[LKLSHH\[VYPKHKJVTWL[LU[L
3. Preferiblemente, realizar los análisis en laboratorios acreditados y que cumplan
con todos los requisitos de gestión de la calidad.
4. Utilizar los productos químicos y soluciones internacionalmente aprobados para
su uso en la acuicultura y registrados en el país a emplear.
5. Instalar sistemas de desinfección para equipos, materiales y personal que labora
en el laboratorio.
;YH[HYLSLÅ\LU[LWYVJLKLU[LKLSSHIVYH[VYPVKLSHY]HZHU[LZKLZLYKLZJHYNHKVHS
cuerpo de agua.
7.6 Buenas Prácticas de Manejo en granjas camaroneras

Las Buenas Prácticas de manejo en granjas camaroneras deben estar dirigidas a
producir un producto inocuo, a aplicar medidas de bioseguridad durante todo el período
de cultivo y a garantizar un buen manejo acuícola y responsable con el ambiente.
Las decisiones que afectan al ambiente y a la productividad, son tomadas día
a día por individuos con un rango amplio de capacidades técnicas. Por lo que los
productores juegan un papel importante en la formulación e implementación de las
mejores prácticas de manejo del cultivo.
Construcción y Medio ambiente

3HZNYHUQHZJHTHYVULYHZUVKLILULZ[HYKLU[YVKLSVZIVZX\LZKLTHUNSHY"ZPZVU
granjas establecidas, se debe contar con un programa de resiembra de manglares
en áreas cercanas a las granjas, por lo general deben sembrarse 3 árboles por cada
manglar cortado.
0KLU[PÄJHY \UH M\LU[L KPZWVUPISL KL HN\H K\SJL KL I\LUH JHSPKHK WHYH ILILY
procesos sanitarios o para transportarla).
,S LZ[\KPV [VWVNYmÄJV KLS ZP[PV KLILYm YL]LSHY SHZ ]HYPHJPVULZ HU\HSLZ KL SHZ
temporadas lluviosa y seca.
3H WSHULHJP}U ZL JVUZ\S[HYm JVU \U PUNLUPLYV JHSPÄJHKV ` \U JVUZ[Y\J[VY
experimentado deberá encargase de la construcción. (Figura 7.3)
5. Los canales de abastecimiento no deberán crear barreras a las corrientes naturales
de agua. Si los canales pasan a través de zonas de agua dulce o áreas agrícolas, no
KLILYmOHILYÄS[YHJP}UUPKLILYmUJH\ZHYSHPU[YVK\JJP}UKLHN\HZHSPUH-PN\YH
7.4)
6. Deberán evitarse las áreas con suelos potencialmente ácidos y con sulfatos.
231
7. Los suelos orgánicos no deberán ser usados para la construcción de estanques.

8. Los estanques deberán situarse en terrenos planos con pendientes suaves entre un
2% a un 3% o menos.
9. La orientación de los estanques deberá considerar los vientos predominantes para
reducir la erosión.
3VZW\U[VZKLKLZJHYNHÄUHSLZKLILYmULZ[HYSVJHSPaHKVZSLQVZKLSVZW\U[VZKL
toma de agua y colocados en áreas donde permita una rápida dilución.
11. Los canales de entrada al sistema de distribución, deberán ser diseñados para
WLYTP[PYX\LLSHN\HÅ\`HWVYNYH]LKHK
12. Los bordes deberán ser compactados de acuerdo al tamaño y características de las
WHY[xJ\SHZKLS[LYYLUVWHYHYLK\JPYSHLYVZP}UÄS[YHJP}U`KLZSPaHTPLU[V
13. Para facilitar la cosecha, deberá ser construida una compuerta de concreto en la
parte exterior del borde del estanque, en su parte más profunda.
14. Durante la etapa de construcción, los desechos generados no deben botarse en el
bosque de manglar y se debe contar con un plan de manejo de desechos.
15. Cuando sea posible, las estaciones de bombeo deberán estar retiradas de la orilla
y con cierta estética.
16. Contar con un sedimentador en las granjas camaroneras para acumular las
WHY[xJ\SHZLUZ\ZWLUZP}U`YLK\JPYSHKLZJHYNHKLZLKPTLU[VZHSLÅ\LU[LK\YHU[L
los recambios de agua y drenaje de los estanques.
17. El sedimento no deberá contener contaminantes.
18. Se debe mantener la vegetación ribereña y una zona de amortiguamiento.
19. Deberán mantenerse los accesos tradicionales usados por la población del lugar y
los corredores de animales migratorios.
20. El tamaño de la granja deberá ser proporcional al abastecimiento de agua y su
demanda y a la capacidad estimada del cuerpo de agua receptor para diluir,
transportar y asimilar las descargas.
21. Los accesos a rutas terrestres o acuáticas, muelles y áreas de estacionamiento,
deberán ser localizados donde sean mitigables los impactos ambientales.
3VZ W\U[VZ KL KLZJHYNH ÄUHSLZ KLILYmU LZ[HY SVJHSPaHKVZ SLQVZ KL SVZ W\U[VZ KL
toma de agua y colocados en áreas donde permita una rápida dilución.
23. Las estaciones de bombeo deberán estar localizadas donde la calidad de agua sea
máxima y evitando áreas donde pueda ocurrir un daño ambiental.
Instalaciones
1. Poseer instalaciones sanitarias de sistema abonera (letrina) con aplicación de cal
para los desechos humanos.
2. Las instalaciones sanitarias deben estar situadas lejos de los estanques o de los
suministros de agua y se deben someter a mantenimiento rutinariamente para
WYL]LUPYSHWVZPISLÄS[YHJP}ULUSVZLZ[HUX\LZVLUSVZZ\TPUPZ[YVZKLHN\H
3. Poseer vivienda para los trabajadores y que sean adecuadas sanitariamente (Figura
7.5)
232
Figura 7.1. Laboratorio de larvas de camarón. Figura 7.2. Laboratorio de microalgas.
Figura 7.3. Construcción de estanques de camarón. Figura 7.4. Canales de drenaje de agua.
Figura 7.5. Instalaciones en una granja camaronera. Figura 7.6. Preparación de estanques.
233
4. Proteger con mallas el área destinada para almacenamiento de alimentos para

evitar la entrada de plagas y roedores.
5. Evitar la presencia de animales de corral en la granja camaronera.
6. Evitar las prácticas de proceso al producto cosechado en la granja, dado que no
existen las condiciones de manufactura.
3VZT\YVZKLILYmU[LULYSHHS[\YHZ\ÄJPLU[LWHYHWYL]LUPYKH|VZWVYPU\UKHJPVULZ
tormentas y oleaje, pero la parte libre del borde debe permitir que los vientos
mezclen las aguas del estanque.
8. Los estanques deberán ser lo bastante someros como para facilitar su manejo y
la buena circulación del agua, pero lo bastante profundos como para prevenir el
crecimiento de plantas (microalgas).
7HYH JVU[YVSHY LS Å\QV KLIL PUZ[HSHYZL LU JHKH LZ[HUX\L \UH LZ[Y\J[\YH KL
alimentación y cosecha.
10. Los combustibles y lubricantes deben ser almacenados y usados de modo que se
prevengan derrames.
11. Implementar un plan HACCP en la granja.
3VZ LÅ\LU[LZ U\UJH KLILYmU KLZJHYNHYZL LU J\LYWVZ KL HN\H K\SJL V mYLHZ
agrícolas.
Preparación de estanques
Los fondos de los estanques deben ser secados completamente cuando menos
después de tres o cuatro ciclos de producción y con más frecuencia si es necesario
(Figura 7.6)
Densidad de siembra
La densidad de siembra debe determinarse con base en la supervivencia y la
capacidad de carga.
Para estanques semi intensivos sin aireación mecánica, las densidades de carga en
SHJVZLJOHKLILYmULZ[HYNLULYHSTLU[LLULSYHUNVKLHJHTHYVULZT2.
Fertilización
1. Los fertilizantes químicos se deben usar solamente cuando sea necesario
PUJYLTLU[HYSHHI\UKHUJPHKLÄ[VWSHUJ[VU
2. Se debe evitar aplicaciones excesivas de fertilizantes como urea y amonio.
:LWYLÄLYLLS\ZVKLMLY[PSPaHU[LZSxX\PKVZWLYVZPZL\[PSPaHUMLY[PSPaHU[LZNYHU\SHKVZ
asegurarse que sea la dilución correcta.
4. Si es necesario utilizar fertilizantes orgánicos, se debe evitar el uso de estiércol a
TLUVZX\LZLHJVUÄYTHKHZ\JHSPKHK
5. Los fertilizantes deben ser almacenados en lugares limpios y secos, lejos de chispas
y se debe evitar su derrame.
234
Encalado
1. La cal agrícola, más que cal viva o la cal hidratada, debe ser utilizada para
neutralizar la acidez del fondo.
2. La cal viva y la cal hidratada se usan en el fondo del estanque, sólo cuando es
necesario romper los ciclos de patógenos.
3HZHN\HZJVUHSJHSPUPKHKLZTH`VYLZHTN3UVKLILUZLYLUJHSHKHZ
3VZ TH[LYPHSLZ WHYH LUJHSHY KLILU HWSPJHYZL \UPMVYTLTLU[L ZVIYL SH Z\WLYÄJPL
del fondo del estanque y arar a una profundidad de 5 a 10 cm. Esto acelera la
reacción del material calizo.
5. Los materiales calizos deben ser aplicados de acuerdo con las pruebas de suelo.
6. Los fondos de los estanques con enfermedad deben ser secados dos o tres
semanas, tratados con 2 ó 3 toneladas de cal viva por hectárea para elevar el pH
y desinfectar el estanque.
7. El uso de los antibióticos y otros agentes debe ser limitado a las ocasiones en
que se sospeche la presencia de patógenos que sean susceptibles al producto
seleccionado y con base en el criterio de un especialista.
8. Las granjas de camarón deben enfocar sus planes de salud animal en la prevención
de enfermedades mediante una buena alimentación, buen manejo de los estanques
y reducción del estrés.
Manejo del fondo y del sedimento del estanque

1. Después del secado de los estanques, el sedimento acumulado deberá ser
regresado a las áreas de donde fue erosionado en el estanque.
2. Los sedimentos deben ser extraídos del estanque solamente cuando sea
absolutamente necesario.
3. Si el pH del fondo es menos de 7, se debe aplicar cal agrícola entre cosechas.
4. Los fondos se deben secar por dos o tres semanas con una distancia máxima de
tres cosechas.
5. Si los fondos de los estanques que usan aireación mecánica son arados entre
cosechas, deben ser compactados antes de llenarlos con agua.
6. Si debe ser extraído el sedimento de los estanques, el material debe ser dispuesto
de una forma ambientalmente responsable. Establecer diseños para reducir la
erosión.
8. Las zonas de tierra descubiertas, se deben recubrir con zacate o piedra.
9. Los sedimentos de los estanques, canales y pilas de sedimentación, deben ser
puestos de vuelta de los lugares de donde fueron erosionados.
Equipos y materiales
1. Garantizar que los equipos y materiales empleados en la cosecha sean de un
material fácil de lavar para la buena desinfección de los mismos.
2. Controlar que los equipos a utilizar en la cosecha estén limpios y que hayan sido
debidamente desinfectados con cloro.
235
3. Desinfectar todos los utensilios, equipos e insumos de cosecha.

4. Colocar y almacenar los equipos y materiales debidamente lavados y desinfectados
en un área seca y segura.
Calidad de agua
1. Clorinar el agua utilizada para el personal y que sea proveniente de pozo.
2. Las aguas de baños, cocinas y otras instalaciones deben ser tratadas en tanques
ZtW[PJVZ,Z[VZ[HUX\LZKLILUZLYKPZL|HKVZWHYHX\LSHZHN\HZULNYHZUVZLÄS[YLU
al medio y causen problemas ambientales.
3. No mezclar agua dulce de pozo con agua del estanque para mejorar salinidad.
4. Las necesidades de aireación mecánica deberán ser estimadas para que se evite la
aireación excesiva.
<ZHYHPYLHKVYLZJVUI\LUHLÄJPLUJPHLUSH[YHUZMLYLUJPHKLV_xNLUV+LILU\ZHYZL
aireadores grandes (2 HP) porque causan menos erosión por unidad de esfuerzo
que aireadores más pequeños. La aireación deberá ser usada durante el ciclo de
producción para regular la biomasa del camarón en el estanque (Figura 7.7)
6. Cuando el estanque tiene varios aireadores, deben operar menos aireadores en el
día que en la noche. Los aireadores deben ser colocados tres o cuatro metros lejos
de los bordes para evitar la erosión.
7. Considerar si el recambio de agua mejorará la calidad de agua del estanque o si
deberán ser consideras otras alternativas.
8. El agua debe ser descargada de los estanques tan despacio como sea práctico,
para minimizar la erosión.
9. El itinerario de descarga de los estanques debe ser escalonado para minimizar el
Å\QVKLSHN\HLUSVZJHUHSLZKLKLZJHYNH`YLK\JPYSHLYVZP}U
10. La descarga de agua a través de los bosques de manglar u otras tierras anegadas
salobres, debe ser considerada y probada experimentalmente.
9LK\JPYLSÅ\QVWHYHPUJYLTLU[HYLS[PLTWVKLYL[LUJP}UOPKYm\SPJH[HU[VJVTVZLH
posible, para incrementar la sedimentación (6 horas según Haws et al., 2001).
12. Implementar monitoreos de calidad de agua dentro de la granja como en el
HÅ\LU[LLÅ\LU[L WHYH KL[LYTPUHY ZP SH PTWSLTLU[HJP}U KL SHZ )74 LZ[m KHUKV
resultado (Figura 7.8).
Insumos
4HU[LULYSHPKLU[PÄJHJP}UKLSHM\LU[LKLHN\HHZxJVTVKLSZPZ[LTHKLKYLUHQL
2. Mantener actualizada la lista de los proveedores de semilla, alimentos y productos
químicos utilizados.
3. Controlar la “semilla” (postlarvas) y el alimento libre de sustancias prohibidas
(cloramfenicol, nitrofuranos).
Uso de químicos y medicamentos

1. El uso de antibióticos permitidos debe estar sujeto a concentraciones menores a
los Límites Máximos de Residuos (LMR) impuestos por naciones importadoras de
236
camarón. Los camarones deben ser examinados para determinar la concentración

de pesticida, PCBs y metales pesados.
,S\ZVKLTLKPJPUHZVX\xTPJVZKLILUZLN\PYSHZLZWLJPÄJHJPVULZKLSMHIYPJHU[L
con respecto a la dosis, período de vencimiento, almacenamiento, disposición,
manipulación y tiempo de retiro.
3. Contar con procedimientos para la detección de enfermedades de los camarones.
Los procedimientos así como los resultados deben quedar documentados y
archivados en las granjas camaroneras.
4. Todo medicamento o químico que no se vaya a utilizar o esté vencido, debe ser
dispuesto de una manera que no contamine el ambiente.
5. Los medicamentos o químicos deben estar bien etiquetados y almacenados en un
sitio seco y seguro.
6. Los trabajadores deben contar con los instrumentos necesarios para aplicar
cualquier tipo de químico para que su salud no se vea afectada.
7. No se recomienda el uso de sustancias que contengan Bifenilos policlorinados.
3VZ Z\WSPKVYLZ KL HSPTLU[VZ ` WVZ[SHY]HZ KLILU JLY[PÄJHY X\L UV ZL \[PSPaHYVU
TLKPJHTLU[VZHU[PIP}[PJVZ`VX\xTPJVZUVWLYTP[PKVZLUZ\WYVK\JJP}U
9. El combustible utilizado para las bombas de agua debe ser almacenado y usado
de modo que se prevengan los derrames. Los tanques de combustibles deben
estar dentro de un área diseñada de tal modo que cuando haya un derrame, el
combustible caiga sobre un contenedor que permita recogerlo para ser reutilizado
`X\LUVZLÄS[YLHSHTIPLU[L
Control de alimentos y aditivos

<ZHY HSPTLU[V KL HS[H JHSPKHK WLSL[PaHKV JVU TxUPTV KL ÄUVZ ` I\LUH
estabilidad.
2. El pescado no debe ser usado como alimento.
3. El alimento debe ser guardado en instalaciones frescas, secas y a salvo de plagas
(Figura 7.9)
4. Los niveles de nitrógenos y fósforos en el alimento deberán ser tan bajos como sea
WVZPISLZPUZHJYPÄJHYSHJHSPKHKKLSHSPTLU[V:LKLIL[LULYWYLJH\JP}UWVYX\LSVZ
límites inferiores de estos elementos no son conocidos.
3VZHSPTLU[VZKLILUZLY\ZHKVZKL[HSTHULYHX\LYPUKHULSTm_PTVILULÄJPVH
la vez que reduzcan los costos e impactos potenciales.
6. Considerar el uso de bandejas o charolas para monitorear el consumo del alimento
por parte de los camarones en cultivo.
7. No alimentar cuando las concentraciones de oxígeno disuelto son menores de 2.5
TN3
Control de fármacos
1. Mantener actualizada la lista de fármacos utilizados, registrados y autorizados
VÄJPHSTLU[LLULSWHxZ
237
2. Utilizar solamente fármacos aprobados por regulaciones nacionales e

internacionales para su uso en la camaronicultura.
3. Controlar mediante un programa de residuos, el uso y aplicación de fármacos.
Control de contaminantes
1. Monitorear a través de un programa de control, los contaminantes tales como los
siguientes metales pesados: Mercurio, Plomo, Cadmio, Arsénico y Cromo
2. Manejar adecuadamente los combustibles, lubricantes, otros.
Control de patógenos en el camarón

9LHSPaHYHUmSPZPZVÄJPHSLZKL7*9WHYHSHZLUMLYTLKHKLZKLKLJSHYHJP}UVISPNH[VYPH
a la OIE.
:LTIYHYZLTPSSHJLY[PÄJHKH`SPIYLKLLUMLYTLKHKLZ
3. Eliminar los camarones muertos en las orillas de los estanques.
Personal
1. No permitir personas con indicios clínicos de enfermedades infectocontagiosas o
con heridas durante la cosecha.
2. Utilizar zapatos y ropa adecuada (botas, gabachas) (Figura 7.10)
3. Facilitar medios de desinfección de manos al personal que labora durante la etapa
de cosecha.
Cosecha
El camarón es un organismo perecedero que si no se trabaja con la temperatura
adecuada, puede descomponerse muy rápido. Es por ello que la manipulación durante
la cosecha y el transporte debe ser la óptima para evitar daños a la salud humana.
1. El camarón debe ser lavado y enhielado continuamente durante la cosecha.
2. El camarón cosechado debe ir directamente a la planta procesadora.
3. El camarón debe ser cosechado y transportado de una manera que se asegure que
la temperatura del tejido, no aumentará entre la cosecha y la entrega en la planta
procesadora.
4. Los equipos y los envases usados para cosechar y transportar el camarón, deben
estar limpios para prevenir la contaminación (Figura 7.11)
3VZJHTHYVULZKLLZ[HUX\LZKPMLYLU[LZZLYmUPKLU[PÄJHKVZWVYLZJYP[V`THU[LUPKVZ
por separado hasta la entrega a la planta procesadora.
6. El camarón cosechado debe recibir un número de lote único que servirá para
remontar a los expedientes de la producción correspondiente.
7. Controlar que el agua utilizada en los procedimientos de cosecha sea agua potable,
HJVYKLJVUSVZLZ[mUKHYLZPU[LYUHJPVUHSLZLZ[HISLJPKVZWVY-(6>/6
8. Controlar que el hielo utilizado en el producto haya sido elaborado con agua
potable y que no presente ninguna alteración en sus propiedades físicas.
238
Figura 7.7. Aireadores en estanques de cultivo de camarón. Figura 7.8. Toma de muestras de agua para análisis de
laboratorio.
Figura 7.9. Buenas prácticas en plantas formuladoras de Figura 7.10. Vestimenta adecuada para el personal.
alimento para camarón.
Figura 7.11. Preparación del camarón cosechado para su

traslado.
239
9. Controlar que las cestas, tinas o compartimientos para manejar y transportar el

camarón, estén limpios.
10. Registrar en formatos los parámetros ambientales y el cloro residual del producto
cosechado.
9LHSPaHYHUmSPZPZTPJYVIPVS}NPJVVÄJPHSHSHN\H`WYVK\J[VKPYPNPKVZHSHKL[LJJP}U
de bacterias patógenas (Vibrio, Salmonella, Escherichia coli, etc.).
9LHSPaHY HS WYVK\J[V JVZLJOHKV HUmSPZPZ VÄJPHS KL YLZPK\VZ IPVS}NPJVZ ` KL
cloramfenicol y nitrofurazonas.
Control de plagas
Los depredadores pueden crear problemas en la productividad de las granjas
camaroneras, ya que pueden entre otros problemas, consumir los camarones, propagar
y difundir enfermedades, consumir el alimento de los camarones y, en casos donde
los depredadores son caimanes o cocodrilos, se pueden perder vidas humanas. Para
controlar a los predadores, se deben utilizar los mecanismos más inofensivos para el
ambiente.
<[PSPaHYTHSSHZKLÄS[YHJP}ULUSHZJVTW\LY[HZKLLU[YHKH`ZHSPKH
2. Utilizar apropiadamente los plaguicidas.
3. La depredación por pájaros debe ser minimizada por métodos no letales, si es
posible, como ruidos repelentes, luces repelentes.
4. El uso de trabajadores para espantar a los pájaros también es recomendable.
Transporte
:LKLILNHYHU[PaHY\U[YHUZWVY[LJVUÄHISLHU[LZKLSJVTPLUaVKLSHJVZLJOHZL
deben utilizar vehículos aislados y cubiertos.
1. Para cada estanque cosechado, se debe registrar: número y fecha del estanque
cosechado, área del estanque y fecha de la siembra, número de postlarvas
sembradas, fuente de las postlarvas, antibióticos y drogas usados, herbicidas,
alguicidas y pesticidas usados, tipo de alimento usado y porcentaje de proteína,
tipo y cantidad de fertilizante usado, nombre de la planta procesadora usada para
el proceso.
2. Realizar un buen enhielado del producto cosechado, se recomienda la relación
hielo–producto de 1:1.
9LNPZ[YHYLUMVYTH[VZKLJVZLJOHSHHWSPJHJP}UKLTL[HIPZ\SÄ[VLULSWYVK\J[V
JVZLJOHKVZLYLJVTPLUKH\UHKVZPZKLRNSIKLJHTHY}U
4. El producto cosechado enhielado debe ser enviado lo más pronto posible a la
planta procesadora.
5. El producto debe ser supervisado para evitar la contaminación química provocada
por generadores, camiones, etc., utilizados durante la cosecha.
6. El productor debe mantener controlados los animales y las plagas durante la
cosecha, para prevenir la contaminación por suciedad.
7. Los envases asignados para transportar el camarón de la granja a la planta
procesadora, no deben tener contacto con el suelo.
240
Figura 7.12. Selección de producto en planta de proceso. Figura 7.13. Producto cosechado.
Figura 7.14. Empacado en planta procesadora.
7.7 Buenas Prácticas de Manejo en plantas procesadoras

Las Plantas Procesadoras deben establecer estándares y principios de HACCP
para asegurar que se reducen al mínimo los peligros microbiológicos, químicos
y físicos, previniendo así problemas de inocuidad alimentaria. Las prácticas de
manejo recomendadas son para asegurar el cumplimiento de estándares de seguridad
HSPTLU[HYPH UHJPVUHSLZ L PU[LYUHJPVUHSLZ SH [YHaHIPSPKHK KLS JHTHY}U JLY[PÄJHKV
políticas y condiciones justas y seguras para los empleados de la planta.
1. La producción de un estanque debe ser procesada y empacada por separado
(Figuras 7.12, 7.13 y 7.14)
2. Se debe procesar y congelar puntualmente el producto.
3. Todos los productos de limpieza, sanitizantes, desinfectantes, etc. deben ser
internacionalmente aprobados para el uso en plantas procesadoras de camarón,
utilizados en la manera prescrita y para el propósito señalado.
4. El agua de la descarga debe ser tratada y cumplir con los estándares
internacionales.
5. Los desechos sólidos, incluyendo las cabezas del camarón, se deben disponer de
una manera aprobada y ambientalmente sostenible.
6. Los empleados deben recibir chequeos médicos.
7. Disponer de equipos y suministros de primeros auxilios para emergencias, así
como un plan de acción para las emergencias médicas.
241
(X\HJ\S[\YL*LY[PÄJH[PVU*V\UJPS05*2007. Código de Conducta Técnico, Social y Ambiental

Responsable para la Camaronicultura en Nicaragua. 64 páginas.
)VSH|VZ4(2004. Buenas Prácticas de Manejo en el Cultivo del Camarón Cultivado. Fondo
Mundial para la Naturaleza (WWF) PROARCA. 38 páginas.
-(6.VIPLYUV KL (\Z[YHSPH 2001. Consulta de Expertos sobre: Buenas Prácticas de Manejo
y Buenos Arreglos Legales e Institucionales para el Cultivo Sustentable del Camarón. 77
páginas.
/H^Z 4* ` *, )V`K 2001. Métodos para mejorar la camaronicultura en Centroamérica.
Universidad Centroamérica (UCA). Managua, Nicaragua. 296 páginas.
/H^Z4**,)V`K)>.YLLU2001. Buenas prácticas de manejo en el cultivo de camarón
LU /VUK\YHZ <UH N\xH WHYH PUJYLTLU[HY SH LÄJPLUJPH ` YLK\JPY SVZ PTWHJ[VZ HTIPLU[HSLZ
de acuicultura del camarón. Coastal Resources Center, University of Rhode Island. Rhode
Island. 96 páginas.
5H[\YSHUK 2002. Naturland Standards for Organic Aquaculture. Naturland, Germany. 20
páginas.
6YNHUPaHJP}UKLSHZ5HJPVULZ<UPKHZWHYHSH(NYPJ\S[\YH`SH(SPTLU[HJP}U-(62001. Informe
de la Conferencia sobre la Acuicultura en el Tercer Milenio. Bangkok, Tailandia.
:HIVYxV(NULZ"L[HS2007. Manual de Buenas Prácticas de Manejo en el cultivo de Camarón
en Nicaragua. 22 páginas.
:HIVYxV (NULZ 2005. Buenas Prácticas de Manejo. Centro de Investigación de Ecosistemas
Acuáticos. Universidad Centroamericana, Conferencia Red Vannamei, CYTED. Managua,
Nicaragua. 60 páginas.
242
GLOSARIO
GLOSARIO
Abiótico Agente no biológico.

Abonera Letrina
Ácido Compuesto orgánico o inorgánico que reacciona con un metal desprendiendo hidró-
geno; reacciona con una base para formar una sal; se disocia en disolución acuosa
dando iones hidrógeno (hidrogeniones); tiene un pH menor que 7 y neutraliza
medios básicos o alcalinos aceptando un par de electrones de la base y formando un
enlace covalente entre el ácido y la base. Se dividen en ácidos orgánicos e inorgáni-
cos minerales; orgánicos son aquellos que presentan carbono (C) en su estructura
(ÅH[V_PUHZ Son toxinas producidas por el hongo (ZWLYNPS\ZÅH]\Z.
Agar Medio de cultivo sólido que se utiliza para el aislamiento de bacterias..
Agente patógeno Es toda aquella entidad biológica capaz de producir enfermedad o daño en la biolo-
gía de un hospedero (humano, animal, vegetal, etc.) sensiblemente predispuesto
Agudo Proceso patológico o aparición de enfermedad que se presenta poco tiempo después
de la infección.
Alcalino Compuesto cuyo pH es superior a 7.
Aldehído Son compuestos orgánicos caracterizados por poseer el grupo funcional -CHO
Aleatorio Realizado al azar, sin hacer escogencia o selección de organismos
Alícuota Es el volumen o cantidad de masa que se va a emplear en una prueba de plataforma
o de laboratorio. Se suele medir en mililitros (mL) o gramos diluidos (g).
Aminoácido Los aminoácidos son los elementos con los que se construyen las proteínas. Son
moléculas que contienen un grupo Carboxilo (-COO) y un grupo amino (-NH2) libre.
Anaeróbico Organismo capaz de sobrevivir, crecer o funcionar en ambientes que no tienen
oxígeno.
(UHTULZPZ Parte del examen clínico que reúne todos los datos históricos de la enfermedad,
anteriores al brote en estudio. Es suministrada por el personal técnico de campo o
por el granjero.
Antibiótico Medicamento que se utiliza para tratar una infección bacteriana, y que por su efecto,
mata o impide el crecimiento de ciertas clases de bacterias, pero que normalmente
es inofensivo para el hospedero.
Anticuerpo Anticuerpo marcado con una enzima que le ha sido adherida como la peroxidasa o
conjugado la fosfatasa alcalina.
(U[PZtW[PJV Son sustancias antimicrobianas que se aplican a un tejido vivo o sobre la piel para
reducir la posibilidad de infección, sepsis o putrefacción.
(WtUKPJL En los artrópodos, se denomina apéndice a las estructuras anatómicas pares formadas
por elementos articulados entre sí, que se insertan en todos o algunos de los metáme-
ros del cuerpo
(WVW[VZPZ Función que controla la muerte de las células, de forma programada
(ZtW[PJV Es la “condición libre de microorganismos que producen enfermedades o infeccio-
nes”. El término puede aplicarse tanto a situaciones quirúrgicas como médicas. La
práctica de mantener en estado aséptico un área, se denomina técnica aséptica.
([YVÄH En términos biológicos consiste en una disminución importante del tamaño de la
célula y del órgano del que forma parte, debido a la pérdida de masa celular
Autoclave Dispositivo que sirve para esterilizar material médico o de laboratorio, utilizando
vapor de agua a alta presión y temperatura.
.\xH;tJUPJH7H[VSVNxHL0UT\UVSVNxHKL*HTHYVULZ7LUHLPKVZ
Bacilo Son bacterias con forma de bastón cuando son observadas en un microscopio.
)HJ[LYPHZ.YHT Las que se tiñen de rosa o rojo con la tinción de Gram (violeta de metilo-safranina).
ULNH[P]HZ
)HJ[LYPHZ Las que causan enfermedades tanto a los animales, vegetales y al hombre.
WH[}NLUHZ
)HJ[LYPHZ 4PJYVVYNHUPZTVZ\UPJLS\SHYLZLUMVYTHKLÄSHTLU[VZJVJVZ`LZ[Y\J[\YHZLZWPYHSLZ
5VWVZLLUJSVYVÄSH
Bactericida Sustancia que tiene la propiedad de destruir las bacterias
Bacteriemia Presencia de bacterias en la hemolinfa.
)PVLUZH`V Experimento que se hace utilizando organismos vivos, bajo condiciones y ambientes
controlados
)PVWZPH Toma y examen de una pequeña parte del tejido o liquido corporal del organismo
para completar un diagnóstico sobre su estado de salud.
Biótico Organismos que comparten un mismo ambiente en un tiempo determinado.
Biotipo Forma típica de organismos vivos que puede considerarse modelo de su especie,
variedad o raza
Brote Aparición de dos o más casos de una misma enfermedad, en los que se observa una
relación con un agente etiológico común, estableciéndose esta relación en términos
de tiempo, lugar y tipo de organismos afectados.
Calambre Proceso de fatiga muscular que implica una contracción rígida del músculo esquelé-
tico, producida por un período de hipoxia prolongado.
Calidad del agua *VTWSLQVKL]HYPHISLZÄZPJVX\xTPJHZKLSHN\HYLSHJPVUHKHZJVUSHHJ\PJ\S[\YH
Camaronicultura Cultivo de camarones
*mWZPKL Estructura proteica formada por una serie de monómeros llamados capsómeros. En
el interior de esta cápside se encuentra siempre el material genético del virus.
*HYPVYYL_PZ Fragmentación de la cromatina y su distribución por el citoplasma como resultado de
la desintegración nuclear.
*LMHSV[}YH_ “cabeza” del camarón; estructura que contiene órganos y tejidos propios del tórax y
de la cabeza.
Citopático Efecto dañino o destructivo que un tóxico químico o biológico ejerce sobre las
células
Coagulación 4LJHUPZTVÄZPVS}NPJV\[PSPaHKVWVYSVZVYNHUPZTVZWHYHL]P[HYWLYKPKHKLZHUNYLV
hemolinfa, mediante la activación de factores que detienen su salida a través de una
herida.
Contingencia Posibilidad de que algo suceda o no suceda.
Control Muestra que se excluye de un análisis experimental, para que sirva de referencia en
la evaluación de resultados de la parte analizada.
*VWtWVKV Son una subclase de crustáceos maxilópodos de tamaño muy pequeño, muchas
veces microscópicos, que se encuentran abundantemente, tanto en agua dulce como
salada
Cromatina Es el conjunto de ADN, histonas y proteínas no histónicas que se encuentra en el
núcleo de las células eucariotas y que constituye el cromosoma eucariótico
*YVTH[}MVYVZ :VUJtS\SHZJVUWPNTLU[VZLUZ\PU[LYPVYX\LYLÅLQHUSHS\a
Crónico :LSSHTHLUMLYTLKHKJY}UPJHHHX\LSSHWH[VSVNxHKLSHYNHK\YHJP}UJ\`VÄUVJ\YH-
ción no puede preverse claramente o no ocurrirá nunca.
Cuarentena Es la acción de aislar o apartar a animales durante un período de tiempo, para evitar
o limitar el riesgo de que extiendan una determinada enfermedad contagiosa.
246
.SVZHYPV
Cutícula Es la capa más exterior del tegumento, inmediatamente por encima de la epidermis
(epitelio cuticular) y segregada por ésta. Es una formación rígida, acelular (sin célu-
las), de estructura compleja y compuesta por quitina y calcio entre otras sustancias.
Degradación Transformación de una sustancia compleja en otra de estructura más sencilla.
+LZPUMLJ[HU[L Bactericida y germicida o agente que mata organismos, generalmente microscópi-
cos.
+PHNU}Z[PJV Conocimiento y estudio de los signos de una enfermedad, para la determinación del
carácter y causa de la misma.
+PHNU}Z[PJV *VUVJPTPLU[VÄUHSZVIYLSHVSHZJH\ZHZKL\UHLUMLYTLKHKVI[LUPKVKLZW\tZKL
KLÄUP[P]VV realizar y analizar información histórica y de campo, pruebas de campo y pruebas
JVUÄYTH[VYPV de laboratorio.
+PHNU}Z[PJV Es la causa probable de una enfermedad, cuyo conocimiento debe aún profundi-
WYLZ\U[P]V aHYZLTmZTLKPHU[LWY\LIHZHKPJPVUHSLZWHYHSSLNHYH\UKPHNU}Z[PJVKLÄUP[P]VV
JVUÄYTH[VYPV
+PNLZ[P}U Proceso de transformación de los alimentos que son ingeridos en sustancias más
sencillas para ser absorbidos.
,J[VKLYTPZ ,ZLSJVTPLUaVKL\U[LQPKVX\LJ\IYLSHZZ\WLYÄJPLZKLSJ\LYWV,TLYNLWYPTLYV`
forma la capa externa de las capas germinativas.
,J[VWHYmZP[V 7HYmZP[VX\L]P]LZVIYLSHZ\WLYÄJPLKLSOVZWLKLYV
Edema Es la acumulación de líquido en el espacio tisular intercelular o intersticial y también
en las cavidades del organismo, debido al incremento en la transudación de los
líquidos capilares.
,UJHWZ\SHJP}U Formación de una cápsula aislante alrededor de un cuerpo extraño. Se puede dar a
nivel celular o tisular
,UKtTPJV Una enfermedad que se presenta sistemáticamente, de manera regular y sin variacio-
ULZHWYLJPHISLZKLWVISHJP}UHMLJ[HKHKLU[YVKL\UZLNTLU[VKLTVNYmÄJV
,UKVWHYmZP[V Parásito que se encuentra en el interior de los animales
Enfermedad 7YVJLZVT}YIPKVKLÄUP[P]VLSJ\HS[PLUL\UHJHKLUHKLZPNUVZJHYHJ[LYxZ[PJVZX\L
pueden afectar el cuerpo entero o alguna de sus partes y su etiología, patología y
pronóstico, pueden ser conocidos o desconocidos
Enfermedad aguda (X\LSSHZLUMLYTLKHKLZX\L[PLULU\UPUPJPV`\UÄUJSHYHTLU[LKLÄUPKVZ.LULYHS-
mente son de corta duración, aunque no hay un consenso en cuanto a que plazos
KLÄULUH\UHLUMLYTLKHKJVTVHN\KH`J\HSJVTVJY}UPJH
Enzima Son sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas siempre que
sea termodinámicamente posible (si bien no pueden hacer que el proceso sea más
termodinámicamente favorable). Las enzimas sirven para controlar las reacciones
químicas, acelerándolas
,VZPUH Es un colorante ácido de color rosado oscuro usado en preparaciones histológicas,
cuya propiedad está basada en su polaridad negativa lo que le permite enlazarse con
constituyentes celulares de carga positiva (alcalinos).
,WPJVTLUZHS Parasito que se adhiere a la parte externa de las hospederos, utilizándoles como
sustrato
Epidemia ,UZ\KLÄUPJP}U[YHKPJPVUHSLZ\UHLUMLYTLKHKHTWSPHTLU[LL_[LUKPKHX\LHMLJ[HH
muchos individuos en una población.
Epitelio Es el tejido formado por una o varias capas de células yuxtapuestas que recubren
[VKHZSHZZ\WLYÄJPLZSPIYLZKLSVYNHUPZTV`JVUZ[P[\`LULSYLJ\IYPTPLU[VPU[LYUVKL
las cavidades y órganos. Los epitelios también forman el parénquima de muchos
órganos.
247
Epizootia Es una enfermedad contagiosa que ataca a un número inusual de animales al mismo
tiempo y lugar y se propaga con rapidez. El término epizootia está cayendo gradual-
TLU[LLUKLZ\ZVW\LZ[VX\LLUSHHJ[\HSPKHKZLWYLÄLYLLS[tYTPUVLWPKLTPH
Epleción Cantidad de eses que se encuentra en el intestino medio de un camarón.
,ZJSLYV[PaHJP}U Es el endurecimiento y oscurecimiento de la quitina en el exoesqueleto
,ZWLJPÄJPKHK *HWHJPKHKKL\UHWY\LIHKLKPHNU}Z[PJVWHYHKL[LYTPUHYKLJVUÄHISL\UHNLU[L
PUMLJJPVZVLZWLJxÄJVZPUYPLZNVZTH`VYLZKLYLHJJP}UJY\aHKHJVUV[YVWH[}NLUV
distinto
,ZWtJPTLU Es aquel individuo o parte de un individuo que se toma como muestra, especial-
mente el que se considera representativo de los caracteres de la población a la que
pertenece.
,ZWLYTH[}MVYV Es una cápsula o masa creada por los especimenes macho de varios invertebrados,
que contienen espermatozoides, siendo integralmente introducida al órgano sexual
femenino durante la cópula.
,Z[LYPSPaHJP}U Procesos físicos o químicos mediante los cuales se elimina el 100% de los microor-
ganismos contaminantes presentes en un sustrato
,Z[YtZ ,Z[VKHKLTHUKHMxZPJHVÄZPVS}NPJHX\LZLSLOHNHHSVYNHUPZTV7\LKLZLYJH\ZHKH
por enfermedades o ser de origen séptico, nutricional o ambiental.
,Z[\HYPV Es la parte más ancha y profunda en la desembocadura de los ríos, en los mares
abiertos o en los océanos, en aquellas zonas donde las mareas tienen mayor ampli-
tud u oscilación. La desembocadura en estuario está formada por un solo brazo o
J\YZVÅ\]PHST\`HUJOV`WYVM\UKVH\UX\L[HTIPtUZ\LSL[LULYHTVKVKLWSH`HZ
a ambos lados en las que la retirada de las aguas permite crecer algunas especies
vegetales que soportan aguas salinas.
Etiología Agente o parámetros que de manera individual o conjunta, causan una enfermedad.
,_VLZX\LSL[V ,ZLSLZX\LSL[VL_[LYUVJVU[PU\VX\LYLJ\IYL[VKHSHZ\WLYÄJPLKLSVZHUPTHSLZKLS
ÄSVHY[Y}WVKVZHYmJUPKVZPUZLJ[VZJY\Z[mJLVZ`V[YVZNY\WVZYLSHJPVUHKVZKVUKL
cumple una función protectora y otra mecánica, proporcionando el sostén necesario
WHYHSHLÄJHJPHKLSHWHYH[VT\ZJ\SHY;HTIPtUZLSSHTHL_VLZX\LSL[VHSHIHZL
-HNVJP[VZPZ Es un tipo de endocitosis por el cual algunas células rodean con su membrana
citoplasmática a una sustancia extracelular (un sólido generalmente) y la introducen
al interior celular. Esto se produce gracias a la emisión de pseudópodos alrededor de
la partícula o microorganismo hasta englobarla completamente y formar alrededor
de él una vacuola, la cual fusionan posteriormente con lisosomas para degradar la
sustancia fagocitada, la cual recibe el nombre de fagosoma.
-HNVJP[VZPZ Proceso por le cual un cuerpo extraño o un desecho celular es ingerido por células
especiales (fagocito) mediante invaginación.
Farmacoterapia Tratamiento de las enfermedades mediante fármacos (medicamentos).
Fijación Preservación de tejidos de un organismo, mediante la inyección y/o inmersión del
mismo en una solución que evita cambios autolíticos.
.LUVTH Es todo el material genético contenido en las células de un organismo en particular.
Por lo general, al hablar de genoma en los seres eucarióticos nos referimos sólo al
ADN contenido en el núcleo, organizado en cromosomas.
.PLTZH Es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos y otro tipo de muestras
biológicas, que permite la tinción diferencial de zonas con un alto contenido de
ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en mi-
croscopio óptico el núcleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos
casos, incluso el ADN mitocondrial.
.S\[HYHSKLOPKV Fijador utilizado para microscopía electrónica de transmisión
.YHT Coloración para diferenciar bacterias.
248
.SVZHYPV
/LTH[VWV`t[PJV Proceso de formación de las células sanguíneas.

/LTH[V_PSPUH Materia colorante del palo campeche muy utilizada en histología.
Hemocele Canales intersticiales a través de los cuales circula la hemolinfa Irrigando los órganos
y tejidos del cuerpo del camarón.
Hemocitopenia Disminución en el número de hemocitos circulantes
/LTVJP[VZ Células plasmáticas de los crustáceos (como el camarón), encargadas de funciones
relacionadas con el sistema inmune
Hemograma Determinación del número total o diferencial de hemocitos en un camarón
Hemolinfa Tejido sanguíneo de los camarones que irriga los órganos y tejidos llevando oxígeno
y nutrientes
/LWH[VWmUJYLHZ Glándula digestiva del camarón, encargada de producir enzimas y hormonas, prin-
cipalmente.
/PWLYWSHZPH Es el aumento de tamaño de un órgano o de un tejido, provocado debido a que sus
células han aumentado en número. Puede producirse en los tejidos cuyas células se
pueden multiplicar.
/PWLY[YVÄH Es el nombre con que se designa un aumento del tamaño de un órgano cuando
se debe al aumento correlativo en el tamaño de las células que lo forman; de esta
THULYHLS}YNHUVOPWLY[YVÄHKV[PLULJtS\SHZTH`VYLZÙVU\L]HZ
/PWV_PH Es un trastorno en el cual el cuerpo por completo (hipoxia generalizada), o una
región del cuerpo (hipoxia de tejido), se ve privado del suministro adecuado de
oxígeno.
/PZ[VSVNxH Es la ciencia que estudia todo lo referente a los tejidos orgánicos su estructura
TPJYVZJ}WPJHZ\KLZHYYVSSV`Z\ZM\UJPVULZ3H/PZ[VSVNxHZLPKLU[PÄJHH]LJLZJVUSV
que se ha llamado anatomía microscópica.
/PZ[VWH[VSVNxH Estudio de las lesiones celulares y tisulares mediante el uso de la histología
/VZWLKLYV Es aquel organismo que alberga a otro en su interior o lo porta sobre sí, ya sea un
parásito, un comensal o un mutualista.
/VZWLKLYV Designa un ser vivo que es imprescindible para el parásito ya que este desarrollará
KLÄUP[P]V WYPUJPWHSTLU[LZ\MHZLHK\S[HLULSHUÄ[YP}U
/VZWLKLYV Designa a un hospedador igualmente imprescindible en el ciclo vital del parási-
intermediario to, donde este desarrolla alguna o todas las fases larvales o juveniles. A veces se
confunde con el término vector y se considera como hospedador intermediario al
invertebrado que participa en el ciclo vital, siendo en muchas ocasiones el hombre y
SVZ]LY[LIYHKVZSVZHUÄ[YPVULZPU[LYTLKPVZ`SVZPU]LY[LIYHKVZSVZKLÄUP[P]VZ
/\tZWLK Agente invasor que vive a expensas de un hospedero, parasito externo (ectoparásito)
o parasito interno (endoparásito).
0UZP[\ Que se realiza en el mismo sitio.
Infección Estado o condición en que el cuerpo o una parte de éste es invadido por un agente
infeccioso, como bacterias, virus u hongos La infección no implica necesariamen-
[LX\LLSVYNHUPZTVLZ[tLUMLYTVW\LZ[VX\LLUMLYTVZLYLÄLYLHTVZ[YHYZPNUVZ
clínicos.
0UMLZ[HJP}U Es la invasión de un organismo vivo por agentes parásitos externos (piel), es decir,
ectoparásitos. El término infección debe restringirse a la acción de bacterias , virus
y parásitos internos (endoparásitos) mientras que infestación puede utilizarse para
otros patógenos y especialmente para parásitos externos (ectoparásitos)Hongos,
Artrópodos, Nematelmintos.
0UÄS[YHJP}U Migración de hemocitos a un tejido en donde hay presencia de un agente patógeno.
hemolítica
249
0UÅHTHJP}U Reacción de los tejidos a daños caracterizados por tumefacción, enrojecimiento y

KVSVY"ZLTHUPÄLZ[HWVYKPSH[HJP}UOPWLYOLTPHHJ\T\SHJP}UKLOLTVJP[VZL_\KH-
JP}UKLSÅ\PKV`KLW}ZP[VKLÄIYPUH
Inmune Protegido contra ciertas enfermedades
Inmunología Es una rama amplia de la biología y de las ciencias biomédicas que se ocupa del
estudio del sistema inmunitario en todos los organismos, entendiendo como tal
al conjunto de órganos, tejidos y células que en los vertebrados o invertebrados
tienen como función biológica el reconocer elementos extraños o ajenos dando una
respuesta inmune.
Integumento Es el sistema orgánico más extenso de un animal ya que lo recubre por completo,
tanto externamente, como numerosas cavidades internas. Su función es la de separar,
proteger e informar al animal del medio que le rodea; en ocasiones actúa también
como exoesqueleto.
0U[YHJP[VWSHZTm[PJV Cuya ubicación es dentro del citoplasma.
Invaginación Es doblar hacia adentro los pseudópodos luego de estar envuelto en un cuerpo extra-
ño. Esto ocurre en las células. Como ejemplo tenemos las crestas mitocondriales.
Lamela 9HTPÄJHJP}UZLJ\UKHYPHKLSVZIYHUX\PHZKLSVZJHTHYVULZ
Larva Animal en estado de desarrollo, cuando ha abandonado las cubiertas del huevo y es
capaz de nutrirse por sí mismo o de su vitelo, pero aún no ha adquirido la forma y la
organización propia de los adultos de su especie.
Larvicultura Fase del cultivo de camarón relacionado con el desarrollo de larvas y postlarvas.
3LZP}U Daño o detrimento corporal causado por una herida, un golpe o una enfermedad.
Letargia Condición presente en varias enfermedades nerviosas, infecciosas o tóxicas, carac-
terizada por un estado de somnolencia profunda y aletargamiento. Conduce en
JHTHYVULZHWLYKPKHKLSYLÅLQVKLO\xKH
3PWVWVSPZHJmYPKV Azúcar propio de la membrana celular de las bacterias.
3PZPZ Ruptura de las células a causa de agentes químicos o físicos
Macerado Es un proceso de extracción sólido-líquido. El producto sólido (materia prima)
posee una serie de compuestos solubles en el líquido extractante que son los que se
pretende extraer.
4HJYVZJ}WPJV Hallazgo que se puede observar a simple vista
Maduración Término utilizado en camaronicultura para hacer referencia a los procesos de manu-
tención de reproductores en cautiverio y obtención de larvas de camarón a partir de
cruces controlados o indiscriminados entre éstos.
Melanina Pigmento de color negro o pardo negruzco en forma de gránulos que existe en el
protoplasma de ciertas células de los vertebrados; en invertebrados es producto de la
activación del sistema inmune (cascada proPO) y se da para encapsular a un agente
agresor (melanización).
4L[HIVSPZTV Es el conjunto de reacciones y procesos físico-químicos que ocurren en una célula.
Estos complejos procesos interrelacionados son la base de la vida a nivel molecular
y permiten las diversas actividades de las células crecer, reproducirse, mantener sus
estructuras, responder a estímulos, etc.
Microbiología Ciencia que estudia los microorganismos y su organización.
4PJYVZJ}WPJV Es un objeto que por su tamaño, es imposible verlo a simple vista, se necesitan
aparatos como microscopios para poder verlo o detectarlo.
Micrótomo ,Z\UKPZWVZP[P]VTLJmUPJVX\LWLYTP[LSHLSHIVYHJP}UKLJVY[LZÄUVZKLT\LZ[YHZ
para su observación al microscopio.
250
.SVZHYPV
Muda Desprendimiento periódico de la cubierta externa, como el exoesqueleto en Artró-

podos (camarones, cangrejos, langostas), para permitir el crecimiento (aumentar en
tamaño) de los tejidos blandos internos. Después de la muda, los especimenes son
especialmente vulnerables a la depredación.
4`ZPZ Estado intermedio de larva pelágica entre la protozoea (zoea) y los estados de
postlarva.
Nauplio Primeros estados larvales de un crustáceo; exhibe el tipo más simple de región ante-
rior con tres pares de apéndices, primera antena unirrama, segunda antena birrama y
mandíbulas. Aunque la larva nauplius es típica, no aparece en todos los crustáceos.
Es común en las formas inferiores, pero en muchas de las formas superiores ocurre
durante el desarrollo en el huevo, y los juveniles eclosionan ya diferenciados y larvas
más avanzadas
5LJYVIPVZPZ 4\LY[LUH[\YHS`ÄZPVS}NPJVKLSSVZJtS\SHKL\UVYNHUPZTVWVYLU]LQLJPTPLU[VKL
las mismas.
5LJYVZPZ Es la muerte patológica de un conjunto de células o de cualquier tejido del orga-
nismo, provocada por un agente nocivo que ha provocado una lesión tan grave que
no se puede reparar. Una vez que se ha producido y desarrollado la necrosis, es
irreversible.
Nódulo Pequeña protuberancia situada en diversos tejidos.
5\JSLVJmWZPKL Material genético envuelto en su cápside. La cápsida o cápside vírica es una
estructura proteica formada por una serie de monómeros llamados capsómeros. En
el interior de esta cápside se encuentra siempre el material genético del virus. Puede
estar rodeada por una envoltura. Cada capsómero puede estar constituido por una o
varias proteínas distintas.
6ZTVYYLN\SHJP}U *HWHJPKHKKLSVZZLYLZ]P]VZWHYHTHU[LULYLUZ\Z[LQPKVZ`Å\PKVZJVYWVYHSLZ\UH
KL[LYTPUHKHWYLZP}UVZT}[PJHTLKPHU[L\UWYVJLZVÄZPVS}NPJVX\LYLN\SHLSLX\PSP-
brio del agua y los electrolitos.
7H[VNtULZPZ Origen y evolución de una enfermedad con todos los factores que están involucrados
en ella.
Patogenicidad Capacidad de un agente patógeno, de causar daño en órganos y tejidos.
Patógeno Es toda aquella entidad biológica capaz de producir enfermedad o daño en la bio-
logía de un hospedero (humano, animal, vegetal, etc.) sensiblemente predispuesto.
El mecanismo de la patogenicidad ha sido muy estudiado y tiene varios factores,
algunos de los cuales son dependientes del agente patógeno y otros del hospedero.
Patognomónico :PNUVJSxUPJVX\LJHYHJ[LYPaH`KLÄUL\UHKL[LYTPUHKHLUMLYTLKHKKPMLYLUJPmUKVSV
del resto de patologías
Patología Es la parte de las ciencias médicas, humanas y animales encargada del estudio de las
enfermedades en su más amplio sentido, es decir, como procesos o estados anorma-
les de causas conocidas o desconocidas.
Patólogo Especialista en patología o enfermedades.
Penaeido Nombre común para los miembros de la familia de crustáceos Penaeidae, común-
mente denominados camarones o gambas. Un cultivo económicamente importante
originario de aguas marinas y salobres de áreas tropicales o subtropicales. Ciclo
vital caracterizado por varias etapas iniciales del desarrollo de las cuales nauplios (5
etapas sucesivas), zoea (3), mysis (3) y postlarva (hasta 22).
7LYLP}WVKVZ (WtUKPJLZTV[YPJLZ¸WH[HZ¹KLSVZJHTHYVULZ\[PSPaHKVZWHYHJHTPUHYZVIYLZ\WLYÄ-
cies sólidas; debido a que el camarón tiene 10, se le llama decápodo.
7PJUVZPZ Compactación de la cromatina nuclear como parte del proceso de necrosis (muerte
celular)
7VSPZHJmYPKVZ Son biomoléculas formadas por la unión de muchos monosacáridos. Se encuadran
entre los glúcidos, y cumplen funciones diversas, sobre todo de reserva energética y
estructural.
251
7VZ[SHY]H Estado que ocurre después del estado larval, parecido al juvenil pero aún le faltan
algunas características. Para crustáceos el estado siguiente a la metamorfosis de larva
zoea a juvenil. En camarones penaeidos, normalmente se cuentan los días después
de la aparición de las características de postlarva. Ej., PL12 indica que la postalarva
ha vivido 12 días desde su metamorfosis desde el estado de mysis.
7VZ[TVY[LT Cambios naturales que ocurren a nivel bioquímico y morfológico en un organismo
después de su muerte
7VZ[T\KH Fase del proceso de muda de los crustáceos que sigue a la ecdisisi o “muda”
Prevalencia Es la proporción de individuos de un grupo o una población que presentan una ca-
racterística o evento determinado en un momento, o periodo de tiempo (“prevalecía
de periodo”), determinado.
7YPTLYZ Indicadores, fragmentos de ADN usados en biología molecular.
Probiótico Microorganismos vivos presentes en un alimento que permanecen activos en el in-
[LZ[PUV`LQLYJLUPTWVY[HU[LZLMLJ[VZÄZPVS}NPJVZ0UNLYPKVZLUJHU[PKHKLZZ\ÄJPLU[LZ
[PLULULMLJ[VT\ÌLULÄJPVZVJVTVJVU[YPI\PYHSLX\PSPIYPVKLSHÅVYHIHJ[LYPHUHPU-
testinal del hospedero y potenciar el sistema inmunológico. Son capaces de atravesar
el tubo digestivo, recuperarse vivos en las heces y adherirse a la mucosa intestinal.
No son patógenos.
7YVÄSH_PZ Procedimientos que buscan prevenir una infección.
7ZL\K}WVKVZ Elongaciones de la membrana de las células que se asemejan a “extremidades”.
8\P[PUVZPZ Melanización multifocal de la cutícula de origen bacteriana.
Repleción Cantidad de heces que se encuentran en el intestino medio de un camarón.
9LZWPYHJP}U :LLU[PLUKLHSWYVJLZVÄZPVS}NPJVPUKPZWLUZHISLWHYHSH]PKHKLVYNHUPZTVZHLY}IP-
cos, consistente en capturar O2 del medio y en eliminar CO2.
:LUZPIPSPKHK Capacidad de una prueba de diagnóstico para detectar un agente (microorganismo)
de interés que está presente en mínimas cantidades en una muestra.
Septicemia Síndrome clínico caracterizado por un proceso infeccioso severo que incluye la
invasión del sistema sanguíneo (hemolinfa) por los microorganismos patógenos.
:tW[PJV Que produce putrefacción o es causado por ella, por presencia de bacterias.
Signo Se entiende por signo clínico a cualquier manifestación objetivable consecuente a
una enfermedad o alteración de la salud, y que se hace evidente en la biología del
organismo enfermo.
Síndrome ,Z\UJ\HKYVJSxUPJVVJVUQ\U[VZPU[VTm[PJVJVUJPLY[VZPNUPÄJHKV`X\LWVYZ\Z
JHYHJ[LYxZ[PJHZWVZLLJPLY[HPKLU[PKHK"LZKLJPY\UNY\WVZPNUPÄJH[P]VKLZxU[VTHZ`
signos, que concurren en tiempo y forma, caracterizando un estado morboso deter-
minado o enfermedad.
Síntoma Es la referencia subjetiva que da un organismo enfermo por la percepción o cambio
que puede reconocer como anómalo o causado por un estado patológico o enfer-
medad.
:PZ[tTPJV Enfermedad que se encuentra en todo el cuerpo.
:VUKHNLUt[PJH Fragmento de ADN que es complementario a una parte del genoma de un organismo
y es utilizada para la detección genómica de dicho organismo en una muestra.
;H_VUVTxH ,UZ\ZLU[PKVTmZNLULYHSSHJPLUJPHKLSHJSHZPÄJHJP}U7VYSVNLULYHSZLLTWSLHLS
término para designar la taxonomía biológica, la ciencia de ordenar a los organismos
LU\UZPZ[LTHKLJSHZPÄJHJP}UJVTW\LZ[VWVY\UHQLYHYX\xHKL[H_VULZHUPKHKVZ
;}_PJV Es toda sustancia química que, administrada a un organismo vivo, tiene efectos
nocivos. El estudio de los venenos es conocido como toxicología.
;YHUZTPZP}U Forma de transmisión de un a enfermedad mediante el canibalismo entre organismos
horizontal o ingesta de alimento infectado.
252
.SVZHYPV
;YHUZTPZP}U Transmisión de una enfermedad de padres a sus progenitores.

vertical
;Y}ÄJV El lugar que ocupan los seres vivientes en una cadena alimentaría.
Trofozoito Es la forma vegetativa activada que se alimenta -generalmente por fagocitosis- y se
reproduce, a diferencia del quiste, el cual es la forma vegetativa infectante y de resis-
tencia, en el ciclo de vida de los parásitos protozoarios, como los gregarinas.
<Y}WVKVZ :VUSHWHY[LÄUHSKLSJ\LYWVKLSVZJY\Z[mJLVZ"LZ[mUHJVU[PU\HJP}UKLSHIKVTLUV
pleon y normalmente son laminares o aplanados, presentando forma de abanico por
lo que se le denomina abanico caudal.
=HJ\VSHZSPWxKPJHZ Glóbulos de grasas almacenados en el hepatopáncreas de crustáceos y utilizados
como reserva de energía.
=PIYPVZPZ Enfermedad bacteriana causada por especies del género Vibrio, que afecta a los
crustáceos y que es favorecida en condiciones de estrés.
Viremia Condición donde virus entran al torrente sanguíneo (hemolinfa) y logran así una fácil
diseminación por todo el organismo.
Virión Partícula vírica morfológicamente completa e infecciosa.
Virulencia Designa el carácter patogénico, nocivo y violento de un microorganismo, como una
bacteria, hongo o virus, o en otras palabras, la capacidad de un microbio de causar
LUMLYTLKHK=PY\SLUJPHKLYP]HKLSSH[xU]PY\SLU[\ZX\LZPNUPÄJHSSLUVKL]LULUV®
=PY\Z Es una entidad biológica capaz de autorreplicarse utilizando la maquinaria celular.
Es un agente potencialmente patógeno compuesto por una cápside (o cápsida) de
proteínas que envuelve al ácido nucléico, que puede ser ADN o ARN.
Zooplancton Es la fracción del plancton constituida por seres que se alimenta de materia orgánica
ya elaborada, por ingestión. Está constituido por protistas diversos, fagótrofos que
engloban el alimento fagocitándolo. También por larvas de esponjas, gusanos, equi-
nodermos, moluscos, crustáceos y de otros artrópodos acuáticos, así como pequeño
253
254

Guia Patologia e Inmunologia de Camarones Penaeidos

Caricato da

Informazioni sul documento

Copyright

Formati disponibili

Condividi questo documento

Condividi o incorpora il documento

Opzioni di condivisione

Hai trovato utile questo documento?

Questo contenuto è inappropriato?

Copyright:

Formati disponibili

Guia Patologia e Inmunologia de Camarones Penaeidos

Caricato da

Copyright:

Formati disponibili

GUÍA TÉCNICA

La presentación y disposición en conjunto de:

Primera edición en español

Esta obra se citará de la siguiente manera:

Los editores agradecen la colaboración de Reinaldo Morales y Hugo Pérez

ELPIDIO BELTRAME, el hombre incansable y luchador por la camaronicultura en

Gracias por tu contribución a una actividad que seguirá dando respuestas en la

La camaronicultura tiene sus inicios en la década del ‘60 incrementándose

El Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnología para el Desarrollo (CYTED)

3.4 Enfermedad de luminiscencia 126

RESEÑA DE LOS AUTORES

MARÍA SOLEDAD MORALES COVARRUBIAS

AGNÉS SABORIO COZE

MARÍA JOSÉ ALMANZA ABUD

MARGHERITA ANNA BARRACCO

LUCIANE MARÍA PERAZZOLO

RAFAEL DIEGO ROSA

ALITIENE MOURA LEMOS PEREIRA

EMIKO SHINOZAKI MENDES

TEREZA CRISTINA VASCONCELOS GESTEIRA

Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en

Métodos de Diagnóstico de Enfermedades en Camarones

Pasos para el diagnóstico:

1.2 Examen clínico

Si el examen clínico debe ser realizado en un lugar diferente al de la captura y los

Cuando se realicen muestreos aleatorios intencionales para estimar la prevalencia

MÉTODO DE EXAMEN CLÍNICO

-PN\YH  4\LZ[YH KL JHTHYVULZ P. vannamei

-PN\YH  *HTHYVULZ P. vannamei que

1.3 Microscopía Directa (Análisis en fresco)

-PN\YH  *HTHYVULZ P. vannamei bajo

-PN\YH  *HTHY}U Q\]LUPS P. vannamei en el

-PN\YH  4\LZ[YH KL OLWH[VWmUJYLHZ KL \U

-PN\YH  4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KL \U Q\]LUPS

MÉTODO DE MICROSCOPÍA DIRECTA

-PN\YH  4VU[HQL LU MYLZJV WYLWHYHKV H

1.4 Montajes en fresco (María Soledad Morales-Covarrubias)

organismos se encuentren enfermos. La gravedad dependerá del nivel de incidencia, de

-PN\YH  ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

-PN\YH  ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

Las muestras que se tomarán son:

-PN\YH  4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KVUKL

el hepatopáncreas y con un bisturí se parte por la mitad para observar la coloración

-PN\YH  6YNHUPZTV JVU OLWH[VWmU-

-PN\YH  4\LZ[YH LU MYLZJV KL OLWH[VWmUJYLHZ JVU

-PN\YH   4\LZ[YH LU MYLZJV KL PU[LZ[PUV TLKPV KVUKL

-PN\YH  4\LZ[YH LU MYLZJV KL TZJ\SV KVUKL ZL

Tabla 2. Formato de reporte para el análisis en fresco.

Actividad de los camarones /,7(;67Í5*9,(:

Contenido del intestino ([YVÄH

Presencia de heces en forma de

Presencia de epibiontes, bacte- 7YLZLUJPHKLSVZ]PY\Z!)7

Apéndices rotos *VSVYKLSÅ\PKV

Coloración anormal ;I\SVZTLSHUPaHKVZ

Presencia de masa de bac-

Nódulos de bacterias en las

Micosis (hifas, conidios) MÚSCULO

Cuerpos de inclusión de WSSV ;L_[\YH

Materia orgánica Color

Tabla 4. Guía para dar un valor numérico cualitativo de grado de severidad a la

Tabla 6. Guía para dar un valor numérico cualitativo de grado de severidad a la

-PN\YH  *HIPUH KL Å\QV SHTPUHY

-PN\YH  (\[VJSH]L OVYPaVU[HS

-PN\YH  7SH[V 7L[YP JVU HNHY ;*): LU

-PN\YH 4\LZ[YH KL JHTHYVULZ P. vannamei

-PN\YH *HTHYVULZ P. vannamei que

-PN\YH *HTHYVULZ P. vannamei bajo

-PN\YH *HTHY}U Q\]LUPS P. vannamei en el

-PN\YH 4\LZ[YH KL OLWH[VWmUJYLHZ KL \U

-PN\YH 4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KL \U Q\]LUPS

-PN\YH 4VU[HQL LU MYLZJV WYLWHYHKV H

-PN\YH ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

-PN\YH ,Z[HUX\L KL J\S[P]V KL JHTHY}U

-PN\YH 4\LZ[YH KL IYHUX\PHZ KVUKL

-PN\YH 6YNHUPZTV JVU OLWH[VWmU-

-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL OLWH[VWmUJYLHZ JVU

-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL PU[LZ[PUV TLKPV KVUKL

-PN\YH 4\LZ[YH LU MYLZJV KL TZJ\SV KVUKL ZL

Apéndices rotos *VSVYKLSÅ\PKV

Coloración anormal ;I\SVZTLSHUPaHKVZ

-PN\YH *HIPUH KL Å\QV SHTPUHY

-PN\YH (\[VJSH]L OVYPaVU[HS

-PN\YH 7SH[V 7L[YP JVU HNHY ;*): LU

-PN\YH *VU[HKVY KL JVSVUPHZ JVU WHU[HSSH

-PN\YH -PQHJP}U KL \U JHTHY}U Q\]LUPS P.

-PN\YH *HIPUH WHYH L_[YHJJP}U KL NHZLZ

-PN\YH 7YVJLZHKVY KL [LQPKVZ WHYH OPZ[VSVNxH

-PN\YH *LU[YHS KL ISVX\LV ,Z[H \UPKHK WVZLL

-PN\YH )H|V KL YLJ\WLYHJP}U KL [LQPKVZ

-PN\YH 3mTPUH WVY[HVIQL[VZ JVU JVY[LZ

-PN\YH 7YVJLKPTPLU[V KL ,30:( LU

-PN\YH 4PJYVWSHJHZ KL ,30:( JVU

-PN\YH *mTHYH KL LSLJ[YVMVYLZPZ PaX\PLYKH ` M\LU[L

-PN\YH ;LYTVJPJSHKVY ¸HWHYH[V KL 7*9¹ JVU WVaVZ

-PN\YH =PZ[H WHUVYmTPJH KL SVZ LX\PWVZ \[PSPaHKVZ WHYH

-PN\YH ,SLTLU[VZ WHYH LS TVU[HQL KL

-PN\YH7\UJP}UKL\UP. vannamei para la

-PN\YH 4VU[HQL KL 3 KL OLTVSPUMH

-PN\YH 6IZLY]HJP}U KL OLTVSPUMH

25% n/a

70% NT3

-PN\YH 4PJYVMV[VNYHMxH KL \U JVY[L KL [LQPKV KL

-PN\YH (SPTLU[HJP}U KVZPÄJHKH KL JHTHYVULZ 7

799;79 -

-PN\YHP. stylirostris durante la fase aguda de

-PN\YH :L T\LZ[YHU ]HYPVZ LQLTWSVZ KL

-PN\YH ,QLTWSVZ HKPJPVUHSLZ KL

-PN\YH -V[VTPJYVNYHMxH H IHQV H\TLU[V

-PN\YH -V[VTPJYVNYHMxH KL \UH SHTLSH

-PN\YH 9LZ\S[HKVZ KL \UH WY\LIH KL